O Sistema de Endomembranas I:

RE e CG

Arnaldo R. Santos Jr.

O Sistema de Endomembranas
(Lodishc et al., 2005)

Retculo Endoplasmtico
Formado por um sistema de membranas interconectadas
na forma de tubos ramificados que delimitam uma cavidade
(luz ou lmen).
Distingue-se dois tipos: o RE rugoso e o RE liso.
Presentes em uma mesma clulas, formando uma estrutura
contnua.
Contnuo com o envoltrio nuclear.
No existe ligao com a membrana plasmtica.
Ocupa em media 10% do volume celular.
Corresponde a mais da metade do total de membranas em
uma clula animal.
Quantidade e localizao no citoplasma variam de acordo
com o tipo e metabolismo celular.

Morfologia do Retculo
Endoplasmtico (RE)
Viso esquemtica do RE

(Alberts et al., 2008)

(Stevens e Lowe, 2001)

Mtodos de estudo: microscopia de luz

Morfologia do Retculo Endoplasmtico

RER de clulas pancreticas excrinas, altamente secretoras (Alberts et al., 2008).

Morfologia do Retculo Endoplasmtico

REL de uma clula secretora de hormnios esterides, as clula Intersticial (Alberts et a., 2008).

Composio qumica
Duas pores:
Membranas:
Distribuio assimtrica
dos componentes
Lipdeos (~30%)
Protenas (~70%)
Cadeias
transportadoras de
eltrons
Luz
Varivel, com o tipo
celular (secreo)
Protenas residentes

Composio qumica:
membranas
Lipdeos: bicamanda
1. Face citoplasmtica: fosfatidilinositol, fosfatidiletanolamino
e fosfatidilserina
2. Face luminal: fostatidilcolina e esfingomielina
Protenas: estruturais, receptores ou enzimas
1. Face citoplasmtica: enzimas oxidativas.
2. Face luminal: glicoprotenas e enzimas relacionadas a
modificao de substncias.
3. Cadeias transportadoras de eltrons: citocromo p450
(hidroxilao de substratos) e citocromo b5 (dessaturao
de cidos graxos).
4. RER tem aproximadamente 20 protenas no observadas no
REL (associao dos ribossomos as membrana do RE).

Aspectos funcionais
Sntese de protenas:
Protenas solveis, residentes, secretadas ou de outras
organelas e transmembranicas;
Sntese e modificao de lipdeos
Fosfolipdeos, ceramidas, colesterol
Elongao e dessaturao de cidos graxos
Sntese de hormnios esterides
Progesterona, andrgenos, estrgenos, glicocorticides e
mineralocorticides.
Modificao de lipdeos e protenas
Alterao na conformao final
Formao de pontes dissulfeto
Glicosilao
Adio ancoras glicosilfosfatidilinositol a protenas.
Detoxificao
Glicogenlise

Sntese proteica
Os ribossomos associados ao RE so idnticos aos
presentes livres no citoplasma.
A associao ao RE transitria. Terminada a leitura
do mRNA o ribossomo liberado no citoplasma.
A transferncia de protenas para o lmen do RE
ocorra durante a traduo.
Em outras organelas a importao de protenas
ocorre ps-traducionalmente.
Algumas protenas (poucas) ser transportadas j em
sua forma final para o RE.

(Alberts et al., 2008)

(Alberts et al., 2008)

Sntese proteica

(Stevens e Lowe, 2001)

Sntese proteica transferncia cotraducinal

Peptdeo sinal (~20 aa hidrofbicos)
SRP uma ribonucleoprotena
Hidrolise do GTP libera a partcula

(Lodish et al., 2005)

Sntese
bloqueada
no
citoplasma (seqncia sinal +
partcula de reconhecimento
do sinal - SRP).

Reconhecimento
do ribossomo/SRP.
Reincio
da
sntese.

Trmino
da
sntese;
Desassociao
do ribossomo

Sntese proteica transferncia

cotraducinal
A Interao do ribossomo
ao RE:
Ligao de
com a p180.
Complexo
(relacionado
ancoramento
ribossomo.

receptores
sec61
com
o
do

A
cadeia
polipeptdica
nascente se liga a um poro
aquoso fisiolgico (2nm):
somente na presena do
complexo
ribossomopeptdeo nascente.

Transferncia de protenas
solveis
Diretamente do ribossomo para a luz do RE.
Presena de protenas chaperonas de lingao (BiP).
Translocon: receptores SRP, poro aquoso, peptidase do
sinal, complexo Sec61, TRAM e as BiPs.

O complexo de protenas na membrana do RE que est

relacionado a translocao denominado translocon.

Transferncia de protenas
solveis

(Lodish et al., 2005)

(Lodish et al., 2005)

Transferncia de protenas de
membrana
Protenas
transmembrana
apresentam
hidrofbicos inseridos nas biomembranas.

segmentos

A insero de um segmento hidrofbico pode ocorrer:

1. A protena no possui stio de clivagem da sequncia
sinal.
2. Uma segunda sequncia hidrofbica seria inserida na
membrana do RE
Nesses casos: protenas transmembranas unipasso.
Pode haver mais de uma sequncia hidrofbica,
formando protenas transmembrana multipasso.

Transferncia de protenas de
membrana

Transferncia de protenas de
membrana

Sntese de lipdeos
Fosfolipdeos so produzidos no RE e sero utilizados
em diversas membranas celulares.
Sntese ocorre em duas etapas.
1. Dois cidos graxos so ligados a um glicerolfosfato
(citoplasma).
2. Diferenciao da cabea polar: insero do inositol,
serina, etanolamina ou colina.
Ocorre a
(flipases).

translocao

dos

fosfolipdeos

formados

A translocao preferencial para alguns lipdeos, em

especial a fosfatidilcolina (assimetria de membrana).

Sntese de lipdeos

Sntese de lipdeos

(Lodish et al., 2005)

Flipase na membrana do RE e Protenas transportadoras.

Carregam os lipdios produzidos outras membranas.
Pode ocorrer transporte de lipdios pelo trfico de vesculas.

Sntese de colesterol e hormnios

esteroides
Sntese de colesterol tambm ocorre na membrana do RE a
partir da Acetil Co-A.
Tambm pode ser aproveitado o colesterol exgeno.
O colesterol precursor dos hormnios esteroides.
A sntese de esteroides: passos intermedirios que ocorrem
na membrana do RE, mitocndria e peroxissomo.
1. Formao do colesterol no RE
2. Colesterol produzido no RE transportado para a
mitocndria: formao da pregnenolona.
3. A pregnenologa vai ao RE: produtos finais so os
hormnios esteroides.

Sntese de colesterosl e esterides:

clulas intersticiais de Leydig

(Gartner e Hiatt, 1999)

(Bloom e Fawlcet, 1977)

Enzimas citoplasmticas e no RE utilizam 22 passos para a produo do colesterol. As enzimas citoplasmticas catalizam at Farnesil-PP (exceto a
formao de Mevalonato). Demais etapas ocorrem no REL. A sintese de esterides envolve a atividade conjunta das Mitocndrias, o REL
citoplasma.

Modificaes em protenas e
lipdeos
Adoo da conformao final das protenas no RE
facilitada por protenas chaperonas BiP presentes na
luz.
Auxiliam na aquisio da conformao tercirias e
quarternrias das protenas.
Quando a conformao final no correta:
1. Podem ser degradadas presentes na luz do RE
2. Podem ser transportadas ao citoplasma onde podem
ser degradadas.

Modificaes em protenas e
lipdeos

Modificaes em protenas e
lipdeos
Formao de pontes dissulfeto

(Lodish et al., 2005)

favorecida pela dissulfeto isomerase (PDI).

Modificaes em protenas e
lipdeos
Glicosilao
Protenas
modificadas
carboidratos.

pela

adio

covalente

de

Ocorre a formao de um oligossacardeo na membrana do

RE.
Esse carboidrato permanece ancorado a membrana pelo
dolicol.
Ao da oligossacaril-transferase:
1. Reconhece os resduos de asparagina (Asn ou N) da
protena nascente
2. Catalisa a trasferncia do oligossacardeo para
aminoterminal da asparagina (glicosilao N-ligada).

Modificaes em protenas e
lipdeos

Modificaes em protenas e
lipdeos
Organizao da estrutura tridimensional da protena.

(Lodish et al., 2005)

Modificaes em protenas e
lipdeos
Adio de ancora glicosil-fosfatidilinositol (GPI)
Algumas protenas da superfcie celular interagem com a
membrana por uma ancora de GPI.
Ancora GPI: ligao covalente da protena (extremidade Cterminal) com um carboidrato de um glicolipdeo (o GPI).

(Lodish et al., 2005)

Modificaes em protenas e
lipdeos
Elongao e dessaturao de cidos graxos
A elongao ocorre por uma srie de reaes em cadeia.
A formao das insaturaes ocorrem por desidrogenao.

Detoxificao
Permite
que
eliminadas.

substncias

txicas

insolveis

sejam

Reao de oxidao do citocromo p450

Ocorrem principalmente no fgado, embora possam ocorrer
em outros rgos ou tecidos.
Aumento de tamanho do REL. Com a eliminao, este volta
as suas dimenses normais.

Reserva de Clcio
Protenas ligadoras de Clcio no RE fazem do RE um
reservatrio de elemento.
Nas clulas musculares o REL: retculo sarcoplasmtico.

http://individual.utoronto.ca/gramolini/

Glicogenlise
A degradao de glicognio
citoplasmtico (hepatcitos),
realizada por regies do RE
(glicose-6-fosfatase).
Glicose-6-fosfatase:
desfosforilao
final
glicose na degradao
glicognio.

(Lombello e Carvalho, 2013)

da
do

Complexo de Golgi
No CG so realizados processos de modificao de
substncias produzidas no RE.
O CG tem grande papel na secreo celular.
composto por sculos achatados e independentes,
mas com contnua troca de material por vesculas.
Geralmente localizado prximo ao ncleo.
Nas clulas animais, costuma ocupar a regio central.
Em clulas polarizadas, costuma ficar voltado para a
face secretora da clula.
Em geral existe uma relao espacial entre o RE e o
CG.

Estrutura do CG
Cisternas achatados (ou sculos) com ~ 10nm de
espessura.
Na maioria dos eucariotos as cisternas so organizadas em
pilhas.
Em geral, cada pilha apresenta de 4 a 8 cisternas
sobrepostas.
O espao entre as cisternas fica preenchido por uma matriz
proteica difusa que se associa as membranas do CG.
Em mamferos, as pilhas de cisternas so conectadas
lateralmente por pontes membranosas (cinta de Golgi).
Em protozorios e plantas onde as pilhas de cisternas so
independentes e, muitas vezes, denominadas dictiossomos.

Estrutura do CG

Neurnios fusiformes: histoqumica para a enzima tiaminopirofosfatase (TPPase),

marcadora das cisternas medianas do CG

(Lombello et al, 2013)

Mtodos de estudo

Mtodos de estudo

Composio qumica
Membranas
Diferentes compartimentos com
composio e espessura varivel.
Lipdeos: 35-40% (fosfolipdeos
em distribuio assimtrica)
Protenas: 60-65% (enzimas,
protenas estruturais, protenas
da formao e direcionamento de
vesculas).
As enzimas so caractersticas de
cada compartimento.
Luz
Monossacardeos, nucleotdeos,
polissacardeos, e protenas de
secreo.
Contedo varia com o tipo celular.

Demonstrao histoqumica da compartimentalizao no CG. Normalmente mais de uma cisterna mostra-se marcada. Isto sugere que estes
componentes se concentram de forma geral e no especfica em cada compartimento. A) sem marcao. B) Marcao com smio reduz as
cisternas cis (C e D). As enzimas Nucleosdeo Difosfatase se localiza em C e a Fosfatase cida em D (Alberts et al., 2008).

Aspectos funcionais
Os diferentes compartimentos do CG:
Processamento de protenas e lipdeos: glicosilao,
sulfatao e fosforilao.
Sntese de polissacardeos (componentes da
membrana plasmtica, parede celular ou matriz
extracelular).
Transporte e endereamento de substncias
Formao do acrossomo
Formao de membranas celulares por transporte
vesicular.

Processamento de protenas e
lipdeos: glicosilao
Glicosilao
Cadeias glicdicas podem ser ligados a:
1. Amina de resduos de asparagina (Asn ou N): Nligados
2. Hidroxila de resduos de serina ou treonina: Oligados
A poro glicdica adicionada: estrutura 3D, adeso
celular, sinalizao celular em receptores de
membrana.

Processamento de protenas e
lipdeos: glicosilao
Acares O-ligados
Carboidratos O-ligados so
produzidos no CG (exceto em
leveduras).
Iniciada pela adio de
GlaNAc de no OH lateral dos
resduos de serina ou
treonina.
Outros carboidratos so
sucessivamente adicionados.
Exemplo: carboidratos do
sistema ABO

(Lombello et al, 2013)

Processamento de protenas e
lipdeos: glicosilao

(Lodish et al., 2005).

(Santos Jr. e Vicente, 2013).

Processamento de protenas e
lipdeos: glicosilao
Acares N-ligados
Adio e processamento inicial no RE. O oligossacardeo
resultante chega ao CG.
Dois tipos de aucares N-ligados:
Ricos em manose:
1. Sofrem pouca alterao estrutural no CG.
2. Nenhum oligossacardeo adicionado.
3. Remoo de um ou mais resduos de manose.
Complexos:
1. Remoo de algumas manoses.
2. Adio sequencial de alguns carboidratos.
3. Grande variedade de oligossacardeos complexos.

Processamento de protenas e
lipdeos: glicosilao

(Lombello et al, 2013)

Processamento de protenas e
lipdeos: sulfatao
Pode ocorrer em cadeias
glicdicas (em protenas e
lipdeos).
A reao pela doao do
sulfato da 3-fosfoadenosina5-fosfosulfato (PAPS).
PAPS transportado do
citoplasma para a rede trans
do CG.
Dentre os componentes
produzidos: proteoglicanos.

Sntese de polissacardeos
So sintetizado diferentes
tipos de polissacardeos
no CG.
Em vegetais:
Hemiceluloses
(xiloglicanos)
e
cidos
pcticos (pectinas).
Em animais:
Glicosaminoglicanos.

Transporte e endereamento de
substncias
A via biossinttica no restrita secreo. Essa
via, ou parte dela, pode ser utilizado em outras
finalidades.
Componentes da MP e lisossomos seguem a mesma
via.
Protenas residentes do RE e do CG seguem etapas
iniciais da via secretora, sendo retidas ou
direcionadas ao seus locais de ao.
Sentido de transporte:
1.Antergrado: mediado por COPII
2.Retrgrado: mediado por COPI

Transporte e endereamento de
substncias

Transporte e endereamento de
substncias
Existem dois modelos de transporte no CG:
Modelo de transporte vesicular:
1. Cisternas como compartimentos fixos.
2. As vesculas so responsveis pelo fluxo de molculas.
3. Componentes podem escapar de seus compartimentos.
Voltam por transporte retrgrado.
Modelo de maturao das cisternas:
1. As cisternas migram em direo a regio trans.
2. As vesculas provenientes do RE fundem-se entre sim
para formar a regio cis.
3. A rede trans se desfaz com o brotamento vesicular.

Transporte e endereamento de
substncias

Transporte e endereamento de
substncias: vai biossinttica
Os produtos de secreo no CG podem seguir dois
caminhos:
Secreo constitutiva:
Secreo de maneira contnua e no regulada.
Secreo regulada:
Produtos permanecem retidos em vesculas
(grnulos) de secreo at sinal especfico para
sua liberao.

Transporte e endereamento de
substncias: vai biossinttica

http://minerva.ufpel.edu.br/~mgrheing/cd_histologia/cito/citoplasma.htm

http://www.pucrs.br/fabio/histologia/atlasvirtual/maxim/76a9.htm

Gros-de-secreo em clula de glndula salivar de camundongo

Transporte e endereamento de
substncias: para o endossomo
Enzimas lisossomais so produzidas no RE, processadas e
transferidas ao endossomo.
Reconhecimento da manose-6-fosfato incorporada.

Transporte e endereamento de
substncias: formao de vesculas
Protenas conhecidas:
1.

COP I
Entre as cisternas
de Golgi;
CG RE.

2.

COP II
RE CG.

3.

Clatrina
MP endossomo
CG

(Lodish et al., 2005)

Transporte e endereamento de
substncias: formao de vesculas
Formao de uma estrutura em forma de cesta, que leva
ao brotamento da membrana. Interagem com
receptores que reconhecem produtos.

(Lodish et al., 2005)

Clatrina
COP

Vesculas recobertas

Reconhecimento e fuso das

vesculas
O transporte vesicular dever ser altamente seletivo no
reconhecimento da membrana alvo com a qual ser
fundir.
Reconhecimento: mediado pelas protenas Rab.
Rab so GTPases monomricas. Mas de 60 membros
Fuso: mediado pelas protenas SNARE.
Existem 35 tipos conhecidos de SNAREs, cada uma
associada a um organela em particular.
So comumente agrupas em v-SNAREs (vesculas) e tSNAREs (membranas alvo)

Reconhecimento das vesculas,

Fuso das vesculas

Formao do acrossomo
Formao e agregao de vesculas do CG.
Enzimas acrossomais so semelhantes as lisossomais.

Gartner e Hiatt, 1999

http://www.udel.edu/biology/Wags/histopage/empage/emr/emr.htm

Bloom e Fawlcet, 1977

Brefeldina (BFA) bloqueia o

transporte antergrado no CG
A BFA um composto txico produzido por fungos.
Acarreta desorganizao do CG em clulas de mamferos.
1. A rede trans se redistribui ao redor do centro
organizador de microtbulos (MTOC).
2. Demais componentes so transportados ao RE.
A BFA inibe a ativao de GTPase de recrutamente de
ARF1, impedindo a associao de COPI e clatrina.
Bloqueia a chegada na rede trans, mas no o transporte
retrgrado.
Mecanismo independente de COPI

Bibliografia
Bsica
Alberts, B.; Johnson, A.; Lewis, J.; Raff, M.; Roberts, K.; Walter, P. Molecular Biology of the Cell, 5th ed., Garland
Science, New York, pp. 749-779, e 723-74, 2008.
Lombello, C.B.; Loureno, L.B.; Carvalho, H.F. Complexo de Golgi, In: Carvalho, H.F. & Recco-Pimentel, S.M. A
Clula, 3 ed., So Paulo: Manole, pp. 337-353, 2013.
Lombello, C.B.; Carvalho, H.F. Retculo endoplasmtico, In: Carvalho, H.F. & Recco-Pimentel, S.M. A Clula, 3 ed.,
So Paulo: Manole, pp. 321-336, 2013.
Complementar
Alberts, B.; Johnson, A.; Lewis, J.; Raff, M.; Roberts, K.; Walter, P. Fundamentos de Biologia Celular, 2 edio,
Artmed, 2006.
De ROBERTIS, E.M.F. Jr.; HIB, J. Biologia Celular e Molecular, 4 edio, Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.
Junqueira, L.C.; Carneiro, J. Biologia Celular e Molecular, 8 edio, Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.
Lodish, H.; Berk, A.; Matsudaira, P.; Kaiser, C.A.; Krieger, M.; Scott, M.P.; Zipursky, L.; Darnell, J. Biologia Celular e
Molecular, 5a edio, Porto Alegre: Artmed, 2005.
Karp, G. Biologia Celular e Molecular, 3 edio, Barueri, SP: Editora Manole, 2005.
Persico, A.; Cervigni, R.I.; Barretta, M.L.; Colanzi, A. Mitotic inheritance of the Golgi complex. FEBS Letters 583:
38573862, 2009.
Pollard, T.D.; Earnshaw, W.C. Biologia Celular. Rio de Janeiro, RJ: Elsevier, 2006.
Salway, J.G. Metabolismo Passo a Passo, 3 edio, Porto Alegre, RS: Artmed, 2009.
Sallet, P.C.l. Prmio Nobel: dinamite, neurocincias e outras ironias. Rev. Psiquiatr. cln., 36: 7-40, 2009
Tin, M.A.S.; Cortelazzo, A.; Buckeridge, M.S. Occurrence of xyloglucan containing protuberances in the storage cell
walls of cotyledons of Hymenaea courbaril L. Rev. Bras. Bot., 23(4): 415-419, 2000