INFORME DE LABORATORIO

Ttulo del trabajo practico: Bioenerga 2: Fotosntesis

Asignatura: Biologa

Nombre autores: Camila Medina Matas Silva

Docente Responsable: Daniela Rebolledo

Ayudante: Javiera Ramos
Fecha: 24/06/15

Introduccin
En el presente informe, se explicara lo estudiado en el cuarto laboratorio correspondiente a
"Bioenerga 2: Fotosntesis.
La fotosntesis es un proceso que utilizan las plantas para sintetizar compuestos orgnicos, se
lleva a cabo en los cloroplastos. Estos poseen doble membrana por lo cual son anlogos a las
mitocondrias y el estroma es anlogo a la matriz mitocondrial. Poseen un sistema membranoso
el cual est compuesto de tilacoides, que contienen sustancias como los pigmentos
fotosintticos (clorofila, carotenoides, xantofilas) los cuales son los encargados de captar la luz
solar.
La fotosntesis se puede dividir en dos fases: Fase clara y fase oscura, la primera ocurre en los
tilacoides, se absorbe luz solar y se convierte en energa qumica (ATP) y poder reductor
(NADPH). EL agua sufre fotlisis liberando O2, protones y electrones para reducir NADP+
generando NADPH, la segunda fase ocurre en el estroma, aqu se genera la fijacin del CO2,
reduccin y produccin de carbohidratos.(1)

El Objetivo del prctico fue comprender el proceso de fotosntesis, as como sus componentes y
productos, tambin se aprendi a reconocer, purificar y separar los pigmentos que poseen los
cloroplastos, y finalmente observar e identificar estomas en hojas de acelga.

Procedimiento experimental
Para comenzar la docente a cargo hizo entrega de los siguientes materiales de laboratorio: dos
tubos de ensayo, un mortero, hojas de Acelga y de Elodea, metanol, vaso precipitado, papel
filtro, microscopio, portaobjeto y cubre objeto, azul de metileno, tambin se utiliz agua
destilada y gotario.

Primer Procedimiento Experimental: Purificacin de pigmentos

En el mortero entregado, se colocaron hojas de acelga que fueron previamente sumergidas en

agua caliente, se le agreg 3 mL de metanol (solvente organico) y se procedi a moler las hojas
hasta conseguir una solucin liquida con una tonalidad de color verde intenso. Posteriormente
con la ayuda de un gotario se tomo una gota de la solucin obtenida en el mortero, y se le
coloc en un papel filtro, luego de unos minutos se coloco ste en un vaso precipitado con
aproximadamente 1 mL de metanol, despus de 30 minutos se observ y registr el color de
las manchas del papel filtro.

Segundo procedimiento experimental: Simulacin del proceso fotosinttico en plantas

acuticas, Elodea
En el primer tubo de ensayo se introdujo una rama de elodea y se le agreg agua destilada
hasta completar el volumen del tubo, luego en un vaso precipitado con de su capacidad con
agua destilada, se coloc de manera invertida el tubo de ensayo, luego este sistema se llevo a
un lugar con ausencia de luz por 60 minutos.
En el segundo tubo de ensayo se procedi de la misma manera solo que el sistema se coloc
en un lugar con 3 lmparas. En ambos sistemas se marco el nivel inicial y final del agua en el
tubo de ensayo.

Tercer Procedimiento experimental: Observar estomas en hojas de acelga o Lilium

Se prepar una muestra con una delgada capa de hoja de Acelga y se puso en un portaobjeto,
se le agreg una gota de azul de metileno y se coloco un cubreobjetos, luego se observo al
microscopio con un aumento de 40X

Resultados
Primer Procedimiento Experimental: Purificacin de pigmentos
Al momento de poner el papel filtro dentro del vaso precipitado con metanol, ste comenz a
subir por el papel pasando por la mancha y arrastrndola hacia arriba por el papel. (anexo e)
Luego de 30 minutos los colores obtenidos en el caso de la mancha con extracto de Acelga
fueron: Anaranjado, verde amarillento, amarillo, correspondientes a los pigmentos carotenos,
clorofila B y xantfilas (ver anexo e)
Segundo procedimiento experimental: Simulacin del proceso fotosinttico en plantas
acuticas, Elodea
Despus de 60 minutos ambos sistemas al sacarlos del lugar con luz y ausencia de sta segn
corresponda se encontraban sin cambios en el nivel del agua del tubo de ensayo a partir de
donde estaba la marca, lo que indicaba que no ocurri fotosntesis en ninguno de los casos.

Tercer Procedimiento experimental: Observar estomas en hojas de acelga o Lilium

Al observar la muestra de hojas de acelga, se observ una cantidad aproximada de 24-25
estomas (ver figura e).

Discusin
En el primer procedimiento experimental de fermentacin alcohlica, en los tubos con glucosa
y sacarosa ocurri fermentacin debido a que son un monosacrido y disacrido
respectivamente, a diferencia del tubo con almidn que no ocurri fermentacin debido a que a
pesar de ser un carbohidrato su composicin es muy compleja, es decir un polisacrido (3) que
contiene gran cantidad de enlaces difciles de romper para la levadura y necesitara de una gran
cantidad de tiempo para que fermentara, en el caso del tubo con agua no ocurri fermentacin
debido a que el agua no es un carbohidrato, y la levadura no tenia de donde sacar este
componente para la glicolisis y posterior fermentacin.

En el segundo procedimiento experimental de determinacin indirecta de la produccin de CO 2

por fermentacin alcohlica, en el tubo de azul de bromotimol unido con una manguera de
anaerobiosis al tubo de sacarosa y levadura, el azul de bromotimol cambio a un color verde, lo
cual indica que la solucin es bsica, pero al medir el pH con una tira indicadora de pH, esta
indicaba un pH neutro, probablemente esta diferencia de resultados se deba a que las tiras
indicadoras de pH, no son exactas a la hora de medir el pH, en el tubo de azul de bromotimol
unido con el mismo sistema a el tubo con glucosa y levadura, al medir el pH del tubo con azul
de bromotimol este no cambio del inicial (pH 7) probablemente debido a que el sistema estaba
mal sellado, donde el CO2 producido en la fermentacin de la levadura con glucosa, no tubo
contacto con el azul de bromotimol.
En el caso del tubo de azul de bromotimol unido al tubo con agua y levadura , el tubo con azul
de bromotimol no tuvo cambios en el pH, debido a que el agua con la levadura no fermenta y no
produce CO2 que pudiese traspasarse al otro tubo.

En el tercer procedimiento experimental de observacin al microscopio de las levaduras

utilizadas en el experimento, en el cual las clulas de levadura no se lograba apreciar ninguna
estructura, como por ejemplo ncleo que es el ms fcil de observar en muestras celulares (4),
probablemente debido a que no use utiliz ningn tipo de tincin que marcara alguna estructura

Conclusin
En base a los resultados obtenidos podemos concluir que entre ms simple sea el carbohidrato
utilizado como sustrato para la fermentacin, mayor es la velocidad de esta, como tambin se
puede deducir que a mayor complejidad del carbohidrato ms tiempo tardara en fermentar,
pero ser en mayor cantidad.
En el caso del azul de bromotimol, este es mas preciso a la hora de medir si una solucin es
acida, neutra o bsica, pero no lo mide en nmeros, lo cual caus la diferencia de resultados
con la tira indicadora de pH.

Tambin en el caso de la observacin de clulas de levadura podemos concluir que para una
mejor observacin de estas es necesario utilizar algn tipo de tincin.

Referencias
(1) Flores Graciela, Gonzlez Carlos (1997) Biologa celular (1 edicin), Argentina, Buenos
Aires CONICET
(2) Deborah De Urieta (22 de Diciembre de 2014) Tipos de Fermentacin. Obtenido de
http://www.tipos.co/tipos-de-fermentacion/
(3) Angel Gil Hernandez (2010) Tratado de nutricin, Composicin y Calidad Nutritiva de
los Alimentos (2 edicin) Espaa Madrid. Editorial Mdica Panamericana.
(4) James D. Watson (2008) Biologa molecular del gen (5edicin) Argentina Buenos Aires,
Editorial Mdica Panamericana

Anexos

Pigmento

Color

Clorofila A

Verde azulado

Clorofila B

Verde Amarillento

Carotenos

Anaranjado

Xantfilas

Amarillo