OBJETIVOS

Al finalizar el laboratorio el estudiante estar en capacidad de reconocer

las diferentes partes del microscopio y utilizarlas correctamente.
El estudiante conocer los diferentes instrumentos y materiales usados
en el laboratorio de Microbiologa.
INTRODUCCION
La microbiologa es una ciencia muy interesante y fascinante y para su estudio
y comprensin es necesario efectuar algunas determinaciones prcticas para lo
cual es necesario el conocimiento y manejo de algunos materiales e
instrumentos de su uso comn.
Algunos de los instrumentos ms utilizados en los laboratorios, son elaborados
de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dixido de
silicio, bajo lcali, xido brico y vestigios de otros xidos, lo que condiciona su
escaso
coeficientede dilatacin, teniendo una gran aplicacin en la fabricacin de mat
eriales delaboratorio, uno de los ms conocidos es el vidrio PYREX. As como los
elaborados de distintos metales pesados como platino,' mercurio, aluminio,
cobre que les otorgan caractersticas como buenos conductores del calor o
porque al medio ambiente son muy manejables sin alterar su composicin.

Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros

como
el mechero Bunsen, son de los ms comunes en la mayora de los laboratorios
cientficos.

EL MICROSCOPIO
Un microscopio simple no es ms que una lente biconvexa, es decir solo tiene
un sistema de lentes, pero el microscopio compuesto emplea dos sistemas de
lentes separados, consiguiendo con ellos mayores aumentos. Al ser el
microscopio compuesto un instrumento fundamental en microbiologa, el
conocer los principios bsicos de la microscopia y la pericia en el empleo y la
manipulacin de este instrumento, son requisitos imprescindibles para casi
cualquier estudio en esta ciencia.
PARTE MECNICA DEL MICROSCOPIO
La parte mecnica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revlver, el
asa, la platina, el carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la
parte ptica y de iluminacin; adems, permiten los desplazamientos
necesarios para el enfoque del objeto.

El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio

y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular.

La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C,

unida a la base por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo
la inclinacin del tubo para mejorar la captacin de luz cuando se
utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el
extremo inferior se adapta al pie.

El tubo: tiene forma cilndrica . El tubo se encuentra en la parte superior

de la columna, enfoca el objeto mediante un sistema de cremalleras, las
cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos.

El tornillo micromtrico o macroscpico: girando este tornillo,

asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizndose en sentido
vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos
largos permiten el enfoque rpido de la preparacin.

El tornillo micromtrico o microscpico: mediante el ajuste fino con

movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la
platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva
acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza
para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca el objeto

que se va a observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que

permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin. La platina

puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede
ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o
producir movimientos circulares.

Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar el objeto.
Se encuentran en la platina.

El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se

enroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje
del tubo y se colocan en posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido
de un pin que lo fija.

SISTEMA PTICO
Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto
de lentes que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El
objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego ampla.

El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre

se debe a la cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como
funcin aumentar la imagen formada por el objetivo. Los oculares son
intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X.
Existen oculares especiales de potencias mayores a 20X y otros que
poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de
medir el tamao del objeto observado.

Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver

y producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y,
por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se examina. Los
objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y
objetivos de inmersin.

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar

sustancia alguna entre ellos y la preparacin. En la cara externa
llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen,
la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un objetivo
tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el
objetivo es planacromtico, su aumento 40 y su apertura
numrica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm.
El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a
que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms
frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.

El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado

sistema de lentes. Para observar a travs de este objetivo es

necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y

la preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto
con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X
y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que
rodea su extremo inferior.
SISTEMA DE ILUMINACIN
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera
que ilumine la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de
la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara

incandescente de tungsteno sobrevolada; en versiones ms modernas
con leds. Por delante de ella se sita un condensador (una lente
convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite
controlar el dimetro de la parte de la preparacin que queda iluminada,
para evitar que exceda el campo de observacin produciendo luces
parsitas.

El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida

dentro del microscopio y ya alineada con el sistema ptico, como suele
ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras: una
cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La
cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin artificial, y la
plana, para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no poseen
espejos sino una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo.

Condensador: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es

concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin,
formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del campo del
objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su lente superior
es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en
contacto con la preparacin cuando se usan objetivos de gran abertura
(los de mayor ampliacin); existen condensadores de inmersin, que
piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la
preparacin. La abertura numrica mxima del condensador debe ser al
menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr aprovechar
todo su poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente
sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo, bajndose para su
uso con objetivos de poca potencia.

Diafragma: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que

regula su abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de
manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo

ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucin del sistema

ptico.

MATERIAL DE VIDRIO
Constituye una de las principales herramientas para los fines que se persigue
en el laboratorio. Los requisitos necesarios para que un material sea un "buen
material", son:
1.Ser de buena calidad; es decir que no sean fcil de quebrarse.
2.Ser de color neutro.
3.Poseer resistenciaa las acciones mecnicasy a las variacionesdetemperatura
as como tambin a los lcali-libre (no se raje).
4.Poseer bajo coeficiente de dilatacin (que no pierda su forma).
TUBOS DE ENSAYO
Se emplean como recipientes de medios de cultivo.
-Tubos de prueba
Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin
rebordes para facilitar el taponamiento.
De 16 x 150 mm
De 15 x 125 mm
De 13 x 100 mm para estudio de fermentacin trabajos
mecnicos
De 10 x 75 mm pruebas, estudios serolgicos.
-Tubos de Roux
Con escotadura de 4 cm. de fondo, de 25 x 200 mm para
-Tubos de centrfuga
De vidrio, pueden ser cnicos o cilndricos, siempre de paredes gruesas,
De paredes gruesas, por estar inmersos rotando a alta velocidad.
De polietileno, se utiliza para centrifugaciones a altas velocidades, de medidas
semejantes a los anteriores.
CPSULAS O PLACAS PETRI:

Cajas cilndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el

cultivo y aislamiento de microorganismos. Las ms usadas son las de 10, 15
20 mm x 100 mm.

PLACAS BREWER:
Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaerbicos. Son idnticas a
las anteriores, con excepcin de las tapas que adems de ser ms pesadas
estn adaptadas para crear anaerobiosis.

PIPETAS:
Tubos cilndricos delgados terminados en punta, graduados al dcimo o al
centsimo de mI. Se emplean en la medicin de pequeas cantidades de
lquidos. Pueden ser:
Serolgicas: son terminales y con capacidad de 0.1 a 25 ml
Volumtricas: Se reconocen por presentar una dilatacin bulbosa central con
unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la
pipeta, se les llama tambin pipetas de bola, las medidas ms conocidas son
de 10, 25, 50 y 100 ml.

Pipetas Pasteur: Confeccionados de varillas de vidrio de dimetro de 4 x

20mm de 30 o 40cm de longitud. La calidad de vidrio debe facilitar
reblandamientos
a
la
accin
directade la llama del mechero, para conseguir por estiramiento la capilaridadd
eseada. Se emplea para la toma de pequeos inculos de siembra.

MATRACES Y ERLENMEYERS:

Recipientes de forma cnica y cuello corto, volumtricos tiles para la

preparacin y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de
cultivos, etc.

MATRACES AFORADOS O FIOLAS:

Recipientes de forma esfrica y base plana. Estn calibrados a
medidas exactas mediante un foro en la parte media del cuello
del
recipiente
en
el
quese indica la medida. Se emplean para la preparacin de reac
tivos de preferencia solucin buffer.
KITASATO:
Son frascos muy parecidos a los Erlenmeyers, se caracterizan por sus paredes
gruesas y por una tubuladura lateral en el cuello, la misma que sirve de
tabulacin lateral para hacer el vaco. Se utiliza

PROBETAS:
Recipientes graduados de forma cilndrica y capacidad variable, con base para
la esterilidad. Pueden estar graduada.

VASOS DE PRECIPITACIN O BEACKER:

Recipientes cilndricos y cortos, con una depresin en el margen de labocadura.
Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

FRASCOS
TEJIDO:

VIALES

PARA

HEMOCULTIVOS,

VACUNAS,

CULTIVOS DE

Son de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca

con capacidad para 50ml y 100ml blancos o de color mbar pueden utilizarse
para la reserva de soluciones y medios de cultivo en stock, previamente
taponados con algodn esterilizados,
MATERIAL DE OTRA NATURALEZA
Vstago de metal con una cubierta de ebonita aislante del calor y en el
extremo proximal una tuerca para insertar el alambre de plstico o necrn,
ASA DE KOLLE
Varillas metlicas o de vidrio que llevan en un extremo alambre de platino;
cuando el alambre es recto se llama Necrn y cuando el alambre forma un
anillo de dimetro variable en su extremidad toma el nombre de asa.
Esptulas de Metal con mango de madera
Estuches cilndricos o Cubculares
Mecheros de Bunsen
Canastillas o Cestos de Metal
Soportes Universales
Trpodes
EQUIPOS DE LABORATORIO
POTENCIMETRO:
Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de
un par de electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados
a un potencimetro que indique las mediciones, Los potencimetros emplean
un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estndar.

CENTRFUGAS:
Se utiliza en la separacin de slidos suspendidos en lquidos. Hay centrfugas
de tamao y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones
por minuto, La velocidad a la cual sedimentaran las partculas en un lquido
dependen de varios factores:
Tamao de la partcula.
El peso de la partcula.
La viscosidad del lquido.
La fuerza gravitacional.
BAOS DE AGUA
Tambin llamados BAO MARIA tienen salida de aire presentan un termostato
que regula la temperatura del agua presenta un piso para colocar los
materiales que se desea.

REFRIGERADORAS Y CONGELADORAS
Son incubadoras de temperatura fra menor de cero
grados y los frigideres de dos a siete grados.

ESPECTROFOTMETRO
Se puede observar los colores de los alimentos con una
intensidad que el aparto brinda.

AUTOCLAVE
Funciona por las presiones que se dar a una mayor temperatura logrando su
esterilizacin como por ejemplo las conservas.

ESTUFAS DE AIRE CALIENTE

Al igual que el anterior es utilizado en la esterilizacin
por el calor seco. Tienen solo dos paredes y son de forma cbica.

CUESTIONARIO:
1.- Para qu sirve el aceite de inmersin?
La funcin del aceite de inmersin es restringir el movimiento de la muestra,
adems de evitar el rozamiento entre el cubre objetos y el objetivo,
generalmente se lo utiliza cuando vamos a observar con el objetivo 100x. Otra
funcin del aceite de inmersin es evitar que la luz se desve; al contrario lo
que se pretende es que la luz llegue concentrada hacia la muestra.

2.- 10 tipos de microscopios:

-Microscopio de iones en campo
El microscopio de iones en campo es una variedad de microscopio que puede
ser usado para visualizar la ordenacin de los tomos que forman la superficie
de la punta afilada de una aguja de metal.
-Microscopio ptico
Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se
le conoce como microscopio de luz.
-Microscopio petrogrfico
Esta adaptado mediante luz polarizada plana, para realizar estudios de las
preparaciones microscpicas de los suelos.
-Microscopio de fluorescencia
En este tipo, la lente que comnmente es de vidrio es remplazada por lentes
de cuarzo, mientras que la iluminacin es efectuada por medio de lmparas de
mercurio

-Microscopio digital
Entre los microscopios electrnicos modernos, se encuentran los digitales, que
poseen cmaras y pantallas del tipo LCD o estn conectados a una
computadora
-Microscopio de campo oscuro
Es un microscopio que utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de
un cono hueco concentrado sobre el espcimen.
-Microscopio de efecto tnel
Es un instrumento para tomar imgenes de superficies a nivel atmico.
-Microscopio de fuerza atmica
Es un instrumento mecano-ptico capaz de detectar fuerzas del orden de
los nanonewtons.
-Microscopio confocal
Es un microscopio que emplea una tcnica ptica de imagen para incrementar
el contraste y/o reconstruir imgenes tridimensionales utilizando un "pinhole"
espacial
-Microscopio de contraste de fases
Permite observar clulas sin colorear y resulta especialmente til para clulas
vivas.
3.- Dibujar un microscopio y poner sus partes