UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

DEPARTAMENTO DE QUIMICA

MESA N 2
titulacin
potenciomtrica del cido
fosfrico y del aminocido
glicina
CURSO:
Laboratorio de Bioqumica
PROFESORA:
Paola Jorge
ALUMNOS:

Delgado Pariona Jahaira

Huamn Cuyubamba Gabriela
Quispe Orellana Vanessa
Ramn Ccana Karolina

2015

I.

INTRODUCCIN

El presente trabajo tiene como finalidad comprobar la formacin de los sistemas buffer a lo
largo de la titulacin potenciomtrica de un cido politrpico y de un aminocido, as como
tambin determinar experimentalmente los valores del pKa, y todo lo relacionado a ello
como se menciona a continuacin.
Primeramente, los cidos poliprticos son cidos que tienen ms de un hidrgeno ionizable,
por ejemplo el cido fosfrico y el cido sulfrico; donde estos se disocian en ms de una
etapa y cada una de estas presenta su propia constante de equilibrio. Estos cidos no ceden
con la misma facilidad todos los protones, sino que lo hacen de forma escalonada, y cada
vez con mayor dificultad. Las correspondientes constantes de disociacin, disminuyen
mucho para cada una de las sucesivas ionizaciones.
Un aminocido es una molcula orgnica con un grupo amino (-NH2) y un grupo
carboxilo (-COOH), donde los ms frecuentes y de mayor inters son aquellos que forman
parte de las protenas. Dos aminocidos se combinan en una reaccin de condensacin entre
el grupo amino de uno y el carboxilo del otro, liberndose una molcula de agua y
formando un enlace amida que se denomina enlace peptdico.
A continuacin en el informe se presentaran dos experimentos relacionados con el tema,
uno es la titulacin del cido fosfrico y el otro es la titulacin de la glicina, con hidrxido
de sodio y cido clorhdrico respectivamente.

II.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

CUADRO N1: VARIACIN DEL pH EN FUNCIN AL VOLUMEN DE NaOH

AADIDO A LA SOLUCIN DE CIDO FOSFRICO 1M

ml
(NaOH
1M)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15

pH

ml
(NaOH 1M)

pH

ml
(NaOH 1M)

pH

ml
(NaOH 1M)

pH

1.0
2
1.0
8
1.1
8
1.2
5
1.3
4
1.4
3
1.5

16

2.4
5
2.6

32

6.74

48

33

6.83

49

2.7
6
3.0
1
3.4

34

6.93

50

35

7.04

51

11.0
3
11.1
2
11.2
1
11.3

36

7.15

52

37

7.28

53

38

7.43

54

1.5
9
1.6
7
1.7
6
1.8
4
1.9
3
2.0
2
2.1
1
2.2
2
2.3
2

23

4.7
5
5.3
5
5.6
5
5.8
6
6.0
1
6.1
4
6.2
5
6.3
6
6.4
5
6.5
5
6.6
5

39

7.61

55

40

7.89

56

41

8.15

57

42

9.83

58

43

10.2
8
10.5
3
10.6
9
10.8
3
10.9
4

59

17
18
19
20
21
22

24
25
26
27
28
29
30
31

44
45
46
47

60
61

11.3
7
11.4
5
11.5
1
11.5
8
11.6
5
11.7
3
11.7
9
11.8
6
11.9
3
12.0
3

GRFICO N1: CURVA DE TITULACIN POTENCIOMTRICA DEL CIDO

FOSFRICO

14

12

10

B
8

pH

pKa2=7.29

ml NaOH 1M

A = 1 er punto de inflexin (pH = 4.75)

B= 2 do punto de inflexin (pH = 9.83)

Segn Gmez, et al. (2005)

-

En el punto inicial hay una disolucin de un cido dbil, cuyo pH se puede calcular a
travs de la ecuacin de su constante de equilibrio (Ka). En la grfica corresponde a la
ordenada en el origen.
Entre el punto inicial y el punto de equivalencia, la disolucin valorada contiene el
cido dbil y la sal de su base conjugada, que se va formando al aadir la base fuerte.
Por tanto, es una disolucin reguladora, cuyo pH puede calcularse, comprobndose que
se mantiene prcticamente constante. Corresponde al tramo aproximadamente
horizontal de la grfica.
En el punto de equivalencia todo el cido se ha neutralizado, encontrndose como la sal
de su base conjugada. En consecuencia, el pH ser bsico, y la eleccin del indicador
est condicionada a que su viraje se produzca en torno a ste. En la grfica corresponde
al punto de inflexin.
Una vez que se haya alcanzado el punto de equivalencia, si se sigue aadiendo la base
fuerte el pH se har muy bsico con rapidez.

En el laboratorio se efectu una titulacin potenciomtrica del cido fosfrico. Luego se coloc
el potencimetro en contacto con la solucin de cido y se procedi a comenzar la titulacin, en
esta primera experiencia se midi el cambio de pH al agregar cada 1 mL de NaOH 1M,
obtenindose as la Grafica N1.
Segn Fukusaki (2009), el cido fosfrico es un cido politrpico (aquel cido que posee ms
de un hidrgeno ionizable). Asimismo menciona que este cido se disocia en ms de una etapa y
que en cada una de ellas presenta su propia constante de equilibrio.
En la Grfica N 1 se observa que el cido fosfrico empieza con un pH de 1.02 y luego llega a
una basicidad de 12.03. Esto se debe a que se le agrego una base fuerte NaOH, la cual provoca
que el pH de la solucin aumente gradualmente hasta un punto donde el cambio de pH fue muy
pronunciado para la adicin del mismo volumen de la base ocurriendo en ese momento el
primer efecto amortiguador, en el cual se obtiene la mxima eficiencia del tampn pues se
tienen un pH igual al pKa1 = 2.88 igualmente en la segunda disociacin se obtiene el segundo

efecto amortiguador obteniendo el pH es igual al pKa2 = 7.29. Sin embargo Morris (1995), nos
menciona que el pKa 1y pKa 2 del cido fosfrico es 1.96 y 6.80 respectivamente.

Fuente: Morris (1995)

Con respecto a los puntos de inflexin Osorio (2007), menciona que la adicin de un valorante,
disminuye la cantidad de iones hidronios en la solucin; logrando que ocurra un cambio de
potencial relativamente grande que indica el primer punto de inflexin o de equivalencia
alcanzado en un determinado volumen.

CUADRO N2: VARIACIN DEL pH EN FUNCIN AL VOLUMEN DE NaOH

AADIDO A LA SOLUCIN CON GLICINA 0.025M

ml

pH

(NaOH 0.1M)

0
1
2
3
4
5
6
7
8

ml

pH

(NaOH 0.1M)

1.5
2
1.5
5
1.5
8
1.6
2
1.6
7
1.7
3
1.8
1
1.9
0
2.0

9
10
11
12
13
14
15
16
17

ml

pH

2.1
8
2.3
6
2.6
5
3.6
0
5.9
7
7.8
5
9.1
4
9.6
5
10

ml

18

10.3

27

19

10.7

28

20

11.0
4
11.3

29

11.4
6
11.5
7
11.6
4
11.7
2
11.7

31

21
22
23
24
25
26

pH

(NaOH
0.1M)

(NaOH 0.1M)

30

32
33

11.8
2
11.8
9
11.9
1
11.9
4
11.9
7
11.9
8
12.0
0

GRFICO N2: CURVA DE TITULACIN POTENCIOMTRICA DE LA GLICINA

14

12

C
10

pKa2=1

pH
6

pKa1=2.18

1 0 -1

ml NaOH 0.1M

Especies inicas formadas

pI = (2.18 + 11.4) / 2 = 6.79

En la prctica se determin la variacin del pH en funcin al volumen de NaOH (0.1M)

aadido a la solucin de glicina a una concentracin de 0.025M, hasta llegar a un pH 12.
Como se observa en el Cuadro 2, el pH inicial fue de 1.52 y mientras se le agregaba ms
hidrxido de sodio, mL a mL, este vara aumentando; y en total para llegar al pH
establecido se utiliz 33mL de NaOH.
Los aminocidos por tener al menos un grupo cido y un grupo amino pueden considerarse
como anfteros, es decir, sustancias que pueden comportarse como cidos o como bases.
Segn Voet y Voet (2006) en soluciones acuosas el aminocido glicina puede existir en tres
formas diferentes: totalmente protonada (glyH2 +), in hbrido (glyH+) y anin glicinato
(gly-). Por otro lado, la concentracin relativa de estas especies depende del pH de la
solucin.
La valoracin potenciomtrica de glicina, con hidrxido de sodio da lugar a una curva,
donde se distinguen varios puntos importantes en relacin con la capacidad reguladora del
aminocido tales como la concentracin de glicina, los valores de las constantes de
equilibrio (Ka1 y Ka2) y el punto isoelctrico de esta.
Para la glicina, existen dos puntos en los que los cambios en la concentracin de los
equivalentes de NaOH no alteran al pH de la solucin. En estos puntos, los valores de pH
corresponden a los pKa del aminocido y como se observa en el Grfico 2, los pKa 1 y 2
experimentales fueron 9.12 y 11.4 respectivamente. Sin embargo Fornaguera y Gmez
(2003), menciona que el pKa 1 y pKa2 de la glicina son 2.34 y 9.6 respectivamente, como se
observa en la siguiente figura.

Fuente: Fornaguera y Gmez (2003)

Fornaguera y Gmez (2003), nos dice que un punto importante de reconocer en la curva de
titulacin lo constituye el punto isoelctrico (pI), que como su nombre lo indica, es el valor
en el cual el aminocido se encuentra en su forma elctricamente neutra, es decir, la suma
de las cargas de los grupos protonables o desprotonables, carga neta, es igual a 0. En el
punto isoelctrico, cualquier cambio de carga (variacin del nmero de equivalentes de H + u
OH-) cambia las propiedades acido-base del aminocido, y provoca un cambio brusco de
pH, es decir, es el punto de menor capacidad amortiguadora del aminocido y menciona que
el valor de este es de 6.1, mientras que en la prctica se obtuvo un valor de 6.79.
La capacidad de tampn de los aminocidos se mide en pK1 cuando la variacin de pH de
la disolucin al ir agregando NaOH es mnima; dicho de otra forma, la capacidad de tampn
es mxima. Se define una base como un aceptor de protones; por tanto, en este caso. La
proporcin de NH3 ionizado disminuye al aumentar el pH, comenzando a ceder su protn y
la mxima capacidad tampn se alcanza en pK2 (Campbell N. et al 2006)
Hay mayores nmeros de pKas o hay ms momentos de equilibrio, si el sustituyente R de
un aminocido presenta mayores posibilidades de ionizacin. En este caso la glicina tiene
como radical un al hidrogeno, teniendo as solo dos grupos ionizables. (Campbell N. et al
2006)
El aminocido glicina tiene carga positiva a pH bajos y carga negativa a pH altos. Segn,
Vaseduman (2011) en solucin cida son catinicos en forma y en solucin alcalina se
comportan como aniones.
Segn Baltener A. (2012).Las titulaciones de aminocidos nos permite encontrar el
mecanismo qumico de una protena .En la parte de pHs bajos, los dos grupos estn en su
forma protonada, de forma que la carga neta de la protena es de signo positivo. A pHs altos,
estos mismos grupos se encuentran en forma de base conjugada, por lo que la carga neta es
este caso ser de signo negativo. Entre una zona y otra habr determinado pH en el que la
cantidad de carga negativa ser igual a la positiva: es el llamado punto isoelctrico o pH
isoelctrico de la protena, que es una constante caracterstica de la misma, y que es un
importante criterio para poder identificar protenas en Protemica. Por debajo del punto
isoelctrico, las protenas tienen carga positiva neta; por encima tendrn carga negativa.
Otra propiedad del punto isoelctrico es que la solubilidad de una protena es mnima en el
mismo.
A valores bajos de pH, los grupos amino y carboxilo estn completamente protonados: la
glicina se encuentra en su forma catinica (NH3+CH2COOH). La valoracin con una base
fuerte como el hidrxido de sodio genera una curva con tres puntos de inflexin: en el
primer punto de inflexin, a pH 2,3, un 50% de la molcula se encuentra en la forma
catinica y el otro 50% en la forma Zwitterinica o neutra (NH3+CH2COO-) con un grupo
carboxilo desprotonizado. El punto de inflexin a pH 9,6 marca la desprotonizacin del
grupo amino: la mitad de las molculas de glicina ha cambiado de la forma zwitterinica a
la forma aninica (NH2CH2COO-). Estos dos puntos corresponden a los valores de pK para
los grupos carboxilo y amino. Eb el punto central de inflexin (pH 6,0) ha finalizado en
gran parte la primera desprotonizacin; la segunda empieza justo entonces: la glicina lleva
en este punto isoelctrico (PI) una carga neta nula (NH3+CH2COO-). De acuerdo al grfico
de: Curva de valoracin de la glicina.

Fuente: Muller E. 2008

III.

CONCLUSIONES
Despus de haber realizado adecuadamente las titulaciones y luego de analizar los
resultados y las grficas se lleg a las siguientes conclusiones:
Se pueden forman sistemas buffer con cidos politrpicos como el cido fosfrico o
con aminocidos como la glicina.
Los valores experimentales del pKa1 y pKa2 en el cido fosfrico y la glicina fueron
2.22, 7.15 y 2.18, 11.4 respectivamente.

IV.

BIBLIOGRAFA

 CAMPBELL N, SMITH A. et al.2006.Bioqumica Ilustrada. Quinta edicin espaol.

Editorial Elsevier Limited. Espaa-Barcelona.
BATTANER E. 2012.Biomolculas: Una introduccin estructural a la bioqumica.
Primera edicin. Ediciones Universidad de Salamanca. Espaa.
FORNAGUERA, J Y GOMEZ, G. 2003. Bioqumica: La ciencia de la vida. Editorial
Universidad Estatal a Distancia.
FUKUSAKI Y., ALEJANDRO. 2009. Qumica Orgnica 2da. Edicin. Ed. Virtual.
Lima - Per.
MORRIS.1995. Fisicoqumica para los bilogos. Segunda edicin. Editorial REVERTE
S.A. Espaa.
MULLER W.E. 2008. Bioqumica: Fundamentos de medicina y ciencias de la vida.
Editorial Revert S.A. Espaa.
OSORIO.2007. Mtodos numricos en qumica con Matlab. Primera edicin. Editorial
Universidad de Antioquia. Colombia.
VASEDUMAN DM, SREEKUMARI S. 2011. Texto de Bioqumica. Sexta edicin
espaol. Editorial Cullar Ayala. Mxico.
VOET, D Y VOET, J. 2006. Bioqumica. Tercera edicin. Buenos Aires. Editorial
Mdica Panamericana.