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UNIVERSIDAD NACIONAL DE

TRUJILLO

E.A.P. Microbiologa y Parasitologa

Curso

: Gentica

Docente

: Gina

Tema

: Informe de prctica

Ciclo

: I 2015

Alumna

Ruz Vidaurre Cynthia

Universidad Nacional de Trujillo

OBTENCIN DE POLIPLOIDES
(Con tcnica de Tjio y colchicina)
I.

INTRODUCCIN
En Gentica, la poliploida se define como el fenmeno por el cual
se originan clulas, tejidos u organismos con tres o ms juegos
completos de cromosomas de la misma o distintas especies o con
dos o ms genomas de especies distintas. Tales clulas, tejidos u
organismos se denominan poliploides. Si los genomas de una
especie poliploide provienen de la misma especie ancestral, se dice
que es autopoliploide o autoploide; si provienen de dos especies
ancestrales diferentes se dice que es alopoliploide o aloploide.
Dependiendo del nmero de juegos cromosmicos completos que
posee la especie se denomina como triploide (3X), tetraploide (4X),
pentaploide (5X) hexaploide (6X) y as sucesivamente, siendo X el
nmero monoploide, no debiendo confundirlo con el nmero
haploide.
La poliploida es un suceso bastante frecuente en la naturaleza, si
bien es ms frecuente en plantas y algas que en animales y hongos.
Para la realizacin de esta prctica utilizaremos las raicillas de
Allium cepa (cebolla); ya que esta es una especie ideal para
estudios citolgicos debido a que cuenta con un numero de
cromosomas (16 = 2n).
Para una correcta determinacin de clulas poliploides es necesario
contar con que las clulas de cebollas debern ser colectadas en
estado de metafase.

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II.

OBJETIVOS
Observar la poliploidia de clulas de raicillas de cebolla, que se debern
encontrar en estado de metafase.
Observar el efecto de la colchicina sobre el estado de divisin celular de
las clulas de cebolla.
Determinar el uso de HCl sobre las clulas de la cebolla.

III. MATERIALES Y MTODO


1. MATERIALES
MATERIAL BILOGICO:
-

raicillas de Allium cepa

MATERIAL DE LABORATORIO :
-

1 lamina porta objetos


1 lmina
Orcena actica

Microscopio ptico
Mechero de bunsen
HCl
La colchicina

2. MTODO
PROCEDIMIENTO PREVIO A LA ACTIVIDAD
EXPERIMENTAL (EN CASA)
-

1. Se coloc las races y fibras de la base del bulbo de


cebolla pequea (5- 7 cm de dimetro).
2. Se Inserto 3 palillos de forma que el bulbo de
cebolla se pueda suspender en un frasco con agua.
3. Se coloco el bulbo de cebolla tapando la boca de un
frasco, y luego se lleno con agua hasta que toque la base de la
cebolla.
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Nota: Este procedimiento
deber realizarse cinco das
antes de la actividad
experimental, con la finalidad de
permitir el crecimiento de los
meristemos.
-

- METODO DE UTILIZACIN
DE COLCHICINA PARA LA OBSERVACIN CELULAS
POLIPLOIDES EN RAICILLAS DE CEBOLLA
1. Se Corto 2 a 3 centmetros de las raicillas con la navaja de afeitar y
se las deposito en un vidrio de reloj.
2. Se Cubri la muestra con de HCl (para romper la pared celular).
3. Se coloc estas raicillas en un frasquito con colchicina y se dejo por
un tiempo all.
4. Se Tom un vidrio de reloj y se sac del frasco con las pinzas unas
cuantas raicillas.
5. Estas luego fueron sometidas a la coloracin con orcena actica y
tambin se calentaron
suavemente a la llama del mechero,
evitando la ebullicin (prueba de los tres humos).
6. Luego se coloc las raicillas ya tratadas sobre el portaobjetos y se
cubri con el cubreobjetos, presionando suavemente, el aplastado
(squash).
7. Seguidamente se elimino el exceso de colorante con una toalla de
papel.
8. Se Observa y enfoca la preparacin al microscopio ptico con el
objetivo 10x.
9. Observar a mayores aumentos (40x, 100x) recorriendo diversos
campos para descubrir en las clulas observadas la poliploida.

IV. RESULTADOS
-

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V.

Observacin de celulas poliploides con orceina y


cochicina a 2x
Observacin de celulas de cebolla a 4x
Observacin de celulas poliploides con orceina y
cochicina a 4x

CONCLUSIONES
-

Se observ
la poliploidia de clulas de raicillas de cebolla en
estado metafsico.
Se resalta una caracterstica importante observada en esta
poliploidia ya que se observ las raicillas hinchaditas, esto se debe
a que colchicina tiene por efecto hacer que en las clulas se
detenga el proceso de divisin celular y por ende se encuentren
las clulas en metafase, esto ayuda mucho en la observacin de
clulas poliploides y la elaboracin de un en cariotipo.
El uso de HCl es muy importante debido a que ayuda al
ablandamiento de las paredes clulas, que sern destruidas
despus con el calor, para la mejor retencin de colorante en las
clulas

VI. REFERENCIAS WEBGRFICAS


https://es.wikipedia.org/wiki/Poliploid
%C3%ADa
-

http://www.unavarra.es/genmic/genetica
%20y%20mejora/Problemas%20de

Universidad Nacional de Trujillo

%20genetica%20y
%20mejora/practicas_pgm08-09.pdf
-

https://es.wikipedia.org/wiki/Colchicina
-

https://es.scribd.com/doc/95683185/ManualCitologia-2009-04-17-B
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ANEXOS

Fig.1 Toma de muestra de races de cebolla, hidrolisis con HCl


y colocacin a la colchicina

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(squash)

Fig.2 Coloracin con orcena actica, aplastado