SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

CENTRO NACIONAL DE HOTELERA, TURISMO Y ALIMENTOS

TECNLOGO PROCESAMIENTO DE ALIMENTOS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
INFORME:
FICHA: 1011239
INTEGRANTES:
FLOR GODOY
MEIDY YATE
WENDY VERA
NICOLAS GUEVARA
LEIDY RIVEROS
FERNANDO MARTINEZ
ANDRES ZABALA
JUAN CARLOS LINEROS

RESULTADO DE APRENDIZAJE:
INSTRUCTOR: Camila Ubaque
COMPETENCIA:

Fecha practica: 28/08/2015

Fecha entrega: 04/09/2015

INTRODUCCIN
MARCO TERICO
En este laboratorio se har la limpieza y
desinfeccin de nuestro entorno de trabajo y
adems aprenderemos a esterilizar las cajas
de Petri en una auto clave, al tener esta
esterilizacin se podrn hacer cualquier tipo de
laboratorio, como cultivar bacterias, mohos y
otros microorganismos.
Despus de este procedimiento sacaremos
una muestra de nuestra boca con un hisopo y
la pondremos para examinar en una laminilla,
agregndole reactivos y soluciones para definir
que bacterias teneos en la boca observndolas
a travs del microscopio.
OBJETIVOS
Objetivo general
Establecer los pasos para la adecuada
realizacin de ensayos de tincin de Gram en
el laboratorio de microbiologa.
Objetivo especfico
Aprender a saber cundo y por qu un
resultado es positivo o negativo segn la
observacin en el microscopio de la prueba de
nuestra propia boca.

LIMPIEZA: Procesos destinados a la

eliminacin de todo tipo de suciedad en las
superficies tanto del establecimiento como de
los equipos destinados a la elaboracin de
alimentos. Tambin a los materiales, personal
etc.
DESINFECCIN: Proceso de inactivacin,
destruccin o remocin de la carga bacteriana
presente sobre una superficie.
La tincin de Gram o coloracin de Gram es
un tipo de Tincin diferencial empleado
en bacteriologa para la visualizacin
de bacterias, sobre todo en muestras clnicas.
Debe su nombre al
bacterilogo dans Christian Gram (18531938), que desarroll la tcnica en 1884. Se
utiliza tanto para poder referirse a la morfologa
celular bacteriana, como para poder realizar
una primera aproximacin a la diferenciacin
bacteriana, considerndose bacterias Gram
positivas a las que se visualizan de color
morado, y bacterias Gram negativas a las que
se visualizan de color rosa, rojo o grosella.
La tincin diferencial requiere el uso de al
menos 3 reactivos qumicos que se aplican en
secuencia a un frotis fijado por calor. El primer

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TECNLOGO PROCESAMIENTO DE ALIMENTOS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
INFORME:
FICHA: 1011239
INTEGRANTES:
FLOR GODOY
MEIDY YATE
WENDY VERA
NICOLAS GUEVARA
LEIDY RIVEROS
FERNANDO MARTINEZ
ANDRES ZABALA
JUAN CARLOS LINEROS

RESULTADO DE APRENDIZAJE:
INSTRUCTOR: Camila Ubaque
COMPETENCIA:

reactivo es llamado tincin primaria o colorante

primario. Su funcin es impartir color a todas
las clulas. Con el objetivo de establecer un
contraste de color, el segundo reactivo usado
es un agente decolorante, el cual puede
decolorar la clula completa o solo parte de
ella. El reactivo final, el colorante de contraste,
le da a las clulas decoloradas un color que
contrasta con el del colorante primario. El
colorante de contraste no puede ser absorbido
por clulas que no han perdido el colorante
primario. De esta manera, tipos de clulas o
sus estructuras se pueden distinguir unas de
otras en funcin del colorante que es
absorbido. Este mtodo divide las bacterias en
dos grandes grupos, las Gram-negativas y las
Gram-positivas. Esto es esencial para la
clasificacin
y
diferenciacin
de
microorganismos. La reaccin a la tincin de
Gram est basada en la diferencia en la
composicin qumica de la pared celular
bacteriana. Las bacterias Gram positivas
tienen una gruesa capa de peptidoglicano o
murena, mientras que esta capa es ms fina
en las Gram-negativas y est rodeada por una
bicapa lipdica externa. El Peptidoglicano es un
polisacrido formado por dos subunidades
qumicas,
N-acetilglucosamina
y
cido
Nacetilmurmico.

Fecha practica: 28/08/2015

Fecha entrega: 04/09/2015

MATERIALES, EQUIPOS,
MEDIOS DE CULTIVOS.
Balanza semianaltica.
Autoclave.
Frascos 100 mL.
Portaobjetos.
Microscopio
Asa bacteriolgica.
Pipetas Pasteur.

REACTIVOS Y

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LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
INFORME:
FICHA: 1011239
INTEGRANTES:
FLOR GODOY
MEIDY YATE
WENDY VERA
NICOLAS GUEVARA
LEIDY RIVEROS
FERNANDO MARTINEZ
ANDRES ZABALA
JUAN CARLOS LINEROS

RESULTADO DE APRENDIZAJE:
INSTRUCTOR: Camila Ubaque
COMPETENCIA:

REACTIVOS Y SOLUCIONES

Fecha practica: 28/08/2015

Fecha entrega: 04/09/2015

Lavar con jabn y refregar adecuadamente con

una toalla o limpin. Secar con un pao
hmedo.

Reactivos Cristal violeta

Lugol
Alcohol acetona
Fucsina
Safranina

Desinfectar aplicando solucin de alcohol

etlico al 70%
METODOLOGA (Grfica)
Retirar todos los objetos que se encuentren
encima de los mesones.

Secar con pao hmedo.

Alternar semanalmente entre las siguientes
soluciones (Alcohol Etlico 70%).

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INFORME:
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LEIDY RIVEROS
FERNANDO MARTINEZ
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RESULTADO DE APRENDIZAJE:
INSTRUCTOR: Camila Ubaque
COMPETENCIA:

Con un copito tomamos una muestra de toda

nuestra boca y la colocamos sobre una
laminilla debidamente limpio, dejamos secar y
lo llevamos al lavaplatos para agregar los
reactivos: Cristal violeta y lo dejamos actuar
por 1 minuto, lo enjuagamos y agregamos
Lugol, dejamos actuar por 1 minuto
enjuagamos y agregamos Alcohol acetona,
dejamos actuar por 15 minutos enjuagamos y
agregamos safranina y dejamos actuar por 30
segundos enjuagamos. Finalmente agregamos
1 gota de aceite Inmersin. Despus lo
llevamos al microscopio para observar las
siguientes grficas.
Gram Negativa

Gram positiva

Estos fueron los

resultados microscpicos de la tincin de Gram
que observamos.
Gram Positivas y Gram Negativas

Fecha practica: 28/08/2015

Fecha entrega: 04/09/2015

DATOS DE LA MUESTRA:
Muestra: Solucin Salina fisiolgica 0,85 g de
Cloruro de Sodio y destilar en agua destilada
hasta completar 100ml de Solucin, agregar el
contenido en un frasco y esterilizar en auto
clave a 121 grados centgrados durante 15
minutos. Luego retirar de la autoclave, dejar
enfriar y refrigerar.

TABLA DE RESULTADOS
Mesfilos
aerobios

PARMETRO EVALUADO

2
3
4

UNIDADES DE EXPRESIN
RESULTADO
TCNICA ANALTICA

5
6

MTODO
NORMATIVIDAD

MXIMO PERMISIBLE

CONFORMIDAD

VALOR

T: Temperatura
C: Grados Celsius
DISCUSIN DE RESULTADOS

TABLA DE RESULTADOS

UFC/g
5,2 X 103
Recuento
placa
NTC 4519

en

Resolucin 3929m=
1000

M=5000 UFC/g.

No cumple

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LEIDY RIVEROS
FERNANDO MARTINEZ
ANDRES ZABALA
JUAN CARLOS LINEROS

RESULTADO DE APRENDIZAJE:
INSTRUCTOR: Camila Ubaque
COMPETENCIA:

Nombre: Staphylococcus aureus

Caractersticas: Cocos Gram Positivos
Enfermedades:
Abscesos,
endocarditis,
gastroenteritis, dermatitis.
Los mayores riesgos de enfermedades por
NEUMOCOCO, son los jardines infantiles, campo
militar, crceles etc.

Fecha practica: 28/08/2015

Fecha entrega: 04/09/2015

Sabemos que las Gram Positivas son

de color morado y las Gram Negativa
de color rosa.

BIBLIOGRAFA
Fuentes fsicas:

CONCLUSIONES
Aprendimos a diferenciar una Bacteria
Gram Positiva y una Bacteria Gram
Negativa.
Es un mtodo utilizado para visualizar
Bacterias sobre todo en muestras
clnicas.

Gua TINCIN DE GRAM

CENTRO NACIONAL DE
TURISMO Y ALIMENTOS.

HOTELERIA