Citometra de flujo[editar]

Artculo principal: Citometra de flujo

La citometra de flujo es una tcnica de anlisis celular que implica medir las caractersticas de
dispersin de luz y fluorescencia que poseen las clulas conforme se las hace pasar a travs
de un rayo de luz. Para su anlisis por citometra de flujo, las clulas deben encontrarse
individualmente en suspensin en un fluido. Las clulas sanguneas pueden analizarse
prcticamente de manera directa, las clulas de tejidos slidos deben primero dispersarse.
Las clulas pueden hacerse pasar a muy altas velocidades (pueden llegar a alcanzarse
velocidades cercanas a las 100,000 clulas por segundo).
Al atravesar el rayo de luz, las clulas interaccionan con este causando dispersin de la luz,
basndose en la difraccin de la luz en sentido frontal, se puede evaluar el tamao de las
clulas que pasan (parmetro denominado Forward Scatter) y al medir lareflexin de la luz de
manera lateral se evala la granularidad o complejidad de estas (parmetro denominado Side
Scatter). Adems de la dispersin de la luz, si previamente a su anlisis se coloca a las clulas
en presencia de anticuerpos monoclonalesmarcados con molculas fluorescentes, se pueden
evaluar que clulas poseen los antgenos complementarios a los anticuerpos monoclonales
usados.
El uso de molculas fluorescentes distintas (distintos colores de fluorescencia) permite
analizar la presencia de varios marcadores de manera simultnea.
Si el anlisis incluye la deteccin de fluorescencia hablamos estrictamente de citofluormetros
de flujo (los conocidos como "citmetros" o "FACS" (por "Fluorescence-Activated Cell Sorter").
Los citmetros de flujo pueden analizar partculas en funcin de su fluorescencia y tamao.
Los conocidos como separadores o "sorters" pueden tambin purificar poblaciones de
caractersticas determinadas (por ejemplo, pueden separar los linfocitos T CD4+ de los CD8+)
en distintas fracciones finales a la vez que realizan el conteo del nmero de clulas presentes
en la muestra.
Los aparatos de citometra de flujo pueden hacer anlisis multiparamtrico, es decir, pueden
combinar las medidas de distintos parmetros medidos sobre la misma clula y relacionarlos.

Aplicaciones[editar]
La tecnologa tiene aplicaciones en un nmero de campos, incluyendo la biologa molecular, la
patologa, la inmunologa, la biologa vegetal y la biologa marina.
Es especialmente til en el campo de la biologa molecular cuando se usan anticuerpos
etiquetados fluorescentemente. Estos anticuerpos especficos se unen a antgenos a las
clulas diana y ayudan a dar informacin de las caractersticas especficas de las clulas

rebuscadas en el citmetro. Tiene grandes aplicaciones en medicina (especialmente en

trasplantes, hematologa, inmunologa de tumores y quimioterapia, gentica y seleccin de
esperma en IVF).
En la biologa marina, las propiedades autofluorescentes del plancton fotosinttico pueden ser
explotadas por citometra de flujo para tal de caracterizar la abundancia y estructura de las
comunidades marinas. En la ingeniera de protenas, la citometra de flujo se usa
conjuntamente con la exhibicin de levadura y la exhibicin bacteriana para identificar las
variantes de protenas exhibidas en membrana con las propiedades deseadas.