Nombre: Cristian R. F. Figueroa.

Comisin: 4

Laboratorio
Homeostasis celular

Introduccin
En el trabajo practico N3 correspondiente al tema Homeostasis celular en su
primera parte se abordan los contenidos de prueba de hemolisis y resistencia
globular, los cuales tienen un fundamento terico especifico, que consiste en
someter al glbulo rojo o hemate a distintas concentraciones de cloruro sdico
(ClNa), glucosa, solucin fisiolgica con detergente y agua destilada, con el fin de
determinar a qu concentraciones de estos el glbulo rojo pierde la integridad de
su membrana plasmtica sufriendo de manera inevitable la hemolisis globular,
este postulado se establece conociendo la caracterstica distintiva que posee el
hemate que es no tener mecanismos regulatorios del volumen celular, a saber:
Disminucin regulatoria del volumen (DRV) y Aumento regulatorio del volumen
(ARV), Cada una con una fase rpida (Egreso de K, Cl y osmolitos orgnicos en
un medio hipotnico e Ingreso de Na , K , Cl y osmolitos orgnicos para un medio
hipertnico), y una fase lenta (Cambios en la expresin gnica de enzimas y
transportadores). Ahora bien, surgen la preguntas: por qu el Hemates carece
de esta regulacin fisiolgica normal?, Cmo hacen para menguar las fluctuantes
concentraciones del medio?

Desarrollo del laboratorio

Para la realizacin de la actividad se necesitaron:
-Seis tubos de hemlisis
-Agua destilada,
-Pipetas Pasteur,
-Soluciones de ClNa al 1.5%, 0.9%, 0.7%, 0.5% y 0.2%,
-5% de glucosa,
-Solucin fisiolgica con detergente diluido
-Sangre pura.
El procedimiento comenz con numerar los tubos y colocar 2 ml de cada una de
las soluciones, posteriormente agregar a cada tubo 2 gotas de sangre y mezclar
suavemente sin agitar y dejar en reposo por 60 minutos, luego la docente procedi
a centrifugar los tubos por 10 min. A 3000 rpm.

Resultados del laboratorio

Tu
bo
N

Soluci
n

osmolari
dad

Resultad
o
obtenido

Resultado fundamento
con
centrifugac
in

517
mOsm/l

Tonicida
d
(resultad
o
esperad
o)
hipertni
ca

ClNa
1.5%

Dos
fases:
una con
liquido
claro y
botn
celular
sediment
ado

Deshidrata
cin

ClNa
0.9%

310
mOsm/l

Isotnic
a

No hay
cambios
de color
de la 1
fase el
botn
celular
ms
grande.

No
hemolisis

ClNa
0.7%

241
mOsm/l

hipotni
ca

1 fase
lquido
transpar
ente y
botn
ms
grande.

No
hemolisis

ClNa
0.5%

171
mOsm/l

hipotni
ca

1 fase
liquido

Hemolisis

El medio
extracelular posee
una alta
concentracin de
partculas
osmticamente
activas
generando una
gran diferencia
entre las
osmolaridades,
esto provoca la
rpida e incesante
salida de agua
desde el eritrocito,
disminuyendo su
volumen y
terminando en la
crenacion.
No se observa
hemolisis debido a
que las
osmolaridades
son
equivalentes(isoto
nicas), el volumen
no se altera.
Osmolaridad
semejante al
plasma
sanguneo.
En esta solucin
la mayora de las
partculas
osmticamente
activas se
encuentran en el
interior del GR,
provocando el
ingreso de agua al
mismo pero como
las osmolaridades
alcanzan una
igualdad no llega
a terminar en una
lisis eritrocitaria.
Hay hemolisis por
las diferencias en

Conclusiones:
Durante el desarrollo de la actividad tambin se respondieron a preguntas como
para qu utiliza el tubo con agua destilada? Cul solucin de ClNa representa la
solucin fisiolgica? Despus de centrifugar qu hay en el sobrenadante y en el
sedimento en cada tubo?, ests preguntar fueron respondidas de la siguiente
manera:
1- Para un control del 100% de hemolisis pues el agua destilada es 100%
hipo- osmtica al carecer de solutos.
2- La concentracin del 0.9% porque es parecida a la concentracin
plasmtica.
3- En el sobrenadante hay lquido celular y en el sedimento se encuentra la
hemoglobina del glbulo rojo.
Al momento de realizar la prueba de hemolisis globular es importante tener
presente la edad del glbulo rojo pues ste con una vida media de 120 das es
ms susceptible a hemolisis cuanto ms cerca de este rango de edad se
encuentre, debido a que a medida que avanza su ciclo de vida la membrana
plasmtica del mismo va perdiendo sus caractersticas de resistencia y de
funcionalidad, una caracterstica nica del glbulo rojo y que puede responder las
interrogantes antes planteadas es su carencia de ncleo y su forma bicncava.

Conceptos claves:
Hemolisis globular, crenacin, hipertnico, isotnico e hipotnico, tonicidad,
osmolaridad y resistencia globular.

Observaciones: Como inconveniente se puede mencionar algunas discrepancias

en resultados con respecto a los tubos pues estos marcaban otras caractersticas
distintas a las esperadas, pero como se menciono con anterioridad la edad del
glbulo rojo es un factor clave en la realizacin de esta prueba, la sangre
disponible contaba con das aproximadamente una semana de ser extrada.