Estructura de las colectinas

Adems de los dos colectinas pulmonares SP-A y SP-D, se han

identificado en suero humano (lectina de unin a manosa, MBL) y en
bvidos (conglutinina, CL-43 y CL-46). Recientes anlisis del genoma han
identificado dos colectinas humanas relacionadas, CL-L1 y CL-P1 que se
expresan en el hgado y endotelio vascular, respectivamente.
SP-A y SP-D se sintetizan como productos de traduccin primarios de
aproximadamente 26-36 kDa y 43 kDa, respectivamente. El dominio
colgeno-like es N-terminal a una estructura espiral que precede al
dominio de lectina. Los dominios de colgeno varan mucho en longitud
(desde 19 tripletes Gly-XY en MBL a 59 en SP-D humano). Las colectinas
se ensamblan como subunidades trimricas, que multimerizan en
diversos grados. SP-A es principalmente un octadecamero y forma una
estructura en forma de bouquet (ramillete) similar a MBL, mientras que
SP-D forma un dodecmero (ver fig).

Organizacin estructural de colectinas pulmonares. SP-A y SP-D pertenecen a los colectinas que consisten en el dominio
similar a colgeno y el dominio de reconocimiento de carbohidratos de tipo C. SP-A forma un octadecmero en forma de
ramo a partir de 6 trmeros, mientras que SP-D forma un dodecmero cruciforme montado a partir de 4 trmeros. La punta
de flecha en SP-A indica la torcedura que es causada por la interrupcin de Gly-XY repite en el dominio de colgeno.

Tanto MBL y SP-A se asemejan a primer componente del complemento,

C1q. Sin embargo, a pesar de esta homologa estructural, C1q no
contiene un dominio de lectina, aunque tiene una N-terminal triple hlice
similar al colgeno. En los seres humanos, los genes que codifican SP-A,
SP-D y MBL se han mapeado a un clster en el brazo largo del
cromosoma 10.

Dominio de reconocimiento de carbohidratos (CRD). El dominio de

tipo C (calcio-dependiente) de reconocimiento de hidratos de carbono
(CRD; dominio de lectina) se defini por primera vez por Drickamer como
un elemento comn de las lectinas y se caracteriza por la presencia de
14 residuos de aminocidos invariantes y 18 residuos conservados,
incluyendo 4 residuos de cistena que forman un patrn de unin de
disulfuro conservado. Los CRD de las colectinas son grupos trimricos con
afinidad relativamente baja para un monosacridos simples pero con
mayor afinidad para oligosacridos agrupados.
Los colectinas pulmonares tienen ambas actividades de unin a
carbohidratos distintas y comunes. Por ejemplo, tanto SP-A y SP-D se
unen a manosa y glucosa, pero mal a la galactosa. La SP-A humana se
une preferentemente a N-acetil-manosamina y L-fucosa, mientras que SPD se une preferentemente a inositol, maltosa y glucosa. La importancia,
si alguna, de esta especificidad no se entiende actualmente. Sin
embargo, la alta afinidad de las colectinas para los oligosacridos
agrupados se cree que es importante para su capacidad para distinguir lo
propio de lo ajeno (self / non-self), ya que la mayora de los hidratos de
carbono en animales terminan por azcares, tales como galactosa o
cido silico, que son mal reconocidos por las colectinas.

Regulacin de las clulas inmunes por Colectinas

Las colectinas opsonizan patgenos. La primera colectina fue
identificado hace ms de 90 aos por Bordet y Streng, que mostraron que
una conglutinina de suero bovino aglutinaba eritrocitos recubiertos con
anticuerpos y complemento. Desde entonces, numerosos estudios han
demostrado que las colectinas se unen a bacterias Gram-positivas y
Gram-negativas, virus, hongos y alrgenos.
La unin de la SP-A y SP-D a las bacterias se produce a travs de varios
mecanismos. Por ejemplo, los LPS es un ligando para ambas SP-A y SP-D.
Adems, la protena de membrana externa P2 de Haemophilus influenzae

tipo A y un componente lipdico de Mycoplasma pneumoniae son ligandos

para SP-A. La SP-D se une al lipo-arabinomanano de la cepa virulenta
Edman de Mycobacterium tuberculosis.
Ambas colectinas pulmonares muestran interacciones especficas con
virus, incluyendo el virus de la gripe, el VIH y el virus herpes simplex. El
CRD de SP-D se une virus de la gripe a travs de interacciones con la
protena

hemaglutinina

glicoprotenas

de

envoltura

de

la

neuraminidasa, mientras que el SP-A interaccin con las protenas del

virus de la gripe est mediada a travs de un oligosacrido N-ligado en el
CRD en lugar del sitio de unin a hidratos de carbono en s . El virus
respiratorio sincitial (VRS) es reconocido por SP-D de una manera
diferente - por la unin de la protena G respiratoria. Por el contrario, SP-A
se une a la glicoprotena F-fusin de VRS dependiente de calcio. Tomados
en conjunto, estos estudios indican que los colectinas pulmonares
reconocen muchos patgenos mediante el uso de diversos patrones de
unin que son con frecuencia, pero no siempre, los objetivos para el CRD
de la colectina.
Receptores de colectina. La bsqueda de receptores para la SP-A y SPD ha estado en curso desde hace casi 20 aos. Debido a que estas
protenas son "pegajosas"1 y se unen fuertemente a ligando lpidos y
proteicos, se han identificado mltiples parejas de unin y supuestos
receptores (Fig. 4).
Numerosos estudios han informado de que SP-A media las funciones
celulares a travs de receptores de C1q, incluyendo C1qR (tambin
conocido como CD93) y calreticulina. El hallazgo de que la calreticulina
es un receptor de la superficie celular para C1q y una colectinas fue
inicialmente confuso: cmo podra una protena que se sabe que
funciona como una chaperona2 en el retculo endoplasmtico (ER) y para
1

sticky
Protenas celulares que, sin formar parte de la estructura primaria de una protena
funcional, se unen a ella para ayudar en su plegamiento, ensamblaje y transporte
celular a otra parte de la clula donde la protena realiza su funcin. Los cambios de
conformacin tridimensional de las protenas pueden estar afectados por un conjunto de
varias chaperonas que trabajan coordinadas, dependiendo de su propia estructura y de
la disponibilidad de las chaperonas.
2

tener una secuencia de retencin de ER se puede encontrar en la

superficie celular?.
Sin embargo, estudios recientes han confirmado que la calreticulina se
une a SP-A y SP-D y han demostrado que CD91 es un componente del
complejo de unin. Adems, un estudio reciente de Gagnon et al,
muestran que la membrana del ER se fusiona con la membrana
plasmtica durante la fagocitosis y proporciona un posible mecanismo
por el cual las protenas residentes en ER podan hacer su camino a la
superficie celular.
Gardai y cols informaron recientemente que SP-A y SP-D tambin
modular las funciones celulares a travs de la protena- reguladora de
seal inhibidora (SIRP-), as como el complejo CD91-calreticulina. Sus
datos muestran que SP-A se acopla diferencialmente ya sea CD91calreticulina o SIRP-, dependiendo de si el dominio de lectina de la SP-A
se une a la diana. Por ejemplo, en la ausencia de un patgeno, SP-A se
une a travs de su dominio de lectina a SIRP-. En la presencia de un
organismo extrao o restos celulares, a los que el dominio de lectina de
SP-A se liga, la regin libre de colgeno-like libre activa las clulas
inmunes a travs de CD91-calreticulina. Es importante destacar que, el
acoplamiento de los diferentes receptores provoca diferentes respuestas.
Cuando SP-A se une SIRP-, se inhibe la produccin de mediadores
inflamatorios. Por el contrario, SP-A aumenta la produccin del mediador
inflamatorio (por ejemplo, TNF, CXCL12 y CCL2) a travs del complejo
CD91-calreticulina.
Este modelo proporciona al menos una explicacin parcial de los informes
aparentemente conflictivos que la SP-A y SP-D tanto incrementan e
inhiben la produccin de mediadores inflamatorios y proporciona
importante informacin acerca de los mecanismos por los cuales podran
estar mediadas las respuestas colectina-especficas.
Hace ms de ocho aos, SP-R210 se identific como receptor de
SP-A. SP-R210 se purific por cromatografa de afinidad de SP-A y un
anticuerpo especfico frente a SP-R210 muestra que bloquea las
funciones mediadas por SP-A, incluyendo la inhibicin de la proliferacin

de linfocitos, el incemento de la captacin de bacterias por los

macrfagos y la muerte de micobacterias por una va dependiente de
xido ntrico. Sin embargo, todava no se ha establecido la identidad
molecular de SP-R210.
La Glicoprotena 340 (gp340) se identific inicialmente como una
protena que se une al CRD de SP-D. Debido a su ubicacin en la
superficie celular de los macrfagos alveolares, gp340 se sugiri a ser un
receptor de SP-D. Posteriormente se demostr ser idntica a la aglutinina
salival, un componente de alto peso molecular de la saliva que se une al
Streptococcus mutans, una bacteria que causa caries dentales. La gp340
no tiene un dominio transmembrana y su identificacin como un receptor
de SP-D sigue siendo poco clara.
Otros estudios recientes han informado de que SP-A y SP-D se unen
a los receptores de tipo Toll (TLRs) - una familia de receptores
celulares conservadas que reconocen patrones moleculares asociados a
patgenos, incluyendo flagelina y el ADN que contiene CpG a partir de
bacterias, peptidoglicano de bacterias Gram +, LPS de BGN, ARN de virus
y zymosan de la levadura.
La activacin de los TLRs por estos ligandos inicia una serie de
respuestas conservadas que culminan en la inflamacin y la produccin
de citoquinas inflamatorias, como el TNF y la interleucina-1 (IL-1).
Guillot y sus colaboradores observaron una activacin TLR4 SP-Adependiente de la va de sealizacin del factor-kappa B (NF-kB) y la
regulacin positiva de la sntesis de citoquinas en clulas de ovario de
hmster chino transfectadas con TLR4. Tal respuesta fue ausente en los
ratones deficientes en TLR4.
Adems, Murakami y sus colegas informaron que la SP-A se une
directamente TLR2. Por el contrario, la interaccin de SP-A con TLR2
atena la estimulacin de la sealizacin de TLR2 y tambin la
estimulacin

de

la

secrecin

de

TNF

inducida

por

zymosan

peptidoglicano.

Las colectinas mejoran la captacin del patgeno por las clulas

inmunes.
Tanto in vitro e in vivo, SP-A y SP-D as como MBL mejoran la
captacin de partculas y agentes patgenos y que lo hacen por al menos
tres mecanismos diferentes: por opsonizacin de patgenos; al funcionar
como ligandos de activacin; y mediante la regulacin de la expresin de
receptores de superficie celular.
El primer mecanismo, la opsonizacin de un patgeno, generalmente se
produce a travs de la unin de la colectina CRD a la superficie de
patgenos, como se describi anteriormente. Interaccin de la colectina
con los resultados de clulas inmunes en una mejor fagocitosis del
patgeno colectina-asociada. Alternativamente, la colectina simplemente
agrega el agente patgeno, lo que resulta en una mayor captacin sin
una obligada interaccin de la colectina con la clula. En resumen,
colectinas mejorar la captacin de las bacterias, los virus y los alrgenos
por

diversas

clulas

inmunes,

incluyendo

macrfagos

alveolares,

monocitos, neutrfilos y clulas dendrticas (DCs). Sin embargo, las

colectinas pulmonares tambin pueden inhibir la captacin de algunos
agentes patgenos por las clulas inmunes. Por ejemplo, SP-D inhibe la
captacin de M. tuberculosis por los macrfagos, por un proceso que es
independiente de la aglutinacin bacteriana. SP-A inhibe la captacin de
Pneumocystis jirovecii por los macrfagos alveolares Por lo tanto, se han
observado tanto respuestas de colectinas dependientes del contexto
como respuestas de patgeno-especficas.
El segundo mecanismo por el cual SP-A aumenta la captacin de
partculas es al funcionar como un ligando de activacin: la partcula se
recubre por una opsonina distinto de SP-A (por ejemplo, IgG), y SP-A
mejora la captacin por la activacin directa de la clula. Esta funcin de
ligando-activacin es compartida por el componente del complemento
estructuralmente homlogo C1q.
Las colectinas pulmonares tambin mejoran indirectamente la fagocitosis
de patgenos por un tercer mecanismo, la regulacin positiva de la
expresin de receptores de superficie celular que estn implicados en el

reconocimiento microbiana. Kuronuma y col. informaron que el SP-A

mejora la captacin de Streptococcus pneumoniae mediante el aumento
de la expresin de la superficie celular de receptor scavenger A3, una
respuesta que fue inhibida por la apigenina, un inhibidor de la casenquinasa 2.
SP-A mejora la absorcin y la supervivencia de M. tuberculosis en los
macrfagos por la supresin de la produccin de intermediarios reactivos
de nitrgeno. Adems, Beharka y col. informaron que la SP-A aumenta la
expresin del receptor de manosa por los macrfagos humanos derivados
de monocitos, que conduce a la captacin de microesferas revestidas de
lipoarabinomanano de M. tuberculosis. As, SP-A y SP-D tienen efectos
antagnicos durante la infeccin con M. tuberculosis. Estos estudios
indican que la SP-A podra tener un papel importante en la regulacin de
la expresin de receptores de superficie celular que son importantes para
la modulacin de las respuestas de clulas inmunes a agentes
patgenos.

carroero

Funciones de inmunomoduladores de colectinas pulmonares en macrfagos.

Parte superior. Las colectinas pulmonares modulan la inflamacin.
La unin del CRD de SP-A y SP-D a SIRP induce la activacin de la tirosin-fosfatasa SHP-1, que resulta en la
bloqueo de la sealizacin a travs de p38 MAP-quinasa. En consecuencia, se inhibe la liberacin de citoquinas
proinflamatorias.
La interaccin de SP-A con TLR inhibe el reconocimiento de microbios y de ligandos no-SP-A por TLRs,
resultando en la regulacin a la baja de las respuestas inflamatorias. En contraste, SP-A induce la secrecin de
citoquinas proinflamatorias en presencia de LPS en bruto, un ligando SP-A.
La unin de la cola de colgeno de SP-A -el cual ha interactuado con un microbio o restos celulares a travs
del CRD- con el complejo CD91/Calreticulina estimula la produccin de citoquinas.
Parte inferior. Las colectinas pulmonares aumentan la fagocitosis de las bacterias.
La SP-A sirve como opsonina y aumenta la fagocitosis de las bacterias y el bacilo de Calmette-Gurin a travs
de procesos mediados por un receptor-C1q y una SP-R210. La colectina tambin estimula la fagocitosis
mediada por FcR-CR1 y por la activacin de los macrfagos. En estos casos la cola de colgeno de SP-A
interacta con los macrfagos.
Adems, el CRD de SP-A interacta directamente con los macrfagos y aumenta la fagocitosis de S.
pneumoniae a travs de la casena-quinasa 2 (CK2) de localizacin en la superficie celular dependiente de la
SR-A.
La SP-A tambin aumenta la fagocitosis de MT y M. avium aumentando la expresin de la superficie celular de
MR. La SP-D estimula la fagocitosis de M. avium, aunque ms bien disminuye la captacin de MT.

Las colectinas regulan mltiples respuestas celulares, adems de

la fagocitosis.

SP-A y SP-D tambin regulan la produccin de mediadores

inflamatorios por las clulas inmunes en una manera dependiente del
contexto. Varios informes demuestran que los mediadores inflamatorios,
tales como TNF, son a la vez upregulated y downregulated por SP-A y SPD. Por ejemplo, SP-A inhibe la liberacin de TNF que es inducida por LPS o
bacterias intactas; por el contrario, SP-A aumenta la produccin de TNF,
ya sea cuando est solo o en presencia de LPS en bruto. Aunque
inicialmente confuso, un concepto emergente es que los efectos de las
colectinas dependen de varios factores, incluyendo la presencia y el tipo
de patgeno o estmulo, el estado de activacin de la clula, el tipo de
clula y el perodo de exposicin.
Estudios recientes realizados por Gardai y col. muestran que los efectos
de la SP-A y SP-D dependen del receptor celular al que se ligue, que a su
vez depende de si SP-A y SP-D estn interactuando con una clula
husped o con un patgeno.
Como es el caso para la produccin de citoquinas inflamatorias, SPA y SP-D se ha demostrado que tanto incrementan como inhiben la
produccin de metabolitos de oxgeno y xido de nitrico. Las respuestas
diferenciales son probablemente debidas a varios parmetros. Por
ejemplo, los efectos de SP-A opuestos sobre la produccin de metabolitos
de xido ntrico se han observado en clulas que han sido activadas por
interfern- (IFN-): SP-A inhibe la produccin de metabolitos de xido
ntrico LPS-mediada en los macrfagos alveolares en reposo aislados
de ratas libres de patgenos, pero aumenta la formacin de xido ntrico
LPS-mediada en macrfagos alveolares que han sido activados por el
tratamiento con IFN-. Adems, SP-A inhibe la produccin de metabolitos
de xido ntrico por las clulas que han sido pre-activadas con IFN- y
expuestas a M. pneumoniae. Por el contrario, SP-A aumenta la produccin
de metabolitos de xido ntrico (y TNF) en respuesta al Mycobacterium
bovis y al bacilo de Calmette-Gurin (BCG).
Las interacciones y los efectos de colectinas sobre las respuestas
celulares mediadas por virus han sido estudiados en detalle. Ambas
colectinas pulmonares, as como MBL, inhiben la hemaglutinacin y la

infectividad del virus influenza. Curiosamente, a diferencia de las

funciones de anti-influenza de la SP-A, que son independientes del calcio,
los efectos anti-influenza de SP-D son calcio-dependiente. Esto muestra
que los efectos de la SP-A y SP-D estn mediados por diferentes
mecanismos. Los efectos de la SP-D son inhibidos por los hidratos de
carbono y estn mediadas por el CRD de SP-D. SP-D aglutina e
incrementa la unin y la internalizacin de los virus de la influenza y en
consecuencia, aumenta la respuesta respiratoria en bloque al virus de
la influenza. SP-D, pero no SP-A, protege los neutrfilos de la capacidad
del virus de la gripe para suprimir la actividad funcional de los
neutrfilos.
En el contexto de las respuestas del husped del pulmn, la
capacidad de modular diferencialmente las respuestas inflamatorias
podra ser de beneficio para el husped. Por ejemplo, en el pulmn
normal en reposo, no inflamado, el aclaramiento de los patgenos por
opsonizacin sin invocar una respuesta inflamatoria robusta sera
ventajoso para el husped. Sin embargo, en una situacin en la que una
infeccin viral o bacteriana se ha disparado fuera de control, el
reclutamiento de todo el arsenal de mediadores inflamatorios en el asalto
contra el patgeno podra estar justificada. Otros estudios, tanto in vitro
como in vivo, se requerirn para establecer este modelo.

Aclaramiento mejorado de clulas apoptticas y el ADN

El aclaramiento de las clulas apoptticas es un paso importante en
la resolucin de la respuesta inflamatoria, as como en el desarrollo
normal durante la embriognesis. La apoptosis es el proceso de muerte
celular programada, en la que una serie de eventos culmina en la
reordenacin

de

los

componentes

de

la

membrana

plasmtica,

incluyendo la fosfatidilserina, que se dirige a la clula apopttica para el

aclaramiento fagoctico.
En el pulmn, un estmulo inflamatorio da lugar a a la liberacin de
mediadores quimiotcticos por los macrfagos y el reclutamiento de
neutrfilos, que migran a travs del barreras endotelial y las epitelial

10

hacia el espacio areo alveolar. Ms del 95% de las clulas obtenidas del
BAL de pulmones normales son los macrfagos alveolares. Despus de un
estmulo inflamatorio, el nmero de clulas totales recuperadas por BAL
aumentan hasta diez veces dentro de 6-12 horas, y aproximadamente el
85-90% de las clulas recin reclutadas son los neutrfilos. Estos
neutrfilos recin reclutadas tienen una posicin ideal y equipados con un
arsenal de mediadores intracelulares que pueden ser liberados en la
defensa contra los patgenos invasores. Los neutrfilos reclutados tienen
una vida til4 limitada, despus de lo cual sobreviene 5 la apoptosis y el
aclaramiento de fagocitosis. La apoptosis es un factor fundamental en la
resolucin de la inflamacin pulmonar, como la eliminacin fagoctica de
los neutrfilos apoptticos previene la liberacin de su contenido
citotxico, que podran daar la delicada superficie-intercambio pulmonar
de gases.
Estudios recientes han demostrado que tanto la SP-A y SP-D
mejoran la captacin de clulas apoptticas por los macrfagos
alveolares in vitro. Vandivier y col. mostraron que la SP-A, SP-D y C1q
incrementaba la captacin de clulas apoptticas por el ratn y el
aclaramiento de las clulas apoptticas humana alveolar macrfagos in
vitro, pero slo SP-D alteraba el aclaramiento de clulas apoptticas en el
pulmn de ratn naive. Adems, C1q, MBL y SP-D se unan a las clulas
apoptticas por un mecanismo al menos parcialmente dependiente
calreticulina y CD91.
Es importante destacar que, Clark y col. informaron que en ratones
con SP-D-null tienen de 5-10 veces niveles ms altos de macrfagos
apoptticos en sus espacios alveolares y que el tratamiento de estos
ratones con el fragmento de 60 kDa de SP-D humana recombinante
administrada traqueal tiene como resultado la reduccin de los niveles de
clulas apoptticas y corrige parcialmente la acumulacin de lpidos que
se ha documentado en estos ratones.
4

lifespan
ensue from: result, follow, develop, stem, spring, arise, derive, evolve, proceed,
emerge, emanate, issue, flow; occur, happen, take place, crop up, spring up, present
itself, come next, come about, originate in, accompany, come after
5

11

SP-A y SP-D, as como MBL, se unen al ADN de una variedad de

orgenes, incluyendo ratones y bacterias. La unin se produce a travs
tanto de CRD y de las regiones colgeno-like. SP-D se une y agrega de
manera efectiva el ADN de macrfagos alveolares y mejora la captacin
de ADN por las clulas monocticas humanas. La unin de las colectinas
al ADN de la superficie celular podra ser un mecanismo por el que
median la mayor fagocitosis de clulas apoptticas.
Una consecuencia de la captacin de cuerpos apoptticos por los
fagocitos es la induccin de una respuesta anti-inflamatoria por el
fagocito. Por ejemplo, la captacin de clulas apoptticas por macrfagos
resulta en la liberacin de mediadores antiinflamatorios, tales como el
factor de crecimiento transformante- (TGF-), IL-10 y la prostaglandina
E2. Esta respuesta est en contraste con la liberacin de citoquinas
proinflamatorias que se produce cuando los fagocitos ingieren un
microorganismo. Adems de mejorar la captacin de clulas apoptticas,
SP-A tambin aumenta la liberacin de TGF- por los macrfagos, lo que
indica que la SP-A puede promover la resolucin de la inflamacin en
varios niveles del proceso de aclaramiento de las clulas apoptticas.
el surfactante enlaza la inmunidad innata y adaptativa
Estudios recientes han apoyado el concepto de que el surfactante podra
tener un papel en la vinculacin de la inmunidad innata y adaptativa en
el pulmn por la modulacin de las funciones de clulas dendrticas (DC)
y las clulas T. Las DC, clulas presentadoras de antgenos ms potentes
en el cuerpo, se localizan en la interfase husped-medio ambiente, en
regiones como la piel y los pulmones. En el pulmn, las DCs se
encuentran en el epitelio de las vas respiratorias, el parnquima
pulmonar y el espacio areo alveolar. Aunque hay pocos DCs en los
alvolos del pulmn normal, no inflamado, el nmero de DCs alveolar
aumento en aproximadamente 60 veces en respuesta a estmulo
pulmonar con ovoalbmina o BCG. La funcin de DC vara con su estado
de maduracin. las DC inmaduras, tales como las que se encuentran en
sitios perifricos, son fagocitos activos y expresan distintos receptores de

12

quimioquinas. Despus de la maduracin, que puede ser inducida por

seales

de

"peligro"

(tales

como

LPS,

dao

tisular

citocinas

inflamatorias), las DCs migran al tejido linfoide. Los niveles de la

superficie celular de MHC de clase II y molculas co-estimuladoras son
aumentan, lo que contribuye a una mayor capacidad para presentar el
antgeno a las clulas T. Los estudios in vivo e in vitro muestran que las
DCs en el espacio alveolar y el intersticio pulmonar internalizan antgeno
inhalado y migran a los ganglios linfticos, donde pueden presentar
antgenos a las clulas T.
Estudios recientes han demostrado que la SP-A y SP-D tienen
diferentes efectos sobre las funciones de DC. Por ejemplo, SP-D mejora la
captacin y presentacin de un modelo de antgeno expresado por
Escherichia coli. SP-A, pero no SP-D, inhibe la maduracin de las DCs,
segn la evaluacin de la expresin de la superficie celular marcador, y la
actividad funcional, tal como la fagocitosis y la quimiotaxis.
Sobre la base de la observacin de que los linfocitos aislados por
BAL son hiporrepondedores en comparacin con los linfocitos circulantes
perifricos, Ansfield y col. propusieron y demostraron que el surfactante
y, en particular, los lpidos tensioactivos inhiben la funcin de los
linfocitos. Estudios posteriores de Borron y sus colegas mostraron que la
SP-A y SP-D inhiben la proliferacin de las clulas T que han sido
estimuladas con lectinas de plantas, anticuerpos CD3-especficos o
steres de forbol, por un proceso que se cree que est mediado por (al
menos, en parte) por la inhibicin de la produccin de IL-2. Adems, tanto
el regin colgeno-like y el CRD de SP-A se han implicado en la inhibicin
de la funcin de los linfocitos, probablemente debido a la inhibicin de la
sealizacin por calcio.
Aunque un papel directo para el SP-A y SP-D en la modulacin de
las funciones de DC y de clulas T se ha demostrado in vivo, los ratones
SP-D-nulos tienen un fenotipo interesante con respecto a sus linfocitos.
Fisher y col. informaron que los ratones SP-D-nulos acumulan linfocitos
peribronquiales y perivasculares en las vas respiratorias y los vasos, pero
no en el intersticio. Estos linfocitos se activan, como se ve por el

13

aumentos en la proporcin de clulas T CD4 + y CD8 + que expresan

CD25 y CD69.
Como seal Shepherd, estos estudios indican que la SP-D y SP-A
podra proporcionar un vnculo importante entre la inmunidad innata y
adaptativa, por la modulacin de las funciones de DC y de las clulas T
(Fig. 5). En tal situacin, SP-D en el espacio alveolar incrementara la
captacin de agentes patgenos por las CD inmaduras, que son
reclutadas

en

el

espacio

areo

alveolar

durante

la

infeccin

inflamacin. SP-A funcionara para inhibir la maduracin de DC, y ambas

SP-A y SP-D suprimiran la activacin de las clulas T en el espacio
alveolar, que si ocurriera, podra dar lugar a una cascada inflamatoria
que podra daar los pulmones y afectar el intercambio gaseoso. Se
requieren estudios adicionales para dilucidar el papel del surfactante en
la regulacin de la respuesta inmune adaptativa en vivo.
Actividad microbicida directa
Recientes estudios han demostrado que la SP-A y SP-D tienen efectos
bactericidas directos, adems de mejorar la captacin de bacterias por
los fagocitos. Wu y colaboradores mostraron que la incubacin de
bacterias con SP-A o SP-D aumento de la tincin nuclear con yoduro de
propidio (lo que indica que las bacterias haban muerto), aumento de la
permeabilidad al antibitico actinomicina D y aumente de la liberacin de
protenas a partir de la bacterias (Fig. 3). Aunque las colectinas agregan
las bacterias, los efectos antibacterianos parecen ser independientes de
la agregacin. Estos investigadores tambin demostraron que la SP-A
destruccin bacteriana una, agregaba e induca la muerte bacteriana de
una cepa LPS-mutante de Bordetella pertussis, mientras que SP-A no tuvo
efecto en la cepa de tipo salvaje. Llegaron a la conclusin que de tipo
salvaje LPS protege a las bacterias de los efectos bactericida de SP-A y
contribuye a la capacidad de B. pertussis para evitar las defensas
inmunitarias en el pulmn.
Ambos SP-A y SP-D tambin tienen efectos antimicrobianos directos
sobre los hongos. Por ejemplo, SP-A y SP-D inhibieron el crecimiento y la

14

viabilidad de Histoplasma capsulatum, un hongo patgeno intracelular

facultativo. SP-D inhibe el crecimiento de hifas de Candida albicans, otro
hongo oportunista.
El mecanismo por el que la SP-A y SP-D ejercen estos efectos
antimicrobianos no se conoce.
SP-A como un mediador del parto
Quizs

uno

de

los

descubrimientos

recientes

ms

intrigantes

sorprendentes en el campo de la biologa colectina fue el informe de

Condon y colegas que la SP-A seala el inicio del parto (Fig. 6). Durante el
ltimo tercio de la gestacin, se incrementan la produccin de
surfactante y los niveles de surfactante en el lquido amnitico. Condon y
colaboradores mostraron que la SP-A es detectable en el lquido
amnitico del ratn a los 17 das post-coito (dpc) y que los niveles de SPA aumentar notablemente hasta el da 19 dpc. El aumento de la SP-A
est asociada con un aumento en los niveles de mRNA de IL-1 y el
nmero de macrfagos de lquido amnitico. La inyeccin de SP-A en el
tero incrementaba la migracin de macrfagos, activacin de NF-kB e
iniciacin de parto prematuro. Es importante destacar que, la inyeccin
de un anticuerpo SP-A- especfico o un inhibidor de NF-kappa B retrasa el
trabajo aproximadamente 24 horas. Estos estudios son consistentes con
la hiptesis de que tanto el trabajo pre-trmino y a trmino estn
asociados con una respuesta inflamatoria, e indican que la secrecin
tarda de SP-A en el lquido amnitico en la gestacin induce la migracin
de clulas inflamatorias en el tero y la activacin de estas clulas. Esto
activa NF-kappa B, lo que resulta en un aumento de la contractilidad
uterina y el parto. A la luz del reciente estudio de Gardai et al., parecera
razonable especular que, en esta situacin, la SP-A sealiza a travs del
receptor inflamatorio CD91-calreticulina o a travs de un receptor Tolllike, TLR2 o TLR4. Se requerirn ms estudios para abordar esta
posibilidad.
De posible relevancia son las conclusiones que la SP-A se expresa
en el tejido vaginal y se puede detectar en el lavado vaginal. SP-D

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tambin se ha detectado en el tracto genital de la mujer, la placenta y el

lquido amnitico. SP-D fue detectable en las clulas epiteliales y
glndulas secretoras en la vagina, el cuello uterino, el tero, las trompas
de Falopio y los ovarios. Curiosamente, los niveles de SP-D variaron con la
etapa del ciclo menstrual.
Estos estudios plantean la interesante posibilidad de que SP-A y / o SP-D
podra tener un papel en la regulacin de la respuesta inflamatoria que
inicia el parto uterino. Sea o no SP-A y / o SP-D son importantes en la
prevencin de las infecciones uterinas queda por demostrar.
Biologa in vivo de las colectinas
SP-A y SP-D ratones nulos.
Varios estudios de SP-A y los ratones SP-D-nulos han proporcionado
pruebas de que las colectinas funcionan in vivo para modular la
respuesta inmune, al menos en ratones. Ratones SP-A-null tienen
esencialmente la funcin pulmonar normal, a menos que se expusieron a
un patgeno o un estmulo. Por el contrario, los ratones SP-D-nulos tienen
un fenotipo complejo y muestran una acumulacin progresiva de los
lpidos en sus espacios areos despus del nacimiento. Tambin tienen
macrfagos alveolares espumosos y un fenotipo enfisematosa, que ha
sido atribuido al aumento de los niveles de metaloproteinasas tisulares y
en macrfagos. Por lo tanto, la evaluacin de una funcin directa de la
SP-D en las respuestas de acogida se complica por las otras alteraciones
que se producen en estos ratones.
Una reciente revisin resume las observaciones realizadas con SP-A
y SP-D ratones nulos. En general, estos ratones tienen una mayor
susceptibilidad a una variedad de infecciones bacterianas y virales en
comparacin con los ratones de tipo salvaje. Un defecto de opsonizacin
debido a la falta de SP-A es responsable para algunos de este aumento
de la susceptibilidad, ya que la captacin de muchos patgenos por los
macrfagos alveolares se suprime en ratones SP-A-nulos y administracin
traqueal de SP-A restaura la captacin. En general, los ratones infectados
SP-A-null tenan niveles ms elevados de mediadores inflamatorios en el

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BAL que los ratones de tipo salvaje. Adems, los ratones, SP-A-null de que
fueron estimulados con LPS intratraqueales tenan mayores niveles de
TNF y metabolitos de xido ntrico que los ratones de tipo salvaje, y el
tratamiento con exgenos SP-A restaur los niveles de estos mediadores
a niveles cercanos de tipo salvaje.
A pesar de, o quizs en parte debido a, su fenotipo complejo, los
ratones SP-D-nulos tambin tienen alteradas las respuestas al estmulo
patgeno, pero en formas que difieren de los ratones SP-A-nulo. Por
ejemplo, a diferencia de los ratones SP-A-null, los ratones SP-D-null
eliminan H. influenzae y Streptococcus del grupo B tan eficientemente
como los ratones de tipo salvaje. Por el contrario, los ratones SP-D-nulos
son ms susceptibles a la infeccin por el VRS y el virus de la influenza.
La administracin exgena de SP-D normaliz el acaramiento viral y la
respuesta de citoquinas.
En resumen, los ratones la SP-A y SP-D nulos tienen alteradas las
respuestas a los agentes patgenos que son, en algunos casos,
patgenos y colectina-especficos. Aunque por lo menos parte de su
respuesta defectuosa resulta probablemente de fagocitosis defectuosa de
patgenos por macrfagos y/o neutrfilos, las respuestas celulares
especficas tambin se alteran en estos ratones. Estos estudios plantean
la intrigante posibilidad de que la terapia con SP-A, SP-D o ambos podra
ser eficaz en el tratamiento de enfermedades pulmonares infecciosas o
inflamatorias.
Polimorfismos humanos.
La posibilidad de que las deficiencias en las colectinas pueden ser
una causa de enfermedad en seres humanos se sugiri por primera vez
por la observacin de que los nios con bajos niveles de MBL tenan un
sndrome de infecciones recurrentes y una deficiente opsonizacin en
suero (generacin de C3b) que poda corregirse mediante la adicin de
MBL6. Estudios posteriores identificaron tres mutaciones puntuales en la
6

Super, M., Thiel, S., Lu, J., Levinsky, R. J. Turner, M. W. Association of low
levels of mannan-binding protein with a common defect of opsonisation.
Lancet 1989;2:12361239.
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regin que codifica la regin colgeno-like de MBL que result en mal

plegamiento de la protena recin sintetizada, lo que traduca una
reduccin de los niveles de secrecin y suero7.
tambien se demsotr en adultos8
Un vnculo claro entre las mutaciones de colectinas pulmonares y
enfermedades an no ha sido establecida, aunque estudios recientes han
relacionado las variaciones allicas y enfermedad pulmonar.
Por ejemplo, Floros y sus colegas identificaron asociaciones de
alelos SP-A con una variedad de enfermedades pulmonares, incluyendo
tuberculosis, sndrome de distrs respiratorio, EPOC y la susceptibilidad a
VRS. Una de las variantes allicas de SP-D, en las que se intercambia una
metionina por una treonina en la posicin 11, podran estar vinculados a
una mayor susceptibilidad a la tuberculosis. En un estudio separado, se
observ que el alelo SP-D que codifica metionina en la posicin 11 ocurra
con mayor frecuencia en nios con infecciones graves por VRS. Aunque
los mecanismos por los cuales estas variaciones allicas pueden alterar
la funcin de los niveles de protena o no se conoce, los estudios in vitro
han demostrado que existen diferencias funcionales y bioqumicas entre
las variantes de SP-A.
Varios estudios han demostrado que los niveles de SP-A y SP-D se
alteran en el lavado y el suero de pacientes con diversas enfermedades y
afecciones pulmonares, incluyendo SDRA en adultos e infantil, el
tabaquismo, asma y neumona. Ya sea que estas alteraciones son causas
o consecuencias de la enfermedad, o ambos, queda por esclarecer.
observaciones finales
Por ms de 70 aos, de surfactante se percibi como una sustancia
similar al jabn que reduce la tensin superficial en el pulmn y hace ms
7

Lipscombe, R. J. Sumiya M, Hill AV, Lau YL, Levinsky RJ, Summerfield JA,
Turner MW. High frequencies in African and non-African populations of
independent mutations in the mannose binding protein gene. Hum. Mol.
Genet. 1992;1:709715.
8
Kakkanaiah VN, Shen GQ, Ojo-Amaize EM, Peter JB. Association of Low
Concentrations of Serum Mannose-Binding Protein with Recurrent
Infections in Adults. Clin Diagn Lab Immunol. 1998;5: 319321.

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fcil la respiracin. Con el advenimiento de las tcnicas moleculares, se

descubri que una de las protenas de agentes tensioactivos, SP-A, era
estructuralmente homloga a una protena inmune de la cascada del
complemento, C1q. Desde entonces, toda una familia de protenas,
conocidas como colectinas, ha sido identificadas, y el papel del sistema
inmune innato ha ganado cada vez ms atencin. Estudios in vivo e in
vitro respaldan de forma convincente 9las protenas de surfactante SP-A y
SP-D como mediadores de diversas funciones de las clulas inmunes.
Estudios ms recientes han mostrado nuevas funciones de estas
protenas en la remocin de clulas apoptticas, muerte directa de los
microorganismos y el inicio del parto. Aunque las terapias de reemplazo
de surfactante que contienen las protenas hidrofbicas SP-B y SP-C han
tenido xito en la reduccin de la mortalidad debido a las deficiencias de
tensioactivos que tienen lugar secundario al nacimiento prematuro, la
posibilidad de que las colectinas podra ser un tratamiento efectivo para
el tratamiento de la enfermedad pulmonar inflamatoria o infecciosa no ha
sido investigado en pacientes.
Los estudios descritos en esta revisin apoyan la intrigante posibilidad de
que la terapia con colectinas puede ser eficaz para el tratamiento de
enfermedades inflamatorias e infecciosas en los pulmones, as como en
otros rganos.

provide compelling support

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