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GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS

2015

SESION PRACTICA N 1
TEMA:

ESTUDIO DE PROTOZOARIOS DE VIDA


LIBRE (NO PARSITOS)
INTRODUCCION

La palabra "Protozoo" significa etimolgicamente "primeros animales" o


"animales primitivos". Constituyen un grupo heterogneo formado por
aproximadamente 50000 organismos unicelulares que poseen organelos celulares
tpicos (eucariticos) rodeados por una membrana. Puesto que casi todos son
mviles y muchos de ellos son heterotrficos, hasta hace algn tiempo se
consideraba que este grupo era slo un Phylum dentro del Reino Animalia: el
Phylum Protozoa. En la actualidad se sabe que el grupo est formado por varios
phyla unicelulares diferentes, los cuales, junto con la mayor parte de los phyla de
algas, pertenecen al Reino Protista.
Los Protozoarios como organismos han evolucionado a nivel celular,
alcanzando diferenciacin protoplasmtica y por lo tanto su complejidad se
manifiesta en el nmero y naturaleza de organitos y organelos.
Forman un grupo de organismos microscpicos unicelulares, con una gran
diversidad en complejidad, tamao y comportamiento. Siendo el cuerpo de los
Protozoarios formado por una sola clula, manifiesta todas las caractersticas
inherentes a la materia viviente y por lo tanto realiza las funciones propias de un
animal superior.
El nivel de organizacin unicelular es la nica caracterstica descriptiva
unificadora de los protozoarios, pues en todos los dems aspectos exhiben una
diversidad extrema. Adems, entre stos se observan todos los tipos de simetra,
una amplia gama de grados de complejidad estructural, y adaptaciones para la vida
en todo tipo de ambientes. Como organismos, los protozoarios se han conservado
en el nivel unicelular, aunque han evolucionado a lo largo de muchas lneas por
especializacin de partes del protoplasma (organelos) o de la estructura esqueltica.
Existen protozoarios donde quiera que haya humedad: en el mar, en todo tipo
de aguas dulces y en el suelo; hay especies comensales, mutualistas y muchas
parsitas.
La locomocin la realizan mediante flagelos, cilios y seudpodos. Su nutricin
puede ser holozoica, holoftica y saprozoica. Se reproducen sexual y asexualmente.
Unos son solitarios y otros coloniales.
Aunque casi todos viven como individuos solitarios, existen muchas formas
coloniales. Algunas de stas, como las especies de Volvox, tienen tal grado de
interdependencia celular que se aproximan a un verdadero nivel estructural
pluricelular. Las especies coloniales o solitarias pueden ser mviles o ssiles.

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En el estudio de los Protozoarios se utilizan determinadas tcnicas


microscpicas, estas son: exmenes en fresco, que nos permiten observar la forma,
locomocin y otras actitudes y reacciones; con colorantes vitales que permiten
ampliar las observaciones hacia algunos procesos intracelulares, as como permiten
la observacin del movimiento ciliar y flagelar; por ltimo las tcnicas de fijacin y
montaje temporal y permanente, en las que se utilizan diversas tcnicas de
coloracin que posibilitan el conocimiento de toda la organizacin celular de los
Protozoarios, haciendo resaltar aquellos caracteres que nos interesan.
Para las tcnicas en las que se utilizan colorantes existen toda una gama de ellos,
de esta manera su empleo permite teir diversas estructuras, tales como: ncleo,
cilios, flagelos, mitocondrias y otras estructuras citoplasmticas.

COLECTA Y CONSERVACION
La colecta de protozoarios en general ofrece pocas dificultades, ya que habitan
en casi cualquier tipo de agua; pero la bsqueda de un determinado grupo o especie
es difcil y depende del conocimiento de su hbitat y hbitos. Son mltiples los
factores que pueden determinar que en cierto lugar habite una determinada
poblacin de protozoarios.
Los Rizpodos estn tipificados por la presencia de seudpodos. Estos son
extensiones no permanentes del cuerpo que funcionan como rganos de
locomocin y alimentacin. La forma de los seudpodos varia considerablemente:
pueden ser salientes redondeados (lobopodios), como en la conocida Amoeba o
estructuras filamentosas largas y finas (filopodios), y en ciertas especies, los
seudpodos poseen tbulos axiales (axopodios). La diversidad de los Protozoos
Rizpodos en las subdivisiones que presenta el grupo. Amoebinos comprende
organismos desnudos, normalmente con lobopodios; los Testceos y los
Foraminferos poseen una concha externa consistente, o testa, y seudpodos de
tipo Rizpodo o filopodios; los Heliozoos carecen de testa externa, pero sus
seudpodos presentan ejes rgidos (axopodios); y los Radiolarios tienen una
cpsula silcea interna que proporciona soporte esqueltico al cuerpo, a la vez que
exhiben numerosos seudopodios filamentosos.
La testa puede ser una estructura dbil formada por la adherencia de
partculas orgnicas o inorgnicas en la superficie del organismo, como ocurre en
muchos Testceos, o bien puede consistir en una slida concha constituida por
material orgnico o inorgnico que impone al organismo una forma rgida. Las testas
calcreas de algunos Foraminferos y las conchas silceas de muchos Radiolarios
presentan una enorme complejidad arquitectnica y son de gran belleza.
Los Mastigforos comprenden aquellos Protozoos comnmente denominados
"Flagelados". Todos ellos poseen uno o ms flagelos, que utilizan principalmente
para la locomocin, aunque tambin contribuyen en la alimentacin. El Grupo se
subdivide en dos: Fitomastiginos y los Zoomastiginos. Los primeros se caracterizan
por la presencia de un pigmento fotosinttico, la clorofila, y normalmente poseen
uno o dos flagelos. En cambio, los Zoomastiginos no tienen clorofila, dependiendo
del medio externo para obtener partculas alimenticias. Adems los Zoomastiginos

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pueden poseer muchos flagelos, algunos de los cuales forman rganos ms


complejos. Entre los fitomastiginos ms conocidos figuran Euglena y
Chlamydomonas, solitarios; el colonial Volvox y los dinoflagelados Ceratium y
Noctiluca. Los organismos patgenos del gnero Trypanosoma, de gran importancia
mdica pertenecen a los Zoomastiginos.
Los Protozoos flagelados se encuentran en todos los tipos de hbitat, ya sea
en el mar, en las aguas dulces o en el suelo. Pueden ser de vidas libres, solitarias o
coloniales, y tambin parsitos.
Los Esporozoos son exclusivamente endozoicos, es decir, todos ellos viven en
la cavidad corporal o en los tejidos de un animal hospedador. Los miembros del
grupo tienen ciclos vitales complejos, y reciben su nombre del proceso de formacin
de esporas (esporogonia) que forma parte del ciclo vital. En la mayora de los
Esporozoos dicho ciclo incluye un estado intracelular, con muchas especies de
importancia mdica.
Los Ciliados, como indica su nombre, se caracterizan por la presencia de cilios
en la superficie corporal. Esta condicin es patente en los conocidos Paramecium y
Tetrahymena, cuyo cuerpo est cubierto por "una capa de finos cabellos". La forma
corporal es muy variable, as como la disposicin de los cilios, que pueden aparecer
modificados como orgnulos complejos. Como ocurre con los Flagelados, los
Ciliados son muy comunes y se encuentran en todo tipo de hbitats. Muchos son de
vida libre, pero hay formas unidas al substrato por un pednculo y formas parsitas.
Ciliados, flagelados y rizpodos se pueden encontrar en cualquier muestra de
agua, aunque algunos grupos se desarrollan en condiciones particulares. As, por
ejemplo, en la superficie de los estanques y de los lagos o de los arroyos de aguas
tranquilas, y a profundidades que pueden variar desde la superficie hasta 30 cm,
existen la mayor parte de los flagelados con clorofila, tales como, Euglena. Este
gnero habita en aguas dulces, donde la vegetacin flotante y las superficies
espumosas casi siempre delatan su presencia. En estos sitios, la colecta se hace
desplazando por la superficie del agua un frasco de boca ancha. Se recomienda
usar redes de plancton de 200 millas por pulgada cuadrada para colectar Euglenas,
tomando muestras entre 25 a 60 cm de profundidad, adems de las muestras
superficiales y del fondo.
Muchas especies de rizpodos, entre ellas las amibas o gneros como Arcella,
Pelomyxa y Difflugia se encuentran en las aguas estancadas obscuras o
sombreadas. Se desplazan sobre los fondos lodosos cubiertos de vegetacin
muerta o de materia orgnica en descomposicin. El material colectado debe
ponerse en frascos limpios y llevarse al laboratorio.
Los Protozoarios marinos abundan tambin en gran cantidad y casi todos
comprenden especies cuya distribucin es muy amplia. Se pueden encontrar a
cualquier profundidad. Para colectar muestras representativas, se necesita usar
redes finas o redes de plancton. Los Rizpodos del grupo de los Foraminferos y
Radiolarios abundan en casi todos los mares y sus caparazones llegan a
acumularse por millones en el fondo de algunas reas marinas.

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Se puede obtener Foraminferos vivos en las coralinas y otras algas marinas,


tanto extrayndolos con ayuda de una lente como utilizando un filtro grueso unido a
una malla de seda. El filtro debe sumergirse en agua de mar y sobre l se colocan
algunos puados de algas, etc. La malla de seda atrapar los organismos que
atraviesen el filtro. Se puede poner tambin fango o arena fina del fondo del mar en
recipientes con agua de mar y agitar. Los Foraminferos se hundirn hacia el fondo,
y las partculas ms ligeras se arrastran con el agua.
Los caparazones de Foraminferos se pueden colectar fcilmente con la arena
fina depositada por la espuma de las olas que desaparecen suavemente sobre las
playas extensas. Esta arenilla, despus de secada, se observa en el laboratorio bajo
un microscopio de diseccin. Los pequeos caparazones se aslan con el pincel fino
o con agujas de diseccin, y se pegan sobre preparaciones o sobre cartones negros
diseados especialmente para eso.
Grandes reas de fondo ocenico son ricas en conchas calcreas de
Foraminferos muertos. El "barro" de Globigerina, que cubre aproximadamente
ciento treinta millones de kilmetros cuadrados del suelo del ocano, est formado
casi por completo de estas conchas. Se pueden secar y filtrar dragados procedentes
de estas reas, colocando los filtrados ms finos en recipientes con agua que se
procede a agitar. Las conchas ms delicadas flotarn, pudiendo ser recogidas,
mientras que las ms pesadas se hunden y pueden secarse tras extraer el agua.
Muchas especies de Radiolarios viven en, o cerca de, la superficie del mar,
donde a veces son muy numerosas. Pueden recogerse mediante una red de
arrastre o en un simple frasco de agua marina. Las conchas silceas de los
Radiolarios muertos caen al fondo y forman el "barro de los Radiolarios", que cubre
un rea de ms de cinco millones de kilmetros cuadrados. Este depsito se
encuentra tpicamente en aguas muy profundas de las regiones tropicales de los
Ocanos Indico y Pacfico. Se pueden recoger de igual forma que los Foraminferos,
por dragado, y secarse de forma similar.
Las muestras de protozoarios marinos se pueden fijar mezclndolas con
alcohol isoproplico de 95%. Este alcohol se puede agregar al agua que contengan
los protozoarios, siempre que su volumen sea reducido o los protozoarios se hayan
concentrado dentro de un rea pequea. Al fijar muestras con Foraminferos o
Radiolarios, se puede agregar un poco de rosa de bengala (un gramo de colorante
seco por un litro de agua destilada), para colorear los protoplasmas de los
protozoarios vivos.
Entre los talos de las aguas marinas se encuentran algunos protozoarios que
habitan estos sitios. Colecte las algas y lvelas en un frasco con agua del medio.
Las redes y los tamices de mallas finas pueden utilizarse para concentrar los
protozoarios en limitados volmenes de agua. Tambin se pueden matar y
concentrar, agregando gota a gota a las muestras de protozoarios una cantidad
pequea de formol neutro al 3%, hasta que mueran los protozoarios y se depositen
en el fondo. En seguida, el agua se decanta dejando slo una pequea cantidad del
fondo junto con el material sedimentado. Este puede fijarse y dejarse en alcohol de
70%.

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Algunas especies de protozoarios parsitos se pueden colectar con facilidad


en los rganos internos de sus huspedes. La cavidad oral y braquial de los
vertebrados puede albergar Amibas. El tubo digestivo de casi todos los vertebrados
y de muchos invertebrados es rico en protozoarios. En la cloaca de las ranas es
frecuente encontrar varias especies. La sangre de los vertebrados terrestres
tambin puede presentar protozoarios del grupo de los Esporozoarios
(Gregarnidos, Coccidios y Hemosporidios).
En las "termitas" hay Fitomastiginos simbiontes que les ayudan a transformar
la celulosa de la que se alimentan. Ms de un 50% de algunas "cucarachas" como,
por ejemplo, Blatta orientalis, Blatella germanica y Periplaneta americana, tienen en
su intestino protozoarios del gnero Gregarina. Muchas especies de Amibas ocupan
sitios semejantes. Las vesculas seminales de la "lombriz de tierra" presentan, casi
invariablemente, protozoarios del gnero Monocystis.
En cualquiera de los casos citados, los protozoarios se pueden observar vivos,
ponindolos en soluciones isotnicas, o bien, pueden hacerse frotis, teidos con
colorantes vitales como rojo neutro o azul de metileno en soluciones diluidas (por
ejemplo al 1/1000). Los frotis de sangre pueden teirse con Giemsa para poder
observar los parsitos.
En general para su conservacin, los especmenes vivos deben colocarse
primero en alcohol al 70 - 90 %. Tambin pueden ponerse directamente en una
solucin de formol neutro al 3 - 5 %. Si se est recolectando especmenes para un
posterior examen citolgico, debe consultarse literatura especializada en tcnicas de
fijacin.

FIJACION
Entre los fijadores ms recomendables estn los de Schaudin, Goldschmidt,
Boui y Guilson. El material fijado en estos lquidos se puede usar para elaborar
preparaciones fijas. Los flagelados, como Euglena, se pueden fijar con el lquido de
Noland, que produce la muerte instantnea del protozoario y permite la observacin
clara del flagelo.
Para fijar y montar temporalmente algunos protozoarios, agregue una gota de
una solucin de verde de metilo en cido actico al 1% a una gota de cultivo de
protozoarios. Este colorante fija y tie de verde los ncleos.
Los ciliados o flagelados cultivados tambin se pueden observar en montajes
temporales siguiendo el mtodo de Noland:
Solucin de Noland:
- Solucin saturada de fenol en
agua destilada............................... 80 cc.
- Formol al 40% (comercial)............ 20 cc.
- Glicerol.......................................... 4 cc.
- Violeta de genciana...................... 20 mg.

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Se debe mezclar al colorante con un poco de agua, antes de agregar los otros
ingredientes. No debe quedar fenol en suspensin.
Agregue a una gota del cultivo de protozoarios, una gota de la mezcla. Los
cilios y flagelos se tien claramente. Este es un mtodo til para el estudio de
ciliados que poseen cirros.

DIVISION SISTEMATICA***
Reino Protista
Subreino Protozoos
Filo Sarcomastigforos
Subfilo Mastigforos
Clase Fitomastigforos
Clase Zoomastigforos
Subfilo Opalinados
Subfilo Sarcodinos
Superclase Rizpodos
Clase Lobosos
Clase Eumicetozoos
Clase Filosos
Clase Granulorreticulosos
Superclase Actinpodos
Clase Acantarios
Clase Policistineos
Clase Feodarios
Clase Heliozoos
Filo Labirintomorfos
Filo Apicomplejos
Clase Perkinsidos
Clase Esporozoos
Filo Mixozoos
Filo Microsporidios
Filo Ascetosporos
Filo Ciliforos
*** HICKMAN; ROBERTS; LARSON. Principios Integrales de Zoologa.

OBJETIVOS
1. Reconocer e identificar los protozoarios de vida libre ms
comunes de nuestra regin.
2. Identificar las principales estructuras y caractersticas de los
diversos grupos taxonmicos de protozoarios de vida libre
observados.

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MATERIAL
MATERIAL DE LABORATORIO:

COLORANTES VITALES:

- Microscopio
- Lmina porta-objetos
- Laminillas cubre-objetos
- Lminas escavadas
- Vaselina
- Algodn
- Glicerina
- Palillos de madera

- Pardo de Bismark
- Rojo Congo
- Verde Jano
- Verde de metilo
- Azul de metileno
- Lugol
- Rojo neutro

MATERIAL BIOLOGICO:
- Muestras diversas de aguas con protozoarios.
- Cultivos de protozoarios.
- Lminas con preparaciones permanentes coloreadas y sin colorear de protozoarios
de vida libre.

METODOLOGIA
I. OBSERVACION DE PROTOZOARIOS DE VIDA LIBRE
Con el material necesario y las muestras de agua con protozoos proceder segn las
tcnicas de observacin siguientes:
1. TECNICAS DE OBSERVACION:
1. 1.EXAMEN DIRECTO:
Este examen permite la observacin de los protozoos vivos, su morfologa,
locomocin, reacciones, etc., durante la observacin se requiere de enfocar
adecuadamente y diafragmar convenientemente.
Con una lmina portaobjetos y una laminilla cubreobjetos proceda a preparar
y montar una muestra de agua estancada o una gota de cultivo. Observar al
microscopio con mayor y menor aumento.
Si al observar la muestra se nota demasiada movilidad en los especmenes,
agregue a la preparacin unas fibras de algodn (puede tambin utilizarse gelatina,
goma arbiga, glicerina, etc.) para que de esta manera se pueda realizar una mejor
observacin.
Si la muestra es muy pobre, y contiene pocos individuos, se puede concentrar los
protozoos, para el caso se utiliza la filtracin rpida e incompleta a travs de un
pao (tela o papel filtro) el residuo de la filtracin debe ser vaciado rpidamente en
un recipiente adecuado, antes de que se complete la filtracin; puede tambin
utilizarse la centrifugacin a bajas velocidades.

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1.2. OBSERVACION EN CAMARA HUMEDA:


A fin de que la pequea gota de lquido que se examina no se concentre o
deseque durante la observacin, no se recurre al sencillo sistema de poner la gota
entre porta y cubre-objeto, sino que se la encierra en un pequeo recinto situado
entre ellos, que permite, adems, entretener la vida de los protozoos durante algn
tiempo. Esto se consigue de tres modos diferentes:
1.2.1. Cmara de Gota Pendiente:
Para esta tcnica se requiere de un porta-objetos especial, en cuya parte
central tiene una excavacin o concavidad de poca profundidad (porta-objetos
excavado o lmina excavada).
En la laminilla cubre-objetos bien limpio proceda a colocar en cada ngulo un
punto de vaselina, esta puede ser colocada con la ayuda de un palillo de
madera (mondadientes o fsforo); en la parte central de la laminilla coloque
una gota de las muestras de agua a observar, luego adhiera la lmina portaobjetos a la laminilla de manera tal que la excavacin coincida con la gota del
medio de cultivo; realizado esto invierta y observe al microscopio con menor y
mayor aumento. De ser conveniente se puede sellar los bordes con vaselina.
1.2.2. Cmara Hmeda de Ranvier:
Con la tcnica de la gota pendiente, el espesor de la capa lquida que se
examina no es uniforme; esto hace que la observacin a grandes aumentos
venga perturbada por los fenmenos de reflexin y refraccin de los rayos
luminosos al atravesar la parte inferior de la gota. Para obviar este
inconveniente y conseguir una capa lquida de igual espesor, con sus
superficies lmites paralelas, se recurre a otros mtodos, entre los cuales el
ms utilizado es el de Ranvier.
La cmara de Ranvier consiste en un porta-objetos, de bastante grosor, que
tiene excavado en su parte central un canal circular, rodeando una plataforma
de unos 15 o 20 mm de dimetro y cuya superficie queda 0.1 mm ms baja
que el resto del porta.
Depositando la gota que se quiere examinar sobre esta plataforma y tapando
con un cubre-objeto, ste la extiende en una capa uniforme entre dos caras
paralelas cayendo al canal circundante el exceso de lquido que hubiese, y
quedando as una capa lquida de igual espesor entre cubre y la plataforma, y
una pequea cantidad de aire encerrada en el canal, suficiente para mantener
algn tiempo la vida de los protozoos, aunque no lo bastante para que la
preparacin se seque.
1.2.3. Cmara Hmeda de Tieghem:
Para esta tcnica se utiliza una lmina porta-objeto corriente en la que se
forma una celda usando un anillo de vidrio que se adhiere mediante el uso de
vaselina, lanolina, blsamo, etc.
Se coloca unas gotas de agua en el fondo para conservar la humedad, se unta
el borde superior del anillo con vaselina slida; se pone la gota de la muestra
en el cubre-objeto, se coloca el porta sobre el cubre, se invierte rpidamente,
debe hacerse ligera presin para que se obtenga una buena adherencia y la
cmara quede completamente sellada.

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1.3. OBSERVACION CON COLORANTES VITALES:


Procedimiento intermedio entre el examen en fresco y las tcnicas de
coloracin despus de la fijacin.
El uso de colorantes vitales tiene por objeto teir algunos elementos celulares de los
protozoos, de manera que las hagan fcilmente visibles, sin causar modificaciones
intensas que puedan alterarlos o matarlos.
Los colorantes vitales son de naturaleza cida o bsica, en soluciones muy diluidas
son poco txicos. Entre los colorantes vitales ms usados tenemos a los siguientes:
- Rojo neutro.
- Azul pirrol.
- Azul de metileno.
- Verde Jano.
- Tinta china.
- Azul de tripan.
- Rojo Congo.
- Amarillo anilina
- Pardo de Bismark.
- Verde de metilo.
- Carmn latinado.
- Cristal violeta.
Se puede utilizar dos metodologas en la presente preparacin: mtodo de dilucin o
el mtodo del secado.
En el de dilucin la preparacin se realiza de la siguiente manera: en una lmina
porta-objetos colocar una gota del medio a observar, luego directamente agregar
una gota del colorante vital (el colorante debe estar en la dilucin correcta para
evitar matar a los protozoos), colocar una laminilla cubre-objetos y observar con
menor y mayor aumento.
En el mtodo del secado la preparacin se realiza de la siguiente manera: en una
lmina porta-objetos colocar una gota del colorante vital, expandir la gota y dejar
secar, luego de esto agregar sobre el secado una gota de la muestra a observar,
colocar una laminilla cubre-objetos y observar al microscopio con menor y mayor
aumento.
En ambos casos el colorante debe estar en la dilucin correcta para evitar matar a
los protozoarios.
Al agregar los colorantes vitales en solucin, en primer lugar verifique la difusin del
colorante para luego observar la reaccin del protozoo frente al colorante y la accin
del colorante sobre las diversas estructuras internas y externas del protozoo.
Explique las reacciones, describa la coloracin de las estructuras correspondientes
y verifique la funcin de los colorantes.
1.4. OBSERVACION EN COLORACIONES SUPRAVITALES:
Las coloraciones supra vitales son aquellas que se realizan sobre el material
simplemente desecado y no fijado, esta tcnica es frecuente en el examen de
protozoos y en los frotis de sangre.
Los colorantes ms usados para el caso son: el azul de metileno al 1/500 y el azul
de toluidina fenicado.
Azul de toluidina fenicado:
- Azul de toluidina...............................0.5 g
- Acido fnico......................................3.0 g
- Alcohol etlico de 95......................10.0 cc
- Agua destilada................................90.0 cc

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Las preparaciones as obtenidas son muy interesantes, pues en ellas los protozoos
simplemente secos no han sufrido alteracin por los reactivos fijadores y los
caracteres morfolgicos se han conservado muy bien.
1.5. PREPARACIONES TEMPORALES:
Para el caso se utiliza el lquido de Noland y el verde de metilo en solucin al
1% en cido actico (solucin de verde de metilo en cido actico al 1%).
La preparacin se realiza de la siguiente manera: en una lmina pota-objetos
coloque una gota de la muestra y agregue una gota del lquido de Noland o una gota
de solucin de verde de metilo; cubra con una laminilla cubre-objeto y realice la
observacin con menor y mayor aumento.
Lquido de Noland:
- Solucin saturada de fenol en
agua destilada................................... 80.0 cc
- Formol al 40%.................................... 20.0 cc
- Glicerol............................................... 4.0 cc
- Violeta de Genciana............................ 20.0 mg

1.6. PREPARACIONES PERMANENTES:


Para el caso se requiere que el material de la muestra sea previamente fijado,
la fijacin puede ser realizada sobre la muestra contenida en un porta-objeto, o en
un pequeo volumen de la muestra. Luego de la fijacin se procede a la coloracin.
1.6.1. Fijadores:
- Fijadores Fsicos: calor, frio.
- Fijadores Qumicos: simples, compuestos.
1.6.2. Coloraciones:
- Hematoxilina - Eritrocina - Orange G.
- Hematoxilina Frrica de Heidenhain.
- Impregnacin Argntica.
- Shorr.
- Giemsa.
- Leisshmann
- Hemalumbre de Mayer.
- Hematoxilina - Mtodo A.
Para mayores detalles consultar la bibliografa especializada.
2. OBSERVACION DE FLAGELADOS:
Realizando las preparaciones que considere necesarias, proceda a observar y
reconocer los protozoarios flagelados ms comunes, identificar los organelos
constituyentes, graficar sus observaciones y ubicarlos sistemticamente.

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3. OBSERVACION DE CILIADOS:
Proceda a preparar y observar muestras de ciliados, diferencie los diversos
organelos, graficar sus observaciones y ubicarlos sistemticamente.

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4. OBSERVACION DE SARCODINOS (RIZOPODOS)


Con las muestras y/o los medios de cultivo realice las preparaciones que
correspondan y observe al microscopio con menor y mayor aumento. Graficar
sus observaciones, identificar sus organelos y ubicarlos sistemticamente.

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5. OBSERVACION DE LMINAS CON PREPARACIONES PERMANENTES:


Se proporcionar el referido material para su conveniente observacin con
menor y mayor aumento.
En cada una de las observaciones realice el estudio de:
- Extremo anterior y posterior
- Presencia de citostoma, citofaringe, citopigio.
- Ectoplasma y endoplasma, caractersticas.
- Ncleos: macroncleo y microncleo
- Vacuolas: alimenticias, contrctiles
- Otras observaciones de importancia
De acuerdo a sus observaciones realizadas con las diferentes tcnicas, ubique en el
grupo taxonmico correspondiente al protozoario observado en las diferentes
muestras.
Graficar sus observaciones, identificar sus organelos y ubicarlos sistemticamente.

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CUESTIONARIO
1. Cules son los factores o condiciones ambientales que influyen en el desarrollo
de los protozoarios dulceacucolas?
2. Porqu los protozoarios no pueden alcanzar grandes tamaos?
3. Caracterice los tipos de seudpodos.
4. Esquematice y caracterice la estructura de un flagelo.
5. Diferencie cilios y cirros.
6. En que consiste el aparato neuromotor de los ciliados.
7. Caracterice el hbitat de los protozoos
mesosaprbicos, polisaprbicos y coprozoicos.

catarbicos,

oligosaprbicos,

8. Describa las tcnicas de coloracin ms importantes y/o usadas para la


preparacin de las muestras permanentes.
9. En que se basa el uso de los colorantes vitales.
10. Refiera las relaciones filogenticas de los protozoos.

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BIBLIOGRAFIA
BARNES, R. D. 1982 Zoologa de los Invertebrados. Ed. Interamericana.
GAVIO DE LA TORRE; JUAREZ LOPEZ Y FIGUEROA TAPIA. 1985. Tcnicas
Selectas de Laboratorio y de Campo. Ed. Limusa.
JIMENEZ, P. 1977. Apuntes para la Elaboracin de un Manual de Invertebrados.
Informe Bilogo. UNSA.
HICKMAN, C.; ROBERTTS, L. y LARSON, A. 2002. Principios Integrales de
Zoologa. Undcima edicin. McGraw-Hill Interamericana
LINCOLN, R. Y SHEALS, G. 1989. Gua de Captura y Conservacin Invertebrados. Ed. Interamericana McGraw - Hill.
LOPEZ, E. Y MORALES, A. 1985. Gua de Investigacin para el Estudio de
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KUDO, R. 1966. Protozoologa. Ed. Continental S.A.
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V B

JEFE DE PRCTICAS

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