UNIVERSIDAD NACIONAL

AGRARIA LA MOLINA
LABORATORIO BIOQUMICA

PRCTICA N 3

PREPARACIN DE SOLUCIONES BUFFERS

PROFESORA: Paola Jorge Montalvo

ALUMNOS:
Trinidad Vivanco Gean Pierre
Figueroa Garca Aarn Josu

LIMA - 2015
INTRODUCCIN

Las soluciones amortiguadoras tienen la capacidad de impedir cambios bruscos

de pH. Su uso es muy amplio comenzando por nuestro organismos que a travs
del buffer fosfato y bicarbonato permiten la estabilidad corporal,
en los
ecosistemas es empleado para estabilizar el pH de los lagos que son afectados
muchas veces por derrames cidos, en los laboratorios como los de microbiologa
mantienen el pH ptimo de un determinado cultivo y en procesos industriales en
la elaboracin del cuero, tintes, fermentacin, entre otros. De ah la necesidad de
conocer el mecanismo de accin y su preparacin, que se adapte a las
necesidades adecuadas mediante clculos que nos brinden la solucin ante
nuestra necesidad. A continuacin se desarrollar la elaboracin de un buffer
partiendo de lo terico a lo prctico, sustentando su fundamentacin.

TRABAJO ENCARGADO
1) Si representamos un sistema amortiguador como:
HA H+ + AA medida que aumenta el pH:
a) Aumenta el H+ o el OHSi el pH aumenta entonces es porque el sistema se hace ms bsico por lo cual
la concentracin de (OH)- aumenta.
b) Que componente resiste el cambio
La concentracin de H+
C) Y a medida que el pH disminuye Qu componente resiste el cambio?
La concentracin de A+
2) Calcule la proporcin de iones H2PO4-que se disocian a pH 7,9
(pKa2 = 7,2)
pH = pKa + log (concentracin molar HPO 42- / concentracin molar H2PO4-)
pKa2= 7.2
7.9 = 7.2 + log (concentracin molar HPO42- / concentracin molar H 2PO4-)
[HPO42-]/[H2PO4-] = 5.01
Se encuentra la siguiente proporcin: Por cada 1 mol de H2PO4- se encontrar
5.0118 moles de HPO42- en 1 L de solucin.
3) Calcule la proporcin de HPO42- que se disocia a pH 5.2 (pKa = 7.2)
pH = pKa + log (concentracin molar HPO42- / concentracin molar H 2PO4-)
pKa2= 7.2
5.2 = 7.2 + log (concentracin molar HPO 42- / concentracin molar H2PO4-)
[HPO42-]/[H2PO4-] = 0.01
Se encuentra la siguiente proporcin: Por cada 1 mol de H2PO4- se encontrar
0.01 moles de HPO42- en 1 L de solucin.
4) Se dan las siguientes soluciones madre: NaCl 1M, Na 2HPO4 100mM y
NaH2PO4 100mM Qu cantidad de soluciones madre y de agua
destilada empleara para producir 1 litro de solucin experimental de
NaCl 120mM tamponada de 3mM en total de iones fosfato con un pH
de 7,5 (pka1= 7.2; pKa3= 12.4)

7.5 = 7.2 + log (concentracin molar HPO42- / concentracin molar H2PO4-)

[HPO42-]/ [H2PO4-] = 1.995 aproximadamente 2------------------- donde se
obtiene que
[HPO42-]=2[H2PO4-]
litro de solucin.

usando el dato: [HPO42-]+ [H2PO4-] = 3 milimoles/

[HPO42-] = 2 milimoles y [H2PO4-] = 1 milimol

Usando los datos dados en el ejercicio:
100 milimoles HPO42- ------------------------------1000 mL de solucin
2 milimoles HPO42-

------------------------------ Vol sal = 20 mL

100 milimoles H2PO4-------------------------------1000 mL de solucin

1 milimoles H2PO4- ------------------------------ Vol acido = 10 mL
Concentracin de NaCl 120 mM, se tiene NaCl 1 M
1000 milimoles NaCl -------------------------------- 1000 mL de solucin
120 milimoles NaCl -------------------------------- V sol = 120 mL
Por lo tanto se necesitara:
10 mL de H2PO4- de 100 mM, 20 mL de HPO42- de 100 mM y 90 mL de agua
para poder completar el volumen de solucin requerido en este ejercicio.
5) se prepara un tampn mezclando 500 ml de Na2HPO4 0.5 M y 500
ml de NaH2PO4:
a) Calcular el PH
b) Calcular el cambio de PH si se aaden 10 ml de HCL 1M.
Se halla el PH:
PH = PKa + log ( S / A)
PH = 7.2 + log ( 0.5 / 0.2)
PH = 7.6

Se halla la cantidad de moles de cido clorhdrico adicionado:

1 mol
X

1000 ml
10ml

X = ( 1 mol )(10 ml) / (1000 ml)

X = 0.01 mol de HCL.

Se plantea la ecuacin para hallar la cantidad de moles despus de

adicionar el cido clorhdrico.
ACIDO
SAL
NaH2PO4 + Na2HPO4 + HCL
Na2HPO4

0.2
(0.5 0.01)

0.5

NaH2PO4

0.01

(0.2 + 0.01)

Se halla las concentraciones molares:

CONCENTRACION MOLAR DEL ACIDO:
Cantidad de fosfato monobsico : 0.2 + 0.01 = 0.21 moles
0.21 moles
X

110 ml
1000 ml

X = (0.21 moles)(1000 ml) / (110 ml)

X = 1.9
CONCENTRACION MOLAR DE LA SAL:
Cantidad de fosfato dibsico : 0.5 0.01 = 0.49 moles
0.49 moles
X

110 ml
1000 ml

X = (0.49 moles)(1000 ml) / (110 ml)

X = 4.5

Se aplica la ecuacin Henderson Hasselbalch

PH = PKa + log ( S / A)
PH = 7.2 + log (4.5 / 1.9)
PH = 7.6

6) Cul es la composicin de un amortiguador fosfato 0.05 molar de

pH 7.5 expresado en g/L de sales sdicas anhidras?
Amortiguador fosfato ([HPO42-]/ [H2PO4-]) pH = 7.5
7.5 = 7.2 + log ([HPO42-]/ [H2PO4-])

[HPO42-]=2[H2PO4-]

[HPO42-]+ [H2PO4-] = 0.05 moles

[HPO42-] = 0.0333 moles/ L y [H2PO4-] = 0.0166 moles/ L

Pesos molecular del Na2HPO4 = 142 g/mol

Pesos molecular del NaH2PO4 = 120 g/mol
[Na2HPO4] = 0.0333 moles x 142 g / mol / L y [NaH2PO4] = 0.0166 moles x
120 g /mol/ L
[Na2HPO4] = 4.7286 g / L y [NaH2PO4] = 1.9992 g / L

7) Que pH tiene una solucin que resulta de mezclar 58mL de {acido

cianhdrico 0.1M con 22mL de cianuro 0.08M si la constante de cidez
es Ka= 7,2x10-10?
moles de HCN = 0.1 M x 58 mL = 5.8 milimoles
moles de NaCN = 0.08 M x 22 mL = 1.76 milimoles
Ka = 7.2 x 10-10

--------------------------------

p Ka = 9.14

pH = 9.14 + log ([CN-]/ [HCN]) --------------------- log ([CN-]/ [HCN]) = -0.5179

pH =8.62

RESULTADOS
Buffer 3:
pKa= 7.2

pH= 7.4

[Buffer]= 0.05 M

FOSFATO MONOBASICO (PM= 119.98)

FOSFATO DIBASICO

0.1M

pH= pKa +log [S]/[A]

7.4= 7.2+log[S]/[A]
0.2=log [S]/[A]
1.58[A]=[S]
[S]+[A]= 0.05
1.58[A] +[A]= 0.05
[A]= 0.019
[S]= 0.030
SAL CONJUGADA
1.1 mol------1000 mL
0.030 mol------x mL
X= 30 Ml

CIDO
W/PM=n
W= 0.019x119.98
W=2.28 g

Interpretacin del resultado

Se requiere 30 ml de fosfato Dibsico y 2.28 g de fosfato monobsico para obtener
un sistema buffer con las caractersticas deseadas.

DISCUSIN

Segn D. voet (2007) El sistema amortiguador fosfato est compuesto por una
base dbil, el fosfato dibsico de sodio, y un cido tambin dbil, el fosfato
monobsico de sodio. Si se aade un cido fuerte al medio donde se encuentre
este sistema, reacciona con el componente bsico del mismo, el fosfato dibsico
de sodio, dando lugar al fosfato monobsico de sodio ms cloruro de sodio. Es por
ello que cuando se aade una base fuerte al sistema, como el hidrxido de sodio,
sta reacciona con el componente cido del mismo, el fosfato monobsico de
sodio, dando lugar al fosfato dibsico de sodio y agua.
Segn Chang (2010) La capacidad amortiguadora de un buffer depende de la
cantidad de cido y de base conjugada cuanto mayor sea la cantidad mayor ser
la capacidad amortiguadora. Este sistema tiene una pKa de 6.8, mucho ms
cercana a los valores normales del pH de los lquidos corporales, por lo que tiene
mayor poder amortiguador que el sistema de bicarbonato; sin embargo la poca
cantidad en que se encuentra en el lquido extracelular determina su poca
importancia en este medio.

CONCLUSIONES:
El sistema amortiguador fosfato est compuesto por una base dbil, el
fosfato dibsico de sodio, y un cido tambin dbil, el fosfato monobsico
de sodio.
El buffer fosfato es ms eficiente respecto al carbonato debido a su
proximidad al pH de los lquidos corporales.
Segn lo desarrollado en laboratorio se puede considerar un sistema como
amortiguador solo si el pKa est dentro de un rango cercano al pH
deseado.

Bibliografa:
D.Voet, JG Voet, CW Pratt. 2007. Segunda edicin. Fundamentos de
Bioqumica. Editorial Mdica Panamericana.Espaa.
Chang Raymond. Quimica general. Mcgraw Hill. Dcima edicin. 2010