Pruebas de esterilidad: Validacin de los procesos de esterilizacin y

pruebas Esporicidas.

La esterilidad es un estado antinatural. Para mantener ese estado

antinatural se requiere que medios extraordinarios se pongan en marcha y se
mantengan; para ello estn las pruebas de esterilidad.
Las pruebas de esterilidad son un componente integral de los procesos
de esterilizacin. Cada proceso de esterilizacin est diseado para hacer que
un producto sea estril. Un producto estril es un producto donde los
organismos viables, no se pueden reproducir. En la prctica, un producto estril
no contiene microorganismos que puedan multiplicarse, ya sea en medio
digerido casena soya o en medio tioglicolato liquido.
Varios conceptos deben ser considerados en pruebas de esterilidad. El
concepto de viabilidad se basa en el crecimiento de los microorganismos en
medios de cultivo especficos y las condiciones para inducir el crecimiento:
tiempo, temperatura, pH, concentraciones nutritivas, fuentes nutritivas,
electrolitos, potencial de oxgeno, y as sucesivamente. Los microorganismos
pueden ser metablicamente activos y no viables. Otros concepto importantes
a tener en cuenta incluyen el concepto de seleccionar el grupo de organismos
que se deben detectar patgenos y patgenos oportunistas) para los que la
prueba de esterilidad est diseado; el concepto de microorganismos "de
inters" en el producto a esterilizar; el concepto de cmo medir y cuantificar
que generalmente se toma literalmente, es decir, "la esterilidad" y lo que
significa-la ausencia de todo microorganismos viable, y el concepto de diseo
de un proceso de esterilizacin y luego documentar la eficacia de dicho
proceso de esterilizacin.
El proceso de esterilizacin est diseado para hacer que un producto
sea estril. La eficacia de cualquier proceso de esterilizacin depende de varios
factores, cualquiera de los cuales pueden afectar el proceso de esterilizacin
produciendo hacer que algunos o todos de producto no se esterilicen. Slo
despus de los diversos parmetros que afectan o inciden en un proceso de
esterilizacin (para un producto) se han evaluado rigurosamente el estado de
la esterilidad para un producto puede ser medido. Este captulo proporciona
informacin bsica acerca de los requisitos para la realizacin de una prueba
de esterilidad vlida y la validacin de un proceso de esterilizacin. Se hable de
el uso y pruebas de los indicadores biolgicos (BPI) y el uso de indicadores
qumicos (IC), y una se da una breve introduccin a las pruebas esterilizantes
de esporicidas.
El enfoque clsico para probar la esterilidad de un producto ha sido
mediante la inmersin en medios de crecimiento microbiano y la posterior

observacin de crecimiento en dichos medios; Este mtodo tiene limitaciones

discutidas en este documento. Las pruebas de esterilidad para determinar si un
proceso de esterilizacin ha sido eficaz ha cambiado ligeramente: El proceso de
esterilizacin se ha alejado de un "arte clsico" y para convertirse en una
ciencia. Este cambio ha sido posible gracias a las mejoras tecnolgicas en el
control de procesos y el monitoreo de equipos. El concepto de esterilidad ahora
se ha convertido en una cuestin de mayor importancia; es decir, hay una
cierta probabilidad de esterilidad para cada unidad de producto que se somete
a un proceso de esterilizacin. Esta probabilidad se conoce comnmente como
el nivel de seguridad de esterilidad (SAL) del producto y se define como el
nmero Log 10 de la probabilidad de una unidad no estril en esa poblacin.
El nivel de seguridad de esterilidad de un proceso de esterilizacin es el
grado de certeza con el que el proceso transforma una poblacin de artculos
estriles. Una seguridad de esterilidad de 10 -6, por ejemplo, indica una
probabilidad de no ms de un microorganismo viable en 1 x 10 6 artculos
esterilizados del producto final. Si la probabilidad de un superviviente en una
sola unidad es uno en un milln, el nivel de seguridad de esterilidad sera 6.
Para determinar el nivel seguridad de esterilidad, es necesario obtener
ms informacin acerca de la carga microbiana en el producto (carga
biolgica), que incluye la biorresistencia de la carga biolgica al conjunto de
especificaciones que definen el proceso de esterilizacin para ese producto y
un profundo conocimiento de los parmetros fsicos del proceso de
esterilizacin mayor al que se conoce normalmente cuando se libera un
producto basado en
solo una prueba de esterilidad. El desarrollo, la
recopilacin, y la documentacin de estos datos se denominan validacin de la
esterilizacin. Cuando la validacin de la esterilizacin se lleva a cabo, el grado
de seguridad de esterilidad se puede determinar. La culminacin de este
concepto permite al fabricante considerar las condiciones fsicas del proceso de
esterilizacin en la construccin del producto de manera que se reduzca al
mnimo el efecto del proceso de esterilizacin en el producto.
Aunque es deseable para una fabricacin lograr una fcil esterilidad en
un producto, no siempre puede ser posible o prctico. Un producto que se
fabrica con poca frecuencia y en pequeos lotes no siempre puede ser
susceptible a la validacin de la esterilizacin debido a las inconsistencias en la
fabricacin. Sin embargo, una simulacin adecuadamente diseada podra
proporcionar documentacin de que el proceso de esterilizacin ser eficaz en
tales casos. Cuando los productos son fabricados o reacondicionados para su
uso en los hospitales u otros centros de atencin mdica, las pruebas de
esterilidad limitada junto con el monitoreo de la carga de esterilizacin a travs
de indicadores biolgicos y qumicos pueden que ser suficiente para demostrar
un proceso aceptable, siempre y cuando el proceso (o procesos) de limpieza
del producto (y su medicin) se ha documentado. En los casos en que se

esterilizan unidades individuales, las pruebas de esterilidad no se puede hacer,

ni los indicadores de proceso (fsicos, qumicos y biolgicos) se puede confiar
en asegurar la eficacia del proceso de esterilizacin para ese producto.
Cuatro mtodos de esterilizacin se han abordado a fondo en otros
captulos de este libro: el calor seco, el vapor, xido de etileno y radiacin
ionizante. Otros mtodos, menos utilizadas en la esterilizacin se han
desarrollado. Entre estos se encuentran los esporicidas lquidos, esterilizantes
gaseosos tales como el ozono, dixido de cloro, formaldehido, perxido de
hidrgeno en fase vapor, y procesos inducido por el formaldehdo-plasma.
Estos mtodos tienen un estrecho rango de aplicacin (Portner y Hoffman
1968; Hennebert et al, 1986;. Feldman y Hui, 1997; Gerlett, 1999).
Esterilizantes lquidos son capaces de destruir las esporas bacteriales. Estos
esporicidas lquidos se utilizan rutinariamente para esterilizar un dispositivos
mdicos tales como cartuchos de dializador de fibra hueca para purificacin de
la sangre que son reutilizados en un entorno clnico. Debido a que no existe
una prueba no destructiva conocida para la esterilidad, el conocimiento
anterior de la eficacia del proceso debe ser acumulada antes de asumir que las
unidades se pueden esterilizar con un esporicida.
Nuevos procesos de esterilizacin, as como los ya mencionados, pueden llegar
a ser aplicables a un segmento de productos nicos en la industria del cuidado
de la salud (Alfa et al., 1998). Es poco probable que estos mtodos
esterilizantes se utilicen para una amplia gama de productos o que van a
reemplazar cualquier de los cuatro mtodos comnmente utilizados de
esterilizacin.
Pruebas de esterilidad
El ensayo de esterilidad de los productos mdicos, como se describe en la
Farmacopea de los EE.UU. (USP), es el evaluador legal para determinar si un
producto es estril o no (USP NF, 1995). Los protocolos de pruebas descritos
son usados tanto por los fabricantes y la agencia de Alimentos y Medicamentos
de EE.UU. (FDA): para determinar la seguridad microbiologica de productos
mdicos y sus componentes. Estos protocolos no son obligatorios, pero son
pruebas de referencia, y cuando hay una diferencia de opinin entre el
fabricante y la FDA, las pruebas de USP se convierten en el fundamento jurdico
para la comparacin; otras pruebas tienen que demostrarse que son tan
buenos o mejores si el fabricante es evitar litigios (Guilfoyle y Yager, 1984).
Todos los protocolos de pruebas de esterilidad descritos en la USP son de dos
tipos bsicos: la inoculacin directa o filtracin por membrana. Las pruebas de
inoculacin directa es simplemente la colocacin de un producto, una parte de
un producto, o un enjuague de un producto directamente en el medio de
crecimiento microbiano. Todo o parte del producto se puede utilizar,
dependiendo de la consistencia, el tamao o forma. La filtracin por membrana

es el lavado de un producto, un componente de un producto, o un lavado a

partir de un producto a travs de un filtro de membrana, donde se recogen los
microorganismos. La membrana entonces se coloca en medio de crecimiento.
Estos mtodos suenan simplistas, y por diseo lo son. El desempeo de la
prueba, sin embargo, es ms complicado. Cinco factores importantes afectan a
la confiabilidad de un prueba de esterilidad: (1) la propia muestra, (2) la parte
de cada unidad de prueba, (3) el medio ambiente, (4) el equipo, y (5) la tcnica
del personal haciendo la prueba, incluyendo los medios y la preparacin
contenedor de muestras.
MUESTRA
Las pruebas de esterilidad de un producto requieren una muestra que sea
representativa del lote de esterilizacin; tambin requiere que el nmero de
unidades sea estadsticamente vlida para el grado de garanta de esterilidad
necesario. Debido a que es imposible o imprctico poner a prueba la totalidad
del lote de esterilizacin, un plan de muestreo debe ser desarrollado par
proporcionar una probabilidad aceptable de encontrar una unidad contaminada
si uno est presente. Los riesgos asociados con la toma de muestras han sido
bien comprendidos durante muchos aos (Knudsen, 1949). Las tablas
publicadas por Brewer (1957) proporcionan una caracterizacin de estos
riesgos. Tabla 70.1 describe la probabilidad de encontrar un nmero de
unidades positivas de 10 unidades cuando se conoce el verdadero nivel de
contaminacin.

Por ejemplo, si el verdadero porcentaje de contaminacin de un lote de

producto es del 1%, la probabilidad de encontrar prueba de un crecimiento
negativo es del 90%; encontrar uno positivo es el 9%, y de encontrar dos
positivos es del 0,4%. Es obvio que probando 10 unidades no se obtiene una

gran seguridad de esterilidad a menos que exista evidente incumplimiento del

proceso de esterilizacin y la mayora de las unidades estn contaminadas.

Tabla 70.2 muestra la relacin de la probabilidad de aceptar diferentes

supuestos grados de contaminacin para diferentes tamaos de muestra.
Si se utiliza el tamao de la muestra comnmente especificado por la
USP (20 unidades), la tabla muestra que la probabilidad de aceptar un lote tan
estril que tiene una tasa de contaminacin de 1% sera 82 de cada 100 lotes
ensayados. Cuando las tasas de contaminacin son bajos (1/1000), la
probabilidad de aceptar un lote contaminado es todava mayor del 60% de
500-unidad muestreadas. Tabla 70.2 tambin muestra que la probabilidad de
aceptar un lote contaminado no se disminuye significativamente para un lote
con un bajo nivel de contaminacin cuando aumenta el tamao de la muestra
de 20 unidades a 100 unidades.
Porciones de la Muestra
Cuando todo el contenido de un vial o un dispositivo mdico completo
pueden ser colocados en medios de crecimiento, la porcin de la muestra
(ANSI / AAMI / ISO 11737-1-1995; ANSI / AAMI / ISO 11737-2-1998) se dice que
es 1,0. Cuando la mitad de una unidad es probada, la porcin de muestra es de
0,5, y as sucesivamente. Este concepto es importante cuando se utiliza el
ensayo de esterilidad para lanzar un producto. Cuando slo una parte de la
unidad es probada, la fiabilidad de la prueba se reduce en la misma proporcin
de la muestra; por ejemplo, cuando se prueba la esterilidad de un gran pao
quirrgico, es una prctica comn para retirar de dos a cuatro secciones de 2
pulgadas cuadradas tomadas de diferentes reas. Suponiendo que cuatro
secciones se tomaron que es 1,600 pulgadas cuadradas, la proporcin de a
muestra sera de 1: 200. La fiabilidad de la prueba de esterilidad se reduce
significativamente, particularmente cuando el nivel de contaminacin es bajo y
al azar.

Medio Ambiente
Una prueba de esterilidad debe llevarse a cabo en un ambiente
controlado. Un ambiente controlado es aquel que limita el acceso a las
personas que realizan la prueba. Por lo general, se disea como una sala
limpia clase 100 para cumplir con la norma federal 209-E (1992) con
especificaciones para el control de partculas y las caractersticas de flujo de
aire. Algunas habitaciones limpias tienen sistemas de flujo de aire
convencionales (turbulencia), mientras que otros tienen los patrones de flujo
de aire laminar vertical u horizontal.
Los filtros de partculas de aire de alta eficacia (HEPA) se utilizan generalmente
sin tener en cuenta los patrones de flujo de aire. Los filtros HEPA estn
diseados para eliminar las partculas de 0,3 o mayor desde el conducto de
aire con una eficiencia 99,999%. Debido a que los microorganismos son
generalmente ms grandes que 0,3 el aire suministrado a la habitacin se
considera estril y libre de partculas. Cuando los paquetes o contenedores se
abren en una habitacin limpia, el riesgo de contaminacin del producto a
esterilizar es menor que si se abri en una habitacin con un sistema de
filtracin convencional. Habitaciones limpias correctamente diseadas son
fciles de limpiar y mantener (Estndar Federal 209-E, 1992), pero los
procedimientos y planes de limpieza y mantenimiento deben ser establecidos y
seguidos. Las habitaciones pueden ser diseadas para ser desinfectada con luz
ultravioleta o aerosoles desinfectantes. Cuando se utiliza luz ultravioleta, debe
haber una alarma para advertir cuando la luz ultravioleta est encendida. Las
pruebas de esterilidad no pueden llevarse a cabo bajo luz ultravioleta o en
presencia de aerosoles desinfectantes.
Mdulos de paredes suaves y salas limpias se utilizan en muchos casos
para proporcionar un control ambiental completo. Estos mdulos pueden ser
similares a los mdulos libres de grmenes en que todo el equipo y los
suministros se pasaron a travs de un esterilizador de doble puerta adjunta al
mdulo. La persona o personas que realicen la prueba de esterilidad lo hacen a
travs los puertos de guantes desde el exterior del mdulo. Estos mdulos son
especialmente eficaces para el ensayo estril de llenado farmacuticos (Akers
et al., 1995).
Equipos
Equipos, suministros, materiales y medios de pruebas que van a entrar
en contacto con el producto deben ser estriles antes del inicio de un ensayo
de esterilidad. Los instrumentos deben ser envueltos de tal manera que les
permite ser retirados del paquete sin contaminarse (extraccin asptica); el
material de envoltura en s mismo debe proporcionar una barrera microbiana.
Es generalmente deseable envolver cada unidad individualmente, ya que es

difcil de retirara el paquete de su contenedor sin tocar otros en el paquete.

Cuando se utiliza la filtracin por membrana, se debe prestar un mayor
cuidado para garantizar la esterilidad de todos los componentes, incluyendo las
membranas. Dispositivos estriles desechables para la filtracin de membrana
pueden ser eficaces en la reduccin de la contaminacin inadvertida (Gee et.
Ah, 1985).
Es deseable que los contenedores de la prueba de esterilidad sean de un
tamao y volumen especifico para contener el medio de cultivo suficiente para
permitir que el producto se sumerge completamente (o, si la necesidad dicta,
al menos, la porcin ms difcil de esterilizar debe ser sumergible). La relacin
de volumen de medio de crecimiento y el tamao del recipiente debe eliminar
salpicaduras de medio sobre el borde de los recipientes. Los labios de los
contenedores deben estar libres de grietas, y las faldas de los cierres de los
recipientes deben ser largos. En la prctica, el uso de papel de aluminio como
una capa moldeable es frecuentemente ventajoso. Idealmente, la lectura de los
resultados de la prueba de esterilidad debe llevarse a cabo sin mover los
recipientes; la manipulacin de contenedores con el producto sometido a
pruebas de esterilidad puede conducir a falsos positivos (a excepcin de los
cierres de recipientes con tapn de rosca).
Con frecuencia es deseable llevar a cabo pruebas de esterilidad en una
campana de flujo de aire laminar, incluso si se llevan a cabo en una sala limpia.
Estas campanas estn equipadas con filtros HEPA y proporcionan un rea
controlada dentro del ambiente de sala limpia. La seleccin de una campana
de flujo vertical o de flujo horizontal para una aplicacin especfica puede
mejorar la fiabilidad de la prueba.
reas para cambio de vestuario, as como los servicios sanitarios y de lavado
son componentes necesarios para las pruebas de esterilidad. La temperatura y
la humedad relativa de la habitacin donde se realiza la prueba de esterilidad
deben ser controladas para minimizar los problemas con la electricidad
esttica. Carros que no se retiren de la habitacin deben transportar equipo o
muestras dentro de la sala limpia dedicada. Equipo que se mueve dentro o
fuera de la habitacin debe ser transferido a un carro fuera de la habitacin.
Los carros deben ser fciles de limpiar.

Personal
El analista de las prueba de esterilidad es el factor ms importante que influye
en el xito o fracaso de un una prueba de esterilidad. La mayora de los falsos
positivos se pueden atribuir al analista. La tasa de falsos positivos en los
bancos de pruebas de esterilidad convencionales se considera aceptable
cuando uno se encuentra un falso positivo por cada 1.000 unidades probadas

La frecuencia de falsos positivos en salas de pruebas convencionales puede

mostrar variaciones que resultan de la complejidad de la prueba, la
complejidad del producto, la formacin del analista, la tcnica del analista, el
tipo de uso de batas utilizado, y la cantidad de derramamiento del analista.
Algunas personas despiden un mayor nmero de microorganismos que otras, y
esto debe ser una consideracin al asignar personal capacitado para hacer las
pruebas de esterilidad. Igualmente importantes son la temperatura y la
humedad relativa en el conjunto de pruebas y su efecto sobre el anlisis.
Cualquier persona con llagas abiertas, resfriados u otros problemas de salud
que pueden contribuir a la diseminacin microbiana no se debe permitir hacer
las pruebas de esterilidad. Cosmticos y joyas usadas por el analista de prueba
de esterilidad tambin pueden contribuir a la contaminacin del producto,
sobre todo anillos con salientes puntiagudos que puedan perforar agujeros en
los guantes; estos deben ser minimizados. El cumplimiento de los buenos
hbitos de higiene personal es una parte esencial del control de la
contaminacin en una conjunto de pruebas de esterilidad. Procedimientos de
uso de batas deben establecerse y seguirse cuidadosamente introduciendo
nico el conjunto de pruebas de esterilidad; observadores no entrenados en
una habitacin limpia deben ser minimizados
Pruebas Farmacopea de Estados Unidos Esterilidad
La USP es la norma por la cual la esterilizacin industrial es evaluada
legalmente. Aunque las pruebas se desarrollaron originalmente para controlar
la calidad y para proporcionar procedimientos de prueba de frmacos, que se
estn aplicando de forma ms activa en el control y la prueba tcnica de
dispositivos mdicos. La Convencin de la USP , Inc., reconocieron que las
pruebas descritas en esta seccin puede no ser los nicos procedimientos que
ponen a prueba adecuadamente la esterilidad de un producto mdico cuando
afirmaron que "Procedimientos alternativos pueden ser empleados para
demostrar que un producto es estril; siempre y cuando los resultados s
resultados obtenidos sern confiables.
La USP describe dos medios bsicos para la recuperacin de microorganismos
de productos inadecuadamente esterilizados. Ellos son el medio tioglicolato
liquido (FTM) y el medio digerido casena soya (SCD). Un tercer medio, medio
tioglicolato liquido alternativo, tambin se describe. El medio alternativo
contiene lo mismo en que el medio FTM pero sin el agar y resazurina y se
utiliza para los productos con lmenes que debe lavarse. Los medios utilizados
en la USP para el ensayo de esterilidad inadecuada se emplean para detectar
la mayora de mesfilos aerobios y microorganismos microaeroflicos. Tambin
puede emplearse para el crecimiento de algunos microorganismos anaerobios
mesfilos. Encontramos que algunos microorganismos trmicamente o
qumicamente estresados no pueden crecer en los medios mencionados y que
existen formulaciones de otros medio para una mejor recuperacin. El medio

de soya casena diluido a 50% se ha usado para esta aplicacin. Muchos

hongos no crecen debido al pH, que es cerca de 7 en ambos medios. Adems,
cualquier microorganismos termfilos no va a crecer a las temperaturas de
incubacin indicados de 20 a 25 C para el medio de soya casena y 30 a
35 C para el medio tioglicolato liquido. Cuando se sospecha la presencia de
estos organismos, otros medios y / o condiciones de incubacin deben
utilizarse en conjuncin con las pruebas requeridas de USP.
Bacteriostasis y fungistasis
Muchos productos farmacuticos contienen inhibidores microbianos, y algunos
medicamentos y dispositivos mdicos son inhibidores debido a su qumica
inherente. Para realizar una prueba de esterilidad adecuada en un producto, es
necesario en primer lugar para determinar si los productos inhiben el
crecimiento microbiano.
El producto a ensayar se coloca en el medio de crecimiento en las cantidades
apropiadas y se inocula con los organismos descritos en la Tabla 70.3 usando
no ms de 100 microorganismos viables.

Si el crecimiento se produce en 7 das, y el crecimiento es visualmente

comparable a la de los controles positivos, el producto no se considera
bacteriosttico o fungisttico. Si el crecimiento no se produce en 7 das, hay
una inhibicin que debe ser disminuida o neutraliza de modo que el sistema de
crecimiento es no inhibidor. Esto se puede hacer en algunos casos mediante el
uso de medios adicionales para diluir el componente inhibidor a una
concentracin en la que no es inhibidor o mediante la reduccin de la cantidad
del producto para reducir la cantidad de sustancia inhibidora. A veces, sin
embargo, la sustancia inhibidora en el producto puede tener que ser
neutralizado, o puede requerir filtracin de membrana seguido de un enjuague
neutralizante. El ensayo de esterilidad de las soluciones de antibiticos es un
buen ejemplo de un producto que requiere filtracin de membrana, seguido de

un enjuague neutralizante. (USP XXIII, 1995). Aunque cantidades especficas de

producto a ensayar se especifica en la USP, el efecto de inhibicin sobre los
microorganismos de prueba se debe tomar en consideracin, y la cantidad del
producto a ensayar se debe ajustar para asegurar una prueba vlida.
Nota: puede utilizarse en lugar de o en conjunto con Pseudomonas aeruginosa
(ATCC 9027 no.); Bacillus subtilis (ATCC N 6633) se pueden usar en lugar de o
en conjuncin con Staphylococcus aureus (ATCC No 6538.); Y Clostridium
sporogenes (ATCC No 11437.) Se pueden utilizar en lugar de o en combinacin
con B. subtilis y B. vulgatus, respectivamente.
Preparacin para las pruebas de esterilidad
Antes de iniciar una prueba de esterilidad, es necesario preparar el
medio ambiente, el analista, la muestra, y el equipo a utilizar en la prueba.

Controles Ambientales
Los procedimientos de limpieza para el medio ambiente deben llevarse a
cabo con suficiente anticipacin de cualquier prueba de esterilidad, y debern
mantenerse registros de referencia en el momento de la prueba. Las
superficies de trabajo deben ser evaluados para la limpieza biolgica de forma
rutinaria y los resultados se deben de conservar como referencia por el analista
en el momento de la prueba. Un registro del programa de mantenimiento y la
aceptabilidad de los equipos de tratamiento de aire (por ejemplo, cambios de
filtro, , y los controles de velocidad de aire) deben estar disponibles. El
muestreo del aire para partculas viables y no viables se debe hacer de forma
rutinaria, y los resultados deben ser recibidos por el analista. Esta informacin
ayuda al analista a determinar la validez de los resultados positivos, en caso de
producirse (Waldheim, 1988).
En el momento de la prueba de esterilidad, las cajas Petri abiertas con
medio soyacaseina estril u otro medio de cultivo apropiado para los
microorganismos que se encuentran en el medio ambiente y en el producto
deben ser distribuidos en y alrededor del rea de trabajo. Estas placas "testigo"
se cubren y se recogieron despus de la finalizacin de la prueba de
esterilidad, se incubaron, y los resultados son evaluados en conjunto con los
resultados de la prueba de esterilidad.
El Analista
A intervalos regulares, el analista debe someterse a una evaluacin de
desempeo, el uso de un producto estril conocido que sea es al menos tan
complejo como el producto de los exmenes de rutina. Manipulacin de
muestras para la identificacin y preparacin para colocarlos en el cuarto de

pruebas de esterilidad se debe hacer con guantes estriles. Se debe tener

cuidado para evitar que las muestras entren en contacto con otras partes del
cuerpo o superficies de trabajo sucias. Antes de entrar en el cuarto de pruebas
de esterilidad, el analista debe vestirse apropiadamente, y antes de comenzar
la prueba de esterilidad, el analista debe cambiarse los guantes estriles. El
analista debe mostrar buenos hbitos de higiene personal y ser capaz de
realizar la prueba usando una buena tcnica asptica.

La Muestra
Las muestras deben recogerse con un mnimo de manipulacin para
evitar cualquier contaminacin microbiana proveniente del envase. Cualquier
embalaje secundario debe ser removido antes de colocar las unidades en el
cuarto de pruebas de esterilidad. Los procedimientos de descontaminacin
deben llevarse a cabo antes de colocar la muestra en el cuarto de prueba de
esterilidad. La descontaminacin puede ser mediante toallitas desinfectantes,
inmersin en desinfectantes, o simplemente lavados de aire, dependiendo del
embalaje y la necesidad de limpieza. Los vapores de algunos desinfectantes
(como por cido actico) pueden entrar en los paquetes porosas y afectar a
los organismos viables en el producto de prueba, lo que invalidar la prueba.
La luz ultravioleta tambin puede pasar a travs de algunos materiales de
embalado, lo que podra matar microorganismos viables. Se debe tener
cuidado de no exponer paquetes porosos a los desinfectantes lquidos.
Equipos
Cualquier equipo que entra en el cuarto de prueba de esterilidad debe
ser esterilizado. Cuando se emplea un doble envase estos se deben esterilizar
en doble envase, el envase exterior se elimina cuando entra en el cuarto de
pruebas, y la envoltura interior se quita cuando entra en el cuarto de prueba de
esterilidad. Se debe tener cuidado para mantener el equipo en condiciones de
funcionamiento con el fin de asegurar un funcionamiento sin problemas
durante la prueba. El equipo que debe ser esterilizado es ms fcil de procesar
cuando se mantiene limpio y relativamente libre de contaminacin microbiana.
Ensayo de Esterilidad
La USP describe pruebas para productos especficos, utilizando los dos
mtodos principales de pruebas de esterilidad: inoculacin directa y filtracin
por membrana. Los ensayos descritos son lo suficientemente generales para
una amplia gama de productos. El analista, sin embargo, debe seleccionar las
pruebas que son ms apropiados para el producto especfico. Por ejemplo, las
jeringas precargadas se incluyen en la seccin sobre la inoculacin directa,
pero para las pruebas de su contenido una tcnica de filtracin de membrana

puede ser las ms adecuadas, especialmente si el contenido es bacteriosttico

o fungisttico. El analista tambin debe seleccionar las partes ms apropiadas
de un medicamento o dispositivo mdico para la prueba, a pesar de que la USP
especifica las partes en su prueba. Las porciones especificadas puede ser poco
prctico o txicas para el crecimiento, y porciones ms pequeas o una mayor
dilucin puede ser ms apropiado.

Interpretacin de los resultados

La USP permite dos etapas de prueba de los procedimientos descritos
previamente.
Primera Etapa
Si todas las muestras permanecen negativas para el crecimiento durante
todo el perodo de incubacin, la muestra cumple los requisitos de la prueba de
esterilidad. Cuando ocurren casos positivas y que se puede demostrar que el
crecimiento puede haber sido el resultado por un mal control del medio
ambiente o por una falla en los procedimientos, la prueba puede ser repetida
repetir. Si el crecimiento se produce y no puede ser atribuida a una causa, la
etapa 2 puede ser iniciada.
Segunda Etapa
Ensayo de la muestra de producto en ll segunda etapa requiere doble de
unidades a ensayar usando los procedimientos de la primera etapa. Si no se
observaron pruebas positivas, la muestra cumple los requisitos de la prueba. Si
se encuentras muestras positivas y se puede demostrar que los resultados
positivos se debieron al medio ambiente o a un procedimiento de prueba
defectuoso, la prueba se puede repetir. Si se presentan casos positivas que no
se pueden atribuir a una causa exterior, la prueba no cumple con los requisitos
de la prueba, y el producto se considera contaminado. La interpretacin de
esta prueba se considera la probabilidad de aceptar un lote no estril con un
bajo nivel de contaminacin. El fabricante debe considerar cuidadosamente
todas las facetas del proceso de esterilizacin y balancear la probabilidad de
rechazar un lote que es verdaderamente estril.
Otras pruebas de esterilidad de productos especficos se incluyen en el Cdigo
de Regulaciones Federales (CFR). Las pruebas para antibiticos y biolgicos se

incluyen en CFR 21, parte 436.20 y 610.12, respectivamente (1995). Aunque

estas pruebas requieren algunas medidas especficas, los procedimientos
generales son comparables a las identificadas de la USP.
Las pruebas de esterilidad son esenciales para asegurar que un producto ha
pasado por un proceso de esterilizacin, incluso aunque la probabilidad de que
un producto no estril no se puede determinar. Tambin se utiliza durante la
validacin del proceso de esterilizacin para determinar si los parmetros de
un proceso sern reducir la poblacin microbiana a un nivel no detectable.
VALIDACIN DE PROCESOS DE ESTERILIZACIN
La validacin se define en la Gua Industrial de Esterilizacin de dispositivos
medico con xido de (AAMI, 1994) como " el establecimiento de pruebas
documentales que proveen un alto grado de seguridad de que un proceso
especfico cumple con todas sus caractersticas y especificaciones de calidad
establecidos. "Este es un procedimiento que requiere un conocimiento
detallado de los equipos y su capacidad para llevar a cabo de una manera
consistente, la interaccin esterilizante / producto y la documentacin
necesaria para demostrar que el proceso era repetitivo y eficaz. Un diagrama
de flujo se presenta en la figura. 70.1.

Fig. 70.1. Diagrama de flujo de la validacin del proceso de esterilizacin

Product specification: Especificacin del producto. Process specification: Proceso
de especificacin
Validation Program: Programa de validacin. Intallation qualification (no
product): Calificacin de la instalacin (sin producto). Equipment testing: Prueba del
equipo. Equipment calibration: calibracin del equipo. Equipment documentation:
Documentacin del equipo
Performance qualification (with product): Calificacin de desempeo (con el
producto). Protocol preparation with minimum 3 runs: Protocolo de preparacin
con un mnimo de 3 pruebas. Product Equipment evaluation: Evaluacin Equipos
producto. Microbial functionality evaluation: Evaluacin funcionalidad microbiana.
Performance challenge: desafo de desempeo.
Certification: Certificacin.
Documentation
accumulation:
acumulada. Review and approval: Revisin y aprobacin

documentacin

Hay tres mtodos de validacin bsicas: 1. ciclo de , en el que el proceso tiene el probado con indicadores biolgicos en
los tiempos de esterilizacin que son igual o menos de la mitad del ciclo
completo. Este procedimiento se utiliza cuando se conoce poco acerca de las
resistencias microbianas o la cantidad de microorganismos en el producto. El
ciclo completo por lo general se considera aceptable cuando los indicadores
biolgicos son eliminados y el producto probado no presento crecimiento en el
medio ciclo. Debido a que los indicadores biolgicos generalmente tienen por lo
menos 1.0 x 106 esporas por unidad, y la resistencia de los indicadores
biolgicos se considera que es mayor que la carga biolgica del producto, la
probabilidad de el producto no esterilizar el producto se consideran menos de
1 de cada milln despus de una reduccin 12-log del indicador biolgico.
2. Validacion de Indicadores Biolgicos combinados con una carga biolgica
(bioburden) (a) cuando la resistencia y la poblacin de la carga biolgica de un
producto son conocidos y (b)cuando se establece una relacin entre la
resistencia total de la carga biolgica y el indicador biologico. Este tipo de
proceso requiere ms conocimiento de la carga biolgica que el mtodo de
overkill. La ventaja de este proceso es que permite que el fabricante acorte el
tiempo de ciclo o para disear un ciclo para minimizar la exposicin del
producto al esterilizante.
3. Validacin de una carga biolgica solo se utiliza slo cuando los indicadores
biolgicos no son adecuados y el proceso de esterilizacin deben mantenerse
al mnimo. En este tipo de validacin, la carga biolgica y su resistencia al
proceso de esterilizacin deben ser determinados. Se puede utilizar, por
ejemplo, en un producto que esterilizado con vapor, pero puede deformarse
cuando las temperaturas se mantienen durante tiempos prolongados y donde
el nivel de carga biolgica es menos del uno por unidad con resistencia

relativamente baja con valores de reduccin decimal (D valores) de menos de

0,5 minutos. Esto requiere extensas pruebas y control de la carga biolgica
para establecer y mantener una probabilidad aceptable de una unidad no
estril.
En laa seccin de referencias de este captulo se suministra listas de la
Asociacin para el Avance de la Instrumentacin Mdica (AAMI) documentos
que describen en detalle los pasos necesarios para validar los productos que
utilizan el mtodo de overkill y los indicadores biolgicos combinados / mtodo
de carga biolgica y el uso adecuado del indicador biolgico .
Indicadores biolgicos
Indicadores biolgicos se definen en la norma AAMI evaluacin de resitencia de
indicadores biolgicos (BIER) los contenedores de gas de xido de etileno como
utilizados como una calibracin de microorganismos (de alta resistencia a la
esterilizacin que se est supervisando) en o sobre un portador, puesto en un
paquete que mantiene la integridad portador inoculado y es de conveniencia
para el usuario final, que sirve para demostrar que se cumplan las condiciones
de esterilizacin. "Varias normas elaboradas por el Comit de Normas de
Esterilizacin AAMI proporcionar orientacin para la prueba y el uso de
indicadores biolgicos (IB) para vapor y esterilizacin con xido de etileno
(ANSI / AAMI, 1985; 1986; 1991). La USP XXIII (1995a, b) tambin proporcion
monografas para probar tira de papel de indicadores biolgicos para calor
seco, vapor y xido de etileno. Hay cuatro tipos comerciales bsicos de
indicadores biolgicos: portadores de papel envasado en sobres de papel
cristal, unidades autnomas, ampollas selladas y suspensiones de esporas. No
todos los tipos de indicadores biolgicos son apropiados para una aplicacin
especfica: por ejemplo, un IB de esporas dentro de una ampolla
hermticamente cerrada no debe ser utilizado para evaluar la esterilizacin de
productos secos debido a que el lquido en el recipiente hermticamente
cerrado produce su propio vapor y no indica si el producto ha tenido suficiente
exposicin al vapor para permitir que la esterilizacin se lleve a cabo. Cada tipo
de IB est diseado para su uso en aplicaciones especficas. La Gua ANSI /
AAMI ST-34 (1991) para el uso de xido de etileno y vapor industrial con
Indicadores Biolgicos describe el uso adecuado de los indicadores biolgicos.
Las normas de la AAMI son los documentos fundacionales que permiten
la calibracin de indicadores biolgicos con los estndares AAMI, monografas
de USP, y la evaluacin de productos mdicos inoculados. Las normas de los
IB / BIER proporcionan las tolerancias y parmetros de funcionamiento que
permiten valores de resistencia comparativos que se obtuvieron. Las
monografas USP XXIII permiten la variabilidad del 20% en el valor D desde el
momento inicial de prueba a travs de la fecha de caducidad. Sin embargo se
encontro una considerable variacin entre los valores-D determinados

(Oxborrow et al 1983). La variacin en los valores- D fue del 18% para los
indicadores biolgicos de xido de etileno cuando se prueban en un solo medio
de cultivo. Cuando los indicadores biolgicos de vapor se probaron utilizando
tres medios diferentes se encontr una variacin que de 20%, 31% y 38%,
respectivamente, lo que indica que las especificaciones de la USP son poco
realista. La calibracin de indicadores biolgicos debe referirse a un proceso
especfico usando un medio especificado si los indicadores biolgicos se van a
utilizar para la liberacin del producto o revalidacin (Boris y Graham, 1985).
Variacin de la resistencia de los indicadores biolgicos. El valor D se
puede ver afectado por la forma en que se producen las esporas, incluyendo
los medios de esporulacin, la temperatura de incubacin, la solucin de
suspensin, y la limpieza de la suspensin de esporas. El material de soporte,
el embalaje, y las condiciones de almacenamiento tambin pueden afectar el
valor D. Los estudios que comparan un tipo de IB a otro muestran diferencias
significativas.
Las especies de microorganismos formadores de esporas ms
comnmente utilizados como Bacillus subtilis subespecie niger para procesos
calor seco y de xido de etileno, B. stearothermophilus para procesos de vapor
y B. pumilus para radiacin. Aunque estos son los microorganismos ms
utilizados, otros pueden ser utilizados, siempre que sus caractersticas de
resistencia se determinan para el proceso de esterilizacin deseado (Caputo et
al, 1979;. Moldenhauer et ah, 1995).
Cuando se usan indicadores biolgicos para evaluar un proceso de
esterilizacin, siempre hay un problema en la interpretacin de los resultados.
Esto es particularmente importante en la validacin de un proceso de
esterilizacin. Dos mtodos de evaluacin de un proceso de esterilizacin se
pueden utilizar. Un mtodo consiste en exponer los indicadores biolgicos a un
ciclo de esterilizacin parcial que permitir esporas para sobrevivir, se
recuperan las esporas restantes, y se calcula una curva de resistencia. La tasa
de muertes, se puede determinar contando los supervivientes para cada
tiempo de exposicin y la comparacin de la cuenta con la poblacin inicial. A
continuacin se puede establecer
un tiempo de ciclo mediante la
extrapolacin de la tasa de muertes (D-valor) al
Nivel deseado de
Aseguramiento de Esterilidad. El tiempo de ciclo puede ser optimizado
mediante la determinacin del tiempo de exposicin requerido para obtener
aproximadamente un 10% de muertes de la poblacin inicial, la determinacin
de la tasa de inactivacin a partir de ese punto, y luego combinando el tiempo
de "activacin" con el tiempo de la curva de muerte se obtiene el nivel de
aseguramiento de esterilidad deseada.
El segundo mtodo consiste en exponer los indicadores biolgicos a un
proceso que reduzca la poblacin a un punto en el que slo algunas de las

unidades sean positivas (fraccin negativa). Se puede determinar el numero

probable de supervivientes utilizando los mtodos descritos en las normas de
la AAMI o las monografas de USP. El valor D se puede determinar y el tiempo
de ciclo establecido. Cuando se utilizan indicadores biolgicos en los procesos
de Overkill o para el seguimiento, los resultados suelen ser una respuesta
negativa de los indicadores biolgicos, asumiendo que el proceso de
esterilizacin fue adecuado. Un indicador biolgico negativo indica al operador
slo que el proceso era adecuado para matar a los indicadores biolgicos.
Cuando la biorresistencia de la carga biolgica se sabe que es menor que la de
los indicadores biolgicos, un el IB colocado en el mismo lugar que la carga
biologica tambin debera ser esterilizado.
Nota: En la documentacin de la eficacia de un proceso de esterilizacin,
el indicador biolgico debe ser colocado en uno o ms de los sitios ms difciles
para esterilizar; Los indicadores biolgicos deben ser colocados a lo largo de la
carga del esterilizador, aproximadamente uno por cada 20 pies cbicos, pero
no menos de 20 No se puede asumir que si todos los indicadores biolgicos son
negativos que toda la carga es estril. Los estudios preliminares deben
demostrar que las ubicaciones de los indicadores biolgicos son los ms
difciles de esterilizar y los indicadores biolgicos son ms resistentes que la
carga biolgica cuando se somete a la misma serie de condiciones del proceso
de esterilizacin (Berube, 1981).
Los indicadores biolgicos positivos indican un proceso fallido, y,
probablemente, el producto no es estril. Los indicadores biolgicos falsos
positivos son raros. Cualquier resultado positivo debe considerarse un fracaso
del proceso.
La USP tiene tres monografas para las probar y evaluacion de los
indicadores biolgicos: Los Indicadores biolgicos para la esterilizacin seca en
tiras de papel, indicadores biolgicos para la esterilizacin con xido de etileno
en tiras de papel, y los indicadores biolgicos para esterilizacin por vapor en
tiras de papel (USP-NF XXIII, T995). Las monografas sobre indicadores
biolgicos de vapor y xido de etileno son comparables a los estndares AAMI
para indicadores biolgicos de la salud y especificar la cepa de B.
stearothermophilus o B. subtilis a utilizar. Alternativamente, cualquier cepa que
ha sido totalmente documentado que muestre tener la resistencia necesaria
para proporcionar desafo equivalente al proceso de esterilizacin puede ser
utilizado.
Para cumplir los requisitos de los indicadores biolgicos USP, los
indicadores biolgicos deben ser etiquetados de acuerdo con la monografa.
Entre los requisitos de etiquetado son los valores de resistencia: el valor D y los
tiempos de exposicin al esterilizante requerido para obtener todos los
supervivientes, el tiempo para lograr la destruccin completa, y el

procedimiento utilizado para determinar la resistencia, recuento de esporas o

fraccin negativa. La USP tambin requiere que el etiquetado asegure que el
valor D indicado es reproducible nicamente en las condiciones exactas en las
que se determin .... "Esta advertencia sirve de aviso a los usuarios de que los
indicadores biolgicos pueden no ser adecuados para aplicaciones en el que se
utilizan los procesos de esterilizacin con otros parmetros fsicos. Tambin
advierte que el usuario puede no ser capaz de replicar los valores del
fabricante e indirectamente insta a los usuarios, siempre que sea posible, para
determinar los valores de resistencia en su aparato de ensayo.
Los parmetros de prueba especficos y protocolos de ensayo para
determinar la resistencia se definen en las monografas de la USP, junto con
una tcnica de cultivo especfico. Se especifican los medios y condiciones de
incubacin de crecimiento para las especies IB apropiados para cada
monografa. Los mtodos para determinar el nmero total de esporas y los
clculos para determinar el valor D IB estn en las monografas y en la Gua
industrial de indicadores biolgicos para el uso vapor de xido de etileno y
(ANSIMAMI ST 34-1991). La USP tambin requiere informacin de
la
supervivencia y muerte de los IB (basado en clculos especficos), para la
estabilidad, la pureza, y la eliminacin.
Indicadores qumicos (ANSI / AAMI ST-44 hasta 1992; ANSI / AAMI ST45 a 1.992)
Los indicadores qumicos (IC) son otra manera de supervisar los procesos
de esterilizacin Se utilizan en todos los tipos de esterilizacin y son especficos
para esterilizacin supervisada. La radiacin ionizante utiliza dosmetros de
varios tipos, y los dosmetros pueden ser especficos para el rango de dosis que
deba controlarse y la sensibilidad requerida. El calor seco utiliza bandas de
indicadores qumicos que unidos al producto que indican cuando alcanzan la
temperatura de esterilizacin deseada. No indica que el tiempo o la
temperatura de exposicin transcurrido hayan sido suficientes para esterilizar.
Este tipo de indicadores est disponible para todos los tipos de procesos de
esterilizacin, y puede indicar que algn parmetro
del proceso se ha
cumplido. Un tipo comn de indicador qumico es uno que cambia de color
cuando el pH del ambiente cambia, como cuando se ponen en contacto con
vapor de xido de etileno.
Indicadores de temperatura son especficos para los procesos de
esterilizacin con vapor. Estos indicadores tienen la capacidad de indicar
cundo hay un punto fro que puede ser debido al aire atrapado. No son
capaces de integrar todos los parmetros del proceso. Indicadores "Bowie-Dick"
son indicadores qumico especialmente diseados para ser utilizados para
detectar fugas de aire o aire atrapado en procesos de esterilizacion de vapor
de vaco . Estos indicadores estn hechos de tinta que cambian fcilmente de

color en presencia de vapor de agua. Se utiliza paquetes de toallas u otros

materiales que desafan la penetracin del vapor, el aire residual impide un
cambio de color completo; los indicadores qumicos pueden ser
extremadamente sensible, y la diferencia en el cambio de color puede ser
dramtico.
Indicadores de mltiples parmetros estn diseados para indicar todos o
algunos de los parmetros de un proceso de esterilizacin. Numerosos
reclamos han sido hechos por varios fabricantes (Lee et al., 1979). Algunos
indicadores multiparamtricos proporcionan al usuario una garanta adicional
de que el proceso era adecuado y que el producto expuesto en esa posicin fue
expuesta a condiciones de esterilizacin. Algunos de los indicadores qumicos
son similares a indicadores Biolgicos en su respuesta al proceso de
esterilizacin; es decir, el cambio de color responde a un cambio en la
temperatura similar a un valor Z para los indicadores biolgicos. Los valores Z
pueden no ser los mismos, sin embargo (Bunn y Sykes, 1980; Danielson y
Oxborrow, 1989; Hirsch y Manne, 1984). Los indicadores qumicos deben ser
utilizados como los indicadores ibiolgicos se utilizan: colocando en sitios
difciles de esterilizar en la carga del esterilizador. Tambin se pueden utilizar
en cada paquete en una carga para indicar la exposicin del producto al
proceso de esterilizacin. Aunque son de fcil uso, la interpretacin de los
resultados puede ser un poco difcil: La respuesta puede estar incompletas
cerca del punto final y el punto final puede no ser fcil de detectar.
En su capacidad para indicar el estado de la esterilidad, los indicadores
qumicos son similares a los indicadores biolgicos: Indican que slo se
alcanzaron los parmetros de esterilizacin, no es que toda la carga este
estril. Como con indicadores biolgicos, la interpretacin de los resultados
requiere el conocimiento de los datos fsicos qumicos y biolgicos para
evaluar la probabilidad de un producto no estril.
Indicadores fsicos
Indicadores fsicos de un proceso de esterilizacin adecuada deben
incluir la temperatura, presin, concentracin de gas, la pureza del vapor, la
humedad relativa, o la dosis administrada, segn sea el caso, y el tiempo de
exposicin a un conjunto especfico de condiciones. Estos parmetros pueden
ser acumulados por los sistemas automatizados, por dispositivos
electromecnicos, o por la observacin manual. Sin embargo la
instrumentacin debe estar calibrada a las normas nacionales o
internacionales. Los datos fsicos suelen ser el primer indicador de la capacidad
de un proceso de esterilizacin. Cualquier desviacin de las lecturas normales
debe ser tomado como signo de una alerta.

Cuando un proceso bien documentado tiene suficientes controles y

lecturas reproducibles, el proceso no necesita ser monitoreado con indicadores
biolgicos o indicadores qumicos. La carga de un proceso bien documentado
puede ser liberada con solo los datos de los parmetros fsicos. Cada vez ms,
hay procesos que cumplen estos los criterios.
Estudios de eficacia para esterilizacin y agentes esporicida
Estas pruebas han sido especificados por la Asociacin de Qumicos Analticos
Oficiales (AOAC, 1996). Ha habido muchas crticas en relacin con la
adecuacin de la prueba, algunos de los cuales estn bien fundados. Esta
prueba, sin embargo, se considera la prueba de referencia por el cual todos los
nuevos esporicidas o los procesos de esterilizacin son desafiados y evaluado.
Una de las mayores preocupaciones relacionadas con esta prueba es la
variabilidad e inconsistencia de los resultados. Existen varias razones obvias
para las inconsistencias. La prueba se realiza utilizando penicilindros de
porcelana, acero inoxidable, o de vidrio como portadores para las esporas
(Ascenzi et al, 1985;. Cole et al, 1987.). Los diferentes materiales retiene a los
diversos organismos de la prueba a diferentes niveles y, por consiguiente, el
efecto de esterilizacin para un desinfectante especfico es diferente.
Es necesario evaluar la actividad esporicida en superficies de preferencia
en superficies que se encuentran en los centros de salud. La inactivacin de los
contaminantes sobre superficies (instrumentos y equipos y la instalacin) es
donde se presenta el desafo no en los microorganismos suspendidos en un
lquido.
Al cargar de esporas un portador y luego sumergindolo en un caldo de
cultivo ofrece una gran oportunidad para la variacin entre los portadores de la
misma materia, en particular de una prueba a otra. Tiene un efecto el medio de
crecimiento, la cantidad de expoliacin, el grado de limpieza de las esporas,.
Danielson y Oxborrow (1989) encontraron diferencias significativas entre las
curvas de supervivencia valores D cuando se prepararon suspensiones de
esporas de B. subtilis limpias con diferentes medios de crecimiento, a pesar de
que las suspensiones de esporas pasaron el criterio de resistencia HC1.
Variabilidad de efecto esporicida se ve agravada por el crecimiento de
residuos medianos en las esporas y se agrava ms por el grado de desecacin
despus de la inoculacin; si el portador inoculado es desecado, mayor ser la
resistencia al esporicida.
Mantener la esterilidad (PACKAGING)
Independientemente del nivel de garanta de esterilidad en la conclusin
del proceso de esterilizacin, el producto esterilizado puede contaminarse si el
envase es insuficiente o defectuosa. Placencia et al. (1986a) desarrollo pruebas
para evaluar la integridad de la biobarrera de envases mdicos para garantizar

que los materiales utilizados mantendrn la esterilidad del producto. La

mayora de fabricantes de envoltorios grado mdico aseguran que el material
de envasado del producto se mantendr estril, siempre y cuando la integridad
del envase no haya sido violada; es necesario garantizar que los materiales son
adecuados para su aplicacin (Stellon, 1986; ANSI / AAMI / ISO 11.607 a 1997).
CONCLUSIN
Los procesos de esterilizacin son cada vez ms sofisticados as como el
conocimiento en relacin con el control y seguimiento de estos procesos. Las
presentes normas de control de proceso utilizando sistemas fsicos, qumicos y
biolgicos proporciona el nivel de garanta de esterilidad se espera para el
producto esterilizado. Monografas detallan el nivel de garanta de esterilidad
necesaria para satisfacer a una agencia reguladora.
Las pruebas de esterilidad es el estndar utilizado para la liberacin de
productos. Es probable que siga sindolo durante algn tiempo. Nuevos
procedimientos y las modificaciones de los procedimientos existentes se estn
desarrollando y evaluando constantemente, pero las pruebas bsicas no van a
cambiar en el corto plazo. Las revisiones de la USP se llevan a cabo segn las
necesidades, y la versin actual debe revisados antes se intenta cumplir con
la USP.
La aplicacin de pruebas USP a un producto especfico puede requerir la
modificacin de la prueba para dar cabida a las caractersticas nicas de un
producto. El proceso de validacin de esterilizacin de validcin se ha
convertido en el estndar para la industria de productos mdicos. La seleccin
de un proceso de validacin debe ser adaptado al nivel seguridad de
esterilidad aceptable para el producto especfico:
El uso de indicadores biolgicos para la calificacin, validacin y
seguimiento de los procesos de esterilizacin es necesaria para garantizar que
el proceso produce muertes biolgica. La cintica de muerte de indicadores
biolgicos son especficos para cada proceso, y los indicadores biolgicos
expuestos a procesar parmetros distintos a los que estn calibrados no
podrn desempearse adecuadamente. Los equipos, procedimientos de
produccin las pruebas de resistencia de los indicadores biolgicos se estn, lo
que permite el refinamiento en el control y la medicin de la respuesta de un
indicador biolgico. La USP y AAMI proporcionan normas que dan orientacin
para la mejora de los procesos de esterilizacin.
Los indicadores qumicos son cada vez ms especficos para el parmetro
crtico de los procesos de esterilizacin. Pueden ser utilizados para indicar la
uniformidad delos parmetros de proceso, y su uso puede ayudar en la
interpretacin de la aceptabilidad de un proceso. Aunque los indicadores
monitorean la presencia de un solo parmetro, que garantizan que el producto

ha pasado por el proceso. Las mejoras en la respuesta mejorarn su

aceptacin.
La aplicacin de los esterilizantes y esporicidas es cada vez ms importante
para los centros de salud como los nuevos materiales se utilizan en nuevos y
ms complicados productos que no pueden ser procesados por los mtodos
habituales. Los esterilizantes y esporicidas, y las formas especficas de su
aplicacin, encontrarn un uso limitado, pero no van a desplazar a los mtodos
habituales de esterilizacin.
Las pruebas de esporicidas es probable que mejoren debido al creciente inters
mostrado por la FDA y por la Agencia de Proteccin del Medio Ambiente sobre
su eficacia.
SIGLAS Y ABREVIATURAS
Bis Indicadores biolgicos
CFR Cdigo de Regulaciones Federales
IC Indicadores Qumicos
FTM Medio tioglicolato liquido
SAL NIVEL de seguridad de esterilidad
SCD caldo digerido de casena soya