UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLAN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLGICAS
SECCIN BIOQUMICA Y FARMACOLOGA HUMANA
LABORATORIO DE ANATOMA Y FISIOLOGA
PRCTICA No. 2 MANEJO DE LA RATA
Elaborado por:
Rodrguez Islas Felipe

Grupo: 1351
Semestre: 2016-1

Fecha:
24/08/15

Profesora teora:
Lidia Rangel
Trujano

Evaluacin: _____________

Profesor Laboratorio:

Equipo:
4

Esquema de las manos

Figura 1. Esquema de las manos

Recomendaciones tcnicas para el manejo de animales del laboratorio

El manejo debe hacerse con gentileza, firmeza y respeto por el animal. Para transferir
por ejemplo una rata de una jaula a otra debe tomarse de la base de la cola, usando
guantes.

Saque el ratn de la jaula tomndolo de la zona media de la cola, y apyelo (sin

soltarlo) sobre una superficie rugosa o rejilla contra la que pueda ejercer resistencia.
Coloque la base de la cola del ratn entre sus dedos anular y meique, dejando
libre sus dedos pulgar e ndice
Con rapidez pellizque con el dedo pulgar e ndice, suave pero firmemente, la piel
de la parte superior de cuello y hombros, teniendo especial cuidado con los ratones
agresivos ya que pueden darse vuelta y morder.
Levante al animal

Tcnica de pinzamiento
La siguiente maniobra de sujecin es conocida con el nombre de pinzamiento, y
es una adaptacin a la tcnica utilizada en ratones. Para realizar esta tcnica se
recomienda tener sesiones de manipulacin suave con frecuencia diaria. La ventaja
de esta tcnica es que permite la exposicin y acceso a otras reas del cuerpo;
para ello el personal toma con su mano hbil un pliegue de piel del dorso de la rata
(figura 3), iniciando el pinzamiento en la piel de la nuca con los dedos ndice y pulgar
(figura 4) y continuando con el resto de la mano hacia la piel del dorso hacia caudal.
Nuevamente, si es una rata de ms de 150 gramos, ser necesario dar apoyo con
la mano libre a los cuartos traseros para completar la tcnica de inmovilizacin
(figura 5).
Se sujeta la rata por la base de la cola con firmeza se coloca la palma de la mano
en su cuerpo de la rata, colocando los dedos medio e ndice o por atrs de la nuca
con el dedo ndice coloca bajo la pata delantera y con la mano se rodea
completamente al animal para inmovilizarlo completamente. (Figura 6)

Figura 3

Figura 5

Figura 4

Figura 6

Marcado de las ratas

Mtodos temporales
-

Tinciones de pelaje con colorantes no txicos, recomendables para experimentos

de corta duracin. El ms frecuente es el cido pcrico (amarillo)

Mtodos permanentes de marcaje

-

Caravanas numeradas (no recomendable, suelen perderse)

Perforaciones en las orejas : Es el mtodo ms extendido de marcaje en ratones y
ratas, no requiere de anestesia y no necesita equipamiento sofisticado
Tatuajes: Puede requerir anestesia. Los animales se identifican mediante cdigos
o nmeros tatuados en la cola.
Microchip: Implante subcutneo de un microchip en la regin interescapular, se
requiere un equipo especial para el implante y la lectura y requiere anestesia, el
animal debe ser afeitado y desinfectado previo al implante.

Diferenciacin entre sexos: distancia ano-genital, mayor en machos

Hembra
-

Polistrica continua
Ciclo estral: 4 a 5 das
Duracin del celo: 8-12 horas
tero bicorne
6 pares de mamas
Celo posparto (dentro de 24 horas)

Macho
-

Canal inguinal abierto an en adulto, testculos abdominales escrotales

Pubertad: 6 semanas
Gestacin: 21-23 das
Promedio de camdada: 6.12 cras
Lactancia: 21 das
Presencia de tapn vaginal posparto
Sin efecto Bruce, leve efecto Whitten

Figura 7. Esquema de sexado de la rata

Vas de administracin
Va oral
Se puede usar el alimento o el agua, en volumen mximo de 1mL de solucin por cada 100
g de peso del animal, cuando es vehculo oleoso y 2mL de solucin cuando es solucin
acuosa; lo ideal es mediante sonda orogstrica y teniendo un buen conocimiento de la
anatoma de la zona orofarngea, los pasos a seguir son los siguientes: Inmovilizar al animal
en forma correcta e introducir la sonda hacia la izquierda en forma lenta y suave a lo largo
de la rama mandibular derecha, aqu el ratn comienza a tragar y la sonda se inserta dentro
del esfago.

Figura 8. Administracin oral

Va subcutnea
Esta va es utilizada como alternativa a la intramuscular. Se prefieren los sitios en que
abunde tejido conjuntivo, en el dorso a nivel del cuello o los flancos. La aguja se inserta en
la piel paralela a la columna vertebral
Se utiliza agujas de 25 a 27 G, a pulgada con jeringas de tuberculina. Y el volumen
para un adulto ser de 2 a 3 mL.

Va intraperitoneal

Figura 9. Administracin
subcutanea

Se usa jeringas y aguja calibre 25 27 G. a 1 pulgada, de bisel pequeo.

Aplicando la sujecin con una mano e inmovilizando la pata izquierda del ratn, con una
inclinacin hacia craneal para producir un desplazamiento de las vsceras con el fin de no
lesionarlas.
Se inserta la aguja en la piel en el cuadrante izquierdo inferior del abdomen, luego se lleva
hacia craneal y se introduce en la cavidad peritoneal, levantando la aguja en contra de la
pared abdominal para evitar la puncin en el interior del intestino; la jeringa con aguja debe
estar paralela a la columna vertebral. Se puede administrar hasta 3 mL.
Una rpida administracin del fluido puede causar daos en el tejido y hemorragia debido
a la presin interna.

Figura 10. Administracin intraperitoneal

Va intravenosa
Se utiliza agujas de 27 - 30 G y jeringas tuberculina de 1 mL. Teniendo a la rata inmovilizada
dentro de un cepo (sujetador), se utilizan las venas laterales de la cola, estas se dilatan
con alcohol o con calor.
El volumen a inocular es de 0,2 a 0,5 mL como mximo. Mejores resultados se logran si la
cola se introduce en agua caliente o si es calentado en la jaula con una lmpara. Las venas
se observan cuando la cola es levantada y girada lentamente en cualquier direccin.
No utilizar medicamentos con vehiculo oleoso o sustancias irritantes.

Figura 11. Administracin intravenosa

Va intramuscular
Se realiza en la regin antero-lateral del muslo con agujas de 26 a 30 G, pulgada con
jeringa de tuberculina. El volumen mximo es de 0,05mL.
Esta va no es muy usada debido a la poca masa muscular y al posible dao que se le
puede causar a las estructuras vitales.

Figura 12. Inyeccin intramuscular

Caractersticas del bioterio

La instalacin para animales de laboratorio debe facilitar la investigacin.
-

Provee todos los requerimientos fisiolgico, sociales y de comportamiento animal.

Deben estar ubicados en lugares donde haya un mnimo acceso del pblico.
Su mantenimiento debe efectuarse con un mnimo de perturbacin para los
animales.
Contar con un rea de recepcin para la entrega y recepcin de animales.
Contar con salas de cuarentena/aislamiento para animales enfermos o los que han
sido utilizados en el laboratorio de un investigador.
Instalaciones de lavado y esterilizacin.
Contar con rea de eliminacin de desechos.

Caractersticas de las jaulas

-

El tamao de las jaulas debe ser apropiado para cada especie alojada.
Las jaulas y los corrales no deben permitir solamente guardar los animales d una
manera segura, sino tambin asegurar su comodidad y seguridad, permitiendo
ajustes de postura y de comportamiento normales.
Las jaulas deben ser adecuadamente ventiladas, permitir un campo visual
satisfactorio y un acceso fcil a los animales.
Los sistemas de bebederos y de distribucin de alimentos deben ser planificados y
ubicados para permitir su acceso fcil, sin que se contaminen con excrementos.
El diseo de la jaula debe permitir su fcil limpieza y desinfeccin.

Cuidados bsicos de las ratas

Alimentacin
El agua debe ser potable y suministrarse libremente durante toda la vida del animal, puede
ser en frascos bebederos de vidrio o de policarbonato.
El agua debe ser acidificada, esterilizada mediante autoclave o por mtodo de filtracin.
El alimento es el material primario a partir del cual se van a formar y renovar los tejidos y
estructuras corporales, tanto las nuevas como las ya existentes, que deben ser
reemplazadas debido al proceso de desgaste. La nutricin es determinante en los estados
sucesivos de crecimiento y produccin de los animales, de ah que haya alimentos
especficos para cada especie y hasta para cada etapa de su vida. Luego de su adquisicin,
se debe tener cuidado en el transporte, almacenamiento y manipulacin del alimento para
reducir al mnimo la introduccin de enfermedades, parsitos y vectores potenciales de
enfermedades (por ejemplo insectos y otras plagas) y contaminantes qumicos.
Se debe contar con un procedimiento para la adquisicin de alimento y los requisitos que
este debe reunir, tales como:
Composicin, que deber cubrir las necesidades de crecimiento, gestacin,
lactancia y mantenimiento del ratn.
Debe ser agradable al paladar y digestible.
Tener fecha de elaboracin y caducidad.
Certificado de anlisis qumico proximal y microbiolgico por cada lote.
Estar libre de harina de pescado, aditivos, drogas, hormonas, antibiticos,
pesticidas y contaminantes patgenos.
El alimento en forma de pellet debe tener la consistencia requerida, para evitar
perdida del alimento y el animal pueda consumirlo.

Tabla 1. Composicin qumica de una dieta estandar

Normas que rigen el uso de animales de experimentacin

-

NOM-003-ZOO-1994, Criterios para la operacin de laboratorios de pruebas

aprobados en materia zoosanitaria.
NOM-029-ZOO-1995, Caractersticas y especificaciones para las instalaciones y
equipo de laboratorios de pruebas y/o anlisis en materia zoosanitaria.
NOM-033-ZOO-1995, Sacrificio humanitario de los animales domsticos y
silvestres.
NOM-051-ZOO-1995, Trato humanitario en la movilizacin de animales.
NOM-062-ZOO-1999, Especificaciones tcnicas para la produccin, cuidado y uso
de los animales de laboratorio.

Frotis
Un frotis o extendido de sangre es un mecanismo cientfico que consiste en el extendido
de una gota de sangre sobre la superficie de un portaobjetos, con el fin de analizarla
posteriormente al microscopio.
El frotis puede ser de sangre perifrica, vaginal, uretral, farngea o
hemorrgico/inflamatorio.
Frotis vaginal
Es un examen que consiste en raspar suavemente las paredes vaginales con un espculo
para recuperar secreciones vaginales para su posterior anlisis al microscopio.
Tipos celulares encontrados en un frotis vaginal
Clulas del epitelio vaginal
Clulas parabasales
Clulas intermedias pequeas
Clulas intermedias grandes
Clulas superficiales
Otras clulas que no tienen su origen en los epitelios que cubren el aparato genital
Leucocitos (linfocitos, monocitos, basfilos, neutrfilos y eosinfilos)
Eritrocitos (huecos con bordes crenados)
Clulas plasmticas. Ncleo de rueda excntrico

Ciclo estral de la rata

La pared vaginal de la rata sufre cambios cclicos que corresponden con los cambios del
ciclo del endometrio. Estos cambios se hallan bajo la influencia de las hormonas ovricas.
Las fases del ciclo estral pueden identificarse a travs de las clulas descamadas
obtenidas de la vagina, por lo que le grado de cambios en el epitelio vaginal y en el frotis
refleja la cantidad de estrgenos circulante (mayor concentracin de estrgenos en
proestro y estro)
El ciclo dura de 4 a 5 das y puede ser dividido en cuatro fases: (Figura 13, Cuadro 2)

Tabla 2. Tipos celulares del cilo estral

Figura 13. Fases del ciclo estral

Tipos de clulas que se observan en un frotis vaginal

Para determinar el ciclo estral en forma histolgica se utilizar la tcnica de citologa vaginal
exfoliativa con coloracin por el mtodo de Papanicolau:

Sujecin de la rata

Toma de muestra vaginal con esptula plstica ad-hoc (por ejemplo, ballenita de
camisa)

Extendido del material obtenido sobre un portaobjetos limpio y desengrasado

Fijacin durante al menos 5 minutos en metanol

Coloracin de las muestras:

1- Lavado con agua corriente por 30 segundos.

2- Lavado con agua destilada por 30 segundos.
3- Coloracin con hematoxilina durante 3 a 4 minutos.
4- Lavado con agua corriente por 30 segundos.
5- Pasaje por HCl 0.25 % durante 2 a 3 segundos.
6- Lavado con agua corriente durante 1 minuto.
7- Lavado con agua destilada por 30 segundos.
8- Pasaje por alcohol 96 por 30 segundos.
9- Coloracin con Orange G durante 2 a 3 minutos.

10- Pasaje por alcohol 96 por 30 segundos.

11- Coloracin con EA (EA 36-EA 50) durante 2 a 3 minutos.
12- Pasaje por alcohol 96 por 30 segundos.
13- Pasaje por alcohol 96 por 30 segundos.
14- Pasaje por alcohol 100 por 30 segundos.
15- Secado de las muestras.

Bibliografa
1. Cabezas C., lvarez P., Anaya E., Burstein Z., Curiosa W., Guillen A., et. al. Gua de manejo y
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2. Falconi E., Garca L., Martn O., Padrn R., Rivas G. y Vargas G. Manual para el manejo de animales
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Disponible:http://www.archivos.ujat.mx/dacbiol/docencia/lineamientos/manejo_animales.pdf
3. Hernndez Y. Manejo y sujecin de roedores utilizados en el laboratorio [libro electrnico]. Morelia
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4. Santos M. Curso: Animal de experimentacin como reactivo biolgico en investigacin, diagnstico
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5. Citologa del ciclo estral de la rata [Pgina en Internet]. Facultad de Ciencias [Consultada
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Disponible:
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6. Vas de administracin de sustancias en animales de laboratorio [Pgina en
Internet]. [Consultada 23 de agosto del 2015.].
Disponoble: http://www.bioterios.com/2013/post.php?s=2013-05-03-vas-de-administracinde-sustancias-en-animales-de-laboratorio
7. Modificacin a la Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999 Especificaciones tcnicas
para la produccin, cuidado y uso de los animales de laboratorio. Diario oficial de la
federacin, Mxico D.F. 9 de Agosto del 2001.