UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

INFORME DE LABORATORIO
Profesora

Curso

: Biologa general

Alumna

: Zevallos Alvites Martha Angela

Ciclo

: 2015 I

I.

INTRODUCCIN

El conocimiento de las estructuras del ser vivo est basado casi totalmente en el
estudio con el microscopio. El microscopio ptico es un instrumento que permite la
observacin de objetos y detalles de estructuras tan pequeas que no podran ser
observadas a simple vista. Con l, nuestro grado de visibilidad se ampla en cientos o
miles de veces, gracias a un conjunto de lentes, dispuestos convenientemente. Dado
que el microscopio permite superar estas dos dificultades, su uso y el conocimiento de
los principios y tcnicas en microscopa, resultan fundamentales para el desarrollo de
la investigacin en ciencias biolgicas, especialmente en los campos de estudio que
conforman el rea acadmica de la Universidad Nacional Agraria La Molina, pues al
ser una universidad dedicada a la formacin de jvenes profesionales con inclinacin
hacia la investigacin cientfica, es necesario que reciban una base slida para realizar
estudios e investigaciones, empezando por lo ms bsico, que es saber utilizar
correcta y eficientemente las diferentes clases de microscopios, que le permitirn
descubrir un mundo que no tenan a su alcance anteriormente, pero que ahora
aprovecharn al mximo y del que nunca dejarn de aprender y sorprenderse.

II.

OBJETIVOS

III.

Identificar las partes del microscopio compuesto y comprender sus

caractersticas.
Manejar el microscopio ptico compuesto y estereoscopio correctamente
Identificar las similitudes y diferencias entre el microscopio compuesto y el
estereoscopio.
Realizar observaciones de muestras biolgicas (vasos conductores abeja) en
los microscopios y aprender a enfocarlas a diferentes aumentos.
Calcular la distancia lmite de resolucin, el grado de aumento y la distancia de
trabajo en el microscopio.

REVISIN LITERARIA

1. Tipos de microscopio utilizados en la prctica

El tipo de microscopio ms utilizado es el microscopio ptico, que se sirve de la luz
visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio ptico ms simple
es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar
un objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan microscopios compuestos, que
disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos
microscopios pticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces.
Los microscopios pticos actuales tienen un poder resolutivo de 0,2 m, unas mil
veces la del ojo humano

A. Microscopio ptico Compuesto

El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular,
montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo est compuesto de
varias lentes que crean una imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes
de los microscopios estn dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el
punto focal del ocular. Cuando se mira a travs del ocular se ve una imagen virtual
aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las
longitudes focales de los dos sistemas de lentes.
Parte mecnica
-

Pie o soporte: sirve como base al microscopio y en l se encuentra la fuente de

iluminacin.
Platina: superficie sobre la que se colocan las preparaciones. En el centro se
encuentra un orificio que permite el paso de la luz. Sobre la platina hay un
sistema de pinza o similar, para sujetar el portaobjetos con la preparacin, y
unas escalas que ayudan a conocer qu parte de la muestra se est
observando.
Tubo: cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Constituye el soporte
de oculares y objetivos.
Revlver: estructura giratoria que contiene los objetivos.
Brazo o asa: une el tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el
microscopio para trasladarlo de lugar.
Tornillo macromtrico o de enfoque grosero: sirve para obtener un primer
enfoque de la muestra al utilizarse el objetivo de menor aumento. Desplaza la
platina verticalmente de forma perceptible.
Tornillo micromtrico o de enfoque fino: sirve para un enfoque preciso de la
muestra, una vez que se ha realizado el enfoque con el macromtrico. Tambin
desplaza verticalmente la platina, pero de forma prcticamente imperceptible.
Es el nico tornillo de enfoque que se utiliza, una vez realizado el primer
enfoque, al ir cambiando a objetivos de mayor aumento.

Parte ptica
-

Lentes oculares: son los sistemas de lentes ms cercanos al ojo del

observador, situados en la parte superior del microscopio. Son cilindros huecos

provistos de lentes convergentes cuyo aumento se resea en la parte superior

de los mismos (normalmente 10X).
Lentes objetivos: son sistemas de lentes convergentes que se acoplan en la
parte inferior del tubo, mediante el revlver. En esta estructura se pueden
acoplar varios objetivos. Algunos objetivos no enfocan bien la preparacin al
aire, y se deben de utilizar con un aceite de inmersin (100x).

Sistema de iluminacin
Este tipo de sistema tiene la finalidad de dirigir la luz natural o artificial de modo que
ilumine la muestra para observarla al microscopio ptico. Est formada por cuatro
partes muy importantes, como la fuente de luz, espejos, condensador y diafragma.
-

Fuente de luz: puede ser natural o artificial. La luz artificial puede ser
independiente del microscopio. Si lo es, este debe tener un espejo que dirija los
rayos hacia el eje ptico y en forma paralela a el.
Espejo: puede moverse para orientarlo de la manera ms conveniente. El
espejo tiene dos caras, una plana y una cncava. Si utiliza la cara cncava
cuando no se trabaja con el condensador, con una fuente luminosa natural. En
cambio la cara plana se utiliza cuando se trabaja con luz artificial o cuando se
usa el condensador.
Condensador: sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los
concentra sobre la preparacin, de manera que proporciona mayor o menos
contraste. Se regula en altura mediante un tornillo.
Diafragma o iris: sobre el reflector de la fuente de iluminacin. Abrindolo o
cerrndolo permite graduar la intensidad de la luz.

B. Microscopio ptico Simple o Estereoscopio

El microscopio estereoscpico tiene dos lentes objetivos y posee una profundidad de
foco mucho mayor que la del microscopio compuesto; ambas caractersticas le
permiten producir imgenes tridimensionales (estereoscpicas). El poder de resolucin
y de aumento del estereoscopio son mucho menores que las del microscopio
compuesto y por esta razn el estereoscopio se usa para estudiar objetos y
especmenes relativamente grandes (razn por la cual tambin se le llama microscopio
de diseccin). En realidad son dos lupas, colocadas una al lado de la otra y con cierta
oblicuidad entre s (15 grados), que da a la imagen el efecto de profundidad. La lupa
posee una capacidad de aumento limitada, que oscila entre 1,5x a 50x, y forma una
imagen aumentada y derecha
Las partes de este microscopio son prcticamente las mismas que las discutidas para
el microscopio compuesto.

2. Caractersticas de visin con el microscopio

Grado de Aumento

Es la magnificacin total que sufre la imagen del objeto debido al efecto de los lentes
oculares y objetivos. Se obtiene multiplicando el nmero de veces que aumenta el
lente ocular por el nmero de veces que aumenta el lente objetivo.
Grado de aumento: Aumento del objetivo x Aumento del ocular
Si el objetivo aumenta la imagen de un objeto 40 veces, sta al pasar por la lente
ocular ser nuevamente aumentada. Si el ocular aumenta 10 veces, la magnificacin
total en este caso ser:
10X x 40X = 400X.
Este resultado permite saber cuntas veces ms grande estamos viendo la imagen de
un objeto.

Poder de Resolucin
Es la posibilidad de distinguir separados dos puntos muy cercanos entre s. Cuanto
mayor sea el poder de resolucin, menor ser la distancia entre dos puntos a la cual
pueden distinguirse como tales. La distancia lmite en la cual dos puntos pueden ser
todava distinguibles se denomina Lmite de Resolucin. El poder de resolucin de un
microscopio compuesto depende de la longitud de onda de la fuente luminosa y de la
apertura numrica (propiedad ptica de la lente).
Lmites de Resolucin aproximados de algunos sistemas pticos:
-

Ojo humano: 0,2 mm.

Microscopio ptico: 0,2 m.
Microscopio electrnico: 0,2 nm.

Puede ser calculado mediante la siguiente frmula:

D.L.R = (0,61 ) / A.N

: Longitud de onda de la fuente luminosa
A.N: Apertura numrica del lente
D.L.R: Distancia Lmite de Resolucin

Distancia de trabajo
Es la distancia que se mide entre la muestra observada y el lente objetivo. Es
inversamente proporcional a la apertura numrica y al aumento. Por lo tanto, cuanto
mayor la apertura del objetivo menor la profundidad de campo, e igualmente, cuanto
mayor el aumento menor la profundidad de campo.

3. Manejo del microscopio

Antes de observar la preparacin al microscopio, esta debe de ser montada sobre
vidrio. Para ello existen dos piezas de vidrio denominadas portaobjetos (porta), que,

como su nombre indica, es el soporte sobre el que va la muestra, y cubreobjetos

(cubre) que siempre ha de colocarse sobre la muestra. Una vez colocada la muestra
en el porta, se debe aadir una gota de agua, o de la solucin acuosa pertinente,
antes de colocar el cubre, para evitar interfases agua-aire, que provocan zonas ciegas.
Los pasos a seguir para la perfecta utilizacin del microscopio son las siguientes:
a. Enchufar el microscopio a la red.
b. Colocar la preparacin sobre la platina de forma que la estructura a observar
quede en el orificio central de la platina.
c. Poner el objetivo de menor aumento cuyo amplio campo visual facilita el
hallazgo de estructuras importantes.
d. Subir la pletina accionando el tornillo macromtrico y mirando la preparacin
desde fuera hasta alcanzar el tope superior. En ningn caso tocar la
preparacin con los objetivos.
e. Mirando por los oculares, bajar lentamente la platina con el tornillo
macromtrico hasta conseguir ver el objeto lo ms ntido posible.
f. Ajustar el enfoque con el tornillo micromtrico hasta verlo claramente.
g. Para observar la preparacin a mayores aumentos cambiar de objetivo con un
simple giro del revolver (sin mover el tornillo macro). Las pequeas variaciones
que se observen en el enfoque se producen al cambiar de objetivo y se
corrigen con el micro.
h. Para observar otros campos, desplazar la preparacin moviendo los tornillos de
la platina.

IV.

MATERIALES

Materiales del alumno por mesa

-

2 estiletes
Lminas portaobjetos
Goteros
Regla milimetrada de 20 cm
Lminas cubreobjetos
Muestras de agua estancada

Materiales del laboratorio

-

V.

Microscopio ptico simple o estereoscopio

Placas Petri
Microscopio ptico compuesto
Pipetas Pasteur

PROCEDIMIENTO

1. Actividad partes del microscopio y poder de resolucin

Se procedi a escribir en los espacios en blanco del cuadro con los sistemas que
conforman el microscopio ptico compuesto, sus partes y funciones; utilizando el
conocimiento adquirido previamente por la teora y la explicacin de la profesora,
ayudada de un grfico contenido en la gua de laboratorio y la observacin fsica de los
microscopios compuestos presentes en cada mesa de laboratorio.
A continuacin se complet el cuadro para hallar el poder de resolucin de cada uno
de los objetivos del microscopio, considerando a la longitud de onda con el valor de
5500 ; esta actividad la realizamos apoyndonos en los microscopios que se nos
proporcionaron al inicio de la clase de laboratorio, para poder identificar cada lente
objetivo presente en el revlver y as poder calcular:
-

el grado de aumento: multiplicando el aumento del ocular por el objetivo.

la distancia lmite de resolucin: con la frmula explicada por la profesora
D.L.R = (0,61 ) / A.N
la distancia de trabajo: midiendo con una regla la distancia entre el objetivo y el
porta objeto en donde se encontraba la muestra.

2. Observacin de muestras
Utilizamos los materiales solicitado para la prctica.
Tomamos unas gotas de la muestra de agua estancada y las colocamos en el porta
objeto, protegindolas con el cubre objeto. Pusimos el porta objeto en la platina
asegurndolo con la pinza; procedimos a observar la muestra con el objetivo de menor
aumento (10x). Para enfocar nuestros objetos de observacin alternamos moviendo
los tornillos macromtrico y micromtrico hasta que logramos imgenes aceptables y
ntidas que nos permitieran hacer nuestras observaciones.
A continuacin, procedimos a retirar la muestra de agua estancada, para observar la
muestra de vasos conductores de plantas proporcionado por la profesora, repetimos la
operacin anterior y anotamos los resultados; aunque esta vez utilizando primero el
objetivo de menor aumento (10x) luego con el de mediano aumento (40x) y finalmente
con el de mayor aumento (100x) aunque no se utiliz el aceite de inmersin como se
solicita. Adems al conseguir cada imagen requerida, medimos con una regla la
distancia de trabajo y calculamos la distancia lmite de resolucin.
Por ltimo, utilizamos el estereoscopio para observar ms detalladamente el cuerpo de
una abeja, tambin modulando la imagen a travs de los tornillos del microscopio, para
luego proceder a documentar lo aprendido.

VI.

RESULTADOS Y DISCUSIN
1. Actividad partes del microscopio y poder de resolucin

Se complet el cuadro de Partes del microscopio ptico compuesto de acuerdo a la

informacin proporcionada en clase, diferenciando el sistema ptico, de iluminacin y
mecnico, las partes que los conforman y sus funciones.
Sistemas
ptico

Partes
1. Lente ocular
12. Lente objetivo
8. Fuente de luz

Iluminacin

10. Diafragma
9. Condensador
2. Tubo ocular
3. Revlver
11. Platina

Funcin
Ampla la imagen de objetivo.
Ampla la imagen de la muestra, se sita cerca de
esta.
Enva los rayos luminosos hacia el condensador.
Regula la cantidad de luz que entra en el
condensador.
Sistema de lentes que concentran los rayos
luminosos sobre la preparacin.
Contiene en su parte superior al lente ocular.
Permite cambiar de objetivo al girar
Lugar donde se coloca la muestra

Soporte

Mecnico

4. Brazo
7. Base
Tornillos de enfoque

5. Micromtrico
6.Macromtrico

Consigue el enfoque ntido

Logra el enfoque rpido

Se desarroll el cuadro para hallar el poder de resolucin de cada uno de los objetivos
del microscopio compuesto.
Ocular

Objetivo
Menor: 10x

G.A

D.L.R

0.61/0.25
)

100

D.T
1 cm

0.55 m

10x
Mediano: 40x

0.61/0.6 5
)

400

2 mm

0.55 m
X: aumentos

D.L.R: Distancia Lmite de Resolucin

G.A: Grado de aumento

D.T: Distancia de trabajo

2. Observacin de muestras
Observacin en el microscopio ptico compuesto

Se estudi la muestra de agua estancada que cada grupo consigui, se pudo observar
lo siguiente:
Muestra
Observacin
Objetivo
Grado de
aumento

Agua estancada
Se pudo reconocer protozoarios desarrollndose en el agua
estancada.
10x
100

Imagen

A continuacin se nos entregaron distintas muestras para ser analizadas, en este

caso, se trabaj con vasos conductores de plantas y los resultados fueron los
siguientes:
Muestra
Observaci
n

La imagen no es muy
expresiva, no se puede
ver la composicin de
la muestra.

Vasos conductores
La imagen es mucho
ms ntida, se
observa la
composicin de la
muestra.

Objetivo

10x

40x

Grado de
aumento

100

400

Imagen

Observacin en el estereoscopio:

La muestra est
aumentada al punto
que podemos
observar detalles
mnimos.
100x (sin aceite de
inmersin)
1000

Muestra
Observacin

Grado de aumento

abeja
Se pudo ver que la composicin de las alas era parecida a
celdas, adems del cuerpo aumentado de la abeja, patas y
cabeza.
12x

Imagen

VII.

CONCLUSIONES

VIII.

Podemos afirmar que el estereoscopio y el microscopio compuesto son

artefactos indispensables en el proceso de observacin de muestras
biolgicas, son la base de todo estudio biolgico pues permiten conocer la
composicin de la muestra y analizarla segn se necesite.
Se concluy que en el agua estancada, suelen encontrarse protozoarios y
algas, producto de la exposicin a los factores ambientales del lugar.
El microscopio nos permiti estudiar la composicin y forma de los vasos
conductores de plantas, reafirmando lo aprendido anteriormente; adems,
aprendimos acerca del cuerpo de un insecto (abeja) al poder observarlo de
manera detallada.

CUESTIONARIO

1. Qu es la apertura numrica?

Es la capacidad de recoger luz de una lente, indica el poder de resolucin del

objetivo. Para lentes secas su valor mximo es de 1, pero por las limitaciones
fsicas de la calidad de las lentes, raras veces sobrepasan el valor de 0,95. Cuanto
mayor sea la apertura podremos conseguir mayor resolucin y brillo en la imagen.
Si queremos usar lentes con una apertura mayor de 1 (mximo 1,4) estas deben
ser de inmersin en aceite con el mismo ndice de refraccin que la lente. El uso
del aceite implica que la distancia de trabajo entre el objeto y la lente debe ser muy
pequea lo que imposibilita la observacin de clulas vivas directamente en el
frasco de cultivo.
2. A cuntos micrmetros (m), Armstrong () y nanmetros (nm) equivalen 0.2
milmetros (mm)?
1 m = 0,001 mm = 1 10-3 mm; por lo tanto, 0.2 mm = 2 x 102 m
1 = 10-7 mm; por lo tanto, 0.2 mm = 2 x 106
3. Qu lente objetivo utilizara para enfocar el preparado y obtener un mayor campo
visual?
Para enfocar el preparado y poder observarlo y estudiarlo de una manera ms
efectiva, se utilizara el lente objetivo de mayor intensidad, preferentemente el de
100x, pero con el aceite de inmersin, pues de otro modo no recomendable; o el
de 40x, con el que se logra un buen alcance.
4. Qu tipo de imagen se obtiene con el microscopio estereoscopio?
El microscopio estereoscopio proporciona una imagen tridimensional
(estereoscpica) con un aumento de 4 a 40 veces el tamao de la muestra
observada, logrndose una imagen aumentada y derecha. Se usa para estudiar
objetos y especmenes relativamente grandes, ya que su poder de resolucin y
aumento son mucho menores que las del microscopio electrnico.
5. Cul es la diferencia entre aumento y poder de resolucin?
El aumento de un microscopio es la capacidad que poseen sus lentes para formar
una imagen de mucho mayor tamao que la imagen real del objeto. Se podra
pensar que la capacidad de aumento es infinita, o al menos, enorme y que
depende de los lentes que se usen. Sin embargo no es as, ya que de nada sirve
tener un gran aumento si la imagen no es ntida, y es aqu en donde se relaciona y
diferencia con la resolucin en el caso de la microscopia ptica, pues esta es la
capacidad de mostrar claramente los detalles del objeto.
6. Describa los diferentes tipos de microscopio ptico y electrnico.
Microscopio ptico
- Microscopios Compuestos: es el tipo de microscopio ms utilizado. Un
microscopio compuesto es un aparato ptico hecho para agrandar objetos,
consiste en un nmero de lentes formando la imagen por lentes o una
combinacin de lentes posicionados cerca del objeto, proyectndolo hacia los
lentes oculares u el ocular.
- Microscopio Binocular Estereoscpico: Slo sirve para exmenes superficiales
(diseccin de animales, observacin de colonias, deteccin de quistes de
parsitos). Es otro tipo de microscopio compuesto que posee una lente

convergente. El objeto se coloca entre la lente y el foco, de modo que la

imagen es virtual y est a una distancia que es la distancia mnima de visn
ntida.
Microscopio Campo oscuro: Este es una variacin del microscopio compuesto
pero presenta un fondo oscuro sobre el que se ven los objetos intensamente
iluminados. Permite ver el contorno de las bacterias y su movilidad, adems de
los microorganismos sin teir.
Microscopio Contraste de fases: El microscopio de contraste de fases permite
observar clulas sin colorear y resulta especialmente til para clulas vivas.
Este aprovecha las pequeas diferencias de los ndices de refraccin en las
distintas partes de una clula y en distintas partes de una muestra de tejido de
forma que sean visibles las distintas partes de una muestra.
Microscopio Fluorescencia: la fluorescencia es la propiedad que tienen ciertas
sustancias de emitir, cuando son iluminadas por una radiacin de L corta, otra
radiacin de L ms larga.

Microscopio electrnico
- Microscopio electrnico de transmisin (MET): Permite la observacin de
muestras de cortes muy finos. Se ha de colocar una placa fotogrfica detrs del
objeto para registrar la imagen aumentada. este tipo de microscopios pueden
aumentar un objeto hasta un milln de veces.
- Microscopio electrnico de barrido (MEB): En ste no es necesario que el
espcimen se encuentre en capas para observarlo. explora la superficie de la
imagen punto por punto, y recorre la muestra con un haz muy concentrado de
electrones. pueden llegar a ampliar una imagen unas 200.000 veces.
7. Enumere ejemplos de muestras que observara en un microscopio ptico
compuesto y en un microscopio ptico simple.
Microscopio ptico compuesto
- Sangre
- Xilema y floema
- Protenas
- bacterias
Microscopio ptico simple
- insecto
- hoja
- flor
- cabello

IX.

BIBLIOGRAFA

BERNIS MATEU, F.J. 1997.- Atlas temtico de Microscopa. Idea Books, S.A.,
Barcelona, Espaa.
RAISMAN, J.S. Y A.M. GONZLEZ 2006.- Introduccin: Principios de Microscopa en

http:// www.biologa.edu.ar
HEALEY, P. 1971.-Microscopio y vida microscpica. Burguera.
Laboratorio n 5: EL microscopio y las clulas - UPRM