Metodo de Calculo AFEX

Producci
on de Bioetanol:
Pretratamiento del Maz
Procesos de Separaci
on I
Primavera 2008
Mexico D.F., 14 de mayo de 2008
Alumnos:
Ana Sofa Amor Mendiola

hakenntnis@hotmail.com
Omar Fernando Cruz Correa
awdseth@hotmail.com
Francisco Jose Guerra Millan
fjguerra@mac.com
Asesor:
M.B. Lorena L. Pedraza Segura

lorena.pedraza@uia.mx
Dr. Ruben Cesar Vasquez Medrano
ruben.vasquez@uia.mx
Resumen
El pretratamiento para el maz, previo a la hidr
olisis de celulosa, permite que los rendimientos aumenten de menos del 20 % a valores mayores
al 90 %. El presente trabajo muestra una caracterizaci
on del olote proveniente del maz Zea mays y sienta las bases para estudios complementarios,
como lo son la correcta selecci
on de dicho pretratamiento. Los resultados
obtenidos son el punto de partida para la selecci
on adecuada de un pretratamiento y probablemente el estudio del mismo, podra ser tema suficiente
para m
as de un proyecto. A lo largo del trabajo se determin
o que s
olo el
10 % en peso de una mazorca de maz es u
til para la producci
on de etanol.
Asimismo, se obtuvo una composici
on preliminar que indica la presencia
de 4 % de glucosa, 26 % de lignina y 19 % de xilosa. A lo largo del reporte
se presenta un an
alisis detallado de los procesos realizados.
Universidad Iberoamericana
on I, Primavera 2008
Indice
1. Objetivos
2. Introducci
on
3. Antecedentes
3.1. Dependencia del petroleo . . . . .
3.2. En cifras . . . . . . . . . . . . . . .
3.3. Proyecciones a futuro . . . . . . . .
3.3.1. Demanda prevista de etanol
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4. Marco Te
orico
4
5
5
5
6
6
5. Procedimiento Experimental
5.1. Balance de masa . . . . . . . . . .
5.2. Tama
no de partcula . . . . . . . .
5.3. Composici
on del olote . . . . . . .
5.3.1. Curvas est
andar . . . . . .
5.3.2. An
alisis de la concentracion
5.3.3. An
alisis de carbohidratos .
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de lignina
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9
11
11
12
12
12
12
6. Resultados y An
alisis
6.1. Procedimientos Previos . .
6.1.1. Balance de masa . .
6.1.2. Tama
no de partcula
6.2. HPLC . . . . . . . . . . . .
6.2.1. Curvas est
andar . .
6.2.2. Muestra de olote . .
6.3. Espectro UV . . . . . . . .
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13
13
13
13
14
14
18
18
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7. Recomendaciones a Futuro
26
8. Conclusiones
26
A. Ejemplo de c
alculos
31
B. C
odigos de Matlab utilizados
34
B.1. Distribuci
on de tama
no de partcula . . . . . . . . . . . . . . . . 34
B.2. Curvas est
andar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
B.3. Espectros UV . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra
1.
Objetivos
Realizar un estudio sobre la composicion del maz para su caracterizacion
y posterior estudio.
Hidrolizar la celulosa obtenida del maz para la posterior produccion de
bioetanol.
2.
Introducci
on
El mundo encara el agotamiento progresivo de sus recursos energeticos basados mayoritariamente en combustibles no renovables y, al mismo tiempo, el
consumo de energa aumenta a ritmos cada vez mayores. Por otro lado, el consumo global de combustibles genera enormes cantidades de gases contaminantes
que son liberados a la atm
osfera, causando cambios significativos en el clima
del planeta, por lo que se ha convertido en una de las problematicas que mas
preocupan a los gobiernos, las comunidades y la opinion p
ublica en general [7].
La u
nica forma de encarar esta problematica es mediante recursos energeticos
renovables. Para ello, la biotecnologa ofrece m
ultiples alternativas tecnologicas.
Una soluci
on renovable es el uso de energa solar en forma de biomasa, la cual
est
a representada en los materiales lignocelulosicos y los cultivos de plantas ricas en energa. La utilizaci
on de biomasa lleva consigo una disminucion de la
contaminaci
on atmosferica: Las emisiones de CO2 generadas por la produccion
y uso de biocombustibles son compensadas por la absorcion de CO2 durante el
crecimiento de las plantas y de otros materiales vegetales, a partir de los cuales
dichos combustibles se producen. Una hectarea de cultivos ricos en energa usada para la producci
on de biocombustibles lquidos (bioetanol, biodiesel) puede
evitar la emisi
on de 0.2-2.0 t de carbono a la atmosfera en comparacion con el
empleo de combustibles f
osiles.
Para un pas como los EEUU, la produccion masiva de biocombustibles representara el regreso de dinero y puestos de trabajo a la economa, sin mencionar que el desarrollo de cultivos energeticos implicara un impulso al sector
rural [26]. Este argumento es a
un mas valido para la mayora de los pases latinoamericanos, y para Mexico por supuesto, considerando la perspectiva de una
reducci
on de las reservas comprobadas de petroleo en un plazo de 5-10 a
nos.
Una parte importante del PIB de cada pas tendra que destinarse a la compra de petr
oleo cuya perspectiva de precios es muy incierta, a lo que hay que
agregar la feroz competencia que encaran los productos agrcolas de los pases
latinoamericanos frente a los enormes subsidios destinados al sector primario
por los pases desarrollados. Por ello es de importancia estrategica la diversificaci
on de la agricultura a traves de cultivos ricos en energa (ca
na de az
ucar,
palma africana, sorgo, maz y yuca, entre otros).
El biocombustible m
as importante y con mas aplicaciones en la actualidad
es el alcohol carburante, o bioetanol (etanol, BioEtOH), un alcohol producido
a partir de la fermentaci
on de los az
ucares que se encuentran en la remolacha, maz, cebada, trigo, ca
na de az
ucar, sorgo u otros cultivos energeticos, que
mezclado con la gasolina produce un biocombustible de alto poder energetico
con caractersticas muy similares a la gasolina pero con una importante reducci
on de las emisiones contaminantes en los motores tradicionales de combustion.
El BioEtOH se obtiene a partir de la ca
na de az
ucar en pases tropicales como Brasil e India, a partir de melazas de remolacha azucarera en algunos pases
europeos como Francia, y a partir de almidon [20] en los EEUU. Sin embargo,
en el caso particular de Mexico no es posible utilizar ninguna de estas materias
primas debido a problemas gubernamentales con los consorcios azucareros y a
que el maz es la base de la alimentacion de la mayor parte de la poblacion
nacional. Es por esto que se ha pensado en materias primas alternativas que
puedan ser utilizadas como biomasa lignocelulosica como el olote por ejemplo,
que en la actualidad est
a siendo desechado o utilizado como forraje con poco o
nulo beneficio econ
omico para los productores de maz. Ademas, esta biomasa
es un recurso que puede ser procesado de diferentes formas para la obtencion
de una gran variedad de productos ademas del BioEtOH como gas de sntesis,
metanol, hidr
ogeno y electricidad [4].
La localizaci
on del cultivo, las condiciones climaticas y el fenotipo juegan un
papel muy importante en la variacion de la composicion de la biomasa en cuanto
a su contenido de celulosa, hemicelulosa y lignina, siendo lo mas importante el
contenido de lignina, ya que esta no puede ser consumida por las levaduras
productoras de etanol y debe ser retirada del olote por medios fisicoqumicos.
Al no contar con amplios estudios previos relativos a la utilizacion del olote de
maz producido en Mexico como materia prima en la produccion de bioetanol, es
necesario partir de caracterizar la composicion del olote mexicano para conocer
la factibilidad de su utilizacion como fuente de carbono para un cultivo de
levaduras productoras de etanol. Es, por lo tanto, la intencion u objetivo de
este proyecto dar el primer paso hacia la posible utilizacion del olote de maz
mexicano en un proceso de produccion de bioetanol.
3.
Antecedentes
Actualmente, pases como Brasil, Canada y Estados Unidos presentan un

desarrollo muy importante en cuanto a la produccion de etanol se refiere. Si
bien el etanol es una solucion paliativa para nuestro problema, el estudio de
su producci
on representa un reto importante para las tecnologas del futuro.
El etanol puede utilizarse como combustible para automoviles en forma pura
o mezclado con gasolina en cantidades variables. El combustible resultante se
conoce como gasohol o alconafta. Dos mezclas comunes son E10 y E85, que
contienen el etanol al 10 % y al 85 %, respectivamente. El bioetanol se perfila
como un recurso energetico potencialmente sostenible que puede ofrecer ventajas

medioambientales y econ
omicas a largo plazo. Sin embargo, los metodos actuales
de producci
on requieren una cantidad significativa de energa en comparacion
al valor de la energa del combustible producido. Por esta razon, todava no
es factible sustituir enteramente el consumo actual de combustibles fosiles por
bioetanol.
3.1.
Dependencia del petr

oleo
Casi cualquier pas con suficiente terreno en su territorio puede producir

etanol para su uso como combustible. A diferencia del petroleo, que debe ser
extrado de unos yacimientos existentes solo en determinadas partes de la Tierra. El etanol es pues una alternativa interesante, que puede incluso ayudar
a mitigar las tensiones internacionales derivadas de la dependencia y adiccion
de algunos pases por el petroleo. En realidad todo esto depende del balance
energetico, ya que el cultivo y procesado de biocombustibles se realiza actualmente con petr
oleo.
El estudio del etanol como combustible es quiza uno de los temas mas polemicos en la actualidad, pero que a la vez representa retos gigantescos y oportunidades de negocio y desarrollo inigualables. Es muy probable que en plazos de
tiempo no demasiado largos el balance energetico mejore y el etanol se convierta
en una alternativa real a los problemas que actualmente existen respecto a los
combustibles f
osiles.
3.2.
En cifras
En 1979, poco despues del renacimiento de la industria del etanol en respuesta a la incertidumbre del suministro de peteoleo, Estados Unidos produjo
10 millones de galones de etanol en un a
no. Para el a
no 2000 esta cifra alcanz
o los 1600 millones de galones. Esto representa aproximadamente el 1.2 %
del consumo de gasolina en Estados Unidos. Muchas industrias calculan que
este porcentaje se triplicar
a en menos de una decada, excediendo los estandares federales propuestos respecto a los combustibles renovables. Desde 1980 la
producci
on de etanol ha crecido 12 % anual. Los ingresos por estas ventas han
alcanzado los 3500 millones de dolares americanos.
3.3.
Proyecciones a futuro
En 1925 Henry Ford llamo al etanol el combustible del futuro. El combustible del futuro vendr
a de las manzanas, del trigo y de casi cualquier producto
biol
ogico. Hay combustible en casi cualquier trozo de vegetal que sea fermentable. Desde el inicio de la era del automovil el etanol fue un serio contendiente
para para los combustibles utilizados. Un combustible con alto octanaje, que no
dejara dep
ositos de carbono era superior a cualquiera. David Morris, presidente del ILSR afirm
o que el etanol es un candidato superior, pero las compa
nas
petroleras no estaban interesadas en ceder el 10 % del tanque de gasolina a los
campesinos.
Cuando el flujo de petr
oleo del Medio Oriente se interrumpio en 1970, revivi
o la importancia del etanol y represento el inicio de la creacion de la industria
moderna como la conocemos actualmente. En 1980 el colapso de los precios del
petr
oleo llev
o a la mitad de los productores de etanol a la quiebra. En los a
nos
90 los productores de etanol recuperaron terreno despues de los tratados para
el mejoramiento del aire, que requeran cambios en las formulas de las gasolinas
para reducir las emisiones de monoxido de carbono.
3.3.1.
Demanda prevista de etanol
Diversas comisiones en Estados Unidos estiman que la demanda para reemplazar el MTBE en s
olo en California sera de 1000 millones de galones por a
no
en 2004. En California existe una planta que produce 7.5 millones de galones de
etanol cada a
no y se preve que produzcan 46 millones de galones anuales. La
gran mayora del deficit de la demanda sera importada desde el Medio Oriente y
Brasil, lo que representa una gran oportunidad de crecimiento y desarrollo para
productores en Mexico.
4.
Marco Te
orico
El desarrollo hist
orico de la produccion de etanol por va fermentativa ha
demostrado que todos los productos que contengan az
ucares o hidratos de carbono que puedan transformarse con facilidad en az
ucares fermentables, almidon
o celulosa pueden servir como materiales de partida desde el punto de vista
te
orico, y cuyo uso pr
actico estara determinado por el rendimiento en alcohol
y por su costo. Sin embargo, la idea de producir etanol a partir de los residuos
lignocelul
osicos data de las decadas de 1940 y 1950 [25]. En el mundo se llevan
a cabo gran cantidad de estudios para desarrollar la produccion a gran escala
de alcohol a partir de biomasa lignocelulosica, y, de hecho, los materiales que
m
as se han investigado son madera, residuos forestales, papel reciclado, residuos
de la industria papelera, bagazo de ca
na y desechos agrcolas as como residuos
s
olidos urbanos.
A este respecto cabe mencionar que diversas investigaciones han estimado
un valor aproximado de 6 a la relacion salida-entrada de energa en el caso de
la producci
on de BioEtOH a partir de biomasa [1]; lo cual significa que existe
una relaci
on positiva de 6 a uno entre la energa liberada durante la combustion
de alcohol y la energa necesaria para su produccion considerando todo el ciclo
de vida del producto desde la extraccion de las materias primas y los insumos
requeridos, pasando por su transporte, hasta el proceso de transformacion a
bioetanol. Lo anterior hace a esta materia prima muy atractiva, en especial en
pases que no cuentan con la facilidad de producir grandes cantidades de ca
na
de az
ucar.
Diversos autores han coincidido en clasificar las materias primas para obtener
alcohol por va fermentativa en tres clases:
Materias Azucaradas (Sustancias sacarinas)
Materias Amil
aceas (Sustancias feculantes)
Materias Celul
osicas
En lo que se refiere a las materias celulosicas, que son las de interes en el
desarrollo de este proyecto, se sabe que el complejo lignocelulosico esta compuesto principalmente de una matriz de carbohidratos formada de celulosa y lignina
enlazada a su vez por cadenas de hemicelulosa [11]. La celulosa, como primer
componente de la biomasa, es un homopolmero lineal y cristalino, formado por
unidades de glucosa unidas por enlaces beta glucosdicos y cuya estructura es
rgida por lo que se requiere un tratamiento intenso para degradarla [9]; mientras
que, la hemicelulosa, por su parte, es un heteropolmero altamente ramificado de
D-xilosa (mayoritariamente), D-glucosa, D-galactosa, D-manosa y L-arabinosa
[24].
Con base en lo anterior, puede decirse que el principal reto en la produccion
de etanol a partir de biomasa lignocelulosica es el pretratamiento e hidrolisis
de la materia prima; Para poder liberar los az
ucares presentes en los materiales lignocelulosicos hay que someter al material a determinadas etapas, estas son:
Molido, cuya funci

on es hacer al material mas susceptible y accesible para
la etapa posterior.
Pretratamiento, cuya funcion es liberar las hemicelulosas que contiene el
material.
Hidr
olisis, cuya funci
on es liberar la glucosa presente en los materiales
lignocelul
osicos.
Fermentaci
on de las hexosas y pentosas para obtener etanol.
Separaci
on y concentracion del alcohol.
El pretratamiento tiene como objetivo desintegrar esta matriz de tal manera
que la celulosa reduzca su grado de cristalinidad y aumente la celulosa amorfa,
que es la m
as adecuada para el posterior ataque enzimatico. Adicionalmente, la
mayor parte de la hemicelulosa se hidroliza durante el pretratamiento y la lignina se libera o puede incluso descomponerse. En una etapa posterior, la celulosa
liberada es sometida a hidr
olisis enzimatica con celulasas exogenas, lo cual hace
que se obtenga una soluci
on de az
ucares fermentables que contiene principalmente glucosa, as como pentosas resultantes de la hidrolisis inicial de la hemicelulosa. Estos az
ucares son posteriormente convertidos en BioEtOH mediante
microorganismos que pueden utilizar uno o varios de los az
ucares presentes en el
material lignocelul
osico pretratado e hidrolizado. Este complejo proceso puede
ser representado por las reacciones que se muestran a continuacion.
hemicelulosa
(C6 H10 O5 )2n
pretratamiento
C5 H10 O5 + C6 H12O6 + otros az

ucares
endoglucanasas y
nC12 H22 O11 2nC6 H12 O6
celobiohidrolasas
C6 H12 O6 + S. cerevisiae
aglucosidasa
2C2 H5 OH + 2CO2
3C5 H10 O5 + Pichia stipitis 5C2 H5 OH + 5CO2

El pretratamiento permite que los rendimientos en la hidrolisis de celulosa
aumenten de menos del 20 % de los rendimientos teoricos a valores mayores al
90 % [18]. Para el pretratamiento se han propuesto y desarrollado diferentes
metodos como combinaci
on mecanica [6], explosion por vapor [10], explosion de
fibras por amoniaco (AFEX) [15], pretratamiento acido o alcalino [17] o tratamiento biol
ogico [14]. Sin embargo, ninguno de los metodos de pretratamiento
propuestos se puede aplicar en forma generica a las diferentes materias primas
[6], lo cual justifica la realizacion de analisis detallados de estas tecnologas en
cada caso en particular, y por supuesto, la realizacion de analisis detallados de
las caractersticas del material que quiere utilizarse para la produccion de BioEtOH. Pretratamientos apropiados permiten liberar la celulosa y hemicelulosa
del material de la planta. Tratamientos posteriores usando aditivos qumicos,
enzimas o microorganismos pueden ser usados para liberar los az
ucares simples
presentes en la celulosa y la hemicelulosa poniendolos entonces a disposicion
de los microorganismos para que durante la fermentacion sean convertidos en
alcohol.
Cabe mencionar que, durante el pretratamiento e hidrolisis de la biomasa
lignocelul
osica se forman, junto con los az
ucares fermentables, gran cantidad
de compuestos que pueden inhibir la fermentacion subsiguiente. Las sustancias
inhibitorias se originan como resultado de la hidrolisis de los diferentes componentes, de los
acidos org
anicos esterificados a la hemicelulosa, y de los derivados
fen
olicos solubilizados de la lignina. As mismo, los inhibidores se forman a partir de productos de degradacion de los az
ucares solubles y de la lignina [18, 22].
Por eso, y dependiendo del tipo de pretratamiento e hidrolisis utilizados, es necesario llevar a cabo la destoxificacion de las corrientes que van a ser sometidas
a fermentaci
on. Sin embargo, los alcances de este proyecto no incluyen, todava,
la consideraci
on seria de este tipo de procesos.
Posterior al pretratamiento, la celulosa liberada es degradada hasta glucosa (sacarificaci
on), lo cual puede hacerse con acidos o enzimas (celulasas). La
mayora de las celulasas comerciales son producidas a partir de Trichoderma
reesei, del cual se obtiene b
asicamente una mezcla de celobiohidrolasas y endoglucanasas [19, 27]. Las primeras hidrolizan los enlaces (1,4) de la cadena de
celulosa a partir de los extremos no reductores o reductores liberando celobiosa
o inclusive glucosa, mientras las endoglucanasas rompen estos mismos enlaces
en forma aleatoria dentro de la cadena. Las etapas de hidrolisis y fermentacion
se pueden realizar en forma secuencial (hidrolisis y fermentacion separadas, SHF
por sus siglas en ingles) o llevando a cabo en una sola unidad la hidrolisis y la
fermentaci
on al mismo tiempo (sacarificacion y fermentacion simultaneas; SSF).
El microorganismo m
as utilizado para este proceso es S. cerevisiae que fermenta las hexosas presentes en el hidrolizado mas no las pentosas. La SSF muestra
mayores rendimientos de BioEtOH y menores consumos energeticos, pero las
temperaturas de operaci
on no son optimas para la hidrolisis y se requiere de
mayores dosis de enzimas.
5.
Procedimiento Experimental
Durante los diferentes pasos de la metodologa experimental se utilizaron los

reactivos, material y equipos que se muestran en las Tablas 5.1 - 5.4 respectivamente. A lo largo de esta seccion se detalla la aplicacion concreta de cada
uno de ellos. La Figura 5.1 muestra de forma esquematica el procedimiento
experimental.
Tabla 5.1: Reactivos utilizados.
Nombre
Acido sulf
urico 72 %
Agua desionizada
Agua grado de pureza HPLC
Carbonato de calcio grado analtico
L-arabinosa
D-celobiosa
D-galactosa
D-glucosa
D-manosa
D-xilosa
Formula
H2 SO4
H2 O
H2 O
CaCO3
C5 H10 O5
C12 H22 O11
C6 H12 O6
C6 H12 O6
C6 H12 O6
C6 H12 O6
Marca
ND
ND
ND
Reproquifin
Fluka
Fluka
Sigma
Fluka
Sigma
Fluka
Tabla 5.2: Material utilizado.

Cantidad
15
7
7
7
7
Nombre
tubos de ensaye
frascos resistentes a presion
crisoles Gooch
matraces Kitasato
probetas graduadas
micropipetas
matraces aforados
papel filtro
mangueras de hule
Tabla 5.3: Equipo utilizado.

Equipo
Espectofot
ometro UV-Visible
Equipo de HPLC
Columna Biorad Aminex
con precolumna de forma ionica H+ /CO3
Autoclave
Balanza Analtica
Molino
Horno
Potenci
ometro
Agitador con ba
no de agua
Marca
HP Serie 1050
HPx-87P
AESA UV300
Blue M
New Brunswick Scientific
Tabla 5.4: Juego de cribas.

N
umero
10
12
18
24
30
35
Marca
Ouvesa
Endecotts
Ouvesa
Ouvesa
Endecotts
Ouvesa
Apertura
1.9 mm
1.7 mm
1.0 mm
0.7 mm
0.6 mm
0.5 mm
10
Figura 5.1: Diagrama esqueatico del procedimiento experimental.
5.1.
Balance de masa
Como primer punto se consiguieron ejemplares de maz mexicano Zea mays,

en la presentaci
on de mazorcas completas con hojas, se tomo nota del peso del
peso de las mazorcas completas. El maz fue deshojado y desgranado utilizando
la misma tecnica que se utilizara para cualquier aplicacion alimenticia normal,
separando los olotes del resto de los residuos y anotando su peso. Posteriormente se secaron los olotes en un horno para obtener el peso de los olotes libres
de humedad, para despues cortar y moler los olotes secos, tomando el peso en
cada uno de estos pasos. Se realizo un balance de masa para obtener la fraccion
que representan los olotes en la masa de las mazorcas como son distribuidas
comercialmente.
5.2.
Tama
no de partcula
Utilizando un sistema de cribas se determino la distribucion del tama

no de
partcula de la muestra molida. Para ello se utilizaron las cribas n
umero 10, 12,
18, 24, 30 y 35, cuyas propiedades se indican en la Tabla 5.4. El procedimiento
consiste en colocar una muestra de olote molido en la parte superior del arreglo
escogido de cribas, donde la malla superior presenta el entramado menos denso.
Con ayuda de un peque
no motor, se sacuden las cribas y finalmente se pesa
la cantidad de muestra que se quedo en cada una de las cribas. La muestra
fue sacudida durante 10 minutos. El procedimiento se realizo por duplicado,
utilizando el promedio para el analisis.
11
5.3.
Composici
on del olote
Se analiz
o la composici
on del olote en cuanto a contenido de lignina, de hemicelulosa y de seis carbohidratos importantes: arabinosa, celobiosa, galactosa,
glucosa, manosa y xilosa. Para ello fue necesario realizar las curvas estandar
para cada az
ucar.
5.3.1.
Curvas est
andar
Antes de analizar con HPLC las muestras de olote, fue necesario obtener curvas est
andar de cada uno de los seis carbohidratos analizados en este estudio.
Primero se prepar
o una solucion estandar de 2.5 g /L que fue diluyendose conse
cutivamente 1:2 con agua grado de pureza HPLC. Estas
seran las soluciones que
se analizar
an por HPLC. El porcedimiento se repitio para cada carbohidrato de
interes. Todas las muestras se analizaron por duplicado y se utilizo el promedio
para su an
alisis. Para cada carbohidrato se grafico el area obtenida del analisis
HPLC contra concentraci
on del carbohidrato expresada en g /L y se realizo una
regresi
on lineal para estos datos.
5.3.2.
An
alisis de la concentraci
on de lignina
Se pesaron por duplicado de 300 mg de cada uno de los carbohidratos de interes y de olote previamente seco y molido. Se agregaron 3 mL de acido sulf
urico
a cada muestra y se colocaron en un ba
no de agua a 30 C con agitacion durante
un periodo de una hora. Posteriormente se diluyeron las muestras para alcanzar
una concentraci
on de
acido sulf
urico de 4 %. Esto se consiguio al agregar cada
muestra a 84 mL de agua desionizada en frascos resistentes a presion. Estos
frascos se metieron al autoclave a una presion de 1 kgf /cm2 durante una hora.
Las muestras filtraron al vaco, utilizando crisoles Gooch puestos previamente
a peso constante. Los crisoles y los solidos se secaron en un horno para obtener
la cantidad de s
olidos insolubles en las muestras. Una vez concluida esta parte
se tomaron alcuotas de cada muestra para analizarlas por espectofotometra de
UV a longitudes de onda entre 200 y 400 nm.
5.3.3.
An
alisis de carbohidratos
Despues de una hora en el autoclave y de haber tomado las alcuotas para

el an
alisis de lignina, se neutralizaron las muestras con carbonato de calcio (la
columna del HPLC es de base calcio) hasta alcanzar un pH entre 5 y 6. Una
vez neutralizadas las muestras se filtran al vaco con filtro milipore para poder
analizar las muestras por HPLC. El area de los picos obtenidos sera comparada
con las curvas est
andar que se realizaron previamente para cada carbohidrato,
con el fin de determinar la concentracion de cada una de las sustancias en la
muestra de maz.
12
6.
Resultados y An
alisis
Con base en la metodologa experimental de la seccion 5 se llevaron a cabo

los mencionados experimentos. Los resultados se presentan a continuacion. Cabe
mencionar que el diagrama de la Figura 5.1 no corresponde de forma estricta
con la cronologa de los experimentos.
6.1.
Procedimientos Previos
6.1.1.
Balance de masa
La Tabla 6.1 muestra los resultados obtenidos para el balance de masa, donde
ph y ps se refieren al peso h
umedo y seco respectivamente del mz, y el olote
(olo). El * indica que dichas cantidades tuvieron que ser desechadas, debido a
la formaci
on de hongos en las muestras. Por esa razon la tabla indica valores de
ND en el caso del porcentaje de olote respecto al maz.
Tabla 6.1: Resultados del balance de masa.
1
Total
Total
phmaiz
[kg]
4.205
4.205
5.145
5.965
3.875
5.495
4.93
7.865
6.31
39.585
pholo
[kg]
1.52
1.52
%olo
[ %]
36
psolo
[kg]
0.498
0.498
24
1.1
1.035
2.135
%h olo
[ %]
33
psmolido
[kg]
0.44
0.44
%olo s
[ %]
10.46
30
ND
ND
3.575
1.14*
1.26*
3.64
9.615
Cabe destacar, que tanto la muestra 1, adquirida en Superama, como la 2,

adquirida en la Central de Abastos indican que la humedad en el olote es de
aproximadamente 30 %.
6.1.2.
Tama
no de partcula
Utilizando cribas mencionadas en la Tabla 5.4 se determino la distribucion

del tama
no de partcula. Los resultados se muestran en la Figura 6.1.
Es importante mencionar que aproximdamente el 50 % de la muestra tiene un
tama
no de partcula de entre 0.7-1.7 mm, lo que representa un tama
no adecuado
para la hidr
olisis y posterior fermentacion. Asimismo, cabe indicar que el 25 %
de la muestra es m
as fina que la malla mas densa utilizada. Es posible realizar
13
Figura 6.1: Distribuci

on porcentual de tama
no de partcula de la muestra.
un an
alisis posterior, para clasificar bien ese porcentaje tan alto, no obstante,
resulta de poco interes para los fines del proyecto. La distribucion de tama
no
de partcula se realiza con el objetivo de caracterizar un tama
no maximo, mas
no uno mnimo. Esto se debe a que las bacterias tienen dificultad con partculas
grandes.
6.2.
HPLC
Utilizando la tecnica de cromatografa lquida de alta presion o HPLC por

sus siglas en ingles es posible calcular el porcentaje de cada carbohidrato en la
muestra de olote. No obstante, es necesario realizar curvas estandar para cada
carbohidrato previamente.
6.2.1.
Curvas est
andar
Como se mencion
o en la seccion 5 se realizaron curvas estandar para seis
diferentes carbohidratos. Las Figuras 6.2 - 6.7 muestran los resultados obtenidos. Las muestras se realizaron por duplicado, pero las graficas se construyeron
utilizando el promedio de ambas.
Como se observa en las Figuras 6.2 - 6.7, los ajustes a una lnea recta practicamente no presentan desviaciones para la mayora de los puntos. Con base en la
ecuaci
on obtenida para cada carbohidrato y utilizando el area del pico obtenido
en el HPLC es posible determinar la concentracion de una muestra desconocida.
14
Figura 6.2: Curva est

andar para determinar la concentracion de arabinosa.

andar para determinar la concentracion de celobiosa.
15

andar para determinar la concentracion de galactosa.

andar para determinar la concentracion de glucosa.
16

andar para determinar la concentracion de manosa.

andar para determinar la concentracion de xilosa.
17
6.2.2.
Muestra de olote
Para determinar los porcentajes de dichos carbohidratos en el olote se realizo una

muestra con el olote diluido. La muestra de olote solo presento dos picos, con
lo que se concluye s
olo para dos de los carbohidratos. Los resultados, obtenidos
con los c
alculos que se muestran en el Apendice A se presentan en la Tabla 6.2.
Tabla 6.2: Carbohidratos en el olote.
Carbohidrato
Glucosa
Xilosa
Cantidad
4%
19 %
La ausencia de picos para el resto de los carbohidratos indica un pretrata

miento no
optimo para el tipo de maz estudiado. Unicamente
dos carbohidratos
fueron liberados del entramado en que se encuentran del olote. De ah la importancia de estudiar y caracterizar el maz para poder escoger los pasos previos a
la hidr
olisis de forma
optima.
6.3.
Espectro UV
Con base en los espectros UV fue posible determinar el porcentaje de lignina en la muestra de olote. Los espectros para los carbohidratos de la Tabla
5.1 se muestran en las Figuras 6.8 - 6.19. Las Figuras 6.20 - 6.21 muestran los
espectros para el olote.
Con base en los c
alculos que se muestran en el Apendice A es posible obtener
el porcentaje de lignina en la muestra de olote. El resultado se indica en la Tabla
6.3.
Tabla 6.3: Lignina en el olote.

Compuesto
Lignina
Cantidad
26 %
El valor mostrado en la Tabla 6.3 coincide con los sugeridos en la literatura,

lo que brinda certeza al procedimiento llevado a cabo. La aparicion de picos no
esperados abren el camino para futuros estudios y analisis.
18
Figura 6.8: Espectro UV para la L-arabinosa. Maximo: =277.0, Abs=0.279
Figura 6.9: Espectro UV para la L-arabinosa. Maximo: =277.0, Abs=0.448
19
Figura 6.10: Espectro UV para la D-celobiosa. Maximo: =284.9, Abs=1.619
Figura 6.11: Espectro UV para la D-celobiosa. Maximo: =282.9, Abs=2.343
20
Figura 6.12: Espectro UV para la D-galactosa. Maximo: =284.9, Abs=1.711
Figura 6.13: Espectro UV para la D-galactosa. Maximo: =282.9, Abs=2.618
21
Figura 6.14: Espectro UV para la D-glucosa. Maximo: =284.9, Abs=1.262
Figura 6.15: Espectro UV para la D-glucosa. Maximo: =284.0, Abs=2.577
22
Figura 6.16: Espectro UV para la D-manosa. Maximo: =283.1, Abs=2.101
Figura 6.17: Espectro UV para la D-manosa. Maximo: =282.0, Abs=3.206
23
Figura 6.18: Espectro UV para la D-xilosa. Maximo: =277.9, Abs=0.495
Figura 6.19: Espectro UV para la D-xilosa. Maximo: =277.0, Abs=0.928
24
Figura 6.20: Espectro UV para el olote. Maximo: =282.0, Abs=0.644
Figura 6.21: Espectro UV para el olote. Maximo: =281.1, Abs=0.812
25
7.
Recomendaciones a Futuro
Si bien los resultados mostrados en el presente trabajo son satisfactorios, la

naturaleza propia del mismo impide que sea un trabajo integral y auto-suficiente.
Por este motivo se plantean las recomendaciones a futuro, tanto para mejorar
etapas experimentales y fortalecer la confiabilidad de los resultados, como para
sugerir pasos a realizar, con el afan de complementar y ampliar lo estudiado.
Como se observa en la Figura 6.1, el 25 % de la muestra presenta un tama
no
de partcula menor a la aperura de la u
ltima criba utilizada. Si bien este hecho
no afecta la digesti
on del olote por las bacterias, podra ser interesante realizar
un estudio m
as minucioso con esa muestra para segmentar finamente esa seccion.
Como se mencion
o, no fue posible detectar todos los carbohidratos de la
Tabla 5.1 en la muestra de olote. Esto puede deberse a una pobre liberacion de
los mismos. Se sugiere revisar distintos procedimientos para mejorar el efecto
de dicho pretratamiento y poder completar la caracterizacion con los az
ucares
faltantes.
Con base en los resultados obtenidos es posible determinar el pretratamiento
ptimo para el maz Zea mayz. De acuerdo a lo propuesto en la literatura, se
o
sugiere que el metodo conocido como AFEX sera el mas adecuado. No obstante es necesario realizar estudios comparativos con los otros metodos para
fundamentar dicho supuesto.
8.
Conclusiones
La posibilidad de obtener una fuente renovable de energa de facil acceso,

segura y efectiva es una de las metas que se buscan con mas premura en la
sociedad actual.
El alcohol etlico obtenido por metodos biotecnologicos constituye actualmente una importante alternativa frente a los combustibles fosiles, no por el
hecho de que no emita CO2 , sino porque su balance global de dioxido de carbono es favorable a la atm
osfera. Sin embargo, los costos de produccion del
etanol a partir de biomasa lignocelulosica siguen siendo elevados, razon por la
cual se siguen llevando a cabo estudios en centros de investigacion de diferentes
pases, adelantando estudios con miras a disminuir estos costos.
Asimismo, cabe recordar, que en el caso del etanol obtenido a traves de
maiz, el balance energetico es desfavorable. Es decir, se requiere mas energa
para producir el combustible, que la que otorga el mismo. Por ello actualmente los usos del biocombstible se restringen a mezclas de gasolina con etanol en
distintos porcentajes.
26
El empleo del bioetanol a nivel global requiere que la tecnologa de su obtenci

on a partir de biomasa sea desarrollada por completo. Esta necesidad de
desarrollo es mucho m
as perentoria para aquellos pases que, como los de Europa
o Amrica del Norte, no poseen las condiciones agroecologicas requeridas para el
cultivo de especies ricas en az
ucares como la ca
na, o simplemente no poseen los
medios para transformar cultivos como el maz en combustible.
Si bien en Mexico los estudios que se realizan para produccion de bioetanol
son primordialmente con base en maz, el consumo del olote para la producci
on de combustibles no representa una amenaza al sector alimentario. Es bien
sabido que en las u
ltimas decadas Mexico ha dejado de ser auto-suficiente en
cuesti
on de consumo de maz, y si bien el desarrollar tecnologas con base en
dicho alimento resulta una afirmacion paradogica, no lo es, pues los estudios se
basan precisamente en los desechos, el olote.
Es importante mencionar que en los procesos estudiados y desarrollados hasta la fecha se considera principalmente la utilizacin de la fraccion celulosica de
las materias primas, habiendo un uso incompleto, de poco valor agregado a los
otros constituyentes de dicho recurso, como lo son las pentosas, protenas, resinas y lignina. Esto resulta improductivo si se considera que las pentosas pueden
utilizarse como sustrato para ciertos microorganismos capaces de transformarlas en etanol, y la lignina, por su parte, puede utilizarse para la formulacion de
adhesivos y lubricantes entre otros.
Algo que se ha se
nalado como desventaja del tratamiento de los residuos
lignocelul
osicos para la produccion de etanol es su biodegradabilidad. La biodegradaci
on de un material lignocelulosico no tratado es muy lenta y a la vez
la extensi
on de la degradacion es baja. Esto impide desarrollar procesos de
hidr
olisis econ
omicamente factibles. Para incrementar la reactividad del material existen metodos que permiten modificar y reducir la naturaleza recalcitrante
del material lignocelul
osico, dejando un sustrato mas apto para una hidrolisis
acida o enzim
atica.
En relaci
on a la etapa de hidrolisis, posterior al pretratamiento, es posible
identificar los siguientes par
ametros claves que inciden en la economa del proceso: rendimiento de az
ucares fermentables, concentracion de az
ucares fermentables, tiempo de reacci
on, concentracion de acido sulf
urico requerida y tama
no
de partculas requerido.
El presente trabajo muestra una caracterizacion del olote proveniente del
maz Zea mays y si bien carece de independencia y auto-suficiencia para llevar
a acabo los procesos de pretratamiento para el maz, sienta las bases para estudios complementarios. Los resultados obtenidos son el punto de partida para la
selecci
on adecuada de un pretratamiento y probablemente el estudio del mismo,
podra ser tema suficiente para mas de un proyecto.
27
Los resultados son satisfactorios y con base en el alcance del proyecto se

puede consider que los objetivos se alcanzaron exitosamente. No obstante, como
se mencion
o, el presente trabajo es solo el principio para inroducirse en un mundo entero por descubrir. El reto del Ingeniero Qumico no esta en desarrollar
nuevos procesos, sino en optimizar los ya existentes y en el caso concreto de la
producci
on de etanol base maz, uno de los principales obstaculos a superar el
el balance energetico, que actualmente es desfavorable.
Una buena dosis de imaginacion, en combinacion con la teora y la practica
ser
an la clave del exito y un futuro prospero para la humanidad.
Logic will get you from A to B.

Imagination will take you everywhere.
- A. Einstein
28
Referencias
[1] C Berg. World fuel ethanol. analysis and outlook.
http://www.agra-europe.co.uk/FOLstudies/FOL-Spec04.html, May 2001.
[2] C Berg. World fuel ethanol. analysis and outlook.
http://www.distill.com/World-Fuel-Ethanol-A&O-2004.html, 2004.
[3] Magnus Bertilsson. Simultaneous saccharification and fermentation of spruce a comparison of pretreatment conditions and different enzyme preparations. February 2007.
[4] H L Chum and R P Overend. Biomass and renewable fuels. Fuel Process.
Technol., 71:187195, 2001.
[5] Shishir P.S. Chundawat, Balan Venkatesh, and Bruce E. Dale. Effect of
particle size based separation of milled corn stover on afex pretreatment
and enzymatic digestibility. Biotechnol. Bioeng., 96(2):219223, February
2007.
[6] P A M Claassen, J B van Lier, A M Lopez-Contreras, E W J van Niel,
L Sijtsma, A J M Stams, S S de Vries, and R A Weusthuis. Utilisation
of biomass for the supply of energy carriers. Appl. Microbiol. Biotechnol.,
52(741-755), 1999.
[7] Federacin Nacional de Biocombustibles. Abc de los alcoholes carburantes.
http://www.minminas.gov.co, May 2008.
[8] J. R. Ferrer, G. Pez, L. Arenas de Moreno, C. Chandler, and Z. Mrmol
andL. Sandoval. Cintica de la hidrlisis cida de bagacillo de caa de azcar.
2001.
[9] A Gray, L Zhao, and M Emptage. Bioethanol. Curr. Opin. Chem. Biol.,
10:141146, 2006.
Saddler. Factors affecting cellulose hydrolisis and the
[10] D J Gregg and JN
potential of enzyme recycle to enhance the efficiency of an integrated wood
to ethanol process. Biotechnol. Bioeng., 51:375383, 1996.
[11] M Hayn, R Klinger, and H Esterbauer. Isolation and partial characterization of a low molecular weight endoglucanase from Trichoderma reesi. Helsinki Foundation for Biotechnical and Industrial Fermentation Research,
1993.
[12] Jason Hill, Erik Nelson, David Tilman, Stephen Polasky, and Douglas Tiffany. Environmental, economic, and energetic costs and benefits of biodiesel
and ethanol biofuels. PNAS, 103(30):1120611210, July 2006.
[13] Eva-Lena Jakobsson. Optimization of the pretreatment of wheat straw for
production of bioethanol. 2002.
29
[14] F A Keller, J E Hamillton, and Q A Nguyen. Microbial pretreatment of

biomass: potential for reducing severity of thermochemical biomass pretreatment. Appl. Biochem. Biotechnol., 105-108:2741, 2003.
[15] H T Kim, J S Kim, C Sunwoo, and Y Y Lee. Pretreatment of corn stover
by aqueous ammonia. Biores. Technol., 90:3947, 2003.
[16] Michael Knauf and Mohammed Moniruzzaman. Lignocellulosic biomass
processing: A perspective. International Sugar Journal, 106(1263):147150,
2004.
[17] R C Kuhad, A Singh, and K E Ericksson. Microorganisms and enzymes
involved in the degradation of plant fiber cell walls. Adv. Biochem. Eng.
Biotechnol., 57(45-125), 1997.
[18] L R Lynd. Overview and evaluation of fuel ethanol from cellulosic biomass:
Technology, economics, the environment, and policy. Annu. Rev. Energy
Environ., 21(403-465), 1996.
[19] L R Lynd, P J Weimer, W H van Zyl, and I S Pretorious. Microbial cellulose
utilization: Fundamentals and biotechnology. Microbiol. Mol. Biol., 66:506
577, 2002.
[20] P W Madson and D A Monceaux. The Alcohol Textbook. Nottingham
University Press, Nottingham, UK, 1995.
[21] Hannah K. Murnen, Venkatesh Balan, Shishir P. S. Chundawat, Bryan Bals,
Leonardo da Costa Sousa, and Bruce E. Dale. Optimization of ammonia
fiber expansion (afex) pretreatment and enzymatic hydrolysis of miscanthus
x giganteus to fermentable sugars. Biotechnol. Prog., 23(4):846850, 2007.
[22] E Palmqvist and B Hahn-Hagerdal. Fermentation of lignocellulosic hydrolysates. Bioresource. Technol., 74:2533, 2000.
[23] L. P. Ramos, S. T. Carpes, F. T. Silva, and J. L. M. Ganter. Comparison
of the susceptibility of two hardwood species, mimosa scabrella benth and
eucalyptus viminalis labill, to steam explosion and enzymatic hydrolysis.
1999.
[24] B C Saha, L B Iten, M A Cotta, and Wu Y V. Dilute acid pretreatment, enzimatic saccharification and fermentation of wheat straw to ethanol. Proc.
Biochem., 40:36933700, 2005.
[25] J Sheehan, A Aden, K Paustian, K Killian, J Brenner, M Walsh, and RNelson. Energy and environmental aspects of using corn stover for fuel ethanol.
J. Ind. Ecol., 7:117146, 2003.
[26] J Sheehan and M Himmel. Enzymes, energy, and the environment: A strategic perspective on the u.s. department of energys research and development
activities for bioethanol. Biotechnol. Prog., 15:817827, 1999.
30
[27] Y H P Zhang and L R Lynd. Toward an aggregated understanding of enzymatic hydrolysis of cellulose: Noncomplexed cellulose systems. Biotechnol.
Bioeng., 8:797882, 2004.
[28] Yizhou Zheng, H.-M. Lin, and George T. Tsao. Pretreatment for cellulose
hydrolysis by carbon dioxide explosion. Biotechnol. Prog., 14(6):890896,
1998.
31
A.
Ejemplo de c
alculos
Porcentaje de olote en el maz
Peso hmedo del olote

1.52 kg
x100 =
*100 = 36%
Peso hmedo del maz completo
4.205 kg
Porcentaje de humedad en el olote
Peso seco del olote

0.498 kg
x100 =
*100 = 33%
Peso hmedo del olote
1.52 kg
Prdidas en la molienda
" Peso seco del olote molido
%
" 0.44 kg
%
100 ! $
x100 ' = 100 ! $
*100 ' = 12%
Peso seco del olote
#
&
# 0.498 kg
&
Porcentaje de olote seco en el maz
Peso seco del olote molido

0.44 kg
x100 =
*100 = 10%
Peso hmedo del maz completo
4.205 kg
Slidos insolubles en el olote
Peso slidos = PesoGooch con slidos ! Peso Gooch = 12.7323g ! 12.6236 g

Peso slidos = 0.1087 g
Peso seco de muestra (Oven Dry Weight)
ODW = 0.3g
Porcentaje de residuos insolubles en cido (%AIR)
Peso slidos in sol ubles

0.1087 g
x100 =
*100
ODW
0.3g
%AIR = 36.23%
%AIR =
Porcentaje de cenizas
%Ash = 10%
32
Porcentaje de lignina insoluble en cido
%AIL = %AIR ! %Ash = 36.23% ! 10%

%AIL = 26.23%
Absortividad
mL
! = 30
mg
Dilucin
Dilucin =
1
= 0.05
20
Volumen filtrado
V filtrado = 87 ml
Porcentaje de lignina soluble en cido
%ASL =
UVabs V filtrado Dilucin
! ODW
x100 =
0.644 * 87 mL * 0.05
*100
mL
30
* 300 mg
mg
%ASL = 0.0311%
Porcentaje de lignina en el olote
% Lignina = %AIL + %ASL = 26.23% + 0.03%

% Lignina = 26.26%
Carbohidratos en el olote
Glucosa
Regresin obtenida de la curva estndar: Area = 1840.7 [Glu ] + 32.283
Anlisis por HPLC de glucosa en la muestra de olote
Area = 286.33
Concentracin de glucosa en la muestra analizada
33
Area ! 32.283 286.33 ! 32.283

g
=
= 0.138
1840.7
1840.7
L
mg
[Glu] = 0.138
mL
[Glu] =
Porcentaje de glucosa en el olote
mg
0.138
* 87mL
[Glu] V
mL
x100 =
*100 = 4.002%
ODW
300 mg
%Glu = 4 %
%Glu =
Xilosa
Regresion obtenida de la curva estndar: Area = 1902 [Xil] ! 38.324
Anlisis por HPLC de xilosa en la muestra de olote
Area = 1203.483
Concentracin de xilosa en la muestra analizada
Area + 38.324 1203.483 ! 38.324

g
=
= 0.6529
1902
1902
L
mg
[Xil] = 0.6529
mL
[Xil] =
Porcentaje de xilosa en el olote
mg
0.6529
* 87 mL
[Xil] V
mL
x100 =
*100 = 18.9341%
ODW
300 mg
%Xil = 19%
% Xil =
34
B.
B.1.
C
odigos de Matlab utilizados
Distribuci
on de tama
no de partcula
%% Archivo para graficar la distribucion de tamano de particula

% FJGM P2008
clc; clear all;
num=1;
%%
pcribai = [0.37 0.46 0.39 0.40 0.42 0.375 0.32]; % 10, 12...35, bot
pcribaf = [0.39 0.48 0.43 0.42 0.435 0.38 0.36 ]; % 10, 12...35, bot
masatot = 0.38-0.22;
peso
= pcribaf-pcribai;
porc
= peso./masatot*100;
check
= sum(porc)
cribas=[1 2 3 4 5 6 7]; % 10, 12...35, bot

%%
figure(num)
plot(cribas,porc)
set(gca,XTickLabel,{10, 12, 18, 24, 30, 35, bottom})
xlabel(criba)
ylabel(masa [%])
grid
num=num+1;
B.2.
Curvas est
andar
%% Archivo para graficar las curvas estandar

% FJGM P2008
clc; clear all;
num=1;
%% Import Data
data=csvread(curvas.csv);
35
arabinosa
celobiosa
galactosa
glucosa
manosa
xilosa
=
=
=
=
=
=
data([1:6],[1:2]);
data([1:5],[3:4]);
data([1:5],[5:6]);
data([1:5],[7:8]);
data([1:5],[9:10]);
data([1:5],[11:12]);
%% Fit
farabinosa
fcelobiosa
fgalactosa
fglucosa
fmanosa
fxilosa
=
=
=
=
=
=
polyfit(arabinosa(:,1),arabinosa(:,2),1)
polyfit(celobiosa(:,1),celobiosa(:,2),1)
polyfit(galactosa(:,1),galactosa(:,2),1)
polyfit(glucosa(:,1),glucosa(:,2),1)
polyfit(manosa(:,1),manosa(:,2),1)
polyfit(xilosa(:,1),xilosa(:,2),1)
%% Plot
figure(num)
plot(arabinosa(:,1),arabinosa(:,2),*,...
arabinosa(:,1),polyval(farabinosa,arabinosa(:,1)))
title(\bf Arabinosa,FontSize,12)
xlabel(C [^g/_L])
ylabel(A [u.a.])
fitlegend=[y=,num2str(farabinosa(1)),+,num2str(farabinosa(2),4)];
legend(datos,fitlegend,0)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(celobiosa(:,1),celobiosa(:,2),*,...
celobiosa(:,1),polyval(fcelobiosa,celobiosa(:,1)))
title(\bf Celobiosa,FontSize,12)
xlabel(C [^g/_L])
ylabel(A [u.a.])
fitlegend=[y=,num2str(fcelobiosa(1)),+,num2str(fcelobiosa(2),4)];
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(galactosa(:,1),galactosa(:,2),*,...
galactosa(:,1),polyval(fgalactosa,galactosa(:,1)))
title(\bf Galactosa,FontSize,12)
xlabel(C [^g/_L])
36
ylabel(A [u.a.])
fitlegend=[y=,num2str(fgalactosa(1)),num2str(fgalactosa(2),4)];
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(glucosa(:,1),glucosa(:,2),*,...
glucosa(:,1),polyval(fglucosa,glucosa(:,1)))
title(\bf Glucosa,FontSize,12)
xlabel(C [^g/_L])
ylabel(A [u.a.])
fitlegend=[y=,num2str(fglucosa(1)),+,num2str(fglucosa(2),4)];
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(manosa(:,1),manosa(:,2),*,...
manosa(:,1),polyval(fmanosa,manosa(:,1)))
title(\bf Manosa,FontSize,12)
xlabel(C [^g/_L])
ylabel(A [u.a.])
fitlegend=[y=,num2str(fmanosa(1)),+,num2str(fmanosa(2),4)];
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(xilosa(:,1),xilosa(:,2),*,...
xilosa(:,1),polyval(fxilosa,xilosa(:,1)))
title(\bf Xilosa,FontSize,12)
xlabel(C [^g/_L])
ylabel(A [u.a.])
fitlegend=[y=,num2str(fxilosa(1)),num2str(fxilosa(2),4)];
grid
num=num+1;
%% Plot Comp
%
% figure(num)
% plot(arabinosa(:,1),arabinosa(:,2),*,...
%
arabinosa(:,1),polyval(farabinosa,arabinosa(:,1)),...
%
celobiosa(:,1),celobiosa(:,2),*,...
%
celobiosa(:,1),polyval(fcelobiosa,celobiosa(:,1)),...
37
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
%
galactosa(:,1),galactosa(:,2),*,...
galactosa(:,1),polyval(fgalactosa,galactosa(:,1)),...
glucosa(:,1),glucosa(:,2),*,...
glucosa(:,1),polyval(fglucosa,glucosa(:,1)),...
manosa(:,1),manosa(:,2),*,...
manosa(:,1),polyval(fmanosa,manosa(:,1)),...
xilosa(:,1),xilosa(:,2),*,...
xilosa(:,1),polyval(fxilosa,xilosa(:,1)))
title(\bf Comparativa,FontSize,12)
xlabel(C [^g/_L])
ylabel(A [u.a.])
% azucares=[arabinosa celobiosa galactosa...
%
glucosa manosa xilosa]
% fitlegend=[ara=,num2str(farabinosa(1)),+,num2str(farabinosa(2),4);...
%
cel=,num2str(fcelobiosa(1)),+,num2str(fcelobiosa(2),4);...
%
gal=,num2str(fgalactosa(1)),num2str(fgalactosa(2),4);...
%
glu=,num2str(fglucosa(1)),+,num2str(fglucosa(2),4);...
%
man=,num2str(fmanosa(1)),+,num2str(fmanosa(2),4);...
%
xil=,num2str(fxilosa(1)),num2str(fxilosa(2),4)];
% legend(azucares(1),fitlegend(1),azucares(2),fitlegend(2),...
%
azucares(3),fitlegend(3),azucares(4),fitlegend(4),...
%
azucares(5),fitlegend(5),azucares(6),fitlegend(6),0)
grid
num=num+1;
B.3.
Espectros UV
%% Archivo para graficar los espectros UV

% FJGM P2008
clc; clear all;
num=1;
%% Import Data
e2
e4
e6
e61
e62
e8
e81
e10
e12
e14
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
csvread(1-2.csv);
csvread(1-4.csv);
csvread(1-6.csv);
csvread(1-6-1.csv);
csvread(1-6-2.csv);
csvread(1-8.csv);
csvread(1-8-1.csv);
csvread(1-10.csv);
csvread(1-12.csv);
csvread(1-14.csv);
38
e141= csvread(1-14-1.csv);
ea
eb
ec
ed
ee
ef
=
=
=
=
=
=
csvread(1-a.csv);
csvread(1-b.csv);
csvread(1-c.csv);
csvread(1-d.csv);
csvread(1-e.csv);
csvread(1-f.csv);
eHO = csvread(1-HIDROLIZADO OLOTE.csv);

eHO1= csvread(1-HIDROLIZADO OLOTE1.csv);
eHO2= csvread(1-HIDROLIZADO OLOTE2.csv);
eM1 =
eM11=
eM2 =
eM5 =
eM51=
eM7 =
eM71=
eM9 =
csvread(1-Muestra1.csv);
%% Plot
figure(num)
plot(e2(:,1),e2(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e2(:,2)))])
title(\bf)
xlabel(Longitud de onda [nm])
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e4(:,1),e4(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e4(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e6(:,1),e6(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e6(:,2)))])
title(\bf)
39

ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e61(:,1),e61(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e61(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e62(:,1),e62(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e62(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e8(:,1),e8(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e8(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e81(:,1),e81(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e81(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e10(:,1),e10(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e10(:,2)))])
title(\bf)
40
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e12(:,1),e12(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e12(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e14(:,1),e14(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e14(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(e141(:,1),e141(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(e141(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
%% Plot
figure(num)
plot(ea(:,1),ea(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(ea(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eb(:,1),eb(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eb(:,2)))])
title(\bf)
41

ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(ec(:,1),ec(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(ec(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(ed(:,1),ed(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(ed(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(ed(:,1),ed(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(ee(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(ef(:,1),ef(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(ef(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
%% Plot
figure(num)
plot(eHO(:,1),eHO(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eHO(:,2)))])
42
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eHO1(:,1),eHO1(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eHO1(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eHO2(:,1),eHO2(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eHO2(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
%% Plot
figure(num)
plot(eM1(:,1),eM1(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eM1(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eM11(:,1),eM11(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eM11(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eM2(:,1),eM2(:,2))
43
axis([200 400 0 ceil(max(eM2(:,2)))])

title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eM5(:,1),eM5(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eM5(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eM51(:,1),eM51(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eM51(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eM7(:,1),eM7(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eM7(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eM71(:,1),eM71(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eM71(:,2)))])
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
figure(num)
plot(eM9(:,1),eM9(:,2))
axis([200 400 0 ceil(max(eM9(:,2)))])
44
title(\bf)
ylabel(Abs)
grid
num=num+1;
45

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Producci

Ana Sofa Amor Mendiola

M.B. Lorena L. Pedraza Segura

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Actualmente, pases como Brasil, Canada y Estados Unidos presentan un

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

como un recurso energetico potencialmente sostenible que puede ofrecer ventajas

Dependencia del petr

Casi cualquier pas con suficiente terreno en su territorio puede producir

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Demanda prevista de etanol

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Molido, cuya funci

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

C5 H10 O5 + C6 H12O6 + otros az

nC12 H22 O11 2nC6 H12 O6

3C5 H10 O5 + Pichia stipitis 5C2 H5 OH + 5CO2

Durante los diferentes pasos de la metodologa experimental se utilizaron los

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Tabla 5.2: Material utilizado.

Tabla 5.3: Equipo utilizado.

Tabla 5.4: Juego de cribas.

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 5.1: Diagrama esqueatico del procedimiento experimental.

Como primer punto se consiguieron ejemplares de maz mexicano Zea mays,

Utilizando un sistema de cribas se determino la distribucion del tama

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Despues de una hora en el autoclave y de haber tomado las alcuotas para

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Con base en la metodologa experimental de la seccion 5 se llevaron a cabo

Cabe destacar, que tanto la muestra 1, adquirida en Superama, como la 2,

Utilizando cribas mencionadas en la Tabla 5.4 se determino la distribucion

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.1: Distribuci

Utilizando la tecnica de cromatografa lquida de alta presion o HPLC por

Figura 6.2: Curva est

Figura 6.3: Curva est

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.4: Curva est

Figura 6.5: Curva est

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.6: Curva est

Figura 6.7: Curva est

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Para determinar los porcentajes de dichos carbohidratos en el olote se realizo una

La ausencia de picos para el resto de los carbohidratos indica un pretrata

Tabla 6.3: Lignina en el olote.

El valor mostrado en la Tabla 6.3 coincide con los sugeridos en la literatura,

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.8: Espectro UV para la L-arabinosa. Maximo: =277.0, Abs=0.279

Figura 6.9: Espectro UV para la L-arabinosa. Maximo: =277.0, Abs=0.448

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.10: Espectro UV para la D-celobiosa. Maximo: =284.9, Abs=1.619

Figura 6.11: Espectro UV para la D-celobiosa. Maximo: =282.9, Abs=2.343

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.12: Espectro UV para la D-galactosa. Maximo: =284.9, Abs=1.711

Figura 6.13: Espectro UV para la D-galactosa. Maximo: =282.9, Abs=2.618

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.14: Espectro UV para la D-glucosa. Maximo: =284.9, Abs=1.262

Figura 6.15: Espectro UV para la D-glucosa. Maximo: =284.0, Abs=2.577

A. S. Amor, O.F. Cruz Correa, F. J. Guerra

Figura 6.16: Espectro UV para la D-manosa. Maximo: =283.1, Abs=2.101

Figura 6.17: Espectro UV para la D-manosa. Maximo: =282.0, Abs=3.206