Thme 1 TS Sp Energie et cellule vivante eucaryote

Activit 3 : La phase photo-chimique de la photosynthse

Thme
1
Sp

Comptences
travailles

Notions construire
La cellule chlorophyllienne des vgtaux verts
effectue la photosynthse grce l'nergie
lumineuse. Le chloroplaste est l'organite cl de cette
fonction. La phase photochimique produit des
composs rduits RH2 et de l'ATP.

Capacits

Attitudes

Faire preuve
dautonomie, de curiosit

Elaborer et Suivre un protocole

Raliser une prparation
microscopique
Utiliser une chaine de montage
Exao
Suivre une dmarche scientifique

A partir des documents proposs et vos connaissances, mettre en vidence que la phase photochimique de
la photosynthse correspond une photo-oxydation de leau avec production de composs rduits et dATP
au niveau des chloroplastes.
Document 1 : Observation de chloroplastes dlodes au microscope optique et sa schmatisation

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Document 2 : Observation de chloroplastes au microscope lectronique

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Document 3 : Mise en vidence de dgagement de dioxygne par llode en prsence de lumire par Exao

Principe : La cuve du bioracteur est remplie de fragments de feuilles d'lode en

prsence d'hygrognocarbonate de sodium (source de carbone).
On effectue une squence obscurit / lumire / obscurit, en mesurant la
concentration en oxygne du milieu.
Interprtations :
Photosynthse brute (PB) = dioxygne produit par la photosynthse
Respiration (R) = dioxygne consomm par la respiration
Photosynthse nette (PN) = dioxygne produit rellement
PN = PB - valeur absolue (R)
Document 4 : La photolyse de leau au niveau thylakode des chloroplastes

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Document 5 : Extraction de chloroplastes dpinards

Peser 10 g de limbes de feuilles propres et fraches d'pinard (2 grandes feuilles) puis dcouper les limbes en morceaux dans un
mortier pralablement plac au rfrigrateur (on vite ainsi une dgradation des enzymes ncessaires aux ractions).
Ajouter 3 mL de tampon tris-saccharose pH = 10,5 et commencer broyer avec un peu de sable
Ajouter 25 mL de solution tampon phosphate saccharose (pH = 6,5) et continuer broyer avec un peu de sable pendant au moins
2 minutes.
Filtrer le broyat obtenu sur gaze (3 4 paisseurs) et coton hydrophile afin de recueillir une quantit suffisante de filtrat (presser si
ncessaire).
Conserver la solution de chloroplastes lobscurit dans un erlenmeyer.
Contrler au microscope optique la prsence de chloroplastes libres et l'absence de cellules foliaires intactes.
Document 6 : Aide au Protocole permettant de vrifier la ncessit d'un accepteur d'lectrons lors de la phase
photochimique de la photosynthse.
Dans les conditions physiologiques, laccepteur dlectrons not R, situ dans les thylakodes, est rduit en RH2 : il accepte les
lectrons provenant de la photolyse de leau. Lors du broyage de cellules de feuilles les membranes des chloroplastes sont brises,
le contenu du stroma est dilu dans la solution et les membranes des hyalodes restent intactes, la quantit daccepteur naturel R
prsente dans le filtrat rcupr est trs donc trs souvent insuffisante. On peut utiliser alors un accepteur dlectrons comme le
ractif de Hill (Solution de potassium hexacyanoferrate K 3Fe(CN)6 ou potassium ferricyanure 0,2M soit 64,5 g/l) ou chlorure ferrique
(FeCl3 50g/l) ou Dichloro 2.6 phnolindophnol (DCPIP 1,59g/l).
Document 7 : Les expriences de Hill (1937)
http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/Photosynthese/exp44.html
http://blinks.free.fr/dossier_specialite/metabolisme/decouvrir/hill/protocole-reactiondeHill.pdf
Document 8 : Les conditions de la synthse dATP par une suspension de chloroplastes
On ralise une srie d'expriences, dont les rsultats sont prsents dans le tableau ci-dessous, sur des solutions de chloroplastes.
Des chloroplastes intacts, extraits de cellules, sont placs dans quatre milieux dont les conditions (composition et clairement)
diffrent d'une exprience l'autre. On prpare galement un milieu sans chloroplastes. Dans chaque milieu, on cherche mettre
en vidence aprs quelques minutes la formation d'ATP.

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Document 9 : La synthse de molcules nergtiques dATP

On note dans le stroma, suite aux ractions prcdentes, laugmentation de la concentration dune molcule : lATP (Adnosine Tri
Phosphate) dans certaines conditions.

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