UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO DE CLNICA Y PATOLOGA

INFORME N1
CURSO

MECANISMOS, AGRESIN Y DEFENSA I

TEMA

INSTRUMENTOS BSICOS EN LA PRCTICA DE

MICROBIOLOGICA.

PROFESOR

DR. CSAR TORREZ DIAZ

ALUMNO

RIVERA JIMNEZ JAVIER ANTONIO

CICLO

IV

PIURA- 2008

MECANISMO , AGRESIN Y DEFENSA I

LABORATORIO 1

INTRODUCCIN
El presente informe de laboratorio da inicio a la parte prctica del curso
Mecanismo, agresin y defensa I, y desarrollar de manera general lo relacionado al
reconocimiento del instrumental como las placas de Petri, las pipetas, los tubos de
vidrio, el microscopio y la autoclave.
As mismo se refiere a la importancia de aplicar las medidas de bioseguridad
para reducir los riesgos de contaminacin biolgica, fsica y qumica, utilizando la
mayor asepsia posible en el manejo de los instrumentos y

procedimientos de

esterilizacin del instrumental como parte del protocolo de trabajo en el laboratorio de

microbiologa.

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LABORATORIO 1

OBJETIVOS
Reconocer los materiales del laboratorio, su uso, su forma de esterilizacin,
su funcionamiento y aplicacin a un determinado trabajo en el laboratorio.
Reconocer las funcin y aplicacin del autoclave uno de los instrumentos
mas importante par la esterilizacin del material del laboratorio.
Reconocer pipetas y placas de Petri del laboratorio de microbiologa, as
como su empleo y tcnica de preparacin para la esterilizacin.
Reconocer las partes del microscopio microbiolgico, as como su empleo
para realizar una correcta observacin de muestras.
Aprender las reglas de seguridad para evitar accidentes.

MARCO TERICO
INSTRUMENTOS BSICOS EN LA PRCTICA
MICROBIOLOGICA.
MATERIAL DE VIDRIO
INSTRUMENTOS PARA MEDICIN
BURETA
Aparato de vidrio transparente, siempre graduado y con una llave de salida en el
extremo inferior, sirve para desalojar a voluntad del operador el volumen del lquido
que contiene.

PIPETA
Aparato de vidrio transparente, a manera de tubo alargado, con un ensanchamiento
central. Este instrumento es graduado se usa para cantidades pequeas de lquidos, se
coloca la boca en el extremo superior, se absorbe el liquido y luego colocando el ndice
en dicho extremo se vierte el liquido en un recipiente en forma intermitente o a chorro.

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LABORATORIO 1

PROBETA
Aparato de vidrio transparente de forma cilndrica de boca ancha y de
base plana, esta graduado en cc. O mm. Se usa generalmente para
medir cantidades regulares de lquidos

MATERIALES PARA SEPARACIN

EMBUDOS
EMBUDOS SIMPLES
Denominados embudos de filtracin, se disponen de distintos
ngulos, dimetros y longitud de vstago. Es de utilidad para
llenar buretas e introducir slidos en matraces aforados.
Tambin se tienen embudos llanos y estirados, estos sirven
para filtraciones rpidas; los hay de todo material: vidrio,
pirex, etc.
EMBUDO DE DECANTACIN
Es un aparato de vidrio transparente que consta de una parte superior por lo general
esfrica y un cuello alargado provisto de una llave de salida. En la parte superior se
colocan sustancia s de diferente densidad y al abrir la llave irn pasando
progresivamente, primero las ms densas y luego las menos densas.

EMBUDO DE BUCHNER
Construido generalmente de porcelana .Los hay de diferentes tamaos y son de vstago
corto. Poseen agujeros en la parte cntrica, en los cuales se coloca un papel de filtro. Se
utiliza para las filtraciones al vaco.

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MATRACES
ERLENMEYER:
Es un instrumento de laboratorio de vidrio, cuyas paredes laterales
son rectas y de fondo plano. Hay de varias capacidades. Se utiliza
para colocar sustancias que se van a calentar o para otros fines.

KITASATO:
Es propiamente un Erlenmeyer, con la nica diferencia de que el
cuerpo presenta un pequeo tubo de desprendimiento. Sirve para
calentar sustancias y recoger los vapores que se desprenden.

MATRAZ AFORADO O FIOLA

Se le denomina tambin matraz volumtrico. Es un recipiente de vidrio
con forma de pera y cuello estrecho y largo en el que aparece o enrase
que indica la capacidad exacta del matraz a una cierta temperatura.
Este instrumento de laboratorio se emplea, principalmente, para
preparar disoluciones de una determinada concentracin. El rango de
capacidades de los matraces aforados ms utilizados va de 25 a 1000
mm.
PAPEL DE FILTRO
Es papel de celulosa pura, sin carga y sometidos a procesos especiales, segn el caso a
que se destine, as por ejemplo, los hay con cenizas taradas pare efectuar anlisis
cuantitativos, resistentes a los cidos, a los lcalis, para filtrar
precipitados
gelatinosos
grasos, finos, etc. El papel de filtro se emplea cortado en crculo
cuyo dimetro debe escogerse de tal modo que, una vez doblado
y
colocado en el embudo , el borde superior de este quede ms o
menos 1 cm. por encima del papel. Si se trata de filtrar al vaco,
el
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LABORATORIO 1

dimetro debe ser tal que encaje perfectamente dentro del embudo Buchner, por ningn
motivo debe quedar doblado e! papel de filtro.
TAMICES METLICOS
Son mallas metlicas, cuya superficie perforada permite efectuar la separacin de
partculas o gramos por tamaos. La magnitud de las perforaciones determina la
clasificacin los tamices, la cual se realiza generalmente por escalas numricas. Las
telas o mallas de alambre tejido ms finas que fabrican tienen agujeros cuadrados cuya
longitud de lado es mucho menor que un milmetro.
As el tejido conocido con el nombre de Malla 200 y que sirve de patrn estndar
universalmente aceptado, tiene aberturas cuadradas pequesimas, siendo la dimensin
del lado cuadrado 0.074 mm. Esta malla 200 se emplea corrientemente en los
laboratorios de prueba de todas las plantas Metalrgicas.

MATERIALES PARA MEZCLAS COMBINACIONES Y REACCIN

TUBOS DE ENSAYO
Es u tubo delgado de vidrio, serrado por un extremo. Este instrumento de laboratorio se
utiliza para contener o calentar pequeas cantidades de sustancias. Llamados tambin
tubos de prueba, son tubos comunes de diferentes dimetros y longitudes, como son de
18 x 150mm con 30cc. De capacidad; de 25 x 150mm con 57cc de capacidad hasta el
borde

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LABORATORIO 1

BALONES
Son recipientes construidos de vidrio, el uso especfico que se
les da es para realizar diversas reacciones qumicas, que
constan de un cuerpo esfrico y un cuello.
a. Con Fondo Plano: denominados "matraces" compuestos por
un cuello largo y boca angosta, o de cuello angosto y corto, y el
cuello corto, con boca ancha. Los que tienen cuello largo se
conocen como balones o matraces de Florencia. Los balones
con boca ancha se emplean cuando sea necesario usar tapones
con dos o tres agujeros.

b. Con fondo redondo: Los de cuello largo constituyen el

modelo clsico, empleados para efectuar reacciones donde
interviene el calor, tambin se dispone de modelos con cuello
corto, y de diferentes capacidades.

c.
Balones de destilacin:
redondo con el cuello largo y
situado en el cuello y
hacia abajo, por donde saldrn
balones de destilacin utilizado
posee dos cuellos, usados para
destilado.

Estos
tienen
fondo
un tubo lateral de salida,
ligeramente
inclinado
los vapores. El otro tipo de
es el de Claissen, que
ciertas operaciones de

CRISOLES:
Son recipientes de forma cnica invertida, con tapa, de diferentes materiales tales como;
porcelana, platino, nquel, plata, hierro, material refractario. Se emplea con mucha
frecuencia para calentamientos a elevadas temperaturas, especialmente en anlisis
qumicos, en los cuales es necesario secar o calcinar una sustancia, para saber su peso
exacto o verificar fusiones o disgregaciones con hidrxidos fuertemente alcalinos. Para
cada caso especfico se emplea un crisol de material adecuado

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LABORATORIO 1

DESCRIPCIN DE MATERIALES PARA SOPORTE O SOSTN.

GRADILLA
Suelen ser de metal o de madera, tiene forma de una escalerilla porttil y sencilla. Sirve
para portar a los tubos de prueba durante el trabajo. Presentan tablillas horizontales
oradas con agujeros de diferentes dimetros.

SOPORTE UNIVERSAL
Es una estructura metlica, que consiste en una varilla metlica de longitud enroscada a
una base de hierro de forma
triangular. Se utiliza
para
realizar
diferentes
instalaciones,
as
como para sostener los distintos
materiales,
especialmente cuando se arman
aparatos complicados.

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LABORATORIO 1

OTRO MATERIAL DE VIDRIOS

LA PLACA DE PETRI
La placa de Petri es un recipiente redondo, de cristal o plstico, de diferentes dimetros
(siendo ms comunes los de dimetros alrededor de 10 cm), de fondo bajo, con una
cubierta de la misma forma que la placa, pero algo ms grande de dimetro, para que se
pueda colocar encima y cerrar el recipiente.
Fue inventada en 1877 por el bacterilogo alemn Julius Richard Petri cuando trabajaba
como ayudante de Robert Koch. Se utiliza en los laboratorios principalmente para el
cultivo de bacterias y otros microorganismos, solindose cubrir el fondo con distintos
medios de cultivo (por ejemplo agar) segn el microorganismo que se quiera cultivar.

PIPETA DE PASTEUR
Es una pipeta de plstico no calibrada pero si graduada que se utiliza apretando la
boquilla de arriba e introduciendo en la probeta, para poder sacar el lquido.

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LABORATORIO 1

LAMINA PORTA OBJETOS

Lamina de vidrio que se utiliza para colocar el
material que se va ha observar al microscopio
previamente preparado.

EQUIPOS
MATERIALES PARA CALENTAMIENTO
MECHEROS BUNSEN
La reaccin de combustin se transmite a un regin de la masa gaseosa a partir
de un punto de ignicin; al proseguir la propagacin, la mezcla reaccionante va
diluyendose, la reaccin cesa gradualmente y la llama queda limitada a una zona del
espacio.
La llama ms utilizada en el laboratorio es la producida por la combustin de un
gas (propano, butano o gas ciudad), con el oxgeno del aire.
La combustin completa (con exceso de oxgeno) produce agua y dixido de
carbono, una llama poco luminosa y de gran poder calorfico. La combustin
incompleta produce, adems de dixido de carbono y agua, carbono, monxido de
carbono y otros productos intermedios, da origen a llamas de bajo poder calorfico y
altamente luminoso (debido a la incandescencia de las partculas de carbono que se
producen).

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LABORATORIO 1

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1
2

can
pie

virola

chicl

entrada de gas

llave

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LABORATORIO 1

EL MICROSCOPIO
Se trata de un instrumento ptico que contiene una o varias lentes que permiten
obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin.
Etimolgicamente Microscopio,viene del griego: "mikro" = pequeo y "scope" =
mirar (para mirar cosas pequeas).

Sus partes:
1.- Mecnica
2.- ptica
3.-Sistema de Iluminacin

LOS ELEMENTOS DE LA PARTE MECANICA

Estos involucran todas las estructuras que permiten sostener y accionar las lentes del
microscopio y lo constituyen:

PIE
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LABORATORIO 1

Sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al
aparato. En los microscopios antiguos tena forma de herradura o de trpode pero en la
actualidad suele ser una plataforma rectangular. En l se integra la fuente luminosa
BRAZO

Es una columna perpendicular al pie. Puede ser arqueado o

vertical y une al pie con el tubo

LA PLATINA
Es una plataforma horizontal con un orificio central,
sobre el que se coloca la preparacin, que permite el
paso de los rayos procedentes de la fuente de
iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven
para retener el portaobjetos sobre la platina y un
sistema de cremallera guiado por dos tornillos de
desplazamiento permite mover la preparacin de
delante hacia atrs o de izquierda a derecha y
viceversa. En la parte posterior de uno de los laterales se encuentra un nonius que
permite fijar las coordenadas de cualquier campo ptico; de esta forma se puede acudir
al cuando interesa.

LOS TORNILLOS MACRO Y MICROMETRO

Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba
y hacia abajo. El macromtrico lo hace de forma rpida
y el micromtrico de forma lenta. Llevan incorporado un
mando de bloqueo que fija la platina a una determinada
altura.

TUBO PTICO

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LABORATORIO 1

Es una cmara oscura unida al brazo mediante una cremallera. Tiene el revolver con los
objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior

REVOLVER

Dispositivo metlico redondeado sobre el cual se insertan

los objetivos y Es el que permite que se muevan los
objetivos

LOS ELEMENTOS DE LA PARTE PTICA

OCULARES

Estn colocados en la parte superior del tubo. Se denominan

as, porque estn muy cercanos al ojo. Su funcin es la de
captar y ampliar la imagen formada en los objetivos. En los
modernos microscopios hay dos oculares (microscopios
binoculares) que estn unidos mediante un mecanismo que
permite ajustar la distancia interpupilar. En general los mas
utilizados son los de 10X ,15X, hasta 20X.

LOS OBJETIVOS
Los objetivos aumentan el tamao de la imagen y la
proyectan en direccin de los lentes oculares. Son varios y
adecuados al revolver porta objetivo; en la parte inferior
tiene una lente frontal plano convexa, y en la superior una
sucesin de lentes correctores.

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LABORATORIO 1

FUENTE DE ILUMINACIN
Se trata de una lmpara halgena
de intensidad graduable. Esta
situada en el pie del microscopio.
Se enciende y se apaga con un
interruptor y en su superficie
externa puede tener una especie
de anillo para colocar filtros que
facilitan la visualizacin.

CONDENSADOR
El condensador es un sistema de
lentes situadas bajo la platina su
funcin es la de concentrar la luz
generada por la fuente de
iluminacin hacia la preparacin.
En el interior del condensador
existe un diafragma-iris cuya
funcin es limitar el haz de rayos
que atraviesa el sistema de lentes
eliminando los rayos demasiado desviados
LA OBSERVACION PUEDE SER AL SECO O A INMERSIN:
A SECO: es decir, no necesitan ninguna sustancia intermedia entre el
objetivo y la preparacin. Los hay de 10x, 20x, 40x.
Pequeo aumento :
Mediano aumento :
Gran aumento

menor de 10x
mayor de 10x y menor de 30x.
:
de 40x.

A INMERSIN: se denomina as porque para hacer uso de ellos, se requiere

aceite de cedro entre la preparacin y el objetivo, de igual manera de corregir
la desviacin del rayo luminoso por la superposicin de lentes.
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LABORATORIO 1

DISTANCIA FOCAL: Distancia que media entre la lente frontal y el objetivo

a observar:

Pequeo aumento :
Mediano aumento :
Gran aumento
Inmersin
:

entre 0,5 y 3 cm
entre 3 y 5 mm
:
entre 1 y 3 mm
entre 0,8 y 1,2 mm

Para determinar el aumento de cada sistema ocular objetivo. Se multiplica la cifra

del ocular con la del objetivo, se multiplica la cifra del ocular con la del objetivo, ambas
representan el aumento proporcionado por cada lente.
Utilice los objetivos secos para pequeos aumentos. A menor aumento se
requiere menor iluminacin, lo cual se consigue bajando el condensador y cerrando
parcialmente el diafragma Busque en todo caso la mayor nitidez.
La observacin de las muestras hmedas, o sea en fresco se hace con lentes de
menor aumento o sea sin inmersin; sta queda para las muestras coloreadas y en
general para aquellos casos en que se requiere la mxima cantidad de luz y se practica
con el auxilio del aceite de cedro u otra sustancia que tenga un ndice de refraccin
parecido.
PARA LA OBSERVACIN MICROSCPICA PROCEDA SEGN EL
SIGUIENTE ORDEN
a)
Ilumine empleando el espejo cncavo o plano; la eleccin depende de la
fuente de luz, aumentos empleados y otros factores.
b)
Enfoque de preferencia con la lente de menor aumento que por lo comn
tiene un tope inferior que impide la ruptura de las lminas a observar.
c)
Una vez enfocado el objeto haga rotar el revlver y utilice el objetivo
deseado. Sise va a usar el de inmersin coloque previamente una gota de aceite de
cedro sobre la preparacin y al colocarse la lente en posicin, debe crearse una
continuidad entre ella. La superficie de la lmina y el aceite de cedro. Para el enfoque
preciso, use el tornillo micromtrico.
Tenga ambos ojos abiertos durante la observacin aunque el microscopio sea molecular.
Al terminar la observacin, limpie el objetivo con un papel especial para lentes, o con
algodn o un lienzo fino. Si hay impregnacin de aceite, utilice xilol en pequea
cantidad y seque bien en cuanto consiga la limpieza deseada. Las lminas, una vez
observadas, se depositarn en un recipiente apropiado, el que contiene la mezcla
bicrmica, cuya composicin es:
Bicromato de potasio................................................... 100 grs
cido sulfrico................................................................100 grs
Agua destilada...............................................................1000 mlEsta mezcla es la empleada en los frascos en los que se desecha todo material
contaminado.
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AUTOCLAVE
La esterilizacin, tanto del material y medios frescos, como de los medios ya
usados que haya sufrido contaminacin, es un proceso esencial en todo laboratorio de
cultivo in vitro. Esta esterilizacin suele efectuarse con calor hmedo en unos aparatos
denominados autoclaves.
El autoclave es un instrumento habitual en los laboratorios de cultivo in vitro.
En esencia, un autoclave es un recipiente en el que se consigue exponer el material a
esterilizar a temperaturas superiores a la de ebullicin del agua, gracias a aumentar la
presin.

Esquema de autoclave

FUNCIONAMIENTO.
El proceso completo de esterilizacin en una autoclave se compone de diferentes fases:
FASE DE PURGADO. A medida que la resistencia calienta el agua del fondo
del caldern, se va produciendo vapor que desplaza el aire, hacindolo salir por la
vlvula de purgado que est abierta. Esta fase termina cuando se alcanza la
temperatura de esterilizacin.
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FASE DE ESTERILIZACIN. Una vez cerrada la vlvula de purgado y

alcanzada la temperatura de esterilizacin previamente seleccionada se inicia el
proceso de esterilizacin.
FASE DE DESCARGA. Terminado el proceso de esterilizacin, deja de
funcionar la resistencia calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presin
y temperatura del caldern empiezan a bajar poco a poco.

HORNO
Se llama tambin Horno de Pasteur o Poupinel, Esteriliza por medio de calor seco, se
utiliza para esterilizar material de vidrio, porcelana y tambin para objetos metlicos.
El material deber introducirse en el horno una vez limpio y seco, una vez introducido
hay que procurar que estos no toquen las
paredes de la estufa, porque alcanza
temperaturas muy altas una vez introducido el material, se cierra el horno y se
enciende, dejandolo calentar hasta 180 , dejndolo a estas temperaturas por espacios
de tiempo variables, dependiendo del tipo de material que se ha introducido. Una vez
transcurrido el tiempo deseado se apagar y se dejar enfriar totalmente antes de sacar
el material.

ASA BACTERIOLOGICA
El asa bacteriolgica es un instrumento de laboratorio tipo pinza que consta de una base
que puede estar hecha de platino, acero, aluminio y un filamento que puede ser de
nicromo, tungsteno o platino que termina o en aro o en punta. Se emplea para
transportar o arrastrar microorganismos de un medio a otro para su adecuado desarrollo,
as como para la realizacin de frotis

OTROS MATERIALES
o
CENTRFUGA: Aparatos de muy diversa capacidad que permiten separar una
sustancia en suspensin del lquido respectivo.
o
LA BALANZA: Se usa en Bacteriologa para pesar colorantes, componentes de
medios de cultivo, animales etc. Las hay de diferentes tipos segn su aplicacin y
sensibilidad. Las de gran sensibilidad son las llamadas de presin.
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o
BAO MARIA: Permite la accin de calor de un lquido sobre una sustancia de
menor temperatura a travs de un recipiente. Evita el calor directo. Se emplea entre
otras cosas. Para licuar medios y para inactivacin de sueros. Hay diversos modelos
segn su aplicacin.
o
AGITADORES MECNICOS: Diversos diseos y con frecuencia variable en
el nmero de veces que oscilan por minuto. Se utilizan para agitar tubos, frascos,
pipetas de Kahn y el rotador de Mazzini.
Tambin hay un agitador de aplicacin mltiple, que se llama agitador universal.
o
POTENCIOMETRO: Aparato destinado a determinar la concentracin de iones
H (pH) en una solucin. El mas perfeccionado es el de Beckman.
o
BOMBA DE VACIO: produce presin negativa y se utiliza de preferencia para
filtrar a travs de buja.
o
CONTADOR DE COLONIAS: (Quebec) Se utiliza para el recuento de colonias
en una placa de cultivo.
o
MATERIAL DE VIDRIO Es el mismo que se emplea en cualquier otro
laboratorio: Tubo de ensayo, balones, matraces, kitasatos, vasos, probetas, buretas,
pipetas, cajas de Petri, placas de Brewer, tubos de centrfuga, tubos de vidrio de
diverso calibre para pipetas Pasteur, jeringas, frascos goteros, lminas porta
objetos, lminas cubre-objetos, perlas de vidrio, termmetros, embudos, etc.
OTROS MATERIALES: Bujas para esterilizacin por filtracin, morteros,
lminas excavadas de porcelana, gradillas. Atencin especial merecen el mango
de Kolle y el aza bacteriolgica; el aza va fijada al mango por un tornillo; las
formas que se da a la extremidad libre del aza pueden ser: recta ( hilo o aguja),
circular o sea como anillo con diversos dimetros (se consiguen con el
calibrador de azas), en esptula y en ngulo recto. Se ha puesto en prctica el
empleo de una cucharilla de vidrio, fabricada en el Laboratorio y que sirve para
obtener muestras rectales, farngeas y vaginales.

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CONCLUSIONES
Es muy importante conocer el funcionamiento de los instrumentos del laboratorio
porque nos permite utilizarlos adecuadamente en un determinado experimento, con
precisin y eficacia.
Es importante conocer el funcionamiento del instrumento porque nos ayuda a
tomar las medidas necesarias para prevenir posibles riesgos fsicos , qumicos o
biolgicos
Es necesario conocer en detalle las parte del microscpico , ya que nos permite
maniplalo con mas seguridad y precisin al momento de ver un a muestra
biolgica.

RECOMENDACIONES
Preprese siempre anticipadamente para cualquier experimento atendiendo las
instrucciones del profesor sobre la prctica de laboratorio y haber estudiado la
gua.
No toque nunca los compuestos qumicos alcohlicos con las manos a menos
que se le autorice. Para manipularlos use esptula, cucharas, pinzas, etc. Lvese
las manos el entrar y al salir del laboratorio
Deje pasar bstame tiempo para que se enfri los vidrios y objetos calientes.
No se deben realizar experimentos no programados
Tomar nota de todo, los datos, observaciones y resultados experimentales
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Consultar al profesor por cualquier duda de la utilizacin del instrumento

Mantenga siempre limpia el rea de trabajo (mesa de trabajo) y no cargar su
mesa con material innecesario
Al terminar sus experimentos, la mesa y equipos utilizados deben quedar limpia
antes de salir del laboratorio. Cercioraste de que las llaves del gas y agua queden
perfectamente cerradas.

BIBLIOGRAFA

CARLOS E. ARMANS RAMIREZ, CIENCIA QUMICA TCNICAS

EXPERIMENTALES, 1 EDICIN , EDITORIAL E.I.R.L. TRUJILLO- LIMA,
1996
LUIS CARRASCO VENEGAS, QUMICA EXPERIMENTAL, 3 EDICIN,
EDITORIAL EDICIONES E IMPRESIONES GRAFICAS AMRICA S.R.L,
LIMA-PER, 1996
ENCICLOPEDIA MICROSOFT ENCARTA 2004.

www.liceodigital.com/cuarto/qumica4/agua. (2002). CAROLL, Uruguay.

www.geocities.com/madisonaveme/4364. (julio 2001) CHICN Juan y PREZ

Luciano.

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