Fisiologa-Biotecnologa 2015-I

Laboratorio 1
PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA CELULAR
Introduccin
La fuerza que determina el movimiento del agua a travs de las membranas
biolgicas es la diferencia de presin osmtica entre lquido intra- y extracelular. La
diferencia de presin osmtica est dada por la diferencia en la concentracin de las
partculas que no difunden a cada lado de una membrana semipermeable.
Es conveniente recordar que hay molculas que no se disocian en solucin, como la
glucosa, por lo tanto cada molcula origina una sola partcula. En cambio, la mayora de las
sale inorgnicas se disocian completamente en los iones que las componen, de modo que
cada molcula puede originar 2 o ms partculas al disolverse. La concentracin de las
partculas en una solucin se expresa en osmoles/litro (osm/l). De este modo, la presin
osmtica de una solucin 1M de NaCl (Na+, Cl-) ser el doble de la de una solucin 1M de
glucosa. Sin embargo, 1 osmol de glucosa ejerce la misma presin osmtica de 1 osmol de
NaCl.
Como las membranas plasmticas son muy permeables al agua, un cambio en la
osmolaridad del medio intra-extracelular implica un movimiento rpido de agua entre estos
compartimentos. De este modo, las clulas se encuentran siempre en equilibrio osmtico
con el medio que las rodea. Por ejemplo, el eritrocito se encuentra en equilibrio osmtico
con el plasma. Si se colocan los eritrocitos en plasma diluido, entrar agua al eritrocito y
ste aumentar de volumen rpidamente. Cuando se alcance el equilibrio con este nuevo
medio lquido, el volumen permanecer constante. Por lo tanto, se puede estimar la
osmolaridad del plasma:
Midiendo el volumen de los eritrocitos en equilibrio osmtico con el plasma (muestra de
sangre total). Midiendo el volumen de la misma cantidad de eritrocitos en equilibrio
osmtico con distintas soluciones de osmolaridad conocida. La osmolaridad del plasma ser
igual a la de aquella solucin en la que los glbulos rojos tengan el mismo volumen que en
el plasma.
Durante este laboratorio vamos a estudiar el efectos de la naturaleza de solutos y de
la concentracin de estos sobre el transporte de agua (osmosis) a travs de la membrana
plasmtica de los eritrocitos.
Objetivos
Comprender el fenmeno de osmolaridad.
Diferenciar entre osmolaridad y tonicidad
Calcular la osmolaridad de las diferentes soluciones
OJO Antes de comenzar el prctico es importante mencionar que usted trabajar con
sangre humana obtenida desde un banco de sangre por lo tanto se encuentra con todos los
controles normales para asegurar que no contiene infecciones. Sin embargo es aconsejable
que usted tome todas las medidas adecuadas a fin de evitar riesgos innecesarios. Los
glbulos rojos se rompen fcilmente y por su peso tienen a precipitar por lo tanto es

aconsejable que antes de sacar una muestra del tubo agite con suavidad este para
homogenizar la sangre sin romper los glbulos rojos.
Materiales:

Sangre de banco de sangre, 10 ml por mesa de trabajo

9 tubos de ensayo grandes, gradilla
Pipeta, propipeta, parafilm
Toalla nova, guantes
9 pipetas de 5 ml y una pipeta de 1 ml
11 capilares de hematocrito
Plasticina
Centrifuga de microhematocrito

Procedimiento:
1. Coloque 9 tubos de ensayo en la gradilla y agregue a cada tubo 4 ml de las
soluciones que se indican en la Tabla 1. Rotule los tubos de 1 a 9
2. Agite suavemente, con movimientos de inversin, la sangre que est en el tubo.
Tome una muestra con un tubo capilar para microhematocrito y luego selle un
extremo del capilar con plasticina. Ensarte el capilar en un papel rotulado, ya que no
es posible numerar los tubos capilares. Esta muestra debe ser rotulada como
"Testigo 1".
3. Agite nuevamente la sangre, tome 0.1 ml de sangre con una micropipeta y
agrguelo lentamente a los tubos del 1 al 9. La punta de la pipeta debe tocar las
paredes del tubo un poco ms arriba del nivel del lquido.
4. Tape los tubos (1 a 9) con parafilm y agite suavemente, invirtiendo los tubos varias
veces, para mezclar la sangre con las soluciones.
5. Mida el tiempo en que tarda la sangre en sufrir hemlisis. Anote los valores en la
tabla 1 e interprete sus resultados.
6. Tome una muestra de cada uno de los tubos (1 a 9) con un capilar de
microhematocrito. Rotule adecuadamente.
7. Agite el tubo con la sangre, y obtenga una muestra con un capilar de
microhematocrito. Este tubo se debe denominar "Testigo 2"
8. Centrifugue los capilares por 5 minutos, en la centrfuga dispuesta para ello.
Recuerde que debe anotar en qu posicin de la centrfuga estn sus tubos.
9. Saque los capilares de la centrifuga con cuidado, y lea en una escala cuadrada
(papel milimetrado) los volmenes de los eritrocitos centrifugados. No tome en
cuenta la capa blanca entre eritrocitos y plasma. Anote la lectura de los 11 tubos.
Calcule el % del volumen que ocupan los glbulos rojos en cada caso. Anote estos
valores en la tabla 1.
10. Calcule el valor promedio de los tubos "Testigo 1" y "Testigo 2".
Clculos:

La osmolaridad de una solucin est dada por el nmero de partculas que se encuentran
disueltas en una cantidad conocida de solvente. Por lo tanto, si se disuelve un soluto
disociable, por ej. NaCl, se obtendrn 2 partculas (1 Na+ y 1 Cl-) por cada molcula de
NaCl. Esto significa que por cada mol de NaCl en solucin se obtendrn 2 osmoles. Un mol
de NaCl corresponde a 58.5 g y un mol disuelto en agua destilada hasta un volumen de 1
litro corresponde a una solucin 1 molar (1 M). Un mol de NaCl disuelto a un litro de agua
destilada dar una solucin 2 osmolar.
1. Calcule la osmolaridad de las soluciones de las series A, B y C de la tabla 1.
Generalmente la osmolaridad del plasma se expresa en miliosmoles por litro
(mosmol/l). Por lo tanto, anote la osmolaridad de todas las soluciones de la tabla 1
en mosmol/l.
2. Anote en la tabla 1 los valores de los eritrocitos medidos en los distintos tubos,
expresados como porcentaje del volumen total de muestra centrifugada.
3. Corrija los valores de porcentaje de los eritrocitos para las muestras diluidas,
multiplicando por el factor de dilucin (la sangre se diluy a un volumen 5 veces
mayor)
4. Construya un grfico de coordenadas cartesianas, anotando las osmolaridades de las
soluciones de las series en la abscisa y los volmenes de los glbulos rojos (% del
volumen total) en la ordenada.
5. Trace una lnea recta, paralela a la abscisa, que pase por el punto del valor promedio
del volumen de los eritrocitos de los tubos testigo.
6. Anote en el grfico el valor del volumen de los eritrocitos (corregidos por dilucin)
de cada uno de los tubos. Trace una lnea recta que una estos puntos.
Elaboracin del informe:
1. Indique a que corresponde el valor de la osmolaridad correspondiente al punto
donde se cruzan las dos rectas del grfico construido por usted.
2. Complete los datos que faltan de la tabla 1
3. Grafique el volumen de eritrocitos en funcin de la osmolaridad
4. Qu puede decir de la forma de la curva?
5. Cul es el valor de la osmolaridad plasmtica?
6.
Tabla 1
Serie

Tubo

Cantidad

Solucin

Tiempo
de
hemlisis

Clasificacin
Osmolaridad
Tonicidad

Osmolaridad
Osmol/l y
mosmol

Testigo I

--

Sangre

--

--

--

4 ml

Agua
destilada

4 ml

Glucosa
0,05M

4ml

Glucosa

--

--

Volumen eritrocitos
(%) medido
corregido

0,15M
4

4 ml

Glucosa
0,30M

4 ml

NaCl
0,05M

4 ml

NaCl
0,15M

4 ml

NaCl
0,30M

4 ml

Urea 0,05M

4 ml

Urea 0,15M

10

4 ml

Urea 0,30M

11

4 ml

TritnX100

Testigo 2

00

--

sangre

--

--

--

Promedio del volumen de eritrocitos en los tubos Testigo:

Osmolaridad Plasmtica:
mosm/l

--

--

Finalmente si existe tiempo realice un hematocrito con las soluciones que no sufren
hemlisis y con la sangre completa. Tome 2 ml de las soluciones (stock, es decir del frasco
original) que no producen hemlisis y adicione 0,5 ml de sangre, mezcle suavemente y
tome una muestra en un capilar. Centrifugue y mida el hematocrito. Cul es el significado
hacer este procedimiento? Solicite ayuda si tienes problema.
Como hacer un hematocrito:
- Una vez mezclada la sangre con la solucin agite los tubos suavemente para homogenizar.
Utilice el papel
parafilm (papel plstico y elstico) para tapar el tubo si es necesario. Tenga cuidado de no
agitar en forma enrgica puesto que se produce hemlisis.
- Utilizando un capilar para micro-hematocrito, tome una muestra de sangre desde cada
tubo (recuerde tomar una muestra de sangre sin diluir) y selle un extremo del capilar con
plasticina. Recuerde homogenizar cada tubo antes de sacar la muestra debido a que los
glbulos rojos tienden a sedimentar. (cuidado de no confundir los capilares).
- Centrifugue los capilares por 5 minutos. (el ayudante lo guiar en este proceso).
- Retire los capilares con cuidado de la centrifuga y lea en una escala graduada (papel
milimetrado o regla) el porcentaje de eritrocitos presentes en el tubo en relacin a la
cantidad total de sangre. No considere la lnea blanca que queda entre los eritrocitos y el
plasma. A que corresponde esta lnea?
Cuestionario
Complete la tabla 1
Prepare una presentacin de los resultados obtenidos, respondiendo las siguientes

preguntas:
1.- Comente porque ocurre o no la hemlisis en cada uno de los tubos estudiado?
2.- Qu puede deducir de los resultados obtenidos respecto de la permeabilidad de la
membrana celular para cada uno de los compuestos usados?
3.- Qu conclusiones puede obtener respecto de los resultados dentro de cada serie?.
4.- Clasifique las soluciones de acuerdo a su osmolaridad y tonicidad.
5.- Explique cul es la diferencia entre una solucin isotnica e iso-osmtica? Todas las
soluciones isotnicas son iso-osmticas?
6.- Busque en al menos 3 textos diferentes la osmolaridad sangunea humana y comprela
con sus resultados. Si tiene la posibilidad o encuentra la osmolaridad plasmtica de alguna
otra especie, comprela con la humana.?
7.- Cul es el valor del hematocrito normal?. Se encuentra la sangre que usted analiz
dentro de los rangos normales?. Mencione al menos 2 situaciones patolgicas en las cuales
el hematocrito es superior y 2 en las cuales es inferior a los valores normales.
8.- Qu diferencia existe entre el paso de sustancias a travs de la membrana plasmtica y
a travs de un epitelio?, Explique cul es la diferencia entre el transporte trans-epitelial y
para-epitelial?
9.- Cuales son los factores que determinan la permeabilidad de una soluto.

Laboratorio 2
PERCEPCIN SENSORIAL Y REFLEJOS
Objetivos
1.
2.
3.
4.
5.

Entender el concepto de receptor.

Identificar la va sensorial.
Localizar las poblaciones de receptores en las diferentes partes del cuerpo.
Conocer la representacin central de las vas sensoriales.
Conocer la adaptacin de receptores.

Introduccin:
La sensacin se refiere a experiencias inmediatas bsicas, generadas por estmulos aislados
simples. La sensacin tambin se define en trminos de la respuesta de los rganos de los
sentidos frente a un estmulo. La percepcin incluye la interpretacin de esas sensaciones,
dndoles significado y organizacin. La organizacin, interpretacin, anlisis e integracin
de los estmulos, implica la actividad no slo de nuestros rganos sensoriales, sino tambin
de nuestro cerebro. Por lo tanto si es el cerebro quien interpreta las sensaciones, eso quiere
decir que no siempre lo que percibimos es lo que esta ocurriendo realmente y eso puede
quedar de manifiesto en las ilusiones. Para mayor detalle ver la pagina
www.monografias.com/trabajos6/napro/napro.shtml . En este prctico aprenderemos a
conocer como nuestro cuerpo puede percibir el medio ambiente y como reacciona ante las
ilusiones.
Maniobras experimentales
Adaptacin de los receptores
1. Se indica al sujeto que cierre los ojos y con la punta de un lpiz se mueva un vello
del antebrazo; se le pide que diga cuando comienza a sentir el movimiento y cuando
cesa la percepcin. Se mide la duracin de la percepcin y se anota en la hoja de
informe. El procedimiento se repite al menos cinco veces y se obtiene el promedio.
2. El sujeto de experimentacin cierra los ojos y coloca las palmas de las manos sobre
la mesa. Se coloca sobre la falange distal del dedo medio un objeto de poco peso
( un papel doblado, un pedazo de corcho, etc); se le solicita que seale el momento
en el cual percibe el objeto, cuando termina la percepcin y se anota la duracin del
fenmeno. Esto se repite cinco veces y se saca un valor promedio. Los valores se
anotan en la hoja de informe.
3. Ahora se coloca de nuevo el objeto sobre la falange distal y al azar se retira de su
sitio. Se pregunta al sujeto por lo menos 10 veces si el objeto est sobre el dedo o si
fue retirado. Anote en la hoja de informe cuntas veces la respuesta fue acertada y
cuntas incorrecta. Al retirar el objeto del dedo, tmelo entre el pulgar y el ndice y
levntelo suavemente; tenga cuidado de no ejercer presin o moverlo hacia los lados
pues ello estimula los receptores.
Discriminacin espacial
1. El sujeto cierra los ojos y el examinador toca con un marcador un punto sobre la
piel pide al sujeto que con la punta de un marcador de diferente color localice el
punto tocado. Se miden y anotan en milmetros los errores de localizacin. Se repite

el procedimiento por lo menos cinco veces en los dedos, manos, brazos y

antebrazos. Se calcula el error promedio para cada zona y se anota en la hoja del
informe.
2. El sujeto cierra los ojos y el examinador toca al mismo tiempo con las dos puntas de
un comps la piel del sujeto, se inicia con la menor abertura y se tiene cuidado de
colocar al mismo tiempo las dos puntas del instrumento sobre la piel. El
procedimiento se repite abriendo de manera progresiva el comps hasta que el
sujeto percibe las dos puntas por separado. Esto se repite por lo menos cinco veces
en los dedos, manos, brazos y antebrazos. En cada ocasin se mide y anota en
milmetros la abertura del comps a la cual se perciben las dos puntas por separado.
Se obtiene el valor promedio para cada zona y se anota en la hoja del informe.
Distribucin puntiforme de las sensaciones somticas.
1. Sobre la cara dorsal de la mano del sujeto se delimita con un marcador un cuadro de
aproximadamente 2 cm de lado y con la punta de un lpiz se toca suavemente la piel
en 2 puntos; se indica al sujeto que en cada ocasin indique que percibe. Si la
percepcin es de fro se pone un punto azul, si es de calor, rojo; si es de presin,
verde y si es de dolor morado. El procedimiento se repite tocando la piel con la
punta de un alfiler. Anote en el informe los resultados indicando para cual sensacin
hay mayor densidad de receptores.
Ley de la energas nerviosas especficas o ley de Mller
2. Desva la mirada lo ms posible hacia la izquierda y con el dedo ndice derecho
ejerza ligera presin en la parte externa del globo ocular derecho. Anote en la hoja de
informe la
percepcin.
Resultados
Percepcin
de Percepcin del objeto
movimiento
de sobre un dedo
cabello
Inicia
Termina
1
2
3
4
5
Promedio
Percepcin
del
movimiento al retirar el
objeto
1
2
3
4
5

6
7
8
9
10
Promedio
Distribucin puntiforme de receptores
Presin

Dolor

Conducta

Calor

Describa brevemente la percepcin al oprimir el globo ocular

Discriminacin espacial
Localizacin
del sitio
Yema del dedo

Dorso
mano

de

1
2
3
4
5
Promedio
la 1

Regin palmar

2
3
4
5
Promedio
1
2
3
4
5
Promedio

Discriminacin
de dos puntos

Antebrazo

Espalda

2
3
4
5
Promedio
1
2
3
4
5
Promedio

Preguntas
1. Qu entiende por estmulo adecuado?
2. Qu entiende por dimensiones de un estmulo?
3. Cules son los receptores de presin, vibracin y contacto, y dnde se localizan?
4. En qu consiste la adaptacin de los receptores y cul es su utilidad?
5. Explique la Ley de Mller.
6. Explique por qu el sujeto es incapaz de localizar con exactitud el punto donde se lo
toc (discriminacin espacial).
7. Explique por qu el sujeto siente en ocasiones las dos puntas del comps y en
ocasiones slo puede sentir una.
8. Explique por qu si se toca la piel con un mismo objeto (por ejemplo, un alfiler) la
sensacin no siempre es la misma.
9. Explique por qu el sujeto no siempre siente el objeto que se le coloca sobre la
falange distal y por qu si se mueve el objeto sobre su piel s lo siente.
10. Explique el mecanismo de adaptacin de los receptores y por qu no todos los
receptores se adaptan a la misma velocidad.

Laboratorio 3
Regulacin de la glicemia
Introduccin:
Tras una comida rica en carbohidratos, la glucosa que ingresa a la sangre estimula una
secrecin rpida de insulina, que a su vez, estimula la absorcin de glucosa en casi todos
los tejidos del organismo, en especial el hgado, los msculos y el tejido adiposo, ya sea
para su empleo inmediato y/o almacenamiento. Durante la mayor parte del da el tejido
muscular depende para su energa de los cidos grasos y no de la glucosa. Las principales
razones de ello son 1.-la membrana normal del msculo en reposo es casi impermeable a la
glucosa, excepto cuando la fibra muscular es estimulada por la insulina, 2.- entre las
comidas se secreta muy poca insulina para promover la entrada de cantidades importantes
de glucosa a las clulas. Solamente durante el ejercicio y despus de una comida, los
msculos utilizan la glucosa para obtener energa, debido a que en ambas situaciones se
produce liberacin de insulina que promueve la entrada de glucosa a las clulas. Adems,
durante el ejercicio intenso tambin se genera entrada de glucosa a la clula muscular por
efecto de la propia contraccin (un mecanismo no muy conocido). Por otro lado durante
una comida, el estomago secreta pptido gstrico inhibidor (GIP) el cual tambin induce la
secrecin de insulina. Una de las funciones ms importantes de la insulina consiste en
favorecer que la glucosa absorbida despus de una comida se almacene casi de inmediato
en el hgado en forma de glucgeno. Entre comidas, cuando no se dispone de insulina y la
concentracin de glucosa en sangre (glucemia) comienza a disminuir, el glucgeno
heptico se libera en forma glucosa hacia la sangre perifrica, evitando disminuciones
importantes de la glucemia. El mecanismo por el cual la insulina ocasiona la captacin y
depsito de glucosa en el hgado incluye varias etapas casi simultneas:
1. La insulina inhibe la fosforilasa heptica, enzima que causa el desdoblamiento heptico
del glucgeno en
glucosa. Este hecho impide la destruccin del glucgeno que ya se encuentra en las clulas
hepticas.
2. La insulina aumenta la captacin de glucosa de la sangre por las clulas hepticas al
incrementar la actividad de la enzima glucocinasa, que ocasiona la fosforilacin inicial de
la glucosa tras difundirse al interior de las clulas hepticas. Una vez fosforilada, la glucosa
es atrapada dentro de los hepatocitos porque la glucosa fosforilada no puede difundirse de
nuevo a travs de la membrana celular.
3. La insulina aumenta asimismo la actividad de las enzimas que promueven la sntesis del
glucgeno, como la fosfofructocinasa, que produce la segunda etapa de la fosforilacin de
la molcula de glucosa, y la sintetasa de glucgeno, que se encarga de la polimerizacin de
las unidades de monosacridos para formar las molculas de glucgeno.
La consecuencia final de todo lo anterior es el incremento de glucgeno en el hgado.
Cuando la capacidad de almacenamiento de glucgeno por hgado esta completa, equivale a
un total de 5 a 6% de la masa heptica. Cuando el individuo termina de comer y la
glucemia comienza a disminuir ocurren varios fenmenos determinantes para que el hgado
vuelva a liberar glucosa a la sangre circulante:
1. La glucemia decreciente hace que el pncreas disminuya su secrecin de insulina.

2. La ausencia de insulina anula en seguida todos los efectos que se comentaron antes y
detiene la sntesis de ms glucgeno en el hgado. Ello impide tambin la captacin
adicional de la glucosa de la sangre por parte de las clulas hepticas.
3. La falta de insulina (con aumento simultneo de glucagn) activa la enzima fosforilasa,
que favorece el
desdoblamiento de glucgeno en fosfato de glucosa.
4. La enzima fosfatasa de glucosa, inhibida por la insulina, se activa por ausencia de la
misma y determina que el radical fosfato se separe de la glucosa, lo que permite que sta,
una vez libre, se difunda nuevamente a la sangre.
En resumen, el hgado absorbe glucosa de la sangre cuando esta se encuentra en exceso (lo
que ocurre despus de una comida) y la regresa a la circulacin cuando se necesita (lo que
ocurre entre las comidas). Por lo general 60% de la glucosa de las comidas se deposita en
esta forma en el hgado y vuelve despus a la sangre. Cuando la cantidad de glucosa que
entra en las clulas hepticas es mayor de la que puede almacenarse como glucgeno, la
glucosa excedente es convertida en cidos grasos. Estos cidos grasos se incorporan como
triglicridos en lipoprotenas de densidad muy baja, se transportan a los adipocitos y se
depositan all. El cerebro es muy diferente de la mayor parte de los restantes tejidos del
organismo porque en l la insulina tiene poco o ningn efecto en la captacin o uso de la
glucosa. Las clulas cerebrales son permeables a la glucosa sin necesidad de insulina. En
condiciones normales las clulas del cerebro slo utilizan glucosa como fuente de energa;
por tanto, es esencial que la glucemia se conserve siempre a nivel crtico, la cual es una de
las funciones ms importantes del sistema de regulacin de la glucemia. Cuando sus valores
son muy bajos, entre 20 a 50 mg/dl, se presentan sntomas de choque hipoglucmico que
se caracteriza por irritabilidad progresiva que causa desvanecimiento, convulsiones e
incluso coma. La diabetes mellituses la enfermedad endocrina ms frecuente. La verdadera
incidencia es difcil de conocer a causa de los diferentes criterios diagnsticos que se
aplican, pero quiz oscila entre 1 y 2% de la poblacin. Esta enfermedad se caracteriza por
anomalas metablicas, complicaciones a largo plazo que afectan ojos, riones, sistema
nervioso y vasos sanguneos, y lesin de la membrana basal, que se demuestra mediante
estudio con microscopio electrnico. Los pacientes que renen estos criterios no forman un
grupo homogneo, sino que existen diversos sndromes diabticos diferentes.
El diagnstico de la diabetes sintomtica no es difcil. Casi todos los mdicos concuerdan
en que los pacientes que presentan signos y sntomas atribuibles a diuresis osmtica y
adems hiperglucemia padecen diabetes. De la misma forma, tampoco hay ningn
problema con los pacientes asintomticos que presentan una elevacin persistente de
laconcentracin plasmtica de glucosa en ayunas. Los problemas aparecen en los pacientes
asintomticos que pueden serdiabticos, pero tienen una concentracin plasmtica normal
de glucosa en ayunas. En general se realiza una prueba desobrecarga oral de glucosa en
estos pacientes y se diagnostica diabetes "qumica" cuando se observan valoresanormales.
Sin duda, una tolerancia normal a la glucosa constituye un argumento bsico contra la
presencia de diabetes;no obstante, el valor de prediccin de la prueba positiva no est
claro.La mayor parte de las pruebas sugiere que la sobrecarga de glucosa oral conduce a un
diagnstico excesivo dediabetes, quiz por la situacin de estrs que produce la respuesta
patolgica. Se cree que el mecanismo operativoconsiste en la descarga de adrenalina. La
adrenalina bloquea la secrecin de insulina, estimula la liberacin de glucagn,activa la
degradacin de glucgeno y altera la accin de insulina en los tejidos efectores de forma
que se eleva laproduccin heptica de glucosa y se reduce la capacidad para eliminar la

sobrecarga exgena de glucosa. Ms an, laansiedad y la puncin venosa a veces generan

tanta adrenalina que los resultados de la prueba se alteran.Las enfermedades, la dieta
inadecuada y la falta de ejercicio contribuyen tambin a la aparicin de resultadosfalsopositivos. El National Diabetes Data Group oftheNationalInstitutesofHealth intent resolver
estos problemasen 1979 mediante la revisin de los criterios para el diagnstico de diabetes
despus de administrar una sobrecargaoral de glucosa:
1. Ayunas ( despus de reposo nocturno) : demostracin de una concentracin de glucosa en
plasma venoso mayora 7.8 mmol/L (140 mg/dl) al menos en dos ocasiones diferentes.
2. Despus de la ingestin de 75 g de glucosa: concentracin de glucosa en plasma venoso
mayor a 11.1 mmol/L(200 mg/dl) a las 2 h y al menos en algunos de los puntos de la
prueba a lo largo de las 2 h. En otras palabras,con dos valores mayores a 200mg/dl durante
las 2h que dura la prueba, la persona es considerada diabtica.
3. Si la cifra de glucosa a las 2 h vara entre 7.8 y 11.1 mmol/L (140 y 200 mg/dl) y uno de
los valores de laprueba es igualo superior a 11.1 mmol/L (200 mg/dl) se efecta el
diagnstico de "intolerancia a la glucosa".
Este diagnstico significa que las personas con dicha intolerancia muestran un riesgo mayor
para lapresentacin de hiperg!ucemia en ayunas o diabetes asintomtica, aunque en la
actualidad no es posiblepredecir el riesgo individual.
La mayora de los pacientes (75%) con intolerancia a la glucosa nunca sufre diabetes y
muchos sujetos aquienes se diagnostica diabetes mediante la aplicacin del segundo criterio
tampoco llegan a manifestar hiperglucemiaen ayunas o un deterioro sintomtico.
Procedimiento: (prueba de sobrecarga oral de glucosa)
Medicin de la glucosuria (escuche las modificaciones y advertencias del ayudante)
a. Obtenga una muestra de orina del estudiante voluntario.
b. Introduzca la tira reactiva para determinacin de glucosuria.
c. Lea la concentracin de glucosa en la escala graduada de colores.
Medicin de la glucemia (escuche las modificaciones y advertencias del ayudante)
a.- Obtenga una muestra de sangre del estudiante voluntario, por medio de un pinchazo en
la yema de un
dedo.
b.- Coloque la gota de sangre sobre una tira reactiva para determinacin de la glicemia.
c.- Introduzca la tira en el glucotest previamente calibrado y lea y anote el valor.
1.- Todos los alumnos del curso se medirn la glucemia y anotarn sus valores y el alimento
ingerido en las ultimas6 h en la siguiente tabla: Esta ser la muestra basal o a tiempo cero.

2. Cada grupo debe elegir a 2 alumnos para realizar el experimento. Dichos alumnos
debern ayunar por 6 h comomnimo. Estos alumnos debern medir su glucosuria antes de
comenzar el test de tolerancia a la glucosa. porqu se realiza esta medicin?

3. Las dos personas de cada grupo que estn en ayuno deben ingerir una solucin de 75 gr
de glucosa disuelta en300 ml, en un periodo no superior a los 5 minutos. Puede agregar
limn si lo desea.
4. Ojo, uno de los voluntarios, previo a ingerir la solucin de glucosa, deber realizar al
menos 15 minutos deejercicios , ya sea subiendo y bajando un cajn o trotando. Solo una
vez concluido el periodo de ejerciciosbeber la solucin.
5. Ambos voluntarios debern volver a medir su glicemia a los tiempo 15, 30, 60, 90 y 120
minutos de ingerida laglucosa. Los otros integrantes de los grupos deben medir su glicemia
a los 90 min.
Nombre Ejercicio basal 15 min 30 min 60 min 90 min 120 min
6. Obtenga sus resultados y grafquelos. Consiga los datos de todos los grupos y utilice los
promedios.
Seminario:
1.- Presente el seminario, mostrando un grfico de glucemia versus tiempo. Que puede
decir de sus resultados.?
cules son los valores considerados normales?, Pueden los valores normales cambiar con
la edad?
2.- Mencione los mecanismos de regulacin de la glucemia, indicando las hormonas que
participan.
3.- Porqu es importante mantener estables los niveles de glucosa plasmticos?
4.- Describa al menos 4 transportadores de glucosa en la membrana plasmtica, indicando
su ubicacin y mecanismode transporte.
5.- Respecto de la glucemia, describa las diferentes etapas que se describen luego de una
comida. pospandrial,posabsortiva, inanicin temprana, inanicin tarda.
6.- Una mujer de 36 aos consulta porque tiene episodios de debilidad y mareos que duran
10 minutos despus decomida abundante. Los episodios se terminan si se come un
caramelo o toma jugo de fruta. La paciente presentauna obesidad moderada, ha subido de
peso 20 Kg durante los ltimos aos y muestra heridas en los pies que sonmuy difcil de
sanar. El resultado de test de tolerancia a la glucosa mostr que en ayunas presenta una
glucemia de180mg/dl, mientras que 3hrs despus de la ingestin de glucosa su glicemia era
de 220mg/dl
a.- Qu posible enfermedad presenta la paciente?
b.- Explique la presencia de cada uno de los sntomas y signos que presenta la paciente?
d.- Qu tipos de diabetes existen y como se pueden diferenciar?
e.- Qu diferencias existen entre una hipoglucemia reactiva (posprandial) y una
posabsortiva?
7.- Porqu se incrementan los niveles de glucosa sangunea durante el embarazo? Cul es
o son las hormonasencargadas de esta adaptacin?
A tener en cuenta
No existe en la actualidad un criterio uniforme o de consenso a nivel internacional por lo
que coexisten diferentesformas de diagnstico.
ADA: American Diabetes Association TTOG: Test de Tolerancia Oral a la Glucosa
OMS: Organizacin Mundial de la Salud
NDDG: Diabetes Data Group

1.- Test de Tolerancia Oral con 100 gr. de glucosa.(ADA) Se realiza determinacin de
glicemia basal , 1hora, 2 horas y 3horas post sobrecarga. Se considera diagnstica de
Diabetes Gestacional si dos o ms valores son iguales o superioresa lo normal. Si solamente
un valor excede los lmites sera diagnosticada una intolerancia a la glucosa en el embarazo,
ydebera repetirse la prueba en tres o cuatro semanas.
2.- Test de Tolerancia Oral con 75 gr. de glucosa. (ADA) Se hace determinacin de
glicemia basal, 1 hora y dos horasdespus de la sobrecarga. Se considera diagnstica de
Diabetes Gestacional si dos o ms valores son iguales osuperiores a lo normal. Si solamente
un valor excede los lmites, se diagnosticara intolerancia a la glucosa en elembarazo, y se
repetira la prueba luego de tres o cuatro semanas. Es aceptada por la ADA, sin embargo
reconocen queesta prueba no est tan bien validada como la anterior.
3.- Test de Tolerancia Oral con 75 gr. de glucosa (prueba abreviada). (OMS)
Determinado glicemia a las 2 horaspost sobrecarga. Se considera diagnstica si su valor es
igual o mayor a 140 mg/dl. Es la recomendada por la OMS y porel Consenso Europeo de
1999. Es ms simple y ms sensible que las otras, sin embargo con estos criterios se
multiplicapor cinco la incidencia de Diabetes Gestacional.
4.- Test de Tolerancia Oral con 100 gr. de glucosa. (NDDG) Se determina la glicemia
basal , 1hora, 2 horas y 3 horaspost sobrecarga. La presencia de dos o ms valores alterados
establece el diagnstico de diabetes gestacional. Un Testde Tolerancia Oral a la Glucosa
con un valor alterado debe ser considerado patolgico, y la paciente ser manejada como
diabtica gestacional.

Laboratorio 4
Presin arterial
Introduccin:
Los vasos sanguneos forman junto con el corazn, el sistema cardiovascular. Este es un
sistema de transporte (sangre) cerrado a travs de tubos elsticos (vasos sanguneos). La
presin en el sistema vascular representa las fuerzas que ejerce la sangre sobre las paredes
vasculares. Debido a que la medicin de la presin sangunea en medicina, se efecta
utilizando manmetros de mercurio, los valores se expresan casi siempre en mmHg
(milmetros de mercurio) y solo en algunos casos en cmH2O (1 mmHg = 13.6 cmH2O =
0.133kPa). Durante cada ciclo cardiaco la presin en la aorta, en la arterial humeral y en
todas las grandes arterias presenta valores que oscilan entre un valor mximo (presin
sistlica, PS) y un valor mnimo (presin diastlica, PD). En un adulto joven se considera
que el valor normal de la presin sistlica es de 120 mmHg, mientras que la presin
diastlica es de 70 mmHg. En unidades SI este valor es de 16.0/9.3 kPa. La presin del
pulso o presin diferencial, es la diferencia entre las presiones sistlica y diastlica, suele
ser de 50 mmHg. La presin arterial media (PAM) es la presin promedio durante todo el
ciclo cardiaco. Como la sstole es ms corta que la distole, la presin media es un poco
mayor que el valor promedio entre las presiones sistlica y diastlica. Con exactitud la
presin media se puede determinar integrando el rea de la curva de presin. Sin embargo
se puede estimar el valor de la presin media para el hombre y para la arteria humeral
usando la siguiente formula PAM= PD + 1/3 (PS-PD).
La presin cae muy ligeramente en las arterias de grueso y medio calibre porque su
resistencia al flujo es pequea, pero lo hace con mayor rapidez en las pequeas arterias y
arteriolas, que son los sitios principales de la resistencia perifrica contra la que bombea el
corazn. La presin media al final de las arteriolas es de 30 a 38 mmHg. La presin del
pulso tambin declina rpidamente hasta cerca de 5 mmHg al final de las arteriolas. La
magnitud de la cada de presin a travs de las arteriolas vara en forma considerable si
estn contradas o dilatadas.
Medicin de la presin arterial en el hombre
La presin arterial se puede medir en forma indirecta con un manmetro de mercurio o en
forma directa utilizando un catter insertado por un extremo en la arteria y conectando el
otro extremo con un transductor de presin el cual se conecta a un oscilgrafo o un
computador.
Mtodo Palpatorio
1.- A un sujeto sentado y descansado se le coloca el manguito (brazalete de Riva-Rocci)
completamente desinflado alrededor del brazo, a 2-4 cm sobre el pliegue del codo. El brazo
debe estar apoyado sobre una mesa de modo que quede a la altura del corazn. El manguito
se encuentra conectado a un manmetro de mercurio (esfigmomanmetro).
2.- Ubique el pulso de la arteria radial por palpacin. Eleve la presin del manguito
rpidamente hasta 20-30 mmHg sobre el punto en que desaparezca el pulso.
3.- Abra lentamente la vlvula de modo que la presin descienda 2-3 mmHg por segundo,
hasta que vuelva a percibir el pulso en la arteria radial. La presin detectada al momento
percibir el retorno del pulso, corresponde a la presin sistlica.

Mtodo Auscultario o de Korotkoff

1.- Coloque el manguito como se describi anteriormente. Identifique el pulso de la arteria
humeral y encima ubique la membrana del estetoscopio.
2.- Eleve rpidamente la presin del manguito hasta 20-30 mmHg por sobre el valor de
presin sistlica determinada por el mtodo palpatorio.
3.- Abra lentamente la vlvula de modo que la presin descienda 2-3 mmHg por segundo, y
escuche la aparicin de un ruido sincrnico con el pulso. Esta presin corresponde a la
presin sistlica. A medida que sigue bajando la presin los ruidos van cambiando de
calidad e intensidad hasta desaparecer. La presin en este punto corresponde a la presin
diastlica. En algunos casos los ruidos no desaparecen y la presin diastlica corresponde a
la presin a la cual los ruidos cambian bruscamente de intensidad.
Los Ruidos
En el punto en el que la presin en la arteria excede la presin del brazalete pasa un chorro
de sangre con cada latido cardiaco y sincrnicamente con cada uno de ellos se oye un ruido
por debajo del brazalete. La presin del brazalete a la que se oyen por primera vez los
ruidos es la presin sistlica. Conforme la presin del brazalete baja, los ruidos se vuelven
ms fuertes, luego sordos y apagados y por ltimo desaparecen en la mayora de los
individuos. Estos son los ruidos de Korotkoff.
Protocolo:
1.- Registre el pulso y la presin arterial segn los mtodos palpatorio y auscultatorio, de
todos los integrantesde su grupo, en ambos brazos, al menos 2 veces. Construya una tabla
donde se muestre el nombre y el promedio de las2 mediciones de: pulso, PS, PD, PAM. Al
final de la tabla calcule los promedios y los errores estndar para lasdiferentes medidas.
Separe las mediciones realizadas en hombres y mujeres para observar las diferencias. Si en
sugrupo no hay suficientes (al menos 3) hombres o mujeres para realizar este trabajo
consiga los datos con otros grupos.
Si usted observa estas diferencias explique posible motivos biolgicos durante la
presentacin del trabajo. A qu seatribuye los ruidos detectados en la arteria?

2.- Registre la presin arterial por el mtodo auscultatorio, a un integrante del grupo,
acostado en posicindecbito dorsal. Mida el pulso y la presin mientras mantiene su brazo
en posicin horizontal, levantando en posicinvertical y colgando. Ojo mida la presin en
el brazo que cambia de posicin. Tome tres mediciones en cada posicin,calcule el valor
promedio de cada medicin y construya una tabla como en le punto 1. No cruce los pies
durante elprocedimiento y suelte los zapatos. Mantenga al paciente acostado al menos 5
minutos antes de tomar la primeramedicin. Cmo explica los resultados obtenidos al
cambiar la posicin del brazo?

3.- Elija a un integrante del grupo (diferente al del punto 2) y mantngalo sentado en forma
cmoda por almenos 5 minutos. Luego registre el pulso y presin por el mtodo
auscultatorio. Manteniendo el manguito puesto en elbrazo, el sujeto se debe poner de pie
rpidamente y en forma instantnea (menos 15 segundos) usted debe medir lapresin
arterial y el pulso. El sujeto debe permanecer de pie durante la medicin. Repita la
medicin 2 veces, separadaspor 5 minutos de intervalo. Construya tablas con los datos.
4.- A un integrante del grupo no utilizado anteriormente, registre su pulso y presin en
condiciones de reposo2 veces. Luego de realizar ejercicio fsico (sentadillas correr subir
un banco) por 5 minutos. Mida nuevamente supulso y presin a tiempos 0, 1, 3 y 5 minutos
despus de terminado el ejercicio. Construya tablas con los datos. Haydiferencias en la
presin arterial al pararse bruscamente? A qu atribuye dichos cambios, si es que los hay?
Seminario:
1.- Elabore la presentacin del seminario contruyendo tablas con los resultados obtenidos y
discuta los datosobtenidos. En cuanto a:
- Modificacin de pulso, PS, PD y PAM
- Modificaciones respecto al Sexo y edad
- Modificaciones respecto al brazo derecho e izquierdo
3.- Como varia la presin arterial dentro del sistema vascular.
4.- Investigue los valores de presin arterial considerados normales para un bebe de 6
meses, un nio de 2aos, una mujer de 8 meses de embarazo y una persona de 70 aos.
5.- Explique como varia la velocidad sangunea dentro del sistema vascular.
6.- Mencione los factores que regulan la presin arterial a corto, mediano y largo plazo.
7.- Cuanta sangre se puede perder antes que la presin arterial descienda. Cul es la
cantidad de sangre quese extrae al momento de realizar una donacin sangunea?
8.- Cules medicamentos se utilizan para tratar una anemia y cul es la funcin de cada
uno de ellos?.
(Mencione solo aquellos mas conocidos y utilizados ejemplo: Hierro)
9.- En condiciones de ejercicio, se modifican los valores de la presin arterial?. Si es que
se modifican
Cules sern los limites aceptables?
10.- Investigue en el ambiente clnico, cuales son valores mas extremos de presin, pulso y
hematocrito que sehan encontrados en pacientes. (No datos de literatura, solo experiencias
vivnciales)

Laboratorio 5
GAMETOGNESIS
Introduccin:
El proceso de divisin celular por medio del cual el espermatozoide y el vulo reciben
solamente un nmero haploide de cromosomas, se conoce como MEIOSIS. Este proceso
tiene lugar durante la formacin de gametos (GAMETOGNESISllamada
espermatognesis en el macho y ovognesis en la hembra).Los principales rganos de la
reproduccin en los animales son las gnadas (testculos y ovarios). Son rganos de funcin
doble: la produccin de clulas sexuales (espermatozoides y vulos) y la produccin de
hormonas sexuales (estrgenos, principalmente en hembras y andrgenos, principalmente
en machos).En la presente prctica se estudiar la gametognesis en el ratn.
Procedimiento:
OBSERVACIONES
HISTOLOGICAS
(SE
MICROSCOIPIA OPTICA) EN RATON y MONA

ADJUNTARA

GUIA

DE

TESTCULO
El testculo, tiene doble funcin: (1) produce las clulas sexuales o gametos masculinos (los
espermatozoides), y (2) es el principal productor de testosterona, la hormona masculina
que estimula los rganos sexuales secundarios o accesorios y producen el desarrollo de los
caracteres sexuales masculinos extragenitales.
En un corte transversal de testculo, observe lo siguiente:
Capa Albginea.- Es una capa de tejido conectivo fibroso que se encuentra en la
periferia del testculo emitiendo septos en sentido radial (tabiques) hacia el
parnquima del rgano. As se delimitan los lobulillos testiculares, dentro de los
cuales se identifican tbulos seminferos de contorno sinuoso.
Tbulos seminferos.-Desde fuera hacia dentro se reconocen las siguientes estructuras:
a)
Capa basal o lmina propia.-Es una capa gruesa, que a su vez est rodeada
por una capa de clulas aplanadas llamadas clulas mioides.
b)
Epitelio germinal.- Constituido por clulas de dos clases:
Clulas Somticas:
- Clulas de Sertoli. Son de forma alargada o piramidal y se apoyan sobre la
membrana basal. Presentan citoplasma claro, poco visible y de forma
irregular. El ncleo es alargado, con la cromatina poco visible y el nucleolo
fcilmente reconocible. Tienen diversas funciones: nutricin, sostn y
liberacin de los espermatozoides. Tambin tienen funcin endocrina.
Clulas Intersticiales o de Leydig.- Se encuentran entre los tbulos
seminferos. Son de forma redondeada o poligonal, ncleo central y
citoplasma acidfilo. Son las encargadas de la secrecin endocrina del
testculo, principalmente la testosterona u hormona sexual masculina.
Clulas de la lnea espermatognica o seminal:
ESPERMATOGNESIS. Reconozca lo siguiente:

Espermatogonias.- Se encuentran adosadas a la membrana basal. Se

pueden reconocer hasta dos tipos de Espermatogonias: Tipo A, con
ncleo redondo u oval, con cromatina muy fina y uno o dos
nucleolos. Tipo B, con ncleo redondo y granos de cromatina de
tamao variable con un nico nucleolo de ubicacin central.
.Espermatocitos I.- Las mayores clulas de la lnea espermatognica,
con figuras cromosmicas en diferentes estadios de condensacin.
Espermatocitos II.- De menor tamao que las anteriores. Por ser un
estadio rpido son difciles de ubicar. El ncleo es redondo y
contiene gruesos granos de cromatina.
Espermtides.- Ubicadas en el lumen del tbulo. Presentan un ncleo
muy claro de ubicacin excntrica.
Espermatozoides.- Se encuentran en la luz del tbulo. Se reconocen
por el capuchn acrosmico, basfilo, y la cola, acidfila.

ESPERMIOGNESIS
Se define como espermiognesis a la serie de cambios celulares y maduracin
que sufre una espermtide para transformarse en un espermatozoide. Para
observar estos estadios se debe utilizar el objetivo de inmersin.
Fase Golgi.- Desde la aparicin de los grnulos proacrosomales
hasta el desarrollo del grnulo acrosomal pegado a la envoltura
nuclear.
Fase de capuchn.- Aumento del rea de adherencia del capuchn
acrosomal sobre la envoltura nuclear; se forma un delgado pliegue
que se distribuye sobre el polo del ncleo, dando lugar al capuchn
ceflico.
Fase acrosomal.- Redistribucin de la sustancia acrosomal,
condensacin del nucleoplasma y elongacin de las espermtides. El
capuchn se distribuye an ms y forma el acrosoma.
Fase de maduracin.- El ncleo se elonga y achata, los grnulos del
ncleo se condensan y se inicia la formacin del flagelo.

OVARIO
Al igual que en el testculo el ovario tiene dos funciones: i) produccin de los oocitos y su
liberacin (Ovulacin), y ii) produccin y secrecin de hormonas
En un corte longitudinal de ovario, observe lo siguiente:
1. Epitelio ovrico.- La superficie del ovario est revestida por un epitelio simple cbico
en su mayor extensin y por uno pavimentoso en ciertas reas.
2. Estroma ovrico.- Se distinguen bsicamente dos zonas:
Zona cortical.- Constituida por una capa de tejido Conectivo fibroso denso,
llamada TNICA ALBUGINEA, donde se hallan incluidas numerosos folculos
en diferentes grados de desarrollo:
Folculos Primordiales.- Oogonias pequeas con ncleo vesicular,
excntrico y alargado. Estn rodeados por una simple capa de clulas
foliculares planas.

 Folculos Primarios.- Cuando el ovocito aumenta de tamao y est

rodeado por una capa simple de clulas foliculares cbicas.
Folculos Secundarios o Antrales.- El ovocito est rodeado de 6-12
capas de clulas. Se nota una cavidad denominada ANTRO
FOLICULAR, la cual est llena del LIQUIDO FOLICULAR. Las
clulas de la granulosa forman un engrosamiento debido a la
proliferacin celular denominado CUMULUS OOPHORUS que se
orienta hacia el antro.
Folculos maduros o de Graaf.- De mayor tamao que los anteriores. El
epitelio alrededor de la cavidad folicular est limitado externamente por
una membrana basal que lo separa de la teca. Dicha teca interna se
reconoce por sus clulas polidricas con un ncleo elptico.
Folculos atrsicos.- Son producto del proceso involutivo de los
folculos ovricos. Se caracterizan por la invasin de vasos sanguneos y
de tejido Conectivo que se dispone en forma de cicatriz.
Cuerpo lteo.- Se forma por un proceso posterior a la ovulacin, se
caracteriza por una diferenciacin de las clulas foliculares que adhieren
inclusiones lipdicas que le dan el color amarillo caracterstico (cuerpo
amarillo). El reemplazo del cuerpo lteo por tejido Conectivo denso
forma el CUERPO ALBICANS.
Zona medular.- Central. En ella hay predominio de tejido Conectivo con
abundancia de vasos sanguneos.
Seminario:
1. En qu fases de la meiosis se detiene la gametognesis femenina?
2. Mencione los tipos celulares del Folculo de Graaf y diga su funcin.
3. Explique el Mecanismo de Transduccin de seales en la Gametognesis.
4. Importancia de la gametognesis en la Reproduccin. Fundamente.
5.- Como se realiza un espermatograma?
6.- Qu es superovulacin?
7.- Desarrolle algn protocolo experimental para obtener clulas germinales a partir de
clulas troncales
8.- Describa las tcnicas de reproduccin asistida en humanos