IMUNO-HEMATOLOGIA

Transfuso de sangue de carneiro

e brao a brao

Produtos originados do sangue total

Hemocomponentes: gerados nos servios de hemoterapia

Hemoderivados: gerados em escala industrial

Afrese
- procedimento

em que o sangue do doador passa por um equipamento

que retira um componente e devolve os outros ao organismo

 James Blundell (1818): 1a transfuso com sucesso

Karl Landesteiner (1901): classificao das hemcias em

quatro tipos: A, B, AB e O

Doao de sangue: um ato solidrio

Atualmente....
328 Ag eritrocitrios descritos, 33 sistemas de grupos
sanguneos
Ag eritrocitrios constitudos por acares ou protenas e so

identificados pelo uso de anticorpos (ex: Ac anti-A)

terminologia dos grupos sanguneos: International Society of Blood

Transfusion (ISBT)

Sistemas de grupos sanguneos e Ag mais importantes

 A biologia molecular permite identificar

novos antgenos no detectveis pelas

tcnicas de aglutinao

CLASSIFICAO DAS
HEMO-AGLUTININAS (anticorpos contra Ag de
grupos sanguneos)
1 - de acordo com o estmulo
Ac naturais: detectados naturalmente a partir de 3-6

meses de idade, predominantemente IgM; podem ser IgG

e IgA; no necessrio contato com o Ag
Devem-se reao a bactrias que colonizam o intestino e que

possuem acares semelhantes aos presentes nas hemcis

Ac imunes: decorrentes de estmulo do sistema imune por

transfuso incompatvel ou contato com me com

hemcias maternas: doena hemoltica perinatal - DHPN)
Doena hemoltica perinatal ou do recm nascido ou eritroblastose fetal

Anticorpos regulares e irregulares

Ac regulares: a ocorrncia esperada (ex: Ac anti A)
Ac irregulares: a ocorrncia no esperada (ex: Ac

anti D

2- de acordo com a origem do Ag que reconhecido

Alo anticorpos: reagem com um Ag estranho, no

presente nas hemcias do indivduo

ex.: Ac anti-A e anti-B em indivduos do grupo O

Auto anticorpos: reagem com um Ag presente nas

hemcias do indivduo
ex.: auto anticorpos contra as hemcias, associados com anemia

hemoltica autoimune

3- de acordo com a temperatura de reao

anticorpos frios: reao Ag-Ac mxima em

temperaturas baixas, cerca de 4 C

anticorpos quentes: reagem melhor a 37 C.

4- de acordo com o comportamento em testes imunohematolgicos

Ac completos (aglutinantes): promovem aglutinao de

hemcias em meio salino temperatura ambiente

Ex: anticorpos IgM

Ac incompletos (no aglutinantes): reagem com o

antgeno, porm no provocam aglutinao das

hemcias.
necessrio usar um meio artificial para provocar a aglutinao

(pela reduo do potencial zeta) ou usar o soro de Coombs (anti

anticorpo anti IgG) para que sejam detectados
ex: anticorpos IgG

Potencial zeta
Em soluo salina, as hemcias apresentam carga

negativa o que faz com que haja repulso entre elas

O potencial zeta impede aglutinao espontnea das hemcias

Fenmeno de hemoaglutinao

Substncias potencializadoras
O potencial zeta pode ser modificado por:
Fixao de anticorpos carregados positivamente
Alterao da composio do meio: LISS (soluo de baixa fora

inica) ou adio de substncias macromoleculares como a

albumina

SISTEMAS H & ABO

Determinantes antignicos (epitopos) so carboidratos

Sistemas ABO e H
Controle gentico por enzimas que conjugam resduos de

acar a uma substncia precursora:

Gene de H: codifica transferase de fucose formao do Ag H
Gene do grupo A: codifica transferase que adiciona N-

acetilgalactosamina ao Ag H formao do Ag A

Gene do grupo B: codifica transferase que adiciona D-galactose

ao Ag H formao do Ag B

Ac anti A,B

SUBGRUPOS DE A
A1 (80%): 1 x 106 stios antignicos
A2 (19%): 2,5 x 105 stios antignicos
E diferena qualitativa

Outros subgrupos (1%): A3, Ax e Am

SUBGRUPOS DE B
Menos frequentes, mais comuns no Oriente
Subgrupos: B3, Bm e Bx

Os Ag do sistema ABO esto presentes em

outros locais alm das hemcias
forma solvel: secrees e outros fluidos (saliva,

lgrimas, leite e lquido amnitico)

membrana de tecidos epiteliais e rgos como medula
ssea e rins
Devem ser considerados quando se faz transplante de rgos

FENTIPO BOMBAY OU BOMBAIN

Gentipo hh ausncia do Ag H

Presena de Ac anti-H, anti-A e anti-B no plasma

S pode receber hemcias de outro Bombay
Maro de 2013: identificados 2 pacientes Bombay no Hemominas
Hemominas tem 1 doador BOMBAY dentro de 1 milho de

doares!!!!!!!!!!

SISTEMA Rh (Rhesus)
Composto por mais de 45 Ag
Ag mais imunognicos: D, C, E, c, e
Rh+: presena do Ag D

Ag D: mais de 30 eptopos (9 mais imunognicos)

VARIAES DO ANTGENO D
D fraco (99%): alterao quantitativa do Ag D (menos

stios antignicos)
D parcial ou incompleto ou variante (1%): alteraes

qualitativas Do Ag D, falta um ou mais eptopos de D

D parcial fraco: ambas alteraes

No laboratrio, todos esses pacientes so classificados como

fraco (no tem como distinguir pelo teste que usado)

Variaes do Ag D

Pesquisa de Ag D nas hemcias

Hemcias do paciente + soro comercial anti-D
Se no houver reao fazer teste de Coombs

indireto
Se der positivo, soltar resultado como:

fator RhD positivo (D fraco)

Rh nulo
ausncia de Ag do sistema Rh (D, C,c, E,

e), instabilidade da membrana anemia

hemoltica

Agulha no palheiro

TESTES LABORATORIAIS NA IMUNO

HEMATOLOGIA
Podem ser feitos em tubo, micro-placa, gel centrifugao

(carto)

TESTES LABORATORIAIS NA IMUNO

HEMATOLOGIA
1- Gel centrifugao (carto)
mais sensvel, custo elevado
necessidade de centrfuga especial

2- Microplaca
Rapidez, custo mais baixo, necessidade de centrfuga
de microplaca
o Ideal para servios de hemoterapia
o

3 Mtodo convencional (em tubo)

Sistema ABO
I- Prova direta: pesquisa de Ag nas hemcias:
hemcias do paciente 3- 5% + Ac anti-A

+ Ac anti-B

II- Prova reversa

Pesquisa de anticorpos anti A e anti B no soro do paciente:
soro + hemcias reagentes comerciais A1neg e B

neg

Hemcias teste - DiaCell ABO (A1+B): hemcias A1 e B RhD negativo

a prova reversa no recomendada em recm-nascidos

Causas de discrepncia na classificao ABO

1- relacionadas a Ac (interferem na prova reversa):
ausncia ou baixa atividade da aglutinina esperada (pacientes

idosos)
: interferncia dos Ac maternos em recm nascidos

2- relacionadas a Ag (interferem na prova direta):

baixa expresso de Ag do sistema ABO nas hemcias de recm-

nascidos (usar mtodos mais sensveis)

Interpretao das provas direta e reversa

do sistema ABO

SISTEMA Rh (em tubo)

Tubo 1: 50 mL de suspenso de hemcias do

paciente 5% + 50 mL de Ac anti-D
e

Tubo 2 (controle Rh): 50 mL de suspenso de

hemcias do paciente a 5% + 50 mL de controle Rh

Controle Rh: reagente com aditivos usados no soro anti-D para

otimizar a reatividade do Ac, sem Ac anti D

aglutinao no tubo 1 Rh D positivo

aglutinao no tubo 2 no deve ocorrer

SISTEMA Rh (em tubo)

ausncia de aglutinao no tubo 1 fazer Coombs
indireto (o reagente de Coombs deve ser
acrescentado nos tubos 1 e 2)
se positivo no tubo 1, soltar como: Rh D positivo (D fraco)

No deve dar positivo no tubo 2 (controle)

Teste da anti globulina (TESTE DE COOMBS)

Soro de Coombs:
Poli especfico: contra IgG e C3d (pode tambm reagir com IgA e IgM)
Monoespecfico: anti C3 ou IgG

a) Teste da anti globulina direto TAD (Coombs Direto)

Pesquisa Ac e/ou complemento ligado in vivo nas hemcias
do paciente

Anemia hemoltica autoimune, doena hemoltica perinatal

B) Pesquisa de anticorpos irregulares PAI (Coombs

Indireto)
Pesquisa Ac

livres no soro

Usos do PAI: pesquisa de Ac anti-D materno e de Ac irregulares

antes da transfuso

Usa hemcias teste do grupo O

Triacel: suspenso de hemcias do grupo O fenotipadas para Ag dos

sistemas Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, MNS, P e Lutheran

possvel identificar a especificidade do Ac irregular

Pesquisa de Ac irregulares
Soro do paciente + hemcias-teste (DiaCell I + II)

Pesquisa de Ac irregulares

KEL: sistema Kell

FY: sistema Duffy
JK: sistema Kidd
LE: sistema Lewis
P: sistema P
MNS: sistema MNS
LU: sistema Lutheran
Di: sistema Diego

Identificao de Ac irregulares
Soro do paciente + DiaPanel (11 hemcias teste)

Identificao de anticorpos irregulares

3- Testes Pr Transfusionais
Recomendaes para transfuso:
Doador e receptor com mesmo grupo ABO (isogrupo)

sempre que possvel.

Excepcionalmente, respeitar a regra transfusional:

Extrado de:

PROVA CRUZADA MAIOR (para transfuso de

concentrado de hemcias):
soro/plasma do receptor + hemcias do possvel doador
+ (4 condies)
se positivo, identificar o Ac irregular

Avaliao imuno-hematolgica pr
transfuso

PROVA CRUZADA MENOR (para transfuso de

plasma):
hemcias do receptor + soro/plasma do possvel doador

(4 condies)

DOENA HEMOLTICA PERI-NATAL

Reao contra Ag presentes nas hemcias fetais e

ausentes nas hemcias maternas

Causas:
incompatibilidade sistema Rh:

98% dos casos

outras causas: incompatibilidade nos sistema ABO, Lewis, Kell e

outros.
incompatibilidade por ABO: de forma geral no grave, pode

prevenir imunizao materna por outro Ag!!!!

DOENA HEMOLTICA PERI-NATAL

Quando ocorre a imunizao materna?
aborto, procedimentos invasivos (amniocentese), transfuso
incompatvel, nascimento
Maior transferncia de clulas fetais: 3 trimestre de

gestao e parto

Doena hemoltica peri-natal

Acompanhamento:
durante a gravidez:
PAI no soro materno: determinao do ttulo de IgG contra Ag

presentes nas hemcias fetais

Amniocentese: determinar concentrao de pigmentos biliares
se necessrio transfuso de hemcias O negativo

aps o nascimento:
determinar grupo sanguneo do recm-nascido
TAD do sangue do cordo umbilical

Doena hemoltica peri-natal

Efeitos sobre o feto: hidropisia fetal, insuficincia

cardaca, bilirrubinemia, anemia, kernicterus e morte

Tratamento:
fototerapia
ex-sanguneo-transfuso

Preveno da DHPN
Imunoprofilaxia anti D: doses intramusculares de IgG

anti-D (Matergam, Rhogan): impede imunizao materna

Deve ser feito com 28-30 semanas de gestao e at

72 h aps o parto

remoo das hemcias fetais no linfonodo e bao

Hidropisia fetal
Edema generalizado do feto

Kernicterus
Forma de ictercia que aparece no recm-nascido, de especial gravidade

pela tendncia a produzir alteraes neurolgicas irreversveis. Deve-se

ao da bilirrubina indireta livre sobre o sistema nervoso central.

Fototerapia

Onde estudar
Imunoensaios: Fundamentos e aplicaes. Adelaide J.

Vaz