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INFORME DE PRCTICAS: OBSERVACIN DE HONGOS EN EL MOHO DEL

PAN Y DE LA FRUTA.
OBJETIVOS:
Observar microscpicamente y macroscpicamente del moho en el pan y fruta
que la mayora de estos hongos puede crecer en diferentes medios
descomponiendo y malogrando algunos alimentos
Observar directamente, con el microscopio ptico, diferentes formas y
estructuras de los hongos, as como utilizar diferentes tipos de reactivos para
ver mejor la estructura de los hongos y poderlos observarlos con diferentes
objetivos de 10x y 40x.
FUNDAMENTO:
Los hongos son organismos eucariotas y cada uno tiene al menos un ncleo y
Una membrana nuclear un retculo endoplasma tico, mitocondrias y un aparato
secretor, muchos son aerobios obligados o facultativos. Son quimiotrofos
secretores de enzimas que degradan una amplia variedad de sustratos
orgnicos en nutrientes solubles. Los hongos al proliferar asumen dos formas
bsicas que son la de levadura y la de mohos. Esta ltima forma ocurre por la
produccin de colonias filamentosas multicelulares integradas por tbulos
cilndricos ramificados llamados hifas, cuyo diametro vara de 2 a 10 um .recibe
el nombre de micelio la maza de hifas entremezcladas, acumulada durante la
fase de crecimiento activo. Algunas hifas se dividen forman clulas gracias a la
intervencin de estructuras cruzadas llamadas tabiques o septos.
Las hifas absorben sus nutrientes son las hifas vegetativas a diferencia de las
hifas areas sobresalen de la superficie del micelio y por lo comn poseen las
estructuras reproductivas del moho
Los mohos producen colonias con caractersticas propias como la rapidez de
proliferacin, textura y pigmentacin.
Es posible conocer el gnero de muchos mohos que afectan a humanos por el
examen microscpico de la ontogenia y la morfologa de sus esporas
reproductivas asexuales o conidios. Las levaduras son clulas nicas de forma
esfricas o elipsoidales mide de 3 a 15 um muchas de ellas se producen por
gemacin, y algunas especies producen yemas de manera caracterstica no se
desprenden y terminan por alargarse. Todos los hongos cuentan con una pared
esencial rgida que es el elemento que les da su forma .la pared est
compuesta en gran medida de capas de carbohidratos y tambin de
glucoprotenas y lpidos.
Dentro de este grupo, los gneros ms importantes son Mucor, Rhizopus y
Penicilium que se localizan sobre alimentos, materia orgnica en
descomposicin, etc. El primero de ellos da lugar al llamado moho blanco del
pan, el segundo al moho negro del pan y el ltimo al moho azulado.

1. Gnero Mucor Su micelio es blanquecino y de aspecto lanoso. Con la lupa


se pueden ver las hifas blancas entrecruzadas entre las que sobresalen
algunas provistas de esporangios en sus extremos. Es caracterstico de este
gnero el que, al romperse los esporangios, las esporas son arrojadas a
distancia. Al microscopio se pueden apreciar las hifas plurinucleadas, que
carecen de tabique de separacin.
2. Gnero Rhizopus: Son hongos zygomicetos, como los anteriores. Estos
mohos tienen el micelio grisceo y de aspecto algodonoso, menos compacto
que el anterior. Si se mira con lupa, pueden verse hifas claras junto con otras
coloreadas, que tienen en sus extremos esporangios negros muy llamativos.
Estos esporangios se abren de forma similar a los del gnero Mucor, pero no
tienen mecanismos para arrojar las esporas a distancia. Son caractersticas de
este gnero unas hifas de aspecto radicular, que penetran en el sustrato para
obtener agua y nutrientes, a la vez que fijan al moho. Con el microscopio se
pueden ver las hifas, no tabicadas, de gran tamao, siendo ms patentes las
portadoras de los esporangios.
3. Gnero Penicillium Este gnero de hongos es de tipo ascomiceto. Las hifas
son tabicadas y ramificadas. Los esporangios tienen aspecto de cepillo,
presentan unos ensanchamientos sobre los que se insertan, como dedos de
una mano, unos apndices cortos, llamados esterigmas. Cada uno de ellos se
contina en una serie de esferitas, denominadas conidios, que sirven para la
reproduccin.
MATERIAL DE LABORATORIO:
Microscopio.
Portaobjetos y cubreobjetos.
Pinzas y palillos.
Placa de Petri.
Cuentagotas.
REACTIVOS:
K.O.H 10%
Lugol
Material Biolgico:
Moho (pan, fruta, camote)
Gaseosa (con moho)
MICROORGANISMOS EN EL PAN:
El pan constituye por su contenido
sales
minerales
y
vitaminas, un medio slido idneo para el desarrollo de numerosas
especies microbianas. Pero podemos decir que los tipos de alteraciones

microbianas ms frecuentes en e l p a n s o n e l " e n m o h e c i m i e n t o " ,


c u a n d o l o s a g e n t e s m i c r o b i a n o s s o n m o h o s (Hongos), y el
"ahilamiento" cuando se trata de bacterias. A ttulo de curiosidad, conviene
sealar tambin la enfermedad del pan conocida con el nombre de
pan sangrante, enfermedad que se presenta muy raramente y que
se debe al desarrollo de una bacteria, Serratia marcescens, que
produce un pigmento

PROCEDIMIENTO:
Introduce en un taper una rebanada o un pedazo de pan, fruta cortada, etc.
humedecido abundantemente con agua y djalo en el taper tapado o en una
bolsa plstica
Pasado este tiempo vuelve a humedecerlos con agua y tapa el taper. Mantn el
taper en reposo a temperatura ambiente durante 20 das aproximadamente.
Aparecer el moho sobre el pan, fruta, etc.
Colocar sobre un portaobjetos una gota de solucin de lugol y KOH no
demasiado grande para evitar que el cubreobjetos flote y la preparacin quede
demasiado gruesa. Tambin se puede ser con lactofenol.
Observar el microscopio las formas de los hongos con objetivo de 10x y 40x.
Aparte se agreg en un portaobjeto una gota del sedimento de una muestra de
orina se cubri con el porta objeto
RESULTADOS:
Obtuvimos en cada pedazo de pan, fruta, camote la formacin de moho que
se puede observar macroscpicamente la presencia de moho blanco y negro.
Estas muestras que obtuvimos de moho nos sirvieron para observar
microscpicamente las formas, estructuras de los hongos que son capaces de
formar el moho.
Se observ la estructura de conidios de risophus, hifas y un conjunto de hifas
que formaban micelios en la fruta que fue el limn se observ
esporangiosporas y esporas.
En el camote tambin se observ la presencia de esporangiosoras

anexos

SEGUNDO INFORME DE PRACTICAS: LEVADURAS


PRESENTES EN CHICHA DE JORA Y ORINA

OBJETIVOS

Observar y reconocer las levaduras utilizando la coloracin Gram.


Entender que hay algunas levaduras que son importantes para la
fermentacin de la chicha y que forman parte del ambiente, de las frutas
y del ser humano.

FUNDAMENTO:
Las levaduras son hongos muy difundidos en la naturaleza. Pueden hallarse
sobre las frutas. Las flores, los granos, en el suelo, en el intestino de los
animales, etc. La importancia econmica de las levaduras es grande y adems
de las clsicas utilizaciones para la fabricacin de pan y la fermentacin de
zumos de frutas. En la actualidad son aprovechadas para sintetizar algunas
vitaminas, grasas y protenas a partir de azcares sencillos y nitrgeno
amoniacal.
La reproduccin puede ser asexual (por gemacin y fisin) y sexual (por
ascosporas). No todas las levaduras tienen un ciclo de reproduccin sexual,
algunas especies como Cndida albicans se reproducen slo vegetativamente.
Aunque la mayora de las levaduras son beneficiosas. Las hay perjudiciales
tanto para vegetales como para animales. Cndida albicans es la causante
ms frecuente de enfermedades por levaduras en el hombre. Produce
infecciones en piel, uas y mucosas. Se combate con antibiticos como
la nistatina y la anfotericina O. Este ltimo es muy txico y raras veces el
paciente, en un tratamiento prolongado, queda a salvo de efectos secundarios
como fiebre, malestar general, trastornos de la funcin renal y tromboflebitis.
MATERIALES:

Cubreobjetos
Portaobjetos
Asa bacteriana
Mechero
Guantes

REACTIVOS:

o
o
o
o

COLORACIN GRAM:
cristal violeta
Lugol
Alcohol acetona
safranina
Aceite de inmersin

MUESTRA:

Concho de chicha de jora


Sedimento de orina
Coloracin Gram:

OBJETIVOS

co m p r e n d e r l o s p a s o s n e c e s a r i o s p a r a r e a l i z a r l a t i n c i n
d e Gram

Reconocer los microorganismos Gram positivos y negativos, al igual


de la aplicabilidad clnica de la tincin
Reconocer los distintos modelos de pared bacteriana.

INTRODUCCIN
De gran importancia en Microbiologa porque permite diferenciar dos grandes
grupos de bacterias (Gram+ y Gram-), segn se comporten ante esta tincin. El
fundamento radica en la diferente estructura de la pared celular de ambos
grupos: las bacterias Gram+ tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su
pared, mientras que las bacterias Gram- tienen una capa de peptidoglicano
ms fina y una capa lipopolisacardica externa. Tras la tincin con el primer
colorante (Cristal violeta) se efecta un lavado con alcohol acetona que
arrastrar al colorante slo en las Gram (-), mientras que en las Gram (+) el
colorante queda retenido y las clulas permanecern azules. Las clulas Gram
(-) se teirn despus con un colorante de contraste (safranina) para que
puedan observarse.
PROCEDIMIENTO
I. prepara las muestras siguiendo estos pasos:
1. en un portaobjeto hacer una fina extensin (frotis) con la muestra del concho
de la chicha y del sedimento de la orina y dejar secar.
3. Fija este frotis dndole varios pases a los portas sobre la llama del mechero,
con la muestra hacia arriba.
II Tie ahora los frotis fijados mediante los siguientes pasos:
1. Cubre ambos frotis con cristal violeta durante 3 min. Se retirar el colorante
mediante un suave lavado con agua, deslizando el agua sobre el porta, para no
desprender la muestra.
2. cubrir ahora con Lugol durante 1 min., y despus se realizar otro lavado
suave. Todas las clulas se teirn de violeta.
2. Se retirar el colorante con alcohol acetona, gotendolo por el portaobjetos,
hasta que las gotas que salen no tengan casi color. Las clulas Gram- pierden
el colorante violeta y quedarn incoloras. Las Gram + seguiran violeta.
3. Aade una gota de agua a la preparacin y cubre las preparaciones 2 min.
con safranina (colorante de contraste).Finalmente, lava el colorante con agua.
Este colorante slo entrar en las bacterias Gram , que quedarn rojas. Las
Gram + seguirn violetas.

Seca las preparaciones sobre papel de filtro y obsrvalas con microscopio


utilizando el objetivo de inmersin. En esta tincin diferencial las bacterias
Gram aparecen rojas y las Gram + violeta. Observar (100). Lugol
CONCLUSIN
La coloracin Gram nos permite diferenciar entre las bacterias, levaduras Gram
positivas de las Gram negativas.
Nos permite ver las estructuras de ciertas bacterias, levaduras etc.

Anexos: