Cromatografa

La cromatografa es una tcnica de separacin extraordinariamente verstil

que presenta distintas variantes. En toda separacin cromatografa hay dos
fases (slida, lquida o gas) una mvil y otra estacionaria, que se mueven
una con respecto de la otra manteniendo un contacto ntimo. La muestra se
introduce en la fase mvil y los componentes de la muestra se distribuyen
entre la fase estacionaria y la mvil. Los componentes de la mezcla a
separar invierten un tiempo diferente en recorrer cada una de las fases, con
lo que se produce la separacin. Si un componente est la mayor parte del
tiempo en la fase mvil el producto se mueve rpidamente, mientras que si
se encuentra la mayor parte en la fase estacionaria, el producto queda
retenido y su salida es mucho ms lenta.
La cromatografa comprende un conjunto de tcnicas que tienen como finalidad la separacin
de mezclas basndose en la diferente capacidad de interaccin de cada componente en otra
sustancia. De forma general, consiste en pasar una fase mvil (una muestra constituida por
una mezcla que contiene el compuesto deseado en el disolvente) a travs de una fase
estacionaria fija slida. La fase estacionaria retrasa el paso de los componentes de la
muestra, de forma que los componentes la atraviesan a diferentes velocidades y se separan
en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla presenta un tiempo caracterstico
de paso por el sistema, denominado tiempo de retencin. Cuando el tiempo de retencin
del compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla, ste se puede
separar mediante la separacin cromatogrfica.

Cromatografa Liquida de alta presin.

La cromatografa lquida de alta presin es una tcnica de separacin basada en la
distinta retencin de los componentes de una muestra disueltos en la fase mvil al
pasar por la fase estacionaria. Se caracteriza por la elevada presin de operacin
necesaria para conseguir una velocidad ptima de la fase mvil. La interaccin entre el
soluto de la fase mvil y la fase estacionaria puede ser modificada eligiendo diferentes
disolventes y fases estacionarias, siendo en consecuencia una tcnica de gran
versatilidad.
Cromatografa de capa delgada

La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar molculas

relativamente pequeas. En la biologa celular se utiliza frecuentemente para separar
azcares simples, lpidos, aminocidos, nucletidos, metabolitos, y ocacionalmente para
separar cadenas cortas de polipptidos y cidos nucleicos. Al igual que otras
cromatografas, consiste de una fase estacionaria y una fase mvil y el principio es el
mismo: la sustancia de inters se adherir a la fase estacionaria o se mover con la fase
mvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase
estacionaria.
La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de
silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie slida (una placa de vidrio,
aluminio, plstico o papel). Esta superficie slida puede ser rgida o flexible. El tipo de
fase estacionaria que se utilice en un experimento depender del tipo de molculas que
se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase

estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgnico o una
mezcla de ambos.
El procedimiento es sencillo: Se colocan las muestras a un centmetro del borde en uno
de los extremos de la placa, se deja secar, se coloca la placa en un envase (tanque de
desarrollo) que ya contiene una pequea cantidad del solvente, se tapa y se deja correr
por un rato. El solvente subir por capilaridad e ir arrastrando las molculas, las cuales
se movern segn la afinidad que muestren por la fase estacionaria. Si la mezcla de
muestras que se est analizando presenta color, se vern los distintos colores migrando a
distintas velocidades. Si son incoloras hay que someter la placa a algn tratamiento con
una sustancia desarrolladora (developer) para poder determinar la presencia de
sustancias sobre el silicato. El tipo de desarrollador depender del tipo de molculas que
se analizan.
Aplicaciones de la cromatografa liquida en la industria.

Campos de Aplicacin de HPLC

Frmacos: Antibiticos, sedantes esteroides, analgsicos
Bioqumica: Aminocidos, protenas, carbohidratos, lpidos
Productos de alimentacin: Edulcorantes artificiales, antioxidantes,
aflatoxinas, aditivos

Productos de la industria qumica: Aromticos condensados,

tensoactivos, propulsores, colorantes

Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB

Qumica forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcticos

Medicina clnica: cidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de

orina, estrgenos.
Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa

Separacin y purificacin de metabolitos

Separacin y purificacin de los metabolitos de las drogas procedentes

de muestras de orina

Purificacin y separacin de enantimeros

Purificacin de compuestos naturales

Purificacin y caracterizacin de enzimas y protenas

IMPORTANCIA INDUSTRIAL.
La cromatografa es empleada en la industria petroqumica principalmente en las plantas
de gases, donde se obtienen los productos acabados como son el propano y el butano. En
cada uno de estos gases, adems de controlar los procesos de obtencin en distintos
puntos, es de inters conocer el grado de pureza de los mismos una vez acabado dicho
proceso, para lo cual por medio de la cromatografa se realiza un anlisis cualitativo y
cuantitativo de los componentes anterior y posterior de cada uno de ellos.
Tambin se emplea para saber el porcentaje de reaccin de ciertos procesos como son la
eliminacin del SH2y SO2por obtencin de azufre elemental en el que es muy importante
saber la relacin entre ambos componentes a la salida de dicho proceso.

En resumen la cromatografa se emplea en cualquier punto de un proceso en el que se

obtenga una mezcla gaseosa y cualquiera de sus componentes nos sea significativo para
controlar la buena marcha del mismo.