BIOLOGA FORENSE

I.

GENERALIDADES
Locard, sostiene que al malhechor le es imposible actuar sobre
toda la intensidad que supone el hecho delictuoso, sin dejar indicios
de su paso. Efectivamente, es natural que esto suceda, de ah que
siempre el delincuente deja lo que ha dado en llamarse su "tarjeta de
visita", el cual puede hallarse en el lugar de la escena como restos
orgnicos o biolgicos pertenecientes a la vctima o a los
delincuentes. Estos restos por su naturaleza, son susceptibles a
descomposicin o desnaturalizacin por agentes fsicos, qumicos y
microbiolgicos del ambiente; motivo por el cual, el perito bilogo
tiene que tener muy en cuenta que "El tiempo que pasa es la verdad
que huye", para realizar las diligencias periciales en forma oportuna,
con resultados eficaces y tiles.
Si se toma en cuenta el concepto general de la Biologa como
"Ciencia que estudia al ser viviente y su relacin con el medio
ambiente", entonces se deduce que la Biologa, es la ciencia que
estudia la "vida"; como tal, las mltiples formas que pueden adoptar
los seres vivos, as como su estructura, funcin, evolucin,
crecimiento y relaciones con el medio ambiente. La Biologa es una
ciencia muy amplia que de ninguna manera puede dominarla un slo
hombre, ni es posible exponerla en forma completa en un slo libro.
Dentro de esta ciencia existen diferentes especialidades, una de las
cuales es la BIOLOGA FORENSE, que ha experimentado avances en la
Criminalstica con la aplicacin de sus diversas reas, tales como la
Hematologa, Espermatologa, Tricologa, Microbiologa, Bioqumica,
Biologa Molecular, Inmunologa, Botnica, Zoologa, Ecologa, etc.
La Biologa Forense es la aplicacin de los conocimientos de las
Ciencias Biolgicas en la Criminalstica, mediante el estudio
sistemtico de las huellas o indicios biolgicos dejados por el autor o
vctima, para identificar los indicios objetivos del hecho delictuoso,
determinar su relacin con ste, con la finalidad de apoyar tcnico
cientficamente en la solucin de problemas policiales y judiciales.
La Biologa Forense, coadyuva al esclarecimiento de delitos
como lesiones, homicidios, violaciones sexuales, abortos criminales,
secuestros, asaltos y robos, terrorismo, atentados a la salud por
contaminacin de alimentos y bebidas, delitos econmicos,
ecolgicos, etc.; asimismo en la identificacin de personas o
cadveres desaparecidos en desastres, mediante anlisis de manchas
de sangre, semen, pelos, restos de tejidos orgnicos, secreciones y
excreciones orgnicas en prendas de vestir, instrumentos materia del
delito, en personas, cadveres y en el lugar de
los
hechos;
identificacin
de
restos y especmenes animales y vegetales
relacionados con hechos delictuosos, exmenes microbiolgicos y

parasitolgicos en alimentos, bebidas, muestras ambientales y otros

exmenes especiales biolgicos; interviene tambin en la
identificacin de autores del crimen, personas o cadveres
desaparecidos en desastres y en la solucin de casos de filiacin y
paternidad, mediante la determinacin de la huella gentica de
individuos por estudio del ADN (cido Desoxirribonucleico).

II. ALCANCES DE ESTUDIO

A. SEGN EL OBJETO DE ESTUDIO
1. EN PERSONAS Y CADVERES
Se determina los caracteres antropofsicos tales como
edad, sexo, raza, color de piel, estatura, contextura, cejas,
forma de nariz, tipo de cabellos, etc., con fines de identificacin
asimismo examen en el cuerpo y sus prendas de vestir
(bsqueda de restos sanguneos, pelos, semen, sarro ungueal,
tierra, restos vegetales, etc.)
Las prendas con evidencias biolgicas tales como manchas
de sangre, semen, sudor, saliva, moco, pelos y otros restos,
debern ser remitidas posteriormente al Laboratorio para
completar el anlisis.
2. INSPECCIN TCNICO CRIMINALSTICA
Consiste en la concurrencia del perito Bilogo o persona
tcnica, versada en la especialidad, al lugar del delito a fin de
verificar objetivamente y desde el punto de vista tcnico los
indicios que hubieran en la escena del crimen, para luego con
atencin sistemtica, recogerlos, trasladarlos o remitirlos al
Laboratorio, protegindolos del contacto de cualquier elemento
extrao.
Esta inspeccin biolgica se lleva a cabo en:
a. LUGARES DE AMBIENTES CERRADOS O INMUEBLES
Generalmente son viviendas, en estos casos se
inspecciona
cuidadosamente
las
entradas,
salidas,
muebles, cadveres y heridos si lo hubieren, prendas,
techos (por donde el agresor ingres o sali), etc.
Se inspeccionarn especialmente los baos o servicios
higinicos por donde el delincuente puede haber tratado de
deshacerse del elemento acusador.
b. LUGARES ABIERTOS O A LA INTEMPERIE
Es tambin posible encontrar elementos biolgicos,
siempre y cuando las condiciones ambientales no los
hayan
destruido
o
no
se
les
haya
protegido

convenientemente. Los elementos biolgicos es posible

hallarlos sobre las piedras, hojas de arbustos, pastos, tierra,
tronco de rboles, etc. Algunas piedras por su porosidad
absorben la sangre, que puede encontrarse por mucho
tiempo despus de ocurrido el hecho.
Tambin esto sucede cuando la sangre cae en lugares
poco transitados, o cuando la coagulacin se fija en la
tierra.
c. EN VEHCULOS
Despus de la descripcin completa del vehculo
(marca, color, placa de rodaje, tipo, etc,) se procede a
inspeccionar primero la parte externa (se incluye
neumticos, parachoques y tolvas en casos de camin y
camionetas), luego la parte interna, para el inicio del cual
preferentemente se ingresar por la puerta del chofer,
posteriormente
los
dems
lugares;
asimismo
se
inspeccionar las maleteras.
3. EN MUESTRAS
Constitudas principalmente en prendas de vestir,
instrumentos, armas, metales, vidrios, tierras, restos de
animales, vegetales y otros. Se describirn las mismas; luego
se buscan y se analizan los elementos biolgicos encontrados.

Foto N 187.- Inspeccin bio-criminalstica en el lugar de los hechos, donde

se aprecia un cadaver, arma de fuego, manchas, pardo-rojizas tipo charco y
gateo.

A. SEGUN EL CAMPO
1. EN LO CIVIL
Para la determinacin de paternidad, fertilidad y filiacin.
2. EN LO PENAL
Exhumaciones, reconstrucciones, etc.
3. EN LO LABORAL
Mediante la determinacin de contaminacin ambiental o
alimentaria.
4. EN LO ECOLGICO
Para el estudio de muestras ambientales tales como agua, aire,
suelo o tierra, etc.; estudio de especmenes de animales y
vegetales y evaluacin de medios ambientes y de ecosistemas.

III. REAS PERICIALES

La Biologa Forense practica anlisis bioqumicos y morfolgicos
de la sangre, semen, orina, saliva, meconio, etc.; examina restos de
tejidos humanos, especmenes animales, vegetales, alimentos, aguas,
bebidas y otros indicios. Estos anlisis se realizan en sustancias
lquidas, manchas frescas o secas, sustancias slidas, formas
vivientes y otros.
La Biologa Forense comprende las siguientes reas periciales de:
. Hematologa
. Espermatologa
. Fanerologa
. Microbiologa e Inmunologa
. Entomologa
. Ecologa
. Biologa Molecular
. Anlisis Especiales
A. PERICIAS DE HEMATOLOGA
1. CONCEPTO DE HEMATOLOGA FORENSE
Es la aplicacin Criminalstica de la morfologa,
serologa y bioqumica de la sangre. Abarca tanto el
aspecto reconstructor como identificador en el terreno

policial, penal y civil. En ste ltimo caso, en lo que se

refiere a filiacin y paternidad.
2. VALOR CRIMINALSTICO
La sangre es una de las evidencias ms frecuentes e
importantes encontradas en la investigacin criminal,
despus de las huellas dactilares.
En la investigacin de manchas de sangre, en lo que
respecta al aspecto identificatorio, los procedimientos que
se siguen son los siguientes:
a. Diagnosticar y precisar la naturaleza sangunea de la
mancha (si es o no sangre)
b. Diagnosticar o precisar si es humana o de animal (can,
ave, pez, etc.)
c. Si la sangre es humana precisar a que grupo de
individuo corresponde (grupo A, grupo B, grupo AB o
grupo O)
d. Parte del organismo de donde procede (epistaxis=
nariz; menstrual = tero; hemoptisis = pulmones; etc.)
e. Cantidad de sangre de que se compone la mancha.
f. Tiempo o data de producida la mancha de sangre.
g. Precisar sexo y edad del individuo del cual procede la
mancha; asimismo determinar el estado de ayuno
prolongado (huelgas de hambre) y la determinacin de
la procedencia del sujeto (sujeto andino o costeo),
stas cuatro ltimas determinaciones se realizan muy
espordicamente y requieren de un estudio prolongado
y costoso.
El aspecto reconstructor se lleva a cabo en la escena
del delito, en las prendas, instrumentos materia del delito,
sobre el cuerpo de las personas y/o cadveres, etc.; en
cambio, el aspecto identificador de la sangre se realiza en
el laboratorio, porque se efectan exmenes y anlisis
biolgicos especiales y que por la delicadeza de los
mtodos, equipos e instrumentos empleados, as como del
tiempo que requieren, no pueden verificarse en el lugar de
los hechos.
La bsqueda debe hacerse en el escenario del delito
revisando minuciosamente todas las superficies y los
objetos que en l se encuentren. Las manchas pueden
hallarse en la vctima, en el piso, en los insterticios, entre
las tablas, en las paredes, sobre alfombras o debajo de
stas, en cortinas, armas, puertas, prendas, etc.
En ocasiones, las manchas se encuentran fcilmente.
Otras veces, es difcil su ubicacin, sobre todo cuando se ha
intentado removerlas mediante lavado o debido a la

naturaleza y color de la superficie sobre la cual se hallan.

La iluminacin con diferentes luces y, a distintos ngulos,
puede ayudar a la ubicacin.
Existen sustancias orgnicas e inorgnicas que tienen
semejanza con la sangre. En este caso la diagnosis
Criminalstica es de mucha importancia para llevar
investigacin a un resultado positivo. Entre estas sustancias
orgnicas tenemos algunos vegetales como la mora. fresa,
betarraga, ltex llamado sangre de grado, el carmn
(extrado de la cochinilla), vino, etc. Entre las sustancias
qumicas: el aseptil rojo, tintura de yodo, anilinas, etc.
3. ASPECTO RECONSTRUCTOR
a. COLOR DE LAS MANCHAS DE SANGRE
Una manchas seca, pero relativamente fresca, es de
un color rojo intenso y de aspecto brillante.
El brillo desaparece bajo la accin de la luz solar,
calor y diferentes condiciones atmosfricas hacindolas
de aspecto polvoriento, deslustradas, resquebrajadas y
ms plidas. Sobre tejidos, el brillo es a menudo menos
visible.
b. TIPOS DE MANCHAS
Las manchas de sangre pueden presentarse en las
siguientes variedades:
(1) De tipo proyeccin (gotas, salpicaduras).
(2) De escurrimiento (charco, reguero, rebaba).
(3) De contacto (las ms importantes
son las
impresiones sangrantes de los dedos, manos y
pies).
(4) De limpiamiento (tentativa del limpiado o
enjuagado de un soporte)
(5) De tipo impregnacin (porque traspasa la textura
del soporte)
c. FORMA Y POSICIN DE LAS MANCHAS
El dimetro de una mancha de sangre slo tiene
valor en la estimacin de la distancia de cada cuando
ste es inferior a 1,5 metros. Ms all de este valor, la
variacin en el dimetro es demasiado reducida como
para ser confiable.
El aspecto de los bordes de la macha slo es
verdadero
cuando
se
tienen
en
cuenta
las
caractersticas de la superficie sobre la que ha cado la

sangre. Son vlidas las correlaciones entre manchas

desconocidas y patrones, slo si se usan idnticas
superficies de impacto. Cuando ms burda y spera es
la superficie, mayor es la posibilidad de que la gota se
rompa.
Cuando las gotas caen perpendicularmente sobre
una superficie lisa y horizontal a una distancia menor
de 50 cm. su forma es circular con los bordes lisos.
Cuando la altura esta comprendida entre los 50 y 100
cm. los bordes ya se presentan en forma festoneada; a
una altura entre 100 y 150 cm. los mismos son ms
aguzados, producindose proyecciones radiales (o
gotas satlites) a una mayor altura.
Cuando las gotas caen verticalmente sobre un
plano liso y oblicuo, las manchas se alargan, tanto ms
cuanto ms agudo sea el ngulo de cada. Su forma, en
cambio, no depende de la altura ni del volumen de la
gota. La relacin longitud/anchura de la gota permite
calcular con aproximacin suficiente cual ha sido el
ngulo de cada.

Foto N 188 .- Prendas de vestir con manchas

sanguineas de tipo impregnacin con talco y
escurrimiento, con predominio en la parte anterior
derecho del polo.

4. ASPECTO IDENTIFICADOR
a. PRUEBAS DE ORIENTACIN
Tienen valor como ensayos de orientacin, pero no
aseguran la presencia de sangre. Se realizan no
solamente cuando hay suficiente cantidad de muestra,
para no dificultar la realizacin de las pruebas de
certeza, especificidad y tipificacin de grupo.
Los ensayos preliminares son pruebas rpidas y
basadas en la actividad de la peroxidasa que posee el
grupo hemo de la hemoglobina de la sangre y que, en
presencia de agua oxigenada y de ciertos reactivos
orgnicos dan lugar a la aparicin de coloraciones o
luminiscencia que orientan sobre la posible existencia
de sangre en las muestras analizadas.
Si el resultado de los ensayos preliminares es
negativo, la mancha no contiene sangre en cantidades
detectables como para permitir su posterior anlisis. Si
el resultado es positivo, se requiere continuar con los
ensayos para confirmar su presencia.
Dentro de los ensayos preliminares, los ms conocidos
son:
(1) Investigacin de la catalasa de Vandervelde o
hemasa de Senter.- Conocida tambin con el
nombre de reaccin de Schoenbein, se basa en el
principio
en
que
el
agua
oxigenada
es
descompuesta fcilmente por un fermento que se
encuentra en la materia colorante de la sangre. El
oxgeno puesto en libertad remonta a la superficie
en forma de pequeas burbujas formando una
espuma blanquecina. Este fermento se llama
catalasa o hemasa.
(2) Reaccin de Thevenon-Roland.- Color violeta, da
esta reaccin si es positiva. Su reactivo se compone
de una solucin alcohlica acuosa de piramidn a
las que se agregan unas gotas de cido actico, lo
que facilita la reaccin (alcohol, 50 gramos;
piramidn 2,50 gramos)
(3) Reaccin de Adler.- Reactivo: Solucin saturada
de bencidina en alcohol de 96 o en cido actico.

Se utiliza agua destilada y unas gotas de agua

oxigenada. Se altera pronto, siendo preferible
prepararla en el momento de su uso. La coloracin
violeta es al instante, puesta en contacto con la
sangre.
Su sensibilidad es
recomienda
su
uso
carcingenas.

de 1/200,000. No se
por
sus
propiedades

Las reacciones preliminares pueden dar falsos

positivos; es decir, resultados positivos producidos
por sustancias diferentes de la sangre, como por
ejemplo:
(4) Oxidantes qumicos Se pone de manifiesto esta
interferencia, pues sin el agregado de agua
oxigenada ya se observa cambio de color.
(5) Sales de cobre y nquel Interfieren slo en
soluciones concentradas. Una coloracin dbil
aparece antes del agregado de agua oxigenada y se
intensifica lentamente despus del mismo. La
reaccin es todava incompleta a los 15-20 minutos.
(6) Peroxidasas vegetales Son las de mayor
incidencia en la produccin de falsos positivos.
b. PRUEBAS DE LA CERTEZA
Son ensayos especficos que certifican la existencia
de sangre en la mancha investigada.
(1) MTODOS MICROSCPICOS
Consiste en la observacin de elementos
figurados de la sangre. La observacin de los
glbulos rojos (eritrocitos) y glbulos blancos
(leucocitos) en sangre fresca no ofrece problemas,
pero pueden presentarse en manchas de sangre
seca.
Esta observacin puede verse afectada por
diferentes circunstancias: la naturaleza del sustrato
sobre la cual se encuentra la mancha, la antigedad
de la misma, el dao originado por el manipuleo y la
putrefaccin que causar la destruccin de los
elementos figurados.
Cuando la sangre se deposita sobre un objeto
en una fina capa y se deseca rpidamente, es

cuando mejor se observan, tanto los glbulos

blancos como los rojos.
(2) MTODOS CRISTALOGRFICOS
Consisten en la preparacin y observacin
microscpica de cristales obtenidos por accin de
ciertos reactivos sobre la hemoglobina de la sangre.
Entre los ms conocidos tenemos:
(a) La prueba de Teichmann.- Consiste en la
cristalizacin caracterstica del Clorhidrato de
hematina (hemina), bajo la forma de cristales
rombodricos de color caf, utilizando cido
actico glacial con vestigio de cloruro de sodio.
Esta prueba da buenos resultados an con
manchas antiguas y con muy pequea cantidad
de sangre.
(b) La prueba de Takayama.- Es especfica y esta
basada en la obtencin de los cristales de
piridina-hemocromgeno como consecuencia de
la accin del reactivo sobre la hemoglobina de
la sangre, presente en la muestra.
El reactivo consiste en una mezcla de piridina,
solucin saturada de glucosa y solucin de
hidrxido de sodio. Los cristales obtenidos son
de color rosado
(3) MTODOS CROMATOGRFICOS
Se basa en la obtencin del mismo Rf
caracterstico para un extracto de la muestra y
testigo de sangre, ambos sembrados sobre papel
para uso cromatogrfico o sobre placa delgada.
(4) MTODOS MICROESPECTROSCPICOS
Consiste en observar el espectro de absorcin
de la oxihemoglobina, con un microscopio provisto
de un ocular microespectroscpico, en lugar del
ocular corriente.
Cuando la muestra de sangre es fresca, el
mtodo no ofrece problemas siempre que se
disponga de la cantidad suficiente; pero si la
mancha es antigua, la hemoglobina se habr
transformado parcialmente en metahemoglobina,
hematina y hemocromgeno. Cada una de estas

sustancias
da
un
espectro
de
absorcin
caracterstico, dificultando la observacin.
Actualmente este mtodo ha sido desplazado
por los mtodos cristalogrficos.
c. PRUEBAS DE ESPECIFICIDAD
Una vez realizadas las pruebas confirmatorias de
sangre, debe efectuarse la investigacin del origen
humano o de otra especie al cual pertenece la muestra.
Hay factores que pueden afectar la posibilidad de
asegurar el origen de la sangre. Entre los ms
importantes son: antigedad de la mancha, accin del
sol, humedad, putrefaccin desarrollo de hongos, altas
temperaturas, lavado y la naturaleza de la superficie en
la que se encuentra la sangre.
Existen dos formas de realizarlas:
(1) Fsicas o microscpicas.- La presencia de
glbulos rojos en una muestra ha sido de valor ya
que el tamao y la morfologa de los mismos
difieren entre ciertas especies.
Los glbulos rojos del hombre, como los de caso
todos los mamferos, son circulares y sin ncleo, a
excepcin de los del camello y otros relacionados,
como los de la llama, que son ovales, pero tambin
sin ncleo.
Las aves, reptiles y peces, poseen glbulos rojos
nucleados y de mayor tamao que el de los
humanos.
Mediante estos datos es posible constatar que la
sangre en cuestin no puede pertenecer a
determinadas especies, quedando las mismas
excludas.
(2) Biolgicas o Inmunolgicas.- Consiste en una
reaccin antgeno-anticuerpo, y como la misma se
visualiza con la obtencin de un precipitado, se
conoce
con el nombre de ensayo de las
precipitinas. Desde el principio de esta centuria, se
sabe que es posible distinguir la sangre de
diferentes
animales por
medio de
sueros
precipitantes.
d. TIPIFICACIN DE MANCHAS DE SANGRE

El fenmeno hoy da ms caracterstico de la

individualidad es el de la isoaglutinacin. De todas las
propiedades biolgicas que se han podido comprobar
en la sangre, la ms especfica es la isoaglutinacin
(aglutinacin de la sangre producida por anticuerpos
presentes en ella); preside la determinacin de los
grupos sanguneos y caracteriza ntegramente la
individualidad de la sangre.
La aglutinacin de la sangre es un fenmeno
caracterizado por la formacin de grupos irregulares de
hemates, amasndose y arracimndose stos en
presencia de sueros normales.
Tipificar una mancha de sangre, es encontrar su
tipo o grupo dentro de la mayor cantidad posible de
sistemas y es fundamental para llegar a la
individualizacin.
En sangre fresca, la presencia o ausencia de un
antgeno, se determina por la aglutinacin o no de los
glbulos rojos puestos en contacto con un antisuero
especfico.
En manchas de sangre seca los glbulos rojos estn
generalmente destruidos y, por lo tanto, las tcnicas de
aplicacin directa no son aplicables; sin embargo los
antgenos no se desnaturalizan inmediatamente y
retienen la capacidad de combinarse con anticuerpos
especficos (mtodos indirectos).
Es muy probable que queden en la escena del delito
manchas de sangre; si se comprueban que las mismas
no pertenecen a la vctima, su estudio es muy
importante para localizar al criminal. Por otra parte, si
en ropas u objetos pertenecientes a un sospechoso, se
encuentran manchas de sangre diferente a la suya y
coincidente con la de la vctima, sera una prueba ms
de culpabilidad. No podrn sacarse conclusiones
valederas si hay semejanza entre los grupos
sanguneos de sospechoso y vctima, ya que alegar el
primero que la sangre es suya.
Los
sistemas
o
grupos
aprovechables son los siguientes:

sanguneos

ms

(1) Sistema ABO: En el cual se manifiestan cuatro

grupos sanguneos: "A", "B", "AB", y "O".
(2) Sistema MN: En este grupo se consideran tres
combinaciones posibles: "MN", "M" y "N".

(3) Sistema Rh: Los antgenos presentes en este

sistema son: D, C, E, c, e, que constituyen el factor
Rh (que segn la combinacin de sus tres alelos, ser
positivo o negativo).
5. FACTORES QUE PUEDEN AFECTAR LOS RESULTADOS
Entre los factores que pueden influir en obtener un
resultado incorrecto, tenemos: la antigedad de la mancha,
la naturaleza del sustrato sobre el cual se encuentra, las
condiciones a la que estuvo expuesta, cantidad de muestra,
etc.
La antigedad de la mancha es de fundamental
importancia en lo que respecta a la investigacin de
anticuerpos. Estos son muy poco estables, por lo que su
estudio en el laboratorio debe ser lo ms rpido posible.
Los antgenos en manchas de sangre secas y bien
conservadas son, en cambio, mucho ms duraderos.
No se deben manipular las muestras con las manos sin
guantes, ya que los antgenos del Sistema ABO se
encuentra, adems, en las secreciones: sudor, semen,
saliva, lgrimas, etc. en la mayora de los individuos. Estos
son
los
llamados
"secretores".
Solo
un
20%
aproximadamente no manifiestan esta propiedad, que son
los individuos "no secretores".
Otro factor importante es la contaminacin bacteriana
de la muestra.
Desafortunadamente no todos los sistema conocidos de
agrupamiento de sangre son tiles en su aplicacin forense.
Algunos son inestables o se deterioran luego de varios das
o semanas. Adems, factores tales como el calor, luz solar
directa, humedad y embalado inadecuado de la evidencia,
disminuyen de una u otra forma la posibilidad de llegar a
un resultado efectivo.
6. HERENCIA DE LOS GRUPOS SANGUNEOS
Los caracteres grupo especficos de la sangre se
transmiten hereditariamente de los progenitores a los hijos
obedeciendo a las leyes de Mendel, basadas sobre la
presencia o ausencia de heterocigotismo.
a. Sistema ABO.- Los aglutingenos (antgenos) A y B se
comportan como caracteres dominantes, es decir, que
jams pueden aparecer inesperadamente. Tanto el
carcter A como el B no pueden presentarse en los hijos
sin ser portador de l, por lo menos, uno de los padres.

La ausencia de la propiedad A y B se manifiesta

como un carcter recesivo, esto es, que puede aparecer
inesperadamente an cuando no sean aparentes en los
progenitores. Pueden sobrevenir de ambos padres y
originarse por la desaparicin del carcter dominante.
b. Sistema MN.- Ms simple es la filiacin de los grupos
M y N, pues no existe carcter recesivo. Se trata de la
herencia de dos genes sin dominancia ni recesividad.
Se trata de la herencia de dos genes sin dominancia ni
recesividad.
c. Sistema Rh.- Existen tres alelos en este sistema, que
son: D-d, C-c y E-e; la combinacin de estos; heredada
de los padres, es lo que se va manifestar como Rh
positivo o Rh negativo.
Las leyes de la herencia de los grupos sanguneos
tienen importancia dentro de la Biologa Forense en
problemas siguientes:
(1)
(2)
(3)

Investigacin de la paternidad.
Investigacin de la maternidad.
Cambio de recin nacidos.

Cuanto ms sean los sistemas de grupos

sanguneos utilizados para este fin, el porcentaje de
exclusin ser mucho mayor.
7. PARTE O REGIN DE DONDE PROCEDE LA SANGRE
Se trata de estudiar los caracteres regionales de la
sangre humana. En primer lugar se estudiar si la forma y
la posicin de las manchas estn o no en contraposicin
con la explosin dada. El examen microscpico suministra a
veces los escasos datos que se posee para establecer el
diagnstico regional de la sangre.
As por ejemplo, la mancha sangunea sea menstrual si
se encuentra clulas epiteliales uterinas o de la mucosa
vaginal. Ser "epistaxis" si va acompaada de clulas
epiteliales de pestaas vibrtiles (fosas nasales). Ser
"melena" cuando la sangre va acompaada de materia
fecal. En la "hemoptisis" la sangre va en forma de
salpicaduras muy finas, producidas por la tos. Y es
"hematemesis" cuando la sangre es de origen gstrico (en
ocasiones acompaadas de alimentos).
8. TIEMPO DE DATA DE PRODUCIDA LA MANCHA DE
SANGRE

Esto se resuelve tanto ms inexactamente cuando ms

antigua es la mancha. Una vez desecada la mancha, su
envejecimiento hace cada vez ms difcil su redisolucin.
Como cuerpo orgnico que es, la sangre esta sometida a
las leyes generales de la putrefaccin y stas no son fijas
ni inmutables. La humedad, el calor, la aireacin y la
luz modifican el proceso de envejecimiento; asimismo,
influye el soporte en donde se encuentran.
Muchos autores se limitan a diferenciar las manchas
como "recientes" si son de color rojo vivo; y "antiguas" si
son pardo oscuras.
9. CANTIDAD DE SANGRE QUE COMPONE LA MANCHA
Dentro de los mtodos conocidos, el ms confiable es el
de la tcnica propuesta por Strassmann y Ziemke, que
consiste en pesar el objeto portador de la sangre y volverlo
a pesar despus de lavado o quitada la mancha con
solucin saturada de brax, o tambin, pesar un trozo de la
tela manchada y de otro trozo igual no manchado. Como
segn Hamrstem, 1000 gramos de sangre producen 211
gramos de extracto seco, puede establecerse la siguiente
relacin:
211 ------------- peso de la mancha
1000 -------------------------------------- x
10.DETERMINACIN DEL SEXO
En
sangre
fresca,
se
puede
observar
microscpicamente la presencia (femenino) o no presencia
(masculino) de la cromatina sexual o corpsculo de Barr en
el ncleo de los glbulos blancos, ms especficamente en
los polimorfonucleados (en los cuales tienen la forma de un
palillo de tambor o "drum stick").
La cromatina sexual se forma cuando en el ncleo de la
clula existen ms de un cromosoma X (como es del sexo
femenino del ser humano) inactivndose los restantes, que
se transforman en corpsculos que se adosan a la parte
interna de la pared del ncleo.

11.MATERIAL NECESARIO PARA EL RECOJO DE MANCHAS

DE SANGRE EN EL LUGAR DE UN HECHO DELICTIVO
- Tubos de ensayo de diferentes volmenes
- Bistur o escalpelo

Pinzas de diseccin, dentadas y no dentadas

Estilete
Tijeras
Lminas porta y cubreobjetos
Lupa
Linterna potente
Placas petri
Jeringas hipodrmicas
Cinta mtrica
Placa de toque de porcelana blanca
Goteros
Frasco de suero fisiolgico
Frasco de agua destilada
Reactivo de Adler (bencidina, cido actico flacial y
agua oxigenada)
Guantes de goma
Guantes quirrgicos.
Torundas.
Papel filtro
Gasa
Frasquito con anticoagulante
Frasco con alcohol.
Bolsitas de polietileno.
Etiquetas tipo stickers.

12.METODOLOGA DE ESTUDIO
a. EXAMEN HEMATOLGICO EN EL LABORATORIO
-

Recepcin de la solicitud u oficio por el

perito.
Recepcin de la muestra o persona a examinar. La
muestra ser tramitada a travs de la Mesa de
Partes para su respectiva verificacin.
Se solicitar referencias del caso, en la medida
que esto sea posible.
El examen hematolgico consistir en la bsqueda
exhaustiva de restos sanguneos, sobre las
prendas y/o cuerpo de la persona, en las muestras
remitidas, para luego realizar las determinaciones
correspondientes.
Formulacin del Dictamen Pericial.

b. EXAMEN
HEMATOLGICO
EN
CENTROS
ASISTENCIALES, MORGUES O ESCENA DEL DELITO,
EN DONDE PUEDEN HALLARSE LA PERSONA O
CADVER.
Es esencialmente el mismo para los casos
examinados en el laboratorio. La diferencia est en que

es la fase previa al contacto con la persona o cadver, y

puede aprovecharse mejor, ya que los elementos
hemticos se encuentran en su forma natural. Estas
caractersticas debern ser anotadas para realizar el
examen reconstructor y poder dar una Apreciacin
Criminalstica de los acontecido en el lugar de los
hechos. Los pasos a seguir son los siguientes:
-

Recepcin del documento: solicitud u oficio

Concurrencia del perito bilogo al lugar: hospital,
clnica, morgue, inmueble, etc.
Referencias
o
indagaciones
de
lo
acontecido.
El examen y/o inspeccin correspondiente, cuya
complementacin se realizar en el laboratorio.
Formulacin del Dictamen Pericial.

B. PERICIAS DE ESPERMATOLOGA
1. CONCEPTO DE ESPERMATOLOGIA FORENSE
Es la ciencia que se ocupa del estudio de la morfologa y
bioqumica del semen, en los casos relacionados a delitos
contra las buenas costumbres, o de otros de carcter sexual
(necrofilia, bestialismo, etc.). El semen al igual que la sangre se
estudia tanto en el aspecto reconstructor como identificador.
ESPERMA.- Se denomina esperma, semen o lquido seminal, al
producto de la secrecin del aparato genital masculino, que
aparece en el hombre despus de la madurez sexual, cuya
funcin especfica estriba en la fecundacin.
2.

VALOR CRIMINALSTICO
Del minucioso estudio ordenado del semen o esperma,
podrn
obtenerse
conclusiones
importantes
para
la
investigacin del hecho. Surgir as, si realmente hay semen en
los efectos analizados, y si dicho humor es humano; se podr
determinar el grupo sanguneo del sujeto al que pertenece
puesto que el semen contiene la mayor parte de veces
sustancias solubles que responden al sistema ABO a la vez, en
base a los lquidos biolgicos provenientes de la vctima, saber
si hubo eyaculacin interna, y con ello penetracin; se podr
por la distribucin de las manchas del semen y su mezcla con
otros materiales biolgicos, sangre, materia fecal, etc. deducir
el grado de resistencia de la vctima o del sadismo del agresor;
hasta ser posible -en oportunidades- , saber si ste se hallaba
drogado.
El elemento fundamental en la identificacin de esta
secrecin est en el hallazgo del espermatozoide, clula, cuyas
caractersticas en el hombre son las siguientes:

3.

1.

Cabeza.- Es de forma ovoide vista de frente y piriforme de perfil;

mide de 4-5 micras de longitud.

2.

El segmento intercalar.- Es de forma cilndrica, mide 5 micras de

longitud.

Cola.- Tiene una longitud de 40-50 micras de Longitud.

3. MANCHAS SEMINALES
a. CARACTERES MACROSCPICOS DEL ESPERMA
Interesa para el personal que lleva
investigacin conozca la caracterstica:

cabo

la

(1) Color y aspecto.- Al estado fresco se presenta

como un lquido filante, blanco lechoso, ligeramente
amarillento, que al disecarse se torna amarillo
franco. Colocado en una placa tiene el aspecto
heterogneo, con pequeos grumos, opaco,
hacindose transparente, homogneo al licuarse.
(2) Olor.- sui gneris, que en la especie 0humana
recuerda al castao comestible o al desmanche.
b. BSQUEDA DE MANCHAS
(1) En la prctica lo frecuente es hallarlo al estado
seco, en diversos materiales que con frecuencia se
remiten al laboratorio pericial, en la investigacin
de los delitos sexuales, estos soportes son: Las
prendas de vestir de la vctima, del acusado, o de
ambos de los sospechosos de haber cometido el
ultraje; hisopos o lquido del lavado vaginal de
aquella, o exudados diversos de la misma (vaginal y
rectal), en oportunidades por el contrario se
requiere concurrir al lugar de los hechos, en busca
de rastros en muebles, alfombras, pisos etc., y otros
aparentes para llevar a efecto el acto sexual,
toallas, pauelos, papel higinico, preservativo,
otros.

(2) Al mismo tiempo que se pone inters en las prendas

de la vctima, se debe reparar en el cuerpo de sta,

verificando actos de violencia que casi siempre

estn presentes en los delitos contra el honor
sexual y homicidio.
Se debe buscar pelos arrancados, mugre en las
uas, que puedan corresponder al autor, tambin
pelos de pubis sobre los orificios naturales (vulva,
boca, ano) de la vctima.
c. ASPECTOS DE LAS MANCHAS SEGN EL SOPORTE
(1) Sobre la piel, formas dbiles pelculas brillantes, de
aspecto barnizado.
(2) Sobre telas absorbentes (ropas de cama, ropa
interior, pauelos, tejidos de algodn en general,
papel higinico) el aspecto conocido de mapa
geogrfico, siendo irregulares de color grisceo,
bordes limpios "almidonado" al tejido.
(3) Sobre telas no absorbentes (lanas, terciopelo,
nylon), formando escamas o pelculas brillantes.
d. RECOJO DE LAS MANCHAS
(1) Si el soporte por su naturaleza no es posible
trasladarlo al laboratorio, las mancha se macera
con suero fisiolgico o agua destilada, para
impregnarlo en gasa o tela, sta ser secada
completamente, para evitar la contaminacin
bacteriana (en caso de que la muestra sea remitida
al laboratorio posterior a las 6 horas); en caso
contrario podr ser mandado el macerado en un
frasco de vidrio con tapa hermtica (en estado
fresco).
(2) Si est sobre la piel o superficie dura (lisa o rugosa)
telas no absorbentes (lanas, terciopelo, nylon)
formar pelculas brillantes, de aspecto barnizado,
stas se recogen mediante un raspado; y sern
empacadas
en
bolsas
plsticas
o
frascos
adecuados; etiquetndolas y lacrando para evitar
que sean alteradas en su contenido.
(3) Si los soportes se encuentran impregnados y
pueden ser recortados, se proceder a cortar los

contornos de las manchas empacando y lacrando

convenientemente.

Foto N 189.- Truza femenina con manchas seminales indicada

dentro de un circulo.

4. PROBLEMAS QUE PLANTEAN

ESPERMA EN CRIMINALSTICA
a.
b.
c.
d.
e.
f.

LAS

MANCHAS

DE

Naturaleza espermtica de la mancha.

Especie animal a la que pertenece el esperma.
Determinacin del grupo sanguneo por el Sistema ABO.
Cantidad de esperma contenido en la mancha.
Data de la mancha de esperma.
Identidad gentica del semen por ADN.

5. ANLISIS DE MANCHAS SEMINALES

a. PRUEBAS DE ORIENTACIN
Cuando se tienen que analizar muchos materiales
o extensas superficies es til la observacin con luz
ultravioleta; tal es el caso de denuncias de delitos
sexuales en los que no se puede precisar exactamente
el lugar donde se realiz el hecho, entonces debe
revisarse alfombras, ropas de cama, pisos enteros,
escaleras, etc. es cuando conviene el uso de una
lmpara porttil de luz ultravioleta, provista de largos
conductores elctricos.
Bajo la accin de radiaciones ultravioletas, las
manchas de semen presentan una fluorescencia directa
que si bien no es especfica, pues existen otros
materiales que producen similar efecto, constituye un

recurso til, para localizar manchas sospechosas. Luego

del examen analtico se dirn si son o no de semen.
La tcnica signada debe ser utilizada para localizar
posibles manchas seminales, pero no como una prueba
de su presencia. La mezcla ntima de sangre y semen
puede enmascarar el efecto fosforescente del segundo.
Cuando en la sustancia problema existe orina, esta
parece de color azul celeste.
b. PRUEBAS DE CERTEZA
(1) MTODOS MICROSCPICOS
Observacin de espermatozoides La maceracin
de la macha es el procedimiento ms generalizado
como para lo cual se cortan algunos pedazos de
soporte introducindolos en un tubo con solucin
salina, se machaca con una vagueta, obteniendo as
una suspensin con los espermatozoides; los que
son separados por centrifugacin; formando un
pellet en el fondo del tubo. Se transfiere a una
lmina porta objetos, se cubre con una lmina
cubre objetos y examinar al microscopio.
Se han detectado espermatozoides mviles en
lquido de lavado vaginal hasta 24 horas despus de
la violacin, e inmviles 100 das despus; el lquido
ser guardado en un tubo de ensayo sin agregado
alguno. Esta informacin es til en casos de
violacin seguida de homicidio; puesto que ilustra
sobre la supervivencia del espermatozoide en el
lquido vaginal de una mujer muerta. En rigor
sorprende esta supervivencia dado el enorme
desarrollo bacteriano, que lgicamente ha de
producirse.
Previa coloracin Los preparados obtenidos
sobre el portaobjetos, pueden ser coloreados
adecuadamente, lo que permite luego un mejor
estudio microscpico.
La tcnica elegida para la tincin es de MayGrnwald-Giemsa; se trata de una combinacin de
las propiedades tintreas de Azur II eosina y azur II,
que constituyen el Giemsa, con las de eosinato de
azul de metileno que componen el May-Grnwald. Y
luego de agregar el colorante en la forma indicada
se agrega en igual cantidad agua destilada se
mezcla mediante un suave movimiento de
inclinacin del portaobjetos. Luego se vuelca y sin

lavar se cubre con el colorante de Giemsa durante

30 minutos. Luego se lava como se mencionar, con
abundante agua corriente.
En todos los casos conviene, luego de la
preparacin, sumergir el preparado en alcohol
absoluto, para su deshidratacin. Asimismo si la
preparacin no fuera suficientemente ntida, se
aconseja sumergirla durante unos minutos en xilol.
(2) MTODOS CROMATOGRFICOS
La cromatografa en papel y en capa fina es
aplicable al estudio pericial de manchas de esperma
que permite, en el caso frecuente de imposibilidad
de visualizar satisfactoriamente espermatozoides,
obtener datos experimentales que, o bien ratifiquen
el resultado negativo de la investigacin, o por el
contrario obligan a continuar el estudio, mediante
mtodos supletorios de alto valor pericial.
Todos los ensayos basados en las tcnicas
cromatogrficas consisten en la ejecucin de
corrimientos sobre soportes y con lquidos
resolutivos adecuados, en paralelo con testigo de
esperma humano indubitable, o de sustancias puras
componentes normales de semen. En tal sentido, la
mayor parte de los mtodos citados por la literatura
especializada, usan como testigos a dos bases
nitrogenadas que son: Colina y Espermina, y una
enzima, la fosfatasa cida, si
bien es cierto
que ninguna de tales sustancias son por s misma
indicaciones categrica de la presencia de esperma
de la mancha analizada, puesto que ninguna de
ellas es especfica de tal humor, su ausencia
permitir confirmar el resultado negativo de la
investigacin. En cambio la presencia de ellas, en
cantidades apreciables constituir un factor de alta
positividad.
(3) MTODOS ELECTROFORTICOS
E. Villanueva y J.A. Gisbert-Calbuig, proponen
mtodo bidimensional sobre papel, combinacin de
electroforesis y cromatografa, lo que permite
separar la espermina de los aminocidos del semen
y obtener una separacin sumamente interesante
de estos ltimos, que puede considerarse de
relevante valor para la identificacin de dicho
humor.
(4) MTODOS ENZIMTICOS

Como ya se mencion el esperma contiene una

elevada cantidad de fosfatasa cida, no hallada
hasta ahora en ningn otro material orgnico
natural sea animal o vegetal. Este hecho hizo que
Lundquist ya en 1945, viendo las cantidades
colosales de fosfatasa con pH ptimo en la zona
cida, sugiriera el uso de esta apropiedad para la
identificacin
de
manchas
de
semen
en
Criminalstica.
Cabe considerar que, merced a los trabajos de
Kutscher y Wolvergs, desde 1935 se conoca la
riqueza del lquido seminal de tal enzima.
Llmese fosfatasa cida a cualquier enzima
capaz de hidrolizar un fosfato orgnico en medio
cido. En particular se denomina fosfatasa cida
prosttica a la existente en el plasma seminal, que
produce como se ha dicho la hidrlisis de la fosforil
colina.
Este ensayo es ideal en los casos en que deben
de examinarse en objetos o ropas cuyo color y/o
estructura no permite la visualizacin directa de las
presuntas mculas de semen o cuando stas se
hallan muy contaminadas por suciedad u otras
impurezas que enmascaran las caractersticas de
textura,
color,
fluorescencia,
etc.
que
se
mencionaron anteriormente.
c. DETERMINACIN DE LA
PERTENECE EL ESPERMA

ESPECIE

LA

QUE

Si bien es cierto no constituye un problema

frecuente
en
la
prctica
diaria,
en
algunas
oportunidades deben procesarse manchas de esperma
no humano, generalmente de animales domsticos.
Todas ellas arrojan reaccin positiva en el ensayo
cualitativo resultado sensiblemente mayores en caso de
semen humano que en el de las muestras animales.
A las tcnicas de coloracin arrojan diferencias
respecto a la coloracin que adquieren las distintas
partes de los espermatozoides animales y humanos,
ellos sumando a las diferencias morfolgicas y
dimensiones,
permiten
arribar
a
resultados
satisfactorios diferenciales de los espermatozoides de
cada especie, la confirmacin se efectuar mediante el
ensayo de precipitinas. El siguiente cuadro consigna las
caractersticas de forma coloracin adquirida mediante
algunos mtodos de tincin conocidos y las

dimensiones de los espermatozoides de los mamferos

ms comunes a los que se han aadido desde las del
pollo, notablemente diferentes a las dems. Las
dimensiones se expresan en micrones.
d. DETERMINACIN DEL
MANCHAS SEMINALES

GRUPO

SANGUNEO

EN

Un alto porcentaje de individuos -alrededor del

80%- presentan cierta concentracin de sustancias
especficas (antgenos) de los grupos del sistema ABH
en otros lquidos biolgicos, adems de la sangre
(sudor, lgrimas, orina, saliva, secrecin vaginal y jugo
gstrico) stos son considerados secretores. Y los que
no presentan antgenos del grupo ABO, son los no
secretores. As tales antgenos se hallan en: leucocitos,
plaquetas, tejido muscular, mucosa del tracto digestivo,
bazo, pncreas, rin, glndulas suprarrenales,
endotelio vascular, corazn, placenta, hgado, prstata,
tiroides, hipfisis, piel, meconio. Los rganos no
portadores son: testculo, cuerpo vtreo, cristalino,
tejido seo y cartilaginoso.
El hecho citado es de gran importancia en la
investigacin pericial, en especial en los delitos
sexuales, en los cuales la determinacin del grupo
sanguneo del agresor en base al examen de las
manchas de semen halladas en el lugar del hecho,
ropas de la vctima, etc. y de otros humores, como la
saliva, pueden servir para descartar la intervencin de
un sospechoso o para aadir un elemento de juicio ms
en contra del sujeto posible autor del hecho. Tal
determinacin es factible en el residuo salivar dejado
en la marca de una mordedura, en la colilla de un
cigarrillo, etc.
e. INVESTIGACIN
DE
SEMINALES.

DROGAS

EN

MANCHAS

F.P. Smith y D.A. Pomposini, han desarrollado una

serie de tcnicas, mediante el sistema de radio-inmuno
ensayo (RIA) las que permiten detectar fenobarbital y
anfetminas en manchas de saliva, semen, sudor y hasta
en pelos.
El RIA se basa en la facilidad de detectar un
compuesto radioactivo, presente en baja concentracin
y en la especificidad unvoca que caracteriza la reaccin
antgeno-anticuerpo. Tal hallazgo puede ser de gran
importancia, indicara en la investigacin de un delito

sexual. Los autores descartaron experimentalmente la

reactividad endgena cruzada con la secrecin vaginal.
f.

DATA DE LA MANCHA
Se funda en que la lecitina de la mancha del
esperma al descomponerse por la putrefaccin origina
colina. Por lo tanto cuanto ms antigua es la mancha de
esperma, ms colina se encontrar, disminuyendo
proporcionalmente la lecitina.

g. CANTIDAD DE ESPERMA QUE TIENE LA MANCHA

Se realiza mediante la determinacin de calcio
contenido en la mancha. Normalmente se encuentra en
la proporcin de 25 mg por 100 cc. de esperma. Esta
sujeta a muchas variaciones individuales de orden
cuantitativo.
6. EXAMEN
ESPERMATOLGICO
EN
CENTROS
ASISTENCIALES, MORGUES O ESCENA DEL DELITO
Esencialmente es el mismo que en los casos
examinados en el laboratorio, especialmente en los casos
de cadveres o heridos; pero en la escena del delito no
debe omitirse la inspeccin en camas, confortables,
divanes, alfombras y otros lugares donde pudo haberse
llevado a cabo el acto sexual. Tambin revisar toallas,
pauelos, papeles higinicos y otros soportes que puedan
haber servido para limpiar los rganos genitales despus
del acto sexual. Igualmente debe buscarse cuidadosamente
en los lavatorios, bids para detectar restos seminales. En
lugares abiertos o a la intemperie, lo mismo que en el caso
de la sangre, debe buscarse manchas espermticas sobre
las hierbas, tierra, arbustos, piedras, troncos cados y hojas
cadas.
El estudio reconstructor de las manchas seminales
sumando a otras comprobaciones despus de la inspeccin,
permiten deducir la verdad o falsedad en el caso de
acusaciones, atentados al pudor y violaciones. Los pasos a
seguir en este caso son:
a. Solicitud telefnica u oficio por autoridades policiales,
judiciales, etc.
b. Concurrencia al lugar (Hospital, morgues, escena del
delito, etc.)
c. Indagaciones del hecho si es posible.

d. Examen o inspeccin; si es en el lugar de los hechos

deber
perennizarse
las
manchas
sospechosas
mediante fotografas o croquis.
e. Formulacin de la pericia.
En el documento solicitante debe consignarse:
a. La unidad solicitante: Unidades Policiales, Autoridades
Judiciales, Del Ministerio Pblico, etc.
b. Nombre y apellidos de la(s) persona(s) a examinar o
ubicacin del lugar a inspeccionar.
c. Referencias sobre el caso que se investiga.
Dentro de la espermatologa, existe un examen especial
llamado Espermatograma, que consiste en determinar
cualitativa y cuantitati-vamente los espermatozoides en
personas y est encaminado a probar las causas de
esterilidad en los casos de acusaciones por paternidad y
violacin. Para llevar a cabo el espermatograma se realiza
primero el examen fsico, que se encarga de determinar el
aspecto, color, volumen, viscosidad, pH del semen,
motilidad y actividad del espermatozoide y luego el examen
microscpico. Este estudio consiste en la observacin de los
espermatozoides en el microscopio mediante el recuento
celular similar al que se efecta con los elementos
sanguneos. La ausencia completa de espermatozoides se
llama azoospermia y la disminucin, oligozoospermia; la
ausencia de motilidad se denomina adromozoospermia.
El examen qumico se realiza mediante la
determinacin de la fructosa, cido ascrbico o
fosfatasa cida. La muestra para este examen deber
ser recogida despus de cuatro (04) das de abstinencia
sexual, en un frasco de boca ancha, limpio y seco, de
preferencia esterilizado; las muestras en preservativos
no son recomendables, ya que el polvo que existe sobre
el caucho es espermicida. Esta muestra deber ser
tomada preferentemente en el Laboratorio CentralDINCRI, otro caso llevar la muestra lo ms pronto
posible (de preferencia en menos de dos horas), y
mantener mientras tanto el frasco cerca del cuerpo,
para que la temperatura sea lo ms prximo a la
normal. El perito o tcnico deber anotar en el reporte
la hora de la recoleccin de la muestra o la hora de la
llegada de la muestra al Laboratorio Central- DINCRI.
Se evacuar el peritaje en el que se consignar las
apreciaciones respectivas.

7. EQUIPO DE MATERIALES DE LABORATORIO

a. EQUIPO
-

Microscopio Compuesto de Investigacin.

Esteroscopio.
Lmpara de Wood-UV.
Bao Mara.
Espectrofotmetro.
Incubadora.

b. MATERIALES Y REACTIVOS
-

Estuche de pinzas de uas, tijeras

escalpelo.
Placas petri
Tubos de prueba
Lminas portaobjetos y cubreobjetos
Baguetas
Suero fisiolgico.
Azul de metileno o cristal de violeta
Guantes
Fenoftalina
cido actico.

C. PERICIAS DE FANEROLOGA
1. CONCEPTO DE FANEROLOGA FORENSE
Es la ciencia que estudia la morfologa y anatoma de las
modificaciones del tejido epidrmico del organismo humano o
animal con fines de identificacin. Estas pueden ser dientes,
cuernos, pelos o cabellos, plumas, escamas, uas o pezuas y
otros, a los que se les denomina FANERAS.
2.

VALOR CRIMINALSTICO
En Criminalstica las faneras que tienen mayor incidencia
de inters forense son los pelos o cabellos y uas, los que son
estudiados para esclarecer casos de lesiones, homicidios,
violaciones sexuales, secuestros, asaltos, robos, abortos
criminales, bestialismo, fraudes con pelucas y pieles, beneficio
clandestino de animales para consumo, trfico ilcito de
animales nativos y otras que infringen a la ley.

La ciencia que estudia la individualizacin e identificacin

de pelos y cabellos tanto en humanos como en animales se
denomina TRICOLOGA (Trichos=pelo; logos=tratado o estudio);
y la ciencia que estudia a las uas o pezuas se llama
UNCOLOGA (Uncus=ua). Igualmente los dientes tienen
tambin
importancia
Criminalstica
mediante
estudios
odontolgicos y odontogramas de inters forense. Este ltimo
es estudiado por profesionales odontlogos forenses.
3.

UAS Y PEZUAS
Las uas o pezuas son estructuras queratinosas de la
modificacin del tejido epidrmico de las falangetas de los
dedos de las manos y pies en humanos, y de las patas en los
animales.
En Criminalstica pueden estudiarse las huellas dejadas por
la uas sobre el cuerpo de las vctima, sospechoso o sobre una
superficie blanda, asimismo se estudia la presencia de la mugre
del sarro ungueal o subungueal, que pueden dar indicios
importantes, similares a los obtenidos con el estudio del polvo,
provenientes de los vestidos o restos de ellos. En este polvo
mezclado con residuos orgnicos o inorgnicos, que constituye
la mugre se puede encontrar: sangre, restos de epidermis,
pelos, pintura, restos de materiales robados, etc.
Para tomar muestra, lo ms adecuado es recortando las
uas o limpindolas con un instrumento adecuado, como
torunda o bistur, estas muestras debern ser separadas en dos
porciones. Una para el examen fsico y otra para el examen
qumico. El examen fsico se realiza por microscopa, en fresco;
luego con reactivos y se podr observar elementos extraos
como: metales, carbn, yeso, pintura, restos de fibras
vegetales o animales, semillas, huevos de parsitos, etc. El
examen qumico. El examen biolgico y qumico se efecta
para determinar si hay sangre, pelos tejido epidrmico o otros
elementos qumicos, para determinar si hay sangre u otros
elementos. Las huellas de uas dejadas por los animales,
permite conocer la especie de animal al que pertenecen; estas
huellas pueden ser de animales feroces, aves, etc., y su
comparacin se hace por moldeo de las mismas.

4. PELOS Y CABELLOS
Son estructuras delgadas, querationosas y alargadas,
implantadas en la piel del cuerpo y cuero cabelludo humano y
cuerpo del animal.

a. CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DEL PELO

En el pelo se distinguen un cuerpo o tallo y dos
extremidades: Una afilada y libre, la punta del pelo o
extremo distal; otra abultada y que se implanta en la
dermis llamado bulbo, raz o extremo proximal.
El tallo tiene forma fusiforme; comienza con un
estrechamiento a nivel de la raz, se ensancha
progresivamente y vuelve adelgazarse en su punta.
Al estudiar el tallo microscpicamente,
observar en el tres estructuras:

vamos

(1) La cutcula est formada por clulas planas inbricadas

(a manera de escamas de pescados o tejas); cuyas
puntas estn dirigidas hacia la extremidad libre del
pelo. Visto de perfil se observa bordes aserrados o
dentados.
(2) La corteza o sustancia cortical, constituida por clulas
piriformes, unidas por finas fibrillas. La importancia de
esta zona es por que presenta el pigmento en forma de
grnulos, cuya naturaleza y disposicin dar la
coloracin de ste; asimismo diferenciar gran nmero
de pelos.
(3) La mdula (que no siempre esta presente), constituye
un cilindro que es el eje del pelo y est constituida por
clulas que se disponen en lneas transversales; esta
clulas estn separadas por una red area de aspecto
variable segn las especies animales.

Foto N 190 .- Presencia de vellos pubianos en una truza

femenina con manchas seminales.

En el caso de los seres humanos, los cabellos se clasifican

en:
1 Lisotricos que
son cabellos rgidos, lisos y
ondulados planos.
2 Quimatotricos, que incluye a los cabellos de
grandes ondas (ondulados) y el rizado.
3 Ulotrico, que abarca los cabellos crespos, muy
rizados, en espiral y lanoso.

b. DIFERENCIA ENTRE PELO ANIMAL Y HUMANO

Dentro del diagnstico especfico del pelo, se
reduce a estudiar los caracteres diferenciales de las
partes constitutivas del pelo humano y del pelo animal,
que han sido resumidas por Lambert y Balthazard en el
siguiente cuadro:

PELO HUMANO

PELO ANIMAL

CANAL MEDULAR
Red rea granulosa

Contenido areo ms o
menos voluminoso

Clulas medulares indivisible

Clulas medulares aparentes

ndice medular: < 0,30

Indice medular: > 0,50

Pelos del vello sin mdula

Mdula en escalones o moniliformes en los pelos del

vello.

SUSTANCIA CORTICAL

Forma un grueso manguito

Pigmento en granulaciones

Constituye un cilindro
hueco bastante delgado
Pigmento en granulaciones
irregulares siempre mayores que en el hombre.

CUTCULA
Escamas delgadas. poco salientes, pequeas e imbricadas.

Escamas gruesas, salientes

y menos imbricadas.

El ndice medular expresa el dimetro de la mdula

relativo al dimetro del pelo y se expresa normalmente
por medio de una fraccin. Para los humanos el ndice,
por lo comn, tiene un valor menor a un tercio (1/3).
Para la mayora de los animales el valor es de un
medio(1/2) o mayor.
El pelo humano puede no exhibir mdula o tenerla
fragmentada raramente muestra una medulacin
contnua en cambio , la mayora de los animales tienen
mdulas que son contnuas o ininterrumpidas.
c. REGIN DEL CUERPO DE DONDE PROCEDE EL PELO
Para determinar la regin de la cual proviene el
pelo se toma en consideracin el largo, el dimetro, la
forma de la punta, el material que cubre la superficie y
la forma de la seccin transversal.
Los pelos de la barba, son generalmente, ms
bloqueados que los del crneo, mostrando el efecto del

afeitado con la tendencia a rematar en punta. Los

pelos de las cejas, prpados, nariz y orejas, son ms
gruesos que los cabellos del crneo, pero mucho ms
corto y terminan en una punta bien marcada.
En pelos de axilar y regiones pbicas, se observan
mayor longitud y desigualdad, con canales medulares
visibles y con posibilidad de mostrarse de forma
excntrica en un corte practicado transversalmente. El
pelo de estas regiones tiene tendencia a rizarse.
Pelos del tronco y extremidades varan en espesor y
tienen menor pigmentos que otros.
Un pelo recubierto de sustancias grasosas proviene
sin duda de la
axila; uno, rizado con cristales y
secrecin vaginal proviene nicamente de la regin
genital de una mujer.
d. EDAD DEL INDIVIDUO
CABELLO

POR

EL

GROSOR

DEL

No es posible indicar la edad ms que con varios

aos de aproximacin, como se observa en el siguiente
cuadro:
12 das ..................24 micrmetros
06 meses...................37
"
18 meses...................38
"
15 aos....................55-70 "
Adulto.....................80-100 "
Ancianos...................60.65 "
Hay ciertos indicios que nos daran un aproximado
de la edad del sujeto, como: los pelos del feto no
presentan canal medular, pigmento, la punta es muy
fina y el largo es de 20 a 25 mm; la presencia de
pigmentgrafos(clulas que se ubican en la corteza y
destinadas a la reabsorcin del pigmento), nos indicara
que procede de un sujeto que comienza a encanecer y
podra relacionarse con una persona entrada en aos
(aunque es un fenmeno que ocurre a edades muy
diversas).
e. DETERMINACIN DEL SEXO
Los mtodos de determinacin de sexo, estn
basados en la tincin diferencial de los cromosomas
sexuales. Estos se hallan en la interfase de los ncleos
de las clulas de la raz del pelo.

En la mujer normal los cromosomas sexuales

aparecen como un par homlogo de cromosoma X. En
la interfase del ncleo, uno de los cromosomas X
aparece condensado y adosado a la pared interna de la
membrana nuclear y puede ser teido para que
aparezca como un cuerpo marginal en el mismo (que no
sucede en el hombre por poseer un solo cromosoma X).
A esto se le conoce como cuerpo corpsculo de
Barra o Cromatina Sexual.
El hombre normal tiene un cromosoma X y un
cromosoma Y. El cromosoma Y tiene una gran afinidad
para fluorescer con el clorhidrato de quinacrina, lo que
no ocurre con el cromosoma X. Por lo tanto, los
cromosomas Y pueden ser vistos como una mancha
fluorescente brillante en la interfase del ncleo.
f.

DETERMINACIN DE LA RAZA
Debido al gran mestizaje que existe actualmente,
esta prueba es slo orientativa. Microscpicamente
puede llegar a distinguirse entre raza blanca o
caucsica, raza negra y raza amarilla o mongoloide (en
la que esta tambin incluida la de los indios
americanos, chinos y otros asiticos).
En la raza blanca los pelos del cuero cabelludo
difieren en textura, forma y grado de pigmentacin. Los
cabellos lacios tienen un calibre regularmente liso, que
gradualmente decrece cerca de la punta. La seccin
transversal es circular o de contorno ovoide y la mdula
es pequea y centrada. Otros pelos pueden ser
ondulados o rizados, mostrando un aumento gradual de
la ondulacin; su dimetro decrece alternadamente a lo
largo de su longitud, y la mdula, de tipo interrumpida,
puede hallarse ligeramente excntrica. En ambos tipos
el pigmento vara en intensidad, pero est concentrado
en las porciones perifricas de la corteza. En la mayora
de los casos los grnulos determinar su color a simple
vista ya sea rubio, rojo u oscuro.
En la raza amarilla, tienen generalmente el cabello
recto rstico y negro, con largos tallos
muy
pigmentados. Los cortes transversales muestran tallos
cilndricos o triangulares con la mdula situada en
forma central.
En la raza negra, es normalmente ensortijado,
retorcido y negro, variando mucho su dimetro a lo
largo de toda su extensin, ya que crece y decrece
alternativamente. Una gran cantidad de pigmento se

encuentra en la corteza, brindando un color negro

intenso opaco. El cabello en seccin transversal, es oval
y estrecho o puede ser casi plano; el canal medular
esta situado en forma excntrica.
g. DETERMINACIN DE TINTES Y DECOLORANTES
Es suficiente en muchas ocasiones reconocer que
los cabellos o pelos de la barba estn teidos, un
examen a simple vista que muestra ausencia de tincin
en la parte proximal a la raz. Los pelos teidos tienen
un color ms uniforme que los de color natural. Para un
mismo pelo el color natural es ms regular y uniforme
que en el teido, al que a menudo falta el brillo y
presenta un aspecto quebradizo. Es muy importante
comparar el color del cabello con pelos de otra parte
del cuerpo y tambin examinar el color del cuero
cabelludo que puede verse manchado del tinte
empleado.
La luz de Wood (o luz ultravioleta) es un auxiliar de
valor para la identificacin de cabellos decolorados y
teidos: es de inters examinar la diferente
fluorescencia entre el tallo del pelo y la regin prxima
a la raz..El cabello teido o el decolorado aparece sin
brillo.
Las tinturas pueden reconocerse mediante las
tcnicas analticas correspondientes, no olvidndose
que en la composicin de cada tonalidad intervienen
cuatro o cinco tintes orgnicos distintos.
Las dificultades tcnicas para identificar la
naturaleza de las sustancias decolorantes son grandes;
toda vez que stas actan generalmente sobre el
pigmento
natural
del
pelo,
destruyndolo
o
decolorndolo, sin dejar huella de su accin, siendo en
ocasiones difcil diferenciar el pelo naturalmente sin
pigmento del despigmentado. Para establecer si un
cabello ha sido decolorado o no, se le somete a la
prueba de la infiltracin o impregnacin de ciertos
colorantes. Los cabellos naturales claros, son
resistentes; en cambio, los decolorados por accin del
colorante se impregnan fcilmente.
h. TRAUMATISMOS DEL PELO
(1) TEMPERATURA
Los pelos empiezan a sufrir alteraciones en su
microestructura entre los 80 y 100 C, que
empieza a perder peso y se acorta; a los 150 C

presentan burbujas gaseosas areas en la,

sustancia medular principalmente, que aumentan
en tamao paralelamente a la temperatura, hasta
vencer por estallido la resistencia de la cutcula,
fenmeno que tiene lugar a los 200 C
aproximadamente. El proceso de carbonizacin se
da entre los 250 y 300 C.
Los reconocimientos histolgicos se pueden
efectuar en cabellos calentados hasta no ms de los
200-400 C, pasados los cules la carbonizacin
impide la determinacin de la microestructura del
pelo.
Los pelos resisten bastante la accin de los
agentes custicos (cidos y lcalis) y de no ser
accin prolongada, durante varios das, no llegan a
producir, aparte de la decoloracin, alteraciones
histolgicas apreciables.
(2) POR ARRANCAMIENTO
El diagnstico diferencial entre pelo cado y
expontneamente y el arrancado violetamente se
hace por el estudio de la extremidad proximal del
pelo o raz.
En el momento en que el pelo termina su
evolucin, la papila se deseca, muere y cae junto
con el bulbo piloso, llamado tambin "bulbo lleno".
Si el pelo es arrancado en plena vitalidad, la
papila drmica no se desprende, queda en la dermis
y el bulbo se denomina "bulbo vaco o hueco".
Un pelo arrancado puede estar roto a una
distancia mayor o menor de su raz; entonces la
extremidad rota es irregular y filamentosa.
(3) POR CORTES
Las lesiones producidas por instrumentos
cortantes son caractersticas y as la navaja realiza
un corte en bisel tpico distinto del producido por
tijera, que es de ngulos rectos.
Asimismo, la superficie de seccin , ms o
menos limpia y con extremidad redondeada, que
indica un proceso de cicatrizacin, nos suministra
datos de inters cronolgico.
(4) POR TRACCIN

Cuando la fuerza de traccin rebasa los lmites

de resistencia y elasticidad del pelo, se produce la
rotura total, observndose el extremo irregular y
filamentoso.
(5) POR APLASTAMIENTO
Las lesiones por aplastamiento, cuando el pelo
es contundido entre dos objetos duros, pueden ser
sin o con separacin de los fragmentos
traumatizados; generalmente
presentan un
hinchamiento con o sin rotura parcial, a nivel de
donde se produjo la lesin.
(6) ADHERENCIAS Y PARSITOS
En ciertas ocasiones puede hallarse con
adherencias de tierra, sangre, vegetales, partculas
metlicas, etc., todo lo cual puede identificarse y
relacionarlo con la vctima o sospechoso. Asimismo
la presencia de parsitos como tricofitsis o
presencia de piojos (Pediculus capitis) ayudaran
para el mismo propsito.

Hay casos, tambin en el que el cabello est

rodeado por sustancias que se encuentran
nicamente en las personas con trabajos
especficos (harina, polvo de minerales, betn, etc.).
(7) LIMPIEZA DE LOS PELOS PARA SU ESTUDIO
Luego de realizar el estudio macroscpico de los
pelos, con la finalidad de hallar adherencias o
parsitos, para el estudio microscpico es necesario
eliminar partculas extraas a travs de una
limpieza.
Para lavar los pelos se emplea solucin
jabonosa, ter o carbonato de potasio al 10 %,
indistintamente, luego se deshidrata con alcohol
absoluto, se los pasa por xilol y se observa con el
microscopio en medio acuoso o glicerinado, puede
emplearse blsamo de Canad.
Si fuesen muy oscuros antes de la observacin
microscpica, deben ser decolorados, para lo cual
pueden ser empleadas una
de las siguientes
soluciones: agua oxigenada, perhidrol caliente,
cido actico, solucin hipoclorito de sodio, solucin
alcohlica de cloro o cido ntrico. Se obtiene buen
resultado con agua oxigenada de 100 vol., y
solucin de hidrxido de sodio en accin
combinada. En general, la decoloracin del pelo se
cumple en aproximadamente 15 minutos, no
alterndose la estructura ni el dimetro de las
muestras.
5. TOMA DE MUESTRAS DE PELOS O CABELLOS PARA
ESTUDIO COMPARATIVO
a. CABELLOS
Las caractersticas morfolgicas y microscpicas de los
cabellos en el cuero cabelludo no son exactamente iguales,
varan segn la ubicacin en las zonas de implantacin, de
acuerdo al tratamiento y cortes que reciben. Por esta razn
las muestras de personas incriminadas deben tomarse en
pequeos mechones de 10 cabellos aproximadamente de
cada regin o zona de implantacin, tal es as que se debe
tomar una muestra de la zona frontal; una del temporo
parietal derecho; una de temporo parietal izquierdo; y una
del occipital. Cada una de estas muestras deben tomarse
un 50% cortados a nivel de la base de implantacin y un
50% arrancados con sus races.

b. PELOS
Se tomarn cortndose por la base de implantacin y
arrancndose segn las zonas (pubiana, axilares,
pectorales, dorsales, bigotes, barbas, cejas, etc.).
Las muestras tomadas en las condiciones indicadas
deben ser depositadas en bolsas de polietileno
transparente o en papel blanco por separados.
6. METODOLOGA DE ESTUDIO
a. EXAMEN EN EL LABORATORIO
Se realizar tanto en muestras de pelos enviados de
diversos lugares y en muestras obtenidas directamente de
personas o de prendas y otros soportes en el mismo
laboratorio, la secuencia para el examen es la siguiente:
(1) Recepcin del documento solicitante.
(2) Recepcin de la person, muestra o muestras a
examinar.
(3) Referencia del caso.
(4) Toma de la muestra, de los cabellos y pelos
arrancados exprofeso a la vctima y sospechoso;
tratndose de cabellos, debe tomarse la muestra
de cuatro regiones:occipital, parietal, frontal y
vertex(parte prominente de la cabeza).
En caso del delitos contra las buenas costumbres, de
hallarse pelos de pubis en los genitales de la victima o en
otra parte del cuerpo, se debe obtener muestras del
sospechoso de la misma regin para el estudio
comparativo; igual sucede cuando se encuentra pelos en
las prendas ntimas de la vctima.
En caso de bestialismo se hace el estudio comparativo
de los pelos del animal que se sospecha, con las muestras
patrones que existen en el Laboratorio de Biologa.
Asimismo, debe examinarse con detenimiento las
prendas de vestir de las personas que se examina, a fin de
buscar pelos, ya que si hubo lucha o forcejeo, puede haber
adherencia de pelos en las prendas.
Al examinar muestras de diferentes tipos, tambin se
busca pelos, para los estudios respectivos.

b. EXAMEN TRICOLGICO EN CENTROS ASISTENCIALES,

MORGUES O EN LA ESCENA DEL DELITO
Es esencialmente el mismo que en los
casos
examinados en el Laboratorio. En caso de examinar
cadveres, es importante observar minuciosamente las
manos, ya que muchas veces se halla mechones de pelos
correspondientes al agresor. En la escena del delito la
inspeccin deber efectuarse en todos los lugares donde
pudo realizarse los hechos con violencia, Los pasos a seguir
para solicitar este tipo de exmenes son:
(1) Recepcin del documento solicitante, donde debe
consignarse el nombre de la unidad solicitante, que
puede ser policial, judicial, del Ministerio Pblico,
etc.,nombre de la persona(s) o cadver(es) a examinar,
direccin del lugar a inspeccionar, tambin debe
considerarse referencia sobre el caso.
(2) Concurrencia
al
lugar
(hospi-tal,CRAS,
morgue,
domicilio, etc.).
(3) Referencias o indagaciones.
(4) Realizacin del examen corporal o de la inspeccin.
(5) Formulacin del Dictamen Pericial.
7. EQUIPOS Y MATERIALES
a. EQUIPO
-

Microscopio

Compuesto de Comparacin
resolucin
Microscopio Compuesto de Investigacin
Esteroscopio
Lupa simple

b. MATERIALES
-

Estuche de pinzas de uas, tijeras y escalpelo.

Lminas portaobjetos
Lminas cubreobjetos
Placas petri
Cubetas de porcelana
Blsamo de Canad
Agua oxigenada
Hidrxido de sodio
cido actico
Hipoclorito de sodio
Bolsitas de polietileno transparentes
Cintas adhesivas anchas
Jabn o detergente
Papel filtro
Glaso.

de

alta

D. PERICIAS DE MICROBIOLOGA E INMUNOLOGA

1. CONCEPTO
DE
FORENSE

MICROBIOLOGA

INMUNOLOGA

La microbiologa es la ciencia que se ocupa del estudio de

los
microorganismos
(bacterias,
levaduras,
parsitos,
protozoos, etc.) que contaminan, conservan o alteran los
diversos tipos de alimentos (de origen animal, vegetal o
mineral), tejidos (animal o vegetal) secreciones orgnicas e
inorgnicas. La Inmunologa, por su parte, se ocupa de las
reacciones antgeno-anticuerpo en la produccin de suero
antihumano y antiproteinas especficas, que se llevan a cabo
con animales de experimentacin.
2. VALOR CRIMINALISTICO
La Microbiologa permite identificar a los microorganismos
infectantes o contaminantes en los alimentos para consumo
humano o animal, tejidos, en secreciones biolgicas y
sustancias orgnicas o inorgnicas, que hayan causado
intoxicaciones o enfermedades, a los cuales califica como aptos
o no aptos para el consumo o determinando la carga de
microorganismos infectantes.
La identificacin de los microorganismos se realiza mediante:
a. El examen macroscico, en el que se observan elementos
visibles a simple vista o con una lupa esteroscpica, por
ejemplo
colonias
de
hongos,
insectos,
parsitos,
protozoarios, etc.
b. El examen microscpico, en el cual se observan
protozoarios, levaduras, hongos, bacterias Gram positivos o
negativas, huevos de parsitos, algas, etc.
c. Cultivo, aislamiento e identificacin microbiolgica, de
acuerdo a los requerimientos o la gravedad del caso se
realizar la siembra bacteriana en medios de cultivo, que
pueden ser enriquecidos, selectivos o diferenciales.
Estos estudios son especficos para la identificacin de
la especie contaminante o infectante.
3. METODOLOGA DE ESTUDIO
a. EXAMEN DE LABORATORIO
(1) Recepcin de la solicitud o del oficio.
(2) Recepcin de la muestra, la cual deber ser tramitada
por Mesa de Partes.
(3) Se solicitar referencias del caso si es posible.

(4) Se proceder con el examen microbiolgico, que

consistir en la bsqueda e identificacin de los
microorganismos.
(5) Formulacin de la pericia.
b. EXAMEN EN EL EXTERIOR
Puede ser en mercados, fbricas de alimentos,
restaurantes, reservorios de agua, tanques de agua,
etc. Se llevar cabo la toma de muestra teniendo en
cuenta las precauciones necesarias para el recojo,
embalamiento y traslado de las muestras al laboratorio
para su anlisis respectivo y la formulacin de la pericia
solicitada
4. RECOLECCIN DE LAS MUESTRAS
a. Los lquidos se recogern en botellas limpias y seca, lavada
con una pequea parte de los mismos, que se vertern
para llenarlos despus. Utilizar tapones nuevos y lacrados.
b. Las materias grasas, pastosas y semilquidas en frascos de
boca ancha, limpios y secos. Se cerrarn con papel
parafinado o apergaminado, con su respectiva tapa
debidamente lacrada.
c. Las muestras cuya desecacin debe evitarse tales como el
caf, harina, sal, etc. deben colocarse en frascos de boca
ancha, limpios, secos y recubiertos con una hoja de papel
parafina, con su tapn de corcho respectivo.
d. Los productos slidos o en polvo se recogern en papel
blanco o en papel pergamino.
e. Las muestras de agua se recogern en frascos
esterilizados, provistos de tapn de cristal o corcho que sea
nuevo, parafinado o esterilizado.
f.

El nmero total de muestras a tomar y el tamao de las

mismas depende del nmero y la distribucin uniforme o
no, de los microorganismos del alimento. Cuanto ms
uniforme bacteriolgicamente sea ste, menor ser el
nmero de muestras necesarias y ms pequeo su tamao.
Algunos alimentos son relativamente homogneos dentro
de una unidad o lote, pero varan considerablemente de un
lote a otro. En tales casos se halla indicado el muestreo de
diferentes lotes, procedindose luego al examen de cada
muestra en particular o al de todas ellas en conjunto.

g. Las
muestras
que
deben
recogerse
sern
las
convenientemente mnimas y de las zonas sospechosas,

por ejemplo carne 200 gr, agua potable 500 ml, harina 150
gr., etc.
h. Cuando no se puede hacer el examen microbiolgico
inmediatamente,
las
muestras
de
los
alimentos
susceptibles a alteracin deben enfriarse inmediatamente
(si no lo estaban ya) y transportarse y conservarse
congeladas o refrigeradas en el laboratorio, hasta que se
utilicen.

Foto N 191 .- Muestras de bebidas gaseosas e insumos para bebida, en

proceso de anlisis microbiolgicos.

E. PERICIAS DE ENTOMOLOGA
1. CONCEPTO DE ENTOMOLOGA FORENSE
Es el estudio morfolgico y taxonmico de insectos que
intervienen en la destruccin de cadveres y en sustancias que
tienen relacin con hechos delictuosos.
2. VALOR CRIMINALSTICO
La determinacin de la Data de la Muerte es uno de los
problemas ms complicados que se le pueden presentar al
Perito Criminalista; pero tambin su importancia criminolgico
es transcendental. Fijar con exactitud el momento en que se ha
producido una muerte puede equivaler en la mayor parte de las
ocasiones a descubrir al verdadero autor y a librar de una falsa
acusacin al inocente.

A estos datos para la determinacin de la fecha de la

muerte se les llama tambin Cronotanatodiagnstico los que
son aplicados para determinar el intervalo post mortem o
tiempo desde la muerte hasta el hallazgo del cadver. No hay
mtodo exacto sino estimativo, tanto ms cuando ms tiempo
a transcurrido.
La aplicacin de estos datos al cronotanatodiagnstico
exige amplios conocimientos entomolgicos. Recogidas las
muestras de los insectos presentes en el cadver y de los
restos de larvas, pupas,etc., identificadas las especies
presentes se determina el Grupo al que pertenecen y por la
sucesin de los ciclos vitales de los gneros correspondientes
podra deducirse la data de la muerte, a esto se le conoce
como "FAUNA CADAVRICA" o "ENTOMOLOGA FORENSE".
El estudio de insectos y caros que infestan los alimentos
(granos de cereales, harinas) y otras sustancias tienen inters
criminalstico para esclarecer casos de delitos econmicos,
ecolgicos y atentados a la salud.
3. FAUNA CADAVRICA
Se llama tambin Entomologa Tanatolgica, y est
compuesta de aproximadamente unas veinte especies de
insectos que formas 8 grupos en corres-pondencia con los
perodos en que entran en escena. Se distinguen,
cronolgicamente, las faunas Californiana (desde la muerte),
Sarco-faguiana(1 a 6 meses), Dermestiana(3 al 9 mes),
Corinetiana( 10 mes), Silfiana (2do. ao), Acarina (2do y 3er.
ao).
El grupo Californiano no est representado ms que por
moscas: Calliphora erythrocephala y C. vomitaria (tipo agreste),
grandes moscas azules de la carne, Musca domstica, "mosca
domstica", M. corvina, Muscina stabulans, que ponen sus
huevos inmediatamente despus de la muerte, sobre el
cadver fresco, alrededor de los orificios naturales (labios,
narices, ngulo interno de los ojos) y a nivel de los pliegues
cutneos. Las puestas, que agrupan 100 a 150 huevos, se
escalonan de abril a octubre en nuestras regiones.
Durante la estacin favorable, en 8 a 12 horas, los huevos
se vuelven larvas o gusanos muy voraces, 8 das (musca) o 10
a 20 das (Callphora) son necesarios para la transformacin de
estas en ninfas que se encierran en un capullo quitinoso de
donde sale el insecto perfecto tras una incubacin de 12 das
(verano) al mes; despus, las generaciones se suceden. El ciclo
evolutivo completo (huevo, larva, ninfa, adulto) no dura en
pleno verano, ms que 12 das. Es preciso pues un mnimo de

12 das para encontrar capullos vacos bajo un cadver, bajo

los vestidos o en la tierra, a donde las larvas emigran para
enquistarse.
El grupo sarcofaguiano es atrado por el olor cadavrico de
un tejido humano en descomposicin. Se compone igualmente
de moscas: Sarcophaga (mosca de color gris cuyo abdomen
esta cubierto de manchas torna-soladas), Lucilia ( de 7 a 9mm
de largo de color verde brillante con manchas blancas a los
lados) Cynomyia (abdomen azul violceo).
Si las crislidas examinadas tiene los estigmas respiratorio
posteriores situados en el fondo de una depresin, proceden de
sarc-fagas, moscas que ponen larvar vivas cuyo ci-clo
evolutivo es ms corto.
El grupo dermestiano coloniza el cadver en el momento
del desprendimiento de los cidos grasos voltiles (cido
butrico de olor fuerte) procedente del enranciamiento de las
grasas. Comprende los colepteros del genero Dermestes y
una pequea mariposa, Aglossa, que se nutren de grasa y
devoran la grasa del cadver.
En las regiones muy clidas, desrticas, las Dermestes son
capaces de reducir un cadver al estado esqueltico entre 40 y
100 das, su ciclo evolutivo dura 30 das.
En el grupo corinetiano se encuentran pequeas moscas
(Piohila Casei, mosca muy comn en el queso, cuya larva se
desplaza saltando) pero sobre todo colepteros del gnero
Corynetes, de 5mm de largo, azules o rojos. En Argelia son
reemplazados por las Necrobia rufipes. Estos insectos acuden
en el momento de la "fermentacin caseaosa" de las materias
proticas, que sigue a la fermentacin butrica de las grasas.
Los insectos del grupo silfiano son dpteos de pequea talla, del
tipo de los Phorides (Phora aterrima), de los Ophira y de los
colepteros de la familia de los Silphides, de los que ms
representativos son los Necrophores. Son atrados por las
emanaciones amoniacales procedentes de los lquidos
saniosos.
El grupo acariano se compone de pequeos caros, cuya
talla es inferior a un milmetro. Se desarrollaran en las ltimas
serosidades ptridas y secan el cadver.
Despus del tercer ao, atacan a los tendones, a las
aponeurosis, a los cabellos, y no dejan ms que los huesos;
consumen tambin los restos de insectos abandonados, estos
ltimos son colepteros de la familia de los Anthrenes que
tambin corroen las pieles y destruyen las colecciones de la
historia natural.

4. EXAMEN ENTOMOLGICO
Para determinar la taxonoma de los insectos se debe
realizar mediante el estudio macroscpico y morfolgico de sus
estructuras anatmicas mediante el empleo de claves
taxonmicas de invertebrados; asimismo mediante el estudio
gentico de sus caractersticas fenotpicas.
5. EQUIPOS Y MATERIALES DE LABORATORIO
a. EQUIPOS
-

Microscopio compuesto de investigacin.

Microscopio estereoscpico.
Lupa de iluminacin.

b. MATERIALES
-

Estuche de pinzas de diseccin, tijeras, escalpelos y

bisturs.
Alfileres de diseccin.
Lminas portaobjetos con sus laminillas cubreobjetos.
Placas de petri.
Frasquitos de boca ancha con tapa rosca.
Tubos de prueba.
Baguetas.
Cajitas de fsforo, gasas o algodn o papel filtro.
Detergente.

F. PERICIAS DE ECOLOGA
1. CONCEPTO
La
Ecologa
(del
griego
OIKOS=casa,
habitacin;
logos=estudio o tratado), es la ciencia que estudia las
relaciones del ser viviente con el medio en que habita y la
influencia de este sobre su organizacin y funcionamiento.
La materia y la energa se estn intercambiando
constantemente entre el mundo fsico no vivo y el mundo
biolgico. El sistema de relaciones que existen entre el mundo
biolgico y su medio ambiente se llama ECOSISTEMA. El
estudio de estos ecosistemas lo realiza la ECOLOGA.

Las comunidades de seres vivos dentro de un ecosistema

viven una armoniosa relacin, pero cuando ocurre un cambio
en el medio ambiente se produce un desajuste ecolgico.
Ambiente es todo lo que le rodea al ser vivo; esto es aire,
agua, suelo, clima, etc.
La naturaleza del medio y sus condiciones son la razn
primordial y causa primera de la distribucin de los seres vivos.
Una poblacin consciente de sus derechos
ambientales,
informada sobre la crisis ecolgica y sus alternativas es el
mejor guardin para que el desarrollo social sea posible en un
ambiente sano es decir ecolgicamente equilibrado.
El cdigo del Medio Ambiente (D.L. # 613, Arts 1 y 2) dice
"Toda persona tiene el derecho irrenunciable a gozar de un
ambiente saludable, ecolgicamente equilibrado y adecuado
para el desarrollo de la vida, y asimismo, a la preservacin del
paisaje y la naturaleza. Todos tienen el deber de conservar
dicho ambiente.
Es obligacin del Estado mantener la calidad de vida de las
personas a un nivel compatible con la dignidad humana. Le
corresponde prevenir y controlar la contaminacin ambiental y
cualquier proceso de deterioro o depredacin de los recursos
naturales que pueda interferir en el normal desarrollo de toda
forma de vida y de la sociedad. Las personas estn obligadas a
contribuir y colaborar inexcusablemente con estos propsitos".
"El Medio Ambiente y los Recursos Naturales constituyen
patrimonio comn de la Nacin. Su proteccin y conservacin
son de inters social y pueden ser invocados como causa de
necesidad y utilidad pblicas"
2. VALOR CRIMINALSTICO
El impacto del hombre sobre su ambiente se ha
incrementado obviamente en los ltimos siglos. El hombre ha
usado los bosques, los desiertos y los suelos, as como tambin
los ros, lagos, puertos y mares sin pensar en el futuro.
Las plantas industriales, cuyas fbricas eliminan desechos
txicos que desembocan en los ros, mares, lagos, etc. Las
aguas negras no tratadas o tratadas inadecuadamente, que
son arrojadas por ahorrar dinero a las comunidades o a las
industrias atentan a la ecologa, asimismo, la depredacin o
explotacin irracional de los recursos naturales biticos por el
hombre, tanto en la costa (recursos marinos) como en la sierra
y la amazona (caza y tala indiscriminada de especies animales
o vegetales) tambin atentan al equilibrio ecolgico adecuado

del paisaje y la naturaleza, que es patrimonio de la nacin,

como tal, incurren en delitos ecolgicos.
El hombre puede corregir la contaminacin del agua y an
ms prevenirla si se le da la educacin, control o correccin
correspondiente. El agua puede entrar en la comunidad en
cualquier nivel alimenticio, pues puede ser tomado por las
plantas y pasar luego a niveles alimenticios superiores, cuando
las plantas sirven de alimento a otros seres. Tambin algunos
consumidores toman agua directamente como alimento. Qu
pasara en el consumidor si el agua tuviera elevada
contaminacin con plaguicidas u otros txicos?
Por estas razones el Laboratorio de Criminalstica cuenta
con equipo de profesionales como bilogos (especialistas en
zoologa,
botnica,
microbiologa,
taxonoma,
biologa
molecular, etc.) e ingenieros qumicos, qumicos farmacuticos
y otros profesionales, que realizan monitoreos y anlisis fsicosqumicos y biolgicos en muestras ambientales. Los Bilogos
estudian e identifican diferentes tipos de animales y vegetales
tanto grandes como pequeos y microscpicos de diversas
procedencias de ambiente ecolgico, asimismo, evalan el
medio ambiente realizando estudios ambientales integrales
para restaurar medios am-bientes deteriorados.

Foto N 192 .- Ambiente contaminado con desechos orgnicos con papeleas,

material polivinlico y otros contaminantes qumicos y microbiolgicos.

3. MUESTRAS AMBIENTALES DE INTERS BIOLGICO

Son muestras ambientales de inters biolgico:

a. Aguas. Potables, de ros, lagos, de riego, de mar y de

relaves.
b. Afluyentes lquidos. Domsticos, mineros, industriales.
c. Residuos slidos. Orgnicos e inorgnicos.
d. Suelos. Residenciales, Parques recreacionales, industriales,
agrcolas y forestales.
e. Aire. De ambientes cerrados (casas, hospitales, fbricas,
etc). De ambientes abiertos (parques, calles, campo, etc.)
f. Especmenes de. Animales, vegetales.
4. EXMENES BIOLGICOS Y MICROBIOLGICOS
a. Determinacin de indicadores biolgicos (flora y fauna) y
microbiolgicos.
b. Investigacin de patgenos de inters sanitario y ecolgico.
c. Identificacin de roedores, vectores y parsitos.
d. Exmenes taxonmicos de especmenes animales y
vegetales de vida terrestre y acuticas, as como la
identificacin de sus restos, que tengan inters ecolgico y
econmico (pieles, carnes, huesos, semillas, tallos, frutos,
etc.)
e. Evaluacin de ecosistemas.
5. EQUIPOS Y MATERIALES DE LABORATORIO
a. EQUIPO
(1) Microscopio Compuesto de Investigacin Cientfica.
(2) Esteroscopio
(3) Micrtomo
(4) Autoclave
(5) Centrfuga
(6) Incubadora
(7) Horno
(8) Bao Mara
(9) Cuenta colonias
(10)
Refrigeradora
(11)
Equipo Millipor de Campo
b. MATERIALES
(1) Tubos de prueba
(2) Matraces
(3) Estuche de pinzas de diseccin, tijeras, escalpelos y
bisturs.
(4) Alfileres de diseccin.
(5) Lminas portaobjetos y cubreobjetos.
(6) Placas petri estriles.
(7) Frascos y botellas de boca ancha y estriles.
(8) Frasquitos de boca con tapa.

(9) Bolsas de polietileno limpias.

(10)
Cajitas de fsforos.
(11)
Gasa, algodn y papel filtro.
(12)
Cintas adhesivas.
(13)
Guantes, mascarillas y cascos.
6. ANLISIS DE AGUAS
a. CONCEPTO
La excepcional importancia que tiene el examen
biolgico y microbiolgico que tiene el agua, teniendo en
cuenta bsicamente su aplicacin en el campo de la
Biologa Forense, es decir, cuando su uso o consumo
implica cierta amenaza al medio ambiente o a la salud, es
necesario considerarlo en el presente manual como punto
importante.
El agua es uno de los compuestos de gran significado
para nuestra vida ("lquido vital"), de ah el gran inters de
provisionarnos de agua con caractersticas adecuadas para
el consumo o para el empleo en la elaboracin de los
diferentes tipos de alimentos.
Las caractersticas del agua en las diferentes fuentes
puede cambiar por ciertos efectos bioestacionales,
incidiendo sobre su calidad, sin embargo los mltiples usos
y aplicaciones del agua, determinan hasta cierto punto
propiedades peculiares; por ejemplo, la "calidad de agua"
con miras a su utilizacin industrial poco tiene que ver con
la "calidad del agua" para la proteccin y reproduccin de
peces, y menos con la "calidad de agua" para consumo
humano. Estas diferentes "calidades" son definidas por
parmetros especficos y las medidas de "preservacin de
calidad" tienden precisamente a mantener estos
parmetros dentro de los valores aceptables en cada caso.
Actualmente se considera no slo el ambiente acutico
como un sistema, sino todas las actividades de la
comunidad humana que configuran este ambiente y que
dependen del mismo, con sus mltiples interacciones y
reciprocidades.
En efecto, las interacciones
biolgicas constituye
fundamentalmente el punto crucial que determina la
"calidad", desde el origen hasta la utilizacin; sin dejar de
considerar
por
supuesto,
las
posibilidades
de
contaminacin qumica.
Sin tener en cuenta la flora microbiana transitoria o
"contaminante", indudablemente existe una microbiota
natural o "propia" en las aguas continentales y marinas,

correspondindoles precisamente una poblacin microbiana

o tipo fisiolgico que guardan relacin con las
transformaciones constantes y repetidas de la materia
orgnica que se observan en las aguas naturales y en el
suelo; de ah que en la transformacin de elementos a
compuestos orgnicos, la subsecuente liberacin de
elementos para convertirse en compuestos inorgnicos y la
reutilizacin (ciclos bioqumicos) dependen precisamente
de la actividad bioqumica de estos microorganismos, y de
las condiciones microecolgicas del medio acutico
(relaciones interespecficas).
La mayor parte de microorganismos que entran en el
agua son incapaces de desarrollarse en esta, de ah que
slo permanecen por poco tiempo, salvo las formas
esporuladas o quistes que persisten durante meses e
incluso aos.
Fundamentalmente la poblacin microbiana (bacteria,
hongos, protozoarios, y algas microscpicas) est
determinada por las condiciones fsicas y qumicas que
prevalecen en el medio acutico; sin embargo es posible
ciertas
generalidades,
as
tenemos
que
los
microorganismos patgenos sobreviven durante ms
tiempo en agua fra y limpia que en el agua relativamente
caliente y que contengan materia orgnica.
b. CONTAMINACIN DEL AIRE
El aire no constituye un medio apropiado para el
desarrollo de la microflora, de ah que se presenta
transitoriamente y variable, dependiendo del lugar o
ambiente. El nmero de microorganismos est relacionada
con la cantidad de partculas de polvo que tiene
suspendidos, por ejemplo son menos en el aire del campo
que en el de la ciudad, menos en el de la montaa que en
el de tierras bajas y el aire en mitad del ocano est casi
libre de micro-organismos.
La presencia de hongos y levaduras es muy comn, y
casi siempre superan a las bacterias, pasando al agua por
cualquier mecanismo; esto explica el por qu muchos de
los microorganismos presentes en el aire formas parte de la
propia flora del suelo.
En el suelo existe una gran diversidad de
microorganismos, y la inmensa cantidad de estas incluye a
miles de millones de bacterias, hongos, algas, protozoos y
virus en cada gramo. Es probable encontrar grmenes
patgenos provenientes muchas veces de la contaminacin
con excreciones humanas o de animales o de los cuerpos

de animales o de humanos
padecimientos infecciosos.

que

han

fallecido

por

En conclusin, el aire y el suelo, contribuyen de manera

especial a incrementar la flora microbiana del agua.

Foto N 193 .- Colonia de microorganismo en Agar Triptasa de un

cultivo de agua en placa de Petrie.

c. ASPECTOS BIOLGICOS DE IMPORTANCIA

AGUAS CONTAMINADAS Y POLUTAS

EN

Al respecto es importante aclarar, que no referimos

a la contaminacin cuando los microorganismos
"infectan por contacto" y polucin, cuanto estos
originan transformaciones del medio acutico , es decir
en la contaminacin el agua es simplemente un
vehculo del agente contaminante, y la polucin origina
desequilibrio en el desarrollo normal de las poblaciones
acuticas, Frecuentemente, la contaminacin y la
polucin se hallan asociados, por que pueden tener un
mismo origen.
El anlisis experimental del efecto que
cada
contaminante
aisladamente
ejerce
sobre
cada
microorganismo o comunidad biolgica, es una de las
preocupaciones latentes de los bilogos.
Partiendo del principio (cuando nos referimos a la
polucin) que la biodegradacin no es ms que el
resultado de los procesos de digestin, asimilacin y
metabolizacin de los compuestos orgnicos, por

microorganismos saprfito o saprozoicos, tales como

bacterias, hongos, protozoos y otros, es de suponer que
adems de conocer las poblaciones vivientes, se debe
tener en cuenta muchos otros
aspectos como :
concentracin de la materia orgnica, presencia o
ausencia de sustancias txicas, temperatura, pH,
Demanda Biolgica de Oxgeno (DBO), Demanda
Qumica de Oxgeno (DQO), entre otros factores.
El efecto de "metabiosis" en el agua puede ser de
importancia cuando se quiere determinar su grado de
polucin o eutroficacin. La investigacin de ciertos
microrganismos u organismos llamados "indicadores"
resulta entonces de gran inters desde el punto de vista
sanitario, o dinmico, cuando se quiere probar su
aptitud para el consumo, o determinar el grado de
desequilibrio ecolgico.
d. MTODOS PARA EL EXAMEN MICROBIOLGICO
DEL AGUA
Si se quiere prevalecer el derecho al consumo del
agua, sin poner en peligro la salud, es conveniente
tener cuenta su calidad higinica.
Para que el agua se considere de buena calidad
higinica se le exige estar exenta de microorganismos
peligrosos, o que estos se encuentran en un nivel que
los haga inocuos.
La prctica en la investigacin de microorganismos
peligrosos,
se
realiza
determinando
cientos
microorganismos indicadores (coliformes), as como
tambin
determinando
el
nmero
total
de
microorganismos presentes (recuento total).

e. EL RECUENTO TOTAL COMO INDICADOR DE LA

CALIDAD SANITARIA DEL AGUA NUMERACIN DE
MICROORGANISMOS
AEROBIOS
MESFILOS
VIABLES
(1) FUNDAMENTO
Cada clula bacteriana puede crecer y desarrollarse
en un medio slido formando colonias. El nmero de
colonias desarrolladas corresponden al nmeros de
clulas viables o Unidades Formadoras de Colonias

(UFC) presente en una cantidad determinada o

volumen de agua.
(2) FINALIDAD
Determinar su grado de contaminacin, as como
tambin
indicar
la
posible
fuente
de
contaminacin.
(3) TOMA DE MUESTRA
En condiciones aspticas, en un frasco estril tomar
entre 100 a 200ml de agua, inmediatamente llevar
al
laboratorio
para
su
procesamiento
o
refrigeracin. El frasco debe ser de vidrio , boca
ancha y color mbar.
f.

RECOMENDACIONES
LOS ANLISIS

TCNICAS

PREVIAS

(1) Una vez tomada la muestra debe conservarse a

temperatura de refrigeracin (0-4 C) y procesarla
dentro de las 24 horas siguientes.
(2) No congele la(s) muestra(s).
(3) Desinfecte el rea de trabajo.
(4) Evite a lo mximo las corrientes de aire y restrinja
el paso de personas en el rea de trabajo.
(5) Esterilice el material con anticipacin.
(6) Marque el material, tomando en cuenta el nmero
de la muestra.
(7) Agite la muestra en forma vigorosa.
(8) Obtenga las diluciones convenientes, siempre
trabajando en condiciones aspticas.
(9) Prepare medios de cultivo de acuerdo al nmero de
muestras diarias a trabajar.
(10)
Evite en lo posible el calentamiento
excesivo de los medios.
(11) Asegrese que la temperatura del medio es la
correcta, en el momento de adicionarla sobre la
muestra, en la caja Petri.
(12)Haga controles de esterilidad y viabilidad del
medio de cultivo.
(13)No olvide de colocar algodn en el extremo
superior de la pipeta, cuanto esta se esteriliza.
(14)Trabaje cerca al mechero, flamee la boca de los
frascos o tubos.
(15)No caliente las pipetas en el mechero.
(16)Utilice una pipeta por dilucin.
g. MTODO STANDARD DE RECUENTO EN PLACA POR
SIEMBRA EN PROFUNDIDAD

PROCEDIMIENTO:
Obtenidas las diluciones a partir
procede a:

de la muestra se

(1) Agregar rpidamente por duplicado, alicuotas de

1ml a placas Petrie estriles, de cada una de las
diluciones utilizando para ello pipetas estriles.
(2) Luego se agrega a cada una de las placas ( que
contiene 1 ml. de la dilucin correspondiente) 15
ml. de agar licuado y temperado a 45 +- 1 C.
(3) Mezclar inmediatamente las alicuotas con el agar
mediante movimientos de vaivn y rotacin de las
placas.
(4) Una vez solidificado el agar, invertir las placas e
incubarlas a 29-31 C durante 48 +- 3 horas.
(5) Realizar el cmputo del recuento Standard en Placa.
h. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS
El recuento total es un ndice de Calidad Higinica,,
por lo que sus valores han sido contemplados en la
legislacin vigente, quedando establecido en el
Reglamento Sanitario, para el caso del agua, que el
recuento de grmenes aerobios mesfilos totales, no
debe sobrepasar de 100/ml, cuando se trata de agua de
la red pblica o como mximo 1000/ml cuando el agua
es de uso industrial y helada.
i.

NUMERACIN DE BACTERIAS COLIFORMES POR EL

MTODO DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP)
(1) FUNDAMENTO
La determinacin de coliformes totales (NMP) se
basa en el empleo de medios de cultivo que se han
hecho selectivo para coliformes por adicin de
sustancias que inhiben la mayor parte de otras
bacterias.
(2) PROCEDIMIENTO
La muestra de agua se procesa como en el caso
anterior, en tres diluciones proporcionales seriadas
sembradas en 9 a 15 tubos de Caldo Lactosado
especial para coliformes, para el mtodo de los 3 o
los 5 tubos respectivamente. El nmero de

microorganismos se conoce en las tablas Standard

de NMP (Mtodo Estadstico).
G. PERICIAS DE BIOLOGA MOLECULAR
1. ANLISIS
DE
LA
MOLCULA
DESOXIRRIBONUCLEICO (ADN)

DEL

CIDO

CONCEPTOS GENERALES
El ADN es el constituyente bioqumico de los cromosomas
en el ncleo de toda clula. Los cromosomas, son componentes
filamentosos que se forman al condensarse los grnulos de
cromatina nuclear al inicio de la divisin celular o cariocinesis;
contienen el material gentico de la clula. El ADN es la nica
molcula biolgica cuyo original sirve de modelo directo para la
sntesis de la molcula de ADN.
Mediante el anlisis de la molcula del ADN, la prueba
biolgica de "TIPIFICACIN DEL ADN", permite obtener una
"huella gentica" del individuo a partir de una muestra de
sangre, semen, pelo, saliva o en fin cualquier otro tejido del
cuerpo. Esta huella gentica es irrepetible, lo mismo que las
huellas
dactilares. Se trata de un documento de
identificacin biolgica "CAPAZ DE INDIVIDUALIZAR CON UNA
EXACTITUD PRCTICAMENTE ABSOLUTA".
2. HISTORIA DE LOS AVANCES DEL ADN
En l953 el Bilogo norteamericano WATSON y el fsico
francs CRICK, crearon el modelo molecular especial que
explica las propiedades fsico qumicas y biolgicas del ADN.
En 1975 SOUTHERN public en el "Journal of Molecular
Biology" la demostracin del uso de sondas para el ADN en el
anlisis de genes sobre fase slida. A partir de ese entonces, el
uso de esta tcnica se ha aplicado hacia muchas reas.
Actualmente su uso es amplio en la investigacin biolgica,
mdica, agrcola y se ha extendido al campo de las ciencias
forenses y Criminalstica.
El 17 de setiembre de 1984, el Dr. Alec JEFFREYS,
investigador britnico present en Washington el mtodo del
"DNA FINGERPRINT" o de la "HUELLA DEL ADN" como una
innovacin en la identificacin humana.
Esta prueba se logr luego de observar que entre un 10 % y
30 % de total de; ADN no contiene informacin codificada y
compone, por lo tanto, secuencias que puede denominarse
"mudas". Este ADN aparentemente intil se llama " ADN
satlite", que se halla disperso entre el ADN que si codifica.
Partes de este " ADN satlite " son identicos en todos los seres

humanos pero otras, muy variables, se heredan conforme a las

leyes de Mendel.
Estas secuencias de informacin gentica varan mucho
entre individuos puede observarse que las secuencias son
altamente repetitivas, por lo que se encuentran varias veces a
lo largo de la cadena del ADN. La longitud de cada secuencia
que se repite, el nmero y ubicacin de estas repiticiones
dentro de cada molcula de ADN son absolutamente
individuales. Justamente, estas secuencias son las que este
examen permite visualizar.
Para emplear este sistema el Doctor Jeffreys inventa una
"Sonda" que se vale de la circunstancia de que el ADN est
integrado por dos filamentos, los cuales si se separan, tienden
a reunirse con su compaero durante el proceso denominado
de " Apareamiento de base ".
Los filamentos del ADN tratados con una solucin alcalina
se dividen. Por lo tanto, quedan en la forma de ADN de un solo
filamento. A su vez, los filamentos que tienen en comn
composicin y secuencia, se atraen y se hibridizan : el grado
de complementariedad determinar el grado de apareamiento
entre la Sonda y la muestra.
La sonda del ADN debe ser, por ello, lo suficientemente
similar a la muestra para permitir la hibridizacin. Pero
tambin, lo suficientemente distinta como para no aparear con
las partes del ADN que son exclusivas de la muestra que
analiza.
El Dr. Jeffreys trabaj con el ADN satlite del gen humano
de la mioglobina, y obtuvo clones de la sonda que satisfacen
los requisitos.
Este mtodo no hubiera existido sin el procedimiento del
"electroforesis sobre gel" que empez a utilizarse en los
laboratorios a partir de 1975. Poco despus, los procesos de la
ingeniera gentica permitieron el acceso a la molcula del
ADN, por ultimo, tampoco hubiera sido posible de no haberse,
descubierto las "enzimas de restriccin", capaces de cortar el
ADN en lugares precisos, como si fueran tijeras y las "sondas",
que como si fueran anzuelos, detectan entre miles a los
fragmentos.
Las metodologas basadas en el anlisis del ADN en el
campo de las Ciencias Biolgicas, Mdicas y Agrcolas, pueden
ilustrarse indicando los hitos en la tecnologa que ha conducido
avances en los campos de la ciencia legal. Los avances se
inician con:
a. La descripcin de la doble hlice de la molcula de ADN.

b.
c.
d.
e.
f.

La aclaracin del cdigo gentico.

El desarrollo de tcnicas de la clonacin molecular.
La secuenciamiento del ADN.
La Transferencia Gentica.
La identificacin del Fragmento de Restriccin Unido a
polimorfismos (RFLPs).
g. El desarrollo de la Reaccin en Cadena de la Polimeraza
(PCR).
3. VARIABILIDAD DEL ADN:
La variabilidad del ADN es muy extensa, la composicin de
pares de base (bp) del hombre (diploide) es ligeramente grande
en 3 x 109 por genoma haploide. Muy poco del gemona humano
es restringido de la variacin, probablemente menos que el 1 %
, ya que es la fraccin aproximada del genoma compuesto de
genes expresados y activos, la evidencia del laboratorio del FBI
sugiere que an esta fraccin del genoma no es inmune desde
la variacin
ya que ellos observaron la presencia de
repeticiones de tndem cortos altamente polimorficos y
polimorfismo de base simple dentro de los axones de genes de
expresin. As el potencial para una amplia variacin de un
individuo a otro existe y la mayora de trabajadores en el
campo para discriminar entre muestras de ADN, derivadas de
diferentes individuos es inmensamente relativa al tamao de la
poblacin. Las regiones del genoma entre los segmentos
codificantes de genes ( intrones) y segmentos intergnicos
exhiben los polimorfismo de secuencias de ADN que fluctan
desde aproximadamente 1/100 bp hasta 1/1000 bp.
4. MUESTRAS BIOLGICAS PARA ANLISIS
La extensa variabilidad del ADN en el genoma humano
unido a tcnicas de cidos Nucleicos de la biologa molecular a
proporcionado al cientfico forense, mtodos poderosos para el
perfil del ADN, cuyo potencial total no ha sido alcanzado , a
pesar de la crtica del Sistema actual del anlisis de ADN, el
cual tiene un sistema analtico que ser apoyado en los
principio cientficos y servir a la comunidad cientfica forense
y a la veracidad pblica. La prueba del ADN beneficiar al
Sistema Legal.
Para los usos forenses, primero se debe extraer el ADN de
una pequea muestra de sangre, pelo, semen, u otro tejido. Las
" Enzimas de restriccin " cortan en lugares especficos el ADN
que se aisl. Los fragmentos que se obtienen se colocan sobre
una hoja de " gel" de agarosa, y se los separa mediante
electroforesis. Este campo elctrico los hace mover, finalmente,
los fragmentos quedan acomodados segn su tamao.
Estas bandas de fragmentos de ADN se transfieren a una
membrana de nylon, tal como la tinta se transfiere a un papel

secante (15). A esta copia se la expone a las " sondas de ADN"

para que se inicie la hibridizacin. Las "sondas" genticas se
pegan a las bandas de ADN en las que calzan. Los fragmentos
complementarios entre la sonda y la muestra se hibridizarn y
se adherirn a la copia. Los no complementarios no se pegarn,
y se los eliminar mediante un lavado posterior.
Como las "sondas" empleadas en un inicio eran
radiactivas, ahora se emplea tambin sonda no radioactiva
como la biotina, la sonda radioactiva puede captarse una
imagen sobre la pelcula fotogrfica ( se emplea la del tipo de
rayos X ). Despus del revelado, aparecer un patrn de
bandas :" las huellas de ADN", cada banda que aparece indica
que se trata de ADN reconocido por la "sonda". La fotografa
resultante se parece a las etiquetas con cdigo de barras que
tiene los productos en el supermercado.
Consiste en unas 20 30 pequeas barras alineadas y de
diferentes anchos. El patrn que se obtiene de cada individuo
es una mezcla de los patrones de sus progenitores biolgicos.
Exceptuando, a los mellizos idnticos, hasta los hermanos
descendientes de los mismos padres tienen patrones distintos
pues en cada uno de ellos se observan diferentes mezclas de
los elementos de los patrones de los progenitores.
Si las posiciones de las bandas de una muestra coincide
con las que se obtuvo de otra, ello indica que el " ADN satlite "
se encuentra en los mismos lugares, es decir, que ambas
muestras provienen del mismo individuo, por ejemplo, coincide
la " huella gentica " que se obtuvo en el semen recuperado de
la victima de una violacin con la sangre del autor. En este caso
de que las muestras provienen de distintas personas habr una
mayor proporciones de bandas comunes entre ascendentes y
descendentes biolgicos.

Foto N 194 .- En una cmara de Flujo laminar, el perito biologo

molecular prepara muestra biolgica para la amplificacin del
ADN.

Las muestras que comnmente se analizan son las siguientes:

a. SANGRE
Tanto en estado fresco o en casos de manchas se trata
de la muestra que se analiza con mayor frecuencia.
El ADN se extrae de los glbulos blancos, pues no se
encuentran en los globulos rojos ni en el plasma, la muestra
debe enfriarse o congelarse, segn cuando piensa
efectuarse el anlisis. Si se trata de manchas, cuanto mas
grande sean mayor ser la posibilidad de xito, sin
embargo, el factor que mas influye en el xito de la prueba
no es el tamao ni la antigedad, sino si se le conserva
correctamente despus de la haberla dejado secar a
temperatura ambiental y se deben colocar en un recipiente
a prueba de la humedad, y enfriarse.
b. SEMEN
Es la otra muestra que se prctica con mayor
frecuencia de este tipo de exmenes, y es la principal en
los delitos de la honestidad. El ADN se extrae de la cabeza
de los espermatozoides presentes en el semen.
Si se recupera es estado liquido, ste debe enfriarse.
Si se trata de manchas, deben dejarse secar y luego

almacenarlas lejos de la humedad. En los casos de

violaciones, como
las
muestras que se recuperan
generalmente estn mezclados con otros tejidos de la
propia victima, conviene que los peritos extraigan
una muestra de sangre de la victima y obtengan su
"huella gentica". Esta ayudar a la horas de interpretar
las dems huellas.
c. CABELLOS
Lamentablemente, el examen solamente puede
efectuarse cuando hay races de cabello, pues el pelo en s
es tejido muerto, que no sirve para el examen. An es difcil
efectuar la pericia sobre estos tejidos, aunque no imposible.
Basta una nica raz de pelo si se empleara sondas de tipo
de las de lugar nico (SLPs) y diez races si se trata con las
sondas de lugar mltiples (MLPs)
d. CLULAS DE EPITELIO BUCAL O VAGINAL
e. OTROS TEJIDOS
En principio no hay mayores inconvenientes en que se
obtenga muestras de cadveres o de material fetal. El xito
del examen depende del estado de descomposicin del
cuerpo , por lo tanto importa tener en cuenta factores tales
como el tiempo transcurrido desde el fallecimiento, la
temperatura, etc. Si la muerte es relativamente reciente,
puede obtener, la " huella gentica " a partir de una
muestra de sangre, o de mdula sea, etc. (6), Ahora bien,
si la conserva- cin es correcta, el ADN es extraordinariamente estable, Prueba de ello, es que se obtuvo con
xito la Huella digital a partir de tejidos extrados de
momias egipcias.(10)
5. TCNICAS USADAS EN ANLISIS DE ADN EN MUESTRAS
BIOFORENSES
a. MTODO RFLP (POLIMORFISMO DE LONGITUD DE
FRAGMENTOS DE RESTRICCIN)
Es la tcnica mas usada cuando se dispone de una
cantidad suficiente de material biolgico para analizar, de
all que es la tcnica de opcin para la determinacin de la
paternidad y filiacin.
En Estados Unidos, el 90% de las disputas de
paternidad se realizan usando esta tcnica con resultados
satisfactorios.
El RFLP, consiste en la extraccin del ADN de una
muestra biolgica, cortados especficamente con enzimas

de restriccin (endonucleasas de restriccin), obtenindose

fragmentos de longitud variable entre una persona y otra.
Los fragmentos de ADN son separados por electroforesis en
geles; y posteriormente transferidos a una membrana,
manteniendo sus posiciones. La membrana es tratada con
una sonda de ADN al que se unir en sitios especficos a los
fragmentos de ADN cortados. La interpretacin es realizada
por la comparacin de inclusin e exclusin de bandas de
ADN.
En anlisis por RFLP, las "huellas digitales" individuales
y especficas del ADN pueden ser obtenidas siempre que el
ADN no este degradado y este presente en cantidades
suficientes. Se requiere no menos de 50 ngr. de ADN para
el anlisis por RFLP, usando una muestra de un slo locus, y
ms de 1000 ngr. si se hace de un anlisis de muestra de
varios loci. Sin embargo, en la prctica dichas cantidades
de ADN no son obtenibles de las evidencias biolgicas
forenses. Ms an, el RFLP consume una gran cantidad de
material para analizar y muchas muestras no pueden ser
reanalizadas.
b. MTODO PCR (REACCIN
POLIMERASA)

EN

CADENA

DE

LA

Es la tcnica que ha revolucionado las ciencias

forenses, puesto que brinda la posibilidad de aplicarlo
cuando el material biolgico disponible es escaso; lo cual es
frecuente en las escenas de los delitos de hechos de
sangre, violaciones sexuales, etc.
Esta poderosa tcnica consiste en replicar a la molcula
de ADN y permite obtener millones de copias de molculas
de ADN a partir de una molcula ADN original en tubo de
ensayo. Actualmente se utilizan los termocicladores o
cicladores trmicos, que son aparatos que automatizan el
sistema y en menos de 24 horas se disponen de los
productos de ADN amplificados, los que posteriormente son
separados por electroforesis en geles. La interpretacin es
realizada por la comparacin de bandas de ADN obtenidas.
La aplicacin de esta tcnica es mayormente para
resolver casos criminalsticos con hechos de sangre y
violaciones sexuales en los que pueden hallarse evidencias
biolgicas en pequea cantidad como indicios.
Utilizando
el
mtodo
PCR,
trabajando
muy
cuidadosamente, se hace posible ahora determinar el ADN
de un simple cabello con raz, de una simple clula diploide
(clula bucal), o incluso de un espermatozoide aislado.
Tambin debido a que la PCR puede generar un gran
nmero de copias de una secuencia especfica de ADN, los

mtodos usados para la deteccin de polimorfismos de ADN

son ms simples y consumen menos tiempo que el anlisis
por el mtodo RFLP.
Para obtener el mximo beneficio para el cientfico
forense un sistema marcador gentico para el PCR forense
debe reunir las siguientes caractersticas:
(1) El marcador debe ser altamente polimrfico, y debe
tener un alto nivel de heterocigoticidad gentica.
(2) La secuencia blanco debe ser fcil y especificamente
amplificada.
(3) Los mtodos de deteccin de las variaciones allicas
deben ser poco complicados y muy confiables.
(4) Los datos de la poblacin de las frecuencias genotficas
deben estar disponibles, para asignar estimados al
poder de discriminacin de los marcadores y la
probabilidad de una falsa inclusin.
(5) Los sistemas marcadores deben ser inherentemente
independientes, de tal forma que las frecuencias
derivadas de un sistema marcador pueda ser
multiplicada con aquellas de los otros, incrementando
as el poder discriminativo. La herencia independiente
ocurre cuando los marcadores se hallan en cromosomas
separados, o se hallan en equilibrio de linkage cuando
se hallan en un mismo cromosoma.
Una cantidad de sistemas de tipificacin altamente
informativos basados en la PCR estn en desarrollo, lo que
hara que el anlisis PCR sea ms til en la identificacin
individual. Sin embargo, ya que muchas muestras de
evidencias no son susceptibles al anlisis RFLP, nosotros
pensamos que los sistemas PCR existentes sern de mucho
uso. Ms An, los mtodos de deteccin en los mtodos
PCR son rpidos, simples, y no requieren el uso de
radioistopos. Los mtodos de tipificacin que incluyen la
hibridizacin con sondas SSO tambin tienen la ventaja de
que los alelos son definidos cualitativamente. Por lo tanto,
la reunin y el uso de las bases de datos de la poblacin se
simplifica.
6. ESTUDIO DE FRECUENCIAS GENTICAS EN LA POBLACIN
PERUANA
En los pases en que el empleo de esta prueba se ha
difundido ms, los abogados suelen presentar ante el tribunal o
jurados, datos estadsticos acerca de la exactitud de la misma,
para reforzar la validez del mtodo.
Estas estadsticas se refieren a las probabilidades de que
dos personas compartan las mismas "huellas Genticas". Las
variaciones de un individuo a otro son muy grandes, y las

probabilidades de compartir
prcticamente nulas.

las

mismas

huellas

son

A pesar de la sencillez de la interpretacin del resultado de

estos exmenes , resulta necesario que se despeje toda duda
del Tribunal y los Jurados. Los datos estadsticos que conviene
presentar ante la justicia, indican las probabilidades de que una
" huella gentica " proveniente de otra persona que no sea el
sospechoso, pueda coincidir con la de l, por pura casualidad.
La tabla que se muestra a continuacin, indica las
probalidades de encontrar una banda semejante en un
individuo, por una coincidencia casual :
Nmero de bandas del patrn
en cuestin

18

Probabilidad de encontrar
bandas semejantes en un
individuo

4
06
08
10
12
14
16
1 en 68,000 millones
20

1 en 250
1 en 4000
1 en 65,000
1 en 1 milln
1 en 17 millones
1 en 268 millones
1 en 4,500 millones
1 en 1 billn

7. INVESTIGACIN BIOLGICA DE PATERNIDAD Y FILIACIN

a. CONCEPTOS GENERALES
La determinacin biolgica de la paternidad y filiacin
ha constituido un problema prcticamente irresoluble hasta
bien entrado el siglo XX, debido a la imposibilidad de
determinar de un modo objetivo los caracteres que cada
individuo hereda de sus progenitores. As, en 1909,
Basteson afirmaba en su libro Mendels Principies of heredity
lo siguiente: "Hay pocas pruebas hasta la fecha de herencia
mendeliana de caractersticas normales en el hombre. Un
solo caso ha sido descrito y verificado claramente: el del
color de los ojos."
Los primeros caracteres humanos de transmisin
mendeliana simple que se objetaron fueron los antgenos
presentes en la superficie del hemate. El primer marcador
humano polimrfico (sistema ABO) no fue descrito hasta
1900 por Landsteiner. El progreso a principios de siglo fue
lentsimo y tuvieron que transcurrir la heredabilidad de los
fenotipos de dicho sistema (1910). Faltaban an 14 aos

para que Bernsten determinara de un modo exacto el

proceso hereditario de los alelos del sistema ABO (1924).
Los posteriores trabajos del propio Landsteiner,
Descatello, Sturli, Levine, Wiener, Walsh y Montgomery
describieron por completo los sistemas eritrocitarios ABO,
MNS, P y RH, base fundamental de todas las
investigaciones biolgicas de la paternidad. Estos sistemas
se siguen utilizando en la actualidad, junto a las
aportaciones realizadas por posteriores descubrimientos
(sistemas
Kell,
Lutheran,
Duffy,
Kidd,
Xg,
etc),
constituyendo un grupo de marcadores eritrocitarios bien
definido y que se caracteriza porque sus fenotipos se
determinan mediante reacciones inmunolgicas con
antisueros, de tcnicas sencilla y precisa.
El segundo grupo de marcadores polimrficos
(protenas plasmticas) aparece en 1947, el mismo aos en
que se descubri el sistema eritrocitario Ss (el que est
ligado al sistema MN). Jayle y Gillard reconocieron la
existencia de varios tipos de haptoglobinas (Hp), primer
paso al descubrimiento posterior de mltiples polimorfsicos
de protenas plasmticas: Gm (Waller y Vaugham, 1958), Gc
(Hirschfeld, 1959), Ag (Allison y Blumberg, 1961), Tf
(Smithies, 1957), Pi (Laurell y Erikson, 1963), Lp (Berg,
1963), etc.
Algo
despus
comenzaron
a
describirse
los
polimorfisimos que constituyen el tercer grupo de sistemas
polimrficos (enzimas eritrocitarias y leucocitarias), ACP
(Hopkinson, 1963), PGM (Spencer, 1964), AK (Fildes y
Harris, 1966), GPT (Chen y Giblett, 1971), etc.
Hubo que esperar hasta 1967 para que los trabajos de
varios grupos de investigadores: Van Rood, Terasaki y
principalmente Dausset (Premio Nobel, 1980), culminaron
en la descripcin completa del sistema Hu-1, que fue
llamando posteriormente HLA (Human Leucocyte Antigen),
el sistema antignico ms polimrfico de los descritos hasta
el momento.
Hasta los inicios de la dcada de los aos 80 cuando el
problema entra en una nueva dimensin, los estudios que
sobre el ADN humano venan realizndose, empiezan a
cristalizar en lo que se refiere a la posibilidad de sus
aplicaciones mdico - legales. El mtodo de anlisis del
ADN, que se basa en el anlisis de RFLP (Restriction
Fragment Lenght Polymorfism) tiene una aplicacin idnea
en la investigacin biolgica de la paternidad.
b. CONSIDERACIONES JURDICAS

De la paternidad biolgica deriva el ejercicio de la

paternidad jurdica, sobre la que concurren circunstancia de
tipo socio-familiar (fundamentalmente la patria potestad),
que constituyen el marco regulador de las relaciones
paterno-filiales. Esta, a su vez, aseguran la supervivencia
de la unidad familiar como clula primaria de la estructura
social humana.
Ante la falta de pruebas biolgicas objetivas y dada la
variabilidad en la expresin de la mayora de las
caractersticas
heredables
fcilmente
visibles;
la
determinacin de la paternidad tena tan poco apoyo en la
herencia que ya del Derecho Romano establecido en
materia del filiacin la teora de las presunciones legales,
por la cual el marido de la madre deba ser considerado
como padre si no exista evidencia clarsima de lo contrario.
Est
teora, vigente durante varias pocas, fue
reimplantada por el Cdigo napolenico, en 1804, en
Francia, y secundada por varios pases (Espaa, Blgica,
Luxemburgo, Portugal, Italia y Pases Bajos), debido a la
comodidad con que resuelve los problemas de paternidad,
no slo ignorando, sino dificultando cualquier tentativa de
demostracin biolgica. La legislacin que en materia de
filiacin y paternidad aplique la teora de las presunciones
legales tiene dos graves inconvenientes: no
puede
garantizar
la
igualdad de
los
hijos , ya que
protege a los habidos dentro del matrimonio (legtimos),
mientras que discrimina a los otros (ilegtimos), y no est
en favor de la verdad, en el sentido de que el padre jurdico
(el que la teora consagra como tal) no tiene por que ser el
biolgico, dndose, por tanto, la circunstancia, de que en
los hijos legtimos, que son los ms protegidos por la teora,
es donde puede darse la dualidad padre jurdico-padre
biolgico.
En funcin de los anteriores inconvenientes expuestos
la legislacin de la mayora de los pases contempla en la
actualidad de una u otra forma, la posibilidad de
investigacin biolgica, si bien en algunos casos de una
forma muy restrictiva, y, excepto en un grupo de pases en
los que existe tradicin biolgica (Alemania, Suecia,
Dinamarca, Noruega, Suiza, URSS, etc), el resto lo
contemplan desde poca reciente (Francia, 1972; Italia,
1975). Desde el punto de vista histrico existe constancia
de que un tribunal escandinavo admiti en el siglo XVIII una
tara hereditaria (la braquidactilia) como prueba de la
paternidad de un individuo enfermo sobre un nio que
padeca aquel defecto.
El grupo de pases mencionados ya legisl a principios
de siglo (Alemania, 1900; Suiza, 1912), incluso antes de

detectarse la relacin hereditaria de los antgenos

eritrocitarios, la preponderancia de la prueba biolgica. As
en Alemania en 1926, 2 aos despus de que Bernstein
aclarase matemticamente el mecanismo hereditario del
sistema ABO, Nippe y cols, ya haba realizado 260
peritaciones con 28 exclusiones conseguidas y Ziemke en
sus 26 casos comunic 9 exclusiones.
La entrada en vigor de la Constitucin espaola en
1978 produjo importantes cambios en la decimonnica
legislacin que en materia de filiacin y paternidad segua
vigente. El espritu de la constitucin actual es un calco de
la constitucin de la II Repblica respecto al reconocimiento
igualitario de los hijos, con independencia de su origen, y
en cuanto a permitir la investigacin de la paternidad, 47
aos
despus!
El
desarrollo
de
los
principales
constitucionales en este campo modific en Cdigo civil en
su Ttulo V ("De la paternidad y filiacin"), mediante la Ley
11/1 981, de 13 de mayo, que elimin las diferencias entre
hijos legtimos e ilegtimos, manteniendo la diferencia
terminolgica
de
"hijos
matrimoniales"
y
"no
matrimoniales", pero con igualdad de derechos.
Tambin se dej la puerta abierta en el nuevo artculo
127 del Cdigo civil a la utilizacin de las pruebas
biolgicas en los casos de impugnacin y reclamacin de
paternidad, aunque no exista en ningn caso obligatoriedad
de someterse a las pruebas, no variando mucho, por tanto,
de la aplicacin del antiguo principio de reconocimiento
voluntario de la paternidad, a diferencia de otras
legislaciones, en general ms avanzadas, en la que la
prueba es obligatoria.
Lo cierto es que estas modificaciones, realizadas, en
1981, del vetusto ttulo del Cdigo Civil relativo a la
paternidad y filiacin, vigente desde 1851, con el
parntesis de la II Repblica, aunque menos abiertas a la
verdad y la igualdad que las de otros Cdigos europeos,
han producido en nuestro medio un incremento notable y
progresivo en las demandas de investigaciones biolgicas
de la paternidad.
c. CONSIDERACIONES EN LA INVESTIGACIN BIOLGICA
Para determinar una paternidad biolgica es preciso
como mnimo, en los casos ms habituales, el concurso de
la madre, el hijo y el supuesto padre. El primer paso que
hay que seguir ser, una vez obtenidas las muestras de
sangre, extraer la informacin gentica necesaria. Para ello,
mediante tcnicas inmunolgicas para los antgenos
eritrocitarios y leucocitarios, o electroforticas para el resto,
se obtienen los fenotipos. De su estudio se realiza una

aproximacin al genotipo de todos ellos, que es la base

gentica sobre la que se apoyar la investigacin. En el
polimorfismo del DNA se obtiene un fenotipo para cada
sonda, en el que los distintos RFLP obtenidos se valoran
exactamente igual a los distintos alelos que se obtienen
mediante separacin electrofortica en los marcadores
proteicos y enzimticos.
Expresado de la forma ms esquemtica posible y una
vez objetivado el material gentico (mediante el estudio de
los cuatro grupos de sistemas polimrficos y el
polimorfismo del DNA), deben hacerse dos operaciones de
cada una de las tres personas estudiadas: una resta y una
comparacin. En primer lugar se resta al hijo todo el
material que comparte con su madre, y posteriormente se
comprueba si el supuesto padre posee el material gentico
que le queda al hijo tras la primera resta, material que ha
heredado forzosamente de su padre biolgico.
d. PROBABILIDAD DE PATERNIDAD Y FILIACIN
Obviamente, slo pueden darse dos situaciones: una de
compatibilidad y otra de incompatibilidad. En principio,
estas situaciones podran equipararse a las de paternidad y
no paternidad, pero en la prctica el problema no es tan
sencillo, ya que debemos estar en condiciones de rebatir
preguntas como: qu garantas existe de que un individuo
no excludo sea realmente el padre? o, en caso de
exclusin, qu garantas tendramos de que sta no sea
producto de un error tcnico o un error biolgico? La
primera pregunta es bastante compleja y para contestarla
se deben definir los dos parmetros matemticos estadsticos fundamentales en que se apoya la
determinacin de la paternidad: la probabilidad de
exclusin a priori y la probabilidad de paternidad y filiacin.
(1) LA PATERNIDAD DE EXCLUSIN A PRIORI, ES DE
HECHO
Cuando la potencial favorable de que con el uso de
unos sistemas de anlisis de laboratorio puedan
excluirse a los falsos padres.
Se suele expresar en porcentaje y cuantifica los
posibles errores que podramos cometer por no excluir
personas que no son el padre.
As, una paternidad de exclusin a priori del 99,9%
significara que, de cada 1.000 falsos padres, uno no
podra ser excluido. Este porcentaje es el recomendado
por la Sociedad Internacional de Hemogentica Forense

como mnimo aceptable, siendo deseable que sea

cuanto ms alto mejor.
(2) LA

PROBABILIDAD
DE
CALCULARSE

PATERNIDAD

DEBE

Siempre que no se logre excluir al supuesto padre.

Se utiliza para el clculo la ecuacin de Essen Moller
(1938), derivada del Teorema de Bayes (siglo XVIII),
teorema que permite la resolucin de problemas
matemticos en los que existan probabilidades
condicionales.
La ecuacin, tal como se utiliza para el clculo, es
muy sencilla:
W= X
X 100
X+Y
En ella se relaciona la probabilidad de transmitir el
alelo paterno por parte del supuesto padre (X) y la
frecuencia del alelo en la poblacin general (Y). El valor
obtenido, expresado en porcentaje, nos indica la
probabilidad de que el hecho de la paternidad haya
sucedido realmente. El nico inconveniente que
presenta es que, al no tener en cuenta las relaciones
sexuales de la madre, dato, por otra parte, difcil de
obtener, incluye a toda la poblacin en el clculo, con lo
que en la prctica es una probabilidad mnima de
paternidad por parte del individuo, siendo la real ms
alta. La mxima ventaja es que, al no incluir nada ms
que datos objetivos es una probabilidad muy fiable.
El valor matemtico obtenido puede transformarse
en los llamados predicados verbales (Hummel):
Paternidad
Paternidad
Paternidad
Paternidad
Paternidad

prcticamente probada
altamente probable
muy probable
probable
de paternidad

W 99,73
W 99,00
W 95,00
W 90,00
W 70,00

El grado de certeza racional en la determinacin

positiva de la paternidad queda establecido, por tanto,
en el valor de la probabilidad de paternidad igual o
superior a 99, 73%, cifra nada fcil de alcanzar y que
exige en la mayora de los casos poseer ms sistemas
que para obtener 99,9% de exclusin, para considerar
positiva una paternidad.
El valor medio ponderado de la probabilidad de
paternidad de todas y cada una de las combinaciones

de un sistema, en que la paternidad es compatible,

constituye un parmetro denominado "eficiencia
bioestadstica" del sistema. A semejanza de lo que
suceda con la probabilidad de exclusin a priori, la
eficiencia bioestadstica de todos los sistemas
empleados valora en este caso la potencia en la
afirmacin que el laboratorio tiene.
Aunque a primera vista pudiera parecer que ambos
parmetros, al cuantificar la potencia en la exclusin y
en la afirmacin, correran de modo parejo es decir, un
sistema til para la exclusin y con una probabilidad de
exclusin a priori alta tendra tambin una eficiencia
bioestadstica alta, en la prctica ello no es as y puede
deducirse fcilmente con un ejemplo sencillo. Si se
tienen dos sistemas de marcadores de dos alelos cada
uno, pero con distinta distribucin poblacional, uno con
las frecuencias de sus dos alelos equilibradas y el otro
no, ocurrira que en el primer caso los tres fenotipos
sern frecuentes y en el segundo existir, al menos, un
fenotipo poco frecuente.
En el caso de los fenotipos frecuentes ser fcil
excluir un falso padre, ya que se darn todas las
combinaciones de forma habitual, lo que aumenta la
probabilidad de exclusin al azar. En el segundo caso
ser difcil producir exclusiones ya que la probabilidad
de que participe una de las combinaciones es muy baja,
lo que disminuye las exclusiones de azar. Por el
contrario, en el primer sistema, de no excluir y en
funcin de la frecuencia de ambos alelos, una gran
parte de la poblacin ser siempre compatibilidad de la
paternidad, por lo que la probabilidad de la paternidad
que se podr lograr ser siempre baja. En el segundo
caso la probabilidad de paternidad de los casos en que
participe el alelo minoritario ser siempre baja. En el
segundo caso la probabilidad de paternidad de los
casos en que participe el alelo monoritario ser siempre
alta, muy superior a la mxima que pueda alcanzar el
caso ms favorable en el primer sistema.
La contestacin a la primera pregunta se apoya, por
tanto, en los conceptos definidos. Qu garanta existe
de que un individuo no excluido sea el padre del hijo
cuestionado? En el primer lugar se conoce la
probabilidad de excluirlo a priori si no es el padre. Si
este valor es alto y no se puede excluirlo, la
probabilidad de que el individuo no sea el padre ser
muy pequea. Pero ello no es suficiente para asegurar
de una forma racional la paternidad.

Entonces es cuando hay que calcular la hiptesis

contraria, en decir la probabilidad de que el individuo
sea el padre, y nicamente si esta probabilidad es muy
alta (superior al 99,73%), se califica la paternidad de
prcticamente probada, probabilidad que sera muy
pequea si el individuo fuera un falso padre que no
hubiera podido excluirse.
e. APRECIACIN DE ERRORES ANALTICOS
Las dos causas de error ms importantes que podran
presentarse en la valoracin de la exclusin: los errores
tcnicos y los errores biolgicos.
(1) LOS ERRORES DE TIPO TCNICO, QUE SE PUEDEN
COMETER SON INFINITOS.
No existe actividad humana infalible y durante todo
el proceso tcnico sos amenazas de forma continuada
y persistente. Los errores, adems, van casi siempre en
factor de la incompatibilidad y, por tanto, la tendencia
es que lleven a considerar como padre imposible a un
individuo que lo sea en realidad,. La falta de
identificacin de las personas, la confusin de
muestras, tcnicas deficientes, errores en la lectura e
interpretacin de los resultados, errores de clculo,
errores de transcripcin, etc. dan una idea de lo
delicado del proceso y de la importancia de utilizar una
sistematizacin tcnica que procure obviar de una
forma pasiva la mayor parte de ellos. El procedimiento
utilizado por nosotros para la deteccin de errores es la
repeticin sistemtica (tres veces) de todos los pasos
del proceso en que ello posible, llegndose en algn
caso a su repeticin total, con lo que los errores
humanos, son fciles de detectar.
(2) NO SUCEDE LO MISMO
ERRORES BIOLGICOS

CON LOS LLAMADOS

Aunque se presentan con una frecuencia baja, si

aparecen, su deteccin es difcil. Los errores biolgicos
ms comunes se producen por la existencia de los
denominados genes silentes es decir, genes que estn,
pero que no se pueden evidenciar de una forma fcil.
En ocasiones resulta imposible su deteccin sin
estudios familiares complejos. Aunque poco frecuentes,
prcticamente ningn sistema se libra de su presencia,
y cuando ello sucede, provoca la aparicin de
situaciones de aparente incompatibilidad.

f.

REGLAS

FUNDAMENTALES
EXCLUSIN

PARA

DETERMINAR

LA

Para valorar las exclusiones, existen dos reglas

fundamentales que determinan: las directas o de primer
orden y las indirectas o de segundo orden.
(1) La primera regla establece que todo carcter presente
en el hijo y que no tenga la madre debe proceder
forzosamente de su padre biolgico
Si el supuesto padre no lo posee, procede la
exclusin. La exclusin sera directa pues prcticamente
carece de otra causa de error que la mutacin (fig.a)
EXCLUSIN DE PRIMER ORDEN
Presunto padre
Madre
Hp 1(1-1)
Hp 1 (1-1)
Hijo Hp 2-1 (2-1)
Fig a.- Exclusin basada en la primera regla de
Landsteiner: el hijo posee un alelo nuevo (Hp - 2)
que no est presente en ninguno de los padres. La
exclusin est slo sujeta a error por mutacin.

(2) La segunda regla es de la imposibilidad de

homocigosis contraria, es decir, si un hijo tiene dos
genes iguales en un mismo locus, el padre no
puede tener los dos genes distintos a los del hijo en
ese locus.
Es aqu donde intervienen los alelos silentes que
pueden confundir y presentar un fenotipo
homocigtico, cuando en realidad, no lo es, porque
no evidenciamos el alelo silente, aparentando una
falsa situacin de incompatibilidad (fig. b).
EXCLUSIN DE SEGUNDO ORDEN
Presunto padre
Hp 1(1-1)

Madre
Hp 2 (2-2)

(1-0-?)
Hijo Hp 2-(2-2)
(2-0-?)
Fig b.- Exclusin basada en la primera regla de
Landsteiner: el presento padre y el hijo son
homocigotes para dos alelos distintos. El error es

posible por la presencia de alelos silentes (Hp O)

relativamente frecuentes en algunas poblaciones.

Debe, por tanto, valorarse con mucha cautela

toda incompatibilidad que se apoye en una
exclusin procedente de la aplicacin de esta
segunda regla, circunstancia que no suele suceder,
pues el trmino medio de exclusiones que se
obtienen con una probabilidad de exclusin a priori
superior a 99,9% es de cuatro. En el supuesto de
que en una investigacin aparezca una sola
exclusin, sea directa o indirecta, debe siempre
calcularse
la
probabilidad
de
paternidad,
prescindiendo del sistema incompatible. Si la
probabilidad es muy baja, la exclusin puede
valorarse; pero si la probabilidad de paternidad es
alta, lo ms probable es que se trate de un error
tcnico o biolgico. Si esto llegara a suceder, es
inexcusable la ampliacin del estudio a nuevos
marcadores que clarifiquen la situacin en un
sentido o en otro, esto es, que confirmen la
exclusin o suban la probabilidad de paternidad.
La posibilidad de mutacin, otra hipottica
causa de errores biolgicos, es realmente
excepcional en los marcadores que se utilizan de
forma habitual. Una mutacin es prcticamente
indetectable y consiste en una modificacin de una
parte del genoma que puede obedecer a distintas
causas. Su aparicin conducira a una aparente
situacin de exclusin, incluso con la aplicacin de
la primera regla, por lo que ante una exclusin
puntual slo cabe la conducta prudente en su
valoracin que se exponan en el prrafo anterior.
En cualquier caso debe afirmarse la casi absoluta
imposibilidad de una mutacin puntual que origine,
adems, un alelo ya conocido.
La pregunta: qu garanta hay de que una
exclusin no es producto de un error tcnico, un
error biolgico o una mutacin?, slo tiene dos
respuestas: muy alta, si el procedimiento tcnico
tiene en cuenta las posibles causas de error y las
detecta con facilidad, o bien muy baja, si no se
tiene en cuenta todo lo expuesto con anterioridad.
Todo sera ms fcil desde el punto de vista
gentico si se dispusiera de la posibilidad de
estudiar todo el genoma del individuo, pero ello, no
es posible de momento. El desarrollo que estn
adquiriendo las actuales investigaciones sobre el
polimorfismo del DNA humano permite postular que

un futuro no muy lejano es previsible que se avance

mucho hacia el posible estudio cuantitativo del
genoma. Tambin sera ms sencillo sin llegar tan
lejos, si se dispusiera de un sistema con suficiente
variabilidad
para
alcanzar
el
grado
de
individualizacin necesario. Pero ninguno de los
sistemas clsicos llega el lmite preciso y es
obligado, por tanto, el uso de prcticamente todas
las posibilidades disponibles para obtener la
suficiente informacin. El polimorfismo del ADN
probablemente alcance por s solo en pocos aos
suficiente desarrollo para ser utilizado en solitario,
porque supere matemticamente utilizando en los
ltimos sesenta aos.
8. MARCADORES GENTICOS
Clasificados de la forma ms racional posible, los
marcadores utilizados hoy da en la investigacin de la
paternidad por nosotros son los siguientes:
a. SISTEMA HLA
Forman parte del sistema mayor de histocompatibilidad
descrito hasta la fecha en el hombre, localizando en el
cromosoma 6. Constituyen el sistema HLA (Human Leucyte
Antigen) y se estudian habitualmente sus loci A, B y C. Se
determinan
mediante
tcnicas
inmunolgicas
de
microlinfotoxidad. Sus caractersticas principales son las
siguientes:

Nmero de alelos descritos

(1984)
Locus A
23
Locus B
47
Locus C
8
Total 10.368 combinaciones

Probabilidad de exclusin
(%)
76,09
88,54
98,62
98,62

La eficiencia bioestadstica del sistema es de difcil

clculo, ya que las combinaciones tericamente posibles de
"madre-hijo-supuesto padre" son superiores a 10 12
(1,000.000.000.000, es decir, un milln europeo que
equivale a un milln de millones). Una estimacin

aproximada entre los genotipos ms frecuentes en la

prctica de nuestra casustica la sita en un valor EssenMoller de 8,22, equivalente a un valor medio ponderado de
probabilidad de paternidad de 98,35%.
Como puede deducirse fcilmente a la vista de las
cifras, el sistema HLA roza las cotas establecidas por el
polimorfismo ideal, aunque sin llegar a alcanzarlas, por lo
que su estudio debe complementarse con otros sistemas.
Sin discusin es el sistema de mayor rendimiento en
funcin de la relacin esfuerzo/informacin.
b. MARCADORES ERITROCITARIOS
Se encuentran en la superficie del hemate. Fueron los
primeros en describirse y se determinan mediante
reacciones de aglutinacin en presencia de antisueros
conocidos. En funcin de su utilidad nosotros usamos los
siguientes:
Sistema

Probabilidad de exclusin media

en poblaciones espaolas (%)

MNSs
Rh
ABO
Kidd
Duffy
Kell
Lutheran
P

32,0
27,8
20,0
18,5
18,4
6,2
3,8
2,9

Total de antgenos
Eritrocitarios

77,1

c. MARCADORES
PLASMTICOS
ENZIMTICOS

PROTEICOS

Son en su mayora protenas plasmticas que cumplen

funciones fisiolgicas muy diversas. En la actualidad se
estudian
en
su
mayora
mediante
tcnicas
de
isoelectroenfoque, que es ms resolutivo que la
electroferesis convencional. Las utilizadas por nosotros
pueden verse a continuacin:

Sistema

Locus

Probabilidad de
exclusin media en

poblaciones espaolaS (%)

Inmunoglobulinas
Alfa-1-antitripsina
Protenas Gc
Factor XIII
Orosomucoide
Haptoglobinas
Alfa-2-HS-glicoprotena
Transferrina
Complemento
Complemento
Inmunoglobulina
Complemento
Plasmingeno
Properdina factor B
Colinesterasa
Amilasa srica
Colinesterasa

Gm
Pi
Gc
FXIIIB
ORM
Hp
A2Hs
Tf
C6
C4
Km
C3
PLG
Bf
C5
AMY2
E1

Total de protenas y
enzimas sricas

34,6
32,0
29,0
23,0
18,7
18,5
18,0
17,9
17,0
16,8
14,9
14,8
13,5
13,3
4,4
2,8
2,6
96,2

d. MARCADORES
ENZIMTICOS
LEUCOCITARIOS

ERITROCITARIOS

Este grupo est formado por enzimas existentes sobre

todo en hemates y leucocitos. Debido a su pequea
concentracin precisa un tipo de revelado en el que
interviene la actividad enzimtica. Las enzimas que lo
forman constituyen el grupo ms seguro en cuanto a la
determinacin de los fenotipos, al eliminarse muchas
causas de error. Los ms utilizados por nosotros aparecen
en la relacin que sigue:

Sistema

Locus

Probabilidad de
Exclusin media en
poblaciones espaolas
(%)

Enzimas eritrocitarias
Fosfoglucomutasa
Fosfatasa cida
Transaminasa
Glutmica-pirvica
Glixalasa
Esterasa D
Delta-aminolevulinato-

PGM1
ACP
GPT

32,0
24,0
18,8

GLO
ESD
ALDAH

18,8
10,9
7,0

Dehidrasa
Fosfoglicolato-fosfatasa
Galactosa-1-fosfatouridil-transferasa
Adenhosn-desaminasa
Uridn-monofosfoQuinasa
Adenilatoquinasa
6-Fosfogluconatodeshidrogenasa
Glucosa-6-fosfato-Gd
Deshidrogenasa
Enzimas leucocitarias
Enzima mlica
Fosfoglucomutasa

PGP
GALT

6,9
6.8

ADA
UMPK

4,5
4,2

AK
PGD

3,6
2.1
1,0

ME2
PGM3

18,2
17,1

Total de enzimas eritrocitarias y leucocitarias

89,6

En resumen la totalidad de las probabilidades de

exclusin, cuando se toman en consideracin todos los
sistemas de marcadores genticos.
Probabilidad de exclusin para la totalidad
de sistemas de marcadores
Sistema

Probabilidad
de exclusin (%)

HLA
Antgenos eritrocitarios
Marcadores plasmticos proteicos
y enzimticos
Marcadores enzimticos
eritrocitarios y leucocitarios

98,6
77,1
96,2

Total de sistemas

99,999

89,6

e. MARCADORES Y ENZIMAS DE RESTRICCIN DE ADN

Por la cantidad de muestras biolgicas que se pueden
obtener para anlisis de ADN, para casos de paternidad y
filiacin, la tcnica de mayor opcin y ms segura es el
mtodo de RFLP (Polimorfismo en Longitud de Fragmentos
de Restriccin). En casos de obtenerse solamente restos o
escasas muestras biolgicas de congeneres ausentes, el
mtodo adecuado es el PCR (Reaccin en Cadena de la
Polimerasa).
Los marcadores y enzimas de restriccin ms usados
hasta el momento para casos de paternidad y filiacin en
poblaciones latinas son los siguientes:
- D4S139/H30/HAEIII

D10S28/TBQ7/HAEIII
D2S44/YN24/HAEIII
D1S39/AC425/HAEIII
S1S80-1,2(1P36-P35)/HAEIII
EGA-1,2(4Q28)/HAEIII

H. PERICIAS DE ANLISIS ESPECIALES

1. CONCEPTO
Es una parte de la Biologa Forense, que se encarga del
estudio de diversas muestras, tales como insectos, uas,
plumas,
escamas,
manchas
obstetriciales,
secreciones
biolgicas, restos vegetales y animales, exmenes citohistolgicas, tierras y otros de ndole biolgico.
2. VALOR CRIMINALSTICO
a. MANCHAS OBSTETRICIALES
Su estudio esta orientado especialmente en casos de
aborto criminal, infanticidio, simulacro de parto, feticidio.
Dentro de estas manchas estn comprendidas por
lquido amnitico, meconio, unto sebceo, calostro; estas
manchas generalmente estn localizadas en las prendas de
vestir, ropa de cama, toalla, colchones, paales, etc. ya
sean aislados o mezclados entre s, como ocurre en la
mayora de los casos, el estudio de estas manchas se
realiza macroscpicamente, microscpica y qumicamente.
(1) LQUIDO AMNITICO
Es el lquido que protege al feto durante su vida
uterina de posibles traumatismos y suministra a este un
medio en el que se puede mover libremente, sale al
exterior de los genitales femeninos. Su color es amarillo
verdoso, a veces claro y lmpido, en las telas se
presentan en forma de manchas extensas, que vara
entre el amarillo muy claro y el violeta, con ribetes
grisceo acentuado, que endurece la tela, de olor
desagradable. Este lquido se vuelve de color caf
achocolatado, cuando el feto ha muerto varios das
antes del aborto o parto. Bajo la luz ultravioleta, el
lquido amnitico presenta una fluorescencia violetarojizo en el centro y amarillo en los bordes.
(2) UNTO SEBCEO
Es una sustancia untuosa o grasosa, que cubre el
cuerpo de los recin nacidos, especialmente se
encuentra en los pliegues inguinales y axilares, las

manchas son de grandes dimensiones, recordando en

cierto modo a la superficie del feto.
(3) MECONIO
Es el contenido intestinal del feto, normalmente
ste se expulsa o defeca de 6 a doce horas despus del
parto, pero si el feto sufre lesiones o muere durante o
antes del parto, puede salir al exterior y manchar el
lquido amnitico. Al estado fresco el meconio es una
pasta viscosa, untuosa, verde oscura, el peculiar color
se debe a pigmentos biliares; si est seco se presenta
en forma de costras de color mate, friables.
Estas manchas debern ser buscadas sobre los
vestidos, sbanas, colchones, etc. frecuentemente van
acompaadas de sangre, unto-sebceo, lquido
amnitico y heces.
Al examen con luz ultravioleta tiene una
fluorescencia de color caf. El diagnstico genrico del
meconio se basa en la presencia de los diversos
elementos constitutivos del meconio, nunca en algn
elemento aislado; sino en la existencia de varios
elementos del cuadro microscpico. Este examen
permite identificar el meconio y fijar aproximadamente
la edad del feto. Puede presentarse el problema de si
una mancha de meconio es de origen animal o humano,
cuando se sospecha de infanticidio o simulacin de
parto, esto se puede solucionar mediante la aplicacin
de los mtodos de los sueros precipitantes de la
desviacin de complemento o de la anafilaxia, cuya
tcnica y mtodo interpretativo, son los mismos que
para el resto de las manchas, o sea el mtodo de la
especificidad.
(4) CALOSTRO Y LECHE MATERNA
En muchos casos de su examen se puede
establecer el perodo de gestacin y si se produjo el
amamantamiento, por la alteracin fisiolgica de las
glndulas mamarias durante la gestacin. Las manchas
son de contornos sinuosos, dentellados, de color
amarillo grisceo, ms oscura en los bordes,
"almidonan" fuertemente la tela y semejan manchas de
semen. Al examen microscpico se observan clulas
epiteliales, corpsculos, que son abundantes en el
calostro, disminuyendo en nmero hasta desaparecer
totalmente cuando la secrecin mamaria esta
constituida por leche pura (8 das despus del parto),
polinucleares, elementos figurados que as como las

clulas varan segn el perodo de gestacin; si no hay

embarazo los elementos figurafos estn ausentes.
Puede realizarse el estudio de los grupos tisulares,
mediante las sustancias grupo especficas, que en el
caso del suero de la leche humana se encuentran en
cantidades considerables.
b. MANCHAS DE ORINA
Generalmente se encuentran asociadas con esperma,
heces y meconio y estn relacionadas con casos de delitos
contra el honor sexual, delito de aborto, infanticidio,
feticidio. Las manchas se presentan de color amarillento,
tomando el aspecto de mapa geogrfico de contornos
indecisos, bordes irregulares o no, de olor sui gneris, que
en la especie humana recuerda al amonaco, tambin se
realiza el examen microscpico y qumico.
c. MANCHAS DE MOCO (NASO BRANQUIAL)
Frecuentemente pueden hallarse en los delitos contra la
vida, especialmente en los casos de muerte por asfixia.
Presenta el aspecto apergaminado, de bordes irregulares,
de color blanquecino y amarillo verdoso, que desecadas
forman escamas de consistencia dura. Al estado fresco son
de consistencia filante, similar a la clara de huevo, a veces
van acompaado de restos pilosos, se les puede confundir
con manchas de esperma. Al examen microscpico se
observa clulas con pestaas vibrtiles, cristales de
cloruros, oxalatos, etc.
d. MANCHAS DE SALIVA
Frecuentemente pueden encontrarse en diversos tipos
de soportes y que puedan haber servido de mordazas, en
caso de secuestro, homicidio, etc.
Al estado fresco las manchas son de color blanquecino,
amarillento o grisceo, son opalescentes inodoras y
filamentosa. Al estado seco presentan las mismas
caractersticas a las del moco; pero son menos densas;
almidonan ligeramente los tejidos. Tambin se realiza el
examen
microscpico
y fsico-qumico.
La
mayor
importancia en el estudio de la saliva esta relacionada con
el problema del diagnstico de la paternidad, ya que en la
saliva de la especie humana se encuentran los
aglutingenos ya conocidos en sangre, en forma
hidrosoluble denominada A y B respectivamente. No todos
los sujetos poseen la propiedad de secretar tales
aglutingenos en la saliva. El gnero humano se divide en
dos grupos: Secretores (S) y no secretores (s). Esta

caracterstica es hereditaria y se estudia en casos dudosos

de paternidad. Los no secretores no tienen los
aglutingenos A y B.
e. MANCHAS DE SECRECIN VAGINAL
Frecuentemente se encuentran en los casos de delitos
contra el honor sexual y son interpretados como manchas
seminales. Las manchas son de color amarillento, de olor
sui gneris, que el humano recuerda al nitrgeno, de sabor
fuertemente salado, grumosa y de densidad elevada, de
contornos imprecisos, que recuerda al mapa geogrfico. Se
realiza tambin el examen microscpico.
f.

MANCHAS DE SECRECIN LAGRIMAL

Se encuentran en todos aquellos casos de delitos
contra la vida y el honor sexual, secuestros; en soportes
que han sido utilizados como vendajes y mscaras, para
cubrir los ojos o la cara en su totalidad, de la vctima. Las
manchas son de color blanquecino, de aspecto ntido, de
bordes irregulares, en algunos casos patolgicos, el color
puede adquirir diversos matices van del amarillo al rojo
(conjuntivitis, dacriocistis); son inodoras de sabor salado.
No es frecuente hallarlas acompaadas de pelos o bulbos
pilosos. Tambin se realiza el examen microscpico.

g. MANCHAS DE SUDOR
Pueden encontrarse en diversos soportes y en todos los
campos en que el delincuente puede actuar, producidas
ya sea por los factores emotivos, por el esfuerzo fsico
o
por
casos
patolgicos
como
las distoras
neurovegetativas o en leves, medianas o grandes
deshidrataciones, las manchas son de color blanquecino de
olor sui gneris, pudiendo depender de factores tnicos y
ocupacionales, por ejemplo en la raza negra es fuertemente
penetrante y en zonas pesqueras el sudor de los
pescadores tiene un olor caracterstico. Se realiza tambin
el examen microscpico.
h. MANCHAS DE ESMEGAMA
Se investiga en todos aquellos soportes provenientes
de delitos contra el honor sexual, pertenece slo al sexo
masculino, dado que solamente en el surco balano
prepucial se produce esta sustancia. Son de color
blanquecino amarillento, olor que recuerda al queso, de
aspecto semejante al requesn, untuoso al tacto, de bordes
irregulares, de tamao pequeo o mediano. Se
complementa con el examen microscpico.

i.

MANCHAS DE MATERIAS FECALES

Se encuentran frecuentemente en los delitos contra el
honor sexual (relaciones sexuales contranatura) y en los
delitos de aborto. Algunas veces dejadas por el autor ya
sea por insolencia supersticin o necesidad.
Son reconocidos por sus caracteres organolpticos:
color, forma, olor, aspecto, etc; desecadas aparecen
cubiertas por una costra, fcilmente separable.
Su estudio se completa con el estudio microscpico y
qumico.

j.

MANCHAS DE CERUMEN
Son frecuentes en aquellos casos en los que el
delincuente trata de falsear el delito, dejndolas como
falsas huellas y se les puede hallar en diferentes soportes.
Las manchas son de color caf, que por el tiempo se torna
achocolatado, de aspecto seroso y untuoso al tacto, en los
pauelos se presentan con bordes bien delimitados, de
sabor amargo. Su estudio se completa con el examen
microscpico y qumico.

k. PLUMAS
Son productos tegumentarios. Los delitos en que las
plumas pueden servir de indicios generalmente estn
relacionadas con aves domsticas o silvestres. Las
silvestres son las comnmente ligadas a los delitos: Hurtos
con aves amaestradas, robos de aves finas o comunes,
aberraciones sexuales (bestialismo con aves).
El color y la forma de las plumas tienen importancia
criminalstica ya que nos permite determinar la posible
especie y zona del cuerpo del animal de donde proviene.
Las plumas sobre el vestido del sospechoso, en sus
cabellos, en los sacos o canastos para transportar aves
serviran mucho para relacionar a tales individuos con el
hecho delictuoso. En los casos de aberraciones sexuales
cometidas con aves de corral, el examen cuidadoso de las
ropas exteriores e interiores del acusado servirn, por las
plumas encontradas, para determinar su participacin en el
delito; adems se debe tener en consideracin la presencia
de otros indicios aprovechables, tales como: sangre,
excrementos, semen, etc. La bsqueda de plumas puede

ser en lugares cerrados, a cubierta o al aire libre, en ambos

casos deber tenerse en cuenta las precauciones
respectivas para la bsqueda y recojo de las mismas. Los
exmenes
que
se
realizan
son
macroscpicos,
microscpicos y qumicos.
l.

RESTOS CITO-HISTOLGICOS
Se ocupa del estudio de las clulas tanto animales
como vegetales. Estas clulas pueden ser halladas en casos
de violacin (clulas vaginales), homicidios y suicidios
(epidrmicas descamativas) en casos de aborto (clulas
desiduales), en orina (clulas propias del sistema urinario),
en las heces especialmente clulas vegetales. Las clulas
tienen elementos como la cromatina sexual llamada
tambin corpsculo de Barr, se encuentran en los ncleos
de los bulbos pilosos y epitelio bucal; sirve para la
determinacin de sexo.
En biologa forense la citologa juega un papel
importante en la identificacin de las personas, mediante el
estudio de ADN (cido desoxirribonuclico) que se
encuentra en los cromosomas de los ncleos de las clulas.
Es un mtodo de identificacin humana como un sustento
gentico, a partir de pequeos indicios biolgicos,
resultando una prueba de gran valor, que evitara que los
delincuentes (entre ellos terroristas y narcotraficantes)
sean liberados muchas veces por falta de pruebas. La
aplicacin de este mtodo se realiza en pequeas
cantidades de muestras biolgicas, que con frecuencia se
encuentran en el lugar de los hechos o sobre las vctimas
en un hecho delictuoso y que por la naturaleza de ellas no
son posibles de desaparecerlas. La paternidad puede ser
determinada sin duda con el mtodo del ADN, siendo
entonces el primer mtodo que responde SI o NO a la
interrogante.
El estudio de este mtodo se realiza en sangre y semen
fresco y manchas de sangre y semen halladas tanto en
prendas de vestir o en otros objetos, races de pelos y
restos de tejidos, hallados en el lugar de los hechos; estas
muestras sern comparadas con las muestras de sangre
y/o semen que se obtendrn de los posible sospechosos.

m. HARINAS Y ALMIDONES
El anlisis de las harinas tiene por objeto comprobar su
genuinidad, pureza y buen estado de conservacin,
especialmente desde el punto de vista higinico; su estudio
trata de:

(1) Establecer su naturaleza, es decir, de que tipo de

harina se trata y si es de una sola o de varias especies.
(2) Establecer si se trata de harina pura o adulterada.
(3) Determinar la presencia de insectos, parsitos, hongos,
bacterias, etc.
(4) Establecer de acuerdo a los anteriores si la harina es
apta o no para el consumo.
El estudio microscpico de las harinas se funda en el
reconocimiento de los granos de almidn, (que son
caractersticas para el vegetal del que proceden) y el
reconocimiento
de
los
elementos
especiales
procedentes de las retculas de las cariopsides de las
semillas.
n. FIBRAS
En Criminalstica el estudio de las fibras sirve para
determinar su origen que puede ser animal, vegetal,
mineral o sinttico. Los exmenes que sobre estas fibras se
pueden efectuar son: microscpicas, fisicoqumicas y
mecnicas. Los exmenes biolgicos de las fibras son
complementadas por los estudios fisicoqumicos. Asimismo
dentro de los anlisis especiales se realizan:
(1) Estudio citohistolgico en clulas y tejidos, de animales
o vegetales como elemento biocriminalstico.
(2) Pruebas biolgicas con animales de laboratorio para el
diagnstico especfico de tolerancia alimentaria,
narcticos, txicos y toxinas.
(3) Determinacin de medios ambientes geogrficos
mediante indicios de tierras, vegetales o animales que
acompaen a las prendas u objetos encontrados junto o
cerca a la vctima.
(4) Otros anlisis especiales de ndole biolgico.

IV. NORMAS
PARA
EL
RECOJO
Y
ENVO DE
MUESTRAS
BIOLGICAS AL LABORATORIO DE
CRIMINALSTICA
A.

RECOJO DE LAS MUESTRAS

Las manchas de sangre se recogen levantando en lo
posible el soporte donde se encuentran: piedras pequeas,
astillas de madera, utensilios, telas, etc. Si no fuera posible
esto, se tomarn muestras de todas las manchas de sangre
que se encuentran. Se indicar el lugar de donde se recogen y
se les colocar la correspondiente numeracin.

Las muestras de sangre lquidas se pueden recoger con

tubos capilares o por medio de papel de filtro o secantes
limpios; si la cantidad de sangre es abundante se le recoge con
una jeringa hipodrmica y se 42 deposita en un tubo de prueba
u otro frasco de vidrio limpio con su respectiva tapa y
conservar
a
bajas
temperaturas,
para
evitar
su
descomposicin.
La sangre seca se desprender de su soporte por medio
de un bistur o cortaplumas. En el caso de manchas que estn
muy adheridas se procede al raspado con los mismos
instrumentos o similares.
Las muestras de manchas de sangre, fluido seminal u
otro semejante, que estn sobre una superficie dura, metal,
cristal, etc. deben ser retiradas raspndolas de la superficie,
empleando un instrumento plano, limpio, con filo, como una
hoja de afeitar, navaja, esptula, varita de madera, para luego
envolverla en una hoja de papel de 10 x 10 cm. de preferencia
satinado.
La mancha de sangre hmeda debe recogerse
empapndola en un aplicador de fibra de algodn (gasa)
humedecindolo con solucin salina o agua destilada, hasta su
desprendimiento; luego se coloca en un tubo de ensayo o
frasco
de
vidrio
pequeo
limpio
y
seco,
tapado
convenientemente para evitar la contaminacin.
El fludo seminal en estado lquido se recoge empleando
una cuchara, esptula limpia o utensilio adecuado y colocarse
en un tubo de ensayo o frasco pequeo de vidrio limpio,
sellado convenientemente para evitar la contaminacin. El
recojo de la mancha seca se realiza en forma similar al de la
sangre seca.
B.

EMBALAJE
Despus de haber sido reconocidos, marcados o
sealados y fotografiados los indicios y evidencias de la escena
del delito, donde pueda hallarse un cadver es de todos modos
sugerible que se transporte o traslade de todos aquellos que
sean transportables fcilmente hasta el laboratorio de
Criminalstica. Para cada tipo de indicio o evidencia se debe
adoptar un procedimiento de embalaje adecuado:
1.

Los objetos muy pequeos como cabellos, colillas,

papeles, trozos o fragmentos de materiales se deben
recoger con pinzas y colocarlas en bolsas adecuadas
completamente limpias.

2.

Para el recojo de muestras biolgicas debe disponerse

del nmero suficiente de cajas de cartn, sobres de
celofn, bolsas de plstico, frascos de vidrio, tubos, para
recoger adecuadamente cada tipo de evidencia o indicio.

3.

Una vez colocados los indicios o evidencias en dichos

depsitos debe empacarse cada uno de ellos en cajas de
madera o cartn fuerte luego cerrarlos con cinta
adhesiva y etiquetar indicando el contenido, el lugar
donde se recogi, que tcnico lo hizo y alguna
observacin importante. Debe usarse un envase para
cada evidencia.

4.

Las prendas con manchas de sangre fresca, se deben

embalar de modo que no se extiendan o se mezclen.

Si es posible se esperar a que se sequen.

5.

Es preferible remitir la muestra desecada, o cuando se

remiten los frascos agregarles anticoagulante, por
ejemplo, para el caso de la sangre o en otros casos
solucin de formol al 5% estas sustancias conservadoras
deben usarse con mayor razn si las muestras provienen
de provincias.

6.

Los lquidos, polvos, tierra, escamas de pintura,

fragmentos de cristal, vmitos, cabellos, fibras y otras
muestras similares deben ser colocadas en recipientes
apropiados,
marcados
y
enumerados
para
la
identificacin.

7.

Se recomienda que el recipiente a emplearse sea ms

grande que las muestras para evitar la posibilidad de
daar los elementos que servirn de prueba.

8.

Todos los recipientes deben ser nuevos y estar limpios,

en todo caso llevan a conclusiones errneas al examinar
los indicios.

9.

Una prenda de vestir seca se puede envolver en un

pedazo grande de papel o en una bolsa de papel; pero
necesariamente en bolsa de polietileno, pero si la prenda
est hmeda, ya sea de sangre, orina, fluido seminal o
de algn otro lquido no procedente del cuerpo, debe
permitirse que se seque perfectamente a la temperatura
del cuarto (medio ambiente), antes de empacarla.

10.

Todas las prendas de vestir del sospechoso o de la

vctima deben ser empacadas separadamente. Los
recipientes deben ser marcados con claridad e indicar su
contenido. Todas estas muestras van en un slo

recipiente grande, con las indicaciones precisas de los

paquetes que en l se hallen.
11.
debidamente.
C.

Todos los recipientes deben ser sellados y marcados

CADENA DE EVIDENCIA
1.

Al recoger las evidencias se hace en presencia del Juez

Instructor, representante del ministerio pblico, Jefe de
Inspeccin Tcnico Policial, algn familiar del occiso o
testigo idneo.

2.

Cerrado el envase, se hace firmar al tcnico que recogi

la evidencia y a las otras personas.

3.

Cuando sea posible, se coloca una marca, sello o rbrica

en la misma especie, por ejemplo en objetos de madera,
ropa, papeles y otros. Si las especies tienen nmero, ste
se consigna en una etiqueta.

4.

El perito del laboratorio al recibir el paquete debe

confrontar la descripcin de la etiqueta con la evidencia,
si la encuentra conforme tambin firmar en la etiqueta.

5.

Por la regla de seguridad, la cadena de evidencia debe

pasar por el menor nmero de manos.

6.

D.

Debe colocarse el nombre y apellido de la(s) vctima(s) o

sospechoso a quien pertenecen las muestras.
TRANSPORTE

D.

TRANSPORTE

E.

1.

Debe ser efectuado por los mismos peritos o tcnicos que

recogieron las evidencias.

2.

Aunque el laboratorio se encuentre muy prximo, no debe

omitirse el correcto embalaje.

3.

Los vehculos usados para el transporte local de la

evidencia debe ser en lo posible los de la inspeccin
tcnico policial y laboratorios mviles.

CORREO
1.

Los paquetes deben ser siempre formados con papeles

gruesos, liados con hilo grueso fuerte, sobre las cuales se
colocarn las etiquetas y sellos correspondientes.

2.

Todos los paquetes deben ser dirigidos al Laboratorio

Central DINCRI, Lima.

3.

Deben remitirse por correo certificado.

4.

Sobre frascos con sustancia vertible se pondr la palabra

"FRGIL"