06/07/2015

MICROBIOLOGIA
AMBIENTAL
- Continuao Microbiologia do ar
PROF. GUSTAVO H. COUTO

Reviso
Bioaerossis
- O que so?
- Principais fontes?
- Composio dos bioaerossis?
- via de percurso: LanamentoTransporteDepsito
2-tranporte

3- Depsito
1- Lanamento/emisso

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TCNICAS DE ANLISE
MICROBIOLGICA DO AR
Considera-se que os microrganismos dispersos no ar esto
suportados no material particulado.

Assim, so contadas partculas e numa partcula

podem existir muitos indivduos.

AVALIAO DA MICROBIOTA DO AR
Uma variedade de tcnicas tm sido desenvolvidas com o
objetivo de se determinar o contedo microbiano em:
- Hospitais;
- Escolas;
- Locais pblicos;
- Ao ar livre.

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AVALIAO DA MICROBIOTA DO AR
H 5 tcnicas principais para a coleta de partculas usadas em testes
microbiolgicos:
Choque
(impingement),
impactao,
centrifugao, filtrao e sedimentao.
Impactao lquida: aprisionamento das partculas de ar em uma
matrix lquida.
Impactao slida: deposio forada das partculas de ar numa
superfcie slida
Centrifugao: deposio forada de partculas usando a fora da
gravidade.

Filtrao: aprisionamento das partculas por excluso de tamanho

Sedimentao: coleta das partculas do ar utilizando as foras de

deposio (gravidade por ex.)

Tcnica de amostragem ativa: exige coleta de um volume de ar

conhecido (impactao, centrifugao e filtrao, choque,
impactao).

Tcnica de amostragem passiva: coleta passiva de contaminao

vivel no ar por deposio em uma placa de petri aberta
(sedimentao).

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1-Sedimentao: ao da gravidade nas partculas

Ex. Exposio de placa contendo

meio nutritivo
- Incubao;
- Anlise do nmero aproximado;
*Permite apenas o desenvolvimento
de alguns dos microrganismos
presentes no ar.

SEDIMENTAO EM PLACA

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PLACAS APS INCUBAO:

IMPACTAO
INSTRUMENTOS DE AMOSTRAGEM

Aparelhos de impacto slido os microrganismos so

colhidos, atravs de uma corrente de ar, diretamente
na superfcie slida de um meio base de Agar ou
membrana filtrante.
Aparelho de impacto lquido os microrganismos so
colhidos, atravs de uma corrente de ar, em meio de
cultura em caldo ou outro lquido em que os
microrganismos so retidos.

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Impactao meio slido Amostrador tipo fenda

Amostrador de fenda

Etapas:
- O amostrador puxa
uma corrente de ar
rapidamente por meio
de fendas ou orifcios
estreitos em uma placa
de metal;
- Os microrganismos
colidem com o gar
abaixo da placa;
- Incubao; e
- Colnia e anlise

Esquema ilustrativo do impactador de fenda

(Fonte: Quadros, 2008)

Impactao- Crivo
ETAPAS: Sedimentao em placa
Amostrador de Impacto
furo. Tampa metlica com orifcios

Amostrador de Andersen - 1 estgio

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AMOSTRADORES EM CASCATA

A ANVISA recomenda utilizar impactador em cascata (1, 2 ou 6

estgios), para a coleta e anlise de bioaerossol em ambientes
interiores.

RESULTADO
AMOSTRADORES EM
CASCATA

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Tcnica de membrana
filtrante: no indicado
para amostras muito
contaminadas.

Amostrador automtico
de ar (Surface Air System
SAS)

Sistema porttil ar aspirado em um amostrador a uma velocidade e

tempo pr-fixados, atravs de um sistema mvel que contm em seu
interior uma placa de petri.

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TCNICA DA MEMBRANA FILTRANTE

Membranas filtrantes

Meios para membranas filtrantes

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Impactao em meio lquido

Amostrador tipo Impinger

ETAPAS:
- O amostrador puxa o
ar por atravs de um
meio de cultura em
caldo ou outro lquido,
que
retm
os
microrganismos
- Parte do lquido
plaqueada ou cultivada.
Fonte: Pelczar et al., 1993

Frasco Impinger (AGI-30)

Coleta

Filtrao do
meio

Cultivo em placa

BORRIFO
Soluo
estril:
gua, leo mineral
ou glicerol.
Alquota do lquido
plaqueada e
cultivada.
Eficincias diferentes
em
amostradores
diferentes.
Mais de uma clula
por partcula.
Reteno no total.

- Este sistema permite contar propgulos ao invs de partculas.

- Por outro lado exige mais trabalho, podendo ser invivel para muitos pontos de
avaliao.

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CONTROLE MICROBIOLGICO DO AR
Medidas de controles de microrganismos no ar dependem
muito da finalidade a que se destinam:
Ambientes fechados: simples circulao do ar.
Ambiente hospitalar: circulao do ar, desinfeco e
limpeza.
Microbiologia industrial: completa remoo dos
microrganismos (mecanismos de esterilizao e
desinfeco).

CONTROLE DAS POPULAES

MICROBIANAS DO AR
Controle microbiolgico de ambientes:
- Ventilao;
- Vaporizao do ar;
- Radiaes;
- Filtrao;
- Desinfetantes e esterilizantes;

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Ventilao
Mtodo mais comum usado para prevenir o acmulo de
partculas do ar.
Criao de fluxo de ar em reas onde ocorre contaminao
do ar.
um dos mtodos menos efetivos para controlar
patgenos no ar.

Vaporizao do ar
Composto qumico substncia germicida dispersada em
aerossol e manifesta sua ao antimicrobiana atravs do
contato com as partculas contaminadas.
Exige grandes cuidados.

Desinfeco de espaos

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Radiaes
Ondas snicas, raios gama e ultra violeta.
Deve-se levar em conta a eficincia da destruio dos
microrganismos, custo envolvido na obteno da radiao e
periculosidade.

As ondas ultrassnicas so utilizadas para

limpeza e desinfeco de ambientes
industriais.

Os raios gama, devido a alta energia que possuem,

so capazes de penetrar profundamente na matria.

A radiao ultra violeta possui comprimento de

onda menor que a luz visvel, tendo efeito
bactericida, sendo utilizada em estabelecimentos
comerciais.

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Filtrao
Camada porosa que permite a filtrao de grandes quantidades
de ar.
Sistema de fluxo laminar: filtros High Efficiency Particulate Air
(HEPA).
Eficaz na remoo de partculas pequenas, como 0,3 m.
Vrias aplicaes industriais.

Capela de Fluxo Laminar

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Desinfetante e Esterilizante

xido de Etileno

- Registrado em 1948 nos EUA como pesticida antimicrobiano.

- Utilizado para esterilizar material hospitalar, tratar temperos
processados e locais de manuseio e preparo de alimentos.
- Usado diretamente no estado gasoso, pode agir como
desinfetante, esterilizante e inseticida.
- Em 2001, foi usado para esterilizar prdios nos EUA contaminados
com esporos de Bacillus anthracis, agente do antraz.

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Sistemas conjugados
1 Filtro para retirar as partculas at 10 micra (plen e poeira)
2 Filtro UV inativa bactrias e vrus
3 Filtro de Fotocatlise queima os odores e microrganismos mais
resistentes como plen e esporos
4 Filtro retira restos de particulados.

QUALIDADE DO AR

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QUALIDADE DO AR INTERNO
Legislao
RE no 09 16/01/2003 ANVISA
Padres referenciais de Qualidade do Ar Interior em Ambientes
Climatizados Artificialmente de Uso Pblico e Coletivo.

Valor Mximo Recomendvel (VMR) para contaminao

microbiolgica:
750 UFC/m3 de fungos e a relao I/E 1,5
onde I a quantidade de fungos no ambiente interior e E a
quantidade de fungos no ambiente exterior.
Quando ultrapassar o VMR ou a relao I/E for > 1,5: necessrio
diagnstico de fontes poluentes.
inaceitvel a presena de fungos patognicos e toxignicos.

QUALIDADE DO AR INTERNO
Legislao
Consulta Pblica (CP) no 109 11/12/2003 ANVISA
Indicadores de Qualidade do Ar Ambiental Interior em
Servios de Sade

Indicador de qualidade de ar ambiental interior: contagem

total de bactrias e fungos

Risco ocupantes e/ou pacientes

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QUALIDADE DO AR INTERNO
Legislao
Decreto-Lei 79 / 2006
Aprova o Regulamento dos Sistemas Energticos de Climatizao
em Edifcios (RSECE)
Parmetros microbiolgicos e valores mximos admissveis a
considerar na determinao da qualidade do ar interior

Bactrias
Fungos
Legionella

No UFC/m3
500
500
100

Efeitos adversos na sade podem incluir doenas ou respostas alrgicas.

Embora no existam padres para regular a contaminao microbiana,
algumas organizaes apresentam sugestes para os limites aceitveis:

Bioaerossis menos de 1.000 UFC/m3 (OSHA*: Field Technical Manual)

Amostras de
superfcie

menos de 100 UFC/in2 em dutos de ventilao (NADCA)

Ar interno

750 UFC/m3 (fungos) (ANVISA***, RE 09, 2003)

Ambientes
hospitalares

CP 109, 2003 ANVISA

Fonte: www.eagleih.com/microbiology.html
*OSHA = Occupational Safety & Health Administration, U.S. Department of Labor
** NADCA = National Air Duct Cleaners Association, USA
***ANVISA = Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria, Brasil

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Consideraes
- Reteno no total,
- Eficincias em amostradores ;
- Destruio de certas espcies;
- Mais de uma clula por partcula;
- Meio de cultura no garante o desenvolvimento de
todas as espcies.

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PATGENOS DO AR
Aumenta durante o outono e inverno aumento do
nmero de pessoas em ambientes confinados.
Contato direto com indivduos infectados: atravs de
secrees do nariz e da garganta, disseminados por
gotculas devido tosse, espirro e conversao.
Contato indireto: resduos infecciosos ou artigos de
pessoas infectadas.

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O Sistema respiratrio dos seres humanos e as regies onde os

microrganismos patognicos geralmente iniciam as infeces

PATGENOS DO AR
Os agentes etiolgicos de cerca de 1/3 dos casos de
infeces respiratrias superiores so de natureza viral:
Rinovrus

Adenovrus

Parainfluenza
Herpes

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PATGENOS DO AR
Bactrias: Streptococcus causam de resfriados at srias
infeces pulmonares.

Actinomicetos e fungos patognicos causam micoses sistmicas

ou profundas, graves ou fatais.

Paracoccidioides brasiliensis

DOENAS VIRAIS
Rhinovrus (resfriado comum): predominante.
Influenza (gripe comum): forma epidmica (A, B e C)
Vrus respiratrio sincicial (bronquite e pneumonia);
Adenovrus (vias areas superiores: otite, faringite e amigdalite).

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Importantes patgenos do ar em
humanos
Doenas humanas

Patgenos

Doenas Virais
Caxumba

Vrus da caxumba

Dengue

Flavivirus

Febre amarela

Flavivirus

Febre hemorrgica

Bunyavirus

Gripe comum

Rhinovirus

Hantavirus (sndrome pulmonar)

Hantavirus

Hepatite

Vrus da hepatite

Influenza myxovirus

Vrus da influenza

Poliomielite

Poliovirus

Sarampo

Morbillivirus

Varicela

Vrus da varicela

Varola

Poxvirus da varola

Doenas de Protozorios
Pneumocistose

Pneumocystis carinii

DOENAS CAUSADAS POR FUNGOS

Leveduras e fungos filamentosos esto presentes no ar.
Alm de alergnicos, so, em sua maioria, organismos oportunistas.
Exemplos: Pneumocystis spp., Cryptococcus spp., Penicillium spp.
infeces frequentes em pacientes com HIV.

Pneumocystis spp.

Cryptococcus spp.

Penicillium spp.

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DOENAS POR FUNGOS

Aspergillus spp. pode atingir indivduos debilitados causando
infeces pulmonares.
Cladosporium spp. raramente patognicos, podem causar
infeces na pele, unhas ou trato respiratrio (podendo levar
pneumonia, caso no seja tratada).

Aspergillus spp.

Cladosporium spp.

Aspergillus fumigatus. (A) Esporforo do fungo em cultura. Os esporos so

produzidos em filides que emanam de um hifa vertical com forma de basto.
(B) Seo de tecido do pulmo contendo hifas de Aspergillus. O crescimento
intenso de hifas no pulmo chamdo um aspergiloma.
http://www.biology.ed.ac.uk/research/groups/jdeacon/microbes/airborne.htm

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Importantes patgenos do ar em humanos

Doenas humanas

Patgeno

Doenas Fngicas
Aspergilose

Aspergillus fumigatus

Blastomicose

Blastomyces dermatiridi

Candidiase

Candida albicans

Coccidiomicose

Coccidioides immitis

Critpococcose

Cryptococcus neoformans

Histoplasmose

Histoplasma capsulatum

Nocardiose

Nocardia asteriodes

Sporotricose

Sporotrichum schenckii

Importantes patgenos do ar em humanos

Doenas humanas

Patgeno

Doenas Bacterianas
Antrax pulmonar

Bacillus anthracis

Bronquite, sinusite

Haemophilus influenza

Brucelose

Brucella melitensis

Difteria

Corynebacterium diphteriae

Febre tifide

Salmonella typhi

Infeco respiratria de Staphylococcus

Staphylococcus aureus

Infeco respiratria de Streptococcus

Streptococcus pyogenes

Legionelose

Legionella spp.

Meningite

Neisseria meningitidis

Pneumonia

Chlamydia psittaci

Pneumonia

Klebsiella pneumoniae

Pneumonia primria atpica

Mycoplasma pneumoniae

Praga pneumnica

Yersinia pestis

Tuberculose

Mycobacterium tuberculosis

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Importantes doenas transmitidas de pessoa a pessoa

pela inalao de partculas areas

Doenas bacterianas
Coqueluche (Bordetella pertussis)
Meningite (Neisseria spp.)
Difteria (Corynebacterium diphtheriae)
Pneumonia (Mycoplasma peneumoniae, Streptococcus spp.)
Tuberculose/Lepra (Mycobacterium tuberculosis, M. leprae)
Amigdalites (Streptococcus pyogenes)
Impetigo (Staphylococcus aureus)

DOENAS BACTERIANAS
Bactrias Gram-negativas
- Legionella pneumophila (legionelose): pneumonia grave, febre,
calafrios, dor de cabea e muscular, decorrente de fonte ambiental
(exemplo: proveniente de gua de ar condicionado).
- Haemophilus influenzae: cocobacilos sem motilidade (meningite,
infeces de ouvido mdio e, raramente, pneumonia).

Legionella pneumophila

Haemophilus influenzae

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DOENAS BACTERIANAS
Bactrias Gram-positivas
- Staphylococcus aureus : infeces hospitalares ;
- Streptococcus pyogenes: gnero complexo, maior nmero e
diversidade de doenas (escarlatina, faringite, laringite, erisipela, febre
reumtica e pneumonia);
- Streptococcus pneumoniae: bronquite, pneumonia.

Streptococcus pyogenes

Staphylococcus aureus

DOENAS BACTERIANAS
Bactrias Gram-positivas: Actinomycetes
- Apresentam filamentos ramificados (procariticos);
- Dimetro inferior ao de fungos.
Principais gneros:
Actinomyces Actinomicose;
Nocardia Infeco pulmonar;
Mycobacterium Tuberculose pulmonar.

Actinomyces

Nocardia

Mycobacterium

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Tuberculose

Pulmo normal

Pulmo doente

TOXINAS BACTERIANAS
Toxina botulnica A (Clostridium botulinum) arma biolgica
(neurotxica)

Lipopolissacardeos (LPS) Salmonella typhimurium (tosse, chiado,

respirao curta, febre).

ARMAS BIOLGICAS
1995: Tkio toxina botulnica em atentados terroristas.

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Doenas adquiridas pela inalao de partculas de fontes ambientais

Doena

Fonte

Psitacose (Chlamydia psittaci)

Fezes de pssaros infectados (papagaios,

pombos, etc.)

Doena dos Legionrios

(Legionella pneumophila)

Sistemas de ar condicionado, tanques de

armazenamento de gua onde h
crescimento de bactrias.

Aoveolite alrgica aguda

Esporos de fungos ou actinomicetes de

matria orgnica em decomposio

Aspergilose (Aspergillus fumigatus, A. Esporos de fungos de matria orgnica em

flavus, A. niger)
decomposio
Histoplasmose (Histoplasma
capsulatum)

Esporos de fungos em fezes de morcegos

ou pssaros em decomposio

Coccidioidomicose (Coccidioides
immitis)

Esporos de fungos em regies desrticas

(nas Amricas)

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Ser um resfriado ou uma gripe?

Sintomas

Resfriado

Sintomas
Febre

Resfriado
comum
Rara

Cefaleia

Rara

Comum

Mal-estar geral

Discreto

Comum; frequentemente severo;

pode durar vrias semanas
Menos comum; no abundante

Secreo nasal

Gripe
Gripe(39-40C), incio repentino
Comum

Comum e abundante

Faringite

Comum

Bem menos comum

Vmito e diarreia

Raro

Comum

(Madigan et al., 2004: Microbiologia de Brock)

Patogenias causadas pelo ar em ANIMAIS

Importantes patgenos do ar em animais
Doenas animais

Patgeno

Doenas Bacterianas
Brucelose
Salmonelose
Tuberculose

Brucella spp.
Salmonella spp.
Mycobacterium bovis

Doenas Fungicas
Aspergilose

Aspergillus spp.

Coccidiomicose
Tuberculose

Coccidioides immitis
Mycobacterium bovis

Doenas Virais
Aftosa

Aphthovirus

Bronquite infecciosa
Clera canina
Encefalomielite
Herpes canina
Influenza

Influenza, outros
Pestivirus
Alphavirus
Herpesviridae
Vrus da influenza

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DOENAS EM PLANTAS
Doenas de plantas:
Ventos na superfcie dos rgos (parte area) ou na superfcie
do solo (patgenos de razes).
At 70% de todas as doenas em plantas so causadas por
fungos (agricultura).

Hemileia vastatrix
Ferrugem do caf

Importantes patgenos do ar em plantas

Doenas de plantas

Patgeno

Doenas Fungicas
Infeco da florao

Sclerotinia laxa

Ferrugem do cedro e da macieira

Gymnosporangium spp.

Ferrugem da coroa dos cereais

Puccinia coronata

Ferrugem da folha

Puccinia recondita

Ferrugem do milho

Puccinia sorghi

Ferrugem do trigo

Puccinia graminis

Fuligem do trigo

Ustilago tritici

Mldio

Pseudoperonospora humuli

Mldio do centeio

Erysiphe graminis

Murcha da batata

Phytophthora infestans

Murcha da folha do milho

Helminthosporium maydis

Sigatoka negra da bananeira

Mycosphaerella musicola

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