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ATMSFERA ,
OCEANOGRAFA Y
CIENCIAS FSICAS
Introduction
The energy coming from the Sun plays an important role in the climatic system
as a whole, more specifically in the Earth energy balance. One of the energy term presents
in this balance is the soil heat flux, which is an important component of surface energy,
mostly in regions with arid, bare or thinly vegetated soil surfaces (Anandakumar et al.
2001). The soil heat flux is comprehended as the heat exchanged occurred between
different depths into the soil, which both present different values of temperature
(Bhumralkar, 1975).
Accuracy in estimative of soil thermal properties is very important for numerical
modelling studies, since the heat sources affecting the atmospheric systems is the
exchange of sensible and latent heat between the surface and atmosphere. The direction
of these energy fluxes is primarily settled by the thermal conditions of the ground and the
adjacent air (Bhumralkar, 1975). However, such estimates are not easily available,
especially in such places as Antarctic region, which offers extreme climatic conditions
for measurements in situ and heterogeneity in the surface properties.
Prosek et al. (1998) showed in a study about the components of energy balance
budget in a vegetation oasis at Polish Station (Henryk Arctowski), King George Island,
South Shetland Islands. The study was taken in summer season of 1994/1995 and they
highlighted the influences of the energy balance on the temperature conditions of the soil
substrata in the Antarctic region. They verified that there is a rapid reaction of the soil
temperature to the radiation balance and sensible heat flux in 5 cm depth. In addition, the
surface layer conditions and soil substrate play important roles to the habitat of the
Antarctic vegetation oasis, which the results can be interpreted in pedological or botanical
studies applied to this type of environment.
The study of the soil heat flux in an Antarctic region is beyond a contribution to
the forecast numerical models. A better improvement of the important variable in the
energy balance, contributes to understand the great environment to the Antarctic
vegetation and its permanence in this region. Thus, this work proposes to evaluate a
method of hysteresis to estimate the soil heat flux and compare with direct measures in
Ferraz Station (EACF - 620507 S, 582333 W, 20 m about mean sea level) during
summer season (Dec-Jan-Feb-Mar, DJFM) of 2013/2014. The data used in this work
refers to the ETA Project (financial support by CNPq and INCT-APA).
Methodology
The measurements was taken from instruments installed in the EACF, located in
the King George Island, which is part of the South Shetland Islands in Antarctic
Peninsula.
The data used in this study was collected in situ during December 2013 to March
2014 (summer season - DJFM).The net all-wave radiation (Rn) data was obtained from a
(NRLite2) installed in a micrometeorological tower (3.4 m of height), while the soil heat
flux (G) was measured using Hukseflux HFP01, 0.05 m depth with time response of 4
minutes. The sampling frequency was stored as 5 min average by a datalogger (CR5000,
Campbell Scientific Inc.) using the local time (- 04 UTC) as standard time. The
instruments installed were connected to this datalogger, which was connected to a laptop
inside the Meteorology laboratory, that is responsible for transmit the data instantly to the
Air-Sea Interaction Laboratory in IAG/USP.
Sometimes G measurements is not available due to difficulties encountered with
observational measurements, and for that reason, empirical relationships between G and
Rn can be used to obtain G. Following this concept, Grimmond et al. (1991) proposed an
indirect method called as the Objective Method of Hysteresis (OHM to estimate G
through values of Rn. The OHM model is based on the following expression:
= 1 + 2
+1
0.5 ( 1 ), and 1 , 2 , and
where
+ 3
Month
December
January
February
March
a1
0.17
0.13
0.12
0.1
Coefficient
a2
-0.09
-0.03
-0.1
-0.068
a3
10.5
11.6
6.0
4.7
Figure 1. Average diurnal variation of (a) soil heat flux (Gobs) and (b) net all-wave radiation (Rn) for summer
period (DJFM) of 2013/2014. The vertical bars indicate the statistical error.
The OHM model presented good agreement with the G observed diurnal
variation values during summer period of 2013/2014, with anticlockwise variation along
the day (Fig. 2).
Figure 2. Hysteresis loop relations between soil heat flux (G - observed and modelled) and net all-wave
radiation (Rn) for summer period 2013/2014 in EACF: (a) December, (b) January, (c) February, and (d)
March. The numbers represent the time (hour).
Figure 3. Soil heat flux (Gobs) observed vs modelled (Gmod) using the OHM method for summer period
2013/2014 in EACF. (a) December, (b) January, (c) February, and (d) March. The gray straight lines
represent the equations on the right side.
Conclusions
The OHM model was applied for G estimation, during summer period of
2013/2014, and presented good agreement with the direct measurements of G in EACF.
Therefore, this method can be applied when in situ net radiation measurements are
available and not soil heat flux measurement in the EACF. In the future, it will be tested
the performance of the found coefficients for others summer periods. The idea is finding
the best coefficients to estimate the soil heat flux in EACF using only net radiation.
Acknowledgement
The first author acknowledge the scholarship from CAPES. All authors would like to thank the INCT-APA, CNPq
(574018/2008-5) and FAPERJ (E-16/170.023/2008) and CNPq (305357/2012-3, 309079/2013-6 and 407137/2013-0).
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Laboratrio de Estudos dos Oceanos e Clima, FURG, Rio Grande, RS, Brasil
renata_eidt@hotmail.com; rodrigokerr@furg.br; iole.orselli@furg.br
1. Introduo
Desde o perodo pr-industrial vem ocorrendo um aumento significativo na
concentrao de dixido de carbono (CO2) na atmosfera (Emerson & Hedges, 2008).
Em se tratando de estudos do clima global, importante entender os processos que
envolvem trocas na interface oceano-atmosfera e o papel dos oceanos nesse cenrio.
Atravs do sistema carbonato, os oceanos contribuem para o controle da presso
parcial de CO2 (pCO2) na atmosfera (Emerson & Hedges, 2008). O CO2, ao reagir
com a gua, forma um conjunto chamado de carbono inorgnico dissolvido total,
composto por CO2 dissolvido, cido carbnico (H2CO3), ons bicarbonato (HCO3-) e
ons carbonato (CO32-) (Williams & Follows, 2011). A concentrao do gs no oceano e
na atmosfera ir determinar a transferncia de gases entre esses ambientes (Steele et al.,
2009).
As regies de altas latitudes so caracterizadas por locais tanto de absoro
quanto de emisso de CO2, tornando-se importantes nos processos de trocas gasosas com
a atmosfera pela sua grande rea ocenica e baixa temperatura, a qual contribui para a
solubilidade dos gases (lvarez et al., 2002; Legge et al., 2015). Neste aspecto, o oceano
Austral apresenta diferenas nos fluxos de CO2 na interface oceano-atmosfera em funo
das caractersticas hidrogrficas de cada regio e das variaes sazonais e interanuais
(Carrillo & Karl, 1999).
Elevadas taxas de produo primria, geralmente associadas a perodos de vero
no oceano Austral, podem contribuir para que ocorra absoro de CO2 atmosfrico pelo
oceano (Legge et al., 2015). J uma maior liberao de CO2 para a atmosfera pode
ocorrer em locais que sofrem processos de mistura vertical mais intensos durante o
inverno (McNeil et al., 2007; Legge et al., 2015) e tambm em reas de ressurgncia
(Takahashi et al., 2009). Regies costeiras da Antrtica apresentam ainda variaes
sazonais na cobertura de gelo, o que interfere nos fluxos entre atmosfera e o oceano
(Takahashi et al., 2009).
Por se tratar de uma regio costeira, o estreito de Gerlache apresenta ampla
relevncia para estudos de fluxos de CO2 no oceano Austral (e.g. Carrillo & Karl, 1999;
lvarez et al., 2002), sendo um importante local de encontro de guas de diferentes
origens. Alm disso, essa regio caracterizada por uma alta taxa de produtividade
primria (Varela et al., 2002). Estudos realizados por lvares et al. (2002) para os
perodos de vero de 1995 e 1996 apresentam uma tendncia absorvedora na regio,
com alta correlao inversa entre fluxos de CO2 e O2 durante maior atividade
fitoplanctnica.
As altas taxas de produo primria encontradas na regio do estreito de
Gerlache se mostram muito importantes para o entendimento de processos de fluxos
entre o oceano e a atmosfera. Dessa maneira, a quantificao da pCO2 na gua (pCO2sw)
nesse local torna-se uma ferramenta til para estimativas de fluxos de CO2, contribuindo
para um melhor entendimento sobre o ciclo do carbono da regio Antrtica e o estudo do
clima da terra.
2. Material e mtodos
O trabalho utiliza dados amostrados na regio do estreito de Gerlache durante o
cruzeiro oceanogrfico do projeto NAUTILUS, em Fevereiro de 2015, perodo de vero
no Hemisfrio Sul. As estaes oceanogrficas localizam-se a oeste da Pennsula
Antrtica, ao longo do estreito de Gerlache e do Canal de Scholaert.
Perfis verticais da coluna dgua foram realizados em cada estao a partir do
sistema CTD/Rosete. Amostras discretas de gua superficial foram coletadas em ~5m de
profundidade, para posterior anlise e clculo indireto da pCO2sw. Os procedimentos
durante a amostragem seguiram as recomendaes do SOP 1 proposto por Dickson et al.
(2007). As amostras foram fixadas com uma soluo de cloreto me mercrio (HgCl2)
para impedir possveis alteraes na composio de carbono causadas por atividade
biolgica, e os frascos foram ento vedados e armazenados a 4C.
Em laboratrio as amostras foram submetidas a anlise de alcalinidade total (AT)
e carbono inorgnico dissolvido total (CT) a partir de titulao em cela fechada, seguindo
o protocolo SOP 3a proposto por Dickson et al. (2007). A titulao foi feita com uma
soluo salina de cido clordrico (HCl) com temperatura da amostra dentro da cela
mantida a 25C. A partir dos valores de AT e CT foi possvel, ento, calcular os valores de
pH e pCO2 para cada ponto amostrado.
O clculo do pCO2sw foi realizado utilizando-se a ferramenta CO2calc (Robbins
et al., 2010). Os dados de entrada foram AT e CT, obtidos atravs das titulaes
realizadas em laboratrio, e tambm temperatura, salinidade e presso, obtidos atravs
dos valores gerados pelo CTD para a determinada profundidade.
3. Resultados
A regio mais a sudoeste do estreito de Gerlache apresenta um padro de
temperaturas mais elevadas do que a nordeste e com guas superficiais de salinidade
menor do que nas estaes mais prximas ao estreito de Bransfield. Os maiores
valores de fluorescncia na superfcie foram encontrados ao longo do estreito de
Gerlache e mais prximos pennsula Antrtica; j no Canal de Scholaert e na poro
mais afastada da costa, os valores foram menores.
Em geral, tanto os valores de AT quanto de CT se mantiveram mais baixos na
regio sudoeste do estreito e entre as ilhas Anvers e Brabant, e mais altos na poro
nordeste do estreito (Fig. 1). Resultados de CT estiveram abaixo de 2200 mol kg-1 na
regio sudoeste, e acima de 2200 mol kg-1 na regio nordeste. Os menores resultados
de pCO2sw foram de aproximadamente 310 atm, e os maiores valores chegaram a
mais de 500 atm. As estaes com menor pCO2sw esto localizadas na poro mais
sudoeste do estreito; maiores valores de pCO2sw foram encontrados na rea mais a
nordeste.
A maior correlao linear encontrada entre as variveis hidrogrficas locais
(salinidade, temperatura, oxignio e fluorescncia) e os resultados obtidos de pCO2sw
foi com a salinidade (r2 = 0.54). Em geral, regies com superfcies mais salinas
apresentaram os maiores valores de pCO2sw. Os locais de superfcie menos salina so
tambm regies que apresentaram maior estratificao vertical desse parmetro.
4. Discusso
Os perfis verticais gerados pelos sensores do CTD demonstram a influncia de
massas de gua com diferentes origens na regio do estreito de Gerlache. A poro
sudoeste recebe aporte de guas ocenicas superficiais relativamente mais quentes
(i.e. provenientes do mar de Bellingshausen), enquanto a parte nordeste sofre
influncia das guas de plataforma, relativamente mais frias (i.e. provenientes do
estreito de Bransfield) e alteradas por misturas com guas de degelo continental.
Os valores de AT e CT da regio do estreito de Gerlache variaram
espacialmente, assim como os valores de pCO2sw. Estes resultados podem estar
associados a variaes de caractersticas das guas, como temperatura, salinidade,
atividade biolgica e derretimento de gelo. Os resultados encontrados para CT
representam valores relativamente altos, considerando-se que a amostragem foi feita
durante um perodo de vero, onde h um aumento na produo biolgica.
Diferentemente deste trabalho direcionado para a regio do estreito de Gerlache, o
estudo realizado por Legge et al. (2015) para a regio de Ryder Bay, a leste da
Pennsula Antrtica, entre 2010 e 2014, indica menores valores de CT durante o vero,
abaixo de 2100 mol kg-1.
Comparando-se os resultados obtidos com o estudo conduzido por lvarez et
al. (2002) durante o cruzeiro FRUELA no vero de 1995 e 1996, os valores de pCO2sw
apresentaram um aumento significativo at o ano de 2015; enquanto os valores de
pCO2sw estimados pelos autores atingiram em 1995 um mximo de 340 atm, em
2015 a maior parte da regio apresentou valores superiores a este. Os locais de
menores valores de pCO2sw (poro sudoeste) coincidem com os de valores mnimos
de pCO2sw encontrados por lvarez et al. (2002).
5. Concluses
O presente trabalho evidencia as caractersticas de uma regio de extrema
relevncia em se tratando de processos evolvendo trocas entre o oceano e a atmosfera.
Os resultados apresentados referem-se a resultados preliminares, onde a continuao
desse projeto visa a quantificao dos fluxos de CO2 na regio e a caracterizao do
local como fonte ou sumidouro de CO2 durante o perodo de estudo, bem como a
verificao na coluna de gua do nvel de acidificao destas guas. Sendo uma rea
ocenica de baixas temperaturas e com significativa produtividade biolgica, o
estreito de Gerlache representa um local de estudo importante para melhor se
compreender um cenrio de rpidas mudanas climticas.
Agradecimentos
Agradeo a todos os pesquisadores que participaram das coletas de campo e
anlises qumicas em laboratrio, a tripulao do NPo Almte Maximiano durante o
cruzeiro NAUTILUS I, e ao CNPq por contribuir financeiramente com a execuo do
projeto atravs da bolsa de iniciao cientfica.
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actan como barreras que limitan el intercambio de aguas intermedias y profundas (Zhou,
Niiler, & Hu, 2002).
Figura 1. Diagrama T-S con isopicnas en el que se distinguen las masas de agua en el estrecho de
Gerlache
Al norte del estrecho se detectaron AASW, las cuales se extienden a lo ancho del mismo
hasta los 500m de profundidad. Estas aguas se extienden hacia la parte central hasta el sur
de isla Brabante; de la misma forma entre la isla Brabante e isla Anvers, se observ un
encuentro entre aguas circumpolares profundas (Circumpolar Deep Water, CDW) y
AASW.
Por otra parte, desde la superficie hasta el fondo marino se conservan temperaturas ms
fras, mientras que una barrera de agua superficial ms caliente y salina, se observ en el
rea ms cerrada del estrecho en su zona central (Figura 2). Esta se extiende desde la punta
oriental de isla Anvers hasta baha Paraso; una barrena similar se forma al norte del
estrecho, lo que genera una piscina clida dentro del estrecho que va aproximadamente
hasta los 30 m de profundidad.
Este marcado frente fue encontrado por Varela (2002) en la entrada NE del estrecho de
Gerlache, en la confluencia con Bransfield. Este frente separa agua ms fresca, ms salina y
verticalmente ms homognea, como son las del estrecho de Bransfield, de las aguas del
centro del estrecho de Gerlache, la cual es estable debido a los aportes de agua dulce
generada por el deshielo de los glaciares.
En general, los primeros 50 m de profundidad en la columna de agua del estrecho de
Gerlache se caracteriza por temperaturas >0C y fuertes cambios en los gradientes de
Para las mediciones registradas hasta los 100 m de profundidad, se observ que la
temperatura en la columna de agua es >0C y en algunos puntos se registraron temperaturas
de hasta 2C (Figura 3).
En la piscina clida se registr un mayor nmero de avistamiento de especies de ballenas;
en las zonas costeras protegidas como las de la Pennsula Antrtica, especialmente en los
Estrechos de Gerlache y Bransfield, eventos meteorolgicos como el viento y las tormentas,
son menos importantes y por lo tanto la profundizacin de la capa de mezcla superior
(UML) y los procesos de adveccin se minimizan, lo que permite el desarrollo de
importantes floraciones de fitoplancton (Holm-Hansen & Mitchell, 1991).
En una cuenca de rea limitada como es el estrecho de Gerlache, el aporte de agua dulce
puede tener un efecto significativo sobre las propiedades del agua de superficie. Las altas
concentraciones de oxgeno de esta piscina podran estar fuertemente influenciadas por la
presencia de pigmentos fotosintticos y nutrientes en los metros superiores de la columna
de agua (Figura 4). Respecto a lo anterior, diferentes anlisis complementarios continan en
desarrollo.
Este trabajo fue posible gracias a la Armada Nacional Colombiana, la Direccin General
Martima y la Comisin Colombiana del Ocano, as como de todas las personas que
participaron directa e indirectamente en la realizacin de la primera expedicin colombiana
a la Antrtica.
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REIS, T. C.
ALVAREZ, C. E.
Universidade Federal do Esprito Santo, Laboratrio de Planejamento e Projetos LPP/ UFES, Brasil.
Introduo
Objetivo
Metodologia
Categorias de danos
Total
Sade Humana
Qualidade dos ecossistemas
Recursos
Unidad
e
Pt
Pt
Pt
Pt
Total
Ao
PUR
Tinta
36,506
16,669
5,75703
14,0799
23,4726
10,5627
5,43628
7,47363
10,4815
4,33082
0,19897
5,9517
0,78691
0,47997
0,03394
0,27301
Grfico: Normalizacin de los impactos ambientales del ciclo de vida del sistema presentado en
categoras de daos.
Graphic 2:Normalization of the environmental impacts the life-cycles system presents in categories of
damage.
Os potenciais impactos ambientais sobre a sade humana (16,669 Pt) esto relacionados
com o processo de emisso pela produo do ao utilizado no painel sanduche (10,56
Pt), resultando na liberao de compostos inorgnicos respirveis (13,2 Pt). Sobre a
qualidade dos ecossistemas (5,75 Pt), tambm no processo de fabricao do ao, resulta
o impacto com a ecotoxicidade (5,38 Pt). Quanto aos recursos (14,07 Pt), o impacto
incide sobre o uso de combustveis fsseis (8,18 Pt), na fabricao da espuma rgida de
poliuretano (PUR), e sobre ao uso de minerais (5,89 Pt), na fabricao do ao. Ainda,
conveniente avaliar os valores incidentes dos transportes.
5
Concluso
Observou-se que, hierarquicamente, o processo de fabricao do ao utilizado nos
painis sanduche corresponde ao fluxo de maior significncia no processo, seguido
pelos impactos das emissividades provenientes dos transportes a longas distncias.
Como pontos passveis de melhoria no caso especfico da EACF, prope-se: a busca por
ao que contenha material reciclado ou substituio do mesmo por material que
corresponda aos requisitos de desempenho; a seleo de fabricantes de origem mais
prxima (como pases da Amrica do Sul, dentre eles, o Brasil) permitindo reduzira
distncia percorrida pelo transporte, e consequentemente, reduzindo consideravelmente
os impactos gerados; a gesto do ps-vida da espuma rgida de PUR de maneira a
encontrar funcionalidade para seus resduos; a disseminao do estudo da ACV junto
indstria da construo civil, a fim de buscar melhorias na qualidade ambiental do que
se projetado e; o incentivo produo de base de dados nacional, visando contribuir
para a aproximao e clareza dos resultados obtidos por softwares internacionais, alm
de contribuir para a disseminao da metodologia no Brasil.
Agradecimentos
Ao INCT-APA, FAPEES e Secirm.
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Souza, J. E. B de. 2008. Brasil na Antrtica: 25 anos de histria. So Carlos: Vento Verde Editora.
Introduccin:
Debido a las particularidades del campo geomagntico, los detectores de partculas situados
en latitudes altas permiten la observacin de los rayos csmicos (RC) con energas ms bajas
que los situados en latitudes medias o bajas. Por lo tanto, la Antrtida es un lugar privilegiado
para estudiar RC que tienen las energas ms bajas que se pueden observar desde el nivel del
suelo. El Observatorio gigante latinoamericano (LAGO) ver [Asorey et al.] consiste en una
red de detectores Cherenkov en agua (DCA) ubicados en nueve pases de Amrica Latina,
para estudiar con extremo detalle el flujo de CR desde el nivel del suelo, (ms detalles
respecto de los sitios pueden encontrarse en [Sidelnik et al.]). Los principales objetivos
cientficos estn orientados a abordar varios problemas de la astrofsica, la fsica espacial y
fsica atmosfrica. En particular, LAGO ha comenzado a desarrollar un programa de Clima
Espacial. Un proyecto para instalar CDA en la estacin Argentina Marambio, ubicada en la
Pennsula Antrtica, est siendo desarrollado como el primer nodo Antrtico de LAGO. En
este trabajo, presentamos varios aspectos del proyecto, incluyendo la informacin sobre el
sitio, el detector, y los estudios de las propiedades atmosfricas, que nos permiten caracterizar
varias propiedades tiles de esta ubicacin. Los resultados de este nuevo sitio LAGO nos
proporcionarn informacin importante para la meteorologa espacial, y los conocimientos
para comprender mejor el acoplamiento Sol-Tierra. Cuando los rayos csmicos primarios
interactan con las partculas de fondo de la atmsfera, producen una gran cantidad de
partculas secundarias, generada a partir de la interaccin entre las primarias y los
componentes atmosfricos. Por lo tanto, con el fin de ser capaz de obtener una correcta
interpretacin de las seales de los detectores de partculas, como los de la red LAGO, es
necesario cuantificar con la mayor precisin posible estos efectos, en particular los
producidos por el campo geomagntico y por la atmsfera. La caracterizacin de los efectos
del campo geomagntico puede encontrase en [Masias-Meza & Dasso]. En este trabajo se
describe el lugar donde se instalarn los detectores, los estudios realizados para la
caracterizacin del sitio, focalizndonos en la comparacin del perfil de la presin en altura
observada en la atmsfera local mediante sondeos realizados por globos, con los tpicos
disponibles en los simuladores cannicos de cascadas secundarias con su respectiva
discusin. Por ltimo se presenta un resumen y las conclusiones del presente trabajo.
Descripcin de sitio:
La estacin Marambio del sector Antrtico Argentino se encuentra en Lat. 64 14'24.96 "S
y 56 37'30.34 "O, a 196 metros sobre el nivel del mar. Debido a las bajas temperaturas
durante el invierno, los DCA deben ser aislados trmicamente para evitar la congelacin
incontrolada del agua y la consecuente prdida de sensibilidad. El diseo de laboratorio
permite la instalacin de hasta tres DCA y equipo adicional, mientras que en esta primera
etapa se desplegarn slo dos DCA, un detector proporcionado por el Instituto de Astronoma
y Fsica del Espacio (IAFE, UBA-CONICET) y el otro por el Centro Atmico Bariloche
(CAB, CONEA). El diseo del edificio tiene en cuenta la accesibilidad mediante pasarela,
las caractersticas del permafrost, y materiales ptimos de construccin y montaje. Toda la
estructura estar anclada al permafrost con una profundidad de al menos un metro y sobreelevada otro metro sobre el nivel del suelo para disminuir el impacto de la acumulacin de
nieve. El anlisis de los datos de los DCA en Antrtida nos permitir hacer estudios de la tasa
de rayos csmicos de fondo, similares a los que LAGO est haciendo en diferentes sitios (Por
ejemplo, en Chacaltaya [Sarmiento-Cano et al.]), pero con mayores tasas de conteo y con el
impacto de partculas primarias con energas ms bajas.
Caracterizacin de la atmsfera local:
Las simulaciones numricas de las cascadas de partculas csmicas en la atmsfera terrestre
requieren un detallado conocimiento del perfil de altura de presin en el sitio. Algunos
modelos numricos (por ejemplo el cdigo CORSIKA) necesitan informacin especfica
sobre los perfiles de altura del sitio simulado. El modelo CORSIKA ha incluido informacin
para alrededor de 10 regiones de todo el planeta de los perfiles de presin atmosfrica listos
para usarse. En la actualidad, una tpica simulacin CORSIKA en el sitio LAGO Marambio
se puede hacer asumiendo uno de estos modelos atmosfricos disponibles. Con el fin de
lograr una representacin detallada para el perfil en este sitio, se analizaron los datos de
sondeos en globo medidos a las 12 Tiempo Universal (UTC) por el Servicio Meteorolgico
Nacional Argentino (Servicio Meteorolgico Nacional, SMN) a partir del ao 1998 hasta el
2014, en Marambio. Hemos calculado el perfil en altura para la densidad basado en los
perfiles de presin y de temperatura observados a partir de los sondeos de la siguiente
manera: Teniendo en cuanta la composicin tpica de la atmsfera, sus masas moleculares y
la ley de Dalton de las presiones parciales de los gases ideales, fue posible a partir de los
datos de presin y de temperatura para cada altitud, calcular la densidad a esa altura,
repitiendo el procedimiento para las diferentes altitudes.
Luego comparamos nuestros resultados con tres modelos atmosfricos predefinidos de
CORSIKA: a) "Estndar", b) "Sub-rtico de verano ', y c) "Sub-rtico invierno '. Haciendo
las comparaciones utilizando las estaciones apropiadas. Encontramos que el perfil del modelo
"Sub-rtico Invierno 'se desva significativamente del perfil local observado (entre 10% y
40% para altitudes mayores que 25 km). Sin embargo, la desviacin de los perfiles de
densidad de los modelos 'Estndar' y 'Sub-rtico de verano', respecto a los observados con
los globos de SMN en Marambio, no es tan alta. Sin embargo, las diferencias encontradas
pueden afectar la simulacin de las cascadas de rayos csmicos. En particular la diferencia
es de menos de ~ 10% para el modelo 'Estndar' y (menos que ~ 5%) para el modelo "Subrtico de verano '. Las diferencias ms grandes corresponden a altitudes mayores. Y en
general los modelos ligeramente subestiman las observaciones en altitudes ms bajas
(inferiores a ~ 10 Km) y las sobreestiman significativamente a altitudes superiores a ~ 15km,
donde los detalles de las simulaciones de las cascadas de reacciones secundarias son
cruciales. Los resultados presentados pueden ayudar a tomar la decisin de que modelo preestablecido usar, y tambin para construir un nuevo modelo para Marambio, basado en las
observaciones locales que permitirn mejorar la calidad de la simulacin numrica de los
rayos csmicos en la atmsfera de este sitio.
Resumen y Conclusiones:
En este trabajo presentamos el proyecto de la colaboracin LAGO para la instalacin de los
CDA en la Antrtida Argentina. Tambin presentamos algunos estudios para este sitio que
permitirn una mejor interpretacin de los datos adquiridos, en particular el estudio de las
condiciones atmosfricas tpicas de este sitio usando observaciones de sondeos con globos y
las comparaciones con los modelos tpicos CORSIKA, cuantificando tambin las diferencias
relativas. Llegamos a la conclusin de que el modelo "Sub- rtico de verano 'es el ms
apropiado en Marambio para los meses de Diciembre, Enero y Febrero. El nuevo sitio de
LAGO en Antrtida podr observar eventos fsicos que son de gran inters en el clima
espacial y las caracterizaciones realizadas permitirn una mejor interpretacin de los datos.
Agradecimientos: Este trabajo fue parcialmente apoyado por un subsidio de Argentina PICT2013-1462. Agradecemos al SMN por proporcionar los datos de los sondeos de Marambio,
y tambin a Viviana Lpez por ayudarnos a comprender su formato
Referencias:
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ICRC Proc., vol. in press, 2015.
Masias-Meza J. and Dasso S., Geomagnetic effects on cosmic ray propagation under
different conditions for Buenos Aires and Marambio, Argentina, Sun and Geosphere, vol.
9, pp. 4147, Jan. 2014.
INTRODUO
A Antrtica a regio mais remota, mais desrtica, mais ventosa, mais estril e de mais
alta superfcie mdia do planeta (Alvarez, 1995), sendo reservada paz e cincia
(MEC, 2006).A presena humana no continente justifica-se por diversos fatores, como a
riqueza de conhecimento que o meio ambiente antrticopode proporcionar atravs das
pesquisas cientficas, sendo essa a maior razo da presena brasileira na regio (Alves,
2009).Apesar de ser um local inspito, o interesse pelo continente incentivou o
desenvolvimento de tecnologias que permitem a permanncia humana em condies
adequadas e seguras.Assim, o conforto ambiental assume um aspecto fundamental nas
edificaes antrticas, principalmente quando considerando que quanto maior for a
dificuldade de adaptao do indivduo, maior ser sua sensao de incmodo (Viana e
Gonalves, 2007), prejudicando com isso, o rendimento da produo cientfica.Alguns
aspectos que no meio urbano podem at passar despercebidos, na Antrtica admitem
uma dimenso muito maior. A iluminao natural representa um desses aspectos,
tornando-se um elemento essencial de conforto, principalmente, quando somada
dificuldade para obteno de energia eltrica no local para acionamento de sistemas
artificiais de iluminao.
Entretanto, para um correto projeto de iluminao natural, deve-se levar em
considerao o stio de implantao do edifcio, visto que as caractersticas do entorno
influenciam na captao da luz natural pelas aberturas laterais (Pereira, Pereira e Claro,
2008;Maioli, 2014).Observa-se que o solo local apresenta caractersticas diferenciadas
ao longo do ano, sendo encoberto por neve em um perodo e com solo natural aparente
em parte do vero. Essa diferena de material presente na superfcie influencia na cor
aparente do solo, e consequentemente, na reflexo da luz proveniente desse componente
da paisagem, justamente em parte do perodo de ocupao da edificao.
Visto que as superfcies externas podem contribuir significativamente para a reflexo da
luz para o interior do edifcio (Pereira, Pereira e Claro, 2008), esta pesquisa teve por
objetivo verificar,atravs de software de simulao,o nvel de iluminao natural
alcanado dentro de um dos principais ambientesde trabalho de um refgio antrtico,
sujeito s diferentes condies apresentadas pela superfcie do solo externo. Os
resultados obtidos podem servir de parmetro para o desenvolvimento de projetos de
edificaes instaladas em locais de condio semelhante, situao bastante comum na
Pennsula Antrtica e em parte das regies litorneas da poro continental.
MATERIAIS E MTODOS
Conforme ilustrado na figura 1, o refgio adotado consiste em umaproposta para
substituio do atual Refgio Emilio Goeldi, localizado na Ilha Elefante (6105S e
5520W), sendo que o ambiente adotado como objeto de estudo compreende a sala de
estar/cozinha por ser o local de maior permanncia da edificao.
Figura 1 - Propuesta para el RefgioAntrtico Emilio Goeldi.
As janelas foram projetadas com dimenses de 0,7x1,0m sendo compostas por vidros
duplos, com valor de transmisso luz visvel disponvel na configurao original do
software Daysim.O ambiente interno foi simulado com ndices de reflexo da luz dos
materiais correspondentes a 90% para teto branco, 50% para as paredes em madeira
plstica de tom mais claro e 30% para o piso em madeira plstica de cor escura.Para
simular as diferentes caractersticas superficiais do solo, foram adotados como valores
de refletividadedesses materiais 90% e 20%, respectivamente, para solo encobertopor
neve e solo sem a presena desse material em sua superfcie aparente.
Outro dado interessante que as simulaes com neve no solo alcanaram maiores
ndices de uniformidade no ambiente interno que os mesmos modelos simulados com o
solo com baixo ndice de reflexo da luz.
CONCLUSES
Nas simulaes realizadas nessa pesquisa, o revestimento do solo influenciou
significativamente para o aporte de luz pelas aberturas e,quando comparados os
modelos com orientaes diferentes, a reduo nos nveis mdios de iluminao
percebidos chega a representar at 30% menos luz natural no ambiente quando
considerada a ausncia de neve no exterior.
De acordo com os resultados obtidos, em relao ao aproveitamento da luz natural no
edifcio, a fachada sul se apresentou como a mais pertinente para posicionamento das
aberturas do ambiente analisado, e a norte, a menos favorvel.
Destaca-se que as variaes no recobrimento do solo interferiram de forma relevante na
condio de adequabilidade luminosa do ambiente interno, confirmando assim a
necessidade de ponderao desse elemento no desenvolvimento de projetos para
edificaes antrticas.
REFERNCIAS
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Os brasileiros esto presentes na regio austral desde o final do sculo XIX, tendo a
Estao Antrtica Comandante Ferraz EACF sido instalada em 1984 na Pennsula Keller,
Ilha Rei George, com a integrao do Brasil como membro consultivo do Tratado
Antrtico, e seu consequente estabelecimento no panorama internacional na mesma dcada
(SOUZA, 2008).
Acompanhando o desenvolvimento das pesquisas e o crescimento do prestgio
brasileiro, com o passar dos anos a Estao passou por ampliaes e reformas at atingir
aproximadamente 2500 m no corpo principal e capacidade para alojar 65 pessoas, dentre
pesquisadores, militares, equipe de manuteno e visitantes (FANTICELE, 2011).
Em 2012 um incndio destruiu o corpo principal da Estao e, para apoiar a retirada
dos escombros e a continuidade das atividades cientficas, em especial, foram instalados
prximo ao local os denominados Mdulos Antrticos Emergenciais MAE (Figura 1),
que esto em uso desde o incio de 2013 (MECH, 2013).
Figura 1 Mdulos Antrticos de Emergencia MAE
Figure 1 Emergency Antarctic Modules MAE
-2
frio
-1
pouco frio
0
neutro
+1
pouco calor
+2
calor
+3
muito calor
Materiais e Mtodos
A pesquisa como um todo se desenvolve alicerada nos procedimentos relativos
metodologia de Avaliao Ps-Ocupao APO, que j foi aplicada anteriormente na
EACF, apresentando-se adequada ao contexto antrtico (ALVAREZ; CASAGRANDE;
WOELFFEL, 2004; FANTICELE, 2011).
Segundo Ornstein e Romro (1992), a APO pretende configurar uma avaliao
global do edifcio, combinando o ponto de vista dos usurios com a avaliao tcnica.
Como procedimento essencial da fase de avaliao tcnica da pesquisa, foram
instalados aparelhos de medio de temperatura do ar, temperatura radiante e umidade
relativa em um Camarote a 0.10, 1.10 e 1.70 m do piso; na Enfermaria e no Refeitrio a
0.10, 0.60 e 1.10 m do piso, seguindo-se as recomendaes da ISO 7730:2005 e da ISO
7726:1998. O perodo de medio foi de 20 de maro de 2014 a 11 de maro de 2015.
Atravs de questionrios aplicados junto aos usurios foram coletadas informaes
sobre seu nvel de atividade e vestimenta, obtendo-se mdia de 1,3 met e 0,5 clo,
respectivamente, utilizadas para o clculo do PMV nos ambientes juntamente com os
valores de registro das variveis ambientais medidas. Para velocidade do ar foi utilizado o
coeficiente de 0,05 m/s, considerando que o ambiente interno dos MAE condicionado
artificialmente e que os cmodos de permanncia (isto , que no so de circulao) ficam
fechados durante a maior parte do tempo.
Resultados
Atravs dos clculos realizados, obtiveram-se valores de PMV para cada hora de
cada dia do perodo de medies, nos trs ambientes e nas trs alturas correspondentes. A
partir dos valores obtidos foram elaborados grficos de caixa como o da Figura 2, que
agrupam os dados por hora no formato de boxplots, possibilitando o maior aproveitamento
dos dados com sua anlise integral. A Tabela 2 apresenta a sntese da anlise dos grficos.
Nota-se que todos os valores de PMV dentro dos limites dos boxplots foram
negativos e que, considerando todos os ambientes e alturas, a amplitude geral foi de
aproximadamente -0,25 a -3 (muito frio). As medianas ficaram entre aproximadamente
-0,75 e -1,5. A variao para quartis foi de aproximadamente 0,2 a 0,5, enquanto a
variao at os limites dos boxplots foi de aproximadamente 0,5 a 1,75. O Camarote foi
o ambiente que apresentou coeficientes mais baixos, chegando a aproximadamente -3
(muito frio) na altura intermediria e superior, alm de maior variao e maior amplitude,
com aproximadamente 2,5, tanto na altura intermediria quanto na superior. Com relao
mediana, o Camarote e o Refeitrio apresentaram valores dentro de uma mesma faixa
intermediria entre frio e pouco frio, enquanto que a Enfermaria apresentou valores pouco
superiores. A partir da anlise da Tabela 2 tambm foi elaborado a Tabela 3.
Figura 2 PMV por hora para la Cabina a 1,10 m para el periodo del 20 marzo 2014 a 11 marzo 2015
Figure 2 PMV per hour for the Cabin at 1.10 m for the period of 20 March 2014 to 11 March 2015
Tabla 2 Sntese de la anlisis de los diagramas de caja del PMV para los compartimentos del MAE
Table 2 Summary of the analysis of PMV boxplots for compartments of the MAE
Variao at limite
superior e inferior
0,25
1,0 para o
perodo da tarde e
0,75 no restante
do dia
-0,25 a
-2,5
[-1,25;-1,5]
[0,25;0,5]
[0,75;1,0] para o
limite superior e
[0,75;1,75]
(principalmente no
perodo da tarde)
para o limite inferior
-0,5 a
-3 (muito
frio)
0,25
0,5
-0,25 a
-1,5
0,7
-0,7 a quase
-2,1
-0,6 a -2,0
(frio,
PPD = 75%)
Mediana
-1,25
1,1 m
Enfermaria
1,7 m
0,1 m
0,6 m
Refeitrio
1,1 m
[-0,75;-1,0]
0,1 m
-1,4
0,6 m
-1,3 chegando a
-1,4 no perodo da tarde
1,1 m
Amplitude
Distride um limite
buio
a outro
0,2
Simtrica
Camarote
0,1 m
Variao
para quartil
superior e
inferior
Assimtrica
Sensor
(h)
Simtrica
Ambiente
Instituto Antrtico Argentino, Balcarce 290 - Cdigo Postal C1064AAF, Ciudad Autnoma de Buenos Aires, Argentina
Universidad Nacional de San Martn, Campus Miguelete, B1650BWA, Buenos Aires, Argentina
3
Consejo Nacional de Investigaciones Cientficas y Tcnicas, Av. Rivadavia 1917, C1033AAJ, Buenos Aires, Argentina
4
Laboratorio TANDAR, CNEA, Av. Gral. Paz 1499, B1650KNA, San Martn, Buenos Aires, Argentina
5
Department of Nuclear Physics, Research School of Physics and Engineering, The Australian National University, Canberra,
ACT 0200, Australia
2
1. Introduccin
El yodo es un elemento traza y se encuentra extensamente distribuido en la Tierra (hidrsfera, litsfera,
atmsfera y biosfera), particularmente en los ocanos que contienen ms del 70% del yodo presente en
la superficie terrestre (~1014 kg), con una concentracin total aproximada entre 35 60 g/l.
Este elemento posee un nico istopo estable, el yodo-127 (127I) y entre sus radioistopos se encuentra el
129
I, cuya vida media es T =15,7106 aos. Este es producido en la naturaleza tanto por fisin
espontnea del uranio presente en la corteza terrestre como por interaccin de rayos csmicos con el
xenn presente en la atmsfera. El inventario ocenico de 129I debido a estos procesos ha sido estimado
en 140 kg [Sny10]. Es habitual, y til, expresar las concentraciones de un radioistopo respecto de la
concentracin de un istopo estable, como una relacin isotpica R I = 129I/127I. Estimaciones tericas han
determinado la relacin isotpica natural en el rango RI entre 0,310-12y 3,010-12 [Fab84], mientras que
estudios realizados en sedimentos marinos han arrojado valores cercanos a 1,510-12 [Mor98]. Tomando
este valor como referencia y una concentracin media de yodo (127I) en agua de mar superficial de 40
g/l (1,91017 tomos/l), la concentracin de 129I natural es 2,8105 tomos/l, valor compatible con las
estimaciones tericas entre 0,6105 y 6,0105 tomos/l.
Desde el comienzo de la era nuclear, el inventario y la distribucin de 129I en el medio ambiente se han
visto drsticamente modificados debido a diversas actividades antropognicas [Rei10]. Los ensayos
nucleares atmosfricos, detonados en su mayora a principios de la dcada de 1960, han incrementado el
inventario de 129I en 40 135 kg. Aunque la mayor parte de estos ensayos se llevaron adelante en el
hemisferio norte, el material transportado a travs de la estratsfera se deposit en el hemisferio austral
en forma no uniforme, siguiendo una distribucin con un mximo en 45S. Esto elev la relacin
isotpica RI media a 510-11. En la actualidad, cerca del 85% del 129I depositado se encuentra en el
ocano profundo. El 15% restante se reparte entre los compartimentos superficiales, entre ellos el agua
de mar superficial [Neg13a] en donde se estima que la concentracin media es ~3105 tomos/l, similar
a la concentracin debido a fuentes naturales. Por otra parte, desde mediados de la dcada de 1960 se
han incorporado cerca de 6.000 kg de 129I al ocano debido a actividades vinculadas a las plantas de
reprocesamiento de combustible nuclear ubicadas en el hemisferio norte. Estas descargas lquidas han
elevado la RI hasta 410-5 en regiones cercanas a estas plantas [He13]. Estas emisiones de 129I, puntuales
y bien caracterizadas temporalmente, junto al carcter hidrfilo del yodo y su largo tiempo de residencia
en el ocano (~30.000 aos), comparados con los mil aos del ciclo ocenico, brindan condiciones
propicias para emplear al 129I como trazador oceanogrfico. As, este radioistopo ha sido exitosamente
empleado en el estudio de procesos tales como mezcla de masas de agua y formacin de agua profunda
en el Atlntico norte [Hou12]. En el hemisferio sur es poco conocido el aporte de las distintas fuentes
antropognicas, como as tambin la distribucin de este radioistopo en el ambiente. [Feh00; Sny04]
radioistopo. A partir del diagrama T-S (ver Fig. 1b) se identificaron las masas de agua asociadas a las
estaciones de muestreo. Sobre este se volcaron las concentraciones de 129I correspondientes,
identificando a SASW como la masa de agua que presenta concentraciones ms altas. Las estaciones
ubicadas en el rea de WSC presentan los valores ms bajos de 129I.
Fig. 1: a) Ubicacin de las estaciones y concentracin de 129I (105 tomos/l). Las lneas indican la posicin del Frente
Subantrtico (SAF), el Frente Polar (PF) y la Divergencia Antrtica (AD), de acuerdo con [Ors95]. b) Diagrama T-S, en gris
datos de T y S, los puntos muestran la concentracin de 129I [105 tomos/l].
Fig. 1: a) Stations location and 129I concentration (105 atoms/l). Dashed lines show SAF, PF and AD positions according to
[Ors95]. b) T-S diagram, in gray T and S data, black dots show 129I concentration [105 at/l].
Fig. 2: Concentracin de 129I en funcin de la latitud. La lnea punteada representa el nivel natural segn [Mor98], el rea
sombreada representa el rango terico estimado segn [Fab84].
Fig. 2: 129I concentration vs. Latitude. Dashed line represents natural level according to [Mor98], shaded area represents
theoretical range according to [Fab84].
Los valores hallados al norte del paralelo de 60S se encuentran por encima del nivel natural,
presentando un claro aporte antropognico. Cabe aclarar que stos se hallan varios rdenes de magnitud
por debajo de los medidos en el hemisferio norte, inclusive en regiones alejadas de las plantas de
reprocesamiento de combustible nuclear [He13]. Al sur del paralelo se hallaron concentraciones
compatibles con el rango natural, siendo las ms bajas reportadas y las primeras que no presentan
influencia antropognica. Esto es consistente con el carcter prstino de la Antrtida.
5. Conclusiones
En este trabajo se presentan los resultados preliminares de las mediciones de yodo-129 en agua de mar
de la regin antrtica, con el objetivo de aportar nueva informacin para el desarrollo de este
radioistopo como trazador oceanogrfico. Se midieron concentraciones en muestras superficiales,
siendo este el primer estudio llevado adelante en esta regin. Se estableci una relacin entre la
concentracin de yodo-129 y las masas de agua presentes en el rea de estudio. Hallndose las
concentraciones ms altas al norte del PF y una disminucin hacia el sudeste, en la regin de la WSC.
Los resultados preliminares de las concentraciones medidas en la mayora de las estaciones se hallan por
debajo de la concentracin natural estimada por J. Moran [Mor98], valor usualmente empleado en la
literatura especializada, pero dentro del rango estimado de manera terica [Fab84]. El carcter prstino
que presenta esta regin brinda caractersticas ideales para poder determinar la concentracin natural de
este radioistopo en agua de mar. Slo dos estaciones, ambas al norte del PF, presentan una clara
presencia de 129I de origen antropognico, con concentraciones hasta tres veces ms altas que la
concentracin natural.
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Snyder, G. et al., Geochem. Geophys. Geosys., 11, Q04010, 2010.
Laboratrio de Estudos dos Oceanos e Clima (LEOC), Instituto de Oceanografia, Universidade Federal do Rio Grande
(FURG), Rio Grande/RS, Brasil. Contato do autor: malu_cf@hotmail.com
Introduo
A preocupao atual com as mudanas climticas tem servido de motor para a compreeno
dos processos fsicos e qumicos atuantes na Terra. O oceano elemento chave no sistema climtico
e atua como regulador do clima, pois responsvel pela maior parte das trocas e transporte de calor.
Essas trocas ocorridas na superfcie geram mudanas em propriedades como temperatura, salinidade
e gases dissolvidos, levando a formao de massas de guas, as quais podem afundar para regies
profundas dos oceanos fazendo a ventilao dos mesmos. O oceano Atlntico importante nesse
processo j que retm locais de formao de massas de gua tanto no norte (abrangindo o mar de
Labrador e os mares Nrdicos (Dickson & Brauwn, 1994)) quanto no sul (mar de Weddell (Orsi,
1999; Pardo et al., 2012)). A formao dessas massas densas, sua circulao e a circulao das guas
superficiais do origem a clula de revolvimento meridional do atlntico (AMOC, Atlantic
Meridional Oceanic Circulation) que resultado da movimentao dessas guas e responsvel pela
distribuio de calor, sal e outras propriedadesimportantes na manuteno do clima. A AMOC tem
sido alvo de estudo em diferentes reas de pesquisa devido sua associao direta com as mudanas
climticas globais (e.g. eventos glacias e deglaciais (Broecker, 2005)).
As guas em subsuperfcie podem ser determinadas por um conjunto de caractersticas
especficas, sendo elas parmetros conservativos (e.g. temperatura e salinidade) e no conservativos
(e.g. oxignio, dixido de carbono e nutrientes), sendo que estas vo se modificando a medida que se
misturam com outras massas (Tomczak, 1999). As guas ocenicas so divididas em massas de gua,
no oceno Atlntico as guas profundas e de fundo so chamadas de North Atlantic Deep Water
(NADW) e Antarctic Bottom Water (AABW). A NADW composta por guas formadas na regio
subpolar do oceano Atlntico Norte e a AABW por guas formada no oceano Austral. Em mdias
latitudes no Hemisfrio Norte a AABW incorporada a NADW, enquanto a NADW sofre elevao
para profundidades intermedirias na zona Subantrtica e entra na Corrente Circumpolar Antrtica
(ACC, Antarctic Circumpolar Current) na qual ser misturada e exportada para outros oceanos
(Talley, 2015).
Estudos vem sendo feitos no mbito de investigar o comportamento dessas guas profundas,
seja por interesse na velocidade de correntes (Rhein, 2015), taxas de calor (Ganachaud et al.,2003),
armazenamento de CO2 (Huhn et al, 2013), espessura e volume das massas de gua (Johnson, 2008)
ou tendncias na variabilidade de suas propriedades (Azaneu et al., 2013; Glessmer et al., 2014). Ante
a essas observaes, o presente estudo investiga a distribuio das guas precursoras da NADW e
AABW, com interesse em quantificar a contribuio de cada uma dessas massas para as bacias do
oceano Atlntico, j que no h antecedentes sobre o compreendimento da distribuio de tais massas
de gua em escala global.
Material e Mtodos
Os dados utilizados provm do banco de dados histricos do National Oceanographic Data
Center (NODC), World Ocean Database (WOD13) de livre acesso, os parmetros utilizados so
temperatura, salinidade, oxignio, nitrato, silicato e fosfato, selecionados a partir de uma
profundidade mnima de 1500 m. Algumas modificaes foram feitas em respeito presso, que foi
calculada a partir da profundidade e latitude, densidade potencial referenciada a 1500 dbar,
temperatura potencial referenciada a 0 dbar (todos utilizando pacote seawater), oxignio foi
convertido para umol/kg multiplicando por um fator de converso 44.658.10 e dividindo pela
densidade.
O mtodo Optimum MultiParameter Analysis (OMP) foi proposto por Tomczak (1981) como uma
escoamento da mesma na bacia norte, onde absorvida completamente pelas guas adjacentes
(Jonhson, 2008; Talley, 2013). Na regio equatorial ocorre uma diminuio brusca na porcentagem
de WSDW de norte para sul, passando de 70% para 40%. Nessa regio ocorre a zona de fratura
Romanche e uma elevao (em torno de 4500 m) que possivelmente aprisiona grande parte da WSDW
na bacia do Brasil. LSW continua ocupando as pores mais rasas da coluna de gua sendo sotoposta
por DSOW, com maiores concentraes na poro oeste e ISOW na leste. Em relao a ocorrncia
destas ltimas, tambm fica evidente uma diminuio na concentrao de ISOW e DSOW de norte
para sul, devido a ocorrncia da WSDW prximo ao fundo.
A bacia atlntica sul dominada pelas massas de gua da Antrtica na regio abaixo de 4000
m, A WSBW fica restrita a bacia de Enderby sendo aprisionada pela cadeia Amrica-Antrtica. A
LSW sofre um afundamento na poro central da bacia chegando a ocupar a parcela mais rasa que
3500 m com uma porcentagem mnima de 40%, esse afundamento coincide a regio central do giro
subtropical sul, que formado pela ao contnua dos ventos alsios e de oeste, esse giro leva o
aprofundamento das isopicnais em seu centro (Pinet, 2008), o que est sendo evidenciado pela
ocupao do ncleo da LSW maiores profundidades. ISOW e DSOW aparecem entre LSW e
WSDW com baixas porcentagens (mxima de 30%). Prximo a 50S fica marcada a ocorrncia do
afundamento da WSDW e asceno da LSW, marcando a frente Subantrtica, na qual as guas
profundas do Atlntico Norte passam para profundidades intermediria entrando na Corrente
Circumpolar Antrtica. As guas formadas na Antrtica com alta densidade entram no oceano
Atlntico principalmente pela poro oeste da bacia sul, evidenciado pela ocorrncia da WSDW com
altas porcentagens (acima de 50%) na bacia oeste enquanto na leste as porcentagens caem para 40%.
Concluses
O OMP uma metodologia que vem sendo utilizada tanto em escala regional (Poole &
Tomczak, 1999; Garca-Ibez et al., 2015) quanto larga escala (Larqu et al., 1997; Johnson, 2008)
para identificar as contribuies de mistura de diferentes massas de gua.. A parcela menos densa da
NADW composta pela LSW, a qual exportada para todas as bacias do Atlntico a uma
profundidade mdia de 2500 m, exceto na parte central do oceano Atlntico sul no qual ocorre um
leve afundamento sendo associado ao giro Subtropical Sul. Na bacia Ibrica h uma diminuio de
sua concentrao devido a presena da MW que atinge essas profundidade com pequenas
concentraes, porm suficiente para diminuir a porcentagem de mistura de LSW, na zona
Subantrtica onde descreve uma inclinao para menores superfcies marca a frente Subantrtica. As
massas de gua formadas nos mares Nrdicos (DSOW e ISOW) possuem distribuio distinta nas
proximidades de sua rea de formao, porm nas bacias mais distantes ocupam a parcela a baixo da
LSW, sendo que a ISOW se mostrou uma variedade mais densa ocorrendo mais prximo ao fundo.
Ambas diminuem sua concentrao de norte para sul, devido a presena da AABW. A variedade mais
densa da AABW (WSBW) distribui-se dentro do oceano Austral e ocorre abaixo da WSDW at a
bacia do Atlntico Sul, sendo que sua maior concentrao ocorre na bacia de Weddell e do mar de
Scotia, pois fica aprisionada a sul das elevaes batimtricas como a cadeia Amrica-Antrtica. A
WSDW exportada para a bacia do Atlntico Sul principalmente pela regio oeste, passando pelo
mar de Scotia at atingir a bacia da Argentina e do Brasil. Do lado leste as maiores concentraes
ocorrem at 30S que coincide com a cadeia Walvis, essa elevao responsvel pela barragem de
parte da WSDW para norte. WSDW ocorre at incio da bacia atlntica norte onde ser absorvida
pelas guas adjacentes.
A delimitao da ocorrencia de cada gua precursora das guas profundas e de fundo do
oceano Atlntico possui grande importncia na interpretao do impacto que mudanas em
propriedades hidrogrficas, volume de exportao e formao dessas guas, que vem sendo
reportadas, possam gerar em escala global, j que essas mudanas podem ser relacionadas com a
quantificao dessas guas.
Agradecimentos
Agredeo a Cordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES) pela
concesso de bolsa de estudos, ao Laboratrio de Estudo dos Oceanos e Clima (LEOC/FURG) pela
estrutura fsica e aos colegas pela ajuda no desenvolvimento do trabalho e a NODC/NOAA pela
disponibilizao dos dados pelo site https://www.nodc.noaa.gov/OC5/WOD13/.
Referncias Bibliogrficas
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Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRS), Departamento de Geografia, Centro Polar e Climtico, Av. Bento Gonalves
9500, Bairro Agronomia, Porto Alegre, RS, Brasil - CEP: 91501-970.
2Laboratrio de Processos Sedimentares e Ambientais (LAPSA), Universidade Federal Fluminense,
Introduo
Nas ltimas duas dcadas a regio da Pennsula Antrtica sofreu mudanas
significativas, principalmente em relao aretrao das frentes das geleiras,
desintegrao das plataformas de gelo e reduo do gelo marinho sazonal (ARIGONYNETO, 2006). Mtodos combinandosGlobal Positioning System (GPS) e Gravity
Recovery andClimateExperiment (GRACE) aplicados em escala regional, indicam com
alto grau de preciso que a Pennsula Antrtica est perdendo gelo (IVINS et al., 2011;
THOMAS et al., 2011a).
A parte ocidental da Pennsula Antrtica a regio com maior perda de gelo da
Antrtica e apresenta um dos maiores nveis de aquecimento atmosfrico do planeta (at
3,0C em 60 anos), resultando num recuo de 87% das frentes das geleiras (TUNNER,
2009).
As plataformas de gelo na pennsula Antrtica esto se desintegrando h vrias
dcadas (FRICKER e PADMAN, 2012). Sete de dez plataformas de gelo da Pennsula
Antrtica retraram nas ltimas dcadas apresentando um total de perda de 28,000 km 2 e
uma taxa de 6000 km2 por dcada (COOK e VAUGHAN, 2010). Acredita-se, com alta
confiana, que a retrao das plataformas de gelo da Pennsula Antrtica esteja
relacionada com as variaes na temperatura atmosfrica da Terra (SCAMBOS et al.,
2000). Essas variaes climticas podem gerar impactos regionais e globais, com graves
consequncias para as populaes costeiras e de regies montanhosas, por exemplo da
Amrica do Sul. Para a regio sul e sudeste do Brasil importante compreender essa
dinmica, pois elas so afetadas pelas massas de ar e correntes ocenicas que se
deslocam da Antrtica e do oceano Austral (SIMES, 2011).
A investigao dos processos glaciolgicos em escala temporal importante para o
entendimento da dinmica glacial e das diferentes respostas da geleira tendncia de
aquecimento regional na Pennsula Antrtica.
O uso de tcnicas de Sensoriamento Remoto para monitorar reas extensas e de
difcil acesso como as regies polares de extrema importncia, em funo das
dificuldades logsticas para o desenvolvimento de trabalhos de campo. O
monitoramento das geleiras tem sido realizado peloGlobal Land Ice Measurements from
Space(GLIMS), mas ainda permanecem setores desconhecidos em sua dinmica, como
o centro oeste da Pennsula Antrtica, onde est localizada a geleira Drummond.
O projeto busca investigar a dinmica da geleira Drummond, localizada na costa
ocidental da Pennsula Antrtica (Figura 1).
RESUMO
Para a produo arquitetnica na Antrtica, assim como em centros urbanos densificados,
deve-se levar em considerao os condicionantes ambientais e fatores locais que possam
interferir no processo construtivo. Contudo, a Antrtica, diferente do meio urbano
tradicional, apresenta condicionantes ambientais rigorosos e particularidades que
influenciam, ou at mesmo dificultam o processo de construo.
Considerada a Terra dos Superlativos, rea mais remota, desrtica, estril, com alta
velocidade de ventos que chegam a 200 km/h , e superfcie mdia elevada altura 3 vezes
maior que qualquer outro continente a Antrtica, apresenta uma das piores condies de
habitabilidade do planeta (ALVAREZ, 1995). Estas condies, juntamente com a dificuldade
de acesso, sensibilidade ambiental, ausncia de materiais construtivos locais, entre outros
fatores, tornam a Antrtica um local desafiador, principalmente quando se almeja
construes pautadas nos fundamentos sustentveis.
Esta pesquisa teve por objetivo a definio de indicadores de sustentabilidade voltados para
construes compatveis com as peculiaridades da Antrtica considerando, especialmente,
sua caracterstica fragilidade ambiental.
No processo metodolgico (Figura 1), previu-se inicialmente o levantamento dos
condicionantes ambientais, alm dos fatores limitantes e das potencialidades do local de
estudo, considerando a Antrtica como recorte territorial. Em paralelo, foi necessrio realizar
a reviso bibliogrfica luz do enfoque pretendido, bem como dos aspectos inerentes aos
indicadores de sustentabilidade propostos nas ferramentas de avaliao de sustentabilidade
de edifcios de efetivo reconhecimento nos mbitos mundial e/ou local.
Reviso Bibliogrfica
Condicionantes ambientais,
fatores limitantes e
potencialidades
Antrticos
Ferramentas de avaliao de
sustentabilidade
Lista 1
Lista 2
Agrupamento listas 1 e 2
Anlise
Anlise/Lista Final
Figura 1. Sntese da metodologia da pesquisa
Aps a sistematizao destas informaes, foram elaboradas 2 listas sendo a Lista 1 oriunda
da estrutura analtica; e a Lista 2, com os indicadores selecionados das ferramentas de
avaliao de sustentabilidade. A partir do agrupamento e verificao de pertinncia dos
tpicos de cada lista, os mesmos foram agrupados, permitindo a definio e a formulao
preliminar dos indicadores ajustados realidade Antrtica. Posteriormente, a consolidao
dos indicadores foi estabelecida a partir de um procedimento de anlise realizado por 20
(vinte) especialistas que avaliaram a pertinncia, compreenso e relevncia, resultado na
proposio final dos indicadores.
Para a definio da Lista 1, foram relacionados os condicionantes, os fatores limitantes e as
potencialidades para construes na Antrtica. Para tanto, foi utilizada como metodologia de
suporte a estrutura analtica PSR Pressure-State-Response (OECD, 2003). A estrutura
analtica contribuiu para organizar o conjunto de indicadores, facilitar sua interpretao e
garantir que todos os aspectos propostos pelos indicadores sejam considerados, alm de
auxiliar na compreenso das diferentes questes inter-relacionadas (SEGNESTAM, 2002).
Assim, a estrutura PSR se caracteriza por uma situao dinmica onde pode ser identificada
a causa, o efeito e as possveis medidas compensatrias ou mitigadoras para uma determinada
situao. A adequao da estrutura analtica foi realizada por meio da adaptao de Pressure
e de State, por no representar a realidade de uma rea de preservao, cuja fragilidade
ambiental no permite presses ou alteraes no estado do ambiente durante as atividades de
construo, uso e desmonte de edificaes. Neste sentido, a estrutura analtica foi adaptada e
os elementos de anlise considerados foram SPR - State-Pressure-Response (Quadro 1).
Quadro 1. Estrutura analtica SPR (State-Pressure-Response)
Definio adaptada pesquisa (diretamente
Tipologia
relacionada ao ambiente construdo)
Se caracteriza pelo estado do ambiente, condicionantes
ambientais e os acontecimentos fsicos, qumicos,
S - State ou
biolgicos e/ou geogrficos que se apresentam como
Estado
fatores limitantes s construes na Antrtica
Descreve a possvel presso que o Estado do ambiente
Antrtico pode ocasionar nas edificaes e nos usurios,
P - Pressure
como tambm a possvel presso que a implantao de
ou presso
edificaes pode ocasionar no Estado do ambiente
As respostas a proposio de decises projetuais que
R - Response contribuem para a resoluo da presso que pode ser
causado pela edificao
ou Resposta
Exemplo
Velocidade do vento
A Lista 2 foi estruturada a partir da apreciao dos indicadores propostos nas principais
ferramentas de avaliao de sustentabilidade, selecionadas a partir de sua relevncia mundial.
Os indicadores foram coletados, especialmente, das seguintes ferramentas: AQUA Alta
Qualidade Ambiental/Brasil (FCAV, 2014); ASUS Avaliao de Sustentabilidade/Brasil
(ALVAREZ; SOUZA, 2011); BREEAM Building Research Establishment Environmental
Assessment Method/Reino Unido (BREAM, 2009); CASBEE Comprehensive Assessment
System for Building Environmental Efficiency/Japo (CASBEE, 2014), HQE Haute Qualit
Environmentale/ Frana (GUIDE..., 2014); LEED Leadership in Energy & Environmental
Design/Estados Unidos (USGBC, 2014); e SBTool Sustainable Building Tool/ Consrcio
Internacional (COLE; LARSSON, 2002).
Para cada lista foi feita uma anlise dissociada, com o objetivo de identificar similaridades e
diferenas. Como mtodo de anlise foi utilizada a estrutura organizacional CSD Theme
Indicator Framework (DESA, 2007), sendo possvel a identificao dos indicadores de maior
influncia na sustentabilidade local, e o reconhecimento das questes relevantes para
insero em edificaes Antrticas. As dimenses e categorias compostas nesta estrutura
foram selecionados a partir das ferramentas de avaliao de sustentabilidade. Na dimenso
ambiental as categorias so: relaes entre o edifcio e o entorno; gua; energia; materiais;
resduos; e emisses. Na dimenso social as categorais so: conforto; segurana; e gesto da
edificao. Na dimenso econmica foi considerada somente a categoria custo. Com a anlise
e a compilao das 2 listas, foi elaborado um conjunto de indicadores ajustados realidade
Antrtica. Os indicadores de cada lista e o resultado do agrupamento foi organizado conforme
tabela 1.
Tabela 1: Quantitativo dos indicadores
Dimenso
Categoria
Lista 1
Quantidade de indicadores
Total
Total
Total
Lista 2
agrupamento
L1
L2
L1 e L2
6
6
12
5
3
9
4
2
12
3
5
11
6
7
21
7
7
17
6
7
2
39
22
2
63
3
5
2
29
19
2
50
8
8
2
Total
57
33
2
92
REA DE CIENCIAS DE LA
TIERRA Y GLACIOLOGA
1.
Introduo
Materiais e Mtodos
A Pennsula Fildes est localizada na regio sudoeste da Ilha Rei George, arquiplago
das Ilhas Shetland do Sul, Antrtica Martima entre 6208' e 6214 S e 5902 e 5851 W
(Figura 1A e B). Possui 29,8 km de rea livre gelo, sendo que na regio da Antrtica
Martima, esta pennsula est entre os primeiros locais a apresentar grandes reas livres de
gelo aps o ltimo mximo glacial (Curl, 1980). As reas livres de gelo possuem solos com
relativo grau de desenvolvimento, principalmente se comparado com outros stios da
Antrtica, havendo predominncia de criossolos crioturbados (Michel et al., 2006).
O clima da Pennsula Fildes do tipo martimo sub-antrtico, com ventos fortes,
precipitao pluvial variando entre 350 e 500 mm durante o ano (concentrado no vero) e
temperaturas do ar mais amenas, com mdia anual de -2C e mdia do vero podendo ser
superior a 0C (Wen et al., 1994).
O stio de monitoramento da camada ativa (SMCA) (Figura 1C) foi instalado em
fevereiro de 2014 na meseta norte (6210,807S e 5856,593W a 109 m de altitude), um
planalto crioplanado com relevo suave ondulado, e se encontra a aproximadamente 2,61 km
de distncia da Base Cientfica Antrtica Artigas (Uruguai). O SMCA composto por um
sensor C107 (Cambpell Scientific) a 1,5 m de altura para monitoramento da temperatura do
ar (Far), um sensor CNR4 (Kipp & Zonen) a 1,8 m de altura para monitoramento do balano
de energia superficial e um transecto superficial de 200 m composto por 30 sensores
minidataloggers KT-20-L (KIMO Instruments), onde, a cada 20 m de distncia feito o
monitoramento trmico da camada ativa a 5 cm (F5), 20 cm (F20) e 35 cm (F35) de
profundidade. O SMCA obtm continuamente dados durante todo o ano, o que possibilitar
avaliar a interao trmica entre o solo e atmosfera. Os sensores KT-20-L coletam dados a
cada quatro horas, enquanto os sensores C107 e CNR4 coletam dados a cada uma hora.
Figura 1: (A) Ubicacin de la Isla Rey Jorge y Pennsula Antrtica, (B) mapa de elevacin de las superficies
libres de hielo y (C) ubicacin de los sensores de monitoreo trmico de la capa activa del permafrost en la
Pennsula Fildes. (A) Location of King George Island and Antarctic Peninsula, (B) elevation map of Fildes
Peninsula ice-free areas, and (C) location of the active layer thermal monitoring sensors in Fildes Peninsula
permafrost.
3.
Resultados e discusso
Figura 2: Registros entre feb/14 y jan/15 de la temperatura media diria: Far (a), F5 (b), F20 (c) e F35 (d). Records
between feb/14 and jan/15 of the average daily temperature: Far (a), F5 (b), F20 (c) e F35 (d).
Tabela 1: Media, desviacin estndar y varianza de la temperatura (C) do Far, F5, F20 e F35 en las diferentes
estaciones. Average, standard deviation and variance of temperature (C) of Far, F5, F20 e F35 in different seasons.
Vero
Outono
Inverno
Primavera
-0,60
1,45
2,07
-3,36
2,91
8,40
-4,86
3,01
8,94
-2,94
2,20
4,78
5 cm
1,38
1,70
2,89
-2,39
2,47
6,10
-3,68
1,48
2,19
-0,70
1,62
2,63
20 cm
0,81
0,89
0,79
-1,68
1,80
3,23
-3,54
1,02
1,03
-1,25
1,23
1,50
35 cm
0,54
0,88
0,78
-1,24
1,61
2,59
-3,38
0,82
0,67
-1,43
1,18
1,39
Ar
Concluses
O regime trmico da camada ativa da Pennsula Fildes foi estimado para o ano 2014,
e nesse perodo houve variabilidade sazonal da temperatura do ar e da camada ativa. A
variao trmica da camada ativa foi influenciada pela temperatura do ar, porm, outras
variveis meteorolgicas superficiais, como a radiao incidente, precipitao e direo do
vento tambm interferem e sero consideradas nas prximas etapas de anlise do estudo.
importante ressaltar que as variaes trmicas da camada ativa apresentadas nesse
estudo devem ser analisadas com precauo devido curta srie de dados coletados, sendo
portanto dados preliminares.
Agradecimentos: Ao Programa Antrtico Brasileiro e ao Instituto Antrtico Uruguaio.
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Centro Polar e Climtico, Instituto de Geocincias, Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Av.
Bento Gonalves, 9500, CEP 91540-000, Porto Alegre, RS, Brasil. E-mail: franschwanck@gmail.com,
jefferson.simoes@ufrgs.br, Ronaldo.bernardo@ufrgs.br.
2
Climate Change Institute, and Department of Earth Sciences, University of Maine, Orono, ME 04469, USA. E-mail:
handley@maine.edu, paul.mayewski@maine.edu.
Introduccin
As informaes obtidas a partir de testemunhos de gelo na Antrtica fornecem um registro
histrico mais longo e detalhado do clima do que o disponvel a partir de observaes diretas. A
alta resoluo dos registros do gelo fornece informaes sobre a composio da atmosfera no
passado, em especial as alteraes em regies de origem de aerossis e vias de transporte
(Legrand & Mayewski, 1997; Schneider et al., 2006; Mayewski et al., 2009).
Neste trabalho ns apresentamos dados de campo e os primeiros resultados de laboratrio
do testemunho de gelo Mount Johns coletado na Antrtica Ocidental. O testemunho faz parte da
coleo de testemunhos de gelo do programa ITASE (International Trans-Antarctic Scientific
Expedition), uma iniciativa internacional que tem como nfase coletar dados dos ltimos 200
anos (embora alguns registros cheguem h 1000 anos) por testemunhos de gelo espaados em
200 km.
Materiales y Mtodos
Perforacin
O testemunho de gelo Mount Johns (7955'28S; 9423'18W, profundidade de 91,20 m),
foi coletado durante o vero austral 2008/2009 no setor ocidental do manto de gelo antrtico
(Figura 1). O Mount Johns fica a cerca de 400 quilmetros a sudoeste das montanhas Ellsworth,
nesse local o manto de gelo atinge a espessura de 2.115 metros, formando uma espcie de domo.
A taxa de acumulao mdia nessa regio de 0,21 m eq. H2O a-1 e a temperatura na
profundidade de 12 m medida foi de -33C. A perfurao foi realizada usando uma perfuradora
eletromecnica FELICS (Fast Electromechanical Lightweight Ice Coring System).
Figura 1 - Mapa de la Antrtica que muestra el sitio de el testigo de hielo Mount Johns (flecha) (figura adaptada de la
US Geological Survey, http://lima.usgs.gov/). Map of Antarctica showing the site of the Mount Johns ice core
(arrow) (figure adapted from the U.S. Geological Survey, http://lima.usgs.gov/).
como Pinatubo (1991), Agung (1963), Santa Mara (1902) e Krakatoa (1883) foram identificadas
pelos marcados picos de concentrao de enxofre e foram usadas como horizontes temporais
absolutos durante o desenvolvimento da datao. Com base nesses dados, os 45 m superiores do
testemunho de gelo MJ abrange o perodo entre 1883 2008.
Foram medidas as concentraes de 10 elementos (Al, Ba, Ca, Fe, K, Mg, Mn, Na, Sr e
Ti) em 2.137 amostras. O resumo das concentraes apresentado na Tabela 1.
Tabla 1: Resumen estadsticos de las concentraciones de 10 elementos determinados en el testimonio de hielo MJ.
Summary statistics of the concentrations of 10 elements determined in MJ ice core.
Elemento
Concentrao
mdia
Concentrao
mnima
Concentrao
mxima
Desvio
padro ()
Erro
()
N de
amostras
Al (ng/g)
2,43
0,11
22,72
1,61
0,03
2113
Ba (pg/g)
8,91
0,10
93,14
10,93
0,24
2073
Ca (ng/g)
2,97
0,07
21,22
3,23
0,07
2089
Fe (ng/g)
0,61
0,03
5,57
0,66
0,01
2091
K (ng/g)
1,74
0,06
39,35
3,38
0,07
2112
Mg (ng/g)
8,69
0,48
44,69
4,68
0,10
2130
Mn (pg/g)
27,84
0,64
783,48
61,65
1,34
2125
Na (ng/g)
21,42
0,12
381,47
31,64
0,69
2126
Sr (pg/g)
22,51
0,81
117,94
17,49
0,38
2108
Ti (pg/g)
13,78
0,47
209,35
17,05
0,37
2105
Discusin
A contribuio de fontes naturais na concentrao dos elementos-trao estudados foi
determinada usando os seguintes indicadores: sulfato no marinho (nss-SO42-) para emisses
vulcnicas, alumnio (Al) para poeira de rocha e solo; e sdio marinho (ss-Na) para spray
marinho.
Dos elementos analisados, foi determinado que as concentraes de Al, Ba, Fe, Mn e Ti
so predominantemente de origem crustal (poeira de rocha e solo), enquanto concentraes de
Mg e Na apresentam uma grande influncia marinha (spray marinho). Concentraes de Ca, K e
Sr apresentaram influncia de ambas s fontes.
Entre 1883 e 2008 os registros de alta resoluo do testemunho de gelo Mount Johns
indicam que as concentraes de elementos-trao de origem crustal (principalmente Al, Ba, Fe e
Ti) foram altamente variveis no tempo, com um aumento significativo a partir da dcada de
1940. Uma explicao plausvel para este aumento seria o aumento da temperatura na regio da
Antrtica Ocidental (Bromwich et al., 2013) e no Hemisfrio Sul. Um estudo na ilha James Ross
dentro da Pennsula Antrtica revelou que o fluxo de alumnio havia dobrado durante o
sculo XX, coincidindo com o aquecimento de 1C no Hemisfrio Sul (McConnell et al., 2007).
Este aumento na entrada de poeira na Pennsula Antrtica tambm est diretamente relacionado
com mudanas ocorridas na Amrica do Sul, especialmente desmatamentos generalizados na
Patagnia e no norte da Argentina (McConnell et al., 2007).
Conclusiones
Os principais elementos-trao encontrados no gelo polar so originrios de vrias fontes,
tais como oceanos e massas continentais, e muitas vezes so transportados para as regies polares
por longas distncias. Nossos resultados mostraram marcada sazonalidade de poeira mineral e
spray marinho nas concentraes dos elementos-trao estudados. Os resultados tambm sugerem
que a concentrao de poeira no stio de amostragem aumentou desde a dcada de 40, resultado
esse condizente com o aumento do desmatamento na Amrica do Sul, o que estaria gerando
aumento da disponibilidade e transporte de poeira para a Antrtica.
Agradecimientos
Ao PROANTAR e ao CNPq, projeto 407888/2013-6.
Referencias Bibliogrficas
Bromwich, D. H.; Nicolas, J. P.; Monaghan, A. J.; Lazzara, M. A.; Keller, L. M.; Weidner, G. A. & Wilson, A. B.
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Antarctic temperatures over the past two centuries from ice cores. Geophysical Research Letters, v. 33.
Doi:10.1029/2006GL027057.
Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRS), Departamento de Geografia, Centro Polar e Climtico, Av. Bento Gonalves
9500, Bairro Agronomia, Porto Alegre, RS, Brasil - CEP: 91501-970.
2Laboratrio de Processos Sedimentares e Ambientais (LAPSA), Universidade Federal Fluminense,
Introduo
Nas ltimas duas dcadas a regio da Pennsula Antrtica sofreu mudanas
significativas, principalmente em relao aretrao das frentes das geleiras,
desintegrao das plataformas de gelo e reduo do gelo marinho sazonal (ARIGONYNETO, 2006). Mtodos combinandosGlobal Positioning System (GPS) e Gravity
Recovery andClimateExperiment (GRACE) aplicados em escala regional, indicam com
alto grau de preciso que a Pennsula Antrtica est perdendo gelo (IVINS et al., 2011;
THOMAS et al., 2011a).
A parte ocidental da Pennsula Antrtica a regio com maior perda de gelo da
Antrtica e apresenta um dos maiores nveis de aquecimento atmosfrico do planeta (at
3,0C em 60 anos), resultando num recuo de 87% das frentes das geleiras (TUNNER,
2009).
As plataformas de gelo na pennsula Antrtica esto se desintegrando h vrias
dcadas (FRICKER e PADMAN, 2012). Sete de dez plataformas de gelo da Pennsula
Antrtica retraram nas ltimas dcadas apresentando um total de perda de 28,000 km 2 e
uma taxa de 6000 km2 por dcada (COOK e VAUGHAN, 2010). Acredita-se, com alta
confiana, que a retrao das plataformas de gelo da Pennsula Antrtica esteja
relacionada com as variaes na temperatura atmosfrica da Terra (SCAMBOS et al.,
2000). Essas variaes climticas podem gerar impactos regionais e globais, com graves
consequncias para as populaes costeiras e de regies montanhosas, por exemplo da
Amrica do Sul. Para a regio sul e sudeste do Brasil importante compreender essa
dinmica, pois elas so afetadas pelas massas de ar e correntes ocenicas que se
deslocam da Antrtica e do oceano Austral (SIMES, 2011).
A investigao dos processos glaciolgicos em escala temporal importante para o
entendimento da dinmica glacial e das diferentes respostas da geleira tendncia de
aquecimento regional na Pennsula Antrtica.
O uso de tcnicas de Sensoriamento Remoto para monitorar reas extensas e de
difcil acesso como as regies polares de extrema importncia, em funo das
dificuldades logsticas para o desenvolvimento de trabalhos de campo. O
monitoramento das geleiras tem sido realizado peloGlobal Land Ice Measurements from
Space(GLIMS), mas ainda permanecem setores desconhecidos em sua dinmica, como
o centro oeste da Pennsula Antrtica, onde est localizada a geleira Drummond.
O projeto busca investigar a dinmica da geleira Drummond, localizada na costa
ocidental da Pennsula Antrtica (Figura 1).
Centro de Investigaciones Oceanogrficas e Hidrogrficas del Caribe, Barrio el Bosque - Isla Manzanillo
-Escuela Naval de Cadetes Almirante Padilla, Cartagena de Indias, Colombia, E-mail: cgrisales@dimar.mil.co
INTRODUCCIN
La Antrtica posee una conexin natural con el resto del mundo en trminos de clima,
circulacin marina y consumo de carbono, entre otros. El sistema climtico est cambiando
rpidamente debido al calentamiento global, siendo la pennsula Antrtica una de las reas
ms afectadas, debido a su sensibilidad a los procesos ambientales que ocurren en ella. Se
espera que las evidencias de los cambios sean ms notorios en esa regin, especialmente en
la Costa de Danco, dado que es considerada como una zona de transicin subpolar-polar
(Anderson y Domack, 1991).
La generacin de plumas de sedimentos en ambientes glaciomarinos puede estar
relacionado con el derretimiento de glaciares que desembocan en las bahas y fiordos (e.g.
Domack y Williams, 1990). Por lo tanto, su estudio puede entregar pistas sobre la
evolucin climtica y oceanogrfica de la zona, donde un incremento en la concentracin
de partculas podra indicar un mayor derretimiento de los glaciares. Por otro lado, el
conocimiento de estas plumas en la Antrtica es pobre, debido a las barreras naturales y
logsticas que no permiten el acercamiento al frente del glaciar y a las mismas bahas.
Las bahas y fiordos pequeos con similar geometra y drenaje glacial, en donde no exista
una gran diversidad de flujos sedimentarios que sean introducidos y redistribuidos en el
ambiente glaciomarino, permiten una evaluacin ms coherente sobre el aporte
sedimentario glaciar, es por ello que elegimos las pequeas bahas de la costa de Danco
para su caracterizacin.
METODOLOGA
El rea de estudio se localiz en aguas interiores de pequeas bahas y fiordos del lado
oeste de la Pennsula Antrtica, especficamente entre la baha Guesalaga (Curtiss Bay) en
los 64S y baha Paraso (Paradise Harbour) en los 65S (Fig.1). El muestreo se realiz en
las Expediciones Cientficas Antrticas N49 (febrero 2013) y N50 (febrero 2014) del
Instituto Antrtico Chileno (INACH), a bordo del buque de la Armada de Chile, AP
Aquiles, y durante la Primera Expedicin Cientfica de Colombia a la Antrtica (enerofebrero 2015), a bordo del buque de la Armada de Colombia, ARC 20 de Julio.
Figura 1. rea de estudio. Los puntos negros muestran las bahas estudiadas.
Figure 1. Study area. Black points show the studied bays.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Cada baha present plumas de sedimentos provenientes del glaciar, sin embargo las
concentraciones de partculas fueron bajas, no superando los 1.0 NTU en la mayora de los
casos. Cerca del glaciar, existe un flujo superficial delgado (<10 m de espesor) de agua fra
(<1C) y con salinidades bajas (<33 psu), que se dirigira hacia afuera de la baha. Bajo esta
capa superficial, existe una capa ms clida (~2C) y salina (~33.5 psu) con un espesor
tpico de 20 m, proveniente posiblemente de aguas exteriores de la baha. Ms en
profundidad y centrado en los ~60 m, se aprecia un sector ms fro (<0C) y de salinidad
superior a 34 psu, que se puede asociar a un flujo de agua intermedio (con respecto a la
profundidad total) proveniente del glaciar. En general, se encontr que las plumas mejores
definidas, extensas y con mayor concentracin de turbidez, ocurrieron durante las mareas
vaciantes, mientras que las plumas ms difusas se observaron durante las mareas llenantes.
La distribucin de las plumas en la vertical se asemej al modelo mostrado por
Domack e Ishman (1993), para la misma regin de estudio, y el modelo de Yoo et. al.
(2014) de la isla Rey Jorge. Sostienen que estas plumas son producto del derretimiento
glacial. Nosotros encontramos tambin, que las bahas ms sencillas (que tienen un solo
glaciar) presentaron una pluma mejor definida que aquellas ms complejas (ms de un
glaciar).
(a)
(b)
(c)
Distancia (km)
Figura 2. Secciones de variables oceanogrficas para la baha Frei (2015), costa de Danco. (a) Turbidez (b)
Temperatura (c) Salinidad. El origen de la distancia (0 km) corresponde a la estacin ms cercana del frente
del glaciar.
Figure 2. Oceanographic variable sections for Frei Bay, Danco Coast. (a) Turbidity (b) Temperature (c)
Salinity. The origin of the distance corresponds to the closer station to the glacier front.
Resultados e discusses
Filtros
Speckle na imagem de radar o padro granulado, o que caracteriza uma interferncia
aleatria construtiva e destrutiva, formando reas claras e escuras devido natureza coerente das
micro-ondas (JENSEN, 2007). Para melhorar a identificao e anlise dessas imagens so
aplicados filtros para reduo do rudo speckle. A janela utilizada foi de tamanho 3x3 e 5x5,
sendo que o ltimo apresentou melhores resultados visuais. Antes de estabelecer valores de
retroespalhamento para os alvos lagos e alagadios, foi realizada uma anlise aps delimitar
duas reas pertencentes a cada uma dessas classes. Se optou pelo uso do filtroMedian por
apresentar um desvio padro com valor intermedirio em relao aos outros (Quadro 1).
Tabla 1: Valores estadsticos para los filtros probados en imagen TERRA SAR X (fondo blanco para los lagos y gris
para los humedales).
Table 1: Statistical values for the filters tested on theTERRA SAR X image, (white background to lakes and gray
towetlands).
Mnimo
Mximo
Mdia
Mediana
Desvio padro
Filtro
8,05
22,48
13,61
13,52
1,40
Gamma 5x5
8,61
23,11
13,61
13,51
1,45
Frost 552
8,32
22,48
13,60
13,51
1,39
Lee 5x5
8,80
22,48
13,56
13,47
1,35
Mean 5x5
9,03
22,52
13,77
13,51
1,40
Median 5x5
9,73
23,34
15,12
15,07
1,46
Gamma 5x5
10,35
23,36
15,24
15,18
1,55
Frost 552
10,02
23,34
15,35
15,25
1,60
Lee 5x5
10,35
23,34
15,19
15,06
1,61
Mean 5x5
9,54
23,32
15,14
14,97
1,47
Median 5x5
Perfil de retroespalhamento
A anlise dos perfis permite a clara identificao do alvo lagos entre os valores de 12,5
e 17,5 dB. Contudo, os valores para alagadios tambm se encaixam nesse intervalo de valores,
entre 15 e 17,5 dB. Isso permite inferir que ser necessrio o uso de outros parmetros para
identificao e diferenciao desses alvos, sendo que os valores de retroespalhamento no sero
suficientes. Provavelmente dados de Modelos Digitais de Elevao (DEM), curvatura horizontal
e vertical do terreno, e dados de imagens pticas sero dados auxiliares para pesquisas futuras
(Figura 01).
O dia 09 de maro de 2015, data em que a imagem TERRA SAR X foi registrada, teve
uma forte nevasca, deixando praticamente todaa Pennsula Fildes coberta por neve. Como a
penetrao da banda X no to grande, com comprimento de onda entre 2,4 e 3,8 cm (JENSEN,
2007), algumas reas de alagadios estavam congeladas e com superfcie coberta de neve. Os
valores entre 15 e 17,5 dB que correspondem area de alagadio, segundo perfil (Figura 2), na
fotografia 2 e 3 caracterizam reas cobertas por neve (Figura 3).A fotografia 4 tambm mostra
um alagadio coberto por neve(18-18,8 dB). Assim, seronecessrias mais imagens desse perodo
de vero da Pennsula Fildes para conseguir identificar os valores de retroespalhamento desses
alagadios.
O retngulo na parte em frente a moraina terminal caracteriza uma zona mida entre 11 e
14 dB, o que pode caracterizar uma realigada a dinmica da geleira Collins, com sua hidrologia
supraglacial. J a moraina terminal (fotografia 5) apresenta-se como uma feio coberta de neve
com valores entre 18 e 18,8 dB. Enquanto a fotografia 1 mostra um lago congelado coberto de
neve, com valores de retroespalhamento prximos de um alagadio (Figura 03).
Figura 02: Imagen Quickbird en febrero de 2006 (A) y la imagen TERRA SAR-X en marzo de 2015 (B).
Figure 02: Quickbird image in February 2006 (A) and TERRA SAR-X image in March 2015 (B)
importantes da rea de estudo (JENSEN, 2007). Outro aspecto a ser avaliado, que a imagem de
RADAR em relao a imagem ptica de fevereiro de 2006, identifica mais canais de drenagem e
alagadios, provando a aplicabilidade da imagem TERRA SAR X.
Contudo, h vrios mtodos utilizando imagens pticas que podem complementar o
mapeamento realizado por imagens de RADAR, permitindo a identificao com maior acurcia
as reas dewetlands. Entre estes mtodos destacam-se a classificao espectral, realce de bordas,
ndice de diferena normalizada da gua, ou mesmo mtodos manuais de vetorizao de lagos
(GOVINDHA, et al, 2013).
Consideraes finais
Ressalta-se que h potencial na imagem TERRA SAR-X para identificao de reas
midas, seja de lagos ou de alagadios, mas a data escolhida para mapeamento apresentou toda
rea coberta por neve. Podem ser observados segundo as fotografias registradas em campomuitos
alagadios, moraina frontal e lagos congelados com camada de neve superficial. Dessa forma,
essa superfcie de neve dificultou a caracterizao do retroespalhamento dos alvos citados.
Reduo do rudo speckle tambm deve ser considerado para anlise dos alvos. Nesse
caso, o filtro Median apresentou os menores valores de desvio padro para lagos e alagadios
analisados.
Nos wetlands livre de gelo e neve, o comportamento do retroespalhamento de lagos e
alagadios encontra-se na mesma faixa de valores de amplitude, entre 12 e 17,5 dB, sendo
necessrio informaes de campo, imagens pticas, e um MDE com boa resoluo espacial para
complementar o mapeamento. precisotambm a aquisio de mais imagens TERRA SAR X
para caracterizao da dinmica mensal e sazonal da Pennsula Fildes, em datas onde no exista
cobertura de neve na rea.
Agradecimentos: Centro Polar e Climtico da UFRGS, CNPq e FAPERGS e CAPES.
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Introduction: Clearwater Mesa is located at the SE side of Croft Bay, on James Ross
Island, NE of the Antarctic Peninsula. There, numerous lakes and ponds develop on large
ice-free areas. The mesa is ~8 km2 large and comprised of the James Ross Island Volcanic
Fig. 1: Map of Clearwater Mesa, with blue areas indicating the lakes and ponds included in Table 1.
Group rocks. The mesa is formed by subaqueously deposited, steeply-dipping foreset beds
of hyaloclastite breccia (Taylor Bluff Formation) overlaid by subaerial pahoehoe capping
lavas (Foster Cliffs Formation), both of Pliocene age (Smellie et al. 2013). The mesa
surface lies at ~ 250 m above sea level with more than 50 lakes and ponds. For a brief
description of the characteristics and origin of this pristine and poorly known area, see Lirio
et al. (2015). Patches of lichen are present between Rios Point and Soledad Lake, and
mosses are very common around Cecilia Lake. Aeolian landforms are frequent on the rocks
in the South sector.
Materials and Methods: Photographs taken from an Argentine Air Force Twin Otter flight
during summer 2014 were used in the field to identify the main landforms of Clearwater
Mesa. Lakes and ponds were named, and the area and perimeter of each were obtained by
hand-held GPS device. Map in Fig. 1C was created in Agisoft PhotoScan Professional
software by means of orthorectification the aerial images using ground control GPS points
coordinates. Physico-chemical parameters (pH, conductivity, total dissolved solids,
temperature) were measured in situ several times over the summer 2015, the average values
are shown in Table 1.
Results: The lakes and ponds of Clearwater Mesa are located in depressions formed by
glacial erosion after ice cap retreat. Lakes are located primarily to the South of the mesa
due to outcrops of the impermeable Foster Cliffs Formation lava beds, which allow the
persistence of water on its surface. The main water source of the lakes is surface runoff
from snow and permafrost melting, as suggested by streams, which connect lakes, resulting
in three main lake drainage systems which were observed during the JanuaryFebruary
2015 expedition:
Graciela System: the biggest, formed by Graciela, Linda, Silvia, Ana, Katerina,
Marta, Sara, Nora, Paula, and Valentina lakes. Other lakes, including Adela,
Ludmila, Ileana, Karina, Susan, Claudina, Alejandra, Sandra, and Carmen drain to
this system when levels rise.
Tatana System: formed by Tatana and Esther lakes. This system drains to Julia
Lake when the water level of Tatana rises.
Trinidad System: formed by Trinidad and Argentina lakes.
Each lake system shows low variation in measured physico-chemical parameters. The
remaining lakes on Clearwater Mesa are closed lake basins, and are more variable in
physico-chemical parameters. Some exhibit higher conductivity values and white salt
deposits along their margins, suggest previously higher lake levels and evaporation
processes. On the other hand, in the North part of Clearwater Mesa and in the East sector of
Nuez Valley, hyaloclastite breccia crops out. As these rocks are more permeable, the
occurrence of lakes is scarce here and the water remains underground.
All the above-mentioned lakes show rocks/gravel substrata, very low clastic inputs,
abundant cyanobacterial and algal biofilms, Branchinecta gaini, and Boeckella poppei. The
lakes are very shallow, with the biggest lake, Katerina, being ~1 m deep. Other lakes, such
as Argentina and Ludmila, are presumed to be deeper, though data are lacking at this time.
Lake name
Area
Perim.
Basin
Lake origin
Temp.
pH
Cond.
Branchi
Boeckella
type
ADELA
ADRIANA
ADRU
ALEJANDRA
ALEXIA
ALINA
ANA
ANDREA
ARGENTINA
CARMEN
CECILIA
CLAUDINA
DANIELA
DELIA
ERMINDA
ESTHER
FLORENCIA
GABRIELA
GRACIELA
ILEANA
ILENE
IRMA
JOANNA
JOAQUINA
JUANITA
JULIA
KARINA
KATERINA
LIBERTAD
LINDA
LUDMILA
MALVINA
MARIA
MARTA
MARTINA
MYRIAM
NATALIA
NATASHA
NORA
NORMA
PAULA
ROSA
SANDRA
SARA
SILVIA
SOLEDAD
SOPHIA
SUSAN
TAMARA
TATANA
TRINIDAD
VALENTINA
YAMILA
Lat. (S)
64 00 58.9"
64 01 58.0"
64 01 27.5"
64 01 31.0"
64 01 26.0"
64 00 51,0"
64 01 23.0"
64 01 58.0"
64 02 02.9"
64 01 45.7"
64 01 43.3"
64 01 38.1"
64 01 46.7"
64 01 33.3"
64 01 54.9"
64 01 30.0"
64 01 24.0"
64 01 42.9
64 01 02.8"
64 01 12.6"
64 01 34.8"
64 01 35.8"
64 00 46.6"
64 01 17.1"
64 01 53.2"
64 01 43.5"
64 01 15.9"
64 01 25.5"
64 01 16.5"
64 01 14.7"
64 01 22.1"
64 02 26.0"
64 01 00.3"
64 01 37.0"
64 00 53.6"
64 01 43.6"
64 01 22.7"
64 01 37.6"
64 01 48.2"
64 01 11.2"
64 01 43.5"
64 02 31.4"
64 01 42.6"
64 01 41.5"
64 01 19.1"
64 00 37.8"
64 01 41.0"
64 01 10.2"
64 01 49.9"
64 01 42.9"
64 01 56.3"
64 01 38.2"
64 01 20.9"
Long. (W)
m2
57 43 13.1" 17949
57 43 35.5" 18505
57 42 10.0"
1837
57 43 53.9" 27389
57 44 28.9"
607
57 40 13.0"
n/a
57 43 30.7"
4285
57 41 04.9" 20577
57 43 55.9" 14086
57 42 40.0"
294
57 39 48.3"
6839
57 43 48.6" 30423
57 4329.9"
3566
57 42 36.0"
1649
57 40 48.0"
35
57 44 18.0"
5332
57 40 03.1"
79348
57 43 59.2"
1313
57 43 41.2" 29956
57 43 23.7"
6599
57 42 23.8"
729
57 41 11.4"
1600
57 42 48.3"
5231
57 42 03.2"
2872
57 43 21.1"
5654
57 44 33.9"
656
57 42 36.7" 20691
57 43 03.6" 138247
57 42 08.4"
461
57 44 01.9" 20956
57 44 06.7"
9974
57 40 03.0"
n/a
57 42 55.5"
2503
57 43 04.2"
2740
57 43 13.6"
820
57 43 39.6"
1886
57 42 03.9"
197
57 42 16.4" 13266
57 43 00.0" 65721
57 42 09.6"
1037
57 43 19.3" 14891
57 40 04.0"
n/a
57 42 44.4"
1821
57 42 59.9"
6035
57 43 45.6" 37207
57 41 56.5"
5003
57 44 08.4"
1027
57 42 49.0" 20064
57 42 32.6" 21538
57 44 24.3" 16772
57 44 13.4" 81612
57 43 16.4"
3897
57 44 26.3"
150
m
713
514
251
1200
116
n/a
249
739
524
89
329
956
266
243
24
328
1186
143
840
413
112
252
362
220
300
121
563
2650
105
835
424
n/a
212
226
115
163
56
474
1228
188
556
n/a
190
590
803
385
138
539
692
742
1800
247
47
close
close
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open
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n/a
open
open
open
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open
open
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open
open
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n/a
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n/a
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open
open
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open
open
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close
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
supraglacial
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
morenic
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
ice-contact
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
morenic
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
morenic
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
glacial erosion
C
14.6
9.8
11.0
12.4
14.0
n/a
11.8
7.3
12.2
4.3
8.6
14.7
14.4
9.8
13.9
13.7
1.5
11.8
14.8
13.3
10.1
16.7
16.9
12.3
9.0
10.8
11.8
13.9
14.0
16.2
14.3
n/a
15.1
13.1
17.2
14.6
11.5
8.3
13.8
11.1
13.7
n/a
9.1
13.7
13.7
15.1
12.7
11.7
8.4
14.6
11.9
14.5
8.5
8.2
8.2
8.5
8.4
8.4
n/a
8.0
7.8
9.0
8.1
8.5
8.3
9.3
8.5
8.1
9.0
8.0
8.9
8.2
8.0
8.6
7.7
8.2
8.2
8.8
8.6
8.0
8.1
8.2
8.2
8.4
n/a
8.4
8.2
8.1
9.0
8.9
8.1
8.5
7.8
8.8
n/a
8.2
8.6
8.1
8.5
8.9
8.0
8.0
8.6
8.4
8.8
8.6
S/m
321
4220
243
252
5394
n/a
482
895
523
380
528
241
380
428
5670
279
141
1130
531
221
398
295
269
360
599
1946
294
461
255
600
190
n/a
209
480
2263
214
313
965
444
238
376
n/a
262
515
598
189
3814
162
295
1255
1681
478
421
--necta
gaini
poppei
x
xxx
xxx
x
x
n/a
x
x
x
x
xx
xx
x
x
xxx
xx
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
x
n/a
x
x
x
x
x
x
x
x
n/a
x
x
x
x
x
x
x
x
x
xx
x
x
x
x
xxx
n/a
xx
x
x
x
xxx
x
x
x
x
x
x
x
xxx
x
x
x
x
n/a
x
x
x
x
x
x
x
n/a
xxx
x
x
x
x
xxx
xxx
x
x
-
Table 1: Physico-chemical data collected during January 2015. The maximum and minimum values are marked in
orange and blue, respectively. Relative abundance of Branchinecta gaini and Boeckella poppei is marked by (xxx) for
very abundant, (xx) for abundant, (x) for present, (-) for absent, (n/a) for no data available.
Close to the ice cap and glaciers, glacigenic deposits allow the damming of lakes in
depressions, as is the case for Florencia, Cecilia, Malvina and Rosa lakes. Well-preserved
3
morainic arcs surround Cecilia and Florencia lakes, suggest they were formed by glacial
retreat after the Little Ice Age (Carrivick et al. 2012).
Florencia Lake is the only ice-marginal lake and is the deepest with more than 10 m as
suggested by the size of the glacier it drains. Florencia Lake shows the lowest temperature
and conductivity values, consistent with input from a very diluted glacier meltwaters. The
high clastic inputs form a river delta in the East coast, along with some raised beaches a
few meters above the actual lake, suggest changes in lake level when a great amount of
meltwater from the ice cap reaches the lake.
During February 2015, the ice cap developed an important supraglacial fluvial system, and
the temporary presence of supraglacial lakes such as Alina Lake. A V-shaped valley formed
on hyaloclastite breccia by fluvial erosion was observed near Andrea Lake and the ice cap
margin.
Conclusions: For the first time, we provide detailed geomorphological and biological
observations on the more than 50 lakes and ponds of Clearwater Mesa. These waterbodies
were observed to have different origin, physico-chemical characteristics and associated
biota, and could help in disentangling the evolution of other areas in Antarctica now
covered by ice. Further studies will include detailed geomorphology, deglaciation
chronology, geochemistry of the volcanic rocks, as well as taxonomic and ecological
studies to ascertain the evolution of the lakes and associated biota.
Acknowledgments: The authors thanks to Direccin Nacional del Antrtico and Instituto
Antrtico Argentino for the logistical support in Antarctica. This contribution was
economically supported by PICTO-2010-0096 project.
References:
Carrivick, J.L., Davies, B.J., Glasser, N.F., Nvlt, D., Hambrey, M.J. 2012. Late Holocene
changes in character and behaviour of land-terminating glaciers on James Ross
Island, Antarctica. Journal of Glaciology 58 (212), 11761190.
Lirio, J.M., Coria, S.H., Lopez, N.B., Vignoni, P.A., Kohler, T.J., Kopalov, K., Chaparro,
M.A., Lecomte, K.L., Nvlt, D. and Mac Cormack, W.P. 2015. Characteristics and
Origin of the Lakes and Ponds of Clearwater Mesa, James Ross Island, Antarctic
Peninsula. XII International Symposium of Earth Sciences, Abstracts: 151-152, July
13-15, Goa, India.
Smellie, J.L., Johnson, J.S. and Nelson, A.E. 2013. Geological map of James Ross Island.
I. James Ross Island Volcanic Group (1:125 000 scale). BAS GEOMAP 2 Series,
Sheet 5, British Antarctic Survey, Cambridge, UK.
Laboratorio de Agroecologa, Centro de Ecologa Aplicada, Instituto de Zoologa y Ecologa Tropical, Facultad de
Ciencias, Universidad Central de Venezuela.
2
Instituto de Ciencias de la Tierra, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela.
3
Universidad Pedaggica Experimental Libertador. Caracas
4
Escuela de Qumica, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela.
RESUMEN
Durante la II Expedicin Cientfica Venezolana al Continente Antrtico, se colectaron 12 muestras de
sedimentos superficiales, en el frente de acumulacin del glaciar Collins y en el rea costanera de dos
lagos periglaciales en la cercana de la Base Cientfica Artigas de la Repblica Oriental del Uruguay,
ubicado en Isla Rey Jorge en el Continente Antrtico. Las muestras de sedimentos se secaron a
temperatura ambiente, se homogenizaron, tamizaron y/o decantaron, utilizando columnas de
separacin, lo que permiti obtener los intervalos de tamao: F1 <2; F2 2-45; F3 45-63; F4 63-125;
F5 125-250; F6 250-500; F7 500-1.000; F8 1.000-2.000; F9 2.000-4.000; F10 4.000-8.000; y F11
8.000-16.000 m. Los anlisis incluyeron: termogravimetra (TGA), carbono orgnico (WalkleyBlack), y difraccin de rayos X (DRX). Adicionalmente, se determin por espectroscopa de absorcin
atmica (AA) y emisin ptica con plasma inductivamente acoplado (ICP-OES) las concentraciones
de Ca, Mg, Na, K, Al, Fe, Mn, Co, Cr, Cu, Ni, Pb y Sr, en cada una en las fracciones granulomtricas.
Los mayores contenidos de carbono se asociaron a las fracciones ms finas (limo-arcilla). Los
minerales y rocas identificadas incluyeron: montmorillonita, albita, anortita, andesina y heulandita. No
se determin un enriquecimiento de ninguno de los metales, ni mayoritarios, ni minoritarios, en
ninguna de las fracciones, por lo que la composicin de estos sedimentos es heredada de las rocas que
les dieron origen, lo que se relaciona con un predominio de la meteorizacin fsica en estos ambientes
sedimentarios. Este trabajo permiti establecer una lnea base en cuanto a la concentracin de metales
que sirve de referencia en estudios de impacto y contaminacin ambiental.
INTRODUCCIN
La importancia de los glaciales se asocia a que representan una fuente de informacin de los cambios
ambientales que ocurren en nuestro planeta, especialmente en la actualidad, donde el fenmeno de
calentamiento global, inducido por las actividades antrpicas, ha incrementado la tasa del deshielo
glacial. En este trabajo, se caracterizaron los sedimentos superficiales adyacentes al glaciar Collins y
prximos a la Base Cientfica Artigas de la Repblica Oriental del Uruguay, ubicada en Isla Rey Jorge,
Antrtida insular. El continente Antrtico es considerado una zona de muy baja o ninguna
contaminacin, por lo que el anlisis de sus sedimentos glaciales, permite establecer una lnea base de
concentracin natural de los metales mayoritarios y minoritarios.
Para la caracterizacin de los sedimentos, se emple el anlisis TGA, que consiste en la determinacin
de los cambios de masa en funcin de la temperatura [2]. Esta tcnica permite caracterizar materiales,
ya que a cada temperatura se promueven distintas reacciones, teniendo establecido que a 105C hay
prdida del agua de humedad. Entre 105C y 450C, en presencia de oxigeno tiene lugar la combustin
de la materia orgnica y son deshidratadas las fases minerales como los oxihidrxidos de hierro y
aluminio y el yeso; Entre 450C y 550C, ocurre la descomposicin de las arcillas y de sulfuros de
hierro; y entre 550C y 750C, ocurre la descomposicin trmica de los carbonatos de calcio y
magnesio, adems de la combustin del grafito. Tambin se emple el mtodo de Walkley-Black, para
1
Fig. 1. Zona de muestreo de dos lagos periglaciales adyacente al glaciar Collins y a la Base Cientfica Antrtica Artigas
RESULTADOS Y DISCUSIN
La Tabla 1 muestra la concentracin carbono orgnico, inorgnico y total en los sedimentos de la
fraccin de tamao F1, que present la mayor acumulacin de este elemento.
Tabla 1. Carbono orgnico, inorgnico y total para la fraccin F1 <2
Estaciones de muestreo
E1
E2
E3
AM1
AM2
AM3
AM4
AM5
AM6
AM7
AM8
AM9
AM10
AM11
C-orgnico
C-inorgnico
C-total
%____________________
0,35
0,99
0,30
0,86
0,40
0,89
0,22
0,70
0,68
2,64
0,37
0,97
0,84
3,06
0,33
0,79
0,43
1,05
0,48
1,14
0,57
1,23
________________________
0,64
0,56
0,49
0,48
1,96
0,60
2,22
0,46
0,62
0,66
0,66
Las muestras AM5 y AM7, presentaron un mayor contenido de carbono orgnico, ambas fueron
colectadas en la parte superior de la morrena del frente de retroceso glacial y constituyen sedimentos
recientes dejados por este retroceso, en los que la capa de hielo superficial y permafrost, pudo haber
contribuido a preservar un mayor contenido de carbono orgnico en estos sedimentos.
De acuerdo a otros trabajos realizados en la zona de estudio, se han encontrado valores de carbono
orgnico de hasta 1%, asociado al crecimiento de comunidades biolgicas como lquenes y musgos.
Sin embargo, en este estudio el promedio ponderado del contenido de C-orgnico y C-inorgnico para
cada una de las muestras y fracciones granulometricas, demuestra que el origen de estos sedimentos
es litognico y no biognico. [1] [4]
La Tabla 2, muestra la composicin mineralgica de los sedimentos, que incluye los minerales: albita
y montmorillonita en todas las muestras colectadas. El mineral andesina slo fue identificado en las
fracciones de menor tamao, lo cual indica que estos sedimentos provienen principalmente de rocas
andesticas. La presencia de montmorillonita en los sedimentos indica que el grado de meteorizacin
qumica es muy bajo en estos ambientes antrticos, en los que predominan los fenmenos de
meteorizacin fsica [3]. Igualmente, en la Tabla 2 es posible observar que no existe diferencia en cuanto
a la composicin mineralgica de los sedimentos de ambos lagos, encontrndose los mismos minerales
en ambos casos.
Tabla 2. Composicin mineralgica de los sedimentos superficiales colectados en dos lagos periglaciales, adyacentes al
glaciar Collins, isla Rey Jorge, Antrtida insular
Mineral
Frmula
AM5-F1(a) AM5-F9 AM7-F1(a) AM7-F2 AM7-F6 AM12-F2 AM12-F6
Albita
NaAlSi3O8
+
+
+
+
+
+
+
Montmorilonita
(1/2Ca,Na)0.7(Al,Mg,Fe)4(Si,Al)8O20(OH)4.nH2O +
+
+
+
+
+
+
Barrerita
Na8(Si28Al8)O72*26H2O
+
Clinoptilolita (Ca,K,Na)6(Si30Al6)O72.20H2O
+
Andesina
(Na, Ca)AlSi3O8
+
+
Heulandita
(Ca, Na2)Al2Si7O18.6H2O
+
+
Anortoclasa
KAlSi3O8
+
Anortita
CaAl2Si2O8
+
Cuarzo
SiO2
+
Fe2Si2O6
Ferrosilita
+
La Tabla 3, presenta los valores mnimos y mximos de concentracin de los metales mayoritarios y
minoritarios. Los resultados indican que no se acumulan en ninguna de las fracciones en particular.
Los valores ms altos de concentracin de los elementos mayoritarios se encontraron en las fracciones
F3 y F7, lo que nuevamente corrobora el predominio de los fenmenos de meteorizacin fsica sobre
la meteorizacin qumica en estos ambientes sedimentarios, debido a las bajas temperaturas inducidas
por las capas de hielo sobre estos sedimentos.
Por otra parte, los valores presentados en la Tabla 3 permiten establecer una lnea base de concentracin
de metales en los depsitos sedimentarios adyacentes al glaciar Collins. Como se demostr con los
resultados de composicin mineralgica, sobre estos sedimentos acta principalmente la
meteorizacin fsica, por lo tanto, la composicin de los sedimentos es muy similar a la composicin
de la roca madre, en consecuencia, los valores obtenidos corresponden con la concentracin de forma
natural de estos elementos en estos ambientes sedimentarios y por lo tanto estos estn libre de
contaminacin.
3
De igual forma, se realiz una comparacin de los valores de concentracin obtenidos en este trabajo
y los valores obtenidos en trabajos previos realizados en otras zonas del continente Antrtico,
encontrndose que los valores obtenidos en este trabajo estn dentro del rango de concentraciones
presentadas por otros autores.
Tabla 3. Concentracin de metales mayoritarios y minoritarios en sedimentos superficiales adyacentes al glaciar Collins,
isla Rey Jorge, Antrtida insular
Concentracin
mnima
mxima
Na
Mg
Al
Ca
Fe
Mn
Sr Cr Co
Ni Cu Pb
mg kg-1__________________________________________________
400
14
15 0,4 0,24 0,06
1 0,18
84.900 3.476 510 50
42
11 86
26
___________________________________________________________
442
9.968
47
2.487
11.743
70.184
2.048
14.549
68
8.071
CONCLUSIONES
La principal fuente de sedimentos en el rea de muestreo adyacente al glaciar Collins, es la
morrena frontal.
La zona de mayor acumulacin de C-orgnico es la parte superior de la morrena, recin
desprovista de hielo, que actuaba como capa protectora. La mayor concentracin de carbono
se encontr en la fraccin de tamao F1<2 m.
El promedio ponderado del contenido de C-orgnico y C-inorgnico para cada una de las
muestras y fracciones granulomtricas, demostr el origen litognico de estos sedimentos.
Los principales minerales primarios y secundarios encontrados en los sedimentos fueron:
albita, anortita, andesina, heulandita y montmorillonita, demostrando que los sedimentos
provienen de la misma fuente litolgica y procesos geoqumicos de posible origen hidrotermal.
La presencia de montmorillonita en estos sedimentos indica, que aunque bajo, hay procesos de
meteorizacin qumica.
No se encontr diferencia entre la composicin mineralgica en los sedimentos colectados en
ambos lagos periglaciales adyacentes al glaciar Collins.
La mayor concentracin de metales mayoritarios y minoritarios se encontr en las fracciones
de tamao F3 45-63 y F7 500-1.000 m y constituyen referentes de lnea base en estudios de
impacto y contaminacin ambiental
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen al MPPCTI y al Programa Antrtico Venezolano.
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Antarctic coastal environment (Marian Cove, King George Island): Seasonal patterns from a sediment trap study. Estuarine,
Coastal and Shelf Science 73 111e122.
Los valores de los ndices de alteracin qumica CIA y PIA (Fig. 2), son ms altos en los
lagos 1 y 2, intermedios en lago 5 y casi constantes para el resto de los lagos. Esto
coincide con el anlisis mineralgico (Tabla I): el contenido de minerales de arcilla es
ms alto en los lagos 1 y 2, y plagioclasas es el mineral dominante en todos los otros
lagos. La Fig. 3 muestra enriquecimiento de Co, Cu y Zn en el lago 4, quien est situado
cerca de varias estaciones antrticas. Los anlisis estadsticos multivariables (Figs. 4 y 5)
revelan 4 grupos distintos de lagos bien definidos.
Nuestros resultados sugieren que los procesos deposicionales tienen poca influencia sobre
la geoqumica de los elementos investigados y que las rocas locales son la fuente
fundamental de sedimentos en los lagos de pennsula Fildes. Ellos indican meteorizacin
qumica moderada en los sedimentos lacustres. El grado de meteorizacin qumica al que
las rocas fuentes enriquecidas en plagioclasas, han sido sometidas, es relativamente ms
alto en los lagos 1 y 2, que estn localizados en elextremo sur de pennsula Fildes, la
regin ms alejada del glaciar Collins. Esto sugiere que la distancia al frente de hielo
glacial es un factos importante que influencia la meteorizacin qumica en el rea.
Los resultados sugieren 4 ambientes sedimentarios lacustres diferentes en pennsula
Fildes: i) lagos 1 y 2 con valores relativamente altos de minerales de arcilla, ii) lago 4 con
enriquecimiento antropognico de Co, Cu and Z, iii) lago 7 con valores relativamente
altos de Ba y P, y un alto contenido de zeolitas, y iv) todos los otros lagos estudiados. Se
presenta valiosa lnea base de informacin cientfica para futuros estudios de evaluacin
ambiental en la zona.
Agradecimientos: Al FONACIT (Proyecto No. 2012002393) de Venezuela, al INACH
(Chile) y PROANTAR (Brasil).
Bibliografa:
Liu, X.D., Sun, L.G., Xie, Z.Q., Yin, X.B. & Wang, Y.H. 2005.A 1300-year record of penguin populations
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Island, Antarctica), Marine Pollution Bulletin, 79, 321-325.
Tabla I. Mineraloga de los sedimentos lacustres estudiados. Pl, plagioclasas; Qtz, cuarzo; Ol, olivino;
Mgt, magnetita; Px, piroxenas; Hem, hemetita; Cal, calcita; Chl; clorita; Zeo, zeolitas.
Mineral Composition
Pl
Qtz
Ol
Mgt
Px
Hem
Cal
1
****
******
**
*
2
***
******
**
**
3
******
***
**
**
*
4
*****
***
**
***
**
**
5
******
**
**
***
*
6
******
*
**
**
**
7
*****
**
*
**
**
**
* <5%; ** (5 10)%; *** (11-20)%; **** (21-30)%; *****( 31-40)%; ******> 40%
Lake
Chl
Zeo
*
*
*
*
**
**
*****
Clays
****
****
***
***
***
***
Fig. 4. Dendogramas (Cluster Analysis) diferentes muestran los mismos cuatro grupos, a: complete linkage
method, b: unweighted pair- group average method, c: weighted pair- group average method, d: ward`s
method.
INTRODUO
O monitoramento de geleiras relevante por elas representarem indicadores sensitivos s
mudanas climticas e agem como importantes reguladores do sistema climtico, pois
influenciam no albedo e contribuem para o gradiente trmico global (ZEMP et al., 2008).
Este trabalho tem como objetivo investigar as flutuaes de rea e a caracterizao da
configurao de trmino das geleiras Znosco e Dobrowolski (setor norte), localizadas na Baa do
Almirantado, ilha Rei George, Antrtica (Figura 1).
Figura 1. Ubicacin de los glaciares Znosco (I) y Dobrowolski (D) en la Baha del Almirantazgo, Isla Rey Jorge..
Figure 1. Location of Znosco (L) and Dobrowolski(D) Glaciers in Admiralty Bay, King George Island.
A geleira Znosco atualmente caracterizada como uma geleira de frente terrestre (landterminating glacier), perdendo massa em terra. Foi evidenciado que h duas dcadas,
aproximadamente, ocorreu a formao de um lago proglacial em sua frente.
A geleira Dobrowolski setor norte possui configurao de trmino no mar, sendo considerada
uma geleira de mar (tidewater), formando falsias de gelo de onde se separam growlers. O setor
ao sul da geleira Dobrowolski tambm caracterizado como geleira de mar, apresentando
comportamento divergente ao do setor norte, pois se encontra mais estabilizada.
Vrios estudos indicam que geleiras na Pennsula Antrtica mostram uma rpida resposta a
estas mudanas (ABDALATI e STEFFEN, 2001; BOLCH e KAMP, 2006), em escalas temporais
que variam entre centenas de anos e dcadas (SIMES et al., 2011) As massas de gelo das ilhas
Shetland do Sul so particularmente sensveis s variaes climticas em funo de sua posio
geogrfica, da pequena espessura de gelo e por estarem muito prximas do ponto de fuso sob
presso (KNAP et al., 1996; ANDERSON, 1999; ARIGONY-NETO et al., 2001; SIMES et al.,
2011). Com o processo de retrao das geleiras, torna-se importante o monitoramento das
respostas da dinmica glacial.
MATERIAIS E MTODOS
As flutuaes de rea foram mapeadas no software ArcGIS Desktop 10.2.1 para calcular o
grau de retrao anual e perda de rea total. A taxa de retrao de cada geleira foi calculada a
partir da rea perdida no perodo analisado dividido pela quantidade de anos no perodo.
Foram utilizadas imagens SPOT (obtidas em Fevereiro de 1988 e de 2000 e em Maro de
1995), LANDSAT-7 ETM+ (obtidas em Janeiro de 2007 e Fevereiro de 2011, com 30 metros de
resoluo no modo espectral, em http://earthexplorer.usgs.gov) e LANDSAT-8 OLI (obtida em
Fevereiro de 2015, com 30 metros de resoluo no modo espectral, em
http://earthexplorer.usgs.gov) para detectar variaes na rea das geleiras Znosco e Dobrowolski
(Tabela 1). Neste estudo, foram aplicadas as coordenadas UTM (Universal Transversa de
Mercator) e sistema geodsico WGS84 (World Geodetic System 84) zona 21S.
Tabela 1. Los datos de teledeteccin utilizados. Table 1. Remote sensing data used.
Data
Fev/1988
Mar/1995
Fev/2000
Jan/2007
Fev/2011
Fev/2015
Satlite
SPOT HRV
SPOT HRV
SPOT HRV
LANDSAT-7 ETM+
LANDSAT-7 ETM+
LANDSAT-8 OLI
Sensor
MSS 20 x 20 m
MSS 20 x 20 m
MSS 20 x 20 m
MSS 30 x 30 m
MSS 30 x 30 m
MSS 30 x 30 m
Bandas
Composio 3, 2 e 1
Composio 3, 2 e 1
Composio 3, 2 e 1
Composio 3, 2 e 1
Composio 3, 2 e 1
Composio 4, 3 e 2
As bacias de drenagens das geleiras analisadas foram delimitadas por Bremer (1998), sendo
considerado apenas o setor norte da Dobrowolski devido a sua maior instabilidade.
RESULTADOS E DISCUSSO
Os resultados dos mapeamentos realizados evidenciam uma continuidade no processo de
retrao frontal durante o perodo analisado (1979-2015), sendo evidenciado na geleira Znosco
uma perda de rea de aproximadamente 15% (0,30 km) de sua rea total, na Dobrowolski-N
19% (1,86 km) e na Dobrowolski-S, onde foi evidenciado perda de rea de aproximadamente
20% (0,87 km). A figura 2 ilustra um grfico do processo de retrao das geleiras e a sua
continuidade.
N
Figura 3. Ilustracin del lago proglacial en Glaciar Znosco (I). Glaciar Dobrowolski en 2015 (D).
Figure 3. Illustration of proglacial lake in Znosco Glacier (L). Dobrowolski Glacier in 2015 (R).
CONICET. Divisin Paleontologa de Vertebrados. Museo de La Plata. Paseo del Bosque s/n, B1900FWA.
La Plata, Argentina. bCorresponding author acostacaro@fcnym.unlp.edu.ar
cartilaginis tibialis poco profunda y ms extendida. El fmur presenta una difisis crneocaudalmente ms comprimida y fuertemente curvada.
Respecto de los Hesperornithiformes, los Gaviiformes se distinguen por una mayor
gracilidad y compresin latero-medial del tarsometatarso y la presencia de un hipotarso;
por la presencia de un pons supratendineus cubriendo el ancho y centrado canalis
extensorius en el tibiotarso; y por la menor robustez y extrema curvatura del fmur.
El hbito locomotor altamente especializado de los Gaviiformes se correlaciona
directamente con los caracteres morfolgico-esqueletarios presentes principalmente en los
elementos del miembro posterior. Los siguientes caracteres hacen posible la certera
identificacin de los restos, an a partir de elementos incompletos: la extrema compresin
crneo-caudal, la curvatura de la difisis y la profunda fovea ligamentaris capitis en el
fmur; la compresin crneo-caudal de la difisis, el amplio sulcus extensorius, y la
presencia de un pons supratendineus en el tibiotarso, la compresin latero-medial, el gran
desarrollo del hipotarso y el arreglo y extensin relativa de las trcleas metatarsales. Estos
caracteres permiten a su vez distinguirlos claramente de los Charadriiformes y
Anseriformes, registrados en el Cretcico del continente Antrtico (Cordes, 2002; Clarke et
al., 2005 respectivamente).
Estos materiales permiten reafirmar la presencia de los Gaviiformes en el Cretcico
Superior y Eoceno inferior de Antrtida. Esto resulta consistente con ideas previas acerca
de la radiacin de las Neornithes en momentos previos al lmite K-P y con el origen austral
de las Aequornithes, soportado por un vasto registro que incluye: los ms antiguos
Gaviiformes y Procellariiformes (Acosta Hospitaleche et al. 2015), uno de los registros ms
tempranos de Sphenisciformes (Tambussi et al., 2005) y las asociaciones ms abundantes y
diversas de pinginos de todo el mundo (Acosta Hospitaleche et al., 2013) y registros
eocenos de Ciconiiformes (Jadwiszczak et al., 2008).
Los actuales Gaviidos son aves buceadores que pasan la mayor parte de sus vidas en
el agua. La configuracin de las trcleas de su tarsometatarso es indicativa del hbito
locomotor. Las especies palegenas conocidas exhiben una adaptacin similar y
probablemente habran vivido en ambientes lmnicos subtropicales (Mayr, 2009). Aunque,
no tan extrema, esta morfologa tarsal se encuentra presente tambin en los especmenes
cretcicos, sugiriendo que sus habilidades bajo el agua se habran desarrollado al menos en
parte durante el Cretcico Superior.
A diferencia de lo que ocurra en el Hemisferio Sur, donde la diversificacin de los
pinginos podra haber generado una alta competencia para los Gaviiformes, la extincin
de los Hesperornithiformes en el Hemisferio Norte, habra dejado un nicho vacante para
este grupo (ver Chatterjee 2002). Esta podra haber sido la causa por la cual los
Gaviiformes habran quedado restringidos al Hemisferio Norte, mientras que los
Sphenisciformes se convirtieron en las aves dominantes en los mares australes.
El continente antrtico parece haber cumplido un rol clave en el origen y
diversificacin de varios grupos de aves, en particular aquellos relacionados a los
ambientes costeros. Se espera que los nuevos restos recientemente colectados y futuros
hallazgos permitan comprender las relaciones entre los distintos grupos de aves buceadoras
y marinas en general, as como la contrastacin de las hiptesis paleoecolgicas y
paleobiogeogrficas propuestas.
VIEIRA, R.1, ROSA, K.K1,2, MAROTTA, H.1, JAA, R.3, SIMES, C.L.2, SOUZA
JR, E.2, FERREIRA, F.1, SANTOS, L.R1, SANTOS, J.V.1, PERRONI, M.A1,
PETSCH, C., GONALVES, M.1, SANTOS, J.P.F.1, RODRIGUES, R.I.1, GALVO,
J.C.M1, FELIZARDO, J.P.S.4
1
Geografia, Av. Gal. Milton Tavares de Souza, s/n, Campus da Praia Vermelha, Boa Viagem - Niteri/RJ
Brasil
2
Instituto Antrtico Chileno (INACH), Plaza Muoz Gamero, 1055, Punta Arenas - Chile
Laboratrio de Biogeoqumica, UFRJ - Instituto de Biologia Depto de Ecologia, Av. Carlos Chagas Filho,
INTRODUCIN
MATERIALES Y MTODOS,
La geomorfologa del rea fue observada y los sedimentos fueron obtenidos en las
actividades de campo. Actividades en terreno en la isla Rey George fueron efectuadas
durante las Operaciones Antrticas (OPERANTAR XXII - verano 2003/2004),
OPERANTAR XXVI (verano 2007/2008), OPERANTAR XXVIII (verano 2009/2010) y
OPERANTAR XXIX (verano 2010/2011) y han posibilitado profundizar los estudios
geomorfolgicos y sedimentolgicos en la zona proglacial de los glaciares Ecology y
Wanda. Fueron identificados diversos tipos de depsitos y rasgos, aparte de reas espesas
de acumulacin de detritos basales. Esa observacin indica que grandes cantidades de
material detrtico glacial son liberadas de la base de los glaciares, entrando como material
en suspensin en los ambientes lacustres e marino, a travs de canales de fusin, procesos
eses que han sido mensurados y monitoreados. Entender, por lo tanto, las relaciones entre
clima y deposicin glacial es tambin vital para descifrar la variabilidad y cambios
climticos a partir de los registros sedimentares.
Fueran efectuados anlisis biogeoqumicos, de parmetros fsicos de la composicin
mineralgica, distribucin granulomtrica, caractersticas macroscpicas de los sedimentos
e imgenes de satlite.
CONCLUSIONES
Centro Polar e Climtico, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonalves 9500, Porto Alegre, RS,
Laboratrio de Processos Sedimentares e Ambientais (LAPSA), Universidade Federal Fluminense, Av. Gal. Milton
Introduction
Recent researches have documented increasing atmospheric and temperatures across
the Antarctic Peninsula and Southern Ocean (TURNER et al., 2005; CHAPMAN and
WALSH, 2007; DAVIES et al., 2012). The climate change and glacial system linkage is so
strong that many small glaciers existing today will probably disappear within a few more
years or decades (DYURGEROV and MEIER, 2000; HAEBERLI and BENISTON, 1998;
HASTENRATH and GEISCHAR, 1997; PAUL et al., 2004).
This work investigates the geomorphological and glaciological response of landterminating and tidewater glaciers retreat processes in King George Island, located off the
Antarctic Peninsula, to climate change on a multi-decadal timescale.
Because their small and near the melting point under pressure, the King George
Island glaciers are more sensitive to climate variations with faster responses to new climatic
conditions, making it an indicator of possible future consequences for other regions of the
globe (KNAP et al., 1996).
Methodology
SPOT, ASTER, Landsat satellite imagery, TERRASAR X band and COSMOSkyMed (Constellation of Small Satellites for Mediterranean Basin Observation) images in
spotlight and stripmap mode (1 and 3 meters of the spatial resolution) with HH and VV
polarization and topographical data were used to detect and measuring glacier and
proglacier changes between 1979 to 2015.
Were generated topography, sedimentary and in-situ glaciological data, obtained in
the fields in 2007, 2010, 2011, 2013, 2014 and 2015 summers.
Was generated the orthophotomosaic and Digital Elevation Model of the spatial
resolution as base for geomorphological mapping in ice-free land areas in Admiranty bay.
Spatial landform distribution mapping is also useful to characterize proglacial zones glacier
and for glacial erosion and retreat process reconstruction.
The glaciation process resulted in several marine terraces, erosional and
deposicional glacial landforms. We observed several eroded bedforms on these ice-free
areas, such as rock moutonns, stoss and lee, striated pavements, artes, U-shaped valley
and glacial cirques.
Proglacial meltwater channels and lakes are located proglacial environments of the
land- terminating glaciers. Flutings deposits were identified in the more recent proglacial
areas in Wanda and Collins glaciers.
The moraine sets are interpreted as terminal positions of the glaciers in different
phases of deglaciation in response to regional climate warming trend in last six decades.
Recent changes in geomorphological process are evidenced to rapid postdepositional paraglacial reworked ice free areas. Subglacial deposits characteristics in
Ecology, Collins, Wanda glaciers indicate that the largest glacial pathways were occupied
probably by warm-based ice.
Conclusion
Most glaciers of the King George Island ice cap have experienced consistently a
frontal retreat processes for the last six decades. This work evidences the geomorphologic
dynamic responses to environmental changes in small land-terminating glaciers in King
George Island.
Glacial geomorphological features, including tors, aretes, glaciofluvial channels,
glacial circles and U-shaped valleys, were identified. Subglacial deposits characteristics in
Ecology, Collins, Wanda glaciers indicate that the largest glacial pathways were occupied
probably by warm-based ice. The geomorphic maps are used for deglaciation evolution
reconstruction of this environment, and thus contribute to the study of glacial dynamics and
periglacial environmental changes observed in the study area.
Acknowledgements: INCT da CRIOSFERA, PROANTAR CNPq and FAPERGS.
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DAVIES, B. J.; CARRIVICK, J. L.; GLASSER, N. F.; HAMBREY, M. J.; SMELLIE, J. L. 2012. Variable
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INTRODUCCION
El estudio de los glaciares posee gran importancia dado que su comportamiento
presenta estrecha vinculacin con la temperatura local (Patterson, 1994; French, 2007;
Silva Busso, et.al.2003; Silva Busso 2009), por lo que la comprensin de su dinmica es
importante para conocer y poder predecir estos cambios. El retroceso o avance glaciario, es
una respuesta directa a un cambio climtico. De todas maneras, la respuesta que presenta un
glaciar algunas veces no depende exclusivamente de la variabilidad climtica regional, sino
de efectos topogrficos locales y de la distribucin del glaciar con la elevacin (Kuhn et al.,
1985).
El presente trabajo tiene por objetivo realizar un anlisis sobre los cambios
glaciolgicos, geocriolgicos e hidrolgicos que sucedieron en el perodo 2000-2015 en el
sector de Baha del Diablo, ubicada en Isla del Diablo, Antrtida, utilizando un mosaico
aerofotogrfico, imgenes satelitales e informacin de campo recolectada durante campaas
sucesivas.
La Baha del Diablo (63 49 S, 57 20 W), Isla Vega, Antrtida, se ubica al
noroeste de la Pennsula Antrtica (Fig. 1). En este sector de la pennsula el clima es
subpolar, rido y presenta temperatura medias anuales que oscilan entre -5 y -10C
(Reynolds, 1981), habindose registrado un significativo calentamiento atmosfrico de
1.5C en la regin (Skvarca et al., 1998). El sector de Baha del Diablo presenta un
ambiente periglaciar de permafrost contnuo evidenciado por datos geomorfolgicos y
climticos (De Angelis et al. 2002). La precipitacin anual estimada de la zona es de
450mm, y la temperatura media es de aproximadamente -4,5C. La vegetacin es de escasa
a nula y se encuentra constituida principalmente por musgos y lquenes, que ocupan
pequeos sectores hmedos y subacuticos (Silva Busso et al., 2003).
Figura 2. Imagen Satelital Lansat 7 Enhance Tematic Mapper Plus (ETM+) tomada el 1 de febrero de 2015,
sobre la cual se observan los frentes de los glaciares para los aos 2000 y 2015.
En ella puede notarse un fuerte retroceso en las posiciones de los frentes de los
glaciares Toke y Smith. El glaciar Toke retrocedi una distancia promedio de 150m,
dejando una superficie expuesta de 189.550 m2, mientras que el glaciar Smith sufri un
retroceso de 60 m, en promedio, dejando una superficie expuesta de 60.294 m2,
aproximadamente. El glaciar Baha del Diablo no presenta modificaciones significativas en
la posicin de su frente en este lapso de tiempo. Adems, como cambios morfolgicos
significativos del periodo citado pueden mencionarse la formacin de icing por delante de
la morena frontal y reactivacin de los paleocauces.
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
De los resultados obtenidos puede notarse retrocesos de los frentes glaciarios para
dicho perodo, pero este cambio no afecta a todos los glaciares de la zona de la misma
manera: El glaciar Toke es el que mayor retroceso tuvo en estos ltimos 15 aos, esto fue
de 150 m en promedio, exponiendo una superficie de 189.550 m2. Este retroceso favoreci
la formacin de permafrost en la morena de fondo del mismo glaciar, as como tambin en
las condiciones de la red de drenaje. Las lagunas marginales que se encontraban asociadas
al glaciar en el ao 2000, actualmente se encuentran desconectadas y con menor contenido
de agua. Otro de los cambios que pueden notarse, es en la red de drenaje asociada a este
glaciar, que para el ao 2000 la misma tena como cabecera estas lagunas marginales,
mientras que para el 2015 estos cauces se secaron y aparecieron otros nuevos sobre la
superficie expuesta.
Por otro lado el glaciar Smith present un retroceso de 60 m, dejando una superficie
expuesta de 60.294 m2. As mismo, no se observan cambios significativos en la posicin
del frente del Glaciar Baha del Diablo, permaneciendo ste estable. Este ltimo presenta
una morena frontal de cizalla con ncleo de hielo formada en el estado glacial IV (De
Angelis et al. 2002), por lo que los mayores cambios que se producen son en la
disminucin de altura, la cual es actualmente estudiada por medio de relevamientos de
campo.
involucrados (i.e. Amrica del Sur, Australia, India, Madagascar), seguida de un evento de
vicarianza. La evidencia paleogeogrfica, hace evidente que el sector occidental y oriental
de la Antrtida debieron entonces constituir un rea vinculante para los Ausktribosphenida
durante el Mesozoico y sera esperable su descubrimiento en dicho continente, cuanto
menos en sedimentos del Jursico Temprano. La persistencia o extincin de este grupo en
la Antrtida durante el lapso Jursico Medio-Cretcico, no queda confirmada a partir del
presente anlisis, pero tampoco refutada. En efecto, los eventos vicariantes mencionados
permiten explicar los registros del Cretcico de Australia, e incluso si el registro de
Vincelestes del Cretcico de Patagonia, si tal como fuera considerado esta forma fuera parte
de los Ausktribosphenida (ver Bonaparte, 2008). Los Monotremata por el contrario,
parecen explicar su distribucin disyunta a partir de un evento de dispersin desde
Australia, como rea ancestral, hacia Amrica del Sur. Este evento se relaciona
directamente con las reconstrucciones paleogeogrficas que vinculan stas reas, con
Antrtida Occidental, la cual tambin habra servido de puente pero en sentido inverso, para
la llegada de los marsupiales desde Amrica del Sur a Australia.
En sntesis, el presente anlisis permite inferir la presencia de los Ausktribosphenida
al menos para el Jursico en todo el continente Antrtico y la de los Monotremata,
restringidos a la Antrtida Occidental, a partir del Cretcico.
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RGIMEN TRMICO DEL SUELO DE LOW HEAD , ISLA REY JORGE, ANTRTIDA
MARTIMA
(Soil Thermal Regime of Low Head, King George Island, Maritime Antarctica)
Michel R.F.M.1, Schaefer C.E.G.R2, Ivan C.C. Almeida3, Andrade A.M.4
1
1. Introduction
International attention to permafrost degradation has grown since it has been recognized as a controller on landscape evolution and ecosystem responses to climate change. The lack of information on
permafrost is applicable to most of Antarctica; with the exception of the McMurdo Dry Valleys, permafrost research has been less systematic (Vieira et al., 2010). Recently, there has been a coordinated effort to monitor permafrost properties and active-layer dynamics, the Antarctic and sub-Antarctic Permafrost, Periglacialand Soil Environments (ANTPAS) project, aims ataddressing key issues of Antarctic permafrost science. The establishment of standards thought the Circumpolar Active Layer Monitoring (CALM) program has optimized the efforts to study the impacts of climate change in permafrost
environments.This paper describes the results of one branch of this coordinated effort, and analyses the
soils thermal regime of a CALM-S site located at Low Head, King George Island.
2. Material and Methods
Low Head is a headland 1 nautical mile (2 km) south-southwest of Lions Rump, the west side
of the entrance to King George Bay, on King George Island (KGI). KGI is the largest of the South Sh etlands Archipelago with approximately 1400 km2. Similarly to the rest of the archipelago, it is almost
completely glaciated, having over 5 % of its area free of ice during the summer (Simeset al. 1999).
Low Head has a diversified geology, formed mainly of andesites, basalts and rhyolites from the Polish
cove formation and sedimentary rocks (Birkenmajer, 1982). The area has served as home for Penguins
and Skuas for a long period in the past, today rich ornithogenic soils are the remains of possibly one of
the first colonization sites of King George island.
The region experiences a sub-antarctic maritime climate with milder temperatures, strong winds
and frequent weather changes. According to the Kppen climate classification, the south Shetlands islands have an ET climate, South Hemispheric Polar Oceanic (Kppen, 1936). The active layer monitoring sites were installed at Low Head, King George Island, in the summer of 2011, and consist of thermistors (accuracy 0.2 C) installed at 1 m above ground for air temperature measurements at one soil
profile on a recent exposed moraine deposit, arranged in a vertical array (CambicCryosol (Eutric, Turbic, Skeletic)94 m asl, 5 cm, 10 cm, 30 cm, 50 cm, 100 cm). All probes were connected to a Campbell
Scientific CR 1000 data logger recording data at hourly intervals from March1st2011 until February
28th 2015.
We calculated the thawing days (days in which all hourly soil temperature measurements are
positive and at least one reading is warmer than 0.5 C), freezing days (days in which all hourly soil
temperature measurements are negative and at least one reading is colder than -0.5 C), isothermal days
(days in which all the hourly measurements range only between 0.5 C), freezethaw days (days in
which there are both negative and positive temperatures with at least one value higher than 0.5 C or
lower than -0.5 C), thawing degree days (TDD, obtained by the cumulative sum of the mean daily
temperatures above 0 C) and freezing degree days (FDD, obtained by the cumulative sum of the mean
daily temperatures below 0 C) according to Guglielmin et al. (2008). The active-layer thickness (ALT)
was calculated as the 0 C depth by extrapolating the thermal gradient from the two deepest temperature measurements (Guglielmin, 2006). The histogram (frequency distribution of temperature readings)
was plotted and a multivariable regression was performed to describe soil temperatureat 100 cmfrom
temperature readings of the air and overlying layers,using R software.
3. Results and Discussion
Soil temperature reaches a maximum daily average inmidJanuary 2014 at 5 cm, reaching a minimum in earlyAugust 2013 (10.5 C, -12.5 C) (Figure 1). The active layer thickness (ALT) reaches a
maximum of 103.3 cm on February 7th2012. Although maximum ALT was reached in 2012, 2014 had
the warmest winter,July average temperature of -3.15.There was a preponderance of freeze days on the
studied profile, yearly values are around 200 on 2012 and 2014, on 2013 values are around 170 for the
different depths; total values are 774 at 5 cm, 785 at 10 cm, 762 at 30 cm, 755 at 50 m and 820 at
100cm. Thaw days are the second most important class recorded, total values found at 5 cm are 290,
379 at 10 cm, 359 at 30 cm 251 at 50 cm and no thaw day was recorded at 100 cm. The number of iso thermal days was greater in depth, 581 thaw days were recorded at 100 cm, 392 at 50 cm, 279 at 30 cm,
180 at 10 cm and 93 at 5 cm. Freeze thaw days were more common at surface, 253 occurred at 5 cm,
66 at 10 cm, 10 at 30 cm, 12 at 50 cm and 9 at the bottom most layer. Over the 1461 days of the studied
period the sumof all positive daily average temperatures was 1688.8 TDD at 5 cm,1342.7 TDD at 10
cm, 908.0 TDD at 30 cm and 391.3 TDD at 50 cm. Only 1.30 TDD were summed at 100 cm. The sum
of allnegative daily average temperatures was -3314.8 FDD at 5 cm, -3208.9 FDD at 10 cm, -2747.5
FDD at 30 cm, -2324 FDD at 50 cm and -1923.2 FDD at 100cm. Only 755.6 TDDwere summed for the
air temperature and -5058.8 FDD. Over all the profile experiences a transition from paraglacial to
periglacial conditions with the occurrence of frequent freeze and thaw cycles but the preponderance of
negative temperatures, the proximity of the glacier still has a great impact over the preservation of permafrost. All layers have a preponderance of temperatures around 0 C, remarkably the bottom most layer (Figure 2). The zero curtain effect caused by the latent heat of water when changing state has a
strong influence on the monitoring site. Equation estimates (multivariate regression) considering the
temperature at the lowermostlayer as dependent on air and the other layer's temperaturesgenerated a adjusted R-squared higher than 0.90, and standarderrors for the beta coefficients within acceptable range.
This estimate aidsthe understanding of the energy flux in the profile, how the delay on temperature
changes affects the thermal gradient. The temperature at 100 cm was more influenced by the closest horizon, but the coefficient of the 30 cm layer was still 0.6 and R 2 did not improve after removing one of
the variables. The contribution of air and topsoil temperatures (5 cm) wassmall, due to the time lag in
temperature changes (Figure 3).All coefficients were statistically significant. The equation proposedoverestimated permafrost temperatures in summer and underestimates temperatures in winter,probably a consequence of the strong buffer effect of the permafrost table. Predicted values diverged from
observed ones by a maximumof 1.6, a minimum of -1.4. Almeida et al. (2014) found smaller residues
when working on drier sites at Lions Hump
4. Conclusions
The active layer thermal regime at Low Head typical of periglacial environments, with strong
influence from the near by glacier. Surface temperatures showgreat variation during the
summerresulting in frequent freeze and thaw cycles. Most soil temperaturereadings were close to 0 C,
remarkably near permafrost table. The temperature profile during the studied period indicatesthat the
active layer thickness reached a maximum of 103.3 cm on February 7th2012.
Acknowledgements: This study was supported technically and logistically by the Brazilian Navy,
MMA, and UFV; grants received from CNPq.
5. Selected References
Vieira, G., Bockheim, J., Guglielmin,M., Balks, M., Abramov, A.A., Boelhouwers, J., Cannone, N.,
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Resumen
Se considera este estudio relacionado con el punto dos de los ejes de Investigacin propuestos
por el INAE, esto es eje interrelacin Ecuador Antrtida. Se trata de conocer el balance de masa
sobre un segmento del territorio Antrtico Ecuatoriano y compararlo con los balances de masa
que han sido medidos sobre los glaciares continentales Ecuatorianos, los cuales estn
considerados dentro de la banda tropical., los mismos han sido monitoreados desde el ao 1994
y uno de ellos forma parte de la red mundial de monitoreo de Glaciares que mantiene la
UNESCO a travs del World Glaciar Monitoring Service
Abstarct
This study is related to one of the research objectives proposed by INAE ( Ecuadorean
Antarctic Institute) which is the interrelation between Ecuador and Antarctic.The study is
focused on the measurement of the mass balance over a segment of the Antarctic region and the
correlation of these data with the mass balance observed for the Ecuadorean continental
glaciers. The Ecuadorean glaciers are located in the tropical band and those have been
monitored since 1994. One of these glaciers is monitored as part of the research project funded
by UNESCO through the World Glacier Monitoring Service.
Introduccin
Se propone comparar estos valores con los obtenidos en el rea continental y tratar de
relacionarlos con los fenmenos climticos estacionales como es el caso del ENSO (5-6).
Actualmente el balance de masa para los glaciares continentales esta como promedio en un
valor de prdida cercano a los 600 mm (6-7) equivalentes en agua, del mismo modo se ha
podido establecer que para los glaciares ecuatorianos continentales actualmente sufren un
proceso de desglaciacin acelerado (2-4-6), como referencia de acuerdo con el ultimo inventario
realizado dentro del Programa Glaciares Ecuador del INAMHI la cobertura actual esta en un
valor cercano a lo 40 Kilmetros cuadrados, observndose una reduccin de alrededor del 27%
en los ltimos 45-33 aos (4).
Objetivo General
Conocer la evolucin del balance de masa y relacionarlo con los resultados obtenidos en el
segmento continental. Establecer posibles relaciones con los fenmenos climticos regionales.
rea de Estudio
El rea considerada se encuentra en el segmento comprendido entre la coordenadas UTM
3071750-3073500 N ; 357250-359500E que corresponde a Punta Fort William.
Metodologa aplicada y Materiales utilizados
Como metodologa de trabajo se utilizaron todos los datos topogrficos obtenidos en las
diferentes expediciones realizadas hasta el inicio de este Proyecto (ao 2010), se hizo una
medicin de puntos relevantes (DGPS) durante las campaas mencionadas (XIV-XV-XVIXVII-XVIII y XIX) . Se estimo el balance de masa para el cuadrante glaciar de Punta Fort
William mediante la utilizacin del mtodo glaciolgico clsico que consiste en la utilizacin de
una red de estacas instaladas en la zona de ablacin del Glaciar. La red instalada durante el ao
2010 consista de trece (13) estacas de las cuales se ha sufrido la prdida de cuatro estacas en
el perodo de medicin considerado, este ao (XIX expedicin) se realizo el reemplazo de las
estacas que ya salieron y se mantiene la red de medicin totalmente operativa (medicin
directa), se espera obtener los valores del balance de masa para los siguientes aos de acuerdo
con la precisin y densidad de los datos recabados en aos anteriores.
Tambin se han realizado medidas en relacin con las caractersticas de la nieve, hielo
acumulado mediante la utilizacin de pozos de nieve (snow pits) para estimar la acumulacin
anual y la densidad promedio de la nieve ,se realizaron pozos en sitios representativos de la
zona estudiada.
Se realizaron levantamiento con DGPS para posicionar la red de estacas y documentar el
movimiento superficial a nivel anual, llegando a determinar velocidades promedio las cuales
son variables de acuerdo con la morfologa de la zona donde se encuentra la estaca.
Este verano Antrtico se implementaron dos sectores ms de estudio con su respectiva red de
medicin con la finalidad de conocer de mejor manera la evolucin del balance de masa.
Resultados:
Se estimo el balance de masa para el perodo considerado (2010- 2015) teniendo un valor
medio de 450 mm equivalentes de agua en promedio. Se ha observado que el proceso de
avance o retroceso del glaciar es bastante lento no se ha observado variaciones apreciable en el
contorno de la lengua estudiada. Se tiene previsto para los aos prximos la instalacin de una
estacin automtica en la superficie del glaciar con la finalidad de evaluar el balance energtico
en la zona.
Agradecimientos:
Al INAE,WGMS ,INACH, INAMHI por el soporte para este trajo
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de octubre 2011, Lima, Per. Presentacin oral, publicacin en las actas del evento.
5.Estimacin
del
balance
de
XV Expedicin Ecuatoriana a la Antrtica.
masa
en
el
Glaciar
Quito
Las mediciones de reflectancia espectral (espectro visible: 380-780 nm) de la radiacin solar y toma
de nieve superficial (profundidad 1-3 cm) fueron realizadas sobre sitios seleccionados en los
alrededores de la Base Cientfica Ecuatoriana Maldonado y sobre el glacial Quito, en Punta Fort
Williams, isla Greenwich, Antrtida marina. Los espectros de reflectancia se midieron en funcin del
Factor de Reflectancia Hemisfrica Direccional (HDRF) en direccin nadir, utilizando un
espectroradimetro porttil modelo PR-650 y un blanco Spectralon de 30 cm x 30 cm. Las
mediciones se realizaron a 1 m de altura, campo de visin (FOV) de 1 y entre las 10 am y las 3 pm
con poca o nula cobertura de nubes. Las muestras de nieve superficial fueron colectadas con
herramientas plsticas bien limpias, filtradas y analizadas para determinar solidos totales (ST) y % de
materia orgnica. Los ST fueron analizados por difraccin de rayos-x (Siemens D-5005) y anlisis de
tamao de partculas va laser (Mastersizer 200). Los anlisis de impurezas absorbentes de luz sobre
la superficie de la nieve, muestran que su cantidad y caractersticas cambian espacialmente y fueron
correlacionados con el albedo del espectro visible. Las impurezas sobre la nieve superficial en Punta
Fort Williams, estn constituidas fundamentalmente por materia orgnica (clulas de algas de nieve
roja, otras), holln (fuente local) y polvo mineral. Los resultados muestran que la reflectancia
espectral vara cuantitativamente entre los sitios influenciada fundamentalmente por cambios en la
cantidad y/o composicin de las impurezas superficiales y el tipo de nieve. Se reportan cambios en la
forma del espectro vinculados al tipo de impureza superficial y al tipo de nieve.
Agradecimientos: Al FONACIT de Venezuela y al INAE de Ecuador.
Presentacin: Pster
bivalvos (Inoceramus sp.) y trazas fsiles; hacia el techo se hace ms arenoso. Este
miembro aflora en Punta Rabot, Hamilton norte y Punta Redonda.
Lirio et al. (1989) y Marenssi et al. (1992), en base a una correlacin litolgica y a la fauna
de invertebrados, asignaron a la Formacin Rabot al Campaniano tardo e indicaron que la
misma es contempornea, al menos parcialmente, a la Formacin Santa Marta (SantonianoCampaniano), aflorante en el noroeste de la Isla James Ross.
Los primeros estudios palinolgicos de la Formacin Rabot corresponden a los de
Palamarczuk (en Marenssi et al., 1992) quien al analizar los quistes de dinoflagelados
sugiere una edad campaniana tarda para los Miembros II y III aflorantes en Punta
Redonda.
Posteriormente, Pirrie et al. (1997) analizaron 8 muestras de la Formacin Rabot (o
Miembro Rabot, segn estos autores) de la localidad de Punta Rabot, 2 de Hamilton Norte
(o Redshaw Point) y 1 de Punta Redonda. Sin embargo, en este estudio preliminar no
indicaron la distribucin de las especies a lo largo de toda la unidad y solo algunas pocas
fueron ilustradas. Sobre la base de la palinologa los autores asignaron a la unidad una edad
campaniana temprana a media y una edad campaniana tarda, sobre la base de la fauna de
amonites.
El objetivo de esta contribucin es dar a conocer la asociacin de quistes de dinoflagelados
de la Formacin Rabot en su localidad tipo (Punta Rabot), corroborar su edad e ilustrar las
principales especies halladas. Para ello se procesaron, siguiendo las tcnicas usuales de
procesamiento, 18 muestras palinolgicas de los Miembros I (y niveles debajo del
conglomerado del Miembro I), II y III.
Resultados
La asociacin palinolgica estudiada contiene quistes de dinoflagelados con una
preservacin de regular a buena. Las especies halladas se indican en la Tabla 1 y algunas de
ellas se ilustran en la Lamina 1.
La muestra ms basal ubicada en el tramo por debajo del conglomerado del Miembro I
posee escasos quistes de dinoflagelados con un pobre estado de preservacin (carbonizados,
color castao oscuro) identificados como ? Heterosphaeridium heteracanthum. En las
siguientes muestras, dentro del mismo tramo, se registran ejemplares mejor preservados
asignables a Heterosphaeridium heteracanthum, el complejo Odontochitina cribropoda-O.
porifera, Nelsoniella aceras, Oligosphaeridium pulcherrinum y Paralecaniella indentata.
En el Miembro II persiste H. heteracanthum en todos los niveles analizados, junto a las
mismas especies que las del tramo por debajo del conglomerado y hace su primera
aparicin Nelsoniella tuberculata. En el Miembro II es muy marcado el dominio de
Nelsoniella aceras y N. tuberculata. En el Miembro III desaparecen Nelsoniella aceras y
N. tuberculata y son reemplazados por Satyrodinium bengalense (y formas transicionales),
Oligosphaeridium sp. de Sumner y Trichodinium castanea.
La asociacin recuperada de los Miembros I y II es comparable a la Zona de Intervalo
Nelsoniella aceras de Australia (Helby et al., 1987), por la presencia de Nelsoniella aceras
y N. tuberculata, que indican Santoniano tardo al Campaniano temprano para secuencias
de Australia. N. aceras se restringe al Campaniano temprano en Australia pero, en
secuencias de Nueva Zelanda (Raine y Schiler, 2012) esta especie est presente en el
Campaniano medio, sin pasar al tardo. La presencia de S. bengalense en el Miembro III
permite su comparacin con la Zona de Intervalo Satyrodinium haumuriense (Campaniano
temprano a medio) y la parte ms baja de la Zona de Intervalo Isabelidinium pellucidum
(Campaniano tardo) de Nueva Zelanda (Crampton et al., 2000) ya que esta especie aparece
en la primera zona y continua en la segunda.
Discusin y conclusiones
El estudio preliminar de los quistes de dinoflagelados de la Formacin Rabot permite
asignar a la unidad una edad campaniana temprana a media, aunque podra llegar a hasta un
campaniano tardo basal.
En la seccin analizada en Punta Rabot tambin se registra el cambio composicional desde
el Miembro II a III como fue previamente observado por Marenssi et al. (1992) en Punta
Redonda. Sin embargo, no puede asegurarse que se trate de la transicin del Miembro Beta
a Gamma, como lo sugirieron estos autores, ya que por el momento, no hay elementos
palinolgicos que permitan esta correlacin. En cambio s se confirma que los Miembros I
y II de la Formacin Rabot son correlacionables con el Miembro Beta de la Formacin
Santa Marta, por el contenido palinolgico de ambos.
Estos resultados preliminares concuerdan con la propuesta de Olivero (2012) quien
considera a la Formacin Rabot dentro de la Secuencia N, depositada durante el Santoniano
temprano y el Campaniano tardo basal. Por otro lado, los resultados aqu presentados
coinciden con Milanese et al. (2013) quienes al realizar un estudio paleomagntico de la
Formacin Rabot (Miembros II y III) en las localidades de Punta Hamilton y Punta
Redonda concluyeron que estos miembros se depositaron durante el Campaniano medio.
El estudio de mayor nmero de muestras y el hallazgo de ms especies permitir precisar la
edad de la unidad, especialmente del Miembro III. Asimismo se podr dilucidar el
significado del cambio composicional existente entre el Miembro II y III que se evidencia
den el terreno por el banco arenoso glaucontico.
Agradecimientos
A Concheyro, Adamonis, Mackern, Ercoli, Barb y Guerstein. Proyecto ANPCyT- PICTO DNA 2010-00112.
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Trichodinium castanea
Spiniferites sp.
Palambages morulosa
Areoligera sp.
Cordosphaeridium sp.
Nelsoniella tuberculata
Cyclonephelium sp.
Oligosphaeridium pulcherrinum
Paralecaniella indentata
Nelsoniella aceras
Heterosphaeridium heteracanthum
2504
2502
2500
2498
2497
2496
2495
M3
MUESTRA BAFC-Pl
MIEMBRO
FORMACIN
RABOT
X
X
X
M2
MI
M1 (debajo
del conglomerado)
2494
2492
2485
2483
2482
2480
2478
2474
2473
2472
2471
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Lamina 1. Quistes de
dinoflagelados de la Formacin
Rabot, en Punta Rabot, sudeste de
la Isla James Ross. Escala grfica:
50 m. La sigla BAFC-Pl seguido
del nmero de muestra
corresponde al repositorio de la
Facultad de Cs. Exactas y
Naturales, Universidad de Buenos
Aires. A. Heterosphaeridium
heteracanthum Deflandre y
Cookson, BAFC-Pl 2474. B.
Nelsoniella aceras Cookson y
Eisenack, BAFC-Pl 2495. C.
Nelsoniella tuberculata Cookson
y Eisenack 1960, BAFC-Pl 2483.
D. Oligosphaeridium
pulcherrimum Davey y Williams,
BAFC-Pl 2483. E.
Oligosphaeridium sp. de Sumner,
BAFC-Pl 2497. F. Trichodinium
castanea Deflandre 1935 ex
Clarke y Verdier 1967, BAFC-Pl
2498. G. Odontochitina
cribropoda Deflandre y Cookson,
BAFC-Pl 2495. H. Odontochitina
porifera Cookson, BAFC-Pl 2504.
I. Odontochitina cribropoda,
BAFC-Pl 2504. J. Satyrodinium
bengalense Lentin y Manum,
muestra BAFC-Pl 2505. K-L. S.
bengalense forma transicional,
BAFC-Pl 2495.
Primera Escuela de Verano de Iniciacin a la Investigacin Antrtica, Facultad de Ciencias-Instituto Antrtico Uruguayo. Igu
4225.
2
Departamento de Evolucin de Cuencas, Instituto de Ciencias Geolgicas, Facultad de Ciencias. Igu 4225.
paleochecho14@gmail.com
La Isla Rey Jorge constituye una zona caracterstica de la Antrtida en cuanto a sus
atributos geolgicos y paleontolgicos. Estos contribuyen con el conocimiento de la
evolucin geolgica, climtica, geogrfica y biolgica de la Antrtida Occidental en los
ltimos 70 millones de aos. Las primeras aproximaciones geo-paleontolgicas de
Uruguay en esta zona se llevaron a cabo por investigadores de la Facultad de Ciencias
en la Pennsula Fildes de dicha isla. Dichas investigaciones se realizaron en los
alrededores de la Base Cientfica Antrtica Artigas, en campaas breves efectuadas
durante los veranos de 1997 y 2000. Se relevaron geolgica y paleontolgicamente
varios puntos fosilferos, entre los que se destaca el Cerro de los Fsiles, ubicado en
el centro de la pennsula. Los sedimentos que componen esta elevacin estn
constituidos por rocas piroclsticas portadoras de fsiles, asignadas a la Formacin
Fossil Hill. En estos se observaron y colectaron restos vegetales (troncos petrificados e
improntas de hojas) e icnofsiles representados por trazas de invertebrados y
vertebrados, formados en un sistema lacustre propio de un clima templado y hmedo.
Ms recientemente, en abril de 2015, otro paleontlogo uruguayo logr incursionar muy
fugazmente tambin en Half Three Point, localidad fosilfera ubicada en la parte ms
extrema de la pennsula. A pesar de lo reducido de las campaas geo-paleontolgicas
llevadas a cabo por Uruguay en la Antrtida, pudieron realizarse algunas publicaciones
con los resultados obtenidos, entre los que se destaca la descripcin de icnofsiles
novedosos. Atendiendo a las potencialidades como zona de investigacin, el retorno a
las investigaciones en estas reas resulta una tarea pertinente y a la vez necesaria. Al
mismo tiempo resulta imprescindible proyectar trabajos en la Pennsula Antrtica donde
se encuentra la base ECARE de Uruguay, ya que se conocen para esa zona notables
antecedentes paleontolgicos.
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Figura 1A. Localizacin geogrfica del rea de estudio, Cabo Lamb, Isla Vega, en el Grupo de islas James
Ross, Antrtida. 1B. Bosquejo geolgico del Cabo Lamb.
Figure 1A. Location of the study area, Cape Lamb, Vega Island, James Ross Island Group, Antarctica. 1B.
Geological sketch map of the Cape Lamb.
Figura 3. A-B Microporella stenoporta Hayward and Taylor; A grupo de autozoecios mostrando aberturas y
avicularias, Nivel 5 (CPBA 21690), B autozoecios con ovicelas, Nivel 5 (CPBA 21690). C-D Micropora
notialis Hayward and Ryland, C grupo de autozoecios y avicularias, Nivel 5 (CPBA 21693), D grupo de
autozoecios con y sin ovicelas, Nivel 5 (CPBA 21693). E Ellisina antarctica (Kluge), grupo de autozoecios,
Nivel 5 (CPBA 21692). F Hippothoa flagellum Manzoni, aspecto general de una colonia, Nivel 5 (CPBA
21691). Todas las barras representan 100 .
Figura 3. A-B Microporella stenoporta Hayward and Taylor; A a group of autozooecia, showing the
apertures, Level 5 (CPBA 21690). B ovicelled autozooecia, Level 5 (CPBA 21690. C-D Micropora notialis
Hayward and Ryland, C a group of autozooecia, Level 5 (CPBA 21693), D a group of ovicelled and nonovicelled autozooecia, Level 5 (CPBA 21693). E Ellisina antarctica (Kluge), group of autozooecia, Level 5
(CPBA 21692). F Hippothoa flagellum Manzoni, general view of the colony, Level 5 (CPBA 21691). Each
scale bar represents 100 m.
INTRODUCCIN
Durante las ltimas dcadas se han observado diferentes cambios en los glaciares del noreste de
la Pennsula Antrtica en respuesta al calentamiento local del clima. Durante el ltimo siglo el
calentamiento de 3.5C en el norte de la Pennsula Antrtica (Morris y Vaughan, 2003) ha
provocado el retroceso de varios glaciares que terminan en tierra, as como la desintegracin de
barreras de hielo en ambos lados de la pennsula (Skvarca y otros, 1995, 1999; Skvarca y De
Angelis, 2003; Braun y otros, 2009; Cook y Vaughan, 2010).
A pesar de estos grandes cambios observados, resulta de gran dificultad monitorear los glaciares
mediante trabajo de campo, especialmente desarrollar y llevar a cabo programas de medicin de
balance de masa (Marinsek y Ermolin, 2015)
Figura 1. Ubicacin de la Isla Vega (izq.) y ubicacin de los glaciares Baha del Diablo y Cabo Lamb en la Isla Vega
(der.). Se indican los puntos utilizados para determinar los cambios de elevacin.
Figure 1. Location of Vega Island (left) and location of Baha del Diablo and Cabo Lamb glaciers in Vega Island
(right). Dots indicate locations used for elevation changes determination.
En la Isla Vega, Pennsula Antrtica (Fig. 1), se han llevado a cabo mediciones topogrficas de la
superficie de dos glaciares, ubicados en las cercanas de la Baha del Diablo y del Cabo Lamb de
la isla. Los glaciares, denominados Glaciar Baha del Diablo (GBD) y Glaciar Cabo Lamb (GCL)
han sido objeto de estudio por ms de 30 aos. En particular en el GBD se desarrolla anualmente
un programa de determinacin del balance de masa anual del mismo desde el ao 1999 (Marinsek
y Ermolin, 2015; Skvarca y otros, 2004).
MATERIALES Y MTODOS
Las determinaciones de los cambios de elevacin y balance de masa del GBD y del GCL se
realizaron mediante trabajo de campo in situ. Para el balance de masa se utiliz el mtodo
glaciolgico con fecha fija (Mayo y otros, 1972) debido a las restricciones de la logstica
realizada desde la cercana Base Marambio. En 1999 se instal en el GBD una red de 24 balizas
de ablacin/acumulacin (Skvarca y otros, 2004). En cada una de las balizas se midi la
acumulacin o ablacin superficial anual. En la zona de acumulacin se determin para cada ao
el espesor de nieve y la densidad de la misma mediante la realizacin de pozos glaciolgicos para
analizar la estratigrafa de la nieve acumulada durante el ltimo ao. Los resultados obtenidos en
cada una de las balizas fueron utilizados para confeccionar mapas de balance de masa del glaciar
utilizando la aplicacin PCI Geomatics.
Para la determinacin de cambios de elevacin en ambos glaciares, se realizaron mediciones
topogrficas en una red puntos que fueron relevados durante los trabajos de campo anuales. Se
presentan en este trabajo los correspondientes a los aos 1984, 2004 y 2014 para el GCL y las
mediciones correspondientes a 1982, 2004 y 2014 para el GBD. Las mediciones de los aos
anteriores a 2014 se realizaron mediante estacin total y prismas de reflexin, mientras que las
del ao 2014 se realizaron mediante sistema GPS cinemtico en tiempo real, para ambos
glaciares. Las mediciones de elevacin se realizaron en referencia a los mismos puntos base para
cada glaciar.
RESULTADOS
En el GBD los resultados de balance de masa anual desde 1999 hasta 2014 muestran una
tendencia negativa de -0.15 m w. eq. a-1, a pesar de los resultados de balance de masa positivos
obtenidos durante los ltimos aos (WGMS, 2013).
Las figuras 2 y 3 muestran los diferentes perfiles longitudinal y transversal para el GBD y para el
GCL. El GBD ha sufrido un cambio de elevacin en la zona de ablacin, medido en 24 puntos, de
-27 m en 32 aos, equivaliendo a una tasa de adelgazamiento de -0.84 m a-1. En el perodo de
1982 a 2004, el adelgazamiento obtenido fue de -19,5 m (0,89 m a-1), mientras que de 2004 a
2014, el cambio fue de de -7,5 m (0,75 m a-1).
Para el GCL, los resultados de cambio de elevacin en 30 puntos durante 30 aos arrojan un
adelgazamiento promedio de -32,3m, lo que equivale a una tasa de -1.07 m a-1 an mayor que la
obtenida para el GBD. En el primer perodo de 20 aos (1984 a 2004), el cambio fue de -23,3 m
(1,16 m a-1), mientras que en el perodo de 2004 a 2014 el cambio fue menor: -8.9 m (0.89 m a-1).
Figura 2. Cambios de elevacin en perfiles longitudinal y transversal del Glaciar Baha del Diablo.
Figure 2. Elevation changes in longitudinal and transversal profiles for Glaciar Baha del Diablo.
Figura 3. Cambios de elevacin en perfiles longitudinal y transversal del Glaciar Cabo Lamb.
Figure 3. Elevation changes in longitudinal and transversal profiles for Glaciar Cabo Lamb.
CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos muestran que el comportamiento observado e los glaciares Baha del
Diablo y Cabo Lamb estn experimentando una prdida de masa y se han adelgazado
continuamente, al menos en las ltimas tres dcadas, tal como se observa en diversos glaciares de
la regin de la Pennsula Antrtica.
Las tasas de adelgazamiento anual medidas en el segundo perodo (2004-2014) fueron menores
que las medidas en el primer perodo (1982-2004 para el GBD y 1984-2004 para el GCL),
probablemente debido a los balances de masa positivos observados tanto en el glaciar Baha del
Diablo como en otros de la regin desde el ao 2010.
Estos glaciares estn ubicados en tierra, sin poseer parte alguna en el mar, por lo cual, el continuo
monitoreo de sus cambios son de gran importancia para complementar la escasa disponibilidad de
datos de cambios glaciarios en la regin al momento de realizar estudios del cambio climtico y
sus efectos en los glaciares y el aumento del nivel medio del mar.
REFERENCIAS
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Esse trabalho realizou o levantamento das variaes das frentes das geleiras no extremo norte
da Pennsula Antrtica atravs da utilizao de tcnicas de Sensoriamento Remoto. Foram
mapeados os avanos e as retraes das geleiras da rea, bem como as reas livres de neve e
gelo da regio, no perodo de 1988-2015 e os resultados foram complementados com dados de
temperatura do ar para a regio. A base de dados utilizou de 8 imagens de satlite: uma
imagem do sensor TM do LANDSAT 5 de 29/fevereiro/1988; cinco do sensor ETM+ do
LANDSAT 7 de 05/fevereiro/2006, 21/fevereiro/2006, 27/janeiro/2011 e 19/fevereiro/2011; e
duas imagens do sensor OLI/TIRS do LANDSAT 8 de 04/dezembro/2014 e
06/fevereiro/2015. Alm de dados da base de dados digitais da Antrtica (ADD), o Mosaico
de Imagens Landsat da Antrtica (LIMA), e o modelo digital de elevao para a Pennsula
Antrtica (APGDEM). A base de dados de temperatura utilizada foi a do READER para a
base Esperanza. As linhas de frente das geleiras foram obtidas atravs de mtodos
automticos e manuais de geoprocessamento. Foram realizadas classificaes nosupervisionadas e supervisionadas na aquisio, transformando a rea em vetores e unindo-os
com a delimitao das geleiras disponibilizada pelo ADD, formando o conjunto das geleiras
com a sua posio de frente para cada ano das imagens. As reas livres de neve e gelo foram
obtidas atravs da classificao supervisionada. As classificaes foram validadas atravs do
ndice Kappa, obtendo resultados satisfatrios. O total da rea de estudo de
aproximadamente 1.450 km e conta com 32 bacias de drenagem glacial, destas, 3 possuem
nome, as geleiras de mar Arena, Depot e Mondor. Com anlises desde do o perodo de 1988,
observou-se uma perda de massa de gelo da rea de aproximadamente 50 km, enquanto que o
ganho total foi de aproximadamente 10 km, resultando em uma diminuio de 40 km (ou
seja, em torno de 2,7 % da rea total). No perodo entre 1988 e 2000 (maior intervalo das
investigaes) a rea perdeu 25,1 km de gelo em suas frentes. Entre 2000 e 2006 o recuo foi
de 12,2 km e entre 2006 e 2011 de 5,0 km. J o perodo de 2011-2015 foi o nico a
apresentar avanos maiores que retraes, com um aumento de rea de 2,5 km (0,16%). As
geleiras Depot e Mondor apresentaram comportamento de retrao, sendo que a geleira Depot
no apresentou nenhum avano dentro dos perodos, j a geleira Arena apresentou avanos e
retraes em todos os intervalos, permanecendo praticamente inalterada. A rea livre de gelo e
neve aumentou em aproximadamente 18 km, ou seja, um acrscimo de 114% em relao a
rea livre de neve e gelo de 1988. Os maiores aumentos se deram entre os anos 1988 e 2000,
no ano de 1988 a rea representava 15,91 km, passando para 37,54 km em 2000 e 37,90 km
em 2006, no ano de 2011 observou-se uma diminuio, com rea de 28,32 km, sendo que em
2015 a rea voltou aos valores anteriores, 34,09 km. A avaliao da temperatura do ar
observada em Esperanza entre 1964-2014 mostra um aumento de 1,45C.
Palavras-chaves: Geleiras, reas livres de gelo, Antrtica.
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REA DE MICROBIOLOGA
En este trabajo se quiso abordar si existe un cambio sobre las comunidades de microorganismos
rizosfricos totales y activos, asociados a plantas vasculares antrticas, como consecuencia de un
aumento de temperatura. Adems, se identific microorganismos implicados en el ciclaje de
nutrientes que puedan estar relacionados con procesos de expansin y aumento de crecimiento de
las plantas vasculares antrticas D. antarctica y C. quitensis.
Para esto, se tomaron muestras de rizsfera de plantas vasculares antrticas sometidas a
calentamiento pasivo mediante Open Top Chambers (OTC) durante el verano austral del 2014,
de dos sitios diferentes de Baha Almirantazgo, Isla Rey Jorge, Antrtica Martima. Adems, se
tomaron muestras de rizsfera de plantas vasculares antrticas que estn en el espacio contiguo a
cada OTC en cada uno de los sitios (Espacio Abierto, EA) (Figura 1). La diferencia principal
entre los sitios es que en el Sitio 1 (S1) la cubierta vegetal es abundante y en el Sitio 2 (S2) es
escasa.
El anlisis de las comunidades microbianas fue abordado a travs de los tres dominios de la vida
(Bacteria, Archaea y Eukarya) mediante amplificacin y secuenciacin masiva de los genes
ribosomales 16S (Bacteria y Archaea) y 18S (Eukarya), a partir de ADN comunitario, para ver
las comunidades microbianas totales (i.e., dormantes y activas) y a partir de ARN comunitario,
para ver las comunidades metablicamente activas.
Figura 1. Diseo experimental de la recoleccin de muestras. S1: sitio 1, S2: sitio 2, OTC: Open Top Chambers, EA:
Espacio Abierto. Experimental desing of the sample collection. S1: site 1, S2: site 2, OTC: Open Top Chambers,
EA: Fell-Field.
Figura 2. Curvas de rarefaccin de comunidades activas y totales de los dominios Bacteria/Archaea y Eukarya.
Rarefaction curves of active and total community from the domains Bacteria/Archaea and Eukarya.
Los anlisis de cluster realizados, tanto para los Dominios Bacteria/Archaea como para el
Dominio Eukarya, indican un agrupamiento de comunidades sometidas a calentamiento y de EA
del S1 en conjunto con el S2 sometido a calentamiento (Figura 3). Y la formacin de un slo
cluster con las comunidades microbianas del EA del S2. Esto sugiere que el S1, por tener una
cubierta vegetal abundante, est eventualmente protegiendo a las comunidades microbianas
rizosfricas del efecto del calentamiento y, por el contrario, en el Sitio 2 por estar ms
desprotegido, hay un efecto del calentamiento sobre la rizsfera con un concomitante cambio de
las comunidades.
Figura 3. Anlisis de cluster de comunidades activas y totales en los dominios Bacteria/Archaea y Eukarya. Cluster
Analysis of active and total community in the domains Bacteria/Archaea and Eukarya.
Bibliografa
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Introduccin:
El virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) es el agente causal de una de las enfermedades de
mayor incidencia en la industria avcola en todo el mundo [Samal SK, 2011]. NDV pertenece al gnero
Avulavirus de la familia Paramyxoviridae. Su genoma est constituido por una molcula de ARN
simple hebra de sentido negativo de aproximadamente 15.186 nucletidos (nt) de longitud [Lamb R et
al., 2007]. Las cepas de NDV se agrupan segn su fenotipo de virulencia en lentognicas, mesognicas
y velognicas, en orden creciente de virulencia [Kim LM et al., 2007]. Asimismo, en base a anlisis
genticos se clasifican en dos clases diferentes: Clase I, formada por un nico genotipo que circula en
aves silvestres y son mayormente avirulentas [Czegle Qdi A et al., 2006] y Clase II, compuesto por 19
genotipos (tanto virulentos como avirulentos), circulantes en aves salvajes y domsticas [Diel DG et
al., 2012, Fernandes CC et al., 2014, Snoeck CJ et al., 2013].
La infeccin por este virus est mediada por dos glicoprotenas de superficie: HN (HemaglutininaNeuraminidasa), que media el reconocimiento de las clulas del hospedero; y F (Fusin), responsable
de la internalizacin [Toyoda T et al., 1988]. Esta ltima juega un papel fundamental en la virulencia,
siendo el principal blanco del sistema inmune [Neyt C et al., 1989]. El sitio de clivaje de F es el
principal determinante de patogenicidad, siendo su secuencia caracterstica en cepas velognicas y
mesognicas 112(R/K)RQ(R/K)RF117, y en lentognicas 112(G/E)(K/R)Q(G/E)RL117 [De Leeuw OS et al.,
2005]. Actualmente hay disponibles dos vacunas para la prevencin y el control de esta enfermedad
(cepas LaSota y Clone-30, pertenecientes al genotipo II) [Rui Z et al., 2010].
La caracterizacin de variantes de NDV es fundamental para anticipar nuevos brotes, as como para
mejorar las medidas de control [Zhang S et al., 2011]. Estudios recientes revelaron la circulacin de
NDV en pinginos de la Isla King George en la regin Antartica [Thomazelli LM et al., 2010]. En este
estudio se realizaron anlisis bayesianos de coalescencia con el objetivo de investigar las tasas
evolutivas, dinmicas poblacionales y patrones evolutivos de NDV.
Materiales y mtodos:
Las secuencias nucleotdicas de cepas de NDV (tanto de los diferentes genotipos como de las aisladas
en la Antrtida) fueron descargadas de la base de datos DDBJ, alineadas y traducidas in silico con el
programa MEGA 5 [Tamura K et al., 2011]. Para investigar los patrones evolutivos se utiliz la
aproximacin bayesiana de cadenas de Markov Monte Carlo (MCMC) implementada en el paquete
BEAST v.1.7.5 [Drummond AJ et al., 2007]. Se utiliz el modelo de sustitucin nucleotdica HKY +
con 50 millones de cadenas de MCMC, testeando diferentes modelos poblacionales. A travs de
Bayesian Skyline Plots (BSP) se exploraron los cambios del tamao poblacional efectivo a lo largo del
tiempo. Asimismo, se generaron rboles de mxima credibilidad utilizando el programa Tree Annotator
[Drummond AJ et al., 2006, Suchard MA et al., 2001].
Resultados y Discusin:
Mapeo de los cambios de aa en la protena F de cepas de NDV aisladas en la Antrtida. Para evaluar las
caractersticas de virulencia de variantes de NDV aisladas en la Antrtida, se exploraron las diferencias
Figura 1. Alineamiento de secuencias aminoacdicas de la protena F de cepas de NDV. Las cepas de clase II se
muestran sobre la izquierda segn su nombre seguido de su genotipo entre parntesis. La identidad con la cepa LaSota (cepa
vacunal utilizada como referencia) se indica por un guin. Los valores indicados sobre el alineamiento hacen referencia a
los sitios aminoacdicos de la protena F.
Figura 2. rbol de mxima credibilidad. Las cepas se indican con su nombre y genotipo. Se incluyen secuencias
correspondientes a la clase I, as como de diferentes genotipos de clase II. Los aos se muestran en el eje de las x.
Figura 3. BSP de la historia poblacional de cepas de NDV. Se indican los aos y el tamao poblacional efectivo en los
ejes x e y, respectivamente. La lnea slida negra indica la media estimada mientras que el rea gris representa el 95% HPD.
Curiosamente, la dinmica poblacional observada en los ltimos aos de nuestro anlisis sugiere un
comportamiento diferente en comparacin a reportes previos, ya que se observ una disminucin
continua persistente en el tamao efectivo de la poblacin. Este comportamiento puede ser explicado
por el mayor nmero de genotipos de clase II considerados en el presente anlisis (I-XIX), as como
que distintos genotipos pueden presentar patrones poblacionales diferentes [Chong YL et al., 2010].
Aunque las razones de la disminucin observada actualmente se desconocen, se ha sugerido
previamente el cambio climtico y las medidas de control de la gripe aviar como posibles factores
[Chong YL et al., 2010]. Ms estudios deben llevarse a cabo con el fin de abordar estas cuestiones.
Agradecimientos:
Instituto Antrtico Uruguayo y Base Cientfica Antrtica Artigas, Uruguay; Agencia Nacional de
Investigacin e Innovacin (ANII), proyecto PE_ALI_2009_1_1603; PEDECIBA, Uruguay.
Referencias:
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Laboratorio de Microbiologa Molecular, Facultad de Qumica y Biologa, Universidad de Santiago de Chile, Santiago,
Chile.
2
Facultad de Ciencias Biolgicas, Universidad San Sebastin, Santiago, Chile.
3
Laboratorio de Microbiologa Molecular y Biotecnologa Ambiental, Facultad de Qumica & Centro de Biotecnologa D.
Alkalay Lowit, Universidad Tcnico Federico Santa Mara, Valparaso, Chile.
Resumen
La Antrtica se caracteriza por estar expuesta a diversos tipos de estrs, como temperaturas bajas
extremas, radiacin UV y metales pesados, los que causan entre otros, daos por estrs oxidativo.
ltimamente se ha evidenciado un aumento drstico de contaminacin por metales pesados en ese
continente debido al fenmeno de destilacin global. Frecuentemente, los ambientes contaminados con
metales y/o metaloides, tanto de origen antropognico como natural, se encuentran mezclados, por lo
que algunos microorganismos han adquirido diversos mecanismos de resistencia para sobrellevar esta
mltiple toxicidad (resistencia especfica y cruzada) (1).
Entre los metales pesados y metaloides ms txicos para los seres vivos se encuentran el
mercurio y el telurito, respectivamente. Los iones mercurio (Hg +2) y telurito (TeO3-2) exhiben las
concentraciones mnimas inhibitorias ms bajas registradas para Escherichia coli (2). Ambos producen
dao celular por deplecin de tioles, inactivacin de enzimas y estrs oxidativo (3,4). La resistencia a
mercurio est dada principalmente por el opern mer, donde se reduce mercurio (II) a mercurio
elemental por actividad de la flavoenzima MerA (5). Por otro lado, los mecanismos de destoxificacin
de telurito son ms bien inespecficos y estaran principalmente relacionados con su reduccin a teluro
elemental, mediada principalmente por flavoenzimas (2,6,7). Se desconoce a la fecha si los mecanismos
de resistencia a mercurio podran conferir resistencia a telurito o viceversa.
El estudio de los mecanismos moleculares de resistencia a metales pesados y metaloides tan
txicos como mercurio y telurito, y el dao oxidativo asociado a bacterias psicrotolerantes, podra
permitir el diseo de nuevas estrategias de biorremediacin de sitios contaminados en ambientes con
bajas temperaturas. Es por esto que, a partir de muestras ambientales antrticas obtenidas en la
expedicin ECA-48, nos interesamos por aislar bacterias que fuesen resistentes simultneamente a
mercurio y telurito. Interesantemente, descubrimos que algunos de estos aislados eran resistentes a
telurito slo cuando el medio estaba suplementado con mercurio. En este trabajo se evalan la filogenia
de los aislados y parmetros de dao oxidativo asociados a los txicos. Finalmente, mostraremos un
anlisis genmico de uno de los aislados, donde se muestran los numerosos genes relacionados contra
estrs oxidativo, multirresistencia a metales y a antibiticos.
Materiales y mtodos
Se utilizaron los aislados bacterianos antrticos resistentes a mercurio ATH-5, ATH-41, ATH-43 y
ATH-62 (manuscrito en preparacin) a los cuales se les calcul las concentraciones mnimas inhibitorias
(MIC) para mercurio y telurito; y se construyeron curvas de crecimiento en distintas condiciones
experimentales (control, tratamientos con mercurio, telurito y mercurio ms telurito). Adicionalmente, se
cuantificaron las especies reactivas de oxgeno (ROS) con la sonda H 2DCFDA en las mismas
condiciones experimentales mencionadas anteriormente. Por otro lado, se realiz un anlisis filogentico
de los aislados mediante el mtodo de Neighbor Joining. Por ltimo, se secuenci el genoma de ATH-43
por Hiseq 2000 (Illumina), y se procedi a hacer el ensamblaje y la anotacin de los CDS.
Resultados y discusin
1. Anlisis filogenticos de los aislados Antrticos
Para determinar la filogenia de los aislados antrticos se construyeron rboles filogenticos. Los
resultados muestran que ATH-5 y ATH-41 estn relacionadas con Pseudomonas frederiksbergensis DSM
13022T y con el aislado rtico Pseudomonas sp. K10, mientras que ATH-43 est relacionado con
diversas cepas de especies de Pseudomonas putida aisladas de distintos ambientes y ATH-62 con
especies de Psychrobacter aisladas exclusivamente de ambientes fros (Figura 1).
Figura 1. Anlisis filogenticos de cepas ATH. A, rbol para ATH-5, ATH-41 y ATH-43. B, rbol para ATH-62. Slo se
muestran los agrupamientos que tuvieron un valor Bootstrap1000 sobre el 50%.
Para monitorear el dao oxidativo que produce el estrs por mercurio, telurito, y cul sera el
efecto de ambos txicos en conjunto, se cuantific especies reactivas de oxgeno (ROS) en cuatro
condiciones experimentales y a tres tiempos (Figura 2). Los resultados mostraron que para ATH-5 y
ATH-41 la condicin control no produjo cambios significativos en los niveles de ROS en 90 minutos.
Sin embargo, los tratamientos con metales aumentaron los niveles de estas especies en los primeros 30
minutos. Luego se observ una tendencia de disminuir la concentracin de ROS especialmente en los
tratamientos con mercurio y mercurio/telurito. No obstante, a los 90 minutos stos aumentaron
nuevamente (Figura 2A y 2B). En el caso de ATH-43, los niveles de ROS fueron ms altos durante el
tratamiento con telurito en comparacin a mercurio y mercurio/telurito. Luego, se observ que hubo una
marcada tendencia del cultivo a la reduccin de los niveles de ROS en todos los tratamientos con
metales durante los 90 minutos del experimento, incluso llegando a los niveles de ROS del control en los
casos del tratamiento con mercurio y mercurio/telurito (Figura 2C). Contrariamente, ATH-62 mostr
tener un comportamiento totalmente diferente con respecto a la variacin de los niveles de ROS. En esta
cepa el telurito no produjo aumento de ROS como ocurri con las otras cepas sin embargo, en presencia
de mercurio o mercurio/telurito si se produjo un aumento drstico de los niveles de ROS que se mantuvo
durante los 90 minutos. Slo en el caso del tratamiento con mercurio, hubo una pequea disminucin de
los niveles de ROS luego de 60 minutos de tratamiento, la que aument en los 90 minutos finales del
experimento (Figura 3D). Estos resultados sugieren que la exposicin a telurito produce un aumento de
los niveles de ROS en las cepas de Pseudomonas, pero que de alguna forma, la presencia de mercurio
podra gatillar mecanismos contra estrs oxidativo que destoxificaran los ROS que se estn formando
cuando las clulas son tratadas con ambos metales. Esto no sucedera en la cepa ATH-62 donde se
evidencia una respuesta totalmente contraria cuando se expone a ambos txicos en conjunto.
Figura 2. Cuantificacin de ROS en las cepas ATH en distintas condiciones experimentales. La cuantificacin se midi en
trminos de intensidad de fluorescencia. Los grficos se muestran como media desviacin estndar. N =3, p< 0,01.
Debido a que esta cepa present el fenmeno de potenciacin a la resistencia a telurito ms fuerte
se decidi secuenciar su genoma (Figura no mostrada). Producto de la secuenciacin se obtuvo un
genoma de 5.830.220 pb ensamblados en 64 contigs con un 58% G+C. Posteriormente el genoma fue
anotado dando una prediccin de 5.204 CDSs donde se identific genes relacionados con la resistencia a
mercurio, cobre, zinc, nquel, cadmio, cobalto, plomo, cromato, arsenato, selenito y telurito.
Adicionalmente, se encontr genes involucrados con resistencia de antibiticos como tetraciclinas,
macrlidos, penicilinas, estreptomicina, entre otros. Por otro lado, se identific la presencia de siete
genes que codifican para Cold shock proteins, 79 tRNAs, 773 protenas hipotticas y un importante
nmero de genes relacionados a la respuesta contra estrs oxidativo, como por ejemplo, dos catalasas,
superxido dismutasas, mltiples oxidoreductasas, tiorredoxinas, glutarredoxinas y ferredoxinas;
adems se encontr el gen que codifica para la micotiol sintasa, el que slo ha sido identificado en
bacterias Gram positivo (especficamente del phylum Actinobacteria). El genoma fue depositado en la
base de datos de GenBank con el nmero de acceso LBME00000000.
Conclusiones
En este trabajo aislamos cuatro cepas antrticas resistentes a mercurio y a telurito relacionadas
con especies de Pseudomonas y Psychrobacter. De stas, ATH-5 y ATH-43 presentan potenciacin a la
resistencia a telurito en presencia de mercurio, siendo la ltima la que presenta el fenotipo ms fuerte.
ATH-43 es capaz de sobrellevar el estrs oxidativo mediante mecanismos moleculares que reducen el
contenido de ROS frente a la exposicin de estos metales. Por ltimo, el genoma de ATH-43 revela la
presencia de mltiples genes relacionados con la resistencia a estrs oxidativo y a diversos metales los
cuales podran estar participando en la resistencia cruzada a telurito. Este es el primer estudio que
muestra que los mecanismos de detoxificacin de mercurio podran conferir resistencia a otro
metal(oide).
Agradecimientos
Fondecyt Regular 1130362, beca Doctoral CONICYT 21120114; y Fraunhofer Chile Research
Foundation.
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Instituto Antrtico Argentino, Buenos Aires, Argentina; 2NANOBIOTEC, UBA-CONICET, Buenos Aires,
Argentina; CIQA, 3UTN-Regional Crdoba, Crdoba, Argentina
Introduccin
En la Antrtida la actividad humana demanda el uso de importantes cantidades de
combustibles. El manejo de los mismos en las bases genera derrames accidentales que pueden
alcanzar magnitudes significativas (Poland y col., 2003) y causar efectos perjudiciales en los
ecosistemas de la regin. Argentina es signatario del Protocolo al Tratado Antrtico sobre
proteccin del Medio Ambiente firmado en Madrid en 1991, por lo cual la preservacin del
medio ambiente antrtico y la restauracin de los ambientes afectados por la actividad
antrpica representan un objetivo nacional prioritario. Por ello, desde hace aos nuestro grupo
de trabajo estudia posibles estrategias de biorremediacin de los suelos antrticos afectados
por derrames de combustibles.
Entre dichas estrategias, el bioaumento consiste en la inoculacin de la zona a remediar con
microorganismos que, por sus capacidades metablicas, tienen el potencial de mejorar la
eficiencia degradadora de la microbiota natural. Sin embargo, el establecimiento y la
viabilidad de los microorganismos inoculados no puede garantizarse a priori, pues depende de
numerosos factores (Boumechez y col., 2000). En este sentido, estudios previos en suelos
antrticos nos han mostrado que el bioaumento no es una estrategia de biorremediacin
efectiva en aquellos suelos que tienen una larga historia previa de exposicin a hidrocarburos
(Vzquez y col., 2009), incluso cuando los inculos fueron inmovilizados en soportes inertes
para protegerlos de la predacin y favorecer la sobrevivencia (Nizovoy 2013). Para estos
suelos crnicamente contaminados, la bioestimulacin (balanceo del contenido de nutrientes
que favorece la actividad degradadoras de la microbiota autctona) mostr ser suficientemente
eficaz, tornndose en una herramienta sencilla y de menor costo que el bioaumento. Se postula
que la exposicin prolongada de las poblaciones autctonas a los contaminantes lleva a
comunidades muy adaptadas a tales condiciones, capaces de degradar los hidrocarburos
eficientemente, resultando innecesaria la incorporacin de otros microorganismos (Margesin y
Schinner, 2001).
Sin embargo, la situacin es diferente en suelos sin previa exposicin a hidrocarburos que
sufren un evento de contaminacin aguda. En este caso las comunidades microbianas no han
estado en presencia de esos contaminantes y por lo tanto no tendran la capacidad catablica
necesaria para lograr una degradacin eficiente en periodos de tiempo razonables.
A fin de contribuir al conocimiento del efecto pueden causar los derrames de combustibles
sobre suelos antrticos prstinos y al desarrollo de posibles estrategias de biorremediacin de
los mismos, en este trabajo preliminar se evalu la eficiencia del bioaumento para la
biorremediacin de dichos suelos. Para ello se simul un evento de contaminacin aguda de
un suelo antrtico con gasoil y se lo bioaument con una mezcla de cepas bacterianas
inmovilizadas en diferentes soportes inertes. Se evalu la eficiencia de esos soportes para
vehiculizar los microorganismos y su contribucin al establecimiento de las bacterias
inoculadas en el suelo a remediar.
Metodologa
Estudios previos sobre la eficiencia degradadora de hidrocarburos de cepas antrticas (Ruberto
y col., 2006), la identificacin molecular de las mismas y la evaluacin de su capacidad de
crecer con hidrocarburos individuales llev a la seleccin, para este trabajo, del cultivo mixto
denominado MAD. El mismo fue inmovilizado en los siguientes soportes: suelo prstino, turba
micronizada y copos de quitina. La seleccin de estos soportes tambin estuvo fundamentada
en trabajos previos (Nizovoy, 2013).
Para evaluar la contribucin de los diferentes soportes al establecimiento del inculo, se
disearon sistemas de microcosmos. Los sistemas se armaron en contenedores plsticos
emulando pequeas biopilas, conteniendo 7,5 kg de suelo y una humedad relativa porcentual
(HR%) de ~10%. Algunos de los sistemas se bioestimularon con una solucin de NH 4NO3 y
Na2HPO4 a fin de lograr una relacin C:N:P de 100:10:1. Se establecieron sistemas noinoculados a fin de evaluar la evolucin de la microbiota autctona en distintas condiciones y
sistemas inoculados, para evaluar el efecto del agregado del inculo inmovilizado en los
diferentes soportes sobre la remediacin de un suelo bioestimulado y contaminado de forma
aguda con gasoil. La Tabla 1 resume las caractersticas de cada uno de los microcosmos.
El inculo se prepar mezclando partes iguales de suspensiones (10 10 UFC ml-1) de las
siguientes bacterias: Rhodococcus sp. ADH, Pseudomonas sp. 2A y 4A, Pedobacter sp. 18A y
Stenotrophomonas sp. 21. Este cultivo mixto se inmoviliz en los tres soportes previamente
esterilizados, segn se describe en Nizovoy (2013). A cada microcosmo se le agreg una
cantidad de soporte tal que aportara un inculo de ~5x107 UFC g-1 de suelo hmedo.
El suelo se obtuvo en las cercanas de la Base Carlini, Isla 25 de Mayo, Antrtida, durante la
campaa de verano 2014/15. El sitio se seleccion por su ubicacin, que garantizaba la
ausencia de eventos histricos de exposicin a hidrocarburos. Se descart la capa superior (2
cm) y la fraccin recolectada del suelo (~3-10 cm) se tamiz con malla de 10 mm. Se midi la
concentracin de hidrocarburos por IR (EPA418.1) para verificar la ausencia de
contaminacin previa. Luego se simul un evento de contaminacin aguda adicionando 7000
ppm de gasoil. Dado que la biodisponibilidad del contaminante depende del proceso conocido
como ageing o envejecimiento, se estacion el suelo contaminado durante 7 das antes de a
iniciar el ensayo.
Inculo
Nutrientes (N y P)
Gasoil
Soporte
P
C
+
CN
+
+
CNS
+
+
+
suelo prstino
CNT
+
+
+
turba micronizada
CNC
+
+
+
copos de quitina
P: prstino C: contaminado; CN: contaminado y bioestimulado; S: suelo; T: turba micronizada; C: copos de
quitina
Resultados y Discusin
Los resultados de los recuentos de BAHT y BDH (Figura 1) mostraron que la microbiota
autctona (microcosmo P) sin ms aporte que la aireacin por el mezclado y la disposicin del
suelo mantiene una cantidad de BAHT constante, aumentando hacia el da 20 el nmero de
BDH. Esto sugiere la presencia de poblaciones que pueden tolerar la presencia de estos
compuestos. Los resultados de fingerprinting contribuirn a conocer los cambios en la
estructura de esta comunidad. Cuando la microbiota autctona fue expuesta a una
contaminacin aguda por gasoil, (microcosmo C), disminuy el nmero de BAHT en el inicio
del ensayo para luego aumentar hacia el tiempo final, donde se observ una importante
fraccin de bacterias degradadoras (Figura1). Esto sugiere un estrs inicial ante la presencia de
gasoil, lo que es esperable dado que las poblaciones microbianas provienen de un suelo
prstino y la adaptacin a la situacin de estrs supone ajustes metablicos. Sin embargo,
cuando este mismo suelo contaminado fue bioestimulado (microcosmo CN), las poblaciones
cultivables fueron capaces de recuperarse a partir del da 10, aumentando 2 rdenes de
magnitud en nmero al final del ensayo y mostrando una alta proporcin de poblaciones
capaces de tolerar o utilizar el gasoil. Al comparar los sistemas no inoculados C y CN, se
observ que el agregado de nutrientes y la aireacin favorecieron el desarrollo tanto de BAHT
como de BDH. Este efecto fue ms acentuado a tiempo final, con diferencias en los recuentos
de ms de 2 rdenes de magnitud entre C y CN. Tambin se registraron ligeros aumentos en la
relacin BDH/BAHT en CN con respecto a C, lo cual sugiere que el agregado de nutrientes
favorecera particularmente a la poblacin de BDH.
Por el contrario, todos los sistemas inoculados (CNS, CNT y CNC) mantuvieron valores de
BAHT en el orden de 1x10 7 y 1x108 UFC g-1 a lo largo de todo el ensayo, detectndose un
aumento en el nmero de BDH que a los diez das ya fue equiparable al nmero de BAHT,
sugiriendo que casi la totalidad de las poblaciones cultivables correspondieron a bacterias
capaces de tolerar/degradar los hidrocarburos. Este aumento en las BDH para los sistemas
Figura 1. Recuento de bacterias aerobias hetertrofas totales (A) y bacterias degradadoras de hidrocarburos (B)
durante el ensayo de bioaumento en microcosmos con diferentes estrategias de inmovilizacin en suelos
antrticos con contaminacin aguda por hidrocarburos.
Conclusiones
Este ensayo sugiere que, a diferencia de lo que ocurre en suelos con historia de exposicin a
los hidrocarburos, la inmovilizacin en soportes inertes permitira la vehiculizacin y el
establecimiento de bacterias degradadoras en un suelo sin previa exposicin a los
hidrocarburos y que haya recibido un impacto de contaminacin aguda por gasoil, cuando la
intervencin se aplica poco tiempo despus del derrame. Sin embargo, es importante destacar
que la microbiota autctona de este suelo fue capaz de tolerar la presencia del contaminante y
hasta desarrollar cuando se balance la relacin C:N:P. Esto ltimo cobra importancia al
analizar la rentabilidad a gran escala, ya que explotar la microbiota autctona supone un costo
menor, que hace ms factible la biorremediacin. La medicin de los hidrocarburos
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I Introduccin
En las ltimas dcadas la Nanotecnologa ha sido una las reas de estudios cientficos con
mayor crecimiento, esto no es solo consecuencia de su novedad, sino tambin porque a partir de
los avances en este campo se han desarrollado aplicaciones que han revolucionado la industria, la
ciencia y la medicina.
Debido a sus propiedades fsicas y qumicas, las nanopartculas metlicas (NPs) ms
estudiadas a la fecha estn compuestas por Au, Ag, Cd y Cu, entre otras. No obstante a sus
interesantes caractersticas, uno de los mayores inconvenientes de las NPs al ser sintetizadas a
travs de mtodos qumicos, es su elevada toxicidad. Debido a esto, la biosntesis de NPs
metlicas mediada por microorganismos se posiciona como una alternativa en pos de disminuir la
toxicidad y aumentar las reas en las cuales se pueden implementar tecnologas basadas en
nanotecnologa.
Es de suma importancia para nuestro grupo de investigacin generar tecnologa en base al
metal ms abundante en nuestro pas, el cobre, el cual no ha sido estudiado como debiese. Chile
lleva aos siendo el principal exportador de Cu en el mundo, sin embargo en todas stas dcadas
no hemos sido capaces de darle valor agregado a este metal con miras a aprovechar a cabalidad sus
propiedades.
En relacin al cobre, existen abundantes estudios relativos a NPs de xidos de cobre y
cobre metlico, sin embargo a pesar de las interesantes propiedades de las NPs de sulfuros de
cobre, son muy pocos los reportes publicados. En el proceso de biosntesis de NPs de Cu, las
biomolculas involucradas en la resistencia celular al metal tendran un rol preponderante. Entre
estas, los polifosfatos (polyP) resultan de especial inters debido a su rol en la proteccin e
interaccin con metales divalentes1,2. Ms an, estudios recientes vinculan la acumulacin de
polifosfatos con la radiacin-UV, temperaturas extremas y deficiencia de nutrientes. Si bien el rol
que poseen los polyP en los mecanismos de resistencia a metales ha sido ampliamente estudiado, su
importancia y relacin en la biosntesis de NPs no ha sido determinada a la fecha.
El continente Antrtico por su parte, presenta condiciones ambientales extremas, tales como
una elevada radiacin UV en ciertos perodos del ao, bajsimas temperaturas, escasez de
nutrientes y estrs osmtico entre otras. Todas stas condiciones podran favorecer la presencia de
microorganismos que acumulen polyP como mecanismo de proteccin, ya que stos biopolmeros
adems de representar una defensa para los organismos que subsisten en stas condiciones, pueden
ser usados como fuente alternativa de energa.
Temperatura
de
crecimiento
Afinidad
tintorial Gram
CIM (g/mL)
Resistencia
UV (min)
A1L3.1
28 C
1750
A1L11.1
28 C
1750
5 min
A1L11.2
28 C
2500
2 min
A1L12.1
28 C
1750
A1L13.1
28 C
2500
A2L1.1
28 C
5000
2 min
A2L1.2
28 C
2500
A2L1.3
28 C
2500
A3L1.1
28 C
7500
A3L2.1
28 C
2500
A5L4.1
28 C
15000
A6L2.1
28 C
7500
2 min
A6L3.1
28 C
15000
2min
A7L1.1
28 C
3250
2 min
A8L4.1
28 C
1750
2 min
L43C
28 C
30000
5 min
M46B
28 C
2500
5 min
M46C
28 C
1750
5 min
L48
28 C
30000
L41B1
28 C
7500
1ii
28 C
7500
2 min
Una vez que las cepas se encontraban aisladas, se realiz tincin Gram. El resultado de la
tincin, el cual se resume en la tabla 1, dice que de las 21 cepas aisladas, solo una de ellas es Gram
positiva (A3L2.1). Hay estudios en los que se realizan anlisis metagenmicos en Fildes Isla Rey
Jorge, en ellos se evala la comunidad bacteriana dominante y los resultados muestran que mas del
65% de la comunidad bacteriana de Fildes est compuesta por proteobacterias, bacteroidetes y
acidobacterias, las cuales son todas Gram negativo6.
A continuacin se realiz ensayos de temperatura ptima de crecimiento. Este ensayo se
hizo a travs de conteo de unidades formadoras de colonia (UFC), para ello se crecieron las cepas
resistentes por 24 h a diferentes temperaturas y se inocul 5 L en placas con medio LB. Las
temperaturas evaluadas fueron 18, 28 y 37 C. Los resultados revelan que la temperatura ptima de
todas las cepas es 28 C, tal como se puede apreciar en la tabla N 1. Este resultado revela que si
bien los microorganismos aislados son capaces de crecer a bajas temperaturas (incluso a 8 C) estos
prefieren una temperatura mas alta, por lo que corresponden a organismos mesfilos.
El ensayo de CIM revela una gran diferencia en los niveles de resistencia a Cu en las cepas
aisladas, stos van desde 1.750 hasta 30.000 g/mL, lo cual representa una elevada resistencia, de
algn modo es posible que los microorganismos presentes hallan desarrollado mecanismos de
adaptacin a condiciones extremas.
El ensayo de peroxidasa total revela que las cepas que poseen los niveles ms altos de
resistencia a Cu, son las que a su vez tienen actividad peroxidasa total particularmente alta. Se
procedi a realizar un zimograma para determinar si los niveles de actividad peroxidasa total estn
determinados por catalasas y sus niveles de expresin.
Como se observa en la figura 1, solo dos cepas no muestran la enzima catalasa, sin embargo
cepas que poseen la ms alta resistencia a cobre como es L43C y L48 muestran la enzima KatG
muy expresada en condiciones normales (ausencia de Cu).
El ensayo de biosntesis de nanopartculas fluorescentes de cobre muestra que cerca del
60% de las cepas aisladas son capaces de sintetizar NPs. No obstante a lo anterior no hay una
relacin aparente entre stas y las que poseen mayor nivel de resistencia o actividad
peroxidasa/catalasa.
En base a lo anterior se cuantific los niveles de polyP en las cepas aisladas. Como ya se
mencion, los polyP representan una defensa que poseen microorganismos para tolerar metales
pesados, adems de estar vinculados a estrs oxidativo, fuente de energa en condiciones de
inanicin, defensa contra radiacin UV, entre otras. La cuantificacin se realiz en todas las cepas
aisladas en condiciones normales, sin embargo no existen diferencias estadsticamente
significativas entre ellas. Por lo que se repiti la cuantificacin, pero esta vez en condiciones de
biosntesis, para ello se usaron 3 cepas que sintetizan NPs y 3 que no lo hacen.
Escuela de Ingeniera Bioqumica, Pontificia Universidad Catlica de Valparaso, Av. Brasil 2085, Valparaso, Chile.
Fraunhofer Chile Research, Mariano Snchez Fontecilla 310, Las Condes, Santiago de Chile (lea.cabrol@gmail.com).
Abstract
The methanogenic potential of 41 Antarctic soil and sediment samples was determined under psychrophilic (5C) and
mesophilic (37C) conditions. 33 enrichments exhibited methanogenic activity at temperature as low as 5C. Most of
them had significantly higher methanogenic rate at 5C than the ones obtained at 37C, suggesting their potential
biotechnological application for low temperature anaerobic digestion. The different methanogenic activities obtained
were not significantly correlated to physicochemical parameters such as ammonia, nitrite, nitrate, phosphate and sulfate
contents. By contrast, the archaeal community structure depicted by 16S-DGGE appeared to be a strong driving force of
the functional outcome of these ecosystems. We identified putative psychrophilic or psychrotolerant methanogens
related to high (Methanocorpusculum labreanum) and low (Methanosarcina sp) methanogenic activities.
INTRODUCTION
Antarctic soil and sediments host a surprisingly high microbial diversity, still incompletely
explored. Extreme environmental conditions selected for adapted microorganisms with particular
functional traits, leading to specific ecosystem service. These original functional capacities offer an
interesting potential for low temperature biotechnological applications. This study takes place in the
context of anaerobic digestion (AD) bioprocesses, which serve the double objective of wastewater
purification and renewable energy production through methane-rich biogas. AD relies on a complex
microbial network (in which methanogenic Archaea play a key role), which can be strongly affected
by environmental parameters such as the temperature. Most methanogens have mesophilic optima
for growth and activity, and their efficiency dramatically drops when operating temperature
decreases below 20C, thus preventing the treatment of contaminated wastewaters at their natural
(low) temperature in cold regions (Lettinga et al., 2001).
We assume that psychrophilic or psychrotolerant methanogens enriched from cold environments
could be used as seed inoculum in AD bioprocess in order to improve its efficiency at low
temperature without extra heating. Methanogen species have been identified in natural cold
environments, such as tundra, permafrost, arctic soils, demonstrating their resistance and tolerance
to sub-mesophilic conditions (e.g. Metje and Frenzel, 2007). However, little information is
available to date about methanogenic activity and archaeal communities in Antarctic ecosystems.
Therefore, the objective of this work was to evaluate the methanogenic potential of microbial
consortia from Antarctic soil and sediments, according to an integrated approach relating the
archaeal community structure, the functional activity and environmental variables.
MATERIALS AND METHODS
Water-saturated soil and sediment samples were collected at different depth levels (between 0 and
40 cm), from 81 sampling sites among coastal zones of the South Shetland Islands and Antarctic
Peninsula exposed to annual freeze-thaw cycles, during the scientific expedition of 2013 austral
summer organized by the Chilean Antarctic Institute (INACH). For comparison purpose, two soil
samples were also collected from continental control sites in the Andes cordillera, in the central
zone of Chile. Soil pH and temperature were measured in situ. Total and volatile solid contents (TS,
VS) were determined according to standard protocol. Ammonium, nitrite, nitrate, sulfate, and
phosphate concentrations were determined through colorimetric quantification using the
multiparameter photometer HI 83200 and the associated reagent kits (Hanna Instruments). Samples
were ordinated by principal component analysis (PCA) according to the five nutrient concentrations
(after normalization and double square root transformation) with R software.
The 41 Antarctic samples containing the highest VS content (>1.0 gVS/gsoil) were selected for
further determination of the methane production activity, according to the protocol of Angelidaki et
al. (2009), slightly modified in order to adapt to the specificities of our samples. Samples were
incubated anaerobically at a final concentration of 6.41.4 gVS.L-1 in replicated batch vials (n=5, 10
mL working volume), at 5C and 37C, with acetate as substrate (30 mM). Endogenic controls were
also incubated under the same conditions but without substrate. The biogas production and the
methane content in the biogas were quantified periodically by, respectively, pressure measurement
with a low-range manometer (P05, PCE Instruments) and gas chromatography (Perkin Elmer Clarus
500 GC, VICI Hayesep Q 4mx1/8OD column). From pressure and GC monitoring, the cumulated
methane volume (standardized by VS content) was computed and plotted against time.
DNA was extracted from all incubated samples with the PowerSoil DNA Isolation Kit (MoBio
Laboratories) from 500 mg of soil, at the time of maximal methanogenic activity. The V3 region of
archaeal 16S rDNA was amplified by PCR with primers A357F and w104R (Leclerc et al., 2001)
and separated by denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) using the Dcode System (BioRad)
with a 20-70% denaturant linear gradient (Muyzer et al., 1993). Community profiles were analyzed
with GelCompar II (Applied Maths). Statistical analysis was performed using the R software,
including the computation of Shannon diversity and Bray-Curtis similarity index, PCA and
UPGMA clustering. Bands of interest (48) were excised from the DGGE gels. After verifying the
band unicity by subsequent DGGE, the band-DNAs were sequenced (Macrogen, Korea). Sequences
were analyzed by BLAST and compared to NCBI database.
The quantitative distribution of the methanogenic community among four key functional groups
with different metabolic pathways is currently under investigation through the quantitative PCR of
16S rRNA genes specific for hydrogenotrophic (Methanobacteriales and Methanomicrobiales) and
acetoclastic methanogens (Methanosaetaceae and Methanosarcinaceae), according to the protocol
of Yu et al. (2005) already implemented and operational at the laboratory. Moreover, deeper
insights in the characterization of total (bacterial and archaeal) community are currently under
analysis through high throughput sequencing (Illumina Mi-Seq, MR DNA Laboratory, Shallowater,
TX, US) of the V4-V5 hypervariable region of 16S rRNA gene (Wang and Qian, 2009).
RESULTS AND DISCUSSIONS
Environmental parameters
As shown in Fig. 1, the 41 Antarctic samples exhibited high variability in terms of VS, TS, pH, T
and nutrient content (ammonium, nitrite, nitrate and sulphate). This variability is interesting since:
(i) it increases the probability to find an ecosystem where the environmental parameters favour the
function of interest (i.e. the methane production); (ii) it enables to study the effect of environmental
parameters on the functional and/or microbial properties of the ecosystem.
Figure 1: Origin of the 41 Antarctic samples (Left), boxplot representation of their main physicochemical parameters
(Middle) and PCA ordination of the samples according to the nutrient concentrations (Right).
Methanogenic potential
From the 41 Antarctic samples, 33 and 25 exhibited methane production activity at, respectively,
5C and 37C, with variable efficiency according to the sample origin. Only 8 samples were not
able to produce methane at 5C after 180 to 350 days of incubation. The methodology robustness
was validated (i) at the lab level (by the high reproducibility between the 5 replicated incubations
for each sample), and (ii) at the sampling level (by the high reproducibility between samples
collected within some meters of one another).
The time-curve of the cumulated methane production exhibited a typical sigmoid trend, from
which it was possible to determine four efficiency criteria (Fig. 2): (i) the CH4 content in the biogas;
(ii) the cumulated methane yield at the end of the production phase (normalized by acetate-COD in
the feed), after subtracting the endogenic yield; (iii) the methanogenic activity computed as the
maximal slope of the cumulated methane volume time-curve, normalized by VS content; (iv) the
lag time before exponential production began. For all active samples, the methanogenic yield and
methane content in the biogas were significantly higher at 5C than at 37C, revealing some
limitation of active samples under mesophilic conditions. However the lag time necessary to reach
steady state was always higher at 5C (19-266 days) than at 37C (3-112 days), suggesting a longer
period of adaptation at low temperature. From the detailed methanogenic activity results, it is
possible to distinguish between three classes of samples: (I) mesophilic samples with very low
activity at 5C; (II) samples maintaining activity at both temperatures; (III) samples which only
produce methane at 5C. Samples from class II are potentially interesting for biotechnological
applications such as wastewater treatment within a wide range of operating temperatures.
Figure 2: Methanogenic performance of Antarctic samples represented by: time-curve of the cumulated methane
volume; boxplots at 5C and 37C (only for the active samples); histograms (standard deviations calculated on
triplicates; blue: 5C; orange: 37C; CONT: continental controls) and PCA (symbol size proportional to activity).
The 5C-methanogenic activities obtained in this study (ranging from 95 to 4121 nmolCH4/gDW/d)
will be discussed by comparison with literature from similar cold environments, such as for
example: 50,4 nmolCH4/gDW/d in sediments from permanently cold Lake Constance incubated with
acetate at 4C (Schulz and Conrad, 1996); 249,6 nmolCH4/g/d in Arctic siberian permafrost
incubated with acetate at 6C (Wagner et al., 2005); 240 nmolCH4/gDW/d in boreal wetland peat
incubated without substrate at 10C (Bergman et al., 2000); 750 nmolCH4/gDW/d in subarctic
permafrost incubated without substrate at 10C (Metje and Frenzel, 2007). Our results suggest the
psychrophilic or psychrotolerant nature of most of the Antarctic samples tested, whereas most
bibliographic reports suggest a mesophilic optimum for methanogenic activity (despite isolation
from cold environments). Currently, 13 samples have been selected for further investigation of the
temperature effect on methanogenic activity, at 7 temperatures between 5 and 37C.
Once acetate was exhausted and CH4 production stopped, fresh substrate was added twice. Along
the successive substrate additions at 5C, the lag time drastically decreased to 1 to 44 days,
revealing the strong adaptation capacity of the microbial consortia to incubation conditions. The
effect of repeated substrate additions on the methanogenic yield and activity at 5C was not clear.
At 37C however, repeated substrate additions generally led a drastic decrease of methanogenic
performance and increase of lag time, confirming some specific limitation and/or inhibition at 37C.
Potential correlations were statistically investigated between environmental parameters and
methanogenic potential (envfit in vegan package, R software). This analysis revealed a slight effect
of sample depth, TS and VS (i.e. higher methanogenic activity in the surface section of soils with
high organic content and high moisture content) but no significant effect of in-situ pH, TC, or
nutrient (NO2-, NO3-, NH4+, SO42-, PO43-) concentrations on methanogenic activity.
Archaeal community structure
Our results suggest that the archaeal community structure was a stronger driving force of the
ecosystem service (methane production) than the physicochemical characteristics of the in-situ
environment. Indeed, preliminary DGGE results (28 samples analyzed to date) revealed that the
clustering of samples (by dendrogram and PCA) on the basis of their DGGE profiles was globally
correlated to methanogenic activity (Fig. 3). More specifically, we identified a major DGGE band
(A) which seems to be a particular signature of the samples exhibiting high methanogenic activity at
5C. This band was affiliated (98% similar) to the (putative psychrophilic) hydrogenotrophic
Methanocorpusculum labreanum sequence (accession number NR_074173.1) detected from lowtemperature anaerobic digesters from NUI Galway, Ireland (OFlaherty, unpublished), indicating
that it may play an active role in psychrophilic methane production from H2/CO2. Moreover, three
intense DGGE bands were dominant in samples with high (B1, B2) and low (C) activity at 5C.
They were phylogenetically close (99% similarity) from the acetoclastic Methanosarcina lacustris
and Methanosarcina sp, respectively, detected in natural low-temperature environments such as
Arctic wetland sediments (accession numbers AB973355 and JQ792838.1).
Figure 3: Achaeal 16S-PCR-DGGE
of 28 Antarctic samples incubated at
5C. UPGMA clustering (Left) and
PCA representation (Right), in
relation with methanogenic activity
(histogram and proportional disc
sizes). Letters A, B1, B2, C indicate
sequenced bands.
CONCLUSION:
We obtained highly promising results demonstrating the methanogenic potential of Antarctic soils
and sediments for low-temperature anaerobic digestion. Some relationships between methanogenic
activity and archaeal community structure were disentangled by DGGE and will be more deeply
investigated by the current analysis of qPCR and next generation sequencing results.
ACKNOWLEDGEMENTS:
This project is funded by the Chilean Antarctic Institute (INACH, RT09-12).
REFERENCES
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wastes and energy crops: a proposed protocol for batch assays. Water Science & Technology, 59, 927-934.
Bergman I, Klarqvist M, Nilsson M. 2000. Seasonal variation in rates of methane production from peat of various
botanical origins: effects of temperature and substrate quality. FEMS Microbiology Ecology, 33, 181-189.
Leclerc M., Delbes C., Moletta R. and Godon J. J. 2001 Single strand conformation polymorphism monitoring of 16S
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Lettinga G., Rebac S. and Zeeman G. 2001. Challenge of psychrophilic anaerobic wastewater treatment. Trends in
Biotechnology, 19(9), 363-370.
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Schulz S, Conrad R. 1996. Influence of temperature on pathways to methane production in the permanently cold
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Wagner D, Lipski A, Embacher A, Gattinger A. 2005. Methane fluxes in permafrost habitats of the Lena Delta: effects
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Wang Y and Qian PY. 2009. Conservative fragments in bacterial 16s rRNA genes and primer design for 16s ribosomal
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Unidad de Microbiologa Molecular, Instituto de Investigaciones Biolgicas Clemente Estable (IIBCE), Montevideo, Uruguay
Institut Pasteur, Unit Plasticit du Gnome Bactrien, Dpartement Gnomes et Gntique, Paris, Francia
3
CNRS, UMR3525, Paris, Francia
4
Instituto de Ecologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Mxico DF, Mxico
2
Introduccin:
A partir de muestras colectadas en diversos sitios de la Pennsula Fildes durante las campaas del Instituto
Antrtico Uruguayo (IAU) (2008-2010), se aisl un conjunto de bacterias capaces de crecer en medio LB a
10C y a 30C. Los sitios de colecta fueron seleccionados intentando obtener muestras que estuviesen
expuestas a distintas influencias ambientales, incluyendo sitios cercanos y alejados de las bases cientficas
(figura 1).
Figura 1: Mapa de la Pennsula Fildes: Bases Antrticas: UY, Uruguay; RU, Rusia; CL, Chile; CN, China; AP, Aeropuerto
Chileno. Sitios de muestreo: CN, Caleta Norma; TR, Tanques Rusos; HP, Halfthree-point.
Figure 1: Map of Peninsula Fildes: Antarctic bases: UY, Uruguay; RU, Russia; CL, Chile; CN, China; AP, Chilean airport.
Sampling locations: CN, Norma Cove; TR, Russian Tanks; HP, Halfthree-point.
Los integrones son estructuras genticas capaces de incorporar y expresar marcos de lectura abiertos
(ORFs), denominados genes cassette.Este proceso est mediado por una enzima denominada integrasa, que
acta como una tirosin recombinasa sitio-especfica, codificada por el gen intI1(figura 2).
Los integrones fueron originalmente identificados a partir de aislamientos de origen clnico y se los clasifica,
tradicionalmente, en distintas clases. Los integrones clase 1 estn casi siempre asociados a genes cassette de
resistencia a antibiticos. Se logr amplificar y secuenciar el gen que codifica para la enzima integrasa clase
1 a partir de todos los aislamientos. El anlisis de secuencia de la regin circundante al gen integrasa (intI1),
permiti identificar dos ORFs,dfrA14 e hyp, que codificaran para una dihidrofolato reductasa (Tmpr) y una
protena denominada hipottica. La secuencia de este fragmento fue casi idntica a la de un fragmento
originalmente identificado en el plsmido pKOX105,purificado a partir de un aislamiento clnico de
Klebsiella oxytoca (HM_126016) (Carattoli y col., 2010).
En este trabajo reportamos el anlisis de secuencia de plsmidos purificados de tres aislamientos
seleccionados a partir de la coleccin mencionada.
Materiales y Mtodos:
Los clones TR5, CN11 y HP19 fueron cultivados en medio Mueller-Hinton suplementado con Tmp (50 g
ml-1) a 25C. El ADN plasmdico deestos tres aislamientos (pTR5, pCN11 y pHP19)fue purificado
empleando el kit Gene Plasmid Midprep Elute HP (Sigma-Aldrich Co, MO).La secuenciacin se realiz en
un equipo Ion 314TM Chip en un Ion PGMTM System (Life Technologies,) en el IIBCE. La reaccin de
secuenciacin gener 86175 reads, con un tamao promedio de 204 pb para pTR5; 97875 reads, con un
tamao promedio de 206 pb para pCN11 y 89140 reads, con un tamao promedio de 202 bp para pHP19,
sumando en total 17, 20 y 18 millones de bases respectivamente. Los reads del Ion Torrent fueron
ensamblados empleando el software CLC Genomics Workbench v6.5 (CLC bio), obteniendo 1139 contigs y
N50 value de 3140 para pTR5, 951 contigs y N50 value de 6699 para pCN11 y 694 contigs y N50 value de
1020 para pHP19. Para la anotacin de los contigs de pTR5, pCN11 y pHP19 y la comparacin con los
plsmidos pECL_A y pKOX105, se utiliz el servidor RAST (Azziz y col., 2008)
(http://rast.nmpdr.org/rast.cgi).Para el anlisis de secuencia tambin se utilizaron los programas Blastn y
Blastx (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) (Zhang y col.,2000).
Resultados:
El anlisis de secuencia de pHP19 mostr una regin de 7185 nt muy similar (99% de identidad por Blastn)
con dos regiones de pKOX105 (54641pb) (Carattoli y col. 2010). De acuerdo con la anotacin asignada por
RAST, esta regin incluye el gen intI1, el gen cassettedfrA14, el ORF que codifica para una protena
hipottica hyp y otrosORFs que codifican para una ADN-citosina metiltransferasa y una probable protena
de membrana.Las secuencias de otras regiones fueron similares a las del plsmido pECL_A (IncFII)
(199562pb) (NC_014107) de Enterobacter cloacae ATCC 13047 (Ren y col., 2010). Estas regiones incluyen
dos ORFs que codifican para protenas de iniciacin de la replicacin (RepFIIA y RepFIB), protenas de
particin (ParA y ParB) y de estabilidad (TraX), as como varios genes involucrados en procesos
conjugativos (traB, traC, traE,traF, traU, traW and trbI). Tambin se identificaron clusters de genes
relacionados con resistencia a mercurio, arsnico, telurito, nquel y cobre, idnticos a los encontrados en
pECL_A.
Conclusiones:
El carcter conjugativo de estos plsmidos fue confirmado por la presencia de varios genes involucrados en
procesos de conjugacin. Probablemente estos plsmidos constituyen un mosaico, con porciones o
fragmentos derivados de otros plsmidos, algunos previamente caracterizados en enterobacterias mesfilas,
lo que sugiere que la transferencia horizontal de genes entre estas bacterias y la microbiota antrtica es un
evento bastante frecuente. Estos resultados demostraran que no existen nichos prstinos para la
diseminacin de genes de resistencia.
Perspectivas: Se deber continuar con el anlisis de secuencia de los plsmidos pTR5 y pCN11.
Referencias:
Aziz RK, Bartels D, Best AA et al. The RAST Server: Rapid Annotations using Subsystems Technology.BMC Genomics 2008,
9:75.
Carattoli A, Aschbacher R, March A et al. N. Complete nucleotide sequence of the IncN plasmid pKOX105 encoding VIM-1,
QnrS1 and SHV-12 proteins in Enterobacteriaceae from Bolzano, Italy compared with IncN plasmids encoding KPC enzymes in
the USA. J Antimicrob Chemoth 2010;65 (10):2070-2075.
Ren Y, Ren Y, Zhou Z, Guo X, Li Y, Feng L, Wang L. Complete genome sequence of Enterobacter cloacae subsp. cloacae type
strain ATCC 13047 J Bacteriol 2010;192(9): 2463-2464.
Zhang Z, Schwartz S, Wagner L, Miller W. A greedy algorithm for aligning DNA sequences. J Comput Biol 2000;7(1-2):203-14.
Laboratorio Tecnolgico del Uruguay, Calle Av. Italia 6201, 11500 Montevideo, Uruguay.
Introduccin
Los cidos grasos poliinsaturados (AGPI), han adquirido creciente importancia en
reas tales como la medicina y la biotecnologa, por ser algunos de ellos compuestos
esenciales de la dieta del hombre y muchos otros animales que no tienen la capacidad de
sintetizarlos de novo a partir de los cidos grasos monoinsaturados . El consumo de AGPI,
sobre todo de cido eicosapentanoico (EPA) y cido docohexanoico (DHA), se relacionan a
una amplia variedad de efectos benficos sobre la salud humana, que se extienden desde un
desarrollo fetal apropiado hasta la prevencin de algunos tipos de cnceres . El EPA, DHA
y ARA (cido araquidnico) son cidos grasos de gran importancia en el sistema nervioso,
ya sea como integrantes de las membranas neuronales o como intermediarios en la
transduccin de seales. Se ha reportado que numerosos desrdenes neurolgicos, tales
como Alzeheimer y depresin profunda, se relacionan a bajos niveles de AGPI A nivel
cardiovascular, se ha probado que el consumo de AGPI disminuye el nmero de
triglicridos en plasma , as como tambin, estaran involucrados en la disminucin de la
frecuencia cardaca y presin arterial .
Los ecosistemas marinos, son ricos en AGPI de cadena larga, por lo que el consumo
de pescado por los seres humanos es el principal aporte de stos en la dieta. Sin embargo, la
produccin primaria de stos nutrientes proviene de la amplia y diversa poblacin
microbiana que habita en los ecosistemas marinos. El continente Antrtico resulta un
ambiente muy propicio para el aislamiento de microorganismos productores de AGPI, ya
que dicha produccin se ha correlacionado con condiciones tales como altas presiones,
bajas temperaturas y salinidad elevada, entre otras. La incorporacin de stos cidos grasos
poliinsaturados a la bicapa lipdica de las membranas microbianas, constituye un
importante mecanismo de adaptacin a las bajas temperaturas, ya que sus bajas
temperaturas de fusin y compleja geometra molecular permiten mantener la fluidez de las
mismas en condiciones extremas .
La produccin bacteriana de cidos grasos poliinsaturados de cadena larga es un
enfoque biotecnolgico prometedor para la produccin masiva de estos compuestos (Shene
et al. 2010; Das, 2008), presenta mayores ventajas respecto a las fuentes tradicionales, ya
que las bacterias pueden producir un perfil de cidos grasos simple, a diferencia de las
complejas mezclas producidas por microalgas o a las acumuladas en peces. Esto minimiza
los tiempos y costos requeridos para la purificacin de los cidos grasos . Las bacterias
resultan ms fciles de cultivar y mantener, por lo que pueden considerarse una fuente
fcilmente renovable para la produccin de AGPI respecto al stock cada vez ms reducido
de peces como fuente de cidos grasos esenciales (Sijtsma et al. 2004; Nichols et al. 1993).
El objetivo del presente estudio fue la determinacin y optimizacin de las
condiciones de cultivo que maximizan la produccin de EPA en la bacteria antrtica
Shewanella sp. FI 8-5.
Materiales y Mtodos
A modo de determinar los requerimientos nutricionales y condiciones de cultivo que
favorecen la produccin de EPA (fuentes de carbono, nitrgeno, sales minerales, pH y
temperatura) se llevaron a cabo ensayos en medio lquido, en condiciones controladas, en
matraces. Se tom como medio de referencia al Medio Marino Modificado reportado para
el crecimiento de Shewanella japnica con la siguiente composicin: bactopeptona 5 g/L,
extracto de levadura 2 g/L, sales marinas 20 g/L, KH 2PO4/Na2HPO4 0,02 g/L, MgSO4.7H2O
0,05 g/L, glucosa 1 g/L. Se variaron las concentraciones de glucosa, peptona, extracto de
levadura y sales marinas evaluando como respuesta la produccin de biomasa y la cantidad
de EPA y DHA en mg por gramos de biomasa seca (mgEPA/g). Las concentraciones de
EPA y DHA se midieron por cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas
(GC-MS), el seguimiento del crecimiento celular fue medido por espectrofotometra a
600nm y el consumo de azcares reductores, por tcnica colorimtricas con cido
dinitrosalicilico (DNS).
Para optimizar el proceso se utiliz la metodologa de superficie de respuesta
(diseo factorial con punto central), que permiti obtener un amplio rango de datos,
minimizando el nmero de unidades experimentales.
A nivel de reactor se evalu el efecto del oxgeno disuelto, as como tambin el
mantenimiento del pH constante a lo largo del ensayo y se utilizaron las condiciones de
temperatura y pH y composicin del medio, optimizadas en los ensayos en matraces.
Resultados y Discusin
A partir de la primera serie de ensayos se obtuvieron la temperatura y pH ptimos:
10 C y 6 respectivamente, produciendo 2,9 g/L de biomasa y 1,8 mgEPA/g. Si bien se
observ que la velocidad de crecimiento es favorecida a temperaturas ms elevadas, una
temperatura baja de 10 C, permite mayor acumulacin de EPA.
En lo que refiere a las fuentes de carbono estudiadas (peptona, glucosa, fructosa,
almidn, maltosa y celobiosa), el consumo de glucosa, fructosa y almidn, fue
despreciable, lo que sugiere que Shewanella sp FI 8-5 no utiliza ninguno de estos
componentes, como fuente de carbono. En lo que refiere a maltosa, peptona, y celobiosa la
produccin de mg de EPA/litro fue: 3,4; 3,6 y 2,9 respectivamente.
Las fuentes de nitrgeno estudiadas fueron: peptona, extracto de levadura y una
fuente de nitrgeno mineral (cloruro de amonio). Dado que anteriormente se observ que
los valores de EPA obtenidos para maltosa y peptona fueron similares, se ensayaron en
paralelo ambas fuentes de carbono. La mayor cantidad de biomasa se obtuvo en los cultivos
con maltosa o peptona y extracto de levadura, y en el medio con peptona la bacteria
present una mayor velocidad de crecimiento. Basado en estos resultados, se opt por la
Figura 1. Produccin de biomasa medida en g/L de Shewanella sp. FI 8-5 para cultivo en reactor,
en distintas condiciones.
Conclusiones
La bacteria Shewanella sp. FI 8-5 aislada de la Antrtida, resulta un
microorganismo productor de EPA prometedor, ya que se adapta fcilmente al cultivo en
reactor. Este microorganismo mostr preferencias por fuentes de carbono y nitrgeno de
origen proteico y acumula mayor cantidad de AGPI a bajas temperaturas.
Agradecimientos
Introduccin
Durante el proceso de poscosecha de frutas pueden surgir prdidas debido a dao fsico,
deterioros fisiolgicos o daos patolgicos producidos por agentes biticos. Estas causas de
deterioro estn afectadas por factores propios de la fruta y tambin por factores externos como
la temperatura, humedad relativa del ambiente, composicin de la atmsfera, luz, etc. Tratando
de minimizar el deterioro y buscando equilibrar la oferta y la demanda en diferentes pocas del
ao, algunas frutas son almacenadas en cmaras a bajas temperaturas durante perodos variables
de tiempo. En estas condiciones los principales patgenos causantes de prdidas en la
produccin son los hongos. El mtodo tradicionalmente empleado para reducir estas prdidas es
la aplicacin de fungicidas sintticos. Sin embargo, con el fin de reducir riesgos de toxicidad
para consumidores y productores y buscando disminuir problemas de contaminacin ambiental,
se han desarrollado estrategias alternativas de control. En este contexto, el control biolgico en
la etapa de poscosecha ha demostrado ser una alternativa promisoria. El control biolgico puede
definirse como el control del crecimiento de una poblacin por accin de uno o ms organismos
antagonistas. Los antagonistas ms ampliamente utilizados en la etapa de poscosecha, han sido
las levaduras, de forma tal que de los cuatro productos comerciales desarrollados para dicho fin,
tres son a base de levaduras. En la bsqueda de levaduras capaces de controlar el desarrollo de
Penicillium expansum en manzanas y peras almacenadas en cmaras refrigeradas, este trabajo
plante utilizar la capacidad de crecimiento a bajas temperaturas como primer criterio de
seleccin de los potenciales agentes de biocontrol. Por ello se realiz el aislamiento de
levaduras provenientes de un ambiente extremo como es la Antrtida y se estudi su capacidad
biocontroladora sobre fruta. Debaryomyces hansenii, una especie extremfila (Vishniac, 2006;
Shivaji et. al., 2009) fue una de las especies aisladas con mayor frecuencia. A su vez, fue la
especie que demostr una mayor capacidad biocontroladora en fruta. Sin embargo, se detectaron
diferencias intraespecficas significativas entre las cepas. En base a los resultados se seleccion
una de las cepas para continuar su desarrollo como agente de biocontrol. A su vez se desarroll
un mtodo molecular que permitiera diferenciar las cepas seleccionada de otras cepas de la
misma especie.
Objetivos
Bsqueda y seleccin de levaduras antrticas capaces de actuar como biocontroladores de
patgenos fngicos, inhibiendo el desarrollo de Penicillium expansum en dos variedades de
manzana y una de peras almacenadas en fro durante su etapa de poscosecha.
Desarrollar un mtodo molecular que permita diferenciar la cepa seleccionada de otras cepas de
la misma especie de levaduras identificadas como Debaryomyces hansenii mediante tcnicas de
ISSR-PCR.
Materiales y Mtodos
Las cepas de este trabajo se aislaron de muestras de suelo y agua de la isla Rey Jorge
(62 23 0 S, 58 27 0 W). Previo a la seleccin de las posibles levaduras biocontroladoras se
dimetro promedio de la herida o pudricin. Los datos se analizaron con el programa Infostat
mediante anlisis de varianza utilizando LSD como mtodo de comparacin, donde se puede
observar que hay levaduras que tienen diferencias significativas con el control y por lo tanto son
posibles agentes de control biolgico. Las levaduras identificadas como D. hansenii se muestran
con barras de color negro. De estas 11 posibles buenas controladoras biolgicas, nuevamente se
observ que 8 corresponden a Debaryomyces hansenii.
M
20
DE
DE
BC
39E
36E
35E
32R
17E
29BE
5E
4BE
F39A
F36A
F32D
F32B
IJ
FGHI
ABC
F32C
F32A
F27A
F26E
F18B
F18A
F13D
F12B
CD
ABC
ABC
F12C
F12A
F9E
F9F
AB AB
F9H
F9D
F7A
F3B
AB AB
F9C
ABC
GHIJ GHIJ
41E
DE
15E
EF
GHIJ
EFG EFGH
13R
EF
HIJ
12R
DE
IJ
12D
EF
7AE
EF
Control
IJ
13
F7D
26
Levadura
Figura 1. Severidad de la enfermedad (dimetro promedio de la herida o pudricin) en cada tratamiento. Letras
diferentes indican diferencias significativas (=0,05) entre tratamientos.
Se realiz un tercer ensayo de biocontrol de P. expansum sobre pera Williams. En este caso
hubo 4 levaduras capaces de proteger ms de un 75% la incidencia de la enfermedad, siendo 3
de ellas D. hansenii. La Figura 2 muestra los resultados obtenidos en forma de severidad de la
enfermedad para los diferentes tratamientos. Los datos se analizaron con el programa Infostat
mediante anlisis de varianza utilizando LSD como mtodo de comparacin.
30
Q
Q
P
NOP
OP
MNO
LMN
KLM
JKLM
15
JKLM
HIJKL
EFGHIJ
EFGHI
EFGH
EFGH
DE
DE
DEF
12R
CD
12D
CD
DEFG
ABCD
ABC
ABC
Control
41E
39E
36E
35E
32R
29BE
17E
15E
13R
5E
4BE
F39A
F36A
F32D
F32C
F32A
F27A
F26E
F18B
F18A
F13D
F12C
F9H
F9E
F9D
F9C
F7D
F7A
F3B
F12B
ABC
AB
CD
BCD
F12A
CD
7AE
DEFG
8
IJKLM
GHIJK
FGHIJ
F9F
23
Levadura
Figura 2. Severidad de la enfermedad (dimetro promedio de la pudricin) en cada tratamiento. Letras diferentes
indican diferencias significativas (=0,05) entre tratamientos.
Mediante los ensayos de control biolgico realizados logramos encontrar levaduras como
potenciales agentes de control biolgico, destacndose la especie Debaryomyces hansenii.
Realizando un anlisis en conjunto de todos los ensayos de control biolgico, se evidenci que
una de las levaduras D. hansenii codificada como F9D tuvo un buen desempeo en los tres
patosistemas estudiados, por lo que se decidi continuar con esta levadura en los posteriores
ensayos. Para lograr diferenciar la cepa F9D del resto de las dems D. hansenii se emple la
tcnica de ISSR-PCR. Mediante los primers 5-AGGAGGAGGAGGAGG-3 y 5CAGCAGCAGCAGCAG -3 se lograron diferenciar algunas cepas con un perfil marcadamente
diferente a la F9D. Para lograr una mejor resolucin se realiz la amplificacin con un tercer
primer (5-GACAGGACAGGACAG-3) con el cual se logr un perfil diferencial para la cepa
seleccionada.
Conclusiones
Como resultado del proyecto se cuenta con una coleccin de levaduras antrticas identificadas
molecularmente y caracterizadas con respecto a su capacidad biocontroladora. Se ha
seleccionado una cepa identificada como Debaryomyces hansenii y codificada como F9D por
su capacidad de controlar el desarrollo de Penicillium expansum en la poscosecha de manzanas
Red Delicious y Granny Smith y en peras Williams. Se logr diferenciar molecularmente
mediante perfiles ISSR-PCR a la levadura F9D del resto de las cepas D. hansenii.
INTRODUCCION
La produccin de biocombustibles est creciendo sostenidamente a nivel mundial ya que su uso
implica una reduccin en la dependencia energtica en los combustibles fsiles a favor de la
utilizacin de fuentes de energa renovables. Uno de los biocombustibles de creciente desarrollo en
nuestro pas es el biodiesel. El mismo se genera por esterificacin metanlica o etanlica de cidos
grasos provenientes de triglicridos de diferentes fuentes, principalmente de origen vegetal (aceites
de girasol, soja, o canola) (Sharma y Singh, 2008). Sin embargo el uso de este tipo de materia
prima, implica disponer de grandes extensiones de tierra para los cultivos los cuales requieren a su
vez, inversin en insumos y mano de obra. Adems, el uso de estos aceites como combustible
compite con la utilizacin de los mismos como materia prima de la industria alimentaria. Por lo
tanto, ltimamente se ha prestado atencin a la bsqueda de fuentes alternativas de cidos grasos,
en especial de origen microbiano. Se ha demostrado que bajo ciertas condiciones de cultivo, ciertas
algas, bacterias, hongos filamentosos y lavaduras, denominadas oleaginosas, tienen la capacidad de
acumular triglicridos, los cuales pueden llegar a representar el 60% o ms del total de su biomasa.
En particular, debido a la facilidad en su produccin, a la capacidad de acumulacin de triglicridos
y al amplio rango de sustratos asimilables, las levaduras oleaginosas constituyen una prometedora
fuente de materia prima para el biodiesel. El presente trabajo tuvo como propsito el aislamiento,
seleccin, identificacin y caracterizacin de levaduras antrticas para ser utilizadas como fuente de
triglicridos para la produccin de biodiesel.
MATERIALES Y METODOS
Seleccin primaria de levaduras oleaginosas
Las cepas de este trabajo se aislaron de muestras de suelo y agua de la isla Rey Jorge (62 58
020S 210 W / 62.033 S 58.35 W) durante las campaas 2012 y 2013. Para la seleccin primaria
de levaduras oleaginosas se determin la concentracin de lpidos intracelulares por el mtodo
postulado por Sitepu et al. (2012) basado en la cuantificcin de fluorescencia utilizando Rojo de
Nilo como fluoroforo. Los lpidos fueron determinados luego de 5 das de incubacin a 20 C, en un
medio para acumulacin de lpidos descrito por Thakur et al. (1989). Las determinaciones se
realizaron por duplicado, determinndose el promedio y el intervalo de confianza (=0.05) en cada
caso.
Seleccin secundaria
Cuantificacin de lpidos saponificables acumulados:
Para cada uno de los aislamientos se determin por duplicado el porcentaje de lpidos saponificables
acumulados en g/L de cultivo. Para ello, se realizaron cultivos de cada cepa en condiciones de
acumulacin de lpidos (limitacin de nitrgeno) utilizando el medio descripto por Thakur et al.,
(1989). Los lpidos fueron extrados a los 5 das de incubacin por saponificacin directa segn
Burja et al. (2007), se determinaron gravimtricamente y se expresaron en g de lpidos sobre litro de
cultivo. Los resultados se analizaron mediante anlisis de varianza (ANOVA) y prueba LSD de
Fisher (=0.05) (Infostat, 2008).
Determinacin de la capacidad de crecer en diferentes sustratos carbonados.
Figura 2: Representacin de lpidos extrados por saponificacin en g/L con el test de Fisher.
Se determin que no exista diferencia significativa entre las cantidades de lpidos acumulados por
las cepas 12D, 8E y 5E que resultaron las cepas de mayor capacidad de produccin de lpidos
intracelulares. Sin embargo se puede afirmar que la cepa 12D acumul una cantidad de lpidos
significativamente mayor que las cepas 15E, 13R y 4E. Los resultados presentados en la Figuras 1
y 2 permitieron concluir que el mtodo utilizado en la seleccin primaria, basado en la fluorescencia
obtenida por Rojo de Nilo no predice adecuadamente la concentracin de lpidos saponificables
intracelulares.
Todas las cepas seleccionadas fueron capaces de asimilar sacarosa y glicerol. Sin embargo las cepas
13R y 5E no fueron capaces de asimilar lactosa. Estos resultados determinan que las cepas 8E, 4E,
12D y 15E seran capaces de crecer en medios con melaza, glicerina o permeado de suero de queso,
tres subproductos industriales uruguayos. El uso de dichos subproductos como fuente de carbono y
energa en un medio de cultivo para la produccin de las levaduras abaratara los costos operativos
haciendo ms rentable el proceso. La capacidad de las cepas de asimilar diferentes sustratos es una
caracterstica buscada ya que aumenta la versatilidad de fuentes carbonadas de uso potencial para su
cultivo.
La siguiente tabla muestra la identificacin obtenida para cada una de las cepas seleccionadas. Se
puede apreciar que fueron seleccionadas dos cepas de la especie C. gloebosa, las cuales a su vez,
presentaron diferencias significativas en cuanto a la acumulacin de lpidos intracelulares.
Tabla 1. Identificacin de las cepas seleccionadas
Cepa
8E
4E
12D
13R
15E
5E
Especie
Guehomyces pullulans
Cryptococcus aerius
Candida glaebosa
Leucosporidiella fragaria
Candida glaebosa
Leucosporidiella fragaria
La Tabla 2 muestra la composicin en cidos grasos de los lpidos acumulados por las levaduras
seleccionadas. Con los datos obtenidos se calcul el nmero de cetano para cada mezcla,
determinndose que era mayor a 45 en todos los casos, lo cual determin que en ese aspecto todas
las mezclas obtenidas fueran aptas para biodiesel segn la Norma UNIT 1100:2014 A su vez, se
determin que la mezcla de cidos grasos obtenidos a partir de las cepas 5E, 8E y 13R contenan
ms del 12% de cido linolnico. Esta caracterstica determin que dichas cepas fueran descartadas
como candidatas para la produccin de biodiesel debido a que la mencionada Norma UNIT exige
que en el biodiesel el porcentaje del mtilester de dicho cido sea menor a 12%. Se pudo observa
adems que la temperatura de cultivo no afect mayormente la composicin de los cidos grasos
correspondientes a los lpidos saponificables acumulados en las levaduras.
Tabla 2. Mezclas de cidos grasos obtenidos con las cepas seleccionadas a diferentes temperaturas
Cepa
4E
5E
8E
12D
13R
15E
Temperatura
% lipidos
de incubacin acumulados/
(C)
biomasa seca
20
35,71
4
29,60
20
41,94
4
34,48
20
42,64
4
29,67
20
53,92
4
28,45
20
36,26
4
31,87
20
46,33
4
19,84
Lipidos
(g/L)
%
14:0
%
16:1
%
16:0
% %
18:3
18:2n6/18:3
%
18:1
3,85625
3,3
5,11625
5,655
4,85
3,1
5,7025
3,5272
4,2425
3,41
4,54
1,815
0
0
1,02
0
0,28
0
0
0
1,45
0
0
0
2,59
9,15
1,04
1,39
0,50
0,28
11,10
9,02
1,13
1,71
6,55
6,29
23,38
16,87
24,37
20,76
22,86
17,76
17,90
16,60
28,40
23,02
18,26
16,61
9,81
4,71
13,79
14,32
13,21
15,36
7,17
4,32
15,19
14,42
4,34
4,43
56,75
60,49
54,48
59,99
52,83
60,53
56,47
59,92
47,34
57,97
62,93
67,11
Introduccin
El continente antrtico se ha aislado geogrficamente del resto del mundo desde
hace millones de aos y sus ambientes son considerados los ms prstinos y extremos
que quedan en la tierra. Debido a estas caractersticas, la fauna presente en la Antrtida
es nica (Bargagli, 2008). Las aves ms abundantes en la Antrtida son los pinginos
(18 especies diferentes), los cuales tienen una larga expectativa de vida, un nicho
ecolgico permanente y han sido considerados como bioindicadores ambientales
(Metcheva et al., 2006; Barbosa, 2011).
En los ltimos aos, la Antrtida ha experimentado un aumento en las
actividades cientficas y tursticas, lo cual podra introducir patgenos asociados a
humanos en la fauna silvestre de este continente. Algunos autores reportan la presencia
de patgenos humanos en pinginos y otras aves marinas (Grimaldi et al., 2011). Sin
embargo, no se han realizado estudios recientes en pinginos de la isla Greenwich, de la
Antrtida martima. El objetivo de este trabajo fue aislar e identificar bacterias en las
heces del pingino pico rojo (Pygoscelis papua) de la isla Greenwich.
Metodologa
Muestras de heces de 4 pinginos pico rojo (P. papua) fueron colectadas del
suelo en la Isla Greenwich, Antrtida. Luego fueron colocadas en recolectores plsticos
estriles y congeladas a -10C para su posterior procesamiento en el laboratorio de
Fisiologa Gastrointestinal (IVIC, Venezuela), en donde se realiz el cultivo bacteriano.
Las heces (aproximadamente 300 mg) fueron resuspendidas en 1 ml de NaCl (0.09%) y
sembradas en medio de cultivo Agar Sangre Chocolate en condiciones de microaerofilia
para aislar Helicobacter pylori (Fernandez et al., 2007) y en medio de cultivo Mueller
Hinton en aerobiosis para aislar bacterias entricas. Luego de 7 das de incubacin
(37C), se seleccionaron colonias con diferentes morfologas de todos los cultivos. La
identificacin bacteriana se realiz mediante pruebas bioqumicas utilizando el sistema
Vitek 2C (BioMerieux, Francia) y pruebas moleculares, amplificando por PCR el gen
16S ARN ribosomal con cebadores universales (27F y 1492R) (Garca-Amado et al.,
2012). Posteriormente, los amplicones fueron secuenciados utilizando los servicios de la
compaa Macrogen (Korea) y las secuencias obtenidas fueron comparadas con la base
de datos Genbank con el programa blast (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi).
Resultados y Discusin
Un total de 11 aislados fueron obtenidos de las heces de pinginos (Tabla 1). Se
pudo observar que hay diferencias entre la identificacin bioqumica y molecular,
observndose consenso a nivel de gnero en 5 aislados y a nivel de especie en un
aislado. En uno de los aislados (2013-EPVM1-CP3) no se observ una buena
identificacin por ninguno de los mtodos, indicando que podra tratarse de una nueva
especie bacteriana.
Algunos de los gneros identificados como Bacillus, Haemophilus,
Staphylococcus, Neisseria y Sphingomonas han sido reportados previamente en
diferentes especies de pinginos (Dewar et al., 2013).
En dos de los pinginos se aislaron cepas que poseen altas similitudes con
bacterias patgenas humanas como Staphylococcus epidermidis y Yersinia
enterocolitica. S. epidermidis ha sido reportado previamente en suelo antrtico de reas
impactadas por humanos (Ah Tow y Cowan, 2005). No hay reportes previos de
Yersinia spp. en pinginos; sin embargo, otros patgenos humanos como
Campylobacter spp., Salmonella spp. y Pasteurella multocida, se han identificado
previamente en pinginos y aves marinas en la Antrtida (Grimaldi et al., 2011). El
sitio de estudio de este trabajo se encuentra cerca de la Isla Barrientos, una zona
frecuentada por turistas que acuden a visitar las colonias reproductivas de las especies
de pinginos P. papua y P. antartica. Esto sugiere que la actividad turstica podra
afectar este ecosistema, introduciendo bacterias de origen humano en los pinginos.
Nuestros resultados muestran la presencia de una gran heterogeineidad
bacteriana en las heces del pingino P. papua de la Isla Greenwich, Antrtida, que
incluyen aislados con potencial patgeno de origen humano. Sin embargo, debido a la
discrepancia entre los dos mtodos de identificacin, ms pruebas son necesarias para
confirmar la especie de estos aislados bacterianos.
Bibliografa
1. Ah Tow L, Cowan DA (2005) Dissemination and survival of non-indigenous bacterial genomes
in pristine Antarctic environments. Extremophiles 9:385-389.
2. Barbosa A (2011) Effects of climate change on Antarctic penguins. Ecosystems 20:33-41.
3. Bargagli R (2008) Environmental contamination in Antarctic ecosystems. Sci Total Environ
400:212-226.
4. Dewar ML, Arnould JP, Dann P, Trathan P, Groscolas R, Smith S (2013) Interspecific variations
in the gastrointestinal microbiota in penguins. Microbiologyopen. 2:195-204.
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selective medium to detect Helicobacter pylori associated with other enteric bacteria in seawater
and marine molluscs. Lett Appl Microbiol 45:213-218.
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disease in Antarctic seabirds and seals. Polar Record 47:56-66.
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of Antarctica environmental state. Sci Total Environ 362:259-265.
P2.2
Aislado
2012P2.2-CP1
2012P2.2-CP2
2012P2.2-CP4
2012P4.1-CP1
2012P4.1-CP2
Cultivo
ASC
ASC
ASC
MH
MH
Identificacin
Bioqumica
Vitek 2
(% probabilidad)
Yersinia
enterocolitica (99%)
Yersinia
enterocolitica (99%)
Yersinia
enterocolitica (99%)
Sphingomonas
paucimobilis (88%)
Organismo no
identificado
2012P4.1-CP4
MH
Staphylococcus
haemolyticus (99%)
2012P4.1-CP5
MH
Staphylococcus
haemolyticus (99%)
2012P4.1-CP6
MH
Staphylococcus
epidermis (97%)
P5.2
2012P5.2-CP3
MH
Acinobacter iwoffii
(99%)
MH
Haemophilus
parainfluenza (93%)
EPVM1
2013EPVM1CP3
2013EPVM1CP4
ASC
Neisseria elongata
(96%)
P4.1
Identificacin
Molecular
16S ARNr
(% Similitud pb/pb)
Yersinia kristensenii
(100%) (CP008955)
Yersinia kristensenii
(99%) (CP008955)
Yersinia kristensenii
(99%) (CP008955)
Bacillus sp. (99%)
(AB680191)
Micrococcus luteus
(99%) (KF993667)
Staphylococcus
epidermidis (99%)
(CP009046)
Staphylococcus
epidermidis (100%)
(CP009046)
Staphylococcus
epidermidis (99%)
(CP009046)
Deinococcus
proteolyticus (95%)
(NR_074320)
Parapedobacter
indicus (97%)
(KJ101506)
Moraxella sp. (99%)
(KF030234)
Taxn
Consenso
Yersinia sp.
Yersinia sp.
Yersinia sp.
Staphylococcus
sp.
Staphylococcus
sp.
Staphylococcus
epidermidis
Fraunhofer Chile Research Foundation, Center For Systems Biotechnology, Santiago, Chile.
posibilidad de que represente una bacteriocina tipo cola de fagos, clsicamente descritas en
P. aeruginosa.
Para dilucidar la dualidad de funcin asociada a este clster de genes, se procedi a realizar
un anlisis de similitud de clusters utilizando el software de visualizacin ACT (Artemis).
Dicho anlisis permiti determinar que pese a que los genes que componen el clster se
corresponden en funcin a los genes incluidos en el clster de la piocina R de P.
aeruginosa PAO1, la similitud de secuencias aminoacdicas es casi inexistente y tambin es
escaza respecto a la nica piocina descrita en una Pseudomonas no-aeruginosa (P.
fluorescens SF4c) (Figura 1), sta ltima duplicando en tamao al clster identificado en la
cepa antrtica.
Por lo anterior, se procedi a comparar el clster de KG01 con clster identificados en otras
Pseudomonas spp. previamente identificados como secuencias de profagos/bacteriocinasproblables y en este caso se determin una alta homologa de clster con bacteriocinas
probables identificadas en el genoma de la cepa P. fluorescens A506 y P. fluorescens
SW25, las que comparten genes de regulacin, lisis y envoltura con la cepa de estudio, no
obstante en cuanto a genes estructurales KG01 se asemeja mayormente a la secuencia de
A506 y en cuanto a genes de cola de fago a la secuencia de SW25. En lo que respecta al
gen de la fibra de la cola, cuyo producto es quien otorga la especificidad a la bacteriocina,
este no se asemeja al de ninguna bacteriocina/profago descrita anteriormente, lo que
dificulta la inferencia respecto a la(s) especies/cepas target de esta hipottica bacteriocina.
Cabe destacar que el clster biosinttico en KG01 es el ms reducido entre los identificados
en Pseudomonas a la fecha, lo que lo hace interesante como building-blocks en futuras
aplicaciones biotecnolgicas.
Respecto a los genes de regulacin del clster de KG01, se identificaron 2 genes con alta
similitud a aquellos previamente descritos en bacteriocinas tipo cola de fagos (prtR y recA)
de P. aeruginosa, sin embargo, al igual que en la bacteriocina descrita funcionalmente en la
cepa SF4c, no se identifica un gen con homologa a prtN, un regulador positivo de la
produccin de bacteriocina, y prtR se transcribe en la misma direccin que el resto de los
genes del clster, a diferencia de lo evidenciado en P. aeruginosa.
Finalmente, para evaluar la funcionalidad del clster, se procedi a inducir cultivos en fase
exponencial de la cepa KG01 con agentes promotores de la respuesta SOS, con demostrado
efecto en la expresin de genes de bacteriocinas en numerosas especies de bacterias
bacteriocinognicas. A las 4 horas post-induccin con mitomicina C, se observa un brusco
descenso en la densidad ptica y viabilidad del cultivo, alcanzando una lisis casi total a las
8 horas post-induccin. Para determinar si la lisis del cultivo se explica por la produccin
de bacteriocinas, se realiz un anlisis de expresin relativa de los transcritos de dos genes
estructurales del clster y se observ a travs de microscopa electrnica de transmisin los
sobrenadantes libre de clulas de los cultivos inducidos, previo a un proceso de
concentracin por ultracentrifugacin. Respecto a los transcritos de genes estructurales,
ambos aumentaron ms de 25 veces en clulas inducidas respecto a la situacin control de
no-induccin y todos los sobrenadantes de cultivos inducidos presentaron partculas tipo
cola de fagos, semejantes a las piocinas descritas en P. aeruginosa, no obstante, al evaluar
su actividad antimicrobiana contra una batera de Pseudomonas que incluyen cepas de P.
aeruginosa, cepas antrticas de P. fluorescens y cepas tipo de especies tales como P.
extremaustralis, P. veronii y P. putida, no se observaron halos de inhibicin, por lo tanto,
resta por dilucidar si la estructura tipo bacteriocina observada es efectivamente funcional o
bien carece de algn componente importante para generar su accin antimicrobiana.
Segn nuestro conocimiento, este es el primer estudio que aborda la caracterizacin
gentica y funcional de una bacteriocina en una bacteria antrtica, y ms an en una cepa
de Pseudomonas antrtica. Si bien restan anlisis para dilucidar la funcionalidad de dicha
bacteriocina, esta tiene caractersticas que la incorporan en un subgrupo dentro del cual no
se ha descrito ningn representante funcional, por lo tanto los futuros hallazgos de esta
investigacin permitirn mejorar/ratificar la anotacin de numerosas secuencias en
Pseudomonas que han sido anotadas automticamente como profagos y que pueden estar
guardando informacin biotecnolgica relevante respecto a posibles antimicrobianos de
gran especificidad de accin.
Agradecimientos. Investigacin financiada a travs del proyecto INACH DT_02-13. MSP
es financiada adicionalmente por CONICYT Chile.
Fischer S, Godino A, Quesada J.M., Cordero P, Jofr E, Moril G. & Espinosa-Urguel M. 2012.
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RESUMEN
El continente antrtico cuenta con escenarios diversos que definen las caractersticas de los
diferentes ecosistemas terrestres y marinos. Es as que los marcados cambios estacionales
generan cambios en el agua superficial y en la distribucin y disponibilidad de nutrientes,
debido al deshielo (Garca et al., 2002), sin embargo se debe tener en cuenta que no todos
los veranos presentan las mismas condiciones. En los ltimos 50 aos, la pennsula
Antrtica ha experimentado los ms rpidos cambios climticos del continente Antrtico
(Turner et al., 2005).
A lo largo del continente antrtico se encuentran cambios en su bordes costeros, como
producto de los cambios estacionales, es as que en verano, en lugares como el estrecho de
Gerlache sus aguas se conectan al sur con el mar de Bellingshausen por una elevacin de
350 m de profundidad (Garca et al., 2002) y al norte, con el estrecho de Bransfield por un
canal de 400 m lo que facilita la circulacin es baroclnica (Sangr et al., 2011),. Por otro
lado, en bahas, las corrientes son dbiles y la circulacin es de tipo rotatoria (eddy) (Zhou
et al., 2002). Se ha descrito que el tiempo de residencia en el estrecho esta entre 70 a 90
das, sin embargo, en zonas donde no hay remolinos (eddies) el tiempo de permanencia es
menor, con 7 a 12 das (Niiler y Illeman, 1990).
Basados en la heterogeneidad del estrecho de Gerlache, donde gradientes fsicos
determinan la variacin espacial de sus organismos (forma, distribucin de la biomasa,
grupo taxonmico o funcional, coexistencia o segregacin, etc), los ecosistemas pueden ser
divididos fsicamente en dos regiones estratificadas en ambos extremos del estrecho,
separados por una mayor o menor zona de mezcla, formando distintas provincias
hidrogrficas y biogeoqumicas (Treguer y Lacques, 1992; Niiler et al., 1990; Rodrguez et
al., 2012), asociados con diferentes concentraciones de microorganismos, lo cual impacta
directamente en las tasas de productividad de la regin (Lpez, 1993). En las reas de la
regin central y la NE, los perfiles de temperatura sugieren una capa superficial clida y
diluida (Rodrguez et al., 2012).
Debido a su aislamiento geogrfico, la Antrtica brinda excelentes oportunidades para
investigar la diversidad bacteriana, as como el estudio de cambios en los ecosistemas
ocasionados por diferentes alteraciones, que impacten el ecosistema. Domnguez (2008),
ha estudiado el comportamiento de microorganismos en tierra, en la Isla de Rey Jorge, en
una escala de aproximadamente 8 km donde se sabe que las comunidades microbianas
a.
b.
La expedicin se realiz a bordo del buque ARC 20 DE Julio, el cual debi ser adecuado
con una plataforma de maniobra oceanogrfica y un laboratorio de anlisis de muestras, con
los cuales se realiz tanto la recoleccin como el procesamiento de muestras a bordo del
buque. La grilla de muestreo abarc un rea aproximada de 330 kilmetros organizada en
20 estaciones de muestreo (figura 1).
.
Figura 2. Recoleccin de muestras en roseta oceanogrfica en Estrecho de Gerlache. Expedicin Caldas.
Verano austral 2015. Figure 2. Collection of samples using oceanographic rosette in the Gerlache Strait .
Expedition " Caldas" . Austral summer 2015 .
Segn indican Mitchell y Holm-Hansen (1991), la pennsula Antrtica muestra una capa
homognea en toda la capa de mezcla (alcanzando profundidades <20 m), determinado por
la distribucin de la temperatura, la salinidad y la biomasa, lo cual esta correlacionado con
las zonas donde se registraron mayores concentraciones de microorganismos indicadores de
contaminacin fecal, en las profundidades evaluadas (5, 10 20 y 50 m). La presencia de
contaminacin fecal en el estrecho de Gerlache, detectada a travs del presente estudio, se
puede atribuir a la presencia de organismos superiores reportados durante la expedicin
Caldas. El hecho de registrar presencia de concentraciones de Coliformes totales y
Escherichia coli en la zona NE del estrecho puede atribuirse a la influencia de mamferos
marinos en mayor densidad que en otros sectores del estrecho (Hughes, K.A. 2003), los
cuales se encuentran contenidos en la materia fecal suspendida en la columna de agua,
(Hernndez et al., 2007; Clayton et al., 1997; Tin et al., 2008) y que por efecto de la marea
se propaga dentro del estrecho de noreste a sur oeste (segn descripcin de la marea
registrada en series de tiempo obtenidas durante la expedicin Caldas), pudiendo indicar
conexin con posibles desplazamientos dentro del estrecho de Gerlache.
Lo anterior permite considerar, que a pesar de las condiciones extremas de temperatura del
agua, hay presencia de Coliformes Totales y Escherichia coli, aunque las mismas se
encuentran dentro de la normatividad internacional considerando as, que se cumplen los
lineamientos establecidos para la regin en los anexos III y IV del protocolo de proteccin
ambiental de la antrtica.
Se agradece a la Direccin General Martima y a la Armada Nacional de Colombia por el
soporte para la realizacin de la presente investigacin en el marco de la primera
expedicin cientfica de Colombia a la Antrtida, llamada Expedicin Caldas.
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Introduccin.
Las celdas fotovoltaicas de tipo DSSC (o celdas de Grtzel) representan una alternativa a
las convencionales celdas solares de silicio. Se basan en el uso de pigmentos coloreados
como fotosensibilizadores, los cuales cumplen la funcin de captar la energa de la luz solar
en la zona visible del espectro y entregarla al semiconductor nanoestructurado sobre el cual
estn depositados. Son de particular inters las basadas en el uso de pigmentos de origen
natural, debido a los bajos costos asociados a su aprovechamiento y a la abundancia de los
recursos (Grtzel, et al., 1991; Grtzel, 2005; Nazeeruddin, et al., 2011; Calogero, et al.,
2012; Hao, et al., 2011).
En esta propuesta se plantea la extraccin de pigmentos responsables del color rojo en algas
presentes en la Antrtida. En ellas abunda el pigmento ficoeritrina, en gran parte
responsable de su color (MacColl, et al., 1996; Marquardt, et al., 2004) . Este pigmento
posee caractersticas que lo hacen un excelente candidato para su uso en estas celdas. Entre
ellas se encuentran: un mximo de absorbancia en los 550 nm con alta absortividad (del
orden de 105 M-1 . cm-1) y la presencia de grupos carboxilato libres que le permiten anclarse
al semiconductor depositado en el electrodo de trabajo y asegurar el flujo de electrones
producido por la incidencia de la luz solar hacia el mismo (Sepulveda-Ugarte, et al., 2011;
Glazer, et al., 1982.; Der Velde, 1973).
En nuestro Laboratorio de Biomateriales hemos evaluado el uso de un sensibilizador
similar, la ficocianina (proveniente del alga Spirulina platensis), incluso evaluando su
comportamiento en celdas DSSC con promisorios resultados (Enciso, et al., 2013).
El uso de pigmentos accesibles y abundantes en una zona con caractersticas tan
particulares como la Antrtida, podra ofrecer una solucin parcial al tema energtico en la
misma.
Materiales y mtodos.
Las algas fueron recolectadas sobre la costa, en diversos puntos de la Isla Rey Jorge. Se us
etanol al 95 % como solvente de extraccin.
Las medidas espectroscpicas fueron realizadas usando espectrofotmetro UV-vis
SPECORD 200 Plus de Analytik-Jena, en el rango 350-800 nm. La evaluacin
electroqumica de las muestras en solucin se realiz con un equipo porttil de la marca
DROPSENS uStat400 utilizando electrodos descartables de oro serigrafiados. Por otro
lado, la evaluacin de las celdas armadas con los pigmentos obtenidos a partir de las algas
se realiz utilizando un potenciostato CHI-604E.
Las celdas fueron ensambladas usando electrodos conductores transparentes de FTO. Se
us platino como electrodo auxiliar y una solucin de I-/I3- en acetonitrilo como electrolito.
Se evaluaron las celdas en oscuridad y bajo la luz irradiada por un simulador solar de la
marca ABET Technologies, a una radiacin de 1 sun, 1.5 AM.
Resultados.
Durante la pasanta desarrollada en territorio antrtico se procedi a la recoleccin de
muestras. Se recolectaron muestras de algas rojas con las que se armaron y evaluaron
celdas fotovoltaicas: Plocamium Hookeri, Delesseria lancifolia e Iridaea obovata.
Para procesarlas, se trozaron y colocaron en tubos con etanol, lo cual permiti obtener un
extracto para ser analizado por espectroscopia UV-vis y por voltamperometra cclica (VC).
El espectro medido de absorbancia mostr la presencia de ficoeritrina en el extracto, junto a
la presencia de clorofila y de carotenos.
Figura 1- Espectro UV-visible de la solucin en etanol obtenida a partir de la muestra de Delesseria lancifolia.
UV-visible spectra measured of the ethanol solution obtained from Delesseria lancifolia.
Figura 2- Perfil voltamperomtrico para solucin etanlica de pigmentos extrados de Delesseria lancifolia en
electrodo serigrafiado de oro. Velocidad de barrido 0.1 Vs-1.
Voltammetric profile for ethanol solution of the extracted mixture of dyes from Delesseria lancifolia in gold
screen printed electrodes. Potential scan 0.1 Vs-1.
Por ltimo, se armaron celdas sensibilizadas con las mezclas de pigmentos obtenidos de las
algas recolectadas, realizndose los perfiles I-V como se observa en la figura 3 para la celda
armada con Delesseria lancifolia.
Figura 3- Perfil I-V obtenido para la celda armada a partir de la mezcla de pigmentos extrada de Delesseria
lancifolia.
I-V profile obtained for the assembled cell using the mixture of dyes extracted from Delesseria lancifolia.
Todas las celdas muestran bajos valores de eficiencia de conversin, pero dentro de lo
esperable para los valores reportados para celdas armadas con colorantes de origen natural
(Calogero, et al., 2012). Los resultados obtenidos se resumen en la tabla mostrada a
continuacin.
Tabla 1- Valores de eficiencia de conversin energtica obtenidos a partir de los perfiles I-V bajo irradiacin
de 1 sun y 1.5 AM para las celdas armadas a partir de los pigmentos obtenidos de las algas rojas evaluadas.
Energetic conversion efficiency obtained from the I-V profiles under 1 sun irradiation and 1.5 AM for the
assembled cells using the extracted dyes from the evaluated red algae.
Iridaea obovata
Isc = 90 A
Voc = 0.38 V
n = 0.022%
Delesseria lancifolia
Isc = 170 A
Voc = 0.40 V
n = 0.045%
Plocamium Hookeri
Isc = 60 A
Voc = 0.52 V
n = 0.027%
Es importante destacar que las celdas fueron armadas con una solucin que contiene la
mezcla de los pigmentos extrados de las algas, y no utilizando solamente el pigmento que
tiene las mejores caractersticas desde el punto de vista de absortividad y potencial redox.
Discusin y conclusiones.
Los resultados obtenidos muestran que, trabajando con una solucin extrada muy
fcilmente y sin posteriores etapas de purificacin, es posible obtener una celda que
funcione razonablemente. Los extractos de los pigmentos obtenidos con etanol muestran un
espectro de absorbancia y un comportamiento redox adecuado para ser usados en celdas
fotovoltaicas del tipo DSSC, y los resultados medidos de eficiencia confirman este hecho.
Agradecimientos.
PEDECIBA. ANII. IAU. Cap. (Nav.) E. Carrero, al Sdo. 1 C. Arias, Cbo 1 A. Fleitas
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Introduccin
Las lipasas han atrado la atencin debido a su amplia aplicacin en procesos biotecnolgicos ya
que en las condiciones adecuadas son capaces de catalizar reacciones distintas a la de hidrlisis,
como la sntesis de steres y la transesterificacin. Adicionalmente, son capaces de aceptar
sustratos distintos a los naturales, ampliando an ms el espectro de aplicaciones posibles.
El biodiesel es un combustible producido a partir de fuentes renovables, que puede sustituir al
diesel de petrleo. Desde los puntos de vista econmico y ambiental la incorporacin de este
combustible a la matriz energtica nacional genera mltiples beneficios. Actualmente se produce
eficientemente aplicando tcnicas de catlisis homognea, a pesar de esto trae aparejadas algunas
dificultades como ser la necesidad de materia prima refinada y seca, adems de generar un gran
volumen de efluentes contaminantes y la dificultosa recuperacin del glicerol, nico subproducto
comercializable.
Mediante la utilizacin de lipasas es posible lograr una catlisis eficiente, por lo que el desarrollo
de biocatalizadores es una alternativa muy prometedora. El biodiesel producido utilizando este
tipo de preparados cumple con las especificaciones requeridas pero a diferencia del proceso
tradicional permite la utilizacin de grasas y aceites de diversas calidades incluyendo desechos de
la cadena agroindustrial, tanto de la industria frigorfica como oleaginosa, como materia prima.
La posibilidad de usar etanol en lugar de metanol, no solo independiza esta industria de la
petroqumica si no que representa un sinergismo con la produccin de bioetanol que nuestro pas
ha impulsado. Se debe considerar tambin la recuperacin por simple decantacin de glicerol de
alta calidad, lo que valoriza este subproducto facilitando su comercializacin.
La produccin de enzimas a partir del microorganismo silvestre en que fueron identificadas
puede tener inconvenientes asociados con baja productividad o mtodos tediosos y costosos de
purificacin. Las perspectivas de utilizacin industrial de cualquier enzima se ven incrementadas
mediante el diseo de protocolos que aumenten sustancialmente su produccin y faciliten su
purificacin. El desarrollo de sistemas de expresin en diversos hospederos ha aportado una
solucin a estos problemas, pudiendo obtenerse as la enzima aislada con alto rendimiento tras un
solo paso de purificacin.
En el marco de trabajos anteriores se aislaron microorganismos con actividad lipoltica a partir
de muestras de la Antrtida, uno de los cuales, identificado como Janibacter sp, mostr potencial
en la sntesis de biodiesel en ensayos preliminares, por lo cual fue elegido para este proyecto.
El objetivo de este trabajo fue el clonado, expresin y purificacin de una lipasa de Janibacter
R02 aislada de suelos de la Antrtida.
Mtodos, Resultados y Discusin. A partir del genoma depositado de Janibacter sp. cepa
HTCC2649 se realizaron estudios de homologa con bases de datos de protenas y se
identificaron zonas altamente conservadas para cada familia de lipasas. Esto permiti disear
oligonucletidos que hibridaran con el genoma en dichas zonas para llevar a cabo la estrategia
planteada en la Figura 1. Se trabaj con varios juegos de primers, en diferentes condiciones, no
obstante los fragmentos secuenciados no mostraron identidad con ninguna lipasa. Se continu
explorando las secuencias de lipasas de Janibacter depositadas en bases de datos, y se identific,
a partir del genoma depositado de Janibacter hoylei, una lipasa hipottica (WP 0079273809)
diferente a las existentes en Janibacter sp. strain HTCC2649. En base a esta secuencia y estudios
de homologa, se disearon dos nuevos oligonucletidos dirigidos a la zona conservada. Se logr
amplificar y secuenciar una secuencia de 200 bp, que permiti seguir adelante con la estrategia
planteada y obtener la secuencia para todo el gen de la protena denominada LipJ2. Asimismo,
utilizando primers dirigidos a los extremos de este gen, se logr amplificar un fragmento de 1300
bp que muestra muy alta identidad con la secuencia depositada
Figura1.
Estrategia
diseada para identificar
genes que codificaran para
lipasas a partir del genoma
de Janibacter.
Esta estrategia permiti
identificar
el
gen
codificante para la lipasa de
Janibacter. Se disearon
primers que permitieron la
amplificacin del gen que
codifica para LipJ2 con
sitios de restriccin para su
clonado en los vectores pET
22b+, para E. coli y
pPINK-HC, para Pichia.
Se construyeron varias cepas recombinantes en base a los dos vectores pUC19-LipJ2 y pET22bLipJ2. Se transformaron E. coli Top10, E. coli BL21(DE3) y rosetta. Con las cepas construidas
se ensayaron diferentes condiciones de induccin (Tabla 1).
Las mejores condiciones de produccin de la protena se obtuvieron con la cepa E. coli
BL21(DE3) pET 22B-LipJ2 (denominada ACI 84B), a 20 C, 150 rpm, expresada como cuerpos
de inclusin. En la Figura 2 se muestra una PAGE SDS (12,5%) de la produccin de la LipJ2
expresada en los cuerpos de inclusin a diferentes tiempos de induccin. Se observa que a las 5
hs de induccin se obtuvo una alta produccin de la protena deseada siendo la nica presente en
el cultivo.
Tabla 1. Diferentes cepas y condiciones de induccin ensayadas para la produccin del LipJ2 en
E. coli.
Cepa
Vector
E. coli Top10
pUC19-LipJ2
pET 22b-LipJ2
E. coli rosetta
E. coli rosetta-gami
E. coli shuffle
pET 22b-LipJ2
pET 22b-LipJ2
pET 22b-LipJ2
T
(C)
20
28
37
42
20
28
37
42
20
20
20
Produccin de protena
Soluble
Insoluble
Muy poca
Muy poca
Muy poca
+++
+++
++
+
+++
+++
estabilidad trmica alta (por encima del 80% de actividad residual durante 24 hs a 40C), si bien
son necesarios mas estudios para confirmarlo.
Conclusin y Perspectivas.
Se logr identificar el gen que codifica para una lipasa extracelular LipJ2 en una cepa de Janibacter
aislada por nuestro grupo de trabajo a partir de muestras de suelo de la Antrtida.
Esto permiti la produccin heterloga de la enzima en una cepa de E.coli. con buena produccin
pero expresada como cuerpos de inclusin. Se logr un protocolo de solubilizacin y
renaturalizacin de la protena que permiti obtenerla en forma pura y activa.
Se comenz la caracterizacin enzimolgica de la misma.
Se estn desarrollando otros caminos alternativos para la produccin heterloga de la protena
utilizando otros sistemas de expresin, en Pseudomonas y Pichia, donde se espera que la
protena se exprese en forma soluble facilitando su purificacin.
Agradecimientos: AECID PCI A2/035635/11, CSIC I+D 811, PEDECIBA Qumica, ANII
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Resumen
Los ensambles microbianos representan la suma de mltiples capacidades metablicas para
adaptarse a las condiciones ambientales que los rodean y para responder al cambio ambiental.
Entre ellos, los tapetes microbianos han sido reconocidos como conjuntos de alta diversidad
biolgica. En el presente trabajo se utiliz secuenciacin masiva de nueva generacin (Illumina
MiSeq) para estudiar la estructura procarionte de los tapetes microbianos antrticos asociados a
corrientes de deshielo. Se realiz tambin una caracterizacin del ambiente fisicoqumico que
circundaba a estas comunidades. A partir de la diversidad procarionte encontrada, se relacion el
potencial metablico reconocido para diversos rdenes bacterianos y arqueanos con su diversidad
gentica.
La asignacin taxonmica mostr la dominancia de grupos incluyendo a Proteobacteria
(principalmente Beta y Gammaproteobacteria), Bacteroidetes, Firmicutes y Cianobacteria, en la
estructura de los tapetes microbianos estudiados. En un balance global, los rdenes bacterianos
predominantes fueron Burkholderiales, Sphingobacteriales y Clostridiales seguidos de
Bacteroidales, Flavobacteriales, Rhodobacterales y Sphingomonadales.
La distribucin de algunos gneros bacterianos (entre los 12 ms dominantes) determin
significativamente la estructura de los diferentes ensambles y con ello, su distancia filogentica.
Estos gneros bacterianos han sido caracterizados como participantes relevantes en la
degradacin de polisacridos (e.g. Clostridium, Luteolibacter), as como de compuestos
aromticos y contaminantes orgnicos (e.g. Polaromonas, Rhodobacter, Hydrogenophaga,
Janthinobacterium, Gemmatimonadetes).
Entre las caractersticas ambientales estudiadas, la concentracin de nitratos y silicatos en el agua
que circundaba a los tapetes microbianos se relacion significativamente con las diferencias
filogenticas entre ensambles.
Este estudio refuerza la evidencia sobre el potencial de los microorganismos polares para
degradar biomolculas complejas y por ello, subraya el inters del estudio de los metabolismos
procariontes para su posible incorporacin en estrategias de manejo y restauracin de sistemas
impactados por la actividad humana.
1
Introduccin
Los microorganismos juegan un papel fundamental en las principales transformaciones
biogeoqumicas de los sistemas naturales, en particular, los procariontes. Si bien es conocida su
capacidad para degradar una amplia variedad de molculas orgnicas, an queda por reconocer la
diversidad de los organismos relacionados con dichas transformaciones, la estructura de los
ensambles microbianos de los que forman parte y su funcin en los mismos.
Entre los ensambles microbianos que se desarrollan en las aguas naturales, los tapetes
microbianos representan un modelo til para explorar estas preguntas, ya que en unos cuantos
milmetros se puede encontrar una amplia diversidad estructural asociada generalmente a una
vasta diversidad funcional. Debido a que los ensambles microbianos (p. ej. tapetes microbianos)
presentan una estructura comunitaria compleja y particular, resulta de gran relevancia identificar
los factores ambientales que determinan su estructura y su funcin en el tiempo.
As, el objetivo de este trabajo es el estudio de la comunidades procariontes de tapetes
microbianos polares y de las variables ambientales que determinan su estructura.
Materiales y mtodos
La presencia de corrientes de deshielo y de tapetes microbianos durante el verano austral
determinaron los sitios de colecta en la Isla del Rey Jorge, Pennsula de Fildes, Antrtida
martima. Estos sitios estn sealados en la Figura 1 y corresponden a un gradiente de cercana al
prominente Glaciar Bellinghausen.
En cada uno de estos sitios se colect una muestra por quintuplicado de tapetes microbianos
(aproximadamente 5 g en total para cada sitio), la cual fue manipulada con material estril y
conservada a -20C hasta su anlisis posterior.
Se realiz tambin una caracterizacin del agua circundante de los tapetes microbianos
colectados, para ello se consideraron parmetros como: temperatura, pH, oxgeno disuelto,
conductividad (se utiliz una sonda multiparamtrica Yellow Springs; YSI). A partir de muestras
de agua previamente filtradas por membranas de nitrocelulosa (Millipore 0.44 y 0.22 nm) se
determinaron nutrientes: fsforo reactivo soluble (PRS), amonio, nitrato, nitrito, nitrgeno
inorgnico disuelto (NID), slice reactivo soluble (SiRS); adems de nitrgeno y fsforo totales
(NT y PT). Estas muestras fueron colectadas en recipientes de polipropileno previamente
lavados, posteriormente fueron congeladas hasta su anlisis. Los nutrientes fueron determinados
2
en un autoanalizador de flujo segmentado (Skalar San Plus) con los mtodos estndar adaptados
por Grashoff et al. (1983) siguiendo los circuitos propuestos por Kirkwood (1994).
Para el anlisis de NT y PT de las muestras de agua, se colectaron 10 ml sin filtrar y fueron
mantenidas en congelacin hasta su anlisis segn el mtodo de Valderrama (1981).
Se realizaron extracciones de ADN total de los tapetes microbianos segn el protocolo de
Zhou et al. (1996), con limpiezas posteriores de fenol: cloroformo: alcohol isoamilco (25:24:1;
ver Centeno et al., 2012). Mediante PCR se amplific para cada tapete la regin hipervariable V4
del gen 16S rRNA (Caporaso et al. 2012) y estos amplicones fueron secuenciados a travs de la
plataforma de secuenciacin masiva Illumina MiSeq. Los amplicones (3 por muestra) fueron
purificados con el sistema de separacin magntico SPRI (Beckman Coulter, Brea, CA, USA).
Las secuencias obtenidas fueron filtradas en QIIME (Caporaso et al. 2012; Bokulich et al.
2013) y fueron agrupadas en unidades taxonmicas operacionales (OTUs) a partir de su similitud
(97%). La asignacin taxonmica de los OTUs fue realizada en la plataforma QIIME utilizando
las bases de datos del Ribosomal Data Project (RDP) y Greengenes Database 13_5. Las
comunidades fueron estandarizadas mediante rarefaccin a un mximo de 37,000 secuencias y
para comparar la estructura comunitaria de los tapetes microbianos estudiados (16S ARNr) se
utilizaron matrices de distancia estimadas por UniFrac. Se utiliz la plataforma QIIME para
realizar los anlisis de diversidad y , as como de componentes principales con los parmetros
ambientales y con la abundancia y distribucin de los gneros bacterianos dominantes, en los
cuales se utilizaron los paquetes Vegan y Biodiversity de R.
Resultados
En un balance global, los rdenes bacterianos predominantes fueron Burkholderiales,
Sphingobacteriales y Clostridiales seguidos de Bacteroidales, Flavobacteriales, Rhodobacterales
y Sphingomonadales.
Los tapetes microbianos colectados se agruparon en cuatro grupos, en base a su estructura
filogentica (UPGMA, Mtodo BrayCurtis). Se distinguieron y agruparon con mayor claridad los
tapetes con mayor cercana al glaciar y los tapetes con cercana al aeropuerto Frei (primer y
segundo grupos de izquierda a derecha; Figura 2). Los descriptores ambientales temperatura, pH,
conductividad, oxgeno disuelto, la concentracin de fsforo reactivo soluble, amonio o nitritos
no mostraron una relacin significativa con la distancia filogentica entre ensambles. En cambio,
la cercana al glaciar y algunas caractersticas del agua circundante como la concentracin de
nitrato y de slice reactivo disuelto mostraron una relacin estadsticamente significativa con la
separacin entre los grupos.
los tapetes
Rey Jorge
los nombres
su sitio de
Discusin
La estructura procarionte particular de cada tapete reflej en general, mostr una relacin muy
estrecha con la distribucin de los grupos ms frecuentes en los tapetes estudiados. Con base en
la frecuencia de OTUs, los grupos dominantes fueron Proteobacteria (principalmente Beta y
Gammaproteobacteria), seguido por Bacteroidetes, Firmicutes y Cianobacteria.
Ha sido documentado el potencial metablico y en algunos casos el metabolismo
funcional (mediante protemica o transcriptmica) de algunos de los gneros bacterianos ms
representados en los tapetes antrticos de la Isla del Rey Jorge. Entre los 13 gneros ms
representados, algunos han sido caracterizados como participantes relevantes en la biosntesis
(Nannocystis; Bode et al. 2003) y en la degradacin de polisacridos (Clostridium, Luteolibacter,
Xia et al. 2014). La actividad de al menos 7 de ellos, ha sido relacionada con la degradacin de
compuestos aromticos y contaminantes orgnicos: Polaromonas (dicloroeteno y compuestos
xenobiticos; Mattes et al. 2008), Rhodobacter (p-nitrofenol; Roldn 1988), Hydrogenophaga
(bifenoles policlorados; Lambo y Patel 2006), Janthinobacterium (polivinil alcohol; Du et al.
2007), Geobacter (fenol, benzaldehdo, benzoato; Lovley y Lonergan 1990), Gemmatimonadetes
(clorociclohexano o clorobenceno; Sun et al. 2015) y de la oxidacin de cidos grasos saturados,
Syntrophomonas (butirato; Schmidt et al. 2013).
Conclusiones
Los resultados resaltan la vasta diversidad funcional de los microorganismos polares para lidiar
con condiciones extremas adems de la baja temperatura, como la presencia fuentes de carbono
recalcitrantes. Igualmente, indica que existen cambios significativos en la estructura comunitaria
asociada a un efecto antrpico.
Agradecimientos
4
INTRODUCCIN
A lo largo de la evolucin de la vida en nuestro planeta, el enorme poder adaptativo de los
organismos hizo posible que variadas formas de vida hayan podido sobrevivir, crecer y desarrollarse
en condiciones ambientales verdaderamente extremas, dando lugar a lo que hoy denominamos
organismos extremfilos (Islas y col. 2007).
Entre los diferentes grupos de extremfilos, los microorganismos adaptados al fro pueden
incluso desarrollarse a 0C y son clasificados como psicrfilos o psicrotolerantes (Robinson y col.
2001) segn sus temperaturas ptimas de crecimiento. Estos microorganismos adaptaron sus
procesos celulares vitales para prosperar en ambientes con temperaturas cercanas al punto de
congelamiento del agua (D'Amico y col. 2006) y, por lo tanto, participan de manera significativa en
el reciclaje de nutrientes y la mineralizacin de la materia orgnica en los ecosistemas de clima fro
extremo. Estas capacidades metablicas las realizan a travs de una clase especial de enzimas
extracelulares denominadas genricamente "enzimas fras" (Gerday y col. 2000). Debido a que estas
enzimas tienen una alta eficiencia cataltica a temperaturas inferiores a 20C estos microorganismos
son candidatos muy atractivos para su aplicacin en procesos industriales que requieren actividades
enzimticas a bajas temperaturas. Entre ellas se incluyen amilasas, proteasas y lipasas, que se utilizan
ampliamente en las industrias de alimentos, biocombustibles y detergentes (Margesin y Feller, 2010).
Debido a la dificultad de acceso a los sitios de aislamiento, muchos microorganismos
extremfilos son an desconocidos o han sido muy poco estudiados. Los microorganismos
extremfilos ms estudiados son las bacterias, mientras que los hongos y levaduras, lo han sido en
una menor proporcin (Margesin y col. 2011). Los miembros del reino Fungi representan un grupo
muy diverso, que se estima est compuesto por ms de 1,5 millones de especies (Hawksworth, 2001)
y, si consideramos los ambientes extremos, constituyen uno de los principales ejemplos de
organismos cuyo potencial biotecnolgico ha sido apenas estudiado. Segn Robinson (2001), los
mecanismos de adaptacin de hongos filamentosos y levaduras a las condiciones polares incluyen,
adems de enzimas especializadas, la produccin de molculas crioprotectoras (polioles, azcares y
protenas anticongelantes) y fotoprotectoras (carotenoides y melaninas).
La Antrtida representa el sitio con el clima fro ms extremo del planeta. Por ello, es el sitio
ms adecuado para la bioprospeccin de microorganismos psicrfilos con potencial biotecnolgico.
Por todo lo mencionado, el objetivo de este trabajo es el estudio de la capacidad productora de
exoenzimas y exopolisacridos de levaduras previamente aisladas e identificadas a partir de
diferentes ambientes antrticos.
MATERIALES Y MTODOS
A partir de 48 levaduras aisladas durante la Campaa Antrtica de Verano 2011-2012 y
previamente identificadas por tcnicas moleculares (Rovati y col. 2013) se evaluaron diferentes
actividades enzimticas utilizando tcnicas semi-cuantitativas. Todas las enzimas se evaluaron en
medio slido, a 15C, luego de 5 das de cultivo. La actividades Amilasa, celulasa y xilanasa se
evaluaron en medio YM (Yeast Morfology Medium) 1/10 preparado sin glucosa y adicionado con
almidn (0,2%), carboximetilcelulosa (0,5%) o xilano (0,5%), respectivamente, segn Carrasco y
col. (2012). Las actividades amilasa y xilanasa se detectaron mediante tincin con solucin de
Iodo/Ioduro, mientras que la actividad celulasa se detect mediante tincin con Rojo Fenol-NaOH.
Lipasas y proteasas se evaluaron en medio YM 1/10 adicionado con aceite de oliva (2% v/v) y
rodamina B (en el caso de la actividad lipasa) y con leche descremada en polvo (1%) para la
actividad proteasa. Para detectar lipasas, las placas fueron expuestas a radiacin UV y aquellas
colonias que presentaran fluorescencia naranja se consideraron positivas. Para detectar proteasa, se
evalu la formacin de halos translcidos alrededor de las colonias (Gopinath y col. 2005, Rovati y
col. 2010). La actividad esterasa se ensay segn Slifkin y col. (2000), en un medio adicionado con
Tween 80. Se consideraron positivas para esterasa aquellas colonias que presentaron un precipitado
blanco alrededor de las colonias. La actividad pectinasa se evalu segn Buzzini y Martini (2002), en
medio YNB adicionado con pectina al 0,5%. Luego del crecimiento de las colonias, se agreg a la
placa Bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB) al 1%; aquellas colonias que presentaron halos claros
alrededor, se consideraron positivas para la produccin de pectinasas.
La produccin de exopoliscaridos (EPS) se realiz segn Pavlova y col. (2009), utilizando
un medio de cultivo lquido con elevada relacin C/N. Las condiciones de cultivo fueron 15C y 250
rpm. Tras 5 das de incubacin, se separaron las clulas del sobrenadante por centrifugacin. Al final
del cultivo se determin la biomasa por peso seco, la produccin de EPS por precipitacin con etanol
absoluto, el rendimiento (gramos de EPS producidos por gramo de biomasa) y la productividad
(gramo de EPS producido por litro por hora).
RESULTADOS Y DISCUSIN
De las 48 levaduras evaluadas, 22 (45% de las cepas) presentaron al menos una de las
actividades enzimticas ensayadas, (Tabla 1). Entre las cepas de levaduras que presentaron alguna
actividad, 8 presentaron actividad amilasa, 5 actividad celulasa, 8 actividad lipasa, 16 actividad
esterasa, 6 actividad proteasa, 3 actividad esterasa y finalmente una sola cepa, Debariomyces
hansenii, present actividad pectinasa. En base a estos resultados, la actividad enzimtica ms comn
en los aislamientos fue esterasa, seguida de lipasa y amilasa, mientras que la actividad menos
frecuente fue pectinasa. Cabe destacar que la mayora de las levaduras present una (7 cepas), dos (7
cepas) o tres (6 cepas) actividades simultneamente. Solo dos aislamientos, Debariomyces hansenii y
Rhodotorula sp. presentaron cuatro de las siete actividades enzimticas ensayadas.
Las actividades enzimticas detectadas son consistentes con lo reportado anteriormente en
otras levaduras psicrfilas aisladas de Antrtida, representadas principalmente por especies de los
gneros Rhodotorula y Criptococcus (Buzzini y Martini, 2002). Sin embargo, esta es la primera vez
que se reporta actividad amilasa en R. creatinivora, R. glutinis y R. laryngis y actividad esterasa en
C. gilvencens y R. pallida.
celulasa
2
1
2
2
2
-
lipasa
1
1
1
1
2
2
1
1
-
esterasa
1
5
6
2
4
3
3
2
4
3
4
1
6
2
2
2
-
proteasa
2
3
2
1
3
6
-
pectinasa
6
-
xilanasa
1
1
1
Biomasa
g/L
3,53
9,54
2,40
3,50
6,52
2,68
2,86
3,52
4,10
4,86
5,14
3,68
6,92
7,04
2,06
EPS
g/L
2,80
3,40
1,43
1,85
2,73
1,40
1,60
1,68
1,57
4,58
2,75
1,65
3,47
3,90
1,60
Rendimiento
g EPS/g biomasa
0,79
0,36
0,59
0,53
0,42
0,52
0,56
0,48
0,38
0,94
0,54
0,45
0,50
0,55
0,78
Productividad
g EPS/h
0,02
0,02
0,01
0,01
0,02
0,01
0,01
0,01
0,01
0,03
0,02
0,01
0,02
0,03
0,01
del promedio general de las cepas evaluadas (1,4g/L y 0,34 g EPS/g biomasa) se observan en la Tabla 2.
Se destacan las cepas Cryptococcus sp., R. glutinis y Exophiala sp., con valores de rendimiento
superiores a 0.78 g EPS/g biomasa. Se estudiar en mayor profundidad a todas las cepas productoras
presentadas en la tabla 2 y se caracterizar el EPS de la cepa con mayor capacidad productiva.
CONCLUSIONES
Todas las actividades de enzimas extracelulares analizadas en este trabajo son potencialmente
tiles para la industria: amilasa en la elaboracin de alimentos, la fermentacin y la industria
farmacutica; celulasa y pectinasa en procesos textiles, biocombustibles y procesamiento y
clarificacin de jugos de frutas; esterasa en las industrias agroalimentarias; lipasa y proteasa en la
industria alimenticia y el procesamiento de bebidas, formulacin de detergentes y biorremediacin, y
xilanasa como una agente de hidrlisis en industrias de los biocombustibles y solventes. A su vez, los
EPS son se suma utilidad en la industria alimenticia y petrolera. Adems, en los ltimos aos el uso
de estos compuestos en biorremediacin y su estudio como potenciales agentes antitumorales,
antioxidantes y/o prebiticos, ha tomado mucha relevancia. Es por esto que el estudio de los EPS
producidos por levaduras antrticas es particularmente relevante para el desarrollo futuro de
herramientas biotecnolgicas.
REFERENCIAS
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38, 46264628.
Introduccin
En los ltimos aos ha habido un incremento importante de la resistencia bacteriana a los
antibiticos, lo que ha sido atribuido al intensivo y, a veces, inadecuado uso de estos
compuestos, para tratar o prevenir infecciones en humanos y animales. Por esta razn, la
prevalencia de bacterias resistentes a los antibiticos en un determinado ambiente est
directamente relacionada con la actividad antropognica del sector. En lugares prstinos
como Antrtica, donde la actividad humana es escasa, se encuentra baja resistencia a los
antibiticos en bacterias endmicas. Un lugar interesante para el estudio de la influencia
humana en este continente es Pennsula Fildes, ya que posee la mayor densidad de
asentamientos humanos de toda la Antrtica. En este trabajo, se determin la presencia de
genes de resistencia a antibiticos e integrones en cepas de E. coli productoras de lactamasas de espectro extendido (BLEE), aisladas de muestras de agua de mar de
Pennsula Fildes, Isla Rey Jorge, Antrtica.
Materiales y mtodos
Durante las Expediciones Cientficas a la Antrtica 2013 (ECA 49) y 2014 (ECA 50), se
colect muestras de agua de mar en distintos sitios de Pennsula Fildes. Las muestras
fueron sembradas en placas de agar cromognico (ChromoCult Coliform Agar ES,
Alemania) desde donde se seleccion e identific mediante pruebas bioqumicas
convencionales, 132 cepas de E. coli. A estas cepas se les determin los perfiles de
resistencia a antibiticos, segn recomendaciones de CLSI (2012a). Se incluy
representantes de antibiticos: -lactmicos, aminoglicsidos, quinolonas, tetraciclinas,
fenicoles, sulfonamidas y trimetoprim. La cepa E. coli ATCC 25922 fue utilizada como
control y los resultados fueron interpretados segn el CLSI (2014). Las cepas con un
dimetro de halo de inhibicin de cefotaxima 27 mm y/o ceftazidima 22 mm, fueron
investigadas para la produccin de BLEE, utilizando el test de sinergia de doble disco
segn CLSI (2012b). Se determin la relacin gentica de las cepas de E. coli BLEE+
mediante macrorrestriccin del genoma bacteriano con XbaI y posterior electroforesis de
campo pulsado (PFGE), segn el protocolo del Instituto de Salud Pblica de Chile (ISP,
Figura 1. Dendograma y secuenciotipo de las cepas de E. coli BLEE+ aisladas desde muestras de agua de mar
de Pennsula Fildes, Isla Rey Jorge, Antrtica. Recuadro negro destaca el nico clster de cepas con relacin
gentica y la lnea negra representa el punto de corte para determinar relacin gentica entre las cepas.
Figure 1. Dendogram and MLST of BLEE+ E.coli strains isolated from seawater samples collected in Fildes
Peninsula, King George Island, Antarctica. The only cluster of genetic related strains is highlighted in a
black box and the black line represents the genetic relatedness cutoff.
Tabla 1. Perfiles y determinantes de resistencia a antibiticos en cepas de E. coli BLEE+ aisladas de muestras
de agua de mar de Pennsula Fildes, Isla Rey Jorge, Antrtica.
Table 1. Antibiotic resistance profile and antibiotic resistance determinants of BLEE+ E.coli strains isolated
from seawater samples collected in Fildes Peninsula, King George Island, Antarctica.
Cepa
CH-15-5
CH1
Perfil de resistencia
AMP CEP CXM CTX CAZ FEP TET NAL
AMP CEP CXM CTX FEP STR TET NAL CIP SUL
Genes de resistencia
blaCTX-M-55 y blaTEM-1
blaCTX-M-14/17 y aac(6)-IIb
blaCTX-M-14/17, dfrA12, orfF y
CHO-3
AMP CEP CXM CTX FEP STR TET NAL CIP SUL TMP
aadA2.
AMP CEP CXM CTX FEP STR GEN TET NAL CIP SUL blaCTX-M-14/17, blaTEM-1 y aac(3)-IIa.
CHMO
TMP
blaCTX-M-14/17, blaTEM-1, dfrA17,
CHO-1*
AMP CEP CXM CTX STR GEN KAN TET NAL CIP
aadA5, aac(3)-IIa, aac(6)-Ib y
CH2*
SUL TMP CLO
aac(6)-IIb.
blaCTX-M-14/17, blaTEM-1, dfrA17,
AMP CEP CXM CTX STR GEN KAN TET NAL CIP
CH+15-B*
aadA5, aac(3)-IIa, aac(6)-Ib,
SUL TMP CLO
aac(6)-IIb y qnrS.
*Cepas relacionadas genticamente.*Genetically related strains; AMP: ampicilina/ampicillin; CEP:
cefalotina/cephalothin; CXM: cefuroxima/cefuroxime; CTX:cefotaxima/cefotaxime; CAZ:
ceftazidima/ceftazidime;
FEP:
cefepima/cefepime;
STR:
estreptomicina/streptomycin;
GEN:
gentamicina/gentamicin; KAN: kanamicina/kanamycin; TET: tetraciclina/tetracycline; NAL: cido
nalidxico/nalidixic acid; CIP: ciprofloxacina/ciprofloxacin; SUL: sulfonamida/sulfonamide; TMP:
trimetoprim/trimethoprim; CLO: cloranfenicol/chloramphenicol.
Finalmente, se determin que las cepas CHO-1, CHO-3, CH2 y CH+15-B portan integrn
clase 1 con una zona 3CS clsica, constituida por sul1 y qacE1. En la zona variable de
los integrones de las cepas CHO-1, CH2 y CH+15-B (genticamente relacionadas), se
identific el cassette dfrA17, que otorga resistencia a TMP y aadA5, que otorga resistencia
a STR y espectinomicina; y en la cepa CHO-3, los cassettes dfrA12, responsable de la
resistencia a TMP; orfF, con funcin desconocida y aadA2, que otorga resistencia a STR y
espectinomicina. Ninguna de las cepas de E. coli estudiadas present los genes intI2,
aac(6)-Ib-cr, qepA, qnrA, qnrB, qnrC, qnrD, aac(3)-IV, ant(2)-Ia, ant(3)-Ia, blaSHV, ni
blaCTX-M de los grupos 2, 8 y 25.
Conclusiones
Las cepas de E. coli BLEE+ aisladas de muestras de agua en Pennsula Fildes presentan
extensos perfiles de resistencia y genes que codifican mecanismos de resistencia a C3G,
aminoglicsidos y quinolonas. Este es el primer reporte de cepas de E. coli portadoras de
blaCTX-M-55 y blaCTX-M-14/17 en el territorio antrtico. Tanto la distribucin de los conteos de
coliformes (datos no mostrado) como los anlisis genticos realizados, indican que la
presencia de estos microorganismos podra deberse a la actividad humana en la zona.
Resulta interesante considerar en futuros estudios, la capacidad de transferencia de los
genes encontrados, debido a que stos podran considerarse una fuente de contaminacin al
genoma endgeno de la Antrtica.
Agradecimientos
Esta investigacin fue financiada por los proyectos INACH RT_06-12 y MA_01-12.
Referencias
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Laboratorio de Micologa, Facultad de Ciencias, Universidad de la Repblica, Calle Igu 4225, 11400
Montevideo, Uruguay.
2
Departamento de Bioingeniera, Inst. Ing. Qumica, Facultad de Ingeniera, Universidad de la Repblica,
Calle Julio H. y Reissig 565, 11300 Montevideo, Uruguay.
3
Laboratorio Tecnolgico del Uruguay, Calle Av. Italia 6201, 11500 Montevideo, Uruguay.
INTRODUCCIN
Los cidos grasos poliinsaturados (PUFAs) son esenciales para el ser humano y por
tanto se adquieren a partir de la dieta. Estos tienen funciones reguladoras y
estructurales, desempeando un rol importante en muchos aspectos de la salud como un
correcto desarrollo visual y neurolgico, una disminucin de enfermedades
cardiovasculares, respuestas inflamatorias, entre otras (Wu et al., 2015). La principal
fuente de lpidos ricos en PUFAs son aceites de pescado, sin embargo este recurso no es
suficiente para abastecer la demanda mundial actual (Gong et al., 2014). Muchos
microorganismos, como bacterias, levaduras y hongos filamentosos, tienen la capacidad
de acumular cidos grasos poliinsaturados, volvindolos interesantes como fuente
alternativa de produccin. Estos microorganismos tienen la ventaja de tener altas tasas
de crecimiento, un alto contenido lipdico y producir un perfil de cidos grasos simple,
lo que favorece su purificacin (Li et al., 2015). Algunas levaduras y hongos
filamentosos tienen la capacidad de producir y acumular altos niveles de triglicridos,
alcanzando incluso a tener un 70% u 80% de su peso en forma de aceites (Sakuradani et
al., 2013). Tambin tienen la ventaja de proporcionar cidos grasos diferentes a los
provenientes de aceites de semillas y de pescado y no poseen mal gusto. Adems los
hongos son capaces de crecer en diversos medios de cultivo de bajo costo. En particular
algunas especies pertenecientes al gnero Mortierella han sido consideradas de inters
industrial por su capacidad de producir lpidos ricos en omega 6 como el cido linolnico (GLA C18: 3 n- 6) y el cido araquidnico (ARA, C20: 4 n- 6)
(Vongsangnak et al., 2013). Tanto la composicin del medio de cultivo como las
condiciones de crecimiento de Mortierella sp. afectan a la produccin de PUFAs. Por
ejemplo en el estudio de Peng et al., 2010 sobre produccin de ARA por M. alpina
encontraron que la temperatura afect al crecimiento de Mortierella y a la produccin
de ARA, obteniendo una mayor concentracin de ARA a temperaturas bajas pero un
menor crecimiento celular.
El objetivo del presente trabajo fue seleccionar especies del gnero Mortierella capaces
de crecer a bajas temperaturas y determinar las mejores condiciones de produccin de
cidos grasos poliinsaturados.
MATERIALES Y MTODOS
Se determinaron los perfiles de produccin de cidos grasos de tres aislamientos de
Mortierella (1C1, 2C2, 2D5) provenientes de muestras de suelo de la Antrtida. Los
cultivos se hicieron en medio lquido (glucosa 3%, extracto de levadura 1%) y se
incubaron a 15C. A los 10 das de incubados se colect el micelio de cada uno de los
cultivos por filtracin y se le realiz una disrupcin mecnica en mortero. Se realiz la
extraccin de cidos grasos con metanol-cloroformo y la metilacin directa con
trifluoruro de boro. El perfil de cidos grasos se determin en el Servicio de
10C
10C
15C
20C
20C
pH 5,5
pH 6,5
pH 6,0
pH 5,5
pH 6,5
c. linoleico
3.40
8.23
5.90
3.18
5.40
c. araquidnico
3.29
17.54
10.85
3.48
9.15
c. eicosapentaenoico
0.51
1.68
0.74
0.27
0.23
Fuente de carbono
El consumo de fructosa fue mayor al de glucosa (10,0 y 7,6 g /L respectivamente).
En el medio con maltosa no se observ consumo de esta fuente de carbono. La biomasa
obtenida en el medio con fructosa fue similar a la obtenida en el medio con glucosa. En
el medio con maltosa fue en el que se obtuvo menor biomasa. La mayor cantidad de
ARA se obtuvo con glucosa, el contenido de LA fue mayor con fructosa y el contenido
de EPA fue similar en todos los tratamientos (Tabla 2). En base a estos resultados se
seleccion la glucosa como fuente de carbono para los siguientes ensayos.
Tabla 2. Rendimiento de los cidos grasos poliinsaturados con distintas fuentes de carbono
Rendimiento
(mg/g
biomasa)
Ac. Graso
Glucosa Maltosa Fructosa
c. linoleico
15,46
2,29
25,99
c. araquidnico
33,31
9,81
29,69
c. eicosapentaenoico
2,44
2,70
1,68
Los valores son promedio de tres rplicas
Fuente de nitrgeno
En los medios con triptona y extracto de levadura fue donde se obtuvo mayor biomasa
(3.3 y 2.7 g/L respectivamente). Mientras que la menor cantidad de biomasa se obtuvo
con sulfato de amonio como fuente de nitrgeno. Sin embargo, con sulfato de amonio se
obtuvieron los mayores rendimientos de cido linoleico y de cido eicosapentanoico. La
cantidad de cido araquidnico fue similar en los medios con peptona y sulfato de
amonio (Tabla 3). Se escogi al sulfato de amonio como fuente de nitrgeno.
Tabla 3. Rendimiento de los cidos grasos poliinsaturados con distintas fuentes de nitrgeno
Ac. Graso
Rendimiento (mg/gbiomasa)
Peptona Triptona Ext. levadura Sulf. amonio
c. linoleico
22,02
11,19
6,16
29,15
c. araquidnico
26,54
13,03
17,07
23,24
c. eicosapentaenoico
0,82
1,83
1,28
2,3
Los valores son promedio de tres rplicas
12
C18: 2cis (n-6) 13.17 10.68 14.17 3.88 11.71 10.78 9.19 3.39 9.65 6.76 13.60 12.07
12.57 13.61 14.92 6.17 10.59 14.02 10.37 4.09 11.61 8.67 13.52 13.83
C20: 4 (n-6)
C20: 5 (n-3)
g/L
2.43 1.77 2.88 0.90 2.24 1.17 2.38 0.69 2.65 1.41 1.64 2.29
1. 41 1.47 1.73 1.18 1.45 1.83 2.03 1.11 1.36 1.27 1.27 1.26
1: 15 g/L glucosa, 3 g/L NH4SO4, 0.25 g/L Mg SO4; 2: 45 g/L glucosa, 3 g/L NH4SO4, 0.25 g/L Mg SO4;
3: 15 g/L glucosa, 9 g/L NH4SO4, 0.25 g/L Mg SO4; 4: 45 g/L glucosa, 9 g/LNH4SO4, 0.25 g/L Mg SO4;
5: 15 g/L glucosa, 3 g/L NH4SO4, 0.75 g/L Mg SO4; 6: 45 g/L glucosa, 3 g/LNH4SO4, 0.75 g/L Mg SO4;
7: 15 g/L glucosa, 9 g/L NH4SO4, 0.75 g/L Mg SO4; 8: 45 g/L glucosa , 9 g/LNH4SO4, 0.75 g/L Mg SO4;
9, 10, 11, 12: 30 g/L glucosa, 6 g/L NH4SO4, 0.5 g/L Mg SO4.
CONCLUSIONES
La cepa de Mortierella estudiada produjo una mayor cantidad de LA, ARA y EPA en un
medio de cultivo con glucosa como fuente de carbono y sulfato de amonio como fuente
de nitrgeno a 10C y a pH 6,5.
Las condiciones que favorecen el crecimiento no necesariamente favorecen la
produccin de cidos grasos.
AGRADECIMIENTOS
A la Agencia Nacional de Investigaciones e Innovacin (ANII) y al Instituto Antrtico
Uruguayo (IAU).
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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INTRODUCCIN
El continente Antrtico, debido a sus condiciones ambientales especficas, es uno de los
hbitats menos poblados de la tierra. Sin embargo, el ambiente marino antrtico es muy
productivo y est habitado por organismos procariotas y eucariotas adaptados al fro que
poseen caractersticas que les permiten sobrevivir en agua de mar a temperaturas
permanentemente bajas, cercanas a -1.8C (Davis 2011).
Para ser metabolicamente activos en tales condiciones, los microorganismos adaptados
al fro deben ajustar sus enzimas y sus membranas. En cuanto a sus membranas el
cambio ms comn observado es el incremento de los cidos grasos mono y
poliinsaturados en su composicin (Gentile et al. 2003), a mayor cantidad de cidos
grasos poliinsaturados (PUFAs) ms flexible y dinmica se vuelve la membrana. Esta
cualidad de los organismos que all habitan (psicrfilos y psicrotolerantes), hace que los
mismos sean potenciales fuentes alternativas de cidos grasos poliinsaturados del tipo
-3 y -6.
Los cidos grasos poliinsaturados del tipo -3 y -6 son esenciales para el ser humano.
Actualmente muchos suplementos derivados de aceites de pescado y de krill son
utilizados en productos alimenticios, nutracuticos y teraputicos (Russell & Nichols,
1999). Sin embargo, los peces y el krill, principales fuente de estos cidos, en la
actualidad presentan una reduccin poblacional mundialmente reconocida, y pueden
contener elevados niveles de metales pesados y contaminantes orgnicos como PCBs y
dioxinas, en el caso de los peces. Por esta razn se buscan fuentes alternativas para su
produccin, por ejemplo mediante fitoplancton, microalgas, algas marinas, bacterias,
levaduras y microorganismos transgnicos.
Se han identificado varios gneros de levaduras en diversos habitas marinos del planeta,
incluidos los de la Antrtida: Bullera, Candida, Cryptococcus, Cystofilobasidium,
Debaryomyces, Kondoa, Leucosporidium, Metschnikowia, Mrakia, Pseudozyma,
Rhodotorula, Sakaguchia, Sporopachydermia, Sympodiomyces y Trichosporon
(Satyanarayana, 2009). Todas estas especies se han aislado de muestras de agua,
sedimento, algas, animales u otra materia orgnica presente en los habitas marinos
antrticos. En el presente trabajo se identifican 13 cepas de levaduras aisladas de agua
de mar de las costas de la Isla Rey Jorge y se evala la capacidad de 5 de las cepas de
producir cidos grasos esenciales.
MATERIALES Y MTODOS
Las 13 cepas en estudio proceden de algas marinas de las costas del Mar de Drake y de
la Baha Maxwell (Isla Rey Jorge).
La identificacin de las cepas se realiz por secuenciacin de la regin del ADNr 18S e
ITS. La amplificacin del ADN fue realizada por PCR con los primers NS1- NS8 e
ITS1 - ITS4 (White et al.1990). La secuenciacin fue realizada por Macrogen Inc. Las
secuencias obtenidas fueron comparadas con secuencias nucleotdicas similares
almacenadas en GeneBank mediante el algoritmo BLAST (Altschul et al., 1997).
Los cultivos a diferentes temperaturas y pHs, se realizaron en matraces (de 250mL con
70mL de medio de cultivo) en caldo YM y 10g/L de sales marinas. En los ensayos con
diferentes fuentes de carbono el medio const de 15g/L de glucosa o maltosa o fructosa,
3g/L de extracto de levadura y 10g/L de sales marinas. Se midi la produccin de
biomasa y el perfil de cidos grasos de la misma. Se calcul la tasa especfica mxima
de crecimiento (max) y se evaluaron los datos con un anlisis de varianza con
comparacin de medias, utilizndose el software InfoStat (Di Rienzo et al., 2014).
Para la determinacin del perfil de cidos grasos, se utiliz una modificacin del
mtodo de extraccin de lpidos de Bligh y Dyer (1959), posterior transesterificacin
(saponificacin del material graso con NaOH en metanol, a 100C bajo atmsfera de
nitrgeno y BF3 en metanol al 14% como catalizador). Los steres de cidos grasos se
extrajeron con hexano y se determin su composicin utilizando un GC-MS.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Identificacin filogentica
De la comparacin de secuencias de la regin 18S del ADNr e ITS, los 13 aislados
antrticos perteneceran al menos a 4 gneros diferentes. Se utiliz la regin 18S a
modo de identificacin primaria y la regin ITS a modo de verificacin. Se gener un
rbol filogentico para cada segmento secuenciado a partir de las secuencias NS1 y NS8
de la regin 18S e ITS4 de la regin ITS del ADNr que permiti verificar los
alineamientos y la relacin entre las especies aisladas. En cada uno de ellos se puede
observar que el modelo resuelve claramente 2 grandes grupos que representan
ascomicetes y basidiomicetes. Dentro de cada grupo, se observaron 2 clados
representando los gneros Metschnikowia y Debaryomyces en los ascomicetes, y los
gneros Cryptococcus (en algunos casos en conjunto con Bullera y Hanaella) y
Rhodotorula para los basidiomicetes. Las cepas T1, T3, T5, T10, T11 y T12 pertenecen
al gnero Metschnikowia y en particular la cepa T5 corresponde a Metschnikowia
australis. Para la cepa T2 la secuencia de la regin 18S forma un clado con los gneros
Hannaella, Bullera y Cryptococcus. Esto tiene sentido, si se considera que todava al da
de hoy, se sigue intentando caracterizar y diferenciar molecularmente estos gneros
(Wang & Bai, 2008). Situacin similar sucede con la cepa T4, que forma un clado con
los gneros Cryptococcus y Bullera tanto para las regiones 18S e ITS. Las cepas T6 y
T7 forman un clado con la especie Debaryomyces hansenii. En ambos casos con
similitud de secuencias igual o mayor a 98% en 18S e ITS. La cepa T9 correspondi al
genero Rodhotorula con 97% de identidad en la regin 18S, y 99% para ITS. Por
ltimo, las cepas T13 y T14 forman un clado con los gneros Cryptococcus y
Filobasidium. En general se sabe que estos gneros presentan similitudes en las
regiones del ADN r, tambin que la secuenciacin con la regin ITS separa estas 2 especies
(Fell et al., 2000). Y en nuestro caso se correspondieron con la especie Cryptococcus magnus
con un 99% de identidad. En las cepas que no fue posible la identificacin a nivel de
especie ser necesario analizar otras regiones del genoma para determinar a cual
corresponden.
Determinacin del perfil de cidos grasos
A 5 cepas pertenecientes a diferentes gneros (T4, T5, T7, T9 y T14) se les determin el
perfil de cidos grasos, tabla 1.
Tabla 1. Perfil de cidos grasos de las cepas, cultivadas a 15 C, obtenido por GC-MS.
tiempo de
retencin
(min)
Compuesto
LRI
LRI
FAME
Mix
%
rea
T4
%
rea
T5
%
rea
T7
%
rea
T9
%
rea
T14
4,49
1808
1807
NP
0,20
NP
NP
NP
6,78
2008
2008
0,31
0,57
0,92
1,14
0,50
7,20
2043
2049
NP
0,16
NP
NP
NP
8,06
2112
2112
NP
0,26
0,32
0,85
0,33
9,36
2214
2215
21,74
21,17
20,85
12,04
13,83
9,72
2244
2244
0,90
7,71
3,18
2,20
1,10
10,64
2317
2318
0,27
0,12
0,28
0,33
0,94
10,92
metil-10-Z-heptadecenoico (17:1)
2343
2343
0,17
1,83
0,58
2,42
2,27
11,90
2417
2418
2,77
0,71
2,29
0,43
1,77
12,21
2440
2441
53,17
29,5
55,57
59,25
67,51
12,29
2447
2441
0,20
0,16
0,42
0,14
NP
12,88
2491
2492
18,83
27,7
11,16
18,24
10,1
13,94
2556
2556
NP
5,97
3,22
1,64
0,33
15,57
metil-11-Z-eicosenoato (20:1)
2654
2654
NP
NP
NP
0,38
0,25
Bsicamente son 3 los cidos grasos mayoritarios que componen estas cepas siendo el
cido oleico es el que se encuentra en mayor proporcin en todas las cepas. El cido
palmtico y el cido linolico C18:2 (-6), son los otros dos cidos grasos mayoritarios
y sus porcentajes varan segn la especie. Tambin se detect cido linolnico C18:3
(-3 o -6) en T5, T7, T9 y T14, siendo en T5 en donde se encuentra en mayor
proporcin alcanzando un 6% del total de cidos grasos determinados. Ninguna de las
cepas present acmulos o vesculas lipdicas. Metschnikowia australis (cepa T5) fue la
que present los ms altos valores de cidos grasos esenciales: cido linolico 28% y
cido linolnico 6%.
Determinacin de las condiciones de cultivo de Metschnikowia australis (T5): pH,
temperatura y fuentes de carbono.
Con la levadura T5 seleccionada por su alto contenido en cidos grasos esenciales, tabla
1, se realizaron estudios preliminares para evaluar su potencial como fuente alternativa
de cido linoleico y cido linolnico. Las temperaturas ensayadas fueron 10, 15, 20 y
25C y los pHs 5,5; 6 y 6,5. La temperatura ptima de crecimiento fue de 25C, max
0,13 h-1, sin embargo la baja de la temperatura de cultivo determin un aumento en el
contenido de cidos grasos esenciales, llegando a tener el 59% de sus cidos grasos
como cido linoleico y linolnico cuando se la cultiv a 10C, tabla 2.
La velocidad mxima de crecimiento fue muy similar en el rango de pH estudiado 0,120,13 h-1, y no se observaron diferencias significativas en la produccin final de biomasa
a las 49hs de crecimiento, tampoco en el consumo de glucosa, pero a pH 5,5 la
concentracin de los cidos grasos de inters fue mayor.
La produccin final, a las 52 horas de cultivo es mayor en los cultivos con glucosa y
fructosa (14,4 g/L y 15,2 g/L) y menor con maltosa (12,4 g/L). En cuanto a la
produccin de cido linoleico y linolnico, no se observaron diferencias significativas
entre los distintos tratamientos, 1,89-2,17 y 0,39-0,56 mg/g de biomasa seca
respectivamente.
25C
0,2
0,2
19,0
1,9
0,1
0,7
1,1
4,4
44,6
22,6
0,4
4,9
Temperatura
20C
15C
0,3
0,3
0,2
0,1
17,6
18,2
2,4
2,6
0,3
0,3
0,4
0,3
0,7
0,6
4,0
3,9
28,9
27,3
38,2
38,5
0,5
0,5
6,4
7,3
10C
0,3
0,0
13,3
1,4
0,2
0,0
0,0
2,7
22,0
35,0
1,5
23,7
CONCLUSIONES
Once de los aislados marinos antrticos pertenecen a los gneros: Metschnikowia,
Debaryomyces, Rhodotorula y Cryptococcus. Dos de los aislados no se pudieron
identificar a nivel de gnero, pudiendo pertenecer a Cryptococcus, Bullera o Hanaella.
Cinco cepas pudieron identificarse a nivel de especie: T5 Metschnikowia australis , T6
y T7 Debaryomyces hansenii, T13 y T14 Cryptococcus magnus.
Tres son los cidos grasos mayoritarios en las cepas: cido oleico, palmtico y linolico.
Todas las cepas contenan cidos grasos esenciales, el cido linoleico (-6) y/o cido
linolnico (-3), siendo T5 la cepa que los contena en mayores proporciones.
En Metschnikowia australis (T5), una disminucin en la temperatura de cultivo
determin un aumento en la proporcin de sus cidos grasos esenciales, llegando a un
60% cuando se la cultiv a 10C.
AGRADECIMIENTOS
Al Quim. Lic. M. Minteguiaga, al IAU, a la ANII.
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1. INTRODUCCIN
Microalgas hetertrofas pertenecientes al grupo Labyrinthulomycetes, familia Thraustochytriaceae presentan un
potencial biotecnolgico focalizado en la produccin de acidos grasos poliinsaturados (AGPIs) especficamente
DHA (Gupta et al 2012). Estos se encuentran en estuarios y hbitats marinos, sobre diversas superficies (algas,
detritus marino, fitoplancton, columna de agua ocenica, en los sedimentos del mar), degradando la materia
orgnica disuelta (Raghukumar 2002). La familia Thraustochytriaceae (thraustochytridos), comprende los
gneros Aplanochytrium, Ulkenia, Thraustochytrium, Japonochytrium, Aurantiochytrium (also known as
Schizochytrium), Botryochytrium, Parietichytrium, y Sicyoidochytrium (Honda et al. 1999). Morfolgicamente
se caracterizan por ser clulas globosas aisladas o aglomeradas con redes ectoplasmticas inmviles, con un
ciclo de vida que incluye esporas biflageladas, esporangios y clulas vegetativas (Leander et al. 2004). Estos
microorganismos se han descrito en diferentes sitios geogrficos (India, Indonesia , Japn, Australia,
Sudamrica y en la Antrtica (Lewis et al 1999; Moro et al 2003; Hinzpeter 2009). Sin embargo, en esta ltima
el estudio de la biodiversidad es escaso limitndose a dos especies descritas; Thraustochytrium antarticum
(Barrera de hielo de Ross), Thraustochytrium rossi (Ocano indico) (Bahnweg y Sparrow 1974) y solo una
caracterizada filogenticamente Aplanochytrium stocchinoi (Baha de Terra nova) (Moro et al 2003).
Esta investigacin es un estudio biolgico basado en el aislamiento de thraustochytridos antrticos, a travs de
su identificacin morfolgica y filogentica, proporcionando informacin nueva sobre la biodiversidad de estos
microorganismos en el continente Antrtico.
2. MATERIALES Y MTODOS
2.1. Cultivo e Identificacin morfolgica
Las muestras fueron tomadas en la isla Rey Jorge, zona costera de las bases Eduardo Frei (Chile) y Artigas
(Uruguay). El aislamiento de los microorganismos se llev a cabo mediante la tcnica del polen de pino
(Bremer 2000). Una vez obtenidos los inculos la cepa 34-2 fue cultivada en medio lquido (extracto de
levadura 0.2%, glutamato monosdico 0.2%, glucosa 0.5% y agua de mar artificial al 70%) (Hinzpeter 2009).
Por otro lado, la cepa CH2 fue cultivada en medio agar (extracto de levadura 0.2%, peptona 0.2% y agua de
mar artificial al 70%) (Hinzpeter 2009). Para llevar a cabo los anlisis morfolgicos las muestras se
suspendieron en agua destilada y se centrifugaron a 14000 rpm por 2 minutos, para luego ser teidas con cristal
violeta y observadas al microscopio ptico (Olympus CX21, Tokyo Japn). Las imgenes fueron tomadas
utilizando el programa ISCapture y editadas con ImageJ.
el programa Clustal X2. Finalmente la topologa del rbol filogentico se desarroll mediante el mtodo
Neighborjoining, utilizando el gnero Prorocentrum como grupo distante.
3. RESULTADOS
Figura 2. Morfologa de las cepas antrticas teidas con cristal violeta. A La cepa 34-2 presenta un ciclo de vida constituido por
esporas (flecha), clulas vegetativas (cv) y esporangios con esporas enquistadas (s). B La cepa CH2 tiene un desarrollo constituido por
esporas (flecha), clulas vegetativas (cv) dadas (d) y ttradas (t). Escala de 12 m
Figure 2. Morphology of antarctic strains with crystal violet staining. A The 34-2 shown a life cycle with spores (arrow), vegetative
cells (cv) sporangium with enclosed spores (s). B The CH2 evidence a life cycle with spores (arrow), vegetative cells (cv), dyad (d)
and tetrads (t). Scale bar 12 m
Figura 3. Anlisis molecular basado en el alineamiento de la secuencias del gen 18S ADNr. La topologa muestra la relacin
filogentica de las cepas 34-2 y CH2 (destacado en negrita). Los anlisis se llevaron a cabo mediante el mtodo Neighbor joining.
Figure 3. Molecular analysis base on alignment of the 18S rDNA gene. The topology of tree shown the relationship of the 34-2 and
CH2 strains (in bold). The phylogeny was developed by the Neighbor joining method.
4. DISCUSIN Y CONCLUSIONES
Microorganismos de la familia Thraustochytriaceae (thraustochytridos) han sido estudios a nivel
biotecnolgico, debido a que presentan diversos compuestos bioactivos (Raghukumar 2008). Una de las
biomolculas ms estudiadas son los AGPIs (particularmente los acidos grasos omega 3 y 6), ya que estas
microalgas hetertrofas pueden producir ms del 25% de su peso seco en lpidos de forma regular y mejorar su
rendimiento a travs de la fermentacin (Barrow 2010). La diversidad de estas microalgas hetertrofas en la
antrtica ha sido escasamente descrita o identificada filogenticamente (Bahnweg y Sparrow 1974; Moro et al
2003). De acuerdo a esto, la utilizacin del pino de polen como sustrato lignocelulsico, evidencia que estos
microorganismos pueden ser aislados y seleccionados (Figura 1). El cultivo y posterior observacin bajo
microscopio muestra que las cepas antrticas presentan estructuras morfolgicas caractersticas de los
thraustochytridos (Sparrow 1960; Yokohama et al 2007) (Figura 2). Particularmente, la cepa 34- 2 tiene un ciclo
de vida constituido por esporangios piriformes a ovalados, constituido por un cuerpo proliferativo unido a
esporas enquistadas en divisin (Figura 2A). La cepa CH2 no muestra un esporangio, reproducindose por
divisin binaria formando dadas y ttradas (Figura 2B). En consistencia con esto, se ha descrito que estos
microorganismos pueden diferenciarse por el tamao de los esporangios, la forma y el nmero de esporas
asociadas a cada esporangio (Mo 2001). Sin embargo, se ha descrito que la morfologa es susceptible a las
condiciones de cultivo (Yokohama et al 2007). En consecuencia, los anlisis filogenticos evidencian que la
cepa 34-2 (97% del total de la secuencia del 18S ADNr) presenta un 95% de alinemiento y un 99% de identidad
con la especie Thraustochytrium kinnei (KF709393.1) y la cepa CH2 (73% del total de la secuencia del 18S
ADNr) tiene un 85% de alineamiento y un 97% de identidad con la especie Aurantiochytrium sp. (KF718864.1)
(Figura 1). Las secuencias de los thraustochytridos emparentados con las cepas antrticas fueron aislados en las
costas chilenas, lo cual nos sugiere una posible distribucin dependiente de las corrientes dinmicas del
hemisferio sur por mecanismos de dispersin (hidrocoria), ya que estos pueden vivir o transportarse en
sedimentos, macroalgas senesentes y hojas cadas (Barnes et al. 2006; Raghukumar 2002; Rintoul et al. 2001).
Actualmente no existen registros bibliogrficos de la presencia de estas especies que se hayan aislado en el
continente antrtico y que posteriormente se cultiven en laboratorio. En conclusin, esta investigacin
proporciona nueva informacin sobre la diversidad de estos microorganismos en la Antrtica, adems esta
investigacin permitir enfocar estudios para la estandarizacin del cultivo basada en el gnero y
posteriormente desarrollar anlisis sobre compuestos bioactivos como enzimas y pigmentos, que podran tener
potenciales aplicaciones biotecnolgicas.
5. AGRADECIMIENTOS
Este trabajo est financiado por DIULA 09/14 y por el programa PAI-CONICYT proyecto 79112042
6. BIBLIOGRAFA
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- Laboratorio de Ecologa Microbiana - Instituto de Investigaciones Biolgicas Clemente Estable (IIBCE). 2 Plataforma Verde - IIBCE. 3- Laboratorio de Microbiologa, Facultad de Agronoma - UDELAR.
*nbajsa@iibce.edu.uy
La Antrtida posee uno de los ambientes terrestres ms severos, caracterizado por bajas
temperaturas y falta de agua lquida, que limita la abundancia y actividad de organismos
terrestres. Por las condiciones climticas de la Antrtida, sus ecosistemas son relativamente
simples y con una baja complejidad trfica, con ciclos de nutrientes y descomposicin
dominados por actividades microbianas. A pesar de la baja cantidad de lluvias, en la Pennsula
Antrtica la tasa de precipitacin excede la de evaporacin, por lo que los suelos tienen un alto
contenido de humedad, favorable para el crecimiento microbiano (Teixeira et al., 2010).
Los microorganismos son el componente dominante de la biomasa de los ecosistemas antrticos
(Wynn-Williams, 1996). Sin embargo, la diversidad microbiana presente en suelos antrticos no
ha sido muy estudiada. Se ha encontrado una alta proporcin de los filotipos correspondientes a
bacterias an no cultivadas, indicando la gran cantidad de microorganismos que falta identificar
(Smith et al. 2006). Otros trabajos coinciden en que en los suelos antrticos existen grupos
bacterianos nuevos respecto a otros ecosistemas (Adams et al., 2006; Aislabie et al., 2006; Pearce
et al., 2009). Se han aislado en la Antrtida Streptomyces de zonas de hielo con una edad de
47.000 aos, probablemente debido a la capacidad de estas bacterias de formar estructuras de
resistencia capaces de mantenerse en estado de anaerobiosis por prolongados perodos de tiempo
(Abyzov et al., 1990).
La vegetacin terrestre nativa de la Antrtida martima incluye dos especies de plantas
vasculares: Colobanthus quitensis (clavel antrtico) y Deschampsia antarctica (pasto antrtico).
Dadas las condiciones ambientales adversas, es probable que estas plantas presenten
asociaciones con microorganismos que favorezcan su crecimiento.
El objetivo de este trabajo fue aislar y caracterizar bacterias promotoras del crecimiento vegetal a
partir de rizsfera de clavel y pasto antrticos.
Se colectaron plantas en varios sitios de la Isla Rey Jorge (Archipilago Shetland del Sur) en los
veranos de 2012 y 2013. A partir de races, utilizando medios semiselectivos e incubando a 4C y
25C, se aislaron Pseudomonas fluorescentes (Kings B), actinobacterias (almidn-casena),
bacterias hetertrofas (tripticasa-soja) y hongos filamentosos (agar malta). Actualmente se cuenta
con una coleccin de 1810 aislamientos, obtenidos a partir de las siguientes fuentes: 961 de
pasto, 622 de clavel y 227 de suelo. Los mismos fueron seleccionados a partir de cultivos a 25C
(1101 aislamientos) o 4C (719 aislamientos), en medios semi-selectivos para bacterias
hetertrofas (847), Pseudomonas fluorescentes (803), actinobacterias (146) u hongos (15).
Se analiz fisiolgicamente casi la totalidad de los aislamientos; se evalu su capacidad
celuloltica (carboximetil celulosa), proteoltica (medio con leche descremada), de produccin de
siderforos (CAS), solubilizacin de fosfato (NBRIP), produccin de biosurfactantes (ensayo de
Albanesi, A.1; Martinez, A.2; Vero, S.2; Cavalitto, S.1 y Cavello, I1.
1
INTRODUCCION
Se entiende por bioprospeccin (del griego : vida, y del latn prospecto:
exploracin) al estudio de la naturaleza dedicado al hallazgo de organismos y sustancias
con posibles usos para beneficio del ser humano que pueden tener un valor comercial
significativo en sectores como el industrial, alimentario, cosmtico y farmacutico,
entre otros. Comprende la bsqueda sistemtica, clasificacin e investigacin de nuevas
fuentes de compuestos qumicos, genes, protenas, microorganismos y otros productos
con valor econmico actual o potencial, que forman parte de la biodiversidad. En estos
ltimos aos se ha enfatizado el estudio de microorganismos adaptados al fro, ya que
estos poseen un gran potencial biotecnolgico, ofreciendo ventajas econmicas y
ecolgicas sobre el uso de organismos y enzimas activas a altas temperaturas. Las
enzimas extracelulares adaptadas al fro poseen una alta eficiencia cataltica a bajas
temperaturas, esta propiedad es interesante tanto para el estudio bsico como para su
aplicacin industrial. Hasta el momento el estudio de enzimas psicrfilas en levaduras
es pequeo comparado con los estudios que existen en bacterias. Las pectinasas son
enzimas de gran importancia en la industria alimenticia y representan el 25% de las
ventas globales de enzimas relacionadas con esta industria. Son utilizadas en varios
procesos industriales como la clarificacin de jugos y vinos, para el desgomado y biorefinado de fibras textiles, produccin de papel, tratamiento de madera y tratamiento de
aguas residuales (Jayani et al., 2005).
OBJETIVO
En este marco se plantea como objetivos la bsqueda de levaduras adaptadas al fro
productoras de pectinasas, el estudio de la posibilidad de utilizar residuos ricos en
pectina como materia prima de bajo costo para la obtencin de dichas enzimas y
finalmente su aplicacin en la clarificacin de zumos de fruta.
MATERIALES Y METODOS
Microorganismos - Bioprospeccin de la produccin de pectinasas
A partir de muestras provenientes de la Isla Rey Jorge (expediciones ao 2012 y 2013)
se lograron aislar e identificar un total de 53 levaduras adaptadas al fro. Todas las
levaduras se mantuvieron en PDA. La seleccin de aquellas levaduras capaces de
producir pectinasas extracelulares se realiz utilizando medio agarizado conteniendo
pectina (10 g/l). Luego de 3 das de incubacin a 20C las placas se revelaron con
solucin de lugol. Aquellas levaduras que produjeron un halo de degradacin distintivo
Identificacin
Cryptococcus victoriae
Metschnikowia australis
Guehomyces pullulans
Cryptococcus tephrensis
Candida davisiana
0.5 M
1.0 M
1.5 M
2.0 M
2.5 M
3.0 M
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
-
+
+
-
Figura 4.. a) Clarificacin del jugo de manzana bajo distintos tratamientos enzimticos. b) Resultado final
de la clarificacin luego de 24 hs de reaccin (de izq. a der. Control sin enzima, 2 U/ml,
U/ml 4 U/ml y 6 U/ml
del pool enzimtico).
Figure 4.. a) Apple juice clarification with different enzymatic treatment. b) Apple juice clarification after
24 hs of reaction (Left to right. Control
Con
without enzyme, 2 U/ml, 4 U/ml and 6 U/ml)
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
En el presente trabajo se puso nfasis en la produccin de pectinasas activas a bajas
temperaturas y el potencial uso de cscaras de frutas como materia prima de bajo costo
para la produccin de pectinasas a temperatura ambiente. Esto es comercialmente
importante dado que, al igual que el uso de materias primas ms baratas,
baratas trabajar a
temperatura ambiente reduce significativamente los costoss de produccin.
produccin G. pullulans
mostr crecimiento tanto 5 como a 24C, produciendo pectinasas activas
activa en fro. La
produccin de pectinasas a temperatura ambiente y su uso para la clarificacin de
zumos de fruta a esta temperatura e incluso en fro lo hace atractivo desde el punto
biotecnolgico.
AGRADECIMIENTOS
Al CINDEFI-CONICET,
CONICET, Instituto Antrtico Uruguayo, ANII, Pedeciba.
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protopectinase
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Fundacin cientfica y cultural Biociencia, Jos Domingo Caas 2280, uoa, Santiago de Chile
Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas, Universidad de Chile
Introduccin
La Isla Decepcin es una de las zonas del territorio antrtico que retienen su actividad
geotrmica hasta la actualidad, con suelos cuyas temperaturas oscilan entre los 40C y los
90C. A partir de una muestra obtenida de stos suelos se aisl el Geobacillussp. ID17, un
termfilo aerbico moderadamente halotolerante, que presenta condiciones ptimas de
crecimiento a pH 7,5 y 65C.
Una caracterstica interesante observada en este microorganismo es la presencia una
actividad Lacasadetectable en su extracto crudo intracelular. Las Lacasas son enzimas de la
familia de las multicobre oxidasas que catalizan la oxidacin de compuestos aromticos con
sustituyentes nucleoflicos como fenoles o aminas primarias, y presentan una interesante
amplitud de sustratos la cual parece variar de especie en especie, lo que alimenta la
motivacin de encontrar y caracterizar nuevas enzimas de esta clase. Las lacasas han sido
estudiadas tanto desde el punto de vista de su mecanismo de reaccin, el cual las incluye
dentro de lasoxidoreductasas, como en bsqueda de aplicaciones biotecnolgicas ya que
entre las enzimas oxidativas, el hecho de que el nico co-sustrato es oxgeno, y el residuo
de la reaccin es agua las vuelve un biocatalizador muy ecolgico (Lanteetal., 2000).
En este proyecto se estudian las caractersticas de este Geobacillus con un nfasis en la
presencia de su actividad Lacasa. Llama la atencin la existencia de esta actividad
enzimtica y la localizacin geogrfica del microorganismo. Las Lacasas tradicionalmente
se asocian con la descomposicin de la biomasa vegetal, la que est prcticamente ausente
de la Isla Decepcin,aunque se han reportado Lacasas que participan como elementos de
resistencia a metales en algunas especies bacterianas (Grass y Rensing 2001). Mediante el
ensayo enzimtico de oxidacin de la siringaldazina, un sustrato especfico de las Lacasas
(Harkin y Obst, 1973), se estudi la capacidad de induccin de la enzima en presencia de
cationes metlicos y de polmeros de lignina. Entender la funcin fisiolgica de sta enzima
podra tener implicancias en nuestra comprensin de los mecanismos mediante los cuales
los extremfilos resisten las condiciones ambientales antrticas y se relacionan con su
entorno.
Materiales y Mtodos
Cultivo Bacteriano: Las cepas bacterianas fueron obtenidas de muestras ambientales de isla
Decepcin, Antrtica, durante la Expedicin Chilena-Antrtica ECA 44. El rango de
temperatura de los sitios de muestreo se encontraba entre 75 C y 95 C y pH 6,0.Las
muestras fueron inoculadas en 20 ml de medio marino enriquecido. 22 cepas fueron
aisladas empleando diluciones seriadas en medio lquido y separacin de colonias mediante
estras en medio slido. El asilado ID17, con caractersticas consistentes con el gnero
Geobacillus, fue seleccionado para su posterior caracterizacin. Lo extractos crudos
utilizados para los ensayos fueron obtenidos tras suplementar el medio con Sulfato de
Cobre y otros inductores. Luego de crecer los cultivos bacterianos durante 20 horas a 65C,
la ruptura de las clulas se logr por sonicacin.
Ensayo de actividad Lacasa: La actividad enzimtica se midi incubando el extracto crudo
de ID17 en buffer de fosfato de potasio 100 mM a pH 7,5 a 55C (u otras temperaturas
cuando especificado) por dos minutos, tras los cuales se agreg syringaldazina 0,216 mM y
se observ el curso de la reaccin registrando los cambios de absorbancia a 530 nm por
siete minutos.
Resultados
El Geobacillussp. ID17 presentacondiciones ptimas de crecimiento a pH 7,5 y 65C y es
posible detectar actividad Lacasa en su extracto crudo cuando el medio de crecimiento se
suplementa con Cobre. Esta actividad es estable a 55C y pH 7, condiciones en las cuales
se mide la mayor actividad.
Resumen
Los tapetes microbianos representan una de las principales comunidades microbianas bnticas de
los lagos y de las zonas encharcables de la Antrtida. La fijacin de N 2 es uno de los procesos
mediante los cuales estos tapetes incorporan N2 atmosfrico a la biomasa del sistema, por lo que
los organismos diazotrficos forman una parte esencial de la diversidad funcional del consorcio
microbiano. En el presente trabajo se explor la diversidad gentica bacteriana de cinco tapetes
distribuidos en la Pennsula de Fildes empleando tres marcadores moleculares: 16S ARNr, nifH y
glnA. Los resultados del estudio de diversidad mediante 16S ARNr mostraron que los fila con
mayor abundancia en los tapetes fueron Proteobacteria (44-50%), Planctomycetes (7-17%),
Bacteroidetes (8-12%) y Actinobacteria (6-9%); donde las secuencias afiliadas a Cyanobacteria
(incluyendo cloroplastos) representaron 2.9-9.5%. El marcador nifH detect principalmente
grupos como Proteobacteriaespecialmente Delta proteobacteria; mientras que cuando se
emple glnA exclusivo para cianobacterias, se encontraron de 2 a 10 filotipos por muestra. Estos
resultados sugieren que existe una amplia diversidad de organismos diazotrficos en los tapetes
microbianos antrticos, los cuales deben ser estudiados con varios marcadores para entender su
extensin y papel en la estructura y funcin comunitaria.
Introduccin
Los tapetes microbianos son una de las principales comunidades bnticas de los lagos y de las
zonas encharcables de la Antrtida, y que por su actividad, afectan la dinmica de los nutrientes
de aquellos sitios donde se establecen (McKnight et al. 2004). Estas comunidades microbianas
reflejan una gran diversidad taxonmica y metablica, e intervienen en varios ciclos
biogeoqumicos (Stal 2012). El nitrgeno (N) es uno de los elementos bsicos para la clula, ya
que forma parte de molculas como protenas y cidos nucleicos, por lo que su obtencin y
ciclaje es esencial para la productividad primaria de los ecosistemas (Canfield et al. 2010).
Las bacterias son los nicos organismos capaces de obtener N a partir de la reserva planetaria
ms grande, la atmsfera (ca. 78% de N2). Sin embargo, para lograr que este N se integre a las
biomolculas, es necesario reducirlo a su estado mnimo -III. Biolgicamente, este proceso es
llevado a cabo por la enzima nitrogenasa, un complejo multimrico codificado por varios genes
como nifH, nifD y nifK, donde nifH codifica para la subunidad dinitrogenasa reductasa o
ferroprotena (Fe-protena)(Zani et al. 2000; Gaby y Buckley 2011). Consecuentemente, nifH ha
1
sido por excelencia el marcador molecular para analizar a los organismos diazotrficos en
muestras ambientales mediante tcnicas moleculares (Gaby y Buckley 2011). La capacidad de
fijar N2, es decir de transformar N2 a NH3(-III), est distribuida entre diferentes grupos de
bacterias como Cyanobacteria, Firmicutes, Proteobacteria, y algunas arqueas, entre otros (Zehr et
al. 2003).
Las cianobacterias son uno de los principales productores primarios en los tapetes
microbianos, y son los encargados de fijar CO 2 para producir materia orgnica que puede ser
fermentada o fotorespirada por otros organismos del tapete microbiano, organismos
quimiotrficos como las bacterias sulfato reductoras (Stal 2012). Paralelamente, las
cianobacterias pueden fijar N2, el cual tambin se incorpora a compuestos orgnicos que despus
pueden ser asimilados por otros organismos. Las cianobacterias asimilan el N fijado mediante las
enzimas glutamina sintetasa (GS) y glutamato sintasa (GOGAT), en la ruta GS/GOGAT (Flores
y Herrero 2005). La enzima glutamina sintetasa es codificada por el gen glnA y es un marcador
que puede ser empleado para identificar organismos que asimilan amonio por esta ruta, y
actualmente se han descrito oligonuclotidos especiales para cianobacterias (Gibson et al. 2006).
Pese a que las secuencias 16S ARNr son un excelente marcador molecular para describir la
diversidad gentica de consorcios microbianos complejos, muchas veces son insuficientes en
resolver el potencial gentico de los microorganismos de llevar a cabo ciertos procesos
biogeoqumicos en especfico, en especial aquellos que no se encuentran distribuidos en grupos
bacterianos monofilticos, como lo es la fijacin biolgica de N 2 (Zehr et al. 2003). Por ello, el
presente trabajo explor la diversidad gentica bacteriana de cinco tapetes distribuidos en la
Pennsula Fildes empleando tres marcadores moleculares: 16S ARNr, nifH y glnA. El objetivo
fue caracterizar la diversidad a escala comunitaria y puntualizar sobre el potencial gentico para
fijar N2 e incorporar amonio como mecanismo de formacin de biomasa.
Materiales y Mtodos.
Sitios de muestreo
En este estudio se muestrearon cinco tapetes microbianos distribuidos en la Pennsula Fildes de
la Isla del Rey Jorge en Antrtida Martima (Fig. 1a). Las muestras fueron colectadas durante el
verano austral (Enero 2012) en diferentes corrientes y chorrillos de deshielo. Mayores detalles
sobre la colecta y el transporte de la muestras puede encontrarse en reportes previos (AlcntaraHernndez et al. 2014).
Extraccin de cidos nucleicos y amplificacin
Los cidos nucleicos se extrajeron empleando una lisis enzimtica y qumica modificada para
microbialitos y tapetes microbianos (Centeno et al. 2012). Una vez obtenido el ADN total de
cada tapete microbiano, ste fue empleado como templado en reacciones de PCR para obtener
amplicones de fragmentos del 16S ARNr, y de los genes nifH y glnA (cianobacterial). Los
fragmentos de 16S ARNr se amplificaron bajo un protocolo para ser secuenciados con la
plataforma Illumina MiSeq300(Carrillo-Araujo et al. 2015). Mientras que los fragmentos nifH y
glnA fueron amplificados para ser analizados bajo el protocolo de clonacin-secuenciacin. Para
nifH, se emplearon los oligonucletidos nif1, nif2, nif3 y nif4 bajo un protocolo anidado (Zani et
al. 2000), y para glnA se emplearon los oligonucletidos GLNcdhpCOF:GLNcdhpGOR y
GLNcdhpCIF:GLNcdhpGIR con una metodologa ya establecida (Gibson et al. 2006).
Secuenciacin y anlisis
Figure 1. Microbial mat studies. a. Geographical distribution of the microbial mats sampled in the Fildes Peninsula
(Mat1-5). b. Bacterial composition at phylum level of the microbial mats, the dendrogram shows the relationships
between the mats by composition.
Martinez, A.1, Cavello, I.2, Gonzlez, A.1, Garmendia, G.1, Albores, S.1, Cavalitto, S2 y
Vero, S.1
1
INTRODUCCION
Los microorganismos psicrfilos en los ambientes antrticos y sub-antrticos presentan
estrategias de adaptacin al fro que resultan interesantes por su aplicacin en la
industria biotecnolgica. Dentro de este variado mundo de los microorganismos
extremfilos, los psicrfilos son uno de los grupos que ha centrado ms la atencin de
los investigadores en los ltimos aos. Se clasifican en dos grandes grupos: a)
psicrfilos estrictos u obligados (aquellos que pueden crecer a 0C, presentan una
velocidad de crecimiento ptima a menos de 15C y no pueden crecer a temperaturas
mayores de 20C) y b) psicrfilos facultativos o psicrotolerantes (microorganismos que
pueden crecer a 0C pero que presentan temperaturas ptimas superiores a los 15C). A
diferencia de otros grupos de extremfilos, cuyos integrantes se encuentran confinados
en uno o pocos grupos taxonmicos, los microorganismos psicrfilos pueden
encontrarse dentro de casi todos los taxones microbianos y si bien algunos gneros son
exclusivos de zonas polares otros pertenecen a grupos con una gran representacin en
diversos ambientes, muchos de ellos con temperaturas que estn lejos de las registradas
en los polos (Gounot, 1986, Margesin & Miteva, 2011). Las enzimas extracelulares
adaptadas al fro poseen una alta eficiencia cataltica a bajas temperaturas, esta
propiedad es interesante tanto para el estudio bsico como para su aplicacin industrial.
Uno de los ejemplos ms claros es la utilizacin de proteasas, amilasas y lipasas en la
formulacin de detergentes y jabones que puedan ser eficientes en el lavado sin
necesidad de calentar el agua, lo que tanto a nivel domstico como industrial reducira
significativamente los costos por consumo de energa en los pases de climas templados
y fros. Otras industrias, como la alimenticia, tienen un gran inters en este tipo de
enzimas ya que muchos procesos de preparacin de alimentos se veran beneficiados al
disponer de enzimas activas a bajas temperaturas. Por ejemplo, las proteasas cidas para
la produccin de quesos, las amilasas para la industria de panificacin, etc (Gerday et
al., 2000). Debido a su potencial aplicacin en diferentes sectores biotecnolgicos, los
microorganismos adaptados al fro se han vuelto cada vez ms interesantes.
El objetivo del presente trabajo fue la identificacin de levaduras adaptadas al fro
provenientes de la Isla Rey Jorge y el estudio de la capacidad de las mismas de degradar
fuentes de carbono simples o complejas mediante el anlisis de sus actividades
enzimticas.
MATERIALES Y METODOS
Sitios de muestreo, aislamiento e identificacin de levaduras adaptadas al frio
Todos los sitios de muestreo se encuentran en la isla Rey Jorge (62 58 020S 210 W /
62.033 S 58.35 W). Se recogieron un total de 90 muestras de suelo durante 2
expediciones a la estacin de investigacin cientfica uruguaya (General Artigas). Para
Candida glaebosa
C. sake
C. davisiana
C. zeylanoides
Cystofilobasidium infirmominiatum
Cryptococcus aerius
C. albidosimilis
C. gastricus
C. gilvescens
C. tephrensis
C. victoriae
C. keelungensis
Debaryomyces hansenii
Debaryomyces macquariensis
Guehomyces pullulans
Leucosporidiella fragaria
Leucosporidiella muscorum
Metschnikowia australis
Rhodotorula laryngis
R. minuta
R. mucilaginosa
Sin identificar
Total de Aislamientos
Total de levaduras prod. de enzimas
% total de levaduras prod. de enzimas
6
1
2
1
1
2
1
1
1
1
5
1
9
1
1
3
1
4
8
1
1
16
68
Pr A
Es A (Tween 80)
Am A
Cel A
In A
Pec A
Xil A
1
1
1
1
1
5
1
1
4
1
1
1
1
1
2
6
1
1
3
1
22
5,9
4
32,4
5,9
12
17,6
6
7,4
8,8
DISCUSION Y CONCLUSIONES
number of isolates; Lip: Lipase activity on Trybutirin agar; AmA:
Entre las actividades n:Amylolytic
enzimticas
extracelulares reportadas hasta el momento, el
activity; EsA: Esterasic activity on Tween 80 agar; PrA:
porcentaje de levadurasProteolytic
capaces
dePecA:
producir
activity;
Pectinolyticxilanasas
activity on pH encontrado
7 and pH 5; CelA: en este trabajo (8.8
Cellulolytic activity; Myc:Mycosporine; +: positive; -: negative.
bAll isolates belonging to a species with + result were positive for the
character.
conservado de unin a los nucletidos YGD-intein-TD. Dicha secuencia del intein fue separada y
analizada en forma independiente de la secuencia de la ADN Polimerasa de la cual provino.
Cuando la secuencia del intein fue analizada usando BLASTp los primeros 22 hits fueron de
origen viral y dos de origen en arqueobacterias. Este set de 24 secuencias de las bases de datos
ms relacionadas al intein aqu descripto fue analizado filogenticamente y resulto ser una
distante pero fuertemente sustentada (con una credibilidad bayesiana del clado igual a 100)
secuencia hermana de un grupo de inteins previamente detectado en Iridovirus. A su vez este
grupo que incluyo el intein ANT02_6103 se agrup como un grupo hermano de secuencias de
inteins encontradas previamente en Mimivirus y Phycodnavirus (Figura 1).
Figura 1. Reconstruccin filogentica bayesiana de las secuencias del intein aqu descrito (ANT-6103) y sus
secuencias ms relacionadas publicadas a la fecha en las bases de datos. Los nmeros en los nodos indican la
credibilidad bayesiana del grupo de secuencias expresada en porcentaje.
Figure 1. Bayesian phylogenetic reconstruction of the sequences of the intein here described (ANT-6103) and their
closest relatives published to date in the database. The numbers at the nodes indicate the bayesian credibility clade
expressed as a percentage.
Discusin y Conclusiones
Para nuestro conocimiento, esta es la primera comunicacin cientfica respecto de la deteccin de
inteins en secuencias de ADN polimerasas virales antrticas. La secuencia descrita en este
trabajo result ser filogenticamente distante respecto de todas las secuencias almacenadas a la
fecha en las bases de datos. Tambin podemos concluir que la secuencia descrita aqu tiene la
potencialidad de transferirse horizontalmente a otros genes, dada la presencia de dominios
conservados de endonucleasa. La secuencia de DNA polimerasa a partir de donde se extrajo el
intein descrito analizada separadamente del mismo, mostr mayor identidad con secuencias de
phycodnavirus desconocidos (dato no mostrado) y como ya ha sido descrito, un mismo intein
puede presentarse en diferentes genes e incluso diferentes virus (Nagasaki et al. 2005)(Gogarten
et al. 2002).
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Figura 1. A) Gel de DGGE con un gradiente de 40-65% de urea formamida. B) dendrograma obtenido a partir
del patrn de bandas usando el ndice de similitud de Dice.
La tabla 1 muestra el nmero de bandas presentes en cada muestra, las bandas comunes
entre T1 y T3 as como las observadas en el suelo original (T0).
El patrn correspondiente al sustrato nC13l a los 24 das (T3) mostr la mayor disimilitud
y la menor riqueza. En ese sistema, el patrn no mostr ninguna banda en comn con su
correspondiente de 8 das.
Tabla 1.Valores de riqueza y nmero de bandas de DGGE en comn entre sistemas y con el suelo original.
Riqueza
(nmero
de bandas)
Bandas en
comn
respecto a
suelo
original
T0
T1: 8 das
T3: 24 das
T1: 8 das
T3: 24 das
nC11
16
nC12
16
10
nC13
16
nC14
16
mezcla
16
Conclusiones
Los resultados mostraron que el uso de diferentes hidrocarburos como sustrato en cultivos
de enriquecimiento a partir de un mismo suelo antrtico contaminados con gasoil result en
comunidades bacterianas de diferente estructura. Esta observacin es particularmente
relevante, ya que diferencias de un carbono en el sustrato utilizado, resultan en
comunidades microbianas con similitudes del 80% o menos, incluso a los 8 das de cultivo.
Los patrones de bandas a los 8 y 24 d sugieren que estas comunidades son
multicomponentes y que la hiptesis que afirma que un cultivo de enriquecimiento, luego
de un nmero apropiado de repiques, resulta en una mezcla estable de microorganismos,
debe revisarse, ya que en este estudio, la riqueza de algunas de las comunidades cambi
entre subcultivo e incluso se increment en alguna de ellas entre los 8 y los 24 das de
cultivo (3 repiques).
Futuros estudios se enfocarn en la identificacin y aislamiento de los microorganismos de
estas comunidades bacterianas. El cultivo a gran escala en biorreactores y la aplicacin de
las clulas obtenidas en procesos de bioaumento, podran contribuir a remover la fraccin
de contaminantes remanentes, incrementando de esta manera la eficiencia de los procesos
de biorremediacin de suelos antrticos contaminados con hidrocarburos.
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AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIN DE UNA CEPA DE THRAUSTOCHYTRIUM KINNEI OBTENIDO DE LAS COSTAS DE LA ISLA REY
JORGE, PENINSULA ANTARTICA
(Isolation and characterization of Thraustochytrium kinnei strain obtained from the coast of King George Island, Peninsula Antarctica)
Caamao E.1, Loperena L.3,Hinzpeter I.2, Salom Stuardo1,Felipe Gordillo4 y Gonzlez A.1,3
1 Laboratorio de Microbiologa de Extremfilos, Departamento de Ciencias Biolgicas y Biodiversidad, Universidad de los Lagos,
Chile
2 Departamento de Gobierno y Empresa, Universidad de los Lagos, Chile
3 Instituto de Ingeniera Qumica, Departamento de Bioingeniera, Universidad de la Republica, Uruguay
4 Centro de Biotecnologa de los Recursos Naturales, Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, Universidad Catlica del Maule,
Chile
1. INTRODUCCIN
Microorganismos de la familia Thraustochytriaceae, son microalgas heterotrficas unicelulares ubicuas en
ambientes marinos, manglares y estuarios, que cumplen un rol importante en la etapa inicial de la cadena
alimenticia microbiana, degradando la materia orgnica disuelta en diversos ecosistemas [12]. La clasificacin
taxonmica comprende los gneros; Aplanochytrium, Ulkenia, Thraustochytrium, Japonochytrium,
Aurantiochytrium (conocido tambin como Schizochytrium), Botryochytrium, Parietichytrium y
Sicyoidochytrium[6]. Su distribucin geogrfica incluye el Mar del Norte, India, Indonesia, Japn, Australia,
Sudamrica y la Antrtica [9; 14, 11]. En esta ltima, los estudios de diversidad en thraustochytridos se limitan
a dos especies descritas; Thraustochytrium antarticum (Barrera de hielo de Ross), Thraustochytrium rossi
(Ocano indico) [1] y solo una caracterizada Aplanochytrium stocchinoi (Baha de Terra nova) [11]. Estos
microorganismos han sido estudiados por su morfologa, rol ecolgico y potenciales aplicaciones
biotecnolgicas [5]. Actualmente adquieren un gran inters, debido a su alto contenido de lpidos,
particularmente el cido docosahexaenoico (C22:6, DHA) y el cido eicosapentanoico (C20:5, EPA) [13]. Estas
biomolculas esenciales de la familia -3, participan en procesos fisiolgicos en nios y adultos, adems de
tener un rol preventivo en ciertas patologas [15].
Esta investigacin proporciona un enfoque biolgico y biotecnolgico, mediante estudios de una cepa
perteneciente a la familia Thraustochytriaceae, aislada en las costas de la isla Rey Jorge, Antrtica. Los
objetivos se enfocaron en la clasificacin taxonmica (gen ADNr 18S), los efectos de la temperatura sobre la
biomasa y el contenido total de cidos grasos.
2. MATERIALES Y MTODOS
2.1 Cultivo y anlisis filogentico
Las muestras fueron tomadas en la isla Rey Jorge, zona costera de las bases Eduardo Frei (Chile) y Artigas
(Uruguay). El aislamiento de los microorganismos se llev a cabo mediante la tcnica del polen de pino [3].
Una vez obtenidos los inculos la cepa fue cultivada durante 8 das a 10C y 25C en medio lquido (extracto de
levadura 0.2%, glutamato monosdico 0.2%, glucosa 0.5% y agua de mar artificial al 70%) [7]. Posteriormente
las muestras fueron liofilizadas y almacenadas a -20C, para los ensayos y anlisis posteriores.
La amplificacin del gen 18S ADNr se realiz utilizando los partidores FA1RA1, FA2RA2, FA3RA3 [10]. Una
vez realizada la secuenciacin del gen 18S, se llev a cabo la bsqueda de secuencias homlogas disponibles en
el banco de genes (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov), las cuales fueron alineadas usando el programa Clustal X2.
Finalmente la topologa del rbol filogentico se desarroll mediante el mtodo Neighborjoining, utilizando el
gnero Prorocentrum como grupo distante.
Figura 1. Filogenia de la cepa 34-2 (18S ADNr), con 4 gneros de la familia Thraustochytriaceae.A-B Las imgenes de microscopa
ptica con tincin Oil Red O, muestran la morfologa celular y el ciclo de vida de la cepa antrtica. Escala 12 m
Figure 1. Molecular phylogenetic analysis of the strain 34-2 (18S ADNr), using 4 genera belong to Thraustochytriaceaefamily. The
light microscopy of cells with Oil Red O staining, shown the morphology and life of cycle of the Antarctic strain.Scale bar 12 m
Figura 2. Ensayos de biomasa, cidos grasos -3 y consumo de carbono. A Efectos de la temperatura sobre la biomasa durante 8 das
de cultivo con 25C () y 10C (). B Efecto de la temperatura sobre la biomasa al quinto da de cultivo. C relacin entre el contenido
de cidos grasos -3 (DHA y EPA) y la biomasa al quinto da de cultivo. D Consumo de la fuente de carbono al quinto da de cultivo
Figure 2. Biomass, -3 fatty acids and carbon intake assays.A Temperature effect on biomass during eight day of culture with 25C
() and 10C ().B Temperature effect on biomass at fifth day of culture.C Relationship of DHA and EPA with relation to biomass at
fifth day of culture.D Carbon source consumption at fifth day of culture
Tabla 1.Perfil de cidos grasos de la cepa antrtica a 10C y 25C. Los valores muestran el porcentaje total del contenido de cidos
grasos con 0,5% de glucosa como fuente de carbono.
Table 1. Fatty acid profile of Antarctic strain 34-2. The values are shown as percentage of total fatty acids content with 0.5 % of
carbon source
4. DISCUSIN Y CONCLUSIONES
Los thraustochitridos se han descrito como plataformas biolgicas para la produccin de cidos grasos con
potenciales aplicaciones en el rea de la nutricin humana, animal y biocombustible [5, 2]. La diversidad de
estos microorganismos en la antrtica ha sido escasamente descrita e identificada filogenticamente [1; 11]. De
acuerdo a esto, los anlisis moleculares del gen 18S ADNr evidencian que la cepa aislada pertenece a la especie
Thraustochytrium kinnei con un 99% de identidad, confirmando las caractersticas morfolgicas observadas en
el microscopio ptico (Figura 1). El cultivo durante 8 das, muestra un crecimiento exponencial donde la mayor
biomasa producida fue 2.2 x 103 mg L-1, al quinto da (Figura 2A). Por otro lado, la biomasa mxima a 10C fue
de 0.7 x 103 mg L-1, al sptimo da. Para determinar el potencial de esta cepa en la produccin de cidos grasos
-3, se realizaron ensayos al quinto da para el contenido de DHA, EPA y consumo de carbono (Figura 2 B,C y
D). Estos resultados evidencian que la condicin ms favorable para la produccin de este tipo de lpidos es
glucosa a 10C, debido a que con una menor biomasa (0.5 x 10 3mg L-1) se obtiene la mayor cantidad de DHA y
EPA(29.8 2.1 y 3.3 0.2 mg g-1). Estos valores son consistentes con el perfil completo de cidos grasos
(Tabla 1). Particularmente, el cultivo a 25C evidenci una disminucin de 22.6% en el contenido de DHA y un
aumento en la produccin de casi todos los cidos grasos saturados (8 de un total de 9) y todos los cidos grasos
monoinsaturados. Actualmente estas biomolculas tienen un valor biotecnolgico, ya que la familia -3 acta
en procesos fisiolgicos importantes y pueden prevenir ciertas patologas [15]. Por otro lado los cidos grasos
saturados y monoinsaturados han sido utilizados como materia prima para la produccin de biocombustible [4].
En conclusin, la variacin del perfil de lpidos, evidencia una respuesta biolgica de adaptacin a los cambios
de temperatura, sugiriendo un rol importante del DHA, como fuente de energa. Adems, esta investigacin
proporciona nueva informacin sobre la diversidad antrtica de estos microorganismos, sugiriendo un potencial
biotecnolgico en la produccin de cidos grasos para la industria nutracetica. Por otro parte, estos resultados
permiten focalizar estudios moleculares para determinar los efectos de la temperatura sobre las enzimas
involucradas en la sntesis de cidos grasos omega-3 e investigar sobre otros compuestos bioactivos (enzimas y
pigmentos) que podran actuar a diferentes temperaturas.
5. AGRADECIMIENTOS
Este trabajo est financiado por DIULA 09/14 y por el programa PAI-CONICYT proyecto 79112042
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Introduccin:
El Glaciar Unin est ubicado en la Antrtica Occidental, y en este lugar recientemente (2014)
fue abierta la Estacin Polar Cientfica Conjunta Glaciar Unin a 1080 Km del centro polar. A
la fecha, en esta zona de la Antrtica se han realizado muy pocas investigaciones sobre las
condiciones fsicas, qumicas y biolgicas del ecosistema (Rivera A et al, 2010). A fines del ao
2014 y a partir de la expedicin realizada por el Instituto Antrtico de Chile (INACH) en la cual
particip un grupo de investigadores del laboratorio de Bionanotecnologa y Microbiologa de la
Universidad Andrs Bello, se obtuvo muestras de distintos puntos del Glaciar Unin para
desarrollar estudios de abundancia y biodiversidad microbiana.
A partir de estas muestras se aislaron bacterias hetertrofas en distintos medios de cultivo las
cuales fueron caracterizadas y seleccionadas en base a su potencial aplicacin
Bionanotecnolgica (resistencia a metales, sal, y produccin de H2S a partir de distintas fuentes
de S), principalmente a travs de la produccin de nanopartculas metlicas.
En base a esto, el objetivo del presente estudio es aislar microorganismos que habitan el Glaciar
Unin capaces de biosintetizar nanopartculas semiconductoras fluorescentes de CdS.
Materiales y Mtodos:
Se colectaron muestras de roca, suelo y hielo de 4 puntos del Glaciar Unin (Rossman Cove,
Elephant Head, Charles Peak y Patriot Hills) en la expedicin realizada en el ao 2014. Se
procesaron las muestras mediante siembra en diferentes agares (LB, LB marino, R2A y M9). Se
prob el crecimiento de los aislados a diferentes temperaturas (4C, 10C, 28C y 50C), pH
(rango de 1 a 13) y concentracin de sal (NaCl 8%, 15% y 25%). Se cultivaron los aislados con
Telurito de Potasio, Cloruro de Litio y Cloruro de Cobre, para determinar la Concentracin
Mnima Inhibitoria (MIC) del crecimiento. Adems, se evalu la capacidad de los aislados de
producir H2S en presencia de diferentes fuentes de azufre (Tiosulfato de Sodio, L-Cistena y
Sulfato de Magnesio) mediante revelado de la actividad con papel filtro y acetato de plomo 100
mM.
Introduccin
El aumento en el uso de antibiticos en la clnica, agricultura, acuicultura y ganadera ha sido considerado
como la principal causa de la propagacin de genes de resistencia a los antibiticos (GRA), considerndose
una amenaza al medio ambiente natural, ya que favorecen la seleccin de bacterias resistentes a los
antibiticos (Goni-Urrizay col., 2000; Chee-Sanfordy col., 2001; Cabello, 2006; Hawkey, 2008). Las
bacterias portadoras de GRA pueden ser diseminadas desde su hbitat de origen hacia otros microambientes
como la microbiota intestinal de seres humanos y animales y la microbiota del suelo, pudiendo nuevamente
ser movilizados a travs de extensas distancias por estos vectores biolgicos, e introducidos en hbitats que
se encuentran a miles de kilmetros (Lighthart y Shaffer, 1995; Levy y Marshall, 2004;Gibbsy col.,2006).
La Antrtica es considerada un sitio prstino, debido a la baja intervencin humana, lo que ha permitido que
su ecosistema se mantenga casi invariable en el tiempo; sin embargo, posee una abundante fauna, incluyendo
mamferos marinos y aves migratorias, las que podran actuar como vectores biolgicos, favoreciendo la
entrada de microorganismos forneos a este territorio, especialmente a travs de viajes estacionales de aves
migratorias (Tin, 2009; Grndahl, 2009). Actualmente existen reportes de pinginos y mamferos marinos
con infecciones y colonizaciones producidas por bacterias asociadas a humanos (Aronson, 2011; Leotta y
col., 2006), por lo que dichos animales podran estar participando en la introduccin de bacterias forneas
con GRA en zonas aledaas a sus asentamientos, los que podran ser incorporados en el genoma de bacterias
endmicas.
Por lo anterior, el objetivo de este estudio fue establecer si la presencia de vectores biolgicos, como podran
ser las aves migratorias y mamferos marinos, influye en el perfil de susceptibilidad a los antibiticos y en la
portacin de GRA en bacterias aisladas de suelo Antrtico con y sin influencia animal.
Materiales y mtodos
Este estudio utiliz 9 muestras de suelo colectadas durante la 49 Expedicin Cientfica Antrtica (2013), en
dos zonas que diferan de acuerdo al grado de influencia animal que presentaban. La Zona A correspondi a
zonas remotas de difcil acceso, sin influencia humana o animal permanente y la Zona B a zonas con
influencia de mamferos marinos o lugares de anidacin de aves (Figura 1). Las muestras de suelo fueron
sembradas en agar R2A e incubadas a 4 C por 15 das y 15 C por 7 das. Se seleccion distintos morfotipos
bacterianos y, posteriormente, se realiz tincin de Gram para evaluar la afinidad tintorial y caractersticas
celulares microscpicas. A los aislados Gram (+) se realiz prueba de catalasa y a los Gram () se estudi la
capacidad fermentativa de glucosa y prueba de oxidasa.
Para todos los morfotipos se evalu su perfil de susceptibilidad por medio de difusin en agar R 2A,
utilizando discos de los antibiticos: ampicilina (AMP, 10 g), cefalotina (CEF, 30 g), cefuroxima (CXM,
30 g), cefotaxima (CTX, 30 g), ceftazidima (CAZ, 30 g), cefepima (FEP, 30 g), estreptomicina (STR,
10 g), gentamicina (GEN, 10 g), kanamicina (KAN,30 g), amikacina (AMK, 30 g),
cidonalidxico(NAL, 30g), ciprofloxacina (CIP, 5 g), tetraciclina (TET, 30 g), cloranfenicol (CHL, 30
g), trimetoprim (TMP, 5 g) y sulfonamida (SUL, 300 g).
Figura 1. Sitios de muestreo en Isla Rey Jorge e Isla Livingston,Zona A, lugares remotos sin influencia humana o animal
permanente: S1, S2, M5, M6; Zona B, lugares con influencia animal permanente: M25, M26; M42, M43, M44.
Figure 1. Sampling sites on King George Island and Livingston Island, Zone A, remote locations without permanent human or
animals influence: S1, S2, M5, M6; Zone B, places withpermanent animal influence: M25, M26; M42, M43, M44.
Se consider que un aislado posea susceptibilidad disminuida frente a un antibitico cuando el halo de
inhibicin fue 14 mm. El ndice de resistencia antibitica (IRA) (Krumperman, 1983)se calcul para la
Zona A y Zona B, considerando slo los antibiticos AMP, CEF, CXM, CTX, FEP, STR, GEN, NAL, CIP,
TET, CHL SUL, TMP. Finalmente, en aquellos aislados que presentaban susceptibilidad disminuida a los
antibiticos y en un grupo considerados susceptibles, se pesquis, mediante PCR convencional, los genes de
resistencia a antibiticos de las familias: betalactmicos: blaSHV, blaTEM-1, blaGES,blaPER-1, blaPER-2, blaAmpC,
blaCTX-MGrupo1,2,9 y 25; quinolonas: qnrA, qnrB,qnrS; tetraciclinas:tetA, tetB, tetC; fenicoles: floR, cmlA,
catIII; aminoglicsidos: aac(6)Ib, aac-(3)II; sulfonamidas: sul1,sul2, sul3 y trimetoprim:dfrA1, dfrA7. Los
aislados, en donde se encontr uno o ms genes de resistencia, fueron identificados por medio de la
amplificacin y secuenciacin de ADNr 16S y posterior comparacin con la base de datos de la NCBI,
utilizando BLAST y MEGA 6.
Resultados y discusin
Desde las muestras de suelo se aisl 91 morfotipos, 43 de la Zona A y 48 de la Zona B, los aislados fueron
capaces de crecer a 4 C y 15 C, por lo que poseen naturaleza psicrfila. En la Zona A, 26 morfotipos
fueron Gram (+) y 17 Gram (-); en cambio, en la Zona B se encontr 16 Gram (+) y 32 Gram (-). Cuarenta y
seis de los 52 aislados Gram (+) produjeron catalasa, lo que podra indicar su naturaleza aerobia, y slo 6
aislados fueron catalasa (-), los que pueden corresponder a anaerobios facultativos. Con respecto a los
aislados Gram (), 42/44 fueron no fermentadores de glucosa; y 44 % no produjeron oxidasa, por lo que un
alto porcentaje de los aislados Gram (-) podran pertenecer a los gneros Pseudomonas, Acinetobacter,
Stenotrophomonas, entre otros, los que han sido descritos en ambientes extremos como Antrtica (Signori,
2014).
El IRA de las bacterias Gram (+) aisladas desde la Zona A y Zona B fue 0,19 y 0,13;
respectivamente,indicando perfiles de resistencia menos extensos con respecto a los aislados Gram (-)
provenientes de la Zona A (IRA: 0,34) y Zona B (IRA: 0,38). Es as que en estos ltimos aislados, de ambas
zonas, se encontr 67% de ellos con resistencia, a lo menos, a 3 familias de antibiticos, incluso en 5
aislados provenientes de la Zona B se encontr perfiles de resistencia que incluyeron 10 o ms antibiticos.
Por otro lado, esta menor susceptibilidad observada en los morfotipos Gram (-) en relacin a los Gram (+)
puede deberse a caractersticas fisiolgicas propias de las bacterias Gram negativas, como la mayor
impermeabilidad a ciertos antibiticos (Tafur, 2008).
En relacin a la deteccin de GRA, se encontr que aislados de distintas especies provenientes de la Zona B
portaban un mayor nmero de GRA de manera simultnea. As, en una cepa de Arthrobacter
psychrochitiniphilus se encontr blaTEM-1, sul1 y aac(6)Ib; por otra parte, un aislado de Acinetobacter
radioresistens porta blaTEM-1, blaPER-2, cmlA y aac(6)Ib; y en otra cepa de la misma especie se detect los
genes blaPER-2, cmlA, aac(6)Ib y aac-(3)II. Adicionalmente, una cepa de Pseudomonas fulva porta los genes
sul1, aac(6)Ib; y un aislado de Arthrobacter siccitolerants, sul1 y aac(6)Ib. Por el contrario, los aislados
provenientes de zonas remotas (Zona A), portaban slo 2 a 3 genes simultneamente. As, una cepa de A.
psychrochitiniphilus tena qnrB y sul1; una cepa de Pseudomonas frederiksbergensis y una de Macrococcus
sp., los genes aac(6)Ib y sul1; una cepa de Xanthomonas campestris y una de Stenotrophomonas rhizophila
el gen qnrB. Finalmente, en una cepa de Escherichia coli se pesquis sul1, aac(6)Ib y blaPER-2; y
correspondi a la nica enterobacteria aislada desde las muestras de suelo antrtico. Adems, los genes que
codifican resistencia a fenicoles (cmlA) y a antibiticos betalactmicos (blaTEM-1 y blaPER-2,) slo fueron
encontrados en aislados provenientes de la Zona B. Los genes sul1 y aac-(6)Ib se presentaron en aislados
provenientes de ambas zonas, con una frecuencia para sul1 de 44 % en la Zona A y 41% en la Zona B y para
aac-(6)Ib41% en la Zona A y 54% en la Zona B. Estos altos porcentajes pueden reflejar la presencia de
bacterias productoras de aminoglicsidos y portadoras naturales de GRA. No se detect los genes blaSHV,
blaampC, blaCTX-M, qnrA, qnrS, tetA, tetB, tetC, catIII, sul2, sul3, dfrA1 y dfrA7.
Es interesante teorizar sobre el mecanismo por el cual estas cepas han adquirido resistencia a los
antibiticos, la que podra ser dada por mutaciones (las que no fueron evaluadas en este trabajo) o por
adquisicin de genes a travs de transferencia horizontal. En este caso puede deberse a una mayor
distribucin de fenotipos insusceptibles a estos antibiticos que han sido seleccionados por la presin
selectiva que podra favorecer la propagacin de la resistencia (Miller, 2009). En los ltimos aos, hemos
comenzado a entender que la resistencia a los antibiticos no evolucion para luchar contra los antibiticos,
sino que ha evolucionado de una manera paralela como parte integral del metabolismo de un organismo. Por
otro lado, la presencia permanente de animales, que pueden actuar como un vector biolgico, puede
favorecer la entrada de GRA, en especial aquellos relacionados con elementos mviles diseminados a nivel
clnico, como plsmidos (blaTEM-1). Sin embargo, en zonas remotas las comunidades productoras de
antibiticos pueden estar poco intervenidas por fuerzas forneas, lo que permite que bacterias productoras de
antibiticos puedan ser prevalentes y, por consiguiente, GRA asociados con la autoproteccin y la
biosntesis de antibiticos, puedan ser adquiridos por bacterias que comparten el nicho ecolgico.
Conclusin.
La presencia de vectores biolgicos en el territorio antrtico, en especial animales, se asocia con la presencia
de bacterias Gram negativas con extensos perfiles de resistencia y genes asociados a la resistencia a
antibiticos betalactmicos y fenicoles, caractersticas ausentes en aislados provenientes de zonas sin
influencia de vectores biolgicos.
Agradecimientos
Al Instituto Antrtico Chileno (INACH) por el financiamiento entregado al Proyecto RT_06-12.
Referencias
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Resumen
La desnitrificacin es un proceso de respiracin anaerbica microbiana por el cual el
nitrato es convertido en N 2 gas que se vuelve a la atmsfera. Ocurre naturalmente en
suelos, ambientes marinos y de agua dulce, pero est muy poco estudiado en ambientes
fros. Se ha demostrado que puede ser utilizado en estrategias de bio-remediacin ya
que muchas bacterias desnitrificantes son capaces de degradar compuestos
recalcitrantes. En este trabajo se estudi la desnitrificacin a bajas temperaturas en
diferentes ecosistemas de la Antrtida con el objetivo final de utilizar microorganismos
desnitrificantes en estrategias de bio-remediacin a bajas temperaturas.
Se tomaron muestras de: lagos, caadas, suelo, glaciar y agua de mar, de la Isla Rey
Jorge cerca de la Base Artigas de Uruguay durante dos veranos. Se aislaron bacterias en
medios de cultivo especficos para bacterias desnitrificantes que se incubaron a 4C en
condiciones anaerobias. Se aislaron ms de 300 cepas que se clasificaron por medio del
anlisis del gen del ARNr de 16S.
La mayora de los aislamientos estudiados se afiliaron a los sub-phylum Gamma y Beta
Proteobacteria. Las cepas caracterizadas dentro de los gneros Pseudomonas y
Janthinobacterium fueron las ms abundantes y fueron aisladas de la mayora de los
ambientes.
En particular la desnitrificacin a bajas temperaturas an no ha sido estudiada en
organismos del gnero Janthinobacterium. Por este motivo se decidi profundizar en el
estudio de esta va metablica en los aislamientos de este gnero. Para ello se
seleccionaron 10 cepas caracterizadas como Janthinobacterium lividum y se estudi su
capacidad de desnitrificacin a 4oC mediante el test de acumulacin del N2O.
Todas las cepas presentaron un resultado positivo en el test (se consider positivo el test
cuando ms de 30 % del nitrato consumido se recupera como N 2O). Se estudi
posteriormente los genes de denitrificacin mediante PCR con cebadores especficos
para los genes nosZ, nirS y nirK que codifican para enzimas claves en la va. La
mayora de las cepas testadas no present resultado positivo para ninguno de los genes
testados, tampoco se ha reportado en bibliografa la presencia de estos genes en los
genomas de estos organismos. Estos resultados preliminares sugieren que
probablemente existan genes diferentes a los ya descriptos que codifiquen para las
enzimas responsables de esta va metablica an no descripta en Janthinobacterium.
Agradecimientos
ANII Beca de iniciacin cientfica de P. Bovio, Instituto Antrtico del Uruguay.
tomaron muestras de rizsfera de plantas vasculares antrticas que estn en el espacio contiguo a
cada OTC en cada uno de los sitios (Espacio Abierto, EA) (Figura 1). La diferencia principal
entre los sitios es que en el Sitio 1 (S1) la cubierta vegetal es abundante y en el Sitio 2 (S2) es
escasa.
El anlisis de las comunidades microbianas fue abordado a travs de los tres dominios de la vida
(Bacteria, Archaea y Eukarya) mediante amplificacin y secuenciacin masiva de los genes
ribosomales 16S rRNA (Bacteria y Archaea) y 18S rRNA (Eukarya), a partir de ADN
comunitario, para ver las comunidades microbianas totales (i.e., dormantes y activas) y a partir
de ARN comunitario, para ver las comunidades metablicamente activas.
Figura 1. Diseo experimental de la recoleccin de muestras. S1: sitio 1, S2: sitio 2, OTC: Open Top Chambers, EA:
Espacio Abierto. Experimental desing of the sample collection. S1: site 1, S2: site 2, OTC: Open Top Chambers,
EA: Fell-Field.
Figura 2. Curvas de rarefaccin de comunidades activas y totales de los dominios Bacteria/Archaea y Eukarya.
Rarefaction curves of active and total community from the domains Bacteria/Archaea and Eukarya.
Los anlisis de cluster realizados, tanto para los Dominios Bacteria/Archaea como para el
Dominio Eukarya, indican un agrupamiento de comunidades sometidas a calentamiento y de EA
del S1 en conjunto con el S2 sometido a calentamiento (Figura 3). Y la formacin de un slo
cluster con las comunidades microbianas del EA del S2. Esto sugiere que el S1, por tener una
cubierta vegetal abundante, est eventualmente protegiendo a las comunidades microbianas
rizosfricas del efecto del calentamiento y, por el contrario, en el Sitio 2 por estar ms
desprotegido, hay un efecto del calentamiento sobre la rizsfera con un concomitante cambio de
las comunidades.
Figura 3. Anlisis de cluster de comunidades activas y totales en los dominios Bacteria/Archaea y Eukarya. Cluster
Analysis of active and total community in the domains Bacteria/Archaea and Eukarya.
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I Introduccin
En las ltimas dcadas la Nanotecnologa ha sido una las reas de estudios cientficos con
mayor crecimiento, esto no es solo consecuencia de su novedad, sino tambin porque a partir de los
avances en este campo se han desarrollado aplicaciones que han revolucionado la industria, la ciencia y la medicina.
Debido a sus propiedades fsicas y qumicas, las nanopartculas metlicas (NPs) ms estudiadas a la fecha estn compuestas por Au, Ag, Cd y Cu, entre otras. No obstante a sus interesantes
caractersticas, uno de los mayores inconvenientes de las NPs al ser sintetizadas a travs de mtodos qumicos, es su elevada toxicidad. Debido a esto, la biosntesis de NPs metlicas mediada por
microorganismos se posiciona como una alternativa en pos de disminuir la toxicidad y aumentar las
reas en las cuales se pueden implementar tecnologas basadas en nanotecnologa.
Es de suma importancia para nuestro grupo de investigacin generar tecnologa en base al
metal mas abundante en nuestro pas, el cobre, el cual no ha sido estudiado como debiese. Chile
lleva aos siendo el principal exportador de Cu en el mundo, sin embargo en todas stas dcadas no
hemos sido capaces de darle valor agregado a este metal con miras a aprovechar a cabalidad sus
propiedades.
En relacin al cobre, existen abundantes estudios relativos a NPs de xidos de cobre y cobre
metlico, sin embargo a pesar de las interesantes propiedades de las NPs de sulfuros de cobre, son
muy pocos los reportes publicados. En el proceso de biosntesis de NPs de Cu, las biomolculas
involucradas en la resistencia celular al metal tendran un rol preponderante. Entre estas, los polifosfatos (polyP) resultan de especial inters debido a su rol en la proteccin e interaccin con
metales divalentes1,2. Ms aun, estudios recientes vinculan la acumulacin de polifosfatos con la
radiacin-UV, temperaturas extremas y deficiencia de nutrientes. Si bien el rol que poseen los polyP en los mecanismos de resistencia a metales ha sido ampliamente estudiado, su importancia y
relacin en la biosntesis de NPs no ha sido determinada a la fecha.
El continente Antrtico por su parte, presenta condiciones ambientales extremas, tales como
una elevada radiacin UV en ciertos periodos del ao, bajsimas temperaturas, escasez de nutrientes y estrs osmtico entre otras. Todas stas condiciones podran favorecer la presencia de microorganismos que acumulen polyP como mecanismo de proteccin, ya que stos biopolmeros
adems de representar una defensa para los organismos que subsisten en stas condiciones, pueden
ser usados como fuente alternativa de energa.
En base a lo anteriormente planteado, la hiptesis de este trabajo es: Los polifosfatos producidos por bacterias Antrticas favorecen la biosntesis de nanopartculas semiconductoras
fluorescentes de cobre.
II - Materiales y Mtodos
Aislamiento de Bacterias Antrtica. Gracias al Instituto Antrtico Chileno (INACH), se viaj al continente Antrtico por 25 das en el mes de febrero del 2014 con el objetivo de tomar muestras de zonas especficas. Isla Decepcin (6258S 6040O), lugar en el que se pueden encontrar
temperaturas tan variadas que pueden llegar hasta 80C, Isla Snow (6244S 6113O), Punta Hannah (6238S 6036O), Coppermine (6222S 5941O), Punta Armona (6218S 5911O), Baha
Fildes (6212S 5857O) y Glaciar Collins (6210S 5850O) son lo sitios desde donde se obtuvieron las muestras.
Para aislar bacterias resistentes a cobre, se tom 1 gramo de cada una de las muestras al
cual se aadi 5 mL de dH2O estril y se dej bajo agitacin por 2 h. Transcurrido el tiempo, se
sembr 50 L del sobrenadante en placas con medio de cultivo LB suplementadas con 4 mM de
CuSO4 y se dej incubar a 15 C por 48 h.
Se aislaron las bacterias que crecieron luego de la incubacin y se caracterizaron a travs de
curvas de crecimiento, tincin Gram, temperatura ptima de crecimiento y concentracin mnima
inhibitoria (CIM) a CuSO4.
Actividad peroxidasa y catalasa. La actividad peroxidasa total se determin a travs de una
modificacin del protocolo descrito por Guozhu Chen y cols. (2003)3. Se crecieron las clulas hasta
fase exponencial y fueron sonicadas para obtener un extracto crudo de protenas el cual se incub
con H2O2 (0.2 mL de H2O2 30% en 100 mL de buffer fosfato de potasio 50 mM, pH 7.0) y se determin la desaparicin de H2O2 a 240 nm.
La actividad catalasa en gel se realiz mediante el protocolo descrito por Woodbury y cols.
(1971)4. Las cepas fueron crecidas hasta DO600 0,4. Para la actividad en gel, se realiz una electroforesis en gel de poliacrilamida al 8% en condiciones nativas a 4 C. El gel se lav con agua
MiliQ y luego se incub buffer fosfato de potasio 50 mM pH 7,0 suplementado con 100 uL de
H2O2 (30%) por 15 min en oscuridad. Para revelar el gel se adicion 40 ml de cloruro frrico 1,5%
(p/v) y 40 ml de ferricianuro potsico 1,5% (p/v).
Biosntesis de Nanopartculas fluorescentes de Cobre. Las clulas bacterianas seleccionadas
se crecieron hasta fase estacionaria a 28 C, posteriormente se centrifug el cultivo y el pellet fue
resuspendido en buffer Tris-HCl pH 7.0. sern expuestas a CuSO4 (sulfato de cobre) y se dejarn
incubar por 24 h. Las clulas sern expuestas a luz UV a una longitud de onda de 365 nm para
analizar mediante fluorescencia la presencia de nanopartculas al interior de las bacterias
Cuantificacin de Polifosfatos. Las clulas se crecieron hasta fase exponencial y hasta fase
estacionaria para determinar los niveles de polyP en ambas condiciones, adems se cuantific en
condiciones de biosntesis de NPs de Cu. La cuantificacin se realiz en base al protocolo reporta-
do por John McGrath y cols. (2011)5, basado en la fluorescencia emitida por el complejo DAPIpolyP a 550 nm cuando es excitado a 415 nm.
III Resultados
Durante parte de Enero y Febrero de este ao, y gracias al apoyo brindado por el INACH,
se viaj al continente Antrtico, la expedicin
fue realizada con xito y con gran apoyo Table 1.- Resumen caracterizacin bacterias antrticas.
Cepa
Temperatura
Afinidad
CIM (g/mL)
Resistencia
logstico. Se tomaron 22 muestras y fueron
de crecimiento tintorial Gram
UV (min)
almacenadas en tubos de centrfuga de 50 mL
A1L3.1
28 C
1750
0
estriles y trasladadas en cadena de fro du28 C
1750
5 min
rante la expedicin en el buque Aquiles y en A1L11.1
el trayecto a Santiago donde se guardaron a - A1L11.2
28 C
2500
2 min
80 C.
Las muestras fueron sembradas a
travs de la metodologa descrita y se logr
aislar 21 cepas resistentes a 4 mM de CuSO4.
Una vez que las cepas se encontraban
aisladas, se realiz tincin Gram. El resultado
de la tincin, el cual se resume en la tabla 1,
dice que de las 21 cepas aisladas, solo una de
ellas es Gram positiva (A3L2.1). Hay estudios en los que se realizan anlisis metagenmicos en Fildes Isla Rey Jorge, en ellos se evala la comunidad bacteriana dominante y los resultados muestran que mas del
65% de la comunidad bacteriana de Fildes
est compuesta por proteobacterias, bacteroidetes y acidobacterias, las cuales son todas Gram negativo6.
A1L12.1
28 C
1750
A1L13.1
28 C
2500
A2L1.1
28 C
5000
2 min
A2L1.2
28 C
2500
A2L1.3
28 C
2500
A3L1.1
28 C
7500
A3L2.1
28 C
2500
A5L4.1
28 C
15000
A6L2.1
28 C
7500
2 min
A6L3.1
28 C
15000
2min
A7L1.1
28 C
3250
2 min
A8L4.1
28 C
1750
2 min
L43C
28 C
30000
5 min
M46B
28 C
2500
5 min
M46C
28 C
1750
5 min
algn modo es posible que los microorganismos presentes han desarrollado mecanismos de
adaptacin a condiciones extremas.
El ensayo de peroxidasa total revela que las cepas que poseen los niveles mas altos de resistencia a Cu, son las que a su vez tienen actividad peroxidasa total particularmente alta. Se procedi a realizar un zimograma para determinar si los niveles de actividad peroxidasa total estn determinados por catalasas y sus niveles de expresin.
A1L3.1 A1L11.1 A1L11.2 A1L12.1 A1L13.1 A2L1.1 A2L1.2 A2L1.3 A3L1.1 A3L2.1 A5L4.1 A6L2.1 A6L3.1 A7L1.1 A8L4.1
L43C M46B
M46C
L48 L41B1
1ii
KatE
KatG
KatG
KatN
Figura 1.- Zimograma de la enzima catalasa, donde cada columna representa una de las cepas aisladas. De las
21 cepas analizadas solo dos no muestran la enzima catalasa.
Como se observa en la figura 1, solo dos cepas no muestran la enzima catalasa, sin embargo
cepas que poseen la mas alta resistencia a cobre como es L43C y L48 muestran una KatG bastante
expresada en condiciones normales (ausencia de Cu).
El ensayo de biosntesis de nanopartculas fluorescentes de cobre muestra que cerca del
60% de las cepas aisladas son capaces de sintetizar NPs. No obstante a lo anterior no hay una
relacin aparente entre stas y las que poseen mayor nivel de resistencia o actividad peroxidasa/
catalasa.
En base a lo anterior se cuantific los niveles de polyP en las cepas aisladas. Como ya se
mencion, los polyP representan una defensa que poseen microorganismos para tolerar metales pesados, adems de estar vinculados a estrs oxidativo, fuente de energa en condiciones de inanicin,
defensa contra radiacin UV, entre otras. La cuantificacin se realiz en todas las cepas aisladas en
condiciones normales, sin embargo no existen diferencias estadsticamente significativas entre ellas. Por lo que se repiti la cuantificacin, pero esta vez en condiciones de biosntesis, para ello se
tom 3 cepas que sintetizan NPs y 3 que no lo hacen.
Tal y como se aprecia en la figura 2, se
observa que en las primeras 3 cepas que sintetizan NPs, el nivel de polyP disminuye considerablemente en condiciones de biosntesis, sin
embargo en las 3 cepas que no sintetizan NPs,
el contenido de polyP no vara ante el
tratamiento con Cobre.
Sntesis
No Sntesis
IV Conclusin y Discusin
La Antrtica representa un continente rico en microorganismos que han desarrollado mecanismos
de adaptacin y una de las caractersticas es su tolerancia a estrs oxidativo dada por sus niveles de
actividad peroxidasa y catalasa. La produccin de NPs de Cu, no est determinada en su totalidad
por la resistencia al metal, sin embargo esta sntesis se ve favorecida en cepas que son capaces de
degradar el contenido de polyP en pos de defenderse de metales como Cu. Al degradarse los polyP
se libera fosfato inorgnico el cual podra favorecer la sntesis de NPs fluorescentes de Cu.
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VI Agradecimientos
Esta investigacin se pudo realizar a travs del apoyo de los proyectos INACH MT_04-13,
INACH T-19_11, FONDECYT 11110077 y FONDECYT 1151255.
Herrera L1, Garca Lavia C1, Marizcurrena JJ1, Ponce de Len R2 y Castro-Sowinski S1
1
Las enzimas son catalizadores biolgicos tiles en procesos biotecnolgicos. Entre estas, las
hidrolasas (proteasas, celulasas, lipasas, esterasas, amilasas, agarasas, etc.) ocupan la mayora
del mercado mundial de enzimas. Entre otras propiedades, las enzimas sicrfilas (producidas
por los sicrfilos/sicrotolerantes), poseen una alta eficiencia cataltica a bajas temperaturas,
comparado con las enzimas producidas por microorganismos mesfilos/termfilos. En la
bsqueda de enzimas sicrfilas, se propuso la siguiente hiptesis: Grania sp. (oligoqueto que
habita las costas de la Baha Maxwell), posee una microflora que ayudara a degradar los
componentes de las algas, mientras que el oligoqueto brindara un nicho apropiado para el
desarrollo de una comunidad microbiana benfica para el animal. Entre estos
microorganismos, podramos encontrar algunos productores de enzimas hidrolticas sicrfilas,
con potenciales usos en biotecnologa. Utilizando diferentes medios de cultivo se obtuvieron
55 aislamientos microbianos (bacterias y levaduras; microflora del oligoqueto) capaces de
hidrolizar protenas lcteas (proteolticos), agar (agarolticos), almidn soluble (amilolticos),
tributirina
(esterolticos)
carboximetil-celulosa
(celulolticos).
No
se
aislaron
microorganismos lipolticos (usando aceite de oliva como fuente de carbono). Las bacterias y
levaduras se identificaron por secuenciacin y comparacin en las bases de datos del gen 16S
y la regin D1/D2 de la subunidad mayor 26S, respectivamente. La filiacin se verific
construyendo rboles filogenticos. Las bacterias se identificaron como pertenecientes a los
gneros Flavobacterium, Psychrobacter y Pseudomonas, y miembros de la familia
Enterobacteriaceae (Rahnella, Serratia o Ewingella). Al momento, las levaduras identificadas
pertenecen al gnero Rhodotorula. Estos gneros tambin se detectaron en la superficie de las
algas, sugiriendo que estos microorganismos probablemente ingresaron al intestino de Grania
sp. junto con su fuente de alimentos (algas); tal como las lombrices de tierra, donde las
bacterias ingeridas del suelo contribuyen a la nutricin del hospedero como simbiontes
intestinales transitorios.
Agradecimientos: IAU, ANII
Seccin Bioqumica y Biologa Molecular, Facultad de Ciencias, Universidad de la Repblica, Igual 4225,
Montevideo, Uruguay. 2Laboratorio de Epigentica e Inestabilidad Genmica, Instituto Clemente Estable, Av.
Italia 3318. 3Microbiologa Molecular, Instituto Clemente Estable.
Sphingomonas,
Pseudomonas,
Janthinobacterium,
Hymenobacter
Dpto. Bioingeniera, Facultad de Ingeniera, Universidad de la Republica, Julio Herrera y Reissig 545.
CP 11300 - Montevideo - Uruguay. Tel: (+5982) 7110871 - Fax: (+5982)7115446.
2
Laboratorio Tecnolgico Uruguayo, Avenida Italia 6201, CP 11500- Montevideo- Uruguay. Tel:(+5982)
601-3724.
Resumen
La importancia de los cidos grasos poliinsaturados (PUFA) y en particular los omega-3
para la salud animal y humana, ha llevado a la bsqueda de fuentes alternativas a las
tradicionales como krill y pescados. Los microorganismos estn siendo estudiados como
posibles alternativas, en particular las bacterias provenientes de ambientas con bajas
temperaturas y altas presiones. La cepa Shewanella sp. 8-5, se aisl a partir de una
muestra de sedimento de playa en el mar de Drake, isla Rey Jorge, Antrtida. El anlisis
de comparacin de secuencias del gen del ARN ribosomal 16S por medio del algoritmo
BLAST (agregar base de secuencias utilizada) revel que el microorganismo pertenece
al gnero Shewanella. El mayor porcentaje de similitud obtenido fue del 95% con
Shewanella livingstonensis KOPRI_2225 (no se cuenta con caracterizacin fenotpica
publicada), y se obtuvo un 94% de similitud con Shewanella livingstonensis NF22.
Considerando el nivel de similitud obtenido, la cepa Shewanella sp. 8-5 podra
constituir una nueva especie, por lo que para avanzar en su identificacin, en el presente
trabajo, se compararon sus caractersticas morfolgicas y fisiolgicas con las de la cepa
que tiene mayor similitud en su ADNr 16S. La cepa de Shewanella livingstonensis
KOPRI 22225 fue amablemente cedida por el Korean Polar Research Institute. La
caracterizacin bioqumica se hizo utilizando el kit Oxoid Microbact 24E y medios
preparados en el laboratorio. Adems, se realizaron antibiogramas segn el mtodo de
Kirby-Bauer de susceptibilidad de antibiticos (test de difusin de disco). Los
resultados obtenidos del kit no mostraron diferencias entre la cepa Shewanella
livingstonensis KOPRI 22225 y Shewanella 8-5, pero hubo diferencias en el color de la
colonia y en la susceptibilidad a antibiticos. Para concluir que estamos ante una nueva
especie, resta realizar estudios de hibridacin ADN-ADN y anlisis de quinonas.
Resumen
El gran uso de bateras recargables ha desarrollado un aumento en el consumo de litio y de la
explotacin del mismo. Chile presenta una de las mayores reservas de litio del mundo y
actualmente lidera la explotacin de este metal con alrededor del 60% del mercado mundial. La
zona norte de Chile forma parte de lo que se conoce como tringulo del litio, junto con parte del
norte de Argentina y del altiplano boliviano, donde se encuentra el 80% de las reservas de litio
conocidas hasta hoy.
Estas bateras recargables poseen componentes de alto costo y que son considerados peligrosos,
tales como litio, cobalto, cadmio, nquel, etc. Por otro lado, el uso de microorganismos para
recuperar litio desde pilas gastadas ha sido poco descrito. Para realizar estos ensayos de
biorrecuperacin se han utilizado, en mayor medida, cepas bacterianas acidfilas, las cuales son
capaces de solubilizar metales en condiciones de gran acidez.
En este trabajo hemos aislado bacterias antrticas capaces de crecer en un amplio rango de
temperatura. Algunas de estas de estas cepas presentan altos niveles de resistencia a Li y Co, por lo
cual constituyen un buen modelo para testear solubilizacin del metal a bajas temperaturas y pH
neutro. Se seleccion tres cepas capaces de solubilizar litio desde distintas fuentes insolubles de
este metal (Li3PO4, LiCoO2 y pilas gastadas de desecho). El genoma de una de las cepas capaces de
solubilizar litio fue secuenciado y actualmente estamos analizando los genes que la componen para
comprender su capacidad de resistir y solubilizar litio.
El uso de las bacterias seleccionadas para la reutilizacin de litio desde bateras constituye una
alternativa de reciclaje novedosa y amigable con el medio ambiente.
Bibliografa.
COCHILCO, Direccin de Estudios y Polticas Publicas. Antecedentes para una Poltica Publica en Minerales
Estratgicos: Litio, Octubre 2009.
Mishra, D., Kim, D. J., Ralph, D. E., Ahn, J. G., & Rhee, Y. H. (2008). Bioleaching of metals from spent lithium ion
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spent lithium-ion battery by the mixed culture of acidophilic sulfur-oxidizing and iron-oxidizing bacteria. Bioresource
technology, 100(24), 6163-6169.
Unidad Microbiologa Molecular, Depto. BIOGEM, Instituto de Investigaciones Biolgicas Clemente Estable, Montevideo,
Uruguay. Instituto de Ecologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Mxico DF, Mxico * Ambos autores
contribuyeron en igual medida
Introduccin
elementos genticos que participan en la THG en bacterias y otros mecanismos que han estado
clsicamente asociados a estos elementos como la resistencia a antibiticos.
Objetivos especficos
1. Detectar el perfil de incompatibilidad de los plsmidos bacterianos presentes en muestras
ambientales.
2. Determinar la abundancia relativa de bacterias resistentes a 4 antibiticos, presentes en muestras
de sedimentos.
Materiales y Mtodos
OBJETIVO 1
Se us la tcnica de Replicon Typing, amplificando mediante PCR fragmentos de ADN conservados
que determinan incompatibilidad en plsmidos de un determinado grupo. Se usaron cebadores para
plsmidos de amplio espectro (IncW, IncQ, IncN, IncP e IncP-9)6. El ADN total, usado como molde, se
prepar mediante dos estrategias distintas: directamente a partir de las muestras ambientales colectadas
y a partir de cultivos de enriquecimiento inoculados con las muestras. En la segunda estrategia las
muestras se incubaron en medio R2A (Reasoners2A), suplementado con diferentes antibiticos
(ampicilina, Amp; kanamicina, Km y cido nalidxico, Nal). Al cabo de 4 das de incubacin a 25C se
extrajo el ADN plasmdico (lisis alcalina). Las extracciones para las que se obtuvo amplificacin, y
confirmacin mediante secuenciacin de la identidad del producto, se usaron para transformar
qumicamente clulas de Escherichia coli TOP10; en cada caso se us como seleccin el antibitico
correspondiente.
OBJETIVO 2
Se realizaron recuentos de bacterias aerobias hetertrofas totales y resistentes a distintos antibiticos. Se
efectuaron mediante recuento en placa en medios TSA1/10 (Tryptic Soy Agar) y R2A. Cinco gramos de
sedimento se suspendieron en 45 ml de Na 4P2O7 0.1 % (p/v). Esta suspensin se incub durante 30
minutos en agitador rotatorio a 25 C y 200 rpm, y luego se realizaron diluciones seriadas en base 10 en
tubos con 10 ml de Na4P2O7 0.1 % (p/v). Las muestras utilizadas para este trabajo fueron extradas de: la
cercana de los tanques de combustible de la base rusa (TR), la isla Ardley (IA) y Half Three Point
(HTP).
Se evaluaron cuatro antibiticos: Amp, antibitico beta lactmico, cuyo sitio de accin es la pared
celular bacteriana; tetraciclina (Tc), inhibidor de la sntesis proteica; Km, aminoglicsido que provoca
errores en la traduccin; y cido nalidxico (Nal), antibitico sinttico, del grupo de las quinolonas que
acta impidiendo la replicacin del ADN. Las concentraciones finales de estos antibiticos en los
medios fueron: Amp, 16g/ml; Tc, 8g/ml; Km, 50g/ml y Nal, 32g/ml. Con el fin de evitar el
crecimiento de hongos se agreg cicloheximida (Chex) a una concentracin final de 50 g/ml. El
recuento de hetertrofos aerobios totales se hizo en TSA1/10 y R2A, suplementados solamente con
Chex. Las placas se incubaron en aerobiosis a 4C y 25C. Las colonias de las placas incubadas a 25C
se contaron al cabo de 72hs, mientras que las de las incubadas a 4C se contaron al cabo de dos semanas.
Resultados
OBJETIVO 1:
Los cebadores utilizados no exhiben alta especificidad por las regiones determinantes de
incompatibilidad. Por ello, es necesario confirmar la identidad de los productos de PCR obtenidos
mediante Southern blot o anlisis de secuencia de ADN. Las bibliotecas de clones obtenidas empleando
los cebadores dirigidos a IncP-9 e IncP no mostraron, a nivel de secuencia, similitud con las regiones
diana que se esperaba amplificar. El par de cebadores Oriv1/Oriv26 del grupo IncW fue el nico que
gener productos del tamao esperado. Este resultado se obtuvo slo a travs del enriquecimiento en
R2A con Km de una muestra de suelo/sedimento cercano a la cmara sptica de Base Artigas (BCAA).
A partir de este producto de PCR se construyeron bibliotecas, cuyos insertos fueron secuenciados. Se
pudo constatar homologa entre los productos amplificados y parte de las secuencias codificantes para
las protenas repA y resP, presentes en varios plsmidos tales como R388, pSA, R7K, pMAK3 y plE321,
todos del tipo IncW. Se aisl uno de estos plsmidos mediante transformacin qumica de E. coli TOP10
el cual ser utilizado para su secuenciacin y anlisis.
OBJETIVO 2
El antibitico para el cual se obtuvo mayor proporcin de resistencia fue Amp. El promedio de
resistencia fue 34,6%. En la muestra IA el promedio de resistentes a Amp fue 56,0%, mientras que en
TR fue 46,2%. En esa muestra se observ, adems, un efecto de la temperatura en la proporcin de
resistentes a Amp; el porcentaje de resistentes fue superior para las bacterias crecidas a 4 C (69,2% vs.
42,9%).
Figura 1.- Abundancia de bacterias hetertrofas capaces de crecer en medios R2A o TSA 1/10 a 4C o 25 C. A) Hetertrofos
totales. Resistentes a: Amp (B), Nal (C) y Km (D). El eje vertical est expresado en log (UFC / g de suelo) (A) o en
porcentaje de resistentes respecto al total (B, C y D). En el eje horizontal se agrupan las barras segn el origen de las
muestras: TR= Tanques Rusos, IA2= Isla Ardley, HTP= Half Three Point.
El porcentaje promedio de resistencia a Nal fue 4,0%. El 1,9% de las bacterias cultivables presentaron
resistencia a este antibitico en la muestra TR, mientras que en IA y HTP el porcentaje de resistentes fue
en ambas 5,0%. En todas las muestras analizadas el porcentaje de resistentes a Nal fue superior en la
poblacin de bacterias capaces de crecer a 25C. En las muestras de IA el porcentaje de resistentes fue
9,0% y 1,1% en bacterias crecidas a 25 y 4 C, respectivamente; asimismo, en las muestras de TR el
promedio fue de 3,6% y 0,2% y en las muestras de HTP no se observaron resistentes a Nal capaces de
crecer a 4 C.
En cuanto a las bacterias resistentes a Km, solamente en las muestras IA y HTP se obtuvieron
proporciones superiores al 1,0%. Esto se observ en el medio R2A, en el caso de IA, en las dos
temperaturas de incubacin, con un promedio de 6,2%, mientras que en HTP, solamente a 4 C con un
3,1% de resistentes.
La nica muestra para la que se obtuvieron resistentes a Tc fue IA. En ella hubo 0,05% de resistentes a
Tc, observadas en medio R2A incubado a 25 C.
Conclusiones y Perspectivas
La deteccin de plsmidos y regiones asociadas a grupos de incompatibilidad nos ha generado
problemas y estimamos desarrollar nuevas estrategias (Southern blot, metagenmica, etc). Se logr
rescatar un replicn del grupo IncW, que suelen ser elementos conjugativos pequeos, capaces de
conjugar en superficie, con genes de resistencia a drogas y generalmente alojados en proteobacterias 7.
De acuerdo a lo esperado, el plsmido obtenido fue aislado a partir de una muestra colectada en las
inmediaciones de la cmara sptica de la base Artigas. En lo que refiere al perfil de resistencia a drogas,
los resultados obtenidos hasta el momento denotan que pueden existir diferencias en la frecuencia de
bacterias resistentes a distintos antibiticos segn el sitio de colecta de las muestras. Esta diferencia
puede deberse a la presencia humana, as como tambin a la incidencia de la avifauna en la dispersin de
los determinantes de resistencia. Para obtener datos que permitan concluir acerca de estas cuestiones, es
necesario realizar un muestreo planificado y consistente de una cantidad de rplicas que permitan aval
estadstico. Con las placas usadas para realizar los recuentos se estn construyendo colecciones de
aislamientos de bacterias resistentes a los antibiticos testeados. Estos aislamientos se utilizarn en la
bsqueda de genes de resistencia, plsmidos e integrones, mediante PCR con cebadores especficos.
Financiamiento: Proyecto PNUD URU 13/001 /Fondo de Cooperacin Mxico-Uruguay; IAU;
PEDECIBA
Referencias Bibliogrficas
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16:472-482.
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Luna O.
1, 4
, Guzmn F.
1, 4
, Crdenas C.
1, 2, 4
1:
Instituto de Qumica, Pontificia Universidad Catlica de Valparaso (PUCV). Av. Universidad 330,
Valparaso, Chile. 2: Ncleo de Biotecnologa Curauma, PUCV. 3: Instituto de Biologa, PUCV. 4: Escuela de
Alimentos, PUCV.
Los pptidos antimicrobianos se caracterizan por ser secuencias catinicas acotadas que
juegan un rol clave en el sistema inmune y que surgen como una alternativa a los
antibiticos convencionales, debido a su baja citotoxicidad y baja induccin de resistencia
en el microorganismo blanco. En estudios previos nosotros determinamos que el
homopptido de Lisina de 11 residuos presenta actividad antibacteriana para un amplio
rango de cepas, tanto Gram negativas como Gram positivas [1] adems de otras
propiedades, como actividad anticongelante, convirtindolo en un modelo interesante de
estudio. El homopptido de Lisina (Homo-K) al ser una secuencia repetitiva permite
determinar de forma ms precisa los posiciones en donde la lisina juega un rol central en la
interaccin con el blanco para as potenciar su actividad. Esto es posible mediante Scanning
de Alanina (Scan-Ala) y Prolina (Scan-Pro) que permite identificar la posicin donde la
carga electrosttica y el giro de la hlice, respectivamente, interaccionan con la clula
blanco. En este trabajo se determinaron estas posiciones y el efecto que tienen en la
actividad antibacteriana, citotoxicidad y actividad hemoltica del Scanning de Alanina y
Prolina comparados con el original.
Todos los pptidos de la serie de Scan-Ala, Scan-Pro y Homo-K de 11 residuos fueron
obtenidos por sntesis en fase slida Fmoc de acuerdo al mtodo tea-bag de Houghten [2]
usando resina Rink amida. La caracterizacin y purificacin de los pptidos fue realizada
por HPLC y Espectrometra de Masas. El ensayo antibacteriano fue realizado por el mtodo
en microplaca en medio TSB a 37C con una concentracin de pptidos de 10, 20 y 30 M
con Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Escherichia Coli y Salmonella
typhimurium como cepas blanco. La toxicidad de los pptidos fue medida en clulas ROS
en un rango de 5-50 M en microplaca de 96 pocillos (5x10 3 clulas/pocillo). Los ensayos
hemolticos se hicieron con sangre humana de un individuo sano con 5-50 M de pptido,
en microplaca.
Los ensayos con Scan-Ala muestran que se pierde la interaccin con la membrana en todas
las posiciones, para L. monocytogenes, excepto en la posicin 7 (Fig. 1A). La bacteria S.
aureus presenta una disminucin en la actividad en la posicin 6.
Para Scan-Pro los ensayos contra L. monocytogenes la actividad antibacteriana se ve
disminuida en 7 posiciones: P1, P3, P4, P5, P6, P8, P10 (Fig.1B). La bacteria S. aureus
presenta una disminucin de la actividad en la posicin P3 y P4.
Para ambos Scanning, los ensayos contra Gram negativas no presentan cambios respecto al
homopptido.
Los resultados de citotoxicidad indican una baja en la viabilidad celular para Scan-Ala en
las posiciones A5, A7 y A8 (~40%) y para el Scan-Pro en las posiciones P2, P6, P7, P8, P9,
P10 (~45%).
Los pptidos sintticos no presentan hemlisis en las concentraciones analizadas (Fig. 2 A y
B).
Este trabajo muestra las posiciones clave para la funcin del homopptido. Es ms, la
importancia de los residuos clave slo se ve en Gram Positivas. Esto deja abierto la
posibilidad de estudiar interacciones pptido-bacteria a nivel de composicin de membrana
(Gram negativas vs. Gram positivas).
Toda esta informacin puede ser luego utilizada para potenciar la actividad antibacteriana
de los pptidos, optimizando residuos que no sean crticos, y as obtener potenciales
heteropptidos funcionales.
10000000
10000000
K11
A1
9000000
P1
A2
8000000
P2
7000000
A3
7000000
P3
6000000
A4
6000000
P4
5000000
A5
5000000
P5
4000000
A6
K11
9000000
8000000
A7
2000000
A10
0
0
10
20
P10
0
A)
P9
1000000
0
A11
30
P8
2000000
A9
1000000
P7
3000000
A8
L)
Supervinca(bts/m
L)
ts/m
ca(B
rvin
e
p
Su
3000000
P6
4000000
10
20
P11
30
B)
98
Scan- Pro
98
78
78
50 uM
58
50 uM
58
5 uM
olis
em
H
%
olis
em
H
%
5 uM
38
18
38
18
-2
Control K11
A1
A2
A3
A4
A5
A6
Posicin de la sustitucin
A7
A8
A9
A10
-2
A11
Control K11
P1
P2
P3
A)
P4
P5
P6
Posicin de la sustitucin
P7
P8
P9
P10
P11
B)
Introduccin
La importancia de las enfermedades de plantas en la agricultura moderna es un hecho
ampliamente documentado y reconocido. Dentro de las plagas que pueden afectar a los
productos agrcolas, se encuentran los microorganismos, destacndose los hongos como
agentes etiolgicos de diversas enfermedades (Velzquez et al., 2008).
Desde los aos cuarenta, el uso de plaguicidas ha aumentado de una manera continua, con
todos los daos y alteraciones que su uso supone para el suelo, el agua y la biota (Torres et
al., 2004). Adems de tener efectos colaterales en el ecosistema, se ha observado aparicin
de resistencia por parte de algunos patgenos, como resultado de la intensificacin de su
uso. Por tanto es necesario la bsqueda de nuevas alternativas y fuentes de compuestos
antimicrobianos.
En su ambiente natural, los hongos, junto a un gran nmero de organismos, bacterias, otros
hongos y animales, compiten entre s por el mismo substrato o hbitat. Para subsistir, estos
microorganismos han desarrollado una serie de estrategias. Entre estas se encuentran la
produccin de metabolitos que resultan agresivos para sus competidores (Ramrez, 2002;
Wanjiku, 2009). Mayoritariamente, estos metabolitos pertenecen a un grupo de compuestos
conocidos como metabolitos secundarios.
Se estima que hay cerca de 140.000 especies de hongos en la tierra. De estas solo 22.000
son conocidas actualmente y solo un pequeo porcentaje (5%) han sido investigadas
(Ghosh, 2014) siendo an menor la cantidad que ha sido explorada en la produccin de
metabolitos biolgicamente activos (De Silva et al., 2013). Por lo tanto an hay mucho que
explorar sobre las propiedades y potenciales aplicaciones de los hongos.
En particular, resulta promisoria la bioprospeccin en ambientes poco explorados, o con
condiciones no tan favorables para la vida, donde puedan encontrarse cepas no
identificadas o que hayan desarrollado mecanismos diferentes como resultado de su
adaptacin a condiciones adversas.
Las prevalentes condiciones antrticas de baja temperatura, baja disponibilidad de agua,
frecuentes ciclos de congelado-descongelado, bajas precipitaciones anuales, vientos fuertes,
alta tasa de sublimacin y evaporacin junto con la gran incidencia solar, principalmente de
radiacin ultravioleta, constituyen significativos factores limitantes de la vida de plantas y
animales. Por lo que, la biota de la Antrtida, ms que en otros continentes, est dominada
por microorganismos (Ruisi et al., 2007)
Debido a las condiciones extremas, los microorganismos del continente antrtico y las islas
vecinas han adquirido estrategias de adaptacin nicas para poder sobrevivir. Con el fin de
obtener ventaja competitiva algunos de ellos producen compuestos antimicrobianos
extracelulares para inhibir el crecimiento de competidores (Wong et al., 2011)
Metodologa
Aislamiento de hongos filamentosos
Se sembraron diluciones de las muestras colectadas en diciembre de 2014 en distintos
puntos de la isla Rey Jorge, en el medio Dicloran Rosa De Bengala Cloranfenicol Agar
(DRBCA). Se incub a 20C y se aislaron las colonias filamentosas observadas.
Evaluacin preliminar de actividad antimicrobiana
Se realizaron cultivos duales con algunos de los hongos aislados, para detectar la posible
inhibicin de patgenos.
Se coloc un trozo de micelio fresco de hongo filamentoso obtenido de las muestras
antrticas, en placas de petri con PDA, a 1 cm del borde de la misma. Se incub a 20C
durante aproximadamente 10 das, y en ese momento se coloc un trozo de micelio o
espora del hongo patgeno de forma diametralmente opuesta y a una distancia de 1 cm del
borde opuesto de la placa. Se incub el tiempo adecuado y se observ de forma diaria.
Adicionalmente se sembraron placas control con cada uno de los patgenos evaluados, de
forma individual, para poder comparar el crecimiento del patgeno enfrentado.
Los patgenos evaluados fueron: R. stolonifer, B. cinerea, F. graminearum, A. alternata, A.
oryzae.
La magnitud de la inhibicin fue cuantificada segn la siguiente expresin:
PICR = (R1 R2)/R1 x 100, donde R1 es el radio del patgeno testigo y R2 es el radio del
patgeno en el cultivo dual.
Identificacin molecular
Las cepas se cultivaron en medio YES (extracto de levadura y sacarosa) a 28C durante 5
das. Luego del tiempo de incubacin se separ el micelio y se realiz la extraccin de
ADN. Se amplific la regin ITS. Los amplicones se secuenciaron y las secuencias se
compararon con la base de datos del GenBank.
Resultados y discusin
A partir de las diluciones sembradas en DRBCA se logr aislar un total de 99 hongos
filamentosos, de los cuales se seleccionaron los que se muestran en la tabla para iniciar los
cultivos duales:
Cdigo
D111
Origen
Isla Ardley
D4412
D323
Costa BCAA
Muestra
Suelo con musgo y materia
fecal
Tierra con materia orgnica
variada
Materia orgnica variada
D412
D362
AM1
D301
Drake
Costa BCAA
Zona Tanques Rusos
Catedral
Suelo de costa
Madera
Madera
Raspado roca
Radio en
enfrentamiento (cm)
2,8
2,2
2,2
1,7
Radio en control
(cm)
5,5
6,5
6,5
6
Radio en
enfrentamiento (cm)
3,9
3,5
2,5
3,7
2,7
Radio en control
(cm)
7
7
5,9
5,5
3
Radio en
enfrentamiento (cm)
2,6
3,1
2,9
2,3
2,8
Radio en control
(cm)
7
4,5
5,9
5,5
3
Radio en
enfrentamiento (cm)
3,5
3
2,2
Radio en control
(cm)
5,5
6,5
3,7
Radio en
enfrentamiento (cm)
Radio en control
(cm)
PICR
49
66
66
72
D4412
Patgeno enfrentado
R. stolonifer
B. cinerea
F. graminearum
A. alternata
A. oryzae
PICR
44
50
58
33
10
D323
Patgeno enfrentado
R. stolonifer
B. cinerea
F. graminearum
A. alternata
A. oryzae
PICR
63
31
51
58
7
D412
Patgeno enfrentado
R. stolonifer
B. cinerea
A. oryzae
PICR
36
54
41
D301
Patgeno enfrentado
PICR
R. stolonifer
B. cinerea
F. graminearum
A. alternata
4,6
3,3
3,9
3,6
6,5
6,5
6,5
6,5
29
49
40
45
D362, AM1 fueron evaluados frente a la misma serie de patgenos, observndose que no
eran capaces de inhibir el crecimiento de ninguno de ellos.
Identificacin
Al momento se ha llegado a esclarecer el gnero de dos de las cepas, cuyos cdigos son
D111 y D4412. La primera cepa pertenece al gnero Aspergillus, y la ltima al gnero
Cosmospora.
Conclusiones y perspectivas
Los resultados preliminares son alentadores; de 7 cepas evaluadas, 5 resultaron tener
capacidad de inhibir, en distinta medida, a hongos fitopatgenos.
Como perspectivas se prevee llevar a cabo ensayos con el resto de las cepas aisladas frente
a hongos, as como la realizacin de ensayos para evaluar la inhibicin de bacterias
patgenas, y la identificacin de todas las cepas que muestren actividad antimicrobiana.
Agradecimientos: Instituto Antrtico uruguayo (IAU), PEDECIBA Qumica
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Introduccin
En la naturaleza podemos encontrar diversas condiciones desfavorables para el
crecimiento de algunos microorganismos. Sin embargo, algunos seres vivos son capaces de
adaptarse a distintas condiciones extremas, ya que presentan diferentes determinantes de
resistencia para combatir el estrs que se pueda generar. Dentro de los ambientes
desfavorables ms extremos existentes en la tierra est el territorio Antrtico, ya que es el
lugar ms fro y seco del planeta. Estudios han demostrado que las bajas temperaturas y
sequa son condiciones que inducen la generacin de ROS en bacterias (DAmico y cols., 2006;
Potts, 1994). Sin embargo, en los ltimos aos se han aislado y reportado una gran variedad
de microorganismos de la Antrtica, siendo estas resistentes tanto a las condiciones
ambientales, como tambin a metales y antibiticos (De Souza y cols., 2006; Lo Giudice y cols.,
2013). Especficamente nuestro grupo de laboratorio hace unos aos realiz una expedicin
al territorio Antrtico obtenindose finalmente 6 cepas resistentes a telurito, un metaloide
con una baja distribucin en la naturaleza. Las cepas encontradas son 35 a 575 veces ms
resistentes a telurito que una cepa sensible Escherichia coli, las cuales fueron identificadas
segn la secuencia del gen de rRNA 16S (Arenas y cols., 2014).
Nuestro laboratorio se ha especializado en el estudio molecular de la toxicidad de
telurito, ya que este compuesto es 2,5 veces ms txico que mercurio en una cepa sensible
como E. coli. Se ha descrito que una vez que ingresa a la clula este compuesto es reducido
generando un fuerte dao oxidativo ya que provoca un aumento en los niveles de especies
reactivas de oxgeno (Summer y Jacoby., 1977; Prez y cols., 2007). Sin embargo, en la naturaleza
se han identificado diversos mecanismos de resistencia presentes en plasmidios y
cromosomas bacterianos. Estos genes que le otorgan resistencia no son comunes en todas
las bacterias, y principalmente se relacionan con tener un efecto directo en el txico, como
modificacin qumica (reduccin a Te (0) y volatilacin como especies metiladas (Chasteen y
cols., 2009).
cristales de teluro al ser expuesta al txico cercana a la membrana celular por microscopa
electrnica de barrido (SEM) y que tiende a agruparse (Fig. 1). Por otra parte, estudios del
consumo de Te intracelular, da cuenta que es poco el telurito que ingresa a esta clula
incluso a 48 horas de ser tratadas (Fig. 2). Finalmente con el objetivo de estudiar qu genes
especficamente juegan un rol fundamental en la resistencia, se secuenci el genoma de esta
bacteria, observndose la presencia de genes previamente relacionados con la resistencia a
telurito como el opern Ter (opern encontrado en plasmidios de Alcaligenes sp entre otros
(Jobling y Ritchie.,1987) (Fig. 3); tambin de algunas flavoprotenas (familia de protenas con
la capacidad de reducir telurito a su estado elemental, como Glutatin reductasa (Pugin y
cols., 2014) y nitrato reductasas (Sabaty y cols.2001)); y 2 tiopurina metiltransferasas (PrigentCombaret y cols., 2012). Adems se puede distinguir la presencia de genes que le otorgan
resistencia a otros metales y genes involucrados en la sntesis de metabolitos como Glicina
Betana, los cuales se han descrito que aumentan en presencia de telurito (Tremaroli y cols.,
2009), por lo que podran estar dando resistencia a ste.
Materiales y Mtodos
Secuenciacin gen 16S RNA: El producto de PCR generado con los primers 8F y
U1492R fue enviado a Macrogen (Korea) para su secuenciacin. La secuencia se analiz
usando BLASTN y los rboles filogenticos se construyeron con MEGA v6.
Composicin de cidos grasos: se determin mediante cromatografa de gases en
el DSMZ Institute de Alemania, para ello se enviaron 70 mg de clulas liofilizadas.
SEM: Las clulas tratadas con distintas concentraciones de telurito fueron
centrifugadas y al pellet se le adicion glutaraldehdo en 0,2M de buffer fosfato pH=7,4
Luego de varios pasos de lavado se tieron las muestras con acetato de uranio, posterior al
lavado se secaron y se observaron por microscopa de bajo voltaje como se publica en
Arenas y cols., 2014.
Consumo de Telurito: El Teluro intracelular se determin por ICP-EOS, las clulas
fueron tratadas con MIC a telurito por 0, 24 y 48 horas, luego se lavaron los pellets, se
rompieron por sonicacin y se trat con xido ntrico al 2%, previo a pasar por el equipo las
muestras fueron filtradas.
Secuenciacin Genoma: El DNA cromosomal fue secuenciado por Illumina
HiSeq2000 en Macrogen S.A. Las lecturas obtenidas fueron filtradas y ensambladas usando
A5pipeline, para la prediccin de modelos gnicos se utiliz el programa Glimmer y para la
reconstruccin metablica usando PRIAM software.
Resultados y Discusin:
Los resultados del gen 16s RNA fueron comparados con otras secuencias utilizando
BLASTN y MEGA generndose el mayor porcentaje de identidad con la cepa
Psychrobacter glacincola. As tambin, se corrobor que pertenece al gnero
Psychrobacter por las seales de referencia de perfiles de cidos grasos, observndose que
el cido graso 18:1 w9c corresponde al 63,8 % de su composicin.
Asimismo, se observ que esta bacteria se agrupa cuando es expuesta a distintas
concentraciones de telurito (Fig. 1) y que se acumulan grnulos de Te (0) en su interior
(Datos no mostrados). Adems anlisis del consumo intracelular del txico aumenta
levemente la concentracin del txico en el tiempo. Lo que podra indicar que si bien
ingresa telurito sta concentracin no es proporcional a la concentracin tratada (Fig. 2),
existiendo posiblemente mecanismos que impidan la entrada del txico, ya sea por una
disminucin en el consumo o alguna molcula que podra estar secuestrando el txico.
h
48
h
24
Sobrenadante
Lavado
Pellet
Te ( g/mL)
Consumo de K2TeO3
200
180
160
140
120
100
10
8
6
4
2
0
puede estar dado por uno o varios genes, como los descritos anteriormente (o nuevos
determinantes) los que estn siendo actualmente dilucidados por estrategias de Biologa
Molecular como genotecas y/o transposones), los cuales participan directamente en la
detoxificacin de telurito o en una disminucin de la entrada de ste.
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bltica. Lo mismo sucede con el porcentaje de identidad del genoma, que alcanza el 98%
para las diversas especies de Shewanella baltica.
Con el fin de identificar las posibles causas de las variaciones fenotpicas entre
aislados, el genoma del aislado Shewanella sp. fue secuenciado y el borrador generado fue
Las comunidades bacterianas endolticas estn formadas por bacterias capaces de colonizar
las fisuras, grietas y poros de las rocas. En ambientes extremos del planeta, como es el
presente en la Antrtida, las rocas pueden representar el principal refugio para la vida
bacteriana ya que proveen a las bacterias de proteccin frente a la alta radiacin UV, la
desecacin, los vientos y las fluctuaciones de temperatura (Wierzchos et al., 2012).
Adems, los depsitos minerales presentes en las rocas, pueden ser usados como nutrientes
y tambin como fuentes de energa (Walker y Pace, 2007). Las comunidades endolticas son
los ecosistemas bacterianos ms simples conocidos hasta el momento, estimndose la
presencia de tan slo cientos de especies por nicho. No obstante, estos nichos presentan alta
diversidad, encontrndose alfa, beta y gama Proteobacterias, Actinobacterias, Firmicutes y
Bacteroidetes. Esto convierte a las comunidades bacterianas endolticas en un nicho muy
interesante desde el punto de vista ecolgico, por tratarse de ecosistemas modelo simples y
ubicuos con una importante fuente de biodiversidad gentica (Walker y Pace, 2007).
Recientemente, Chan y colaboradores (Chan et al., 2013) usaron una aproximacin de
metagenmica para analizar el potencial metablico de una comunidad endoltica antrtica
e interesantemente encontraron un gran nmero de posibles genes implicados en la
tolerancia/resistencia a metales pesados. Por consiguiente, el estudio de estas comunidades
de particular inters para disciplinas como la geologa y biogeoqumica, ya que el
conocimiento de los mecanismos empleados por estos microorganismos ayudara a
comprender los ciclos biogeoqumicos, la biodinmica de las rocas, la meteorizacin y la
biomineralizacin. Por otra parte, son de potencial inters biotecnolgico para la
prospeccin de bacterias que puedan emplearse en la biorremediacin y biotransformacin
de metales pesados.
Con el objetivo de contribuir al conocimiento de las comunidades endolticas antrticas y
conocer la capacidad de estas bacterias de tolerar y/o biotransformar metales, nos
propusimos en este trabajo analizar la respuesta de bacterias cultivables aisladas de rocas
antrticas a la presencia de distintos metales.
Los objetivos especficos fueron: 1) Identificar el gnero de los aislamientos presentes en
una coleccin disponible en el laboratorio obtenida a partir de rocas colectadas en la
pennsula Fildes de la isla Rey Jorge, Antrtida. 2) Caracterizar la morfologa y fisiologa
de los aislamientos y 3) Analizar la respuesta bacteriana a la presencia de diferentes
metales.
Material de partida
Se emple para este trabajo, una coleccin de 66 aislamientos obtenidos a partir de cinco
muestras de rocas (I, P1, P2, P3 y P4) colectadas en los alrededores de la Base Cientfica
Antrtica General Artigas (BCAA) ubicada en la Pennsula de Fildes de la Isla Rey Jorge
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Introduccin
En las aguas ocenicas el bacterioplancton representa la mayor parte de la biomasa (Granli et al.
2004), juega un papel clave en el ciclo de nutrientes y constituye un factor importante en el flujo
de carbono (Ducklow 2000). Adems, en las regiones templadas y polares es fundamental para
las interacciones oceno-atmosfra y la red trfica ocenica (Prabagaran et al. 2007). En Caleta
Potter (Isla 25 de Mayo/King George, Shetland del Sur, Antrtida) y en otras zonas marinas
costeras antrticas, a pesar de existir un alto nivel de nutrientes, no ha sido frecuente observar
florecimientos apreciables del fitoplancton en los meses de verano (Schloss y Ferreyra 2002). Si
bien esta situacin ha tendido a cambiar en los ltimos aos, probablemente debido al
calentamiento global (Schloss et al. 2014), ha sido la situacin imperante en la zona al menos
hasta el ao 2010. Bajo esta condicin, el bacterioplancton parece ser el principal responsable de
la incorporacin de los nutrientes en biomasa, permitiendo que estn disponibles para los niveles
trficos superiores. Sin embargo, hasta el momento no existen trabajos que describan la
estructura de la comunidad del bacterioplancton de Caleta Potter ni sus variaciones temporales y
espaciales. Para ello, los estudios independiente de cultivo son esenciales, debido a que slo una
pequea fraccin del bacterioplancton puede cultivarse (Amann et al. 1995).
El objetivo del presente trabajo fue estudiar, mediante la construccin de bibliotecas de clones
del ADNr 16 S, la estructura y la variacin espacial del bacterioplancton de Caleta Potter en tres
zonas con diferente salinidad, as como su dinmica interestacional (verano-invierno).
Materiales y Mtodos
En julio 2008 y enero 2009 se tomaron muestras (10 l) de agua superficial, utilizando botellas
Niskin, en tres sitios de Caleta Potter: estacin 1 (E1: 62 13.935'S, 58 39.990'O), en la zona
interior de la caleta; estacin 2 (E2: 62 14.011'S, 58 41.443'O) en la zona externa y estacin 3
(E3: 62 14.064'S, 58 39.402'O) en la desembocadura del principal arroyo de deshielo. El agua
se filtr a travs de membranas de 3 y 0,22 m. A partir del filtro de 0,22 m se aisl el ADN
genmico mediante un kit comercial y se amplific el gen del ARNr 16S usando los primers:
27f y 1492r. A partir de los productos de PCR se construyeron 5 bibliotecas de clones (E1
invierno, E2 invierno, E1 verano, E2 verano, E3 verano) y se seleccionaron al azar entre 170 y
180 colonias blancas de cada una. Luego de eliminar las quimeras mediante el programa
BELLEROPHON, la secuenciacin de los amplicones rindi 883 secuencias entre las cinco
bibliotecas. Las secuencias fueron alineadas usando el programa Clustal Omega-Multiple
Sumado a ello, es frecuente que la zona de estudio se congele durante el invierno, con la
concomitante reduccin de la radiacin solar que puede alcanzar la superficie del agua lquida
que subyace a la capa de hielo.
Phyla
Clase
Actinobacteria
Actinobacteria
0,63
0,64
4,74
6,91
22,63
Planctomycetes
Phycisphaerae
0,00
0,64
0,00
0,53
1,58
0,00
0,64
1,58
0,00
0,53
15,82
35,03
28,95
22,87
24,21
0,63
0,64
0,53
1,60
1,58
Gammaproteobacteria
25,95
14,01
15,26
10,64
10,53
Deltaproteobacteria
0,00
0,64
0,00
0,00
0,00
Alphaproteobacteria nc
1,90
3,82
2,11
3,19
0,53
Gammaproteobacteria
nc
44,94
29,30
25,26
20,74
0,53
0,63
0,64
0,00
1,06
0,53
Flavobacteriia
8,86
10,83
20,00
21,28
19,47
Cytophagia
0,00
0,64
0,53
1,60
1,58
Sphingobacteriia
0,00
0,00
0,00
0,00
3,68
0,00
1,27
0,53
1,06
6,32
0,00
0,00
0,53
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
2,13
0,00
0,00
0,00
0,00
4,26
0,00
Latescibacteria
0,00
0,00
0,00
0,00
0,53
Candidatus
Saccharibacteria
0,00
0,00
0,00
0,00
2,63
Bacteria nc
0,63
1,27
0,00
2,13
3,16
Cyanobacteria/
E1
verano
E1
invierno
E2
verano
E2
invierno
E3
verano
Chloroplasto
Proteobacteria
Alphaproteobacteria
Betaproteobacteria
Proteobacteria
nc
Bacteroidetes
Bacteroidetes nc
Firmicutes
Bacilli
Marinimicrobia
Nitrospinae
Nitrospinia
Tabla 1. La estructura de la comunidad del bacterioplancton a nivel de Phyla y Clases presentes en Caleta Potter. Los
valores representan porcentajes de los taxa presentes en cada biblioteca. Los nmeros en negrita representan los
porcentajes ms altos. nc: no clasificadas.
Adems, debe mencionarse la casi total ausencia de cianobacterias en el rea de estudio (al igual
que en muchas otras reas marinas antrticas), las cuales representan el principal grupo de
microorganismos productores primarios en muchas regiones del planeta. Todos estos factores
podran sugerir que los Rhodobacterales podran jugar un rol importante como productores
primarios en el ecosistema de Caleta Potter, ya que como ha sido reportado previamente, algunos
grupos son capaces de fotosintetizar incluso utilizando longitudes de onda del infrarrojo cercano,
como los gneros marinos Roseobacter y Erythrobacter (Sato-Takabe et al. 2012). Por otro lado,
nuestros resultados sugieren que la estructura del bacterioplancton de Caleta Potter est
condicionada, al menos en parte, por la salinidad, efecto mencionado tambin para el
fitoplancton de la regin (Hernando et al. 2015). Por ello, dado los recientes incrementos en el
aporte de aguas de deshielo y los tambin recientes cambios en cuanto a la presencia de
florecimientos fitoplanctnicos, tornan a estos registros del periodo 2008-2009 una valiosa
herramienta de comparacin para futuros estudios sobre los efectos de las consecuencias del
calentamiento global sobre el rico ecosistema marino de Caleta Potter.
Finalmente, el elevado nmero de ribotipos no clasificables segn el RDP (Cole et al. 2007),
principalmente dentro de la clase Gammaproteobacteria, representa un aporte original de
secuencias a las bases de datos. Dado que este trabajo es el primero en describir la estructura del
bacterioplancton en Caleta Potter, algunos de tales ribotipos no clasificables podran ser
endmicos del sitio en estudio o simplemente no haber sido descriptos aun en otros sitios del
mundo.
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REA DE ECOLOGA Y
BIODIVERSIDAD
Introduction
Mercury (Hg) is identified as pollutant of great concern, however in contrast
with the established long-term research programs in the Arctic, little is known about
mercury biogeochemistry in Antarctica. While a few publications explore Hg levels in
some biotic/abiotic compartments, an integrated study is still missing.
Comparatively to other locations in Antarctica, environmental studies in
Deception Island (South Shetlands Archipelago) are scarce and are of great interest
since it has potential sources of trace element related to the volcanic activity, as well
as anthropogenic input due to its history, tourism and two scientific stations. Although
Hg levels in Deception were previously analysed in lichen specie Usneaantarctica by
Bargagli et al. (1993), to the best of our knowledge this is the first integrated mercury
study, which was initiated in Deception Island in 2011 (Mo de Ferro et al., 2014).
Our studies in this volcanic island aims to better understand the Hg cycle in
Antarctica particularly by accessingthe sources, fluxes, pathways and bioavailability
of mercury in this ecosystem.
Materials and Methods
In December 2011 and February 2014 field campaigns took place in Deception
Island (Figure 1). Sediments, ice, water and suspended particulate matter was
collected in Mecon River and in the Foster Bay during 8 consecutive days. During
this period Hg fluxes between fumarole soil/water and atmosphere were also measure
in fumaroles at Fumarole Bay. Samples were processed in the laboratory of Gabriel de
Castilla Spanish Antarctic Station and transported to Lisbon preserved in HNO 3 or
HCl (water) or dried (sediments/soils). In the laboratory all samples were analysed for
total mercury (particulate HgP and dissolved HgD), methylmercury (MeHg) and
other interpretative physico-chemical parameters (e.g. organic carbon, Al, Si, Fe).In
the laboratory trace element bioavailability tests were also performed using the
method described by Cabrita et al (2014).
A three-dimensional hydrodynamic model was implemented using Mohid
water modeling system. The numerical computation has been carried out on a spatial
domain that represents Port Foster and the surroundings using a grid with a uniform
horizontal resolution of 50 m. The bathymetry was then created and the tide level and
phase of the tidal components imposed (Fes2004 solution). The barotropic tide was
validated, and the study of internal tides is underway with the aim of understanding
their role in the mixing processes. Finally the Hg data was applied on the model to
better understand the Hg circulation in the Bay.
the tide gauge data presented in Vidal el al (2011). A first approach to the circulation
of Hg and MeHg was done using Lagrangian tracers, allowing visualizing their
movement in the aquatic environment and concluding that the tidal currents have
almost no impact in the elements dispersion. The ultimate goal is to have a threedimensional baroclinic model that will help to understand the role of Port Foster
hydrodynamics on the dispersion of elements such as mercury, taking into account the
role of tides, bathymetry, the stratification of the water column and the forcing due to
the wind.
Conclusions
The preliminary results obtained in this work pointed to a continuous input of Hg to
the Deception ecosystem due to volcanic emissions. This input and the special
biogeochemical conditions in Port Foster Bay water promotes Hg methylation and the
presence of more bioavailable Hg species that can, in fact, be uptake by aquatic
organisms.
Acknowledgements: The authors would like to thank to the Portuguese Polar Program (PROPOLAR)
funded by the Fundaopara a Cincia e Tecnologia(FCT)and to the Spanish Polar Program for
providing access to the Gabriel Castilla Antarctic Station.The authors would like to acknowledge FCT
for the Project UID/QUI/00100/2013.
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4
British Antarctic Survey, Natural Environment Research Council, Cambridge UK.
8
Instituto Nacional de Cincia e Tecnologia Antrtico de Pesquisas Ambientais INCT-APA, Brasil.
Introduction
Individual variability in foraging strategies may cause intra-population
variability to exposure to fisheries, which is sometimes associated to sex-specific
foraging strategies (Votier et al 2010, 2013). Southern Giant Petrels (SGPs) are circumAntarctic distributed; in the Atlantic Ocean its breeding distribution goes from
Patagonia to Antarctic waters. While Gonzlez-Sols et al. (2008) and Thiers et al
(2014) found that SGPs from sub-antarctic islands (~50S) tended to keep their centre
of dispersion during the non-breeding season, isotope analysis (Forero et al 2005, Rey et
al 2012) suggests that high Antarctic Populations shift their distribution during the nonbreeding season.
In this study we test the differences in breeding and non-breeding distribution of
Southern Giant Petrels breeding in Elephant Island (~61S) and test how the sex based
differences in non-breeding distribution explain the overlap with fisheries. Furthermore,
we evaluate the relation between fisheries within the current non-breeding distribution
with the population numbers from 1970 until nowadays.
Methods
We tracked 31 Southern Giant Petrels of Stinker Point , Elephant Island (fig 1)
from January to December (16 females and 15 males) with BioTrack Geolocators, in
2011 (n=12) and 2014 (n=19). Individual home range HR (95% Kernel Density),
individual foraging area FA (50% kernel density) were calculated using the KernelUD
function of the adehabitat R package (Calenge 2006).
Fishing vessel density was computed from the ship density shapefiles from
PASTA-MARE project (LuxSpace 2010). They calculated the density of ships on a
1x1 spatial grid from three month Satellite Automatic Identification System S-AIS
movement of 62000 vessels on a global scale. Historical fishing effort was calculated
from ICCAT. The information was crossed with the historical number of breeding pairs
from Petry (1994) for 80s and 90s, and our own data from 2009 to 2012. ANCOVA on
aod package (Lesnoff and Lancelot 2015) was done within the R environment to test
how the position of the FA (centroids) explains the fishing intensity within FA, between
sexes and periods.
Results
During the breeding period the distribution of males and females was similar,
however during non-breeding females moved towards Patagonian waters more often
than males, but in a smaller extent, both sexes used both Patagonia and Antarctic
Peninsula waters (fig 1). Both sexes tended to move north in the non-breeding period
(F1,58=106.6, P<0.001) but the females tended to use areas further north than males in
both periods (F1,58=6.24, P<0.01) which was highlighted by no differences in the
sex*period interaction (F1,58=1.38, P=0.25). As a result, females had a higher overlap
with areas of fishing activities (F1,58=8.78, P<0.01) mainly during non-breeding period
(F1,58=111.1, P<0.01) (Fig.2). The number of breeding pairs is enhancing, which
matches a decrease with fisheries in Patagonian waters (fig. 3) (R 2=0.71, =-0.39,
F1,9=22.1, P=0.001).
Figure 1. Breeding and non-breeding Home Range (thin line) and Foraging Areas (bold line) of males
and females overlaped with density of fishing vessels.
Figura 1. Zona de Vida (lnea delgada) y zona de alimentacin (lnea negrita) de machos y hembras
Sobrepuestos con la densidad de la pesca.
Figure 2. Relations between sex, foraging area distribution (Latitude centroid) and fishing vessels density
during breeding (circle) and non-breeding (triangles) distribution for females (dark grey) and males (light
grey).
Figura 2. Relaciones entre sexo, distribuicin de alimentacin (latitude) y densidad de la pesca en las
zonas de alimentcion durante perodos reproductivo (crculo) y no-reproductivo (tringulos) de las
hembras (gris oscuro) y los machos (gris claro).
Figure 3. Year number of SGPs breeding pairs on Stinker Point (left), year fish landings on Patagonia
reported to ICCAT (middle) and the relation between number of SGPs breeding pairs and fish landings
reported to ICCAT. Linear trend SE.
Figura 3. Pares reproductivos anuales de pardelas gigantes en Stinker Point (izquierda), desembarques
pesqueros anuales en la Patagonis reportados a ICCAT (medio) y la relacin entre numero de pares
reproductivos y desembarques pesqueros en la Patagonia. Tendencia lineal SE.
Discussion
The individuals from Elephant Island clearly shift their home range to the north during
the non-breeding season, in strong contrasts to populations of South Georgia (54S)
(Gonzlez-Sols et al. 2008) and Crozt Islands (46S) (Thiers et al 2014) which
tended to keep their centre of dispersion around the breeding colony during the nonbreeding season. While such movements during the non-breeding season had already
been suggested for high Antarctic Populations of Southern Giant Petrels through isotope
analysis (Forero et al 2005, Rey et al 2012) no tracking studies had yet been published
on this topic.
While sexual differences with fisheries overlap are expected, previous studies found that
males interacted with fisheries more than females (Votier et al 2013, Granadeiro et al
2014). Sex differential distribution should explain the sexual differences in the foraging
ecology of SGPs with males feeding frequently on carrion and preying upon penguins
(Hunter 1984, Gonzlez-Sols et al 2000ab) which potentially is why their main feeding
areas were near the ice-edge during the non-breeding period.
Conclusion
We found a sex and size based differential distribution which caused a higher degree of
exposure to fisheries. Such finding highlight a potential effect of fisheries on the nonbreeding distribution of females. Fortunately this population is increasing, so effects of
reductions on fisheries may be acting on the population (Copello & Quintana 2009).
Acknowledgments
CNPq, FAPERJ, Brazilian Antarctic Program, SECIRM, Brazilian Navy, BAS.
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INTRODUCCIN
La dureza de las condiciones abiticas antrticas es la causa de que slo haya dos especies
nativas de plantas vasculares: Deschampsia antarctica Desv. (Poceas) y Colobanthus
quitensis (Kunth.) Bartl. (Cariofilceas). Su estacin de crecimiento queda reducida al corto
periodo en que la nieve se funde, dejando las plantas descubiertas e hidratadas, y la
temperatura media es superior a 0 C. Varios estudios han demostrado que estas especies
viven en condiciones subptimas en la Pennsula Antrtica, ya que su temperatura ptima
de fotosntesis se encuentra en el rango entre los 10 y 14 C (D. antarctica y C. quitensis,
respectivamente) (Xiong et al. 1999). Esta regin est especialmente amenazada por el
calentamiento global (IPCC, 2014), y de hecho se ha registrado un incremento de 3.7 C en
el ltimo siglo (Convey, 2013). En consecuencia, es lgico pensar que la productividad
fotosinttica de las dos especies mencionadas aumentar al aumentar la temperatura media.
Pero, se vern afectados tambin otros procesos que puedan repercutir en una disminucin
de su resistencia a las bajas temperaturas como la capacidad de fotoproteccin? El presente
estudio se basa en la siguiente hiptesis: las plantas que crecen a mayor temperatura
tendrn mayor productividad fotosinttica, pero perdern capacidad de fotoproteccin, al
derivar preferentemente la energa lumnica que reciben por la va fotoqumica. Para
comprobar esta hiptesis se tomaron medidas de fluorescencia en terreno en plantas en
condicin natural o espacio abierto (EA) y en ejemplares dentro de cmaras de
calentamiento pasivo (open top chambers, OTC).
MATERIALES Y MTODOS
Calentamiento pasivo: En diciembre de 2012 se instalaron 10 OTC cerca de la base polaca
Henryk Arctowski, en la baha Almirantazgo, Isla Rey Jorge, Islas Shetland del Sur,
Antrtida. Al proteger del viento y concentrar los rayos solares, estas estructuras
proporcionan un calentamiento pasivo, que por tanto sucede principalmente durante el da
(Marion et al., 1997).
Datos climticos: Los datos climticos se recogieron durante dos estaciones de crecimiento
sucesivas: 2013-2014 (10 de Diciembre-8 de Marzo) y 2014-2015 (10 de Enero-5 de
Marzo). Se registraron valores cada hora de PAR y temperatura del aire.
Medidas de fluorescencia: Para el registro continuo de datos de fluorescencia se instal un
Moni-DA-Quad PAM (Walz, Effeltrich) que tom datos cada hora en dos ejemplares de D.
A pesar de las claras diferencias en temperatura entre OTC y EA, la particin de energa de
ambas especies no se vio modificada por el calentamiento (Figs. 1 y 2). Esto puede deberse
al corto espacio de tiempo que las plantas llevaban creciendo dentro de OTC: una
temporada en el caso de D. antarctica y dos en el de C. quitensis. Sin embargo, tambin es
posible que no se vean diferencias en el reparto porque, en contra de lo que se postulaba, la
va fotoqumica no est limitada en las condiciones naturales en las que las plantas viven,
de forma que la energa que se deriva por esta va es mxima ya en las condiciones control,
por lo que el reparto no cambia, aunque la temperatura aumente. El mayor crecimiento que
se ha podido observar en las plantas dentro de OTC se debera entonces nicamente al
aumento del periodo en que stas estn activas y a la ventaja de fotosintetizar a
temperaturas algo ms elevadas, pero no a un aumento proporcional de la asignacin de
energa a la va fotoqumica en detrimento de las otras vas. Los datos absolutos de toda la
temporada apoyan la importancia del alargamiento de sta al inicio de la estacin, puesto
que la diferencia entre OTC y EA es ms acusada en los valores de D. antarctica que en C.
quitensis, donde no hubo seguimiento al principio de la temporada.
OTC
EA
121%
121%
11464
251%
272%
10967
24690
23023
632%
612%
58272
54458
E(NO)
E(NPQ)
ETR
Fig. 1: Particin de energa en plantas de C. quitensis que crecen dentro de una OTC (izqda) o en espacio
abierto (dcha.). Datos de porcentaje (arriba) e integral para toda la temporada (abajo).
Energy partitioning of C. quitensis plants either growing inside an OTC (left) or in open space (EA, right).
Percentage data (above) and integral of the whole season (below).
OTC
EA
121%
121%
28003
22300
282%
231%
63413
41677
652%
601%
123126
136460
E(NO)
E(NPQ)
ETR
Fig. 2: Particin de energa en plantas de D. antarctica que crecen dentro de una OTC (izqda) o en espacio
abierto (dcha.) Datos de porcentaje (arriba) e integral para toda la temporada (abajo).
Energy partitioning of D. antarctica plants either growing inside an OTC (left) or in open space (EA, right).
CONCLUSIN
La particin de energa no difiere significativamente entre las plantas sometidas a
calentamiento pasivo y las plantas control. Este resultado puede ser consecuencia de un
corto periodo experimental, o ms probablemente del hecho de que las plantas ya explotan
al mximo la va fotoqumica en condiciones naturales de terreno.
Agradecimientos: PIA ART 1102, INACH, Tripulacin Rompehielos Almirante scar
Viel, Base Polaca Henryk Arctowski.
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mientras que para 150 mM la germinacin comenz al da 7 con un porcentaje por debajo
del 10%. Al final del ensayo hubo un 100% de germinacin en el control y 50 mMde NaCl,
mientras que para 150 mM fue slo de 28%. En la Poblacin Conguillio (pC) la
germinacin comenz al da 5 en el controly los 50 mM de NaCl, alcanzando el mayor
porcentaje al da 7 en el control (Fig 1b). A diferencia de pPA, pC mostr slo un 72% de
germinacin en 50 mM y fue inferior al 20% en la ms alta concentracin.
Figura 1. Efecto del NaCl y los iones Cu en la germinacin in vitro de C. quitensis poblaciones La Marisma y
Conguillio. a y b) Efecto del NaCl a 0 (control), 50 y 150 mM.b y c) Efecto de Cu (II) a 0 (control), 100 y 500
M. a y c) Poblacin La Marisma (pPA). c y d) Poblacin Conguillio (pC).
Letrasdiferentesindicandiferenciassignificativas (p>0,05).
Figure 1. Effect of NaCl and Cu ions in the in vitro germination of C. quitensis at La Marisma and
Conguillio populations. a and b) Effect of NaCl to 0 (control), 50 and 150 mM.c and d) Effect of Cu (II) to
0 (control), 100 and 500 uM. a and c) La Marisma population (pPA). c and d) Conguillio opulation (pC).
Differentlettersindicatesignificantdifferences (p> 0.05).
Tabla 1. Efecto del NaCl y los iones Cu (II) en la supervivencia y en la recuperacin de plntulas de C.
quitensis germinadas in vitro de las poblaciones La Marisma (pPA) y Conguillio (pC). Letras diferentes
indican diferencias significativas (p>0,05).
Table 1.Effect of NaCl and Cu (II) ions in the survival and recovery of C. quitensis seedlings germinated in
vitro
from
La
Marisma
(pPA)
and
Conguillio
(pC).
Populations.
Differentlettersindicatesignificantdifferences (p> 0.05).
Las plntulas que sobrevivieron a los diferentes tratamientos, fueron capaces de recuperarse
en los medios en ausencia de NaCl o iones Cu (Tabla 1). No hubo diferencias significativas
entre tratamientos ni la TCR ni la biomasa totalen ninguna de las dos poblaciones. En
general el crecimiento relativo fue muy bajo para ambas poblaciones, incluso con valores
negativos para pPA (-0,03 y -0,01, para NaCl y iones Cu, respectivamente). Los valores de
biomasa para pC fueron mayores que para pPA pero sin diferencias significativas entre los
tratamientos para ambas poblaciones.
Discusin:Las poblaciones de C. quitensis mostraronrespuestas diferencialesal NaCl y los
iones Cu. En la germinacin en presencia de NaCl, se evidenci un efecto negativo
directamente relacionado con el aumento de la concentracin, el cual fue ms evidente en
pC. Similares efectos han sido observados en especies que habitan en climas templados
como Cenchrus ciliaris23, Thymus broussonetii24, Prosopis juliflora25y Diplotaxis harra25.
En todos los estudios se emplearon concentraciones similares a las usadas en este trabajo,
observndose los mismos resultados, incluso D.harrafue incapaz de germinar despus de
20 das en presencia de 150 mM de NaCl 26. Si bien la germinacin no fue inhibida, se
produjo un efecto negativo en la capacidad de sobrevida de estas plntulas, llegando a
valores por debajo del 25% en la concentracin ms alta. Khan& Ungar26 sostienen que en
condiciones donde existe una alta concentracin de sal, la supervivencia est por sobre la
germinacin, reconocindose que esta es vital para que las plantas se puedan establecer con
xito, una vez que han superado los efectos negativos del estrs salino en la
germinacin.Por lo tanto es fundamental que se presente tolerancia a la salinidad en esta
etapa, puesto que le permite a la planta un buen establecimiento y crecimiento en suelos
salobres17,25. Se ha demostrado que el exceso de hierro y de cobre inducen efectos
inhibitorios sobre la germinacin de semillas y el crecimiento temprano de las plntulas 27.
En Triticumaestivumconcentraciones de 100 y 300 M de Cu no produjeron efectos
significativos sobre la germinacin, slo a 500 Mse inhibi este parmetro 28, en cambio
las semillas de C. quitensis de ambas poblaciones fueron capaces de germinar a esta
concentracin. El Cu interfiere con varios procesos fisiolgicos y acta como un potente
inhibidor del crecimiento vegetal29, efecto que slo se vio reflejado en pC dnde la ms alta
concentracin de iones Cu caus una disminucin significativa de la sobrevida respecto de
los otros tratamientos. En este trabajo no se detectaron diferencias significativas en la TCR
ni en la biomasa entre los tratamientos, en cambio, en estudios similares se comprob que
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19
20
Introduccin
La importancia de la respiracin en las plantas radica en que es el principal proveedor de
esqueletos carbonados y energa para una serie de procesos que incluyen mantencin de
gradientes inicos, captacin de nutrientes y carga floemtica, entre otros. La respiracin es un
proceso altamente sensible a la temperatura. Bajo condiciones naturales el grado de aclimatacin
de este procesova a estar determinado por el ajuste en la tasa respiratoria para compensar el
cambio en temperatura. Se han descrito dos tipos de aclimatacin de la respiracin a la
temperatura, la aclimatacin tipo I queinvolucra cambios en Q 10 (coeficiente de sensibilidad a la
temperatura cuando la T cambia en 10C) regulado por disponibilidad de sustrato y/o actividad
enzimtica;y aclimatacin tipo II, que se evidencia por un cambio en la curva de respuesta de la
respiracin a la temperatura que estara reflejando un cambio en la capacidad respiratoria (Atkin
et al. 2003).
En la actualidad, es ampliamente aceptado que la temperatura global incrementar durante el
prximo siglo (Hansen et al. 1999). Se ha indicado que este calentamiento podra ser ms
pronunciado durante la noche, cuando la respiracin se vuelve el proceso fisiolgico dominante
en el metabolismo de las plantas (Turnbull et al. 2003).Registros de temperatura de la Pennsula
Antrtica indican que sta ha incrementado a una tasa de 3,7C por siglo (Vaughan 2003). Esto
podra afectar a las nicas dos especies de plantas vasculares que han logrado colonizar la
antrtica, DeschampsiaantarcticaDesv. (Poeacea) y Colobanthusquitensis (Kunth) Bartl
(Caryophyllaceae). En ecosistemas de baja productividad como las regiones polares las prdidas
de carbono por respiracin pueden tener una fuerte influencia en el balance de carbono. La
capacidad de aclimatacin de la respiracin a incrementos de temperatura en especies
antrticasha sido poco estudiado (Xiong et al. 2000). Nosotros hipotetizamos que el
calentamiento generar un incremento de la tasa respiratoria de ambas especies.As, el objetivo
de esta investigacin fue evaluar en terreno el efecto diurno y nocturno del calentamiento sobre la
respiracin oscura,y determinar el posible grado de aclimatacin de la tasa respiratoria frente a un
futuro escenario de cambio climtico.
Metodologa
Cmaras de calentamiento pasivo (OTC) fueron instaladas en Diciembre de 2012 en poblaciones
de D. antarcticay C. quitensiscreciendo en Isla Rey Jorge, en las cercanas de la Base Polaca
Arctowski (62 09' S, 5828' W). Adicionalmente, sistemas de registro microclimtico (HOBO
U30) fueron instalados dentro y fuera de OTC, con lo cual se registr radiacin
Resultados y Discusin
El calentamiento generado por la OTC fue alrededor de 2 a
3C, siendo ms pronunciado al medio da (ver recuadro
dentro de Fig. 2B). Este incremento en la temperatura del
aire gener un incremento de la temperatura en ambas
especies,
principalmente en Deschampsiaantartica(Fig. 2D).Las mayores
temperaturas en el sitio de estudio no siempre fueron coincidentes con la radiacin PARincidente
(Fig. 2A y 2B), lo que sugiere que a pesar de haber una alta proporcin de das nublados durante
la estacin de crecimiento, las temperaturasse mantiene en un rango entre 2 a 6C.
El calentamiento produjo un incremento significativo de la respiracin de
Colobanthusquitensis(Tabla 1), lo que tiende a ser mayor durante la noche (Fig. 3B). Los
parmetros de sensibilidad de la respiracin a los cambios de temperatura al corto plazo (Q 10 y
Eo) no presentaron diferencias entre OTC y fuera de ellas durante el ciclo diario, lo que indicara
que el tipo de aclimatacin sera del tipo II. La separacin de las pendientes en la respuesta de la
respiracin (log de respiracin, Fig 3B) indicara que las mayores diferenciasentre OTC y fuera
de ellas fueron a bajas temperaturas. El incremento de R 10 podra estar relacionado con un
incremento en la temperatura ptima para la fotosntesis dentro de OTC (datos no mostrados).
Una mayor actividad fotosinttica durante las horas de luzgenerara una mayor disponibilidad de
sustrato,incrementando la tasa respiratoria durante la noche resultando en una mayor produccin
de energa en la mitocondria.Futuros anlisis de carbohidratos solubles ayudarn a determinar si
efectivamente es la disponibilidad de sustrato la que incrementa la respiracin bajo condiciones
de calentamiento y si tambin habra un ajuste dela aclimatacin tipo I en C. quitensis.
Tabla1. Parmetros de sensibilidad de la respiracin oscura calculados desde ecuacin de Arrhenius para ambas
especies de plantas antrticas creciendo en OTC (open top chamber) y EA (espacio abierto) desde curvas de
respuesta de la respiracin a la temperatura durante el da y la noche. ANOVA de dos das vas fue realizado donde
los factores fueron C (calentamiento), Cd (Ciclo diario) y la interaccin entre ambos (C x Cd). No significancia est
indicado por ns. Asterisco indica significancia por Prueba Tukey(P<0.05).
Table 1. Sensitivity parameters of dark respiration calculated from Arrhenius equation for both species of Antarctic
plants in OTC (open top chamber) and EA (open site) from respiration temperature response curves during day and
night. Two-Way ANOVA was performed where the factors were C (warming), Cd (Daily Cycle) and the interaction
(C x Cd). Not significance is indicated by ns. Asterisks indicate significant differences by Tukey test (P<0.05).
Colobanthusquitensis
R10
(moles CO2 m-2s-1)
Da
OTC
Noche
EA
OTC
ANOVA
EA
-1.620.18
-1.330.16
-1.710.21
-1.150.21
Eo
(J mol-1K-1)
392842992
532014395
512225899
591707218
Q10
1.850.11
2.160.14
2.120.17
2.390.24
Da
C< 0.05; Cd ns
C x Cd ns
C ns; Cd ns
C x Cd ns
C ns; Cd ns
C x Cd ns
Noche
Deschampsiaantarctica
R10
(moles CO2 m-2s-1)
OTC
EA
OTC
EA
-1.700.19
-2.140.11
-0.810.10*
-2.190.17
Eo
(J mol-1K-1)
364804295
489365873
380816536
466905663
Q10
1.700.10
2.040.15
1.760.16
1.970.15
Por otra parte, en Deschampsiaantarctica el efecto del calentamiento sobre la respiracin fue ms
pronunciado, generando un descenso significativo de la tasa respiratoria, el cual fue menor
durante la noche (Tabla 1). Los parmetros Q10y Eotienden a disminuir concalentamiento.Sin
embargo las diferencias no fueron significativas, indicando una baja sensibilidad al corto plazo.
La separacin de las curvas de respuesta de la respiracin (Fig 3D) indican un importante cambio
en la capacidad respiratoria por efecto del calentamiento. Por lo tanto,habra una aclimatacin del
tipo II en esta especie. Este resultado, probablemente refleja un ajuste en la respiracin que
minimiza las prdidas de carbono. Plantas aclimatadas a altas temperaturas generalmente
disminuyen su respiracin a mayores temperaturas (Slot et al. 2015). Un cambio en la capacidad
respiratoria refleja un completo ajuste en la respiracin generado por cambios en el tamao,
densidad de las mitocondrias y en la maquinaria enzimtica asociada.
Conclusin
Nuestros resultados indican que ante un incremento de la temperatura ambiental ambas especies
de plantas vasculares antrticas presentaran una aclimatacin del tipo II de la respiracin
mitocondrial.Sin embargo, la capacidad respiratoria se ajusta diferencialmente en ambas especies.
Una mejor comprensin de la respuesta de la respiracin y la fotosntesis de las plantas antrticas
son fundamentales para evaluar como el balance de carbono de ser afectado bajo un futuro
escenario de cambio climtico, lo cual podra complementar el rol de estas especies como
indicadores de cambio climtico.
Fig 3. Curvas de respuesta de la respiracin oscura (Rd) a la temperatura expresadas como funcin logartmica para
Colobanthusquitensis (A y B) y Deschampsiaantarctica (C y D).
Fig 3.Temperature response curve of dark respiration (Rd) showed as Log function forColobanthusquitensis (A and
B) andDeschampsiaantarctica(C and D).
Introduccin
El continente Antrtico ha sido categorizado como un laboratorio natural para los estudios del
cambio climtico a nivel global (Convey 2006) ya que ofrece un conjunto de ecosistemas clave que
permiten mejorar la compresin de las consecuencias del cambio climtico en la biota terrestre y
acutica (Huiskes et al. 2006). El 95% del continente presenta climas extremos que lo mantienen
cubierto por hielo y con temperaturas bajo cero durante todo el ao. Sin embargo, la Antrtida
martima, se caracteriza por presentar climas menos extremos, con temperaturas y precipitaciones
ms elevadas que en el continente (Toro et al. 2007). Estas condiciones, resultan en la presencia de
un gran numero de ecosistemas dulceacucolas, los cuales permanecen libres de hielo durante el
verano y que presentan comunidades con estructuras trficas relativamente simples, pero que
pueden ser muy diversas (Peck, 2005; Convey et al. 2008). Por ejemplo, pocas especies de
vertebrados terrestres son residentes de la Antrtida y aparte de las aves, la fauna terrestre se
compone principalmente de invertebrados, con solo dos especies de insectos holometbolos
(Convey y Block 1996): Parochlus steinenii y Belgica antarctica (Diptera: Chironomidae). La
mosca antrtica sin alas B. antarctica es endmica y ha sido ampliamente estudiada debido a que
presenta adaptaciones que le permiten vivir en condiciones con temperaturas bajo cero durante gran
parte del ao. Sin embargo, poco se sabe de la mosca alada P. steinenii, siendo uno de los animales
terrestres ms abundantes en la Antrtida (Convey y Block 1996). P. steinenii presenta un rango de
distribucin amplio, que se extiende desde el sur de Bariloche, en el continente sudamericano, a las
Islas Shetland del Sur en la Antrtida martima. En este contexto, los objetivos de este estudio son
1) contribuir al conocimiento actual sobre la distribucin y preferencias de hbitats de P. steinenii
en las Islas Shetland del Sur, 2) estudiar el rango trmico optimo de la especie y 3) proporcionar
una lnea base para realizar estudios que permitan proyectar cambios en su fenologa y distribucin
como consecuencia del cambio climtico global.
Materiales y Mtodos
rea de estudio. El estudio se llev a cabo en las islas Shetland del Sur (61-63S, 53-62O), en las
islas Decepcin, Livingston, Roberts, Nelson y Rey Jorge. El clima es caracterstico de la Antrtida
martima, con temperaturas que superan los 0C desde Diciembre a Marzo, humedad ambiental alta
(95%) y precipitaciones anuales de 450 mm aproximadamente (Hann y Reinhardt 2006). La
geomorfologa de las reas libres de hielo se caracteriza por presentar regiones periglaciales con
numerosos lagos permanentes y lagunas temporales que se encuentran cubiertas de hielo entre 9-10
meses al ao (Barsh et al. 1985).
Metodologa de muestreo, preferencias de hbitat y caractersticas fsico-qumicas. Las
expediciones fueron organizadas por el Instituto Antrtico Chileno (INACH) y se realizaron a bordo
del Buque AP Aquiles durante enero y febrero de 2014 y 2015. Los censos para determinar la
distribucin de P. steinenii se llevaron a cabo en las reas libres de hielo de las islas mencionadas y
en dos zonas de la Pennsula Antrtica (alrededores de la base Antrtica Chilena OHiggins y la isla
Litchfield). Se busc exhaustivamente en todos los ros, arroyos, lagunas y lagos accesibles durante
1 of 4
Pennsula Byers, isla Livingston (13 puntos); un segundo grupo compuesto por lagos que se
encuentran en Fildes, isla Rey Jorge (5 puntos); y un tercer grupo los lagos de isla Decepcin (2
puntos) (Figura 1B). Asimismo, el anlisis de distancia al vecino ms cercano realizado en el
programa Spatstat de R, confirma el patrn (Figura 2).
Figura 1. A) Distribucin de Parochlus steinenii a lo largo de las islas Shetland del Sur. B) rea de influencia (buffer) de 3.5 km en
las zonas de presencia de P. steinenii.
Figura 2. A) Grfico de variacin local en intensidad de presencias de P. steinenii en las Islas Shetland del Sur y Funcin de Ripley
L(r) r univariado para las islas muestreadas. La franja gris representa el envolvente crtico bajo la hiptesis nula de CSR. La
lnea de puntos en L(r) r representa la funcin de Poisson K bajo la Ho de CSR. La lnea solida representa la distribucin
observada de la especie estudiada (Test de Montecarlo, p= 0.039). B). Distribucin de las distancias a los vecinos ms cercanos para
cada ocurrencia registrada de P. steinenii en las islas Livingston, Decepcin y Rey Jorge. Los crculos punteados indican la
agregacin de ocurrencias en cada isla y las distancias entre cada punto. Al mismo tiempo, se observa la distancia entre cada isla.
Tolerancias trmicas.- Los datos de temperatura del agua, registrados para dos lagos habitados por
P. steinenii en la isla Rey Jorge, muestran un periodo de temperaturas sobre 0oC, entre noviembre y
3 of 4
marzo de cada ao (Figura 3A). Adems, P. steinenii presenta un rango amplio de tolerancias
trmicas, alcanzando un rango ptimo entre los 0-15oC (Figura 3B).
Figura 3. A) Temperatura minima, maxima y promedio del agua en dos lagos de la Isla Rey Jorge habitados por P. steinenii. B)
Rango de tolerancais trmicas de cada estado de desarrollo.
Discusin y Conclusiones
Con respecto a la distribucin de P. steinenii en las Islas Shetland del Sur, se puede concluir que
presenta una distribucin agrupada, siendo las islas Livingston y Rey Jorge las que presentan el
mayor nmero de presencias registradas por este estudio (Figuras 1 y 2). Es importante sealar que
estas islas presentan las reas libres de hielo de mayor tamao entre las Shetland del Sur y que
poseen un gran numero de lagos permanentes y otros cuerpos de agua dulce temporales, generados
por el deshielo durante la poca de verano. Los sitios permanentes proveen el hbitat ideal para P.
steinenii: lagos profundos con un nivel de agua estable, ros y arroyos con orillas rocosas y/o
musgos y lquenes acuticos. Con estos antecedentes, se podra concluir que probablemente P.
steinenii no sea una especie generalista en su eleccin de hbitats, ya que en cuanto a la Antrtida
martima se refiere, se vera restringida a lagos y otros cuerpos de agua dulce permanentes. Esta
especificidad en hbitat permitira que P. steinenii pueda ser utilizado como una especie indicadora
de los procesos asociados al cambio climtico global, por al menos dos razones: a) cualquier
cambio en las condiciones actuales (ej. aumento en reas libres de hielo) podra inducir una
expansin en su distribucin a sitios en los que actualmente no se registra su presencia (otras islas
en las Shetland del Sur o la Pennsula Antrtica) ya que adems, presenta un rango trmico optimo
amplio (Figura 3) y b) un aumento en las temperaturas actuales podra generar cambios en los
patrones fenologcos, alargando o acortando su periodicidad.
Agradecimientos
Agradecemos el soporte entregado por el proyecto FONDECYT 11130451 e INACH (Fl_03-13)
Referencias
Baddeley, A., Turner, R. (2000): Practical maximum pseudolikelihood for spatial point patterns. Australia and New
Zealand Journal of Statistics, 42, 283322.
Baddeley, A., Turner, R. (2005): Spatstat: an R package for analyzing spatial point patterns. Journal of Statistical
Software, 12, 142.
Convey, P., Block, W. (1996): Antarctic Diptera: Ecology, physiology and distribution European Journal of
Entomology 93, 1-13.
Convey, P. (2006): Antarctic climate change and its influences on terrestrial ecosystems, En D.M. Bergstrom, P.
Convey, and A.H.L. Huiskes, (eds.), Trends in Antarctic Terrestrial and Limnetic Ecosystems: Antarctica as a
Global Indicator, Springer, Dordrecht.
Hahn, S., Reinhardt, K. (2006): Habitat preference and reproductive traits in the Antarctic midge Parochlus steinenii
(Diptera: Chironomidae). Antarctic Science, 18(02), 175.
Huiskes, A.H.L, Convey, P., Bergstrom, D.M (2006): 1. Trends in Antarctic terrestrial and limnetic ecosystems:
Antarctica as a global indicator En D.M. Bergstrom, P. Convey, and A.H.L. Huiskes, (eds.), Trends in Antarctic
Terrestrial and Limnetic Ecosystems: Antarctica as a Global Indicator, Springer, Dordrecht.
4 of 4
ENSAMABLE DE CRUSTCEOS EN EL
LAGO URUGUAY, SHETLAND DEL SUR, ANTRTIDA
(Crustaceans assemblage in the Uruguayan lake, South Shetland, Antartica)
Waller, A; Verdi, A.
Seccin Entomologa. Facultad de Ciencias. Universidad de la Repblica.
et. al., 2008; Rogers, 2013). Para comparar las medias de la abundancia entre los sitios
de muestreo se aplic el test de Mann Whitney.
Resultados
El ensamble de crustceos del lago Uruguay se encuentra integrado por el anostraco
Branchinecta gaini Daday, 1910 y el coppodo Boeckella poppei (Mrzek, 1901)
Respecto a la ubicacin espacial dentro del lago ambas especies fueron recolectadas en
todas las localidades muestreadas, mostrando una mayor concentracin en la zona
profunda (Tab. I). Las diferencias de las abundancias de cada especie entre la zona
superficial y profunda fueron significativas, B gaini (Man Whitney, p<0.05), B. poppei
(Man Whitney, p<0.05).
Tabla I. Abundancia de crustceos (Ind/m3) y desvo estndar (D.E.) registrados para las zonas Superficial
(S) y Profunda (P) del Lago Uruguay.
B. gaini
B. poppei
S1
8 (3.9)
130 (23.8)
S2
8 (2.6)
101 (30.4)
P1
81 (18.3)
1625 (130)
P2
85 (8.1)
1245 (341)
Discusin
Se registra por primera vez la presencia de Branchinecta gaini y Boeckella poppei en el
Lago Uruguay, lo que concuerda con lo observado en estudios anteriores para pequeos
lagos en la isla Rey Jorge (Jurasz et. al., 1983; Menu-Marque, 2000; Bayly et al., 2003;
Gibson y Bayly, 2007). La presencia de ambas especies se vincula con lagos
oligotrficos de baja conductividad, altamente sensibles a la polucin (De los Ros et.
%$
" #$
150
Niveles altos
Niveles bajos
fue > 0,7 en las estaciones C7, C8, T1, T2, T3, T4, T5, T7, T9, T10 y T14, present
valores < 0,3 en C10 y C12 y valores entre 0,3 y 0,7 en las dems estaciones (Fig. 2b).
La razn coprostanol/colesterol fue >1 en las estaciones C7, C8, T1, T2, T5 y T7, entre
1 y 0,2 en T3, T4, T6, T9, T10 y T14, mientras que las estaciones C0, C1, C2, C4, C10,
C11 y C12 presentaron valores < 0,2 (Fig. 2c). La razn coprostanol/epicoprostanol fue
> 2,5 en las estaciones C7, C8, T1, T2, T5, T6, T7 (Fig. 2d). Estas estaciones, excepto la
T6 presentaron niveles altos de aporte de esteroles fecales (Fig. 3).
DiscusinConcentraciones altas de coprostanol (> 0,5 g g-1), as como valores de la
razn coprostanol/(coprostanol + colestanol) >0,7 g g-1y de la razn
coprostanol/colesterol>1 g g-1como las registradas en las estaciones C7, C8, T1,T2, T5
y T7 han sido reportadas en sedimentos contaminados por aguas residuales y efluentes
domsticos en la Antrtida y en otras regiones del planeta (Gonzles-Oreja & SaizSalinas, 1998; Hughes & Thompson, 2004; Martins et al., 2014). En contraste, la
ausencia de coprostanol o lasmenores concentracionesy los menores valores de dichas
razones indican que las estaciones C0, C1, C2, C3, C4, C5-9, C6, C9, C10, C11, C12,
T0, T6, T8, T11 y T13 presentan sedimentos y/o suelos poco o no contaminados
(Martins et al., 2014).Adems, la razn coprostanol/epicoprostanol > 2,5 junto con las
altas concentraciones de coprostanol en las estaciones C7, C8, T1,T2, T5 y T7 indican
aporte antropognico y reciente de esteroles fecales (Puerari et al., 2012; Martins et al.,
2014). En las estaciones T1, T2, T5 y T7 esto es esperado debido la proximidad delas
mismas a las cmaras spticas de la BCAA. En las estaciones C7 y C8 el aporte de
esteroles fecales podra derivar de la estacin T7 (cmara sptica del comedor) y llegar
hasta la caada debido a la pendiente del terreno y a la escorrenta durante el deshielo.
ConclusionesExiste un aporte significativo de esteroles fecales en algunos puntos
alrededor de la BCAA, siendo el principal la cmara sptica del comedor (estacin T7),
la cual representarauna fuente de estos compuestos para la porcin inferior de una de
las caadas (estaciones C7 y C8).
SEPARACIN
DE
LAS
FAUNAS
MARINAS
ANTRTICAS
Y
SUDAMERICANAS: UNA APROXIMACIN MOLECULAR
(Divergence between Antarctic and South American marine fauna from: a molecular
approach)
Poulin E.1, Gonzlez-Wevar C.2, Hne M.1, Daz A.1, Grard K., Naretto J.1
1
Instituto de Ecologa y Biodiversidad (IEB), Departamento de Ciencias Ecolgicas,
Facultad de Ciencias, Universidad de Chile, Santiago, Chile.
2
GAIA-Antrtica, Universidad de Magallanes, Punta Arenas, Chile
A pesar de millones de aos de separacin, la Pennsula Antrtica y la regin de
Magallanes muestran una gran similitud en la fauna marina somera y numerosos
gneros son compartidos entre ambos continentes. Para evaluar la dinmica de los
procesos evolutivos que acompaaron la separacin de Sudamerica y Antrtica,
evaluamos la divergencia gentica del ADN mitocondrial (COI o Regin Control) de
especies congenricas de los erizos Abatus y Sterechinus, del gatropodos Nacella, del
bivalvo Yoldia y del pez intemareal Harpagifer. Para cada gnero se construy la red de
haplotipos de los especimenes colectados en la Pennsula antrtica y en la zona de
Magallanes (Figura 1). Estos cuatros gneros poseen representantes en ambos
continentes y son caractersticos de los ambientes someros. En base a la hiptesis del
reloj molecular, evaluamos los tiempos de divergencia entre las especies antrticas y
sub-antrticas de cada uno de estos taxa. En todos los gneros, encontramos claras
diferencias genticas entre especies de la Pennsula Antrtica y las de Magallanes. Sin
embargo, detectamos marcadas diferencias de los tiempos de divergencia entre estos
taxa, los que fueron interpretados en luz de los tipos de desarrollo y del origen
biogeogrfico del grupo. En particular, el tiempo de divergencia en el gnero Abatus, en
el cual las especies carecen de estadio larval de dispersin, correspondi a los tiempos
de separacin tectnica de ambos continentes. En contraste, para Sterechinus, Nacella y
Yoldia, todos caracterizados por estadios larvales de larga duracin, los tiempos de
divergencia fueron netamente posteriores a estos eventos tectnicos y podran asociarse
a la instalacin definitiva de la corriente Circumpolar. Finalmente, las especies de
Harpagifer se separaron mucho ms recientemente, esta vez probablemente asociado a
un evento de dispersin de la Pennsula antrtica haca el extremo sur de Sudamrica.
Figura 1. Red de haplotipos construidos usando secuencias COI en especies congenricas de: A)
Sterechinus (n = 150), B) Nacella (n = 191); C) Yoldia (n = 10)
Figure 1. Neighbor-Joining haplotype Networks constructed using COI sequences from Antarctic and
Magellanic congeneric species of: A) Sterechinus (n = 150), B) Nacella (n = 191); C) Yoldia (n = 10)
Referencias Bibliogrficas
Hne M., Gonzlez-Wevar C.A., Mansilla A., Fernndez D.A. & E. Poulin. Low level
of genetic divergence between Harpagifer fish species (Perciformes: Notothenioidei)
suggests a Quaternary colonization of Patagonia from the Antarctic Peninsula. Polar
Biology, in press.
Poulin, E., Gonzlez-Wevar, C., Daz, A., Grard, K. and Hne, M. 2014. Divergence
between Antarctic and South American marine invertebrates: what molecules tell us
about the Scotia Arc geodynamics and the intensification of the Antarctic circumpolar
current. Global and Planetary Change 123: 392-399.
Agradecimiento: Proyectos Fondecyt 11140087, C/D GAIA Antrtica, P05-002 ICM
and PFB 023, Fondecyt 1151336.
Bueno, C.1, Kandratavicius, N. 1, Prez, L. 2, Iglesias, K.4, Figueira, RCL. 3, Venturini, N.4, Brugnoli,
E.1*
1. Oceanografa y Ecologa Marina, Instituto de Ecologa y Ciencias Ambientales (IECA), Facultad de Ciencias, UdelaR; Igu
4225, 11400, Montevideo, Uruguay. * ebo@fcien.edu.uy
2. Centro Universitrio Regional del Este, Sede Rocha, UdelaR; Ruta 9 int. Ruta 15. Rocha, Uruguay
3. Instituto Oceanogrfico da Universidade de So Paulo, Praa do Oceanogrfico 191, Cidade Universitria, 05508-120, So
Paulo, SP, Brasil.
4. Laboratorio de Biogeoqumica Marina, Instituto de Ecologa y Ciencias Ambientales (IECA), Facultad de Ciencias, UdelaR;
Igu 4225, 11400, Montevideo, Uruguay.
INTRODUCCION
El continente Antrtico ha sufrido un incremento de las actividades humanas en las ltimas dcadas (ej.:
navegacin, turismo), que aunado al nmero de bases cientficas establecidas desde inicio del siglo XX,
ocasionan diferentes niveles de impactos antrpicos (Tin et al. 2009). Las actividades regulares propias del
funcionamiento de las bases cientficas instaladas en el territorio antrtico generan impactos que afectan la
calidad del aire, agua y suelo (incluyendo hielo y nieve) (Tin et al. 2009).
En respuesta al aumento de las actividades humanas, las naciones signatarias del Tratado Antrtico,
establecieron la necesidad de fomentar, controlar y comprometerse con diferentes acuerdos ambientales que
promueven su proteccin (SCAR 1959, 1964, 1991). Estos acuerdos internacionales recomiendan el diseo e
implementacin de monitoreos ambientales durante la planificacin y ejecucin de las diferentes actividades
antrticas. Para evaluar las alteraciones en el ambiente, se sugiere el uso de indicadores ambientales (fsicos,
qumicos) y la consideracin de estndares.
La Repblica Oriental del Uruguay presenta una base cientfica permanente Base Cientfica Antrtica
Artigas (BCAA) y es signataria de los mencionados acuerdos internacionales que establecen normas para
la evaluacin de impactos ambientales, conservacin de la fauna y flora, gestin de residuos y prevencin
de la contaminacin marina entre otros. Los principales impactos ambientales asociados a la operativa de la
BCAA, corresponden a la generacin de residuos y efluentes, emisin atmosfrica de gases, partculas y
ruido. El objetivo del presente estudio fue realizar una caracterizacin geoqumica del suelo y sedimentos de
las caadas cercanas a la BCAA para identificar la presencia de diferentes impactos humanos. Para dicho
fin, se consideraron las caractersticas granulomtricas, el contenido de materia orgnica total,
concentraciones de fsforo total (Pt) y metales pesados (Cu, Zn, Cr, Pb).
MATERIAL & METODOS
rea de estudio
La BCAA se ubica en la Pennsula Fildes de la Isla Rey Jorge, Archipilago Shetland del Sur (62114 S y
58 517 W), es la base ms cercana al glaciar Collins, se encuentra instalada sobre una formacin de
playas holocnicas emergidas y existen en sus cercanas diferentes sistemas acuticos (caadas, lagos y zona
costera de la Baha Maxwell) (Figura 1). Cuenta con 11 construcciones y presenta una capacidad de
alojamiento mximo de 60 personas. Posee un grupo de 9 residentes permanentes durante todo el ao,
alcanzando su capacidad mxima durante el verano. Para el almacenamiento de los efluentes domsticos
cuenta con ocho cmaras spticas y una grasera distribuidas en zonas cercanas a las construcciones;
adicionalmente existe una zona de acopio de combustibles, con recientes adecuaciones.
Figura 1. Ubicacin de la BCAA y estaciones de muestreo; estaciones caadas (C) y terrestres (T).
Figure 1. BCAA location and sample stations; creek stations (C) and land (T).
100
80
% Fangos
% Arena F
% Arena M
% Arena G
% Grava
60
40
20
0
T0 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T12 T13 T14
C0
C1
C3
C5-9
C6
C7
C8
Estacin
Figura 2. Distribucin de las fracciones granulomtricas en estaciones terrestres (A) y caadas (B).
Figure 2. Granulometric fractions distribution in land (A) and creeks (B) stations.
C10
C11
El contenido de MOT mostr valores similares en las caadas (mn. 2,20,8% C7 y mx. 4,90.1% C3);
mientras que en las estaciones terrestres los valores fueron ms variables (mn. 1,80.03% T2 y mx.
7,60,4% y 7,10,6% T2 y T11 respectivamente) (Figura 3). Los valores de MOT observados, coinciden
con los encontrados en estudios realizados en otras zonas de la Pennsula Fildes (Cury et al. 2014, Michel et
al. 2014) y son considerados como contenidos bajos de MOT.
10
MOT (%)
0
T0 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T13 T14
C0
C1
C2
C3
C4 C5-9 C6
C7
C8 C10 C11
Estacin
Figura 3. Contenido de materia orgnica total (MOT) en estaciones terrestres (A) y caadas (B).
Figure 3. Total organic matter (TOM) content in land (A) and creeks (B) stations.
Variables qumicas
En la Caada AINA (C1 a C4), se encontraron valores de fsforo total similares al registrado en C0 (CV
Caada Aina= 6,86); sin embargo en la Caada Comedor, se observan valores superiores a la C0 y un
incremento de Pt aguas abajo (C5-9 a C8; Figura 4). Estos resultados sugieren un aporte de Pt a lo largo de
la misma (C5-9 a C7) y su acumulacin hacia estaciones ubicadas aguas abajo (C8) posiblemente como
producto de los aportes de origen terrestre (T5 a T7). Por otro lado, en las estaciones terrestres se destacan
valores mximos de Pt para el estudio, en la estacin T7 (1323,0 mg kg-1) y T2 (1141,0 mg kg-1); las cuales
se encuentran cercanas a las cmaras spticas del comedor y dormitorios respectivamente (Figura 1), reas
donde se concentra el mayor flujo de personas dentro de la BCAA.
1400
1200
P (mg/Kg)
1000
800
600
400
200
0
T0 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T13 T14
C0
C1
C2
C3
C4 C5-9 C6
C7
C8 C10 C11
Estacin
Figura 4. Contenido de fsforo total (mg kg -1) en estaciones terrestres (A) y caada (B).
Figure 3. Total phosphorus content (mg kg -1) in land (A) and creek (B) stations.
Los valores de metales pesados registrados en las estaciones control (T0 y C0), son similares a los
reportados para Pennsula Fildes en otros estudios (Lu et al. 2012, Santos et al. 2005), con excepcin del Cr
que present menores valores en la BCAA (Tabla 1).
Tabla 1. Valores de metales traza (mg kg-1) en Pennsula Fildes.
Table 1. Heavy metal values (mg kg-1) in Pennsula Fildes.
Cu
Zn
Cr
Pb
5,0
3,0
La abundancia relativa de los metales fue Cu > Zn > Cr > Pb, presentando valores menores y similares en
estaciones de las caadas, mientras que en las estaciones terrestres las concentraciones fueron mayores y
ms variables (Tabla 2). Las mximas concentraciones se encontraron en las estaciones T2, T10, T11 y T13
(Tabla 2). Las mencionadas estaciones coinciden con reas cercanas a las cmaras spticas (T2, T10) y los
depsitos de combustible (T11 y T13).
Tabla 2. Concentracin de metales traza (mg Kg -1) en estaciones en estaciones terrestres (A) y caada (B).
Table 2. Heavy metals concentration (mg Kg -1) in land (A) and creek (B) stations.
Caada
Terreno
Cu
Zn
Cr
Pb
Cu
Zn
Cr
Pb
C1
C2
72,1
63,5
57,2
52,0
7,4
7,4
5,6
5,3
T1
T2
57,7
85,1
130
106,3
26,1
21,5
13,3
62
C3
C4
C5-9
C6
C7
C8
C10
C11
70,7
62,9
60,6
77,9
73,6
57,9
50,0
47,0
56,4
53,1
59,4
77,0
77,6
65,5
54,4
54,3
6,5
7,0
3,3
2,9
3,9
3,8
3,3
3,7
4,8
4,3
4,5
5,1
5,6
4,9
3,6
4,5
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9
T10
47,5
33,4
47,3
55,4
67,1
56,4
46,1
83,0
48,2
44,2
66,2
50,7
97,2
43,0
47,8
435,6
3,0
3,3
17,4
7,7
20,6
3,9
6,5
22,8
4,0
3,2
8,7
9,3
10,5
4,6
2,8
28,4
T11
65,1
375,5
35
59,1
T13
T14
54,8
55
58,0 14,4
4,9 1,9
16
38,5
CV
15,7
CV
24,9
231,7
22,9
31,2
49,5
7,7
3,4
132,8 132,5 15,3 10,4 18,5 20,8
99,8
68,5
112,2
En sntesis, la variables qumicas analizadas pueden asociarse a los distintos tipos de actividades y diferentes
niveles de impacto (Pt a los efluentes domstico y los metales pesados con residuos de combustible)
resultando buenos indicadores para el monitoreo de los impactos de origen antrpico.
AGRADECIMIENTOS
JM Rivero por el apoyo en el anlisis granulomtrico, SNI-ANII, CSIC-DT, IAU. Dotacin Antarkos XXXI
REFERENCIAS
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USEPA. 1996. Method 3050B. Acid digestion of sediments, sludges and soil. Revision 2. December.
INTRODUCCIN
Las invasiones biolgicas son una de las principales amenazas para la biodiversidad de
todos los ecosistemas (Richardson et al. 2006). La Antrtica se caracteriza por ser uno de
los ambientes ms extremos para la vida y geogrficamente ms aislados, lo que determina
que sea un ecosistema poco propenso a las invasiones biolgicas (Convey et al. 2014). No
obstante, debido a los efectos del cambio climtico las condiciones ambientales de la
Antrtica han disminuido en rigurosidad (Turner et al. 2014). Por otro lado, el aumento del
turismo ha determinado que el aislamiento geogrfico disminuya, resultando en un aumento
de especies que llegan a la Antrtica desde otras latitudes (Hughes et al. 2015).
El ecosistema antrtico presenta slo dos especies vasculares nativas, sin embargo
en los ltimos aos se ha documentado la presencia de algunas especies no-nativas (Hughes
et al. 2015, Molina-Montenegro et al. 2015). Un ejemplo de esto ltimo es Poa annua
(Poaceae) la cual ha logrado persistir por mas de 20 aos en la Antrtica, aumentando sus
lmites de distribucin al interior del continente (Molina-Montenegro et al. 2012). Estudios
bajo condiciones controladas sugieren que P. annua podra competir con las especies
nativas afectando de manera negativa su fisiologa y crecimiento (Molina-Montenegro et
al., en revisin).
En ambientes tan rigurosos como la Antrtica se ha sugerido que los procesos de
establecimiento y colonizacin se deben principalmente a interacciones positivas entre
especies (Bertness & Callaway 1994). En el ecosistema antrtico se ha demostrado algunas
especies pueden mitigar las condiciones ambientales generando condiciones
microclimticas menos rigurosas para otras especies (Molina-Montenegro et al. 2013). De
manera similar, se ha demostrado que en estos ambientes los microorganismos (e.g.,
hongos) puede aumentar el desempeo ecofisiolgico y el establecimientos de plantas
vasculares al asociarse simbiticamente (Upson et al. 2009, Rosa et al. 2009).
En el presente trabajo evaluamos el rol de las interacciones biticas planta-planta y
planta-hongo sobre el desempeo ecofisiolgico, establecimiento y colonizacin de la
especie invasora P. annua en el ecosistema antrtico. Especficamente evaluamos patrones
espacio-temporales, diferentes mecanismos involucrados en el xito de P. annua y las
consecuencias de la invasin sobre la flora vascular nativa de la Antrtica.
MTODOS
Mediantes experimentos en campo y bajo condiciones controladas de laboratorio,
evaluamos el rol de las interacciones biolgicas sobre el desempeo de la invasora P.
annua. Con el objeto de evaluar las mitigaciones microclimticas que generan plantas
nativas, actuando como nodrizas para la especie invasora, medimos la temperatura,
humedad y nutrientes entre el dosel de la nativa Deschampsia antarctica (Poacea) y en
espacios abiertos fuera de ella. Posteriormente se realiz un experimento de trasplantes con
individuos adultos de P. annua sobre y fuera D. antarctica en 2 sitios y se registr la
supervivencia durante dos estaciones de crecimiento. Adicionalmente se realiz un
experimento en cmaras de crecimiento para evaluar la tolerancia ambiental a travs de
plasticidad en atributos fisiolgicos, tanto en la invasora como en la nativa. Finalmente, se
realiz un anlisis espacial de co-ocurrencia a lo largo de la Pennsula Antrtica para
evaluar la importancia de las interacciones en los lmites de distribucin a grandes escalas.
Por otro lado, se evalu el rol de los hongos endfitos en el desempeo
ecofisiolgico de la invasora P. annua y sobre su habilidad competitiva contra la nativa. D.
antartica. En condiciones de campo se realiz un experimento de trasplante con individuos
inoculados con hongos aislados del suelo y sin hongos. Adicionalmente, bajo condiciones
controladas, se realiz un experimento de competencia entre la invasora P. annua y la
nativa D. antartica con y sin la presencia de los hongos endfitos.
Con el objeto de evaluar los efectos sobre la flora nativa, mediante modelacin
matemtica y basado en la informacin obtenida de los experimentos de campo y terreno,
se realiz un modelo de autmatas celulares para proyectar el efecto de las interacciones
biticas sobre el desempeo de las invasoras y las consecuencias comunitarias.
RESULTADOS
En general los resultados muestras que la planta nativa D. antarctica genera condiciones
microclimticas menos rigurosas que el entorno, proporcionando condiciones menos
rigurosas para el desempeo y establecimiento de la invasora P. annua. La supervivencia
de P. annua fue significativamente mayor cuando creci asociada a D. antarctica que
cuando creci sola. Los individuos de P. annua mostraron una mayor tolerancia ambiental
y una mejor eficiencia en el uso de los recursos que la nativa, lo cual le confiri una mayor
habilidad competitiva. Finalmente, los datos muestras que a escalas espaciales amplias, la
presencia de una espacie nativa climticamente tolerante (i.e., D. antarctica), permitira
ampliar los lmites de distribucin de la invasora P. annua, hacia el interior de la Pennsula
Antrtica.
Por otro lado, la presencia de hongos endfitos mejor el porcentaje de
supervivencia de la invasora P. annua en los experimentos de campo. De manera similar,
bajo condiciones controladas de laboratorio la presencia de hongos endfitos aument el
desempeo ecofisiolgico de P. annua. El efecto positivo de la simbiosis, determin que
aumente la habilidad competitiva de la invasora, afectando de manera negativa a las
especies nativas.
Finalmente, el modelo de autmatas celulares sugiere que la llegada de P. annua
podra generar efectos negativos sobre la flora nativa, llegando incluso a desplazarlos, lo
cual sera potenciado por la presencia de los hongos endfitos.
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
Los efectos del cambio climtico global y el aumento del turismo, han determinado que la
condicin prstina de la Antrtica disminuya. En los ltimos aos se ha documentado la
llegada de diversas especies no nativas, algunas con expansin en sus lmites de
distribucin y con efectos negativos sobre la biodiversidad vegetal del ecosistema antrtico
(Chown et al. 2012, Molina-Montenegro et al. 2012).
Las interacciones positivas han sido sugeridas como determinantes de la estructura
de las comunidades vegetales en ambientes climticamente extremos, tal como se ha
evidenciado en la Antrtica (Molina-Montenegro et al. 2013). Estas interacciones,
facilitaran la el establecimiento, colonizacin y distribucin de plantas invasoras, como es
el caso de P. annua (Atala et al., en revisin). Por lo anterior, los procesos de invasin en la
Antrtica podran ser favorecidos por la interaccin con organismos nativos, con efectos
negativos sobre el ecosistema.
Actualmente no existe un protocolo claro de erradicacin de especies invasoras, si
bien algunas mencionen son posibles de encontrar en el Protocolo de Madrid, la
evidencia sugiere que no es suficiente (Hughes et al. 2015). Por lo tanto, diferentes
iniciativas de manera conjunta entre pases deberan ser consolidadas para poder erradicar,
manejar, contener y/o prevenir los avances de las especies ya establecidas y la llegada de
nuevas especies, con los consecuentes efectos negativos sobre uno de los ltimos
ecosistemas prstinos del planeta, como lo es la Antrtica.
AGRADECIMIENTOS
Proyectos INACH T_11_13 y G_22_11.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Atala C, Molina-Montenegro MA, Pertierra LR, Torres-Daz, Oses R, et al. Facilitation by
Deschampsia antarctica to native and invasive plant species in Antarctica: assessing the
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its negative effects on native Antarctic plants. Conservation Biology 16: 717-723.
INTRODUCCION
Se investig la contribucin de las principales especies componentes de la dieta de las
hembras adultas del Elefante Marino del Sur (Mirounga leonina) a la ingesta energtica
previa al perodo reproductivo. Su dieta est mayormente compuesta de cefalpodos y
peces en proporciones variables (Laws 1960, entre otros). En su etapa previa de
forrajeo en el mar deben obtener las reservas energticas corporales que le permitan
cubrir sus requerimientos energticos durante la reproduccin, cuando las hembras
adultas ayunan y deben hacer frente a sus necesidades metablicas y al
amamantamiento de su cra (Ling y Bryden 1981). La etapa de forrajeo previa a la
reproduccin se estima en aproximadamente 250 das (Carlini et al. 1999). Carlini et al.
(2004) estim que la reserva energtica con la cual las hembras de la poblacin en
estudio llegan al parto es de 10.337 MJ, de la cual 5.228 MJ corresponden a la energa
usada durante la lactancia. En base a tales datos, se estim el consumo total de presas
(asumiendo diferentes proporciones de las mismas en la composicin de la dieta)
requerido para la reserva energtica de las hembras que arriban a reproducir en Stranger
Point, Isla 25 de Mayo, Antrtida.
OBJETIVO: Determinar el contenido calrico y la contribucin energtica de las
principales presas de las hembras del Elefante Marino del Sur durante el forrajeo previo
al perodo reproductivo.
MATERIALES Y METODOS
En Caleta Potter (62 14S, 58 40O), Islas Shetland del Sur (ISS), y en inmediaciones
de Punta Cierva (64 09S, 60 57O), Pennsula Antrtica (PA), se recolectaron
muestras de Peces: a) ejemplares bentnico-demersales pertenecientes a las familias:
Nototheniidae (Notothenia coriiceps, Gobionotothen gibberifrons), ejemplares
juveniles y adultos (estado pre-reproductivo) capturados con trasmallos entre Enero y
Marzo de 1999 y de 2002 en ISS, y de 2000 en PA, y b) un ejemplar de la familia mesopelgica Myctophidae (Electrona antarctica), obtenido durante una cesin de alimento
del Gaviotn Antrtico Sterna vittata. Los ejemplares fueron medidos, pesados y
congelados a -20 C hasta su anlisis qumico en el laboratorio. El anlisis del
contenido de agua de los ejemplares frescos se realiz siguiendo el mtodo AOAC
(1980) por deshidratacin en estufa a 100 2 C. Para la determinacin de la energa
bruta, ejemplares enteros de peces, fueron secados, molidos y posteriormente sometidos
a combustin in vitro en presencia de oxgeno mediante una bomba calorimtrica
(Miller y Payne 1959). Mediante datos bibliogrficos basados en esta misma
metodologa se estim el valor energtico de los cefalpodos (Brown 1989). Asumimos
1
una eficiencia digestiva (ED) del 93% para la asimilacin de la energa bruta aportada
por cefalpodos y peces (Worthy 2001).
RESULTADOS
En la Tabla 1 se muestran los valores energticos obtenidos para cada tem alimentario.
Tabla 1- Tallas (largo total en cm), pesos (en g) y contenido calrico (kJ g -1 peso hmedo) de los
ejemplares analizados. (Total length (in cm), mass (in g) and caloric content (kJ g -1 wet weight) of the
specimens analyzed).
Especie
Talla
Peso
Cefalpodos
n.d.
n.d.
n.d.
Peces:
Nototheniidae
N. coriiceps
10 ej. 28,0 39,5 334,42 882,00
G. gibberifrons 10 ej. 19,9 36,0 50,54 466,79
Peces:
Myctophidae
E. antarctica
1 ej.
9,5
6,83
Valor calrico
(*)
3,25 (**)
4,7 0,4
4,4 0,5
5,6
Referencia
(#)
Laws 1977
Ling y Bryden
1981
Laws 1956
Daneri y
Carlini 2002
Daneri et al.
2000
Daneri y
Carlini 2002
N= nmero de ejemplares; n.d.= no determinado; (*) Valores expresados como energa bruta, sin
considerar la digestibilidad de cada tem alimentario. Media Desvo estndar; (**) Brown 1989; (#)
Referencias bibliogrficas que citan a cada tem alimentario como componente del Elefante Marino del
Sur.
Composicin de la dieta
expresada
como
proporcin (*)
Cefalpodos Peces
Mictfidos
de
Peces
Al parto = 10.337 MJ
Mictfidos (Carlini et al. 2004)
(Kg)
2
100 %
75 %
50 %
25 %
0%
0%
25 %
50 %
75 %
100 %
3.446
2.584
1.723
862
0
0
497
994
1.491
1.988
Gasto de lactancia = 5.228
MJ (Carlini et al. 2004)
100 %
75 %
50 %
25 %
0%
0%
25 %
50 %
75 %
100 %
1.743
1.307
872
436
0
0
251
502
754
1.005
(*) Se asume que cada especie est representada en la dieta segn el % estimado como: 1) 100%
cefalpodos + 0% peces mictfidos, 2) 75% cefalpodos + 25% peces mictfidos, 3) 50% cefalpodos +
50% peces mictfidos, 4) 25% cefalpodos + 75% peces mictfidos, y 5) 0% cefalpodos + 100% peces
mictfidos.
DISCUSION
Numerosos autores (Daneri et al. 2000, Daneri y Carlini 2002, entre otros) han
observado que el Elefante Marino del Sur se alimenta predominantemente de
cefalpodos, de peces meso-pelgicos (Laws 1977) y tambin de presas bentnicodemersales (Fedak 1994). Por anlisis de cidos grasos (Brown et al. 1999) y de valores
de los istopos estables 15 N y 13 C , se refuerza la hiptesis que especialmente los
peces mictfidos ocupan un lugar muy importante en la dieta de este pinnpedo (Cherel
et al. 2008). La estimacin del consumo de presas y de su aporte energtico vara de
acuerdo con la composicin de la dieta que se asuma y hay poca justificacin para
decidir a favor de una proporcin dada de presas en la dieta del Elefante Marino del Sur
(Carlini et al. 2005). Debido a esta limitacin, se asumieron los porcentajes expresados
en la Tabla 2 para indicar en que medida las presas podran ser consumidas por las
hembras adultas, teniendo en cuenta diferentes proporciones en peso de cefalpodos y
peces en la dieta (Laws 1977, Carlini et al. 2005). Dentro de los peces, se consideraron
en los clculos las especies con mayor aporte calrico, lo que est sustentado por los
hallazgos de Walters et al. (2014). El consumo total estimado durante el perodo de
forrajeo pre-reproductivo de las hembras adultas, teniendo en cuenta sus diferentes
proporciones en la dieta, sera de 862-3.446 Kg de cefalpodos y 497-1.491 Kg de
peces mictfidos, lo que aportara una energa total de reserva al momento del parto de
10.337 MJ (Carlini et al. 2004). En base a esta ingesta calrica las hembras producirn
su reserva corporal para cubrir durante su perodo de ayuno el gasto energtico de la
lactancia y el de su propio mantenimiento metablico.
CONCLUSIONES: Para afrontar el gasto energtico de la reproduccin y la lactancia,
las hembras adultas del Elefante Marino del Sur consumirn preferentemente presas
energticamente ricas y abundantes dentro de las reas de forrajeo pre-reproductivo,
tales como cefalpodos y peces mictfidos, lo que sera llevado a cabo mediante buceos
menos costosos en aguas pelgicas.
AGRADECIMIENTOS: Dedicado a nuestro amigo y colega Alejandro Carlini.
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INTRODUCCION
Se investig el rol de diferentes especies componentes de la dieta de los juveniles de
ambos sexos de la foca de Ross (Ommatophoca rossii) para la estimacin de su ingesta
energtica. Estudios previos (Oritsland 1977 entre otros), indicaron que la composicin
de la dieta es diversa y que cefalpodos, peces y otros invertebrados, incluido el krill,
son las presas principales de este pinnpedo. La foca de Ross se alimenta
principalmente en aguas superficiales hasta los 200 metros de profundidad, predando
mayormente sobre especies meso-pelgicas (Bengtson y Stewart 1997, Blix y Nordoy
2007). El conocimiento del valor energtico de las presas de la foca de Ross es de
particular importancia para entender el patrn de alimentacin de este predador
antrtico.
OBJETIVO: Determinar el aporte calrico de las principales presas de los juveniles de
ambos sexos de la foca de Ross, las que fueron muestreadas en diferentes localidades
de Antrtida durante el verano, con el objetivo de estimar la ingesta energtica de este
pinnpedo antrtico.
MATERIALES Y METODOS
En Caleta Potter (62 14S, 58 40O), Islas Shetland del Sur (ISS), y en inmediaciones
de Punta Cierva (64 09S, 60 57O), Pennsula Antrtica (PA), se recolectaron
muestras correspondientes a los siguientes grupos: 1) Crustceos: a) Anfpodos
Gamardeos, recolectados manualmente por buceo autnomo, mediante el empleo de
trampas de acrlico y/o redes manuales, durante los meses de Febrero y Marzo de 1994,
1999 y 2000 en ISS y en PA, b) krill antrtico Euphausia superba (capturado en el
Estrecho de Gerlache, PA, en Marzo de 1976); 2) Peces: a) ejemplares juveniles y
adultos (estado pre-reproductivo) del pez bentnico-demersal perteneciente a la familia
Bathydraconidae o Peces Dragn Parachaenichthys charcoti, capturados con trasmallos
entre Enero y Marzo de 1999 y de 2002 en ISS, y de 2000 en PA, y b) un ejemplar de
Electrona antarctica perteneciente a la familia meso-pelgica Myctophidae o peces
Linterna , obtenido durante una cesin de alimento del Gaviotn Antrtico Sterna
vittata. Inmediatamente luego de la captura, los ejemplares fueron medidos y pesados y
congelados a -20 C hasta su anlisis qumico en el laboratorio. El anlisis del
contenido de agua de los ejemplares frescos se realiz siguiendo el mtodo AOAC
(1980) por deshidratacin en estufa a 100 2 C. Para la determinacin de la energa
bruta, ejemplares enteros de crustceos y peces fueron secados, molidos y
posteriormente sometidos a combustin in vitro en presencia de oxgeno mediante
una bomba calorimtrica (Miller y Payne 1959). Mediante datos bibliogrficos basados
en esta misma metodologa, se estim el valor energtico de los cefalpodos (Brown
1989). Asumimos una eficiencia digestiva (ED) del 93% para la asimilacin de la
energa bruta aportada por cefalpodos y peces y del 86% para los crustceos (Worthy
2001).
RESULTADOS
En la Tabla 1 se muestran los valores energticos obtenidos para cada tem alimentario.
Tabla 1-Tallas (largo total en cm), pesos (en g) y contenido calrico (kJ g -1 peso hmedo) de los
ejemplares analizados. (Total length (in cm), mass (in g) and caloric content (kJ g -1 wet weight) of the
specimens analyzed).
ESPECIE
TALLA
PESO
VALOR
CALORICO
(*)
Crustceos
Anfpodos
Gamardeos
Krill
E. superba
Cefalpodos
Skinner y
Klages 1994
10
n.d.
n.d.
pools
de ej.
4
4,5 6,0
0, 6 1,0
pools (ejemplares (ejemplares
de ej. individuales) individuales)
n.d.
n.d.
n.d.
4,5 0,3
6,3 0,3
Blix y
Nordoy 2007
3,2 (**)
Oritsland
1977, Blix y
Nordoy 2007
Peces
Bathydraconidae
P. charcoti
Myctophidae
Referencia
(#)
Bengtson y
Stewart 1997
10 ej.
37,0 52,2
205,38 827,99
4,4 0,4
Bengtson y
Stewart
1997, Blix y
Nordoy 2007
E. antarctica
1 ej.
9,5
6,83
5,6
N= nmero de ejemplares; n.d.= no determinado; (*) Valores expresados como energa
bruta, sin considerar la digestibilidad de cada tem alimentario. Media Desvo
estndar; (**) Brown 1989; (#) Referencias bibliogrficas que citan a cada tem
alimentario como componente de la dieta de la foca de Ross.
La Tabla 2 muestra las ingestas energticas estimadas para un consumo diario de 7,9 kg
para las hembras y de 6,9 kg para los machos correspondiente al 7% del peso corporal
de cada sexo (Oritsland 1977). En los clculos se utilizaron los datos de pesos
aportados por Skinner y Klages (1994) correspondientes a hembras de 2-3 aos y
machos de 2-4 aos. Se estim la ingesta energtica de la foca de Ross segn el
contenido calrico de cada presa (en peces e invertebrados solo se consideraron
aquellas especies con mayor densidad energtica), luego de ser corregido de acuerdo a
su ED. El valor calrico determinado para el ejemplar analizado de E. Antarctica
obtenido del contenido estomacal de un ave, es ligeramente inferior al reportado para
las especies de mictfidos por otros investigadores (7,00 kJ g -1, Guinet et al. 1996), lo
que puede deberse a la digestin parcial del mismo, por lo que se podra estar
subestimando el aporte calrico real de la especie. Se asumi que la dieta est
compuesta por un 64% de cefalpodos, un 22% de peces (fundamentalmente
mictfidos) y un 14% de invertebrados (fundamentalmente krill) (Oritsland 1977).
Tabla 2- Masa corporal (MC) promedio de los juveniles de ambos sexos de la foca de Ross, consumo
diario estimado de cada presa y estimacin de la ingesta energtica diaria segn la contribucin de cada
presa a la dieta. (Mean body mass (MC) of juvenile Ross seals of both sexes, daily consumption estimates
by prey and daily energy intake according to the contribution of each prey to the diet).
Foca
Ross
de MC
(a)
Consumo
total diario
estimado de
presas
y
energa
ingerida (b,
c)
Consumo
diario
estimado
de
Cefalpodos y
su
aporte
energtico
(c, d)
Consumo
diario
estimado de
Peces
mictfidos y
su
aporte
energtico (c,
d)
1,7 kg
8,8 MJ
Consumo
diario
estimado
de
Krill antrtico
y su aporte
energtico (c,
d)
Hembras 113 kg
7,9 kg
5,1 kg
1,1 kg
juveniles
30 MJ
15,3 MJ
5,9 MJ
(2-3 aos)
Machos
98 kg
6,9 kg
4,4 kg
1,5 kg
1,0 kg
juveniles
26,4 MJ
13,2 MJ
7,8 MJ
5,4 MJ
(2-4 aos)
(a) Segn los datos informados por Skinner y Klages (1994); (b) Segn los datos
informados por Oritsland (1977) que estiman un consumo diario correspondiente al 7%
de su peso corporal; (c) Se asume que cada especie est representada en la dieta segn
el % informado por Oritsland (1977), correspondiente a un 64% cefalpodos, 22%
peces (mictfidos) y 14% invertebrados (krill); (d) Ejemplares enteros.
DISCUSION
El conocimiento de los requerimientos nutricionales y energticos es importante para
precisar el impacto de las poblaciones de pinnpedos sobre los recursos marinos
antrticos, y determinar su rol en el flujo de energa a travs de las redes alimentarias
marinas. Los anlisis realizados en crustceos, cefalpodos y peces, indicaron que el
contenido calrico mas elevado se encuentra en el krill y en los peces mictfidos (Tabla
1). Numerosos estudios informan que el grado de consumo de cefalpodos y peces
puede ser importante (Ver referencias en Tabla 1). Los cefalpodos (Brown 1989) y los
peces bentnico-demersales, (Tabla 1, Mrquez et al. 2010), presentan una baja
densidad energtica. Otros estudios (Bengtson y Stewart 1997, Blix y Nordoy 2007)
sugieren que cuando las especies ictcolas meso-pelgicas (mayormente mictfidos)
estn presentes en abundancia en el rea de forrajeo, la foca de Ross preda
intensamente sobre ellas, debido al alto valor energtico (Tabla 1). Tambin es
necesario considerar los valores de digestibilidad de cada tem alimentario para cada
especie consumidora, para tener una idea precisa de los valores reales de energa
aprovechable. Se estim el consumo energtico diario de juveniles de ambos sexos de
la foca de Ross asumiendo una tasa de alimentacin correspondiente al 7% del peso
corporal (Oritsland 1977) y la proporcin de cada especie en la dieta de las focas
compuesta de un 64% de cefalpodos, 22% de peces y 14% de otros invertebrados
Resultados
Se observaron diferencias significativas entre los sistemas con diferente contenido
inicial de contaminantes. La biopila que mayor eficiencia de remocin present fue la
que al inicio contena una concentracin de 5000 mg/kg de Gas Oil, que alcanz una
remocin del 87,84%. Los sistemas con concentraciones iniciales de 2500, 7500 y
10000 mg/kg presentaron una remocin final del 83,29; 70,53 y 68,17%
respectivamente.
La actividad biolgica, reflejada tanto por el anlisis de DAF como por los recuentos de
bacterias degradadoras, sigui un patrn similar al de la remocin de hidrocarburos,
sugiriendo una fuerte correlacin entre ambas variables. La actividad biolgica inferida
por el mtodo de DAF exhibi valores mximos en el sistema de 5000 mg/kg (0,6817
g Fluorescena/g suelo seco) a los 30 das de iniciado el experimento. Adems, a lo
largo de todo el tratamiento, los valores en este sistema fueron mayores que los
exhibidos por el resto de los mismos. Por otro lado, el recuento de bacterias
degradadoras de hidrocarburos tambin mostr su valor mximo en el sistema de 5000
mg/kg; llegando a valores de 2,79 x 10 7 UFC/ml, en este caso a los 20 das de
tratamiento.
Discusin
Este trabajo mostr claramente que la eficiencia de remocin de hidrocarburos, al cabo
de 40 das de tratamiento, se vio afectada por la concentracin inicial del contaminante.
La razn por la cual los sistemas con menor concentracin de Gas Oil fueron los que
mayor eficiencia de remocin presentaron puede deberse a varios factores. Por un lado,
la optimizacin previa realizada a escala laboratorio para la bioestimulacin de estos
suelos, fue realizada con un suelo con baja concentracin de hidrocarburos (1200 mg/kg
aproximadamente). Estos resultados podran indicar que la optimizacin realizada para
una determinada concentracin, puede tener un rango operativo limitado; y cuando los
niveles difieren significativamente de aquel que se us originalmente, la eficiencia
disminuye. En tal caso, se debera realizar un nuevo proceso de optimizacin,
explorando el mbito de concentraciones de contaminante que sea relevante.
Por otro lado, al usar la relacin entre C:N:P dicha optimizacin se realiza
independizndose de la concentracin inicial de Carbono, ya que siempre se mantiene
una relacin fija entre estos compuestos. Sin embargo, el efecto que el nivel inicial de
Carbono tiene sobre la microbiota es muy diverso. Concentraciones muy bajas de
compuestos carbonados pueden generar una inhibicin del crecimiento microbiano
simplemente debido a la falta de sustrato biodisponible. Por el contrario, niveles muy
elevados de hidrocarburos puede presentar un efecto txico sobre una gran parte de la
comunidad microbiana, originando una disminucin en la poblacin capaz de degradar
el xenobitico o, al menos, un retardo en su metabolismo. Esto ltimo es lo que parece
INTRODUCCIN
La Antrtida es uno de los ecosistemas ms duros y desafiantes para la vida. La cubierta
vegetal est formada principalmente por criptgamas, pero tambin hay dos especies de
fanergamas que se han adaptado a estas condiciones: Deschampsia antarctica Desv.
(Poceas) y Colobanthus quitensis (Kunth.) Bartl. (Cariofilceas), aunque su distribucin se
restringe a la Pennsula antrtica (Smith, 2003). Cuando las condiciones abiticas son tan
limitantes la presencia de vecinos que puedan mitigar en algo dichas condiciones limitantes
cobran especial importancia (facilitacin). La facilitacin tiene lugar cuando una especie
modifica el ambiente de forma que hace posible que otra especie se establezca y crezca en
un lugar en el que no medrara aislada (Callaway, 2007). Krna y sus colaboradores (2009)
demostraron que cuando D. antarctica creca junto a C. quitensis o musgos su crecimiento
era menor que cuando creca sola. Por el contrario, Ricote y Carrasco (2010) describieron
un crecimiento mayor de ambas especies de plantas vasculares cuando estaban juntas.
Casanova-Katny & Cavieres (2012) estudiaron el efecto de la interaccin con el musgo en
D. antarctica, eliminando la alfombra circundante en individuos seleccionados. Sus
resultados muestran que el musgo facilita el crecimiento de los macollos de D. antarctica,
pero no su supervivencia. En el presente estudio nos preguntamos cul es la dependencia de
C. quitensis a la cubierta vegetal que rodea sus cojines.
MATERIALES Y MTODOS
Se seleccionaron 30 cojines de tamao similar y aspecto saludable de Colobanthus
quitensis en las inmediaciones de la base antrtica polaca Henryk Arctowski, Baha
Almirantazgo, Isla Rey Jorge (Islas Shetland del Sur, Antrtida). Estos cojines se
fotografiaron para medir su rea inicial a comienzos de Enero de 2015 y a continuacin se
retiraron todas las plantas que rodeaban cada uno de ellos en un radio de 10 cm
aproximadamente, de manera que quedaron rodeados por suelo descubierto.
En Marzo de 2015, cerca del final de la estacin de crecimiento, se tomaron fotografas
para evaluar el cambio de rea desde el comienzo del tratamiento. Las reas se midieron
con el software libre ImageJ. Tambin se tomaron fotografas termogrficas con una
cmara trmica testo 875-2i para comparar la temperatura de estos ejemplares de
Colobanthus quitensis con otros 30 cojines de las inmediaciones, pero que no haban sido
sometidos al tratamiento de eliminacin de la cobertura vegetal adyacente. Posteriormente,
la mitad de los cojines rodeados por suelo descubierto fueron rodeados por pequeas
% de crecimiento
50
40
30
20
10
0
Elim
Control
Fotografas termogrficas: Los cojines de C. quitensis a los que se les quit la cubierta
vegetal circundante estn significativamente ms calientes que los controles (Fig. 2A). Esa
diferencia significativa desaparece cuando el suelo descubierto se cubre de piedras,
demostrando que se debe probablemente a un efecto de cuerpo negro del sustrato que rodea
a la planta (Fig. 2B). De hecho, cuando el cojn est rodeado de sustrato, est en promedio
0,31 C ms caliente que su control, mientras que al aadir piedras est en promedio 0,45
C ms fro que el control. A pesar de que en este ambiente antrtico la principal limitacin
fotosinttica viene dada por la temperatura, y si bien es cierto que la diferencia es
estadsticamente significativa, una diferencia de temperatura tan pequea no debiera ser
relevante a nivel biolgico. No obstante, es importante recordar que estas medidas son
puntuales y se requiere de un seguimiento ms prolongado.
5
p= 0'03
p= 0'18
**
Elim
Control
Elim
Control
Temperatura ( C)
Temperatura ( C)
Fig. 2: Diferencia de
temperatura de los cojines
de C. quitensis rodeados
de suelo desnudo (A) o de
piedras (B) frente a un
control.
Difference in temperature
between control plants and
plants surrounded by bare
soil or by pebbles.
p= 0'002
Fv/Fm
0,8
**
0'737
0'695
0,6
0,4
0,2
0,0
Elim
Contr
Esto no repercuti en la atenuacin no fotoqumica o disipacin por calor (NPQ), que fue
similar y paralela (Fig. 4), pero s en su rendimiento cuntico del FSII (PSII) y su tasa de
transporte de electrones (ETR) (Fig. 5).
2,5
NPQ
2,0
1,5
Elim
Contr
1,0
Within subject: p= 0
Between subject: p= 0.27
Interaction: p= 0.46
0,5
0,0
0
200
400
600
800
PAR
0,8
PSII
0,7
160
ETR
140
Elim
Contr
0,6
0,5
100
0,4
80
0,3
60
0,2
0,1
Elim
Contr
120
40
Within subject: p= 0
Between subject: p= 0.004
Interaction: p= 0.001
Within subject: p= 0
Between subject: p= 0
Interaction: p= 0
20
0,0
0
0
200
400
600
800
PAR
200
400
600
800
PAR
INTRODUCCIN
Los patrones de trasporte pasivo de partculas biolgicas hacia la Pennsula Antrtica estn
basados en la inmigracin desde zonas septentrionales, como tambin desde islas
subantrticas (Smith, 1991), los mecanismos involucrados en la llegada de estas partculas
estn mediados por vectores de tipo abiticos como el viento y corrientes marinas; y vectores
biticos como aves, mamferos marinos y por la accin del hombre (Hughes et al, 2011).
Existe poca informacin disponible de cules son los tipos de especies vegetales,
representados por estas partculas biolgicas (bacterias, esporas, semillas, polen), que estn
inmigrando a la Antrtica y qu podra implicar esto bajo el panorama actual de cambio
climtico sobre el ecosistema Antrtico. Existen registros botnicos actuales que nos brindan
las bases para determinar cules son las especies ms agresivas que estn inmigrando al
continente Antrtico, dentro de las familias ms representativas desde el punto de vista de la
llegada de semillas, estn la familia Asteraceae, Fabaceae, Chenopodiaceae, Lamiaceae y
Poaceae (Lityska-Zajc et al, 2012; Fuentes et al 2013). Por otro lado, la lluvia de polen
actual que se ha determinado para la regin Antrtica, est compuesta por taxas de la familia
Asteraceae, Brassicaceae, Chenopodiaceae, Juncaceae, Lamiaceae, Nothofagaceae y Poaceae,
existiendo una correlacin entre los taxa polnicos y los diferentes tipos de semillas que estn
arribando al territorio Antrtico (Kappen y Straka, 1988; Harmata y Olech, 1991; Sharma et
al, 2002). La estrecha relacin existente entre el polen y la vegetacin nos permite identificar
las posibles rutas de trasporte implicadas en la llegada de estas partculas (Nascimiento et al,
2015); si bien, este mtodo de identificacin de rutas de trasporte est condicionada por
variables externas como caractersticas climticas y topogrficas del rea en estudio, permite
una aproximacin en la determinacin de los tipos de taxas que se estn depositando en
distintos tipos de suelos (Sharma et al, 2002). El anlisis de la lluvia de polen actual nos da
una aproximacin de los tipos de taxas que estn arribando y las rutas de trasporte implicadas,
y tambin nos permite contribuir con informacin a la elaboracin de modelos climticos
predictivos y patrones de antropizacin en distintas zonas geogrficas (Li et al, 2015).
Realizar un registro polnico de la lluvia de polen actual en Pennsula Fildes, permitir
identificar los diferentes taxas que estn arribando a este territorio; adems, nos brinda
informacin clave para generar distintas hiptesis acerca de cules son las posibles especies
vegetales que tendran ms posibilidades de superar las barreras geogrficas, ya sea por
mecanismos naturales o por consecuencia de la alta antropizacin que presenta, en particular,
Pennsula Fildes, para llegar y potencialmente establecerse en este ecosistema.
El objetivo general de la presente investigacin consisti en realizar un registro de los
palinomorfos que estn arribando a Pennsula Fildes, en la Isla Rey Jorge, Antartica Martima.
MATERIAL Y MTODOS
Para la identificacin de los palinomorfos presentes en Pennsula Fildes, se muestre un
transecto norte-sur, que comprendi las localidades de Glaciar Collins (6216S; 5885W),
Base Eduardo Frei Moltalba y Base Profesor Julio Escudero (6219S; 5896W) e Isla
Ardley (6220S; 5893W). En cada sector de muestreo se realizaron 10 parcelas de 1m 2, de
las cuales se tomaron 50 gramos de suelo superficial (1-2 cm profundidad); el muestreo fue
realizado en replicado. Las muestras fueron almacenadas a 4C, hasta su transporte al
Laboratorio
de
Palinologa
y
Ecologa Vegetal de
la Universidad de
Concepcin,
Campus
Los
ngeles, con el
objetivo
de
determinar
el
contenido polnico
presente en las
muestras de suelo.
La preparacin de las muestras sigui la metodologa clsica para palinologa (Faegri e
Iversen, 1989), con adicin de cido fluorhdrico y el uso de acetlisis. El anlisis
microscpico se realiz montando una alcuota del concentrado polnico, en medio de montaje
sinttico Hydromatrix. Para la realizacin del conteo de los palinomorfos presentes, las
muestras fueron observadas bajo microscopio trinonocular planacromatico Olympus
CX31RTSF adosado a una cmara CCD Microimaging 5.1 megapixeles; luego fueron
digitalizados utilizando el software Micrometrics SE Premium 4. Para la identificacin
taxonmica de los palinomorfos, se utiliz bibliografa especializada (Beug, 1961; Heusser,
1971; Markgraf y Antoni, 1978; Faegri e Iversen, 1989).
RESULTADOS Y DISCUSIN
En la tabla 1, se resumen los diferentes taxas polnicos encontrados en el transecto norte-sur
realizado en Pennsula Fildes. El resultado de la identificacin taxonmica mostr la
presencia de dos tipos dominantes de especies criptgamas presentes en los tres sectores
muestreados, Didymodon sp que es una especie de musgo endmica de la Antrtica y de Islas
subantrticas (Ochyra, 1998) y diferentes esporas de liquen del tipo diporites, que son
caractersticas de lquenes crustosos, como Caloplaca sp, Rhizocarpon sp y Rinodina sp, las
primeras dos especies corresponden a especies endmicas de la Antrtica e Islas subantrticas
y Rinodina sp corresponde a una especie introducida y naturalizada en la Antrtica
(Ochyra,1998). En cuanto a los granos de polen, la mayor cantidad de plenes pertenecen al
grupo de las angiospermas y corresponden a las familias Asteraceae, Apiaceae, Brassicaceae,
Chenopodiaceae, Fabaceae, Juncaceae, Nothofagaceae y Poaceae (Fig.1). Solo se identific
un tipo de grano de polen de gimnospermas, que corresponde a la familia Podocarpaceae
(Fig.1).
Tabla 1. Registro de polen actual en Peninsula Fildes.
Table 1. Modern pollen record in Fildes Peninsula.
Al realizar una comparacion entre sectores, se encontr mayor abundancia y una mayor
diversidad polnica en el sector de Base Escudero y Base Eduardo Frei en comparacin con
los dems sectores en estudio. En el sector de glaciar Collins la presencia de la familia
Poaceae, est estrechamente asociada a la presencia de poblaciones de Deschampsia
antartica, adems de la presencia de una gran variedad de flora criptogama. En Isla Ardley se
presentan prcticamente, los mismos registros polinicos que para el sector del Glaciar Collins.
En un contexto general, los diferentes tipos de palinomorfos determinados en este estudio han
sido reportados con anterioridad para otros sectores de la Pennsula; las familias Brassicaceae,
Nothofagaceae, Podocarpaceae y Poaceae han sido identificadas en la Baha del
Almirantazgo, en las cercanas de la Base Polaca Arctowski (Kappen y Straka, 1988). En
cuanto a los patrones de depositacin de polen-esporas para Antrtica Oriental, stos siguen
una tendencia similar a la indicada para Antrtica Occidental, en donde, las familias con
mayor presencia son Asteraceae, Fabaceae, Chenopodiaceae, Podocarpaceae y Poaceae
(Sharma et al, 2002). La presencia de plenes de la familia Podocarpaceae y Nothofagaceae
nos indicara un influjo de palinomorfos probable, a partir de zonas ms septentrionales, por
ejemplo Patagonia, Navarino, Cabo de Hornos. Las dems familias determinadas presentan
distribucin cosmopolita, por lo que es difcil establecer cules son los orgenes de esta
inmigracin sin estudios complementarios del tipo aeropalinolgico. Diferentes estudios han
demostrado la inmigracin de palinomorfos desde islas subantrticas, mediada por las
corrientes atmosfricas de carcter circular, principalmente de tipo catabtico, que estn
presentes en Antartica martima (Wynn-Williams, 1991; Smith, 1991). El transporte por
medio de las corrientes marinas tambin puede ser una de las hiptesis que explique la
inmigracin de polen-esporas hacia el continente Antrtico (Harmata y Olech, 1991). La
llegada de algunos palinomorfos puede estar relacionada adems, con el nivel de
antropizacin que presenta actualmente Pennsula Fildes, en un escenario de cambio climtico
que va en desmedro de la cubierta nivosa y que favorecera una correlacin positiva entre una
llegada cada vez ms masiva del hombre a este ecosistema y el aumento de las especies nonativas que estn inmigrando o ya se encuentran establecidas en Antrtica Martima (Whinam
et al, 2005; Hughes et al ,2005; Lee y Chown ,2009; Osyczka et al, 2011; Cuba et al., 2013).
CONCLUSIONES
El anlisis de suelo superficial nos permiti identificar el influjo polnico presente en
Peninsula Fildes, demostrando que existe una concordancia entre los patrones generales de
depositacin de polen-esporas en la Antrtica Martima y los identificados en Peninsula
Fildes.
En cuanto a la diversidad y abundancia, las familias dominantes para Peninsula Fildes son las
familias Brassicaceae, Poaceae, Asteraceae y Nothofagaceae, encontrandose una mayor
abundancia y diversidad polnica en el sector correspondiente a las Bases Eduardo Frei y Base
Profesor Julio Escudero, la cual puede estar relacionada con los patrones actuales de
antropizacin que presentan estos sectores dentro de la Peninsula.
AGRADECIMIENTOS
Se agradece al proyecto INACH PR_05-14.
BIBLIOGRAFA
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Introduccin
El tratamiento y la disposicin de las aguas residuales en bases antrticas representa un
desafo para los pases en la gestin de sus instalaciones de investigacin, sobretodo cuando
se considera el reciente aumento de la preocupacin cientfica por el posible problema
ambiental asociado a esta actividad (Connor 2008; Grndahl et al. 2009; Gmez-Fuentes &
Calisto-Ulloa 2013; Calisto-Ulloa & Gmez-Fuentes 2014; Stark et al. 2015).
La mayora de las bases antrticas estn situadas en las reas costeras libres de hielo, las
cuales son especialmente sensibles a las perturbaciones humanas y representan alrededor de
un 2% de la superficie total del continente (Grndahl et al. 2009). Estas bases suelen contar
con sistemas de tratamientos de aguas residuales con descargas al mar, de acuerdo a los
requerimientos de Anexo III del Protocolo al Tratado Antrtico sobre la proteccin del
medio ambiente1. La descarga de estos efluentes representan el nico tipo de residuo que se
permite liberar al medio ambiente antrtico y constituye la nica actividad que podra estar
introduciendo intencionalmente microorganismos fecales en el medio (Aronson et al.
2011).
En temporada estival, con el aumento de poblacin cientfica, el personal logstico y los
turistas, las exigencias sobre los sistemas de tratamiento de aguas residuales aumenta
significativamente, lo cual puede traducirse en un impacto mayor en el medio costero
(Gmez-Fuentes & Calisto-Ulloa 2013). Adems, la ampliacin de las bases antrticas y el
aumento del nmero de investigaciones han impuesto nuevas demandas a los sistemas de
tratamiento de aguas residuales, quedando muchas veces los sistemas subdimensionados
para los actuales requerimientos. Este trabajo muestra los resultados de la intervencin
sobre una planta de tratamiento comn a dos bases antrticas, su respuesta a lapsos de
sobrecargas puntuales y el efecto de la incorporacin de soportes biopelculas como forma
de aumentar la capacidad del sistema sin alterar el diseo de la planta de tratamiento y sin
causar su detencin.
Materiales y mtodos
Planta de tratamiento: La planta de tratamiento de aguas servidas (PTAS) trata el efluente
conjunto de la Estacin Martima de Baha Fildes (operacin continua) y la Base Profesor
Julio Escudero (operacin estacional), ambas bases presentan en verano una ocupacin
mxima alcanzado las 100 personas en los periodos ms crticos. Originalmente el diseo
1
Secretaria del Tratado Antrtico (1998). Anexo III al Protocolo al Tratado Antrtico Sobre Proteccin del
Medio Ambiente Eliminacin y Tratamiento de Residuos.
Toma de muestra
Reactores
Efluente
Desinfeccin
UV
Ecualizador
Desarenador
es
Decantador
secundario
Resultados y discusiones.
Turbidez y slidos suspendidos.
14-mar
12-mar
10-mar
08-mar
06-mar
04-mar
28-feb
02-mar
fecha
26-feb
24-feb
22-feb
20-feb
16-feb
14-feb
12-feb
10-feb
18-feb
Euente
nal
Euente
linea
1
Euente
linea
3
75
55
14-mar
12-mar
10-mar
08-mar
06-mar
04-mar
28-feb
02-mar
26-feb
24-feb
22-feb
20-feb
18-feb
16-feb
14-feb
12-feb
10-feb
08-feb
06-feb
Euente
nal
Euente
lnea
1
Euente
lnea
3
95
08-feb
50
115
06-feb
100
04-feb
135
04-feb
Turbidez (NTU)
150
fecha
200
150
100
Euente lnea 1
50
14-mar
12-mar
10-mar
08-mar
06-mar
04-mar
02-mar
28-feb
26-feb
24-feb
22-feb
20-feb
18-feb
16-feb
14-feb
10-feb
08-feb
06-feb
Euente
lnea
3
04-feb
12-feb
DQO (mg/l)
250
fecha
Colobanthus quitensis
-5,8 C (-4,8C) (evasora)
-12,5C (-7C)
-14,9C (-7C) (tolerante)
-15,3C (tolerante)
Deschampsia antarctica
-24 C (-12C) (tolerante)
-17C (-12C)
-18,4C (-16,5C) (tolerante)
-22,8C (tolerante)
Sitio 2
Sitio 1
Sitio 3
-25
TL50 (C)
C. quitensis
-30
-20
-15
be
-10
-5
0
-30
TL50 (C)
D. antarctica
-25
a
b
-20
-15
-10
-5
0
-OTC +OTC
-OTC +OTC
-OTC +OTC
Figura 1. Temperatura que produce el 50% de fotoinactivacin (TL50) medido en hojas de C. quitensis y
D. antarctica creciendo en condiciones naturales de temperatura y expuestas a calentamiento en 3 sitios en
la Isla Rey Jorge. Los valores corresponden al promedio error estndar (n = 7). Letras diferentes indican
diferencias significativas (P <0,05).
Figure 1. Temperature producing 50% photoinactivation (LT50) measured in leaves of C. quitensis and D.
antarctica growing under natural temperature conditions and exposed to warming in 3 sites in King George
Island. Values correspond to mean standard error (n = 7). Different lower cases indicate significant
differences (P <0.05).
Introduccin
Las actividades humanas desarrolladas en el continente Antrtico han tenido un impacto en el
medioambiente, este impacto se manifiesta principalmente en las reas cercanas a los asentamientos
humanos, permaneciendo la gran mayora del territorio libre de la influencia del hombre, aun
cuando todo el continente es sensible a las actividades antropognicas globales (Bargagli et al.,
2005; Bergstrom et al., 2006). La Isla Rey Jorge, del archipilago de las Shetland del Sur presenta
una alta densidad de Bases Cientficas comparada con otros sectores en la Antrtica (Braun and
Hock, 2004). Durante el ao 2009 se produjo un derrame de combustible en la base Rusa
Bellinghausen, ubicada en Baha Fildes, en la Isla Rey Jorge, que afect a un pequeo ro que
desemboca en dicha Baha.
Con el objetivo de determinar el efecto y la variacin en el contenido de hidrocarburos antes y
despus de ocurrido un derrame de combustibles se cuantificaron los niveles de hidrocarburos
totales del petrleo (HTP) en muestras de agua de mar y sedimento marino en diferentes estaciones
ubicadas alrededor de la desembocadura del ro en la Baha Fildes. Adicionalmente se cuantificaron
los metales Cd, Co, Cu, Fe, Mn y Zn presentes en sedimentos marinos, en las mismas estaciones,
con la finalidad de determinar si existe relacin entre su concentracin y el derrame de combustible.
Metodologa
Los muestreos se realizaron en enero de 2009, antes que se produzca el derrame de combustible, y
durante enero de 2010 y 2011, despus de ocurrido el derrame.
Para los sedimentos y agua de mar se muestrearon 7 puntos ubicados alrededor de la desembocadura
del ro, se consider un punto en la desembocadura del rio denominado R y puntos distantes a 10,
25 y 50 metros hacia ambos lados de la desembocadura denominados R-50; R-25; R-10; R+10;
R+25 y R+50. Las muestras de agua de mar se tomaron solo para los aos 2009 y 2010.
En el caso de los sedimentos se trabaj con las muestras secadas a 40 C con la fraccin menor a 2
mm.
Para la extraccin de los hidrocarburos totales del petrleo (HTP) se utiliz la tcnica de extraccin
con equipos soxhlet de acuerdo al mtodo EPA 3540C y cuantificacin gravimtrica.
La cuantificacin de metales se realiz mediante la tcnica de espectrofotometra de absorcin
atmica con llama de aire acetileno en un equipo Perkin Elmer Aanalyst 700.
Resultados y Discusiones
En la Figura 1 se muestran los resultados obtenidos para la concentracin de HTP para el ao 2009,
antes del derrame, y para el ao 2010 despus del derrame. Los resultados muestran que si bien en
agua se observan variaciones antes y despus de ocurrido el derrame, las concentraciones detectadas
no superan en ningn caso las 2,5 ppm, encontrndose estos valores muy cercanos al lmites de
deteccin del mtodo.
En la Figura 2 se muestra la variacin en la concentracin de HTP en los sedimentos para los aos
2009, 2010 y 2011. Se puede observar que la concentracin de HTP despus de ocurrido el derrame
aumenta prcticamente en todas las muestras. La concentracin promedio de HTP para el ao 2009
es de 90,0 ppm, mientras que para el ao 2010 es de 121,1 ppm. Esto corresponde a un aumento
promedio de 31,1 ppm, equivalente al 35%.
Al observar los resultados para el ao 2011 se aprecia una disminucin de la concentracin de la
muestra ubicada en la desembocadura del ro y las muestras ubicadas al noroeste de la
desembocadura (R, R-10 y R-50). Para las restantes muestras se observa un aumento en la
concentracin de HTP. No obstante la distribucin de los HTP para los aos 2010 y 2011 es
diferente, la concentracin promedio obtenida es similar para ambos aos, 121,1 y 122,4 ppm para
los aos 2010 y 2011 respectivamente.
La variacin en la distribucin de los HTP para estos dos aos podra estar relacionada con la
direccin predominante de las corrientes marinas en la zona de muestreo, las que provocaran una
movilizacin y acumulacin de los HTP en los puntos donde se midieron mayores concentraciones
durante el ao 2011. Por otro lado, los valores promedio similares para ambos aos podran
relacionarse con la baja degradacin natural que se observa para los hidrocarburos en las
condiciones ambientales antrticas, situacin que se ha reportado para estudios realizados en suelos
antrticos (Rojas, 2009).
Se midi la concentracin de los metales Cd, Co, Cu, Fe, Mn y Zn para los tres aos del estudio. En
la Figura 3 se presentan los grficos con las variaciones espaciales y temporales de cada metal. Se
puede observar que para los metales Mn, Fe, Zn y Cu las menores concentraciones se midieron para
el ao 2009, para el caso del Co se detect que las concentraciones ms bajas corresponden al ao
2011. Por otro lado, el Cd fue el elemento que present menores variaciones entre los aos de
estudio y tambin el menos abundante en las muestras estudiadas.
La abundancia de los elementos present el siguiente patrn: Fe > Mn > Zn > Cu > Co > Cd.
Con la finalidad de determinar si existe una relacin entre la variacin de la concentracin de los
metales estudiados y la concentracin de hidrocarburos medida se realiz un anlisis de correlacin
de Pearson, con un nivel de correlacin de significancia P<0,05. Los resultados de este anlisis se
muestran en la Tabla 1 donde se observa que no existe una correlacin significativa entre la
variacin de la concentracin de los metales analizados y las concentraciones de HTP medidas. Si
bien el origen y las variaciones en la concentracin de los metales no estaran relacionadas con el
derrame de combustible ocurrido, si podran estar asociadas a otras actividades antropognicas
realizadas en el sector. Se requiere de informacin adicional, y un estudio ms detallado de los
resultados obtenidos para los metales, para poder relacionar los patrones observados con actividades
humanas o procesos naturales propios de la zona estudiada.
Tabla 1: Matriz de correlacin de Pearson (P<0,05) entre HTP y metales en los sedimentos
Table 1: Pearson correlation matrix (P <0.05) between hydrocarbons and metals in sediments
HTP
Fe
Mn
Zn
Co
Cd
Cu
HTP
1
0.028971
0.086122
0.000212
0.047145
0.000620
0.010474
Fe
Mn
Zn
Co
Cd
Cu
1
0.631684
0.360987
0.562514
0.076148
0.467430
1
0.313509
0.217584
0.026349
0.704116
1
0.090671
0.001668
0.263189
1
0.099737
0.058310
1
0.047144
Conclusiones
En el presente estudio se detectaron variaciones en la concentracin de HTP en la desembocadura de
un pequeo ro afectado por un derrame de combustibles. Si bien fue posible detectar en el agua de
mar variaciones en la concentracin de HTP antes y despus de ocurrido el derrame los valores
medidos se encuentran muy prximos al lmite de deteccin del mtodo. Los sedimentos marinos
mostraron ser mejores indicadores del impacto provocado por este tipo de accidentes ambientales.
Las condiciones ambientales antrticas no favorecen la degradacin natural de los hidrocarburos en
el medioambiente, lo cul estara reflejado en la concentracin promedio similar de HTP durante dos
aos consecutivos luego de ocurrido el derrame. Adicionalmente, las condiciones naturales propias
del lugar, tales como corrientes marinas, pueden modificar la distribucin espacial de los
contaminantes a travs del tiempo.
Se observ una variacin temporal importante en la mayora de los metales estudiados (Cu, Co, Mn,
Zn y Fe), sin embargo esta variacin no present una relacin estadstica significativa con el
derrame de combustible que afecto la zona estudiada. Las variaciones de la concentracin de
metales podran estar asociadas a otras actividades antropognicas o a variaciones naturales del
medioambiente.
Agradecimientos
Esta
investigacin
fue
financiada
por
los
proyectos
INACH
T_09-08
y
MA_01-12.
Referencias bibliogrficas
Bargagli R., C. Agnorelli, F. Borghini & F. Monaci. 2005. Enhanced deposition and bioaccumulation of mercury in
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Qumica, Lanus, Buenos Aires. Argentina.
Secuencia
5 AGA GAG AGA GAG AGA GT 3
5 AGA GAG AGA GAG AGA GG 3
5 TCT CTC TCT CTC TCT CG 3
5 ACA CAC ACA CAC ACA CG 3
5 GAG AGA GAG AGA GAG AYG 3
5 HBH AGA GAG AGA GAG AG 3
5 VDV CTC TCT CTC TCT CT 3
5 GAT AGA TAG ATA GAT A 3
La superficie de la testa de las semillas fue similar en las tres procedencias, mostrando
cierta rugosidad. Romero9, en su estudio morfolgico de la especie, describi que la testa de
la semilla posea una superficie ms bien lisa, mientras que Ahmadpour y Hossinzadeh8
informa haber encontrado un nivel de rugosidad en la testa de la semilla de esta especie.
estar directamente relacionada con las condiciones geogrficas donde habitan los
individuos, siendo la procedencia de Antrtica la que se encuentra ms aislada
geogrficamente y en condiciones ambientales realmente adversas, donde se encuentra en
un terreno que en su mayora est cubierto por hielo, sumado a las variaciones climticas y
estacionales muy extremas11.Por otro lado, no existe evidencia sobre el tiempo de
permanencia de esta especie en Antrtica, podra ser reciente o podra tratarse de una
poblacin antigua que no habra sido detectada anteriormente, en cualquier situacin el
flujo gnico esperado sera bajo por tanto es esperable un menor polimorfismo gentico.
Conclusiones: La comparacin de semillas, no permiti detectar diferencias cualitativas ni
cuantitativas, mostrando una alta homologa entre y dentro de las poblaciones. Slo las
semillas de Angol mostraron ser de menor tamao.
Este constituye el primer estudio de variabilidad gentica usando marcadores tipo ISSR en
la especie Antrtica no nativa J. bufoniusresultando sersencillo, rpido e informativo,
detectando polimorfismo de loci entre las diferentes procedencias.
Tal como se esperaba los individuos provenientes de Antrtica presentaron el menor
porcentaje de polimorfismo, por tanto una menor variabilidad gentica que los individuos
de otras localidades.
A partir de datos generados en este estudio, se estn analizando otros indicadores de la
variabilidad gentica de la especie dentro y entre poblaciones, preliminarmente se ha
detectado una ms alta relacin gentica entre individuos de Antrtica y Angol, por lo que
se podra suponer que la posible fuente de introduccin de esta planta no nativa en la
Antrtica, estara ms relacionada con Chile que con Polonia.
Agradecimientos: Proyecto INACH RG_02-13.
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Systematic Botany from the Missouri Botanical Garden 107, 3 Volumes. 3486 pp.
Introduccin
La regin bentnica de la Caleta Potter posee una importante diversidad de organismos,
entre los que sobresalen las esponjas y las ascidias. Las esponjas (phylumPorifera), son
animales invertebrados acuticos ssiles que carecen de autnticos tejidos.
Las ascidias, por su parte tambin son organismos ssiles ubicados en el
subphylumUrochordata dentro del phylumChordata.
Aunque filogenticamente muy distantes, ambos grupos de organismos comparten,
ademas de su estilo sesil de vida una estrategia de alimentacin por filtracin. Las
esponjas lo hacen mediante un sistema acufero de poros, canales y cmaras que genera
corrientes de agua provocados por el movimiento de unas clulas flageladas
especializadas, los coanocitos. Mientras que las ascidias lo hacen mediante un sistema
de dos sifones, por uno de los cuales (sifon bucal) ingresan el agua cargada de
partculas, que son retenidas en una capa mucosa a nivel de la faringe. El agua es luego
expulsada al exterior por un sifn atrial.
Su principal fuente de alimento son partculas orgnicas submicroscpicas en
suspensin, muy abundantes en el mar, aunque tambin ingieren bacterias,
dinoflagelados y otros componentes del plancton de pequeas dimensiones. La notable
capacidadde filtracin de ambos grupos de organismos parece ser crucial en el
mantenimiento de la estructura de las comunidades microbianas de los ecosistemas en
donde habitan, ya que son capaces de consumir un gran nmero de individuos de
especies con una alta tasa reproductiva, como bacterias. Por esta capacidad podran ser
importantes en la aplicacin de estrategias de biorremediacin cuando es necesario
disminuir la alta carga bacteriana en aguas residuales (Taylor, 2007).
Ambos grupos comparten tambin el potencial biotecnolgico. En los ltimos aos
estos y otros grupos de invertebrados marinos se han convertido en el foco principal de
los programas de prospeccin de nuevos compuestos bioactivos, especialmente aquellos
de aplicacin en medicina.
En el caso de las esponjas, su potencial biotecnolgico est incrementado por su
capacidad de formar asociaciones con un amplio rango de microorganismos, condicin
bajo la cual se convierte en una fuente rica de metabolitos secundarios con actividades
biolgicas de inters (Taylor, 2007). Como ejemplo puede mencionarse la
Haliocondrina,droga con actividad antitumoral aislada de una esponja del
gneroLissodendorix.
De la ascidia Ecteinascidia. turbinata se ha obtenido la molcula de Trabectedina,
utilizada en el tratamiento de varios tipos de cncer (Molinskiy col, 2009), mientras que
inhibidores de proteasas con potencial aplicacin antimalrica han sido detectados en
varias especies de ascidias marinas tropicales (Reytory col, 2011).
Sin embargo,debido a la necesidad de preservar las especies productoras de los
compuestos de inters, as como al bajo rendimiento que se obtiene cuando se quiere
obtener estas molculas directamente de los organismos, se estn desarrollando otras
estrategias de obtencin, tales como la genmica, en la cual los fragmentos de ADN de
inters son expresados en un hospedador;los cultivos de microorganismos asociados a
mezcl con vrtex, La mezcla se centrifug y el solvente se evapor con N 2 a 40Cy las
muestras fueron resuspendidas con 1 ml de CHCl3. Se preacondicionaron columnas de
SPE con CHCl3, y una vez cubierta la slica con el solvente, se sembr la muestra.
Luego de eluir el solvente, se agregaron 10 ml de CHCl 3, manteniendo un flujo de 1
ml/min. El eluato se volvi a evaporar con N2 a 40C y se resuspendi en 200 l de
EtOH. As se eluyeron los esteroles. El resto de los lpidos se eluyeron con 10 ml de
MeOH.El contenido de lpidos se analiz por HPLC utilizando, en primera instancia,
una columna de fase reversa.
Otra fraccin de la muestra fue derivatizada, y analizada por GC-MS. Para ello la fase
orgnica se evapor bajo corriente de nitrgeno, el residuo se resuspendi en 100 lde
N-metil-N-(trimetilsilil) trifluoroacetamida (MSTFA) y se incub por 30 min a 70C.
Estas muestras se analizaron con una columna HP-5MS (30 m x 0,25 mm x 0,25 m;
Agilent Technologies) en un cromatgrafo gaseoso (Hewlett Packard HP 6890) segn el
siguiente programa de temperaturas: 10C/min desde 100 hasta 310C y 10 min a
310C. La deteccin se realiz usando un detector (HP massselective detector,model
MSD 5973, voltaje de ionizacin 70 eV con un rango de 50 a 600 unidades de masa
atmica (amu).
Resultados y Discusin
Una identificacin preliminar basada en imgenes, sugiere que las muestras E1 y E4
corresponden a miembros de la clase Ascidiaceae , mientras que las muestras E2 y E3
corresponden a organismos del phylumporifera. La identificacin molecular en curso,
mediante secuenciacin del gen del ARNr18S, brindar informacin que permitir una
adecuada clasificacin de las muestras estudiadas.
El anlisis por HPLC de las cuatro muestras mostr patrones similares, donde se
observan de dos a cuatro picos segn la muestra ensayada. Con el uso de estndares se
logro identificar el colesterol, presente en todas la muestras y el estigmasterol en la
muestra E3. El anlisis por GC-MS confirm los datos obtenidos, identificndose en las
cuatro muestras el colesterol. Adems se pudo identificar otros esteroles como el 5,22
ergostadien-3-ol (brasicasterol), mayoritario en las muestras E1 a E3. Por el contrario,
la muestra E4 mostr una mayor proporcin de colesterol frente al 5,22 ergostadien-3ol.
Otros esteroles analizados mediante cromatografa gaseosa acoplada a detector de masa
fueron el estigmasterol y el betasitosterol. La Tabla 1 muestra la composicin y
proporcin de los esteroles principales en cada muestra, mientras que la Figura 1
muestra la estructura molecular de los esteroles identificados.
Muestra
E1
E2
E3
E4
Esteroles
Brasicasterol
Colesterol
Brasicasterol
Colesterol
Sitosterol
Brasicasterol
Colesterol
Sitosterol
Estigmasterol
Brasicasterol
Colesterol
rea relativa
13421
6368
9456
4703
6407
4031
736
867
655
2032
6987
rea %
67.8
32.2
46.0
22.9
31.2
64.1
11.7
13.8
10.4
22.5
77.5
Tabla 1: Composicin y proporcin de los esteroles principales de cada una de las muestras analizadas.
Estos esteroles han sido reportados en otros organismos marinos de regiones templadas
(Berquis, 1991; Hagemann, 2008) por lo que una modificacin en la composicin de
esteroles no sera una estrategia significativa de adaptacin a la baja temperatura
(aunque no puede descartarse un cambio en las proporciones de los mismos como parte
de dicha estrategia). En el caso particular de las muestras de Caleta Potter, resulta
interesante el estudio de las actividades enzimticas que intervienen para la obtencin
de estas molculas, ya que por tratarse de organismos que habitan regiones polares,
deben contar con enzimas adaptadas a las bajas temperaturas. Estudios complementarios
de los cidos grasos de estos organismos proveern informacin adicional sobre las vas
metablicas presentes en los organismos analizados.
Referencias bibliogrficas
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Biotechnology,26 (1), 26-31.
Introduo
Nos ltimos anos a regio antrtica vem sofrendo com o crescente impacto humano
e com a poluio ambiental, apesar de ainda ser conhecida como a regio de maior
preservao mundial (Bargagli 2008). Os elementos traos esto distribudos em nvel
global, podendo ser transportados para as regies polares do Hemisfrio Sul atravs de
massas de ar e correntes marinhas, os quais so acumulados na regio pela teia trfica
(Lambert et al. 1990, Xu e Gao 2014). Alm disso, em uma escala local, os nveis desses
elementos podem aumentar devido ao aporte de atividades humanas como o turismo e
estaes de pesquisa (Santos et al. 2005, Ribeiro et al. 2011).
As aves marinhas so indicadoras de qualidade do ambiente por serem espcies
longevas e predadoras de topo (Burger e Gochfeld 2004), por isso a concentrao de
elementos traos nestas espcies um indicativo dos nveis de contaminao na teia trfica.
Entre as espcies de aves marinhas antrticas o Petrel-gigante-do-sul o maior predador de
topo da regio. Esta espcie se alimenta de cefalpodes e peixes, sendo considerado
tambm o maior carniceiro dos oceanos do sul se alimentando de carcaas de mamferos e
aves marinhas (Copello et al. 2008, Petry et al. 2010). Por estas razes, o Petrel-gigante-dosul pode contribuir com o entendimento de questes relacionadas a concentraes de
elementos traos na regio bem como a qualidade do ambiente antrtico.
O Selnio (Se) um elemento trao considerado essencial para os seres vivos, no
entanto e em altas concentraes pode causar danos severos. Para as aves predadoras de
topo a alta concentrao de Se pode provocar problemas hepticos, m formao congnita,
baixo sucesso reprodutivo, envenenamento embrionrio e mortalidade de adultos
(Ohlendorf et al. 1990, Elliot et al. 1992). Na Antrtica nveis de Se foram encontrados em
trs espcies de pinguins de diferentes latitudes (Jerez et al. 2011). No entanto, no existem
dados sobre a concentrao de Se para o Petrel-gigante-do-sul nesta regio. Portanto, este
trabalho tem por objetivo avaliar dados preliminares sobre a concentrao de Se em Petrelgigante-do-sul em trs regies do Arquiplago das Shetlands do Sul.
Material e Mtodos
As amostras foram coletadas em trs reas das Shetlands do Sul, Ilha Elefante
(Stinker Point) e Ilha Rei George (Baia do Almirantado e Ponta Turret) em novembro de
2013. As penas foram retiradas e guardadas em sacos hermticos para posterior anlise no
Laboratrio de Qumica Inorgnica Marinha da Universidade de So Paulo. Em laboratrio,
as penas foram lavadas trs vezes com acetona para remover a contaminao externa.
Depois da lavagem, permaneceram 24 horas secando em temperatura ambiente. As
amostras foram digeridas separadamente em 1,7 mL de HNO3 e adicionadas 0,4mL de
H2O2. Aps 15 horas as amostras permaneceram em bloco digestor por trs horas. Aps o
resfriamento das amostras, estas foram filtradas e avolumadas para 15 mL com gua
deionizada.
A concentrao de Se foi obtida por espectrometria de emisso ptica com plasma
indutivamente acoplado (ICP-OES). O material de referencia (SRM-2976 Mussel Tissue
freeze/dried - National Institute of Standards and Technology e DORM-2 NRCC National
Research Council Canada) e o branco foram duplicados para cada rea de estudo e
analisados com as amostras no ICP-OES. A concentrao de Se foi apresentada em mg/kg.
Para avaliar se houve diferena de concentrao nos indivduos para diferentes regies foi
utilizado Anova com Tukey a posteriori. Considerou-se p<0,05.
Resultados
Ao total foram coletadas 45 amostras, sendo 15 de cada rea de estudo. A rea com maior
concentrao mdia de Se foi Stinker Point, seguido de Ponta Turret e Baia do Almirantado
(Tabela 1). Entre as reas de estudo foi observada diferena significativa para a
concentrao de Se (F44, 2=12,74; p<0,05), uma vez que Stinker Poit foi diferente de Baia
do Almirantado (F=6,313; p<0,01) e de Ponta Turret (F=6,042; p<0,01). No houve
diferena significativa na concentrao de Se para os dois locais de coleta na Ilha Rei
George (p>0,05).
Tabela 1. Concentrao de Selnio para as reas de
estudo.
Local
Se
Ilha Elefante
Stinker Point
8,01,5
Ilha Rei George
Ponta Turret
5,81,3
Baia do Almirantado
5,71,3
Concentrao em mg/kg
Discusso
Este trabalho apresenta resultados preliminares sobre a concentrao de Se em
Petrel-gigante-do-sul para a regio Antrtica. Os resultados obtidos mostraram que h uma
maior concentrao do Se em Petrel-gigante-do-sul quando relacionada a concentraes
para a maioria das espcies de Procellariiformes distribudas no Hemisfrio Norte (Burger e
Gochfeldt 2000). A mesma relao ocorre para a avifauna antrtica, onde a concentrao do
Se maior em Petrel-gigante-do-sul do que para os pinguins (Jerez et al. 2011). Este pode
ser um indicativo da diferena da alimentao destas espcies j que ocupam diferentes
nichos. No caso dos pinguins a relao pode ser explicada pela predao de Petrel-gigantedo-sul sobre estes indivduos, resultando na bioacumulao do Se na teia trfica da regio.
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Grande do Sul, Brasil.
2
INCT-APA Instituto Nacional de Cincia e Tecnologia Antrctica de Pesquisas Ambientais
Introduo
Estudos relacionados alimentao, como a anlise da dieta e as atividades
alimentares, constituem uma importante ferramenta para a compreenso da ecologia das
populaes (Kokubun et al. 2010; Miller et al. 2010; Polito et al. 2011), determinando a
localizao das espcies dentro de uma teia trfica e definem seu papel ecolgico. Na
Antrtica, os pinguins, so os maiores consumidores de recursos marinhos, especialmente o
krill-antrtico. O krill considerado chave fundamental no ecossistema Antrtico e serve
como parte principal na transferncia de energia a partir do macro-zooplncton at os
predadores de topo de cadeia (Nicol 2006; Miller & Trivelpiece 2007). Assim, muitos
estudos vm sendo realizados a cerca da interao predador-presa nesta regio, onde o
krill-antrtico a presa de maior representatividade (Miller et al. 2010). de particular
interesse o estudo da inter-relao do krill com seus predadores, uma vez que suas
populaes tm diminudo nos ltimos anos, devido perda na extenso de gelo (Siegel et
al. 2002). Desta forma, objetivo deste trabalho investigar a preferncia alimentar e avaliar
a sobreposio de nicho trfico das espcies Pygoscelis papua e P. antarcticus, que
reproduzem simpatricamente na regio de Stinker Point, na Ilha Elefante.
Materiais e Mtodos
O estudo foi realizado em Stinker Point na Ilha Elefante (6113'20.5"S 5521'35"W),
durante o vero austral de 2010/2011 e 2011/2012. As amostras de contedo estomacal
foram obtidas de indivduos adultos utilizando a metodologia de lavagem estomacal
(CCAMLR 2004). Para todos os crustceos foram tomados s medidas e realizados a
identificao em relao a sexo e estgio de maturao sexual. Para cada item alimentar foi
determinado a frequncia de ocorrncia (FO). Anova Fatorial foi utilizada para comparar o
tamanho da carapaa de krill-antrtico entre sexos do mesmo e entre as espcies de
pinguim. Anlise Discriminante foi utilizada a fim de analisar as diferenas na utilizao de
itens alimentares entre as espcies de pinguins estudadas. Enquanto que a sobreposio de
nicho foi aplicada atravs do software EcoSim 7.0. Foi considerado p<0,05 para nveis de
significncia.
Resultados
Composio geral da dieta. E. superba foi a presa mais abundante comparado com
os demais itens alimentares, apresentando aproximadamente 69% FO para P. papua e 98%
FO para P. antarcticus. Seguido de E. chrystallorophias (8% e 11% FO para P. papua e P.
antarcticus, respectivamente), e E. frigida (4% FO), foi somente registrado para P.
1
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2013; Pea et al. 2014; Clucas et al. 2014) periodo coincidente con el proceso de
desglaciacin en la Pennsula Antrtica (~17000 aos atrs) (Turner et al. 2013). Las
disminuciones poblacionales actuales de Barbijo y Adelia en la WAP no se condicen con las
respuestas demogrficas histricas de los Pygoscelis. La evidencia molecular (deDinechin
et al. 2012; Picn 2012; Pea 2013, Clucas et al. 2014; Pea et al. 2014) y fsil (Baroni, &
Orombelli 1994; Wang et al. 2007; Huang et al.2011) seala que periodos clidos en el
pasado han sido favorables para todos los Pygoscelisen la WAP. Esta respuesta diferencial
podra estar relacionada con condiciones particulares del cambio climtico actual (Lynnes
et al. 2002) o con un lasescalas espaciales y temporales analizadas(Wang et al. 2007;
Huang et al. 2011;LaRue et al. 2013). En Barbijo para abarcar todo el rango de
distribucin, falta evaluar la estructuracin e historia demogrfica de las colonias presentes
en Bouvet y Balleny Islands, que se encuentran a distancias geogrficas mayores. Estudios
a largo plazo de los tamaos poblacionales y abarcando todo el rango de distribucin
pueden ayudar a determinar con mayor precisin las tendencias poblacionales globales y
dinmicas metapoblacionales actuales.
Quisiera agradecera mis Tutores Elie Poulin y Juliana Vianna; as como tambin a mis
compaeros de Laboratoriopor las enseanzas y apoyo brindado. Agradezco al Instituto de
Ecologa y Biodiversidad por el financiamiento.
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Resumen expandido
Literatura acerca de la sistemtica, distribucin y ecologa de poliquetos en el continente
antrtico no es vasta. La composicin de poliquetos en el bentos es ms documentada que
aquella en el zooplancton. No obstante, la importancia de este grupo en ambos ecosistemas
es ciertamente alta, ya que representa uno de los taxones ms representados. Benham
(1921) realiz un recuento de las especies reportadas en diferentes cruceros oceanogrficos,
y encuentra, junto con sus registros, que se han reportado 128 especies, a profundidades
entre 4 y 720 m. El porcentaje promedio de especies nuevas en dichos cruceros fue de 37%,
con lo cual se puede comprobar la hiptesis expuesta por Salazar-Vallejo (1996) que
menciona que en un lugar poco estudiado, al menos, un tercio de las especies pueden ser
nuevas para la ciencia. Este estudio es, quiz, el ms importante para demostrar la cantidad
de especies encontradas en el continente blanco, pero con muestras tomadas hace ms de un
siglo. Otros esfuerzos son puntuales y muy recientes, comparativamente. Barbosa et al.
(2010) reportan 67 especies de sustrato blando a profundidades entre 0 y 100 m,
procedentes de fondos blandos y Wilmsen y Schller (2011) reportan una alta riqueza de
especies y abundancia de organismos que componen el bentos entre 2000 y 4000 m de
profundidad. Por ltimo, Glover et al (2013) reportaron por primera vez la familia
Siboglinidae, describiendo por vez primera un poliqueto devorador de huesos. El propsito
de este estudio es recopilar la mayor cantidad de informacin posible, con la cual se pueda
estimar el nmero real de especies, siguiendo el anlisis de distribucin ofrecido por
Cantone y di Pietro (2001).
Se realiz una bsqueda de la literatura que incluye informacin taxonmica, ecolgica y
biogeogrfica, acerca de la Clase Polychaeta (Phylum Annelida). Se realiz un listado de
todas las especies de poliquetos reportadas, el rango de profundidad a la cual se
encontraron los organismos que representaron las especies, y se incluy informacin acerca
de su distribucin, de acuerdo con Cantone y di Pietro (2001) con algunas modificaciones,
como sigue: CA: Continente Antrtico; AS: Antrtica y Subantrtica; HS: Hemisferio Sur;
CO: Cosmopolita; AD: Amplia Distribucin; DD: Distribucin Disyunda; EM: Endmica;
1: Primer Registro en Antrtica; 2: Nueva Especie; 3: Nueva Subespecie. Todos los
nombres de las especies fueron corroborados usando el sitio web WORMS, y la localidad
tipo y distribucin por fuera de la regin Antrtica, fue corroborada con literatura
especializada para cada uno de los taxones, con el fin de establecer si se trata de una
especie de la regin o un nombre de una especie cuya distribucin est por fuera de la
regin y que es difcil que se incluya como una distribucin natural. Igualmente, fueron
evaluados los nombres invlidos o incorrectos por sinonimias, con el fin de estimar,
sistemticamente, la riqueza de especies para la regin.
Se encontr, tal como lo mencionan Convey et al. (2014), que los poliquetos estn
altamente representados en el continente Antrtico, a un nivel mayor, incluso que el
La diversidad de entomofauna nativa presente en la Isla Rey Jorge es muy baja, solo dos
especies de la Familia Chironomidae son los representantes para el Orden Diptera.
Parochlus steinenii es el nico insecto alado del continente con una distribucin
limitada para las Islas Shetland del Sur. Este trabajo representa el primer estudio de
relevamiento de la entomofauna y la primera notificacin de P. steinenii para el Lago
Uruguay.
Introduccin
El Archipilago Shetland del Sur es una de las regiones ms investigadas en la
Antrtida ya que posee la mayor biodiversidad terrestre (Convey 2001). La Isla Rey
Jorge, la mayor de las islas de este archipilago, presenta menos del 10% de su rea
libre de hielo, siendo esta zona la de mayor actividad biolgica (Vogt & Braun 2004)
(Fig.1). Esto permite la realizacin de numerosas investigaciones cientficas (Hahn &
Reinhardt 2006; Vaughan et al. 2003)
Fig.1: Mapa Archipilago Shetland del Sur modificado de Volonteiro et al. 2013 (Map Archipielago
Shetland South modified Volonteiro et al. 2013)
distribucin limitada para las Islas Shetland del Sur (Lee & Denlinger 2006; Convey &
Block 1996) (Fig.2). En 1889 Gerke la describe por primera vez a partir de material
recolectado al sur de la Isla Rey Jorge y en 1956 Torres la registra para la Isla (Convey
& Block 1996). Aos ms tarde Rauschert (1985) describe la pupa y los adultos de
ambos sexos mientras que Edwards & Usher (1985) hacen lo mismo con la larva.
Parochlus steinenii presenta su mayor actividad durante la fase adulta en verano, la
eclosin masiva ocurre prxima al borde de los cuerpos de agua bajo condiciones
adecuadas formndose grandes enjambres (Hahn & Reinhardt 2006). Debido a que las
condiciones climticas no son las adecuadas para el vuelo los adultos a menudo se
limitan a la actividad en el terreno (Volonteiro et al. 2013) y pasan el invierno como
larva en el fondo de los estanques y lagos de agua dulce (Teets & Denlinger 2014). El
papel de los chironomidos en los ecosistemas acuticos puede ser muy importante ya
que sus larvas son indicadores de calidad de agua dulce (Coffman & Ferringto 1996;
Tokeshi 1997).
Fig. 2: Parochlus steinenii: Izquierda: larva; Derecha: hembra adulta (Parochlus steinenii: Left: larva;
Right: adult female)
Materiales y Mtodos
El estudio se llev acabo en el Lago Uruguay prximo a la Base Cientfica
Antrtica Artigas (62114S; 58517O) en la Isla Rey Jorge, Archipilago Shetland
del Sur. Los muestreos se realizaron en el mes de febrero durante la campaa estival
2015. Como mtodo de recoleccin se utilizaron trampas de cada (pitfall), recipientes
de plstico de 12 cm de dimetro y 12 cm de profundidad enterrados en la tierra con la
boca al ras del suelo (Cheli & Corley 2010). Se colocaron 8 trampas separadas 4m entre
s, distribuidas en dos transectas, una longitudinal y otra perpendicular a la orilla del
lago. Cada trampa contena alcohol 70% como lquido fijador. Se recolect el contenido
de las trampas a los cuatro das de haber sido colocadas, repitiendo el muestreo una vez
ms. Tambin se emplearon como mtodos de recoleccin red de agua y recoleccin
manual con un esfuerzo de muestreo de 15 minutos para cada uno. Los ejemplares
recolectados fueron identificados en el laboratorio de la Seccin Entomologa de la
Facultad de Ciencias y para ello se cont con la colaboracin de la Dr. Tamara Contador
del Instituto de Ecologa y Biodiversidad de Punta Arenas, Chile. El material se
deposit en la Coleccin de Entomologa de la Facultad de Ciencias.
Resultados
Se recolectaron 7244 ejemplares adultos, 11 pupas y una larva de P. steinenii.
En las trampas ubicadas perpendicular a la orilla del Lago la abundancia se increment
a medida que disminuyo la distancia a la orilla, mientras que en las trampas ubicadas
paralelas al Lago la abundancia fue relativamente uniforme.
Discusin
Adems de ser una especie indicadora de calidad de agua Parochlus steinenii es
una especie sensible al cambio climtico y sus efectos. Del punto de vista ecolgico es
de inters para la Base Cientfica Antrtica Artigas continuar con los estudios
faunsticos ya que estos proporcionan informacin sobre el funcionamiento, la
estructura y variabilidad natural de los ecosistemas. Dichos estudios tambin son
requisitos fundamentales para el establecimiento de programas de monitoreo y una
herramienta bsica para la conservacin de la biodiversidad y evaluacin del impacto
antropognico.
Agradecimientos
El equipo agradece al Instituto Antrtico Uruguayo (IAU) y la Dra. Tamara Contador.
Bibliografa
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Trichoceridae (Diptera) in the maritime Antarctic.2013. Polar Biology. 36: 1125-1131.
observadas
en
pH,
oxigeno
disuelto,
temperatura,
alcalinidad,
Doctorado en Biologa Marina, Facultad de Ciencias, Universidad Austral De Chile, 2 Instituto de Ciencias
Marinas y Limnolgicas, Facultad de Ciencias, Universidad Austral De Chile, Casilla 567, Valdivia, Chile
Segn el informe del IPPC de 2001: "se espera que los cambios climticos ms intensos y a
mayor velocidad ocurran en las zonas polares, causando daos principalmente a nivel
fsico, ecolgico, sociolgico y con impacto econmico, especialmente en las regiones del
rtico y la Pennsula Antrtica". El aumento local de las temperaturas y radiacin UV en
la Antrtica, dos importantes manifestaciones del cambio climtico global, podran afectar
a los productores primarios con consecuencias para la estructura y funcionamiento de los
ecosistemas marinos. El metabolismo es dependiente de la temperatura (fotosntesis y
crecimiento) determinando la temperatura de tolerancia (sobrevivencia) y por otro lado, la
respuesta a la temperatura de las especies est correlacionada con los ambientes locales.
Por lo tanto, el alza en las temperaturas puede tener serios efectos en diferente aspectos
relacionados con adaptacin, e incluso distribucin biogeogrfica de las macroalgas
(Mller et al. 2009).
Bajo estrs de luz, es decir exceso de radiacin solar, ocurre una disminucin en el
rendimiento cuntico fotosinttico (Osmond 1994, Bischof et al. 2006, Hanelt 2003). La
eficiencia fotosinttica (Fv/Fm, Fv: fluorescencia variable, Fm: fluorescencia mxima), es
un parmetro importante y sensitivo para medir el estado fisiolgico de algas y plantas
expuestas a estrs lumnico. La radiacin UV-B lleva a una inhibicin fuerte del PSII
debido al contenido de alta energa que posee la longitud de onda de la radiacin UV-B. Sin
embargo, las algas muestran importantes mecanismos fotoprotectores qumicos contando
con compuestos que son capaces de absorber UV y confieren fotoproteccin: por ejemplo
aminocidos tipo
micosporina (MAAs) en algas rojas o compuestos fenlicos
(florotaninos) con propiedades antioxidantes en algas pardas (Swanson et al. 2002).
Las algas presentes en la Antrtica poseen un desarrollo y crecimiento a bajas temperaturas,
dado por la aislamiento de la Antrtica desde hace al menos 14 millones de aos. Adems
debido a la latitud, las macroalgas son organismos adaptados a bajas demandas de luz,
capaces de usar bajas irradiancias de manera eficiente (Wiencke & tom Dieck 1989,
Gmez et al. 2009). En trminos fotobiolgicos, las macroalgas de esta regin son
importantes de analizar debido a que en la Antrtica ocurren procesos qumicos en la
estratsfera que llevan a una disminucin estacional (primavera) de la concentracin de
ozono desde 1979. En el rea de King George Island (South Shetland Island, 62S), donde
se realizaron los muestreos, la radiacin solar incidente durante la temporada de primaveraverano es altamente variable y depende fuertemente de las condiciones climticas (Gmez
et al. 1997, Wiencke & Amsler 2012).
superiores a los valores iniciales. A los 12 C, los valores fueron muy similares como a 7
C, siendo el valor ms alto en el tratamiento UVB a las 2 h de la exposicin (78,29 mg
Trolox Equivalente g-1 DW), tendiendo a disminuir a las 6 horas y luego subiendo estos
valores nuevamente, mientras que en el tratamiento PAR los valores de antioxidantes
tienden a subir a travs del tiempo, siendo el valor ms alto a las 48 h de exposicin (82,85
mg Trolox equivalente g-1 DW).
Pese a que se esperara que un aumento en las temperaturas afectase la respuesta de
eficiencia fotosinttica de Desmarestia anceps, no se observa un efecto significativo tanto a
los 2C (que es la temperatura mxima que podra llegar a medirse un da de verano en la
Antrtica), como a los 7C y los 12C (que son temperaturas cercana al lmite superior de
supervivencia, USL), tanto en el tratamiento PAR y UV-B. Esta respuesta se puede deber
ya que las algas son organismos ancestrales, las cuales han sobrevivido a procesos de
calentamiento y glaciaciones. Estos organismos ancestrales que poseen un background
gentico, que les permite poder responder de manera estable fisiolgicamente dentro de un
cierto rango de temperaturas, en el caso de este trabajo hasta 12C. Las respuestas a 7 y
12C en Fv/Fm, pese a ser temperaturas por sobre las observadas en la naturaleza, pueden
deberse a una fotoproteccin mediada por florotaninos, ya que los valores que se observan
a estas temperaturas son mayores a los observados a 2C. Esta proteccin puede ser
mediada a su vez por la actividad antioxidante que muestra esta misma tendencia,
rescatando especies reactivas de oxgeno (EROS) que se estn produciendo por estrs
mediado por temperatura y radiacin UV-B.
Financiamiento:
Programa de Formacin de Capital Avanzado de CONICYT; Proyecto Anillo ART1101
(PIA-CONICYT), Instituto Antrtico Chileno (INACh).
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Utilization, Springer.
Fig. 1: Efecto de diferentes tratamientos de radiacin UV y la temperatura sobre Fv/Fm a travs de diferentes
tiempos de exposicin en D. anceps. Datos: media (n = 3) SD. Las letras indican las diferencias
significativas en los valores determinados por una prueba de Student Neuwman-Keuls (P <0,05).
Fig. 1 Effect of different treatments of UV radiation and temperature in Fv/Fm through different times of
exposure in D. anceps. Data are mean (n=3) SD. Letters indicate the significant differences in values
determined by a Student NeuwmanKeuls test (P<0.05).
Instituto de Ciencias Marinas y Limnolgicas, Universidad Austral de Chile, Campus Isla Teja, Valdivia.
2
Programa de Doctorado en Ciencias de la Acuicultura, Universidad Austral de Chile.
2
Departamento de Ciencias y Recursos Naturales, Universidad de Magallanes, Punta Arenas.
*
claudio.rivas@postgrado.uach.cl
INTRODUCCION
Los fenmenos conocidos como nieve roja y nieve verde, corresponden a
florecimientos de microalgas de nieve (principalmente de la familia
Chlamydomonadaceae), extremfilospsicrfilos comunes en zonas polares, altas montaas
y glaciares (Fuji et al 2010). Estas microalgas presentan adaptaciones metablicas que les
permiten crecer y realizar fotosntesis en condiciones ambientales extremas, como
temperaturas cercanas a 0C, alta radiacin solar, disponibilidad de nutrientes y fotoperodo
(Hoham et al. 1993, Spijkerman et al 2012). La coloracin de la nieve depende de los
pigmentos prevalentes de la especie dominante y su estado de desarrollo.
MATERIALES Y METODOS
Colecta de muestras de nieve
Durante febrero del 2015, se tomaron muestras denieve roja superficial (esporas de
resistencia) y nieve verde bajo los 10 centmetros de profundidad (clulas vegetativas)
enel sector Elefantera de la Isla Rey Jorge, Antrtica (6211'57,07'' S 5859'42,48''O).
Despus las muestras fueron trasladadas al laboratorio de la Estacin Antrtica Profesor
Julio Escudero del Instituto Antrtico Chileno, donde fueron depositadas en botellas
estriles de cultivo celular (TR6000, TrueLine, USA), en medio Snow Algae, cuya
formulacin se encuentra estandarizada por la UTEX the culture Collection of algae
(TheUniversity of Texas at Austin). Las muestras fueron mantenidas a una temperatura de
4C con un fotoperodo de 18 horas luz y 6 horas de oscuridad (verano antrtico) y una
intensidad lumnica de 250 Lux.
Mediciones de radiacin solar
Se realizaron mediciones de penetracin de luz y espectroin situ, utilizando un
radimetro(RAMSES-ACC2-UVvis,
TriosOpticalSensors,
Alemania)
y
dataloggers(HOBO UA-002-64, Unisource, USA) a 0, 10, 20, 30 y 40 centmetros en la
columna de nieve.
Exposicin experimental a radiacin UV y recuperacin
Cuatro muestras de 3 ml de nieve roja y nieve verde fueron expuestas por 4 h a
tratamientos de radiacin UV-B+PAR, UV-A+PAR y PAR a temperaturas de 0 y 20 C,
seguido de un perodo de recuperacin en oscuridad de 4 horas. Para los tratamientos
lumnicos se utilizaron lmparas de radiacin UVB(UVB-313, Q-Panel, USA),UVA (UVA340, Q-Panel, USA) y PAR (TL-D 36w/54-765, Philips, Tailandia). Los tratamientos fueron
establecidos cubriendo las muestras con filtros que cortan selectivamente diferentes partes
del espectro: Ultraphan 295, 320y 400 (Digefra, Munich, Alemania), respectivamente.
Actividad fotosinttica
Se midi el rendimiento cuntico mximo (Fv/Fm) por medio de un fluormetro de amplitud
modulada (Water PAM; Walz, Alemania) en las muestras expuestas a radiacin UV,
Fig. 1. Ciclo diario de radiacin solar en la columna de nieve. Se indica adems los valores promedio de la
demanda fotosinttica de luz para ambos tipos de algas (Lneas dobles)
Fig. 2. Perfil de radiacin UVB (A) y UVA (B). Valores promedio D.E. Letras distintas indican diferencias
significativas (ANOVA, P < 0,05)
Fig. 3. Inhibicin fotosinttica radiacin UVB (A) y UVA (B). Valores promedio D.E. Letras distintas
indican diferencias significativas (ANOVA, P < 0,05)
Instituto de Qumica, Pontificia Universidad Catlica de Valparaso (PUCV). Av. Universidad 330,
Valparaso, Chile. 2: Instituto de Biologa, PUCV.3: Escuela de Alimentos, PUCV.
4:
Ncleo de Biotecnologa Curauma, PUCV.
Manrquez K (1,2)*, Latorre-Melin L(3), Letelier-Pino J(3), Marcovich N(1,2), Masotti I(3), Ortiz
J(1,2), Ortiz-Gonzlez D(3) & Landaeta MF(3)
1. Centro de Investigacin Marina Quintay CIMARQ. Escuela de Ciencias del Mar. Facultad de Ecologa y
Recursos Naturales. Valparaso Chile. Universidad Andrs Bello.
2. Hydroplank Ltda. Lira 126. Of: S. Santiago, Chile.
3. Laboratorio de Ictioplancton (LABITI), Escuela de Biologa Marina, Facultad de Ciencias del Mar y de
Recursos Naturales, Universidad de Valparaso. Avenida Borgoo 16344, Reaca, Via del Mar, Chile.
(*)k.manriquezdiaz@uandresbello.edu
(General Oceanic) para estimar el volumen filtrado. Luego las muestras fueron fijadas con
formalina al 5%.
Los resultados meteorolgicos preliminares (Figura 2) muestran el predominio de la
componente zonal del viento, es decir, la mayor parte de la variabilidad se observ en la
direccin este-oeste, con eventos intensos que duran ms de 24 horas. Adems esta
localidad est sujeta a un rgimen zonal de casi 30 das ya que entre mediados de enero a
mediados de febrero predomina el viento del oeste mientras que despus predominan los
vientos desde el este. Asociado al cambio de mes y especialmente a la llegada del otoo se
incrementan los valores de turbulencia producida por el viento, aunque en forma de pulsos.
Se observ una mayor abundancia de individuos de mesozooplancton, tanto en una
escala espacial como temporal. (N=255,91 ind/m3 y 152,85 ind/m3,
meso-, y
macrozooplancton respectivamente). Las abundancias estudiadas en este estudio destacan
la importancia de la variabilidad temporal del zooplancton a corto plazo en un ecosistema
antrtico. Para el mesozooplancton, se observaron diferencias espaciales K-W:
(H=11,840)=29,01923; p=0,0023; H(11,2380)=33,95737 p=0,0004, respectivamente). Sin
embargo, para el macrozooplancton no se encontr diferencias en las abundancias, H (11,
340) = 5,628131 p=0,8970) (Figura 3).
Al realizar el anlisis multivariado nMDS, se encontr diferencias solo en la escala
temporal (ANOSIM: R global=0,335; p=0,001; R global=0,238 P=0,005, para meso, y
macrozooplancton, respectivamente). Sin embargo, el ANOSIM del factor espacial no
arrojo diferencias significativas (p>0,05).
En relacin a la diversidad de especies Shannon Wiever (H) para cada uno de los
grupos funcionales analizados se encontraron valores promedio de 1,88 y 0,50 para meso- y
macrozooplancton respectivamente. Al realizar el test de Kruskal-Wallis con la diversidad
(H) se encontr que tanto para la escala temporal como espacial, en los tres grupos
funcionales, no existen diferencias significativas. (p > 0,05) (Figura 4).
Figura 2. Grficos
hidrogrficos de la
Baha Chile en Isla
Greenwich
para
el
verano austral del 2014.
Figure 2. Hydrographic
graph Greenwich Bay
Island to Chile in the
austral summer of 2014.
Se puede observar que en Baha Chile de las Islas Shetland del sur durante el verano austral
del 2014, se encuentra una mayor abundancia de organismos mesozooplantonicos. Este
resultado concuerda con estudios realizados en el ecosistema antrtico donde la comunidad
estuvo principalmente compuesta de coppodos. (Bonicelli et al., 2008). En este contexto,
el estudio de la estructura de tamaos del plancton representa actualmente una
A)
Mesozooplancton
5000
Macrozooplancton
4000
3000
)
3
ci(/m
a
d
n
u
b
A
2000
1000
0
Tiempo (Das)
B)
3000
2500
2000
1500
)
3
ci(I/m
a
d
n
u
b
A
1000
500
0
Estacin 1
Estacin 2
Estacin 3
Estaciones
Figura 3. Abundancias del meso- y macrozooplanton en Baha Chile en Isla Greenwich durante el verano austral
del 2014. A) Indica la abundancia en una escala temporal (das) y B) a una escala espacial (estaciones).Las barras
negras indican Desviacin estndar (DE).
Figure 3. Mesozooplankton and Macrozooplanton abundances of Chile in Greenwich Bay Island during the
austral summer of 2014. A) Abundance in a time scale (days) and B )Spatial scale ( stations ) .The black bars
indicate standard deviation (SD ).
Mesozooplancton
Macrozooplancton
2,5
2
1,5
')
(H
m
o
p
a
ersd
iv
D
1
0,5
0
Tiempo (Das)
Figura 4. Diversidad temporal para el meso-, y macrozooplanton en Baha Chile en Isla Greenwich. Las
barras negras indican Desviacin estndar (DE)
Figure 4. Temporal diversity for the mesozooplankton and macrozooplanton in Chile in Greenwich Bay
Island. The black bars indicate standard deviation (SD)
En base a los resultados de abundancia, se puede observar que existe una variabilidad
temporal del zooplancton (Figura 3). Lo que estara dado por las condiciones de turbulencia
que existi en la baha en los das de muestreo (Figura 2). Los das de mayor abundancia de
zooplancton (01,03, 14 y 15 de marzo del 2014) fueron das donde existi un bajo ndice de
turbulencia. En este contexto, en la mayora de los sistemas marinos, la productividad tiene
una distribucin normal en relacin con la turbulencia. Es decir, con un poco de
turbulencia se forma una ventana ptima de productividad ya que se genera una mezcla de
nutrientes en la zona euftica. Pero en exceso de turbulencia, se genera un efecto negativo
hacia los organismos (Visser y Stips, 2002). La magnitud del efecto positivo de la
turbulencia depende fuertemente de la conducta de alimentacin del depredador y solo
funciona cuando existe una baja concentracin de alimento en el ambiente (Marrase et al.,
1990; Saiz et al., 1992). Sin embargo, la turbulencia en exceso genera un efecto negativo en
el forrajeo de los organismos, en especial por la deteccin de presas o depredadores (Visser,
2001).
En relacin a las abundancias en la escala espacial, observamos que no existe una variacin
entre las estaciones muestreadas, la teora que se plantea ante este resultado es que las
estaciones estaran muy cercanas entre s, ya que a pesar que no existan muchos estudios
recientes sobre la variabilidad del plancton en Baha Chile, estudios realizados muestran
resultados que difieren en este aspecto, encontrando diferencias en las abundancias en
distintas estaciones de muestreo (Ortega, 1998).
Resumen
El nitrgeno (N) tiene incidencia en el crecimiento y desarrollo de las plantas, afectando
directamente la tasa fotosinttica de las especies vegetales. Sin embargo, su
disponibilidad en el suelo es variable y muchas veces limitada. En la Pennsula
Antrtica durante las ltimas dcadas y como posible respuesta al calentamiento
regional registrado, se ha reportado el incremento de la poblacin de D. antarctica y C.
quitensis. Nuestra investigacin propone que el aumento de temperatura ha influido en
la velocidad de temperizacin de los suelos antrticos y por ende ha aumentado la tasa
de reciclaje de nutrientes y la disponibilidad de nitrgeno en el suelo, siendo aumentada
la tasa fotosinttica de las plantas; lo cual podra explicar el incremento de los
individuos tanto en nmero como en tamao. Para su evaluacin se estableci un ensayo
en invernadero donde se correlacion la incidencia de la aplicacin de nitrgeno sobre
distintos parmetros fotosintticos. Dos fuentes de nitrgeno (amonio y nitrato) y cinco
dosis (0, 4, 8, 16 y 32 mmol/L) fueron evaluadas. Ambas especies respondieron
aumentando su fotosntesis neta con la aplicacin de N, mientras que el desempeo
fotoqumico del fotosistema II no se vi mayormente afectado con los tratamientos. Las
curvas de luz mostraron que C. quitensis tiende a tener ETRs ms altos en condiciones
de limitacin de N mientras que D. antarctica los obtiene a las dosis medias (8-16
mmol/L), los contenidos de pigmentos fueron influenciados positivamente con la
adicin de N, apreciando un aumento mayor en D. antarctica que en C. quitensis;
mientras que las firmas espectrales junto con los otros parmetros evaluados mostraron
un efecto negativo a la dosis de 32 mmol/L NH4+. Por lo tanto podemos inferir que la
disponibilidad de N, a concentraciones no txicas, tiene un efecto positivo sobre el
rendimiento fotosinttico para ambas especies.
Palabras claves: Nitrgeno, Fotosntesis, Deschampsia antarctica, Colobanthus
quitensis
Agradecimientos: Proyecto CONICYT-INACH ART 1102.
Los ecosistemas antrticos son particularmente frgiles ante los disturbios y poseen una
muy baja resiliencia, se ven afectados por florecientes actividades tursticas que, si bien
se encuentra muy poco desarrollada actualmente, est incrementando rpidamente. Por
lo tanto, conocer en profundidad la fauna de artrpodos presente en la regin se torna
fundamental para evaluar el impacto de potenciales disturbios. El orden Dptera es bien
conocido por su amplia distribucin en los continentes y su rpida colonizacin de
nuevos sitios. El objetivo de este trabajo fue realizar un relevamiento de la
artropodofauna area en las inmediaciones de la base cientfica Artigas. Las reas de
estudios fueron el Lago Uruguay, el lago cercano al Ionosphrico y la base Cientifica
Artigas. Se utilizaron trampas de cada, trampas de intercepcin de vuelo y recoleccin
manual (en la base se revisaron 10 cmaras spticas). Se obtuvieron: 9796 individuos de
Parochlus steinenii (Diptera, Chironomidae) en el Lago Uruguay, y en el Lago cercano
al Ionosphrico un total de 4 individuos de la misma especie. En la Base Artigas se
recolectaron 13 hembras, 15 machos y una pareja en cpula de Trichocera maculipennis
(Diptera, Trichoceridae), esta especie se registr dentro de la base pero tambin en el
exterior, en una trampa de cada y entre las rocas. En las cmaras spticas se hallaron 2
especies de Dpteros: Parochlus steinenii y Trichocera maculipennis Las cmaras
spticas as como los mdulos de la base mantienen una temperatura elevada con
respecto al exterior para asegurar su correcto funcionamiento, esto genera un ambiente
propicio para el desarrollo de especies forneas no adaptadas a las bajas temperaturas
como es el caso de Trichocera maculipennis. Sin embargo el muestreo evidencia que no
solo se encuentra dentro de la base sino tambin en zonas aledaas, pudiendo tratar de
un caso de adaptacin de esta especie.
dos premisas, uno puede ubicar la areola ms antigua y conocer su edad; lo cual
permitir analizar su qumica para conocer la atmosfera pasada de la Antrctica.
Financiamiento: Este proyecto se ejecuta en el marco del Programa Nacional
Antrtico del Per, a cargo del Ministerio de Relaciones Exteriores - MRE; y que
en su financiamiento adems del MRE tambin contribuyen el Museo de Historia
Natural de la UNMSM y el Instituto Peruano de Energa Nuclear - IPEN.
Palabras claves: Cambio Climtico,
geographicum, crecimiento y desarrollo
Antrctica,
ECAMP,
2013
2015
Rhizocarpon
INTRODUO
O interesse no continente antrtico justifica-se por diversos fatores, tais como sua
importncia no equilbrio do clima mundial, a riqueza de sua fauna e por suas
caractersticas que o tornam um laboratrio nico, sendo possvel obter informaes
climticas de at 900 mil anos atrs e reconstruir a atmosfera do planeta graas s suas
vrias camadas de gelo acumuladas ao longo do tempo (VIEIRA, 2006; BRASIL, 2009).
Somado a importncia cientfica e ambiental, o interesse econmico outro aspecto que,
possivelmente, foi o maior incentivador das primeiras incurses ao continente
(SCHELLMANN e KOZEL, 2005), visto as reservas incalculveis de diversos minerais
como ferro, petrleo e gs, terem criado expectativas quanto explorao destes recursos.
Porm, sua maior riqueza ainda a gua potvel, cuja quantidade presente no continente
representa cerca de 70% a 80% da gua doce do planeta (BRASIL, 2009).
As baixas temperaturas, os fortes ventos que surgem rapidamente trazendo riscos
segurana por reduzirem a sensao trmica e dificultando processos construtivos, bem
como a dificuldade de obteno de gua em estado lquido e a quase ausncia de matrias
primas, constituram barreiras a serem superadas pela arquitetura (ALVAREZ, 1995).
Apesar das caractersticas do meio ambiente antrtico o tornarem um local inspito para
a ocupao humana, o interesse pelo continente incentivou um amplo desenvolvimento
de inovaes tecnolgicas permitindo a presena do homem no Continente Branco em
condies de segurana e habitabilidade.
Alm da preocupao com a segurana e o bem-estar, a presena humana requer a
preocupao quanto preservao ambiental do continente e a obedincia aos acordos
estabelecidos, como o Tratado Antrtico e o Protocolo de Madri, que tornam os pases
signatrios responsveis em cumprir uma srie de requisitos com o objetivo principal de
designar a Antrtica como uma reserva natural dedicada paz e a cincia (VIEIRA, 2006;
ALVAREZ, 1995).
Paralelamente ao desenvolvimento cientfico iniciou-se o turismo comercial que, apesar
de ter tido um comeo modesto, atualmente tem representado uma expressiva parcela
referente ao nmero de pessoas que se dirigem ao continente, chegando at mesmo a
superar o nmero de pesquisadores e pessoas envolvidas em programas cientficos. No
tem sido ignorado que esse nmero tem se mostrado crescente ao longo dos anos e
algumas regulamentaes tm sido desenvolvidas na busca da preservao do continente
(INTERNATIONAL..., 2015).
Dessa forma, esse artigo visa analisar a presena humana no continente a partir das
primeiras incurses exploratrias at chegar a prtica de um turismo ambiental e a
possvel necessidade de criao de espaos para receber tal demanda. Como resultado,
busca-se avaliar se essa presena seria benfica no s ao continente como tambm ao
planeta, visto a influncia que este pode sofrer como resultado das aes humanas no
Continente Antrtico.
MATERIAIS E MTODOS