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Materiales y Mtodos
En una primera fase se evaluaron envases, substratos y soluciones
nutritivas, de bajo costo y muy prcticos, que permitieran el crecimiento
autotrfico del material y en donde se manifestaran las ventajas citadas
de esta tcnica. En una segunda etapa se busc un mtodo que
permitiera el repique de las plntulas obtenidas autotrficamente, para lo
cual se evaluaron microesquejes de distinta ubicacin en la planta madre
segn su capacidad de regeneracin, adaptabilidad al trasplante y
produccin de minitubrculos.
Materiales
Se utilizaron plntulas in vitro obtenidas segn los protocolos
recomendados por CIP (Lizrraga R, et al., 1991) las que se
micropropagaron en tubos de ensayo (10 cm x15 mm) conteniendo 4 mL
de medio. Durante la primera etapa se trabaj con las variedades Spunta y
Kennebec y se corroboraron los resultados obtenidos en otros 10
cultivares. En la segunda parte se trabaj con la variedad Frital INTA.
PRCTICA 6
EMBRIOGNESISSOMTICAAPARTIRDECALLODEMAZ
INTRODUCCION
Un embrin es la estructura ms temprana en fase multicelular de un
individuo que aparece antes de que ste desarrolle todas las estructuras y
rganos caractersticos de la especie a la que pertenece. En las plantas
estamos familiarizados con los embriones que se forman dentro de las
MATERIALYMTODOS
Material vegetal: callo embriognico de la lnea pura de maz A188 obtenido
a partir del cultivo de embriones inmaduros (1-2 mm longitud) en medio de
callognesis (sales minerales y vitaminas N6, 2,8 g/l prolina, 100 mg/l
casaminocidos, 1 mg/l 2,4-D, 10 M nitrato de plata, 2 g/l gelrite, pH 5,7).
El callo se mantiene en oscuridad a 28C.
Porciones de unos 5 mm del callo embriognico se cultivan en el medio
REGEN I. Las placas se sellan con esparadrapo poroso. Tras 3 semanas en
oscuridad y 28C se diferenciarn estructuras blanquecinas en la superficie
del callo que corresponden a los embriones madurados.
Se subcultiva todo el material en medio REGEN II. Se mantienen las placas
en fotoperiodo de da largo donde germinarn los embriones en 2-3
semanas.
Las plntulas desarrolladas se individualizan con cuidado y se cultivan
separadamente para que enracen y adquieran vigor en el medio
ENRAIZAMIENTO, dispensado en cajas Magenta. Las plantas bien
desarrolladas pueden trasplantarse, de modo similar a lo realizado con las
plantas de patata.
MEDIOS DE CULTIVO
REGEN I
REGEN II
ENRAIZAMIENTO
Macro y micronutrientes
MS
MS
MS/2
Vitaminas
MS
MS
MS/2
Myo-inositol (mg/L)
100
100
Sacarosa (g/L)
30
60
20
Gelrite (g/L)
2.5
RESULTADOS.PARMETROSAMEDIR