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cdigo: 14070191
cdigo:
cdigo: 14070058
cdigo: 14070205
cdigo: 14070223
Grupo: lunes 9 a 1 pm
Lima Per
2015 ll
INTRODUCCION
Podemos concluir que las actividades de los microorganismos se ven muy
afectadas por las condiciones qumicas y fsicas del medio. El conocimiento
de los efectos ambientales nos permite explicar la distribucin de los
microorganismos en la naturaleza y hace posible disear mtodos que
controlen o potencien las actividades microbianas.
Los mecanismos de accin de los agentes fsicos y qumicos:
Inhiben la sntesis de la pared celular, o aceleran su degradacin, alteran la
permeabilidad selectiva de la membrana citoplsmica, desnaturalizan las
protenas, y alteran su estructura secundaria y terciaria y inhiben la
actividad enzimtica mediante el bloque de los radicales sulfhidrilo (SH)
Los agentes fsicos; que actan en los microorganismos causando cambios,
evaluados en esta prctica fueron: temperatura, se determin a que medida
de esta se da la muerte trmica de cepas de Escherichia Coli y
Staphylococcus aureus; y la accin de la presin osmtica, determinando a
que concentracin de NaCl se ve afecta el crecimiento de la cepa de E. Coli.
Los agentes qumicos, que actan en los microorganismos causando
cambios, evaluados fueron: la concentracin de iones hidrogeno, se
determin el efecto del pH en el crecimiento y desarrollo microbiano en
cultivos de E. Coli con 24 horas de esas; y la accin de los desinfectantes y
antispticos como inhibidores del desarrollo microbiano en cepas de S.
aureus.
Desinfectantes y antispticos:
MATERIALES
EFECTO DE LA TEMEPRATURA
Cepas de Escherichia coli
aureus
(ambas
24
y Staphylococcus
horas
de
edad).
de
NaCl
al
EFECTO DE LA
CONCENTRACION DE
IONES HIFROGENO (ph )
EN LOS MICROORGANISMOS
Desinfectantes:
Leja 10%
Cresol 5%
Pinesol
Antispticos:
Alcohol 70%
Agua oxigenada
Merthiolate
Pinesol
Jabn medicado(Protex)
Disco
de
papel
filtro,
pinzas.
Plumn indeleble.
DIAGRAMA DE FLUJO:
I)
EFECTO DE LA
TEMPERATURA
CULTIVO
SOMETEMOS
Escherichia coli
40C y
65C
CADA
Sthaphylococcus
aureus
0, 40y 80
HACEMOS DILUCIONES
SERIADAS (1ML) DE CADA
CULTIVO (10-3)
SEMBRAMOS 0,1 ML DE CULTIVO POR
DIFUSIN EN MEDIO DE AGAR NUTRITIVO
ACCION DE
PRESION
OSMOTICA
NaCl
CONCENTRACION
5%
10%
20%
40%
ROTULAMOS LAS
PLACAS DE
MANERA
INCUBAR POR 48
HORAS A 28C
COMPARAMOS
RESULTADOS DE
CRECIMIENTO
II)
PH 3
PH 5
PH 7
PH 9
ANOTAMOS
OBSERVACIONES
ACCION DE LOS
DESINFECTANTES Y
ANTISEPTICOS
AGENTES
3
DESINFECTANTES
DIVISIONE
DIVISION DE
PLACAS CON
4
AGENTES
DIVISIONES
ANTISEPTICOS
1 ml de
cultivo +
Agar
nutritivo
.LEJIA AL
10%
.CRESOL
. PINESOL
1 ml de
cultivo +
Agar
nutritivo
SEMBRAMOS S.
aureus POR
DIFUSION
CON UN PINZA
ESTERIL
COLOCAMOS UN
DISCO DE PAPEL
FILTRO
PREVIAMENTE
EMBEBIDO EN
SOLUCION SOBRE
LA PLACA
.ALCOHOL AL
70%
.AGUA
OXIGENADA
.
MERTHIOLATE
INCUBAMOS A
28CPOR 48
HORAS
Escherichia
coli
INOCULAMOS 1
ML DE CADA
CEPA
Staphylococcus
aureus
.JABON
EN
CALDO DE ROJO
FENOL
CON
GLUCOS
A
LACTOS
A
SACARO
SA
INCUBAR LOS
TUBOS A 28C
POR 48 HORAS
PROCEDIMIENTO:
ACCION DE AGENTES FISICOS SOBRE LOS
MICROORGANISMOS
A)EFECTO DE LA TEMPERATURA
1. Sometemos a 40C y 65C los cultivos de Escherichia coli y
Sthaphylococcus aureus. A los 0, 40 y 80 realizaremos
diluciones seriadas.
1.- Inocule con una azada el cultivo de E coli en cada uno de los tubos de
caldo nutritivo con distintos valores de pH. Incubamos a 28C por 48 horas y
anotamos resultados.
AGENTES ANTISEPTICOS
1.- Dividir a placa de Agar Nutritivo en 4 mitades con el plumn
indeleble.
2.- Realizar el mismo procedimiento que con los agentes
desinfectantes con la cepa de Staphylococcus aureus . Incubamos a
28C por 48 horas y anotamos las observaciones con los datos de
la escala acoplada en la gua de trabajo y as mismo anotamos los
resultados.
RESULTADOS:
Efecto de la temperatura
Temperatura
Tiempo
(min)
40C
65C
Escherichia
coli
2,4x103
Staphylococcus
aureus
2,20x103
40
3,20x103
4,80x103
80
7,20x103
6,40x103
1,8x103
1,75x103
40
2,65x103
4,20x103
80
4,00x103
5,30x103
Staphylococcus aureus:
Escherichia Coli:
Interpretacin de resultados
Para determinar el efecto de la temperatura sobre el microorganismo,
comparamos 2 cepas Escherichia coli y Staphylococcus aureus a
diferentes temperatura de 40 y 65C.
Comparamos el efecto para una misma cepa y obtuvimos que el
crecimiento bacteriano fue mayor para la temperatura de 40 para
ambos microorganismos y que la cantidad de colonias aumentaban
de manera notoria a esta temperatura, tambin pudimos ver que el
nmero de colonias aumentaban en mayor cantidad para el
Escherichia coli a comparacin de Staphylococcus aureus para las dos
temperaturas de acuerdo a nuestro resultados.
Observamos que la temperatura de mayor crecimiento de las dos
cepas fue el de 40, y que, y que el E. Coli es ms sensible a la
temperatura de 65C ya que su aumento de colonias fue mayor en
comparacin del Staphylococcus aureus.
Discusin de resultados
De acuerdo a nuestras graficas pudimos ver en todas, una curva de
crecimiento, a pesar de que las temperaturas no fueron las ptimas
para el crecimiento de las cepas.
El desarrollo para el crecimiento ptimos para el Escherichia coli y
Staphylococcus, es de temperatura de 40 ya que ah pudimos
observar un mayor nmero de colonias formadas.
es
AGAR NUTRITIVO
SOL. SALINA
(5%)
SOL.SALINA
(10%)
SOL.SALINA
(20%)
SOL.
SALINA
(40%)
SI
NO
NO
Imperceptib
le
152
00
00
--
Represen
tacin
fotogrfic
a final
Presencia
de
colonias
Numero
de
colonias
INTERPRETACION:
o El crecimiento bacteriano puede ser afectado grandemente por
las cantidades de agua que entran o salen de la clula. Cuando
el medio que rodea a un organismo es hipotnico (presencia de
pocos solutos) resulta una presin osmtica mayor dentro de la
clula. La pared de la mayora de las bacterias es tan fuerte y
rgida, que un hinchamiento celular ligero generalmente es
inaparente.
DISCUSIN:
En funcin de los necesarios conceptos previos podemos concluir
que los resultados obtenidos son fidedignos y correspondientes a
lo esperado para cada caso. Profundizaremos estos con el
siguiente grafica de curvas en funcin del crecimiento y la
concentracin salina.
++
+++
pH
pH 7.0
pH 9.0
pH 11.0
5.0
+
++++
+++
++
Interpretacin de resultados:
Para el estudio del pH de la bacteria Escherichia coli preparamos
diferentes soluciones de concentraciones variadas de pH como lo
muestras nuestro cuadro, en cual podemos observar por turbidimetria
E.coli
ALCOHOL AL 70%
S. aureus
+++
++
+
+
H2O2
MERTHIOLATE
JABON PROTEX
Agentes antispticos
+
++
+++
ANTISEPTICO
ALCOHOL AL 70%
Halo de inhibicin en mm
frente al S. aureus
5 mm
H2O2
MERTHIOLATE
JABON PROTEX
4 mm
1mm
1mm
Interpretacin de resultados:
Con lo descrito previamente, notamos que despus de todo, el jabn
antibacterial Protex no deba ser tan efectivo como quiz
suponamos. Asimismo el Methriolato es un compuesto, que
necesita una alta concentracin para poder inhibir la proliferacin de
microorganismos, mas no la muerte de estos. Por lo tanto esto dara
razn, al poco tamao del halo de inhibicin que poseen en el
experimento de las placas. Por otro lado, el alcohol al 70% posee
gran efectividad frente a bacterias Gram positivas y Gram negativas ,
lo que hace que en el experimento, haya podido tener un halo de
mayor tamao que la de los dems antispticos. Por ltimo el
perxido de hidrogeno es un agente oxidante de efecto fugaz,
pues se descompone frente a las catalasas de los tejidos.
Asimismo los radicales antioxidantes que posee ataca a los
componentes esenciales de los microorganismos como lpidos,
protenas y ADN, lo que lo hace efectivo para detener la
proliferacin de bacterias Gram positivas, en especial del
Staphylococcus aureus.
GLUCOSA:
(+)
S. Aureus: naranja
(+)
SACAROSA:
E. Coli: anaranjado rojizo
(+)
S. Aureus: amarillo
(+)
LACTOSA:
E. Coli: amarillo
(+)
S. Aureus: naranja
(+)
Especificaciones:
El caldo base rojo de fenol; y sacarosa, glucosa o lactosa, son
utilizados para la diferenciacin de cultivos puros, en base a la
capacidad de los microorganismos en estudio (E. Coli y S. Aureus)
para fermentar la glucosa.
Formula:
Peptona de casena.
Cloruro de sodio.
Glucosa, sacarosa o lactosa.
Rojo de fenol.
Explicacin:
La capacidad de las bacterias de fermentar carbohidratos es utilizado
como un criterio para su identificacin.
El medio provee los
requerimientos
nutricionales
para
el
crecimiento
de
los
microorganismos y contiene Rojo de fenol como indicador de pH.
Este indicador fue utilizado en este experimento obteniendo
resultados altamente confiables.
La peptona provee la fuente de nitrgeno para el buen desarrollo de
los microorganismos, el cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico del medio y el Rojo de Fenol acta como indicador, virando
de color rojo-naranja a amarillo en presencia del cido producido por
la fermentacin del azcar.
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Tanto la E. Coli como S. Aureus son bacterias anaerobias facultativas,
es decir, pueden desarrollarse bajo condiciones de presin de oxgeno
bajas. Esto les permite obtener energa fermentando Hidratos de
carbono, y generar cidos derivados de los mismos. Por eso
disminuyen el PH de su medio.
Podemos observar que en las muestras de glucosa y lactosa que
contenan E. Coli se tornaron amarillo lo que garantiza la
fermentacin, mientras que la sacarosa se torn rojo anaranjado lo
que tambin confirmara que se dio de manera ms leve.
De igual forma en la muestra que contena cepa de S. Aureus, las 3
muestras con sacarosa, lactosa y glucosa cambiaron su coloracin de
rojo intenso a tonalidades de amarillo-anaranjado confirmando la
fermentacin (positivo).
Nuestros resultados se dieron de la manera que se esperaba,
confirmando el poder de ambas bacterias como fermentadores de
carbohidratos.
CUESTIONARIO:
1. De los microorganismos estudiados Qu estructuras
bacterianas le confieren resistencia trmica? Por qu?
En el caso del Staphylococcus aureus que son Gram-positivos
carentes de endosporas se debe a su capacidad de producir toxinas
consumirse
FUENTE:www.um.es/adyv/diversidad/salud/nutricion/con
servacion.php- Universidad de Murcia: Avda. Teniente
Flomesta, n 5 - 30003 - Murcia
3. Qu cuidados debemos practicar frente a la cantidad de
agua extra o intracelular en posibles productos frescos a
temperatura ambiente?
La actividad de agua (aw) es la cantidad de agua libre en el alimento,
es decir, el agua disponible para el crecimiento de microorganismos y
para que se puedan llevar a cabo diferentes reacciones qumicas.
Tiene un valor mximo de 1 y un valor mnimo de 0. Cuanto menor
sea este valor, mejor se conservar el producto. La actividad de
agua est relacionada con la textura de los alimentos: a una mayor
actividad, la textura es mucho ms jugosa y tierna; sin embargo, el
producto se altera de forma ms fcil y se debe tener ms cuidado.
Cuanto menor es la actividad de agua de un alimento, mayor
FUENTE:bnnnnwww.consumer.es/seguridadalimentaria/ciencia-y-tecnologia/2008/03/26/175613.php
4. Qu ejemplos de aplicacin estn basados en la
fisiologa de la presin osmtica?
ESTABILIZACION DE VINOS: Tiene por objeto eliminar un precipitado
de tartrato potsico que disminuye generalmente su valor comercial y
puede hacerse precipitando los tartratos de forma controlada, tras
concentrar el vino por smosis inversa.Hacer pasar el vino a travs de
una smosis inversa, obteniendo, por un lado, un permeado que
representa aproximadamente el 60% del volumen inicial, y por otro,
un concentrado que supone el 40% restante en el que los distintos
productos que no pueden atravesar las membranas.
CONCENTRADO DE ZUMOSDE FRUTAS: La concentracin elimina el
agua, y mantiene el aroma y resto de molculas. La produccin de
zumos concentrados mediante smosis inversa tiene las siguientes
FUENTE: http://www.lenntech.es/biblioteca/osmosisinversa/que-es-osmosis-inversa.htm
5. Cul es la razn de usar el alcohol de 70%?
El mecanismo de accin de los alcoholes es la desnaturalizacin de
las protenas de los microorganismos. La desnaturalizacin
proteica slo es posible en presencia de agua; por este motivo el
alcohol absoluto presenta un poder bactericida mucho menor que las
mezclas de alcoholes con agua. Podra tener cierta accin
bacteriosttica al inhibir la produccin de metabolitos esenciales para
la divisin celular rpida. Tiene accin bactericida pero poco efecto
residual. Presenta un inicio de accin retardado; por este motivo se
debera dejar actuar dos minutos antes de cualquier procedimiento.
Bactericida de potencia intermedia. Es activo frente a bacterias
Gram positivas y Gram negativas, incluyendo patgenos
multirresistentes (Staphylococcus aureus).
Como elemento de desinfeccin el alcohol diluido con agua en
una proporcin de 70 y 30 es ms efectivo que puro. El
alcohol diluido desinfecta mejor. Si entran en contacto con alcohol
puro, las estructuras externas de los microorganismos se deshidratan
y en ocasiones, forman una capa gruesa que impide el ingreso del
alcohol y protege al microbio. En cambio, el alcohol diluido al 70%
no tiene la capacidad de deshidratar esas capas externas, por
eso penetra en el interior de las bacterias y resulta efectivo para
destruirlas.
FUENTE:http://www.funlarguia.org.ar/Herramientas/Guia
-de-Prevencion-de-Infecciones-Intra-Hospitalarias/Usode-Antisepticos-y-Desinfectantes
6. En un proceso productivo de derivados de frutas. Cul
sera el agente contaminante principal? Cul sera su agente
qumico de control? Qu funcin cumplira este agente?
Proponga un ejemplo.
En un proceso de derivados de frutas nuestros agentes
contaminantes serian bacterias, mohos, y levaduras principalmente.
Por esta razn utilizaramos el Hipoclorito de sdio a 5,25% diluido por
1L de agua. Este agente cumple la funcin de oponerse a la sepsis o
putrefaccin de materiales vivos. Se trata de desinfectantes con baja
actividad txica hacia los tejidos vivos donde se aplican.
FUENTE:
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/14agquimicos.h
tm
FUENTE:http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/dermato
logia/v15_n2/pdf/a02.pdf
8. De acuerdo a la capacidad fermentativa de los
carbohidratos por las bacterias estudiadas. Indique los
alimentos que pueden ser potencialmente deteriorados por
esta actividad metablica. Por qu?
En la fermentacin alcohlica, tiene como finalidad biolgica
proporcionar
energa
anaerbica
a
los
microorganismos unicelulares (levaduras)
en
ausencia
de oxgeno a partir de la glucosa. El etanol resultante se emplea
en la elaboracin de algunas bebidas alcohlicas, tales como
el vino,
la cerveza,
la sidra,
el cava,
etc.
En
la
fermentacin
actica,
es
la fermentacin bacteriana por Acetobacter,
un gnero de
bacterias aerobicas, que transforma el alcohol etlico en cido
actico, la sustancia caracterstica del vinagre. La fermentacin
actica del vino proporciona el vinagre debido a un exceso
FUENTE:http://www.unavarra.es/genmic/curso
%20microbiologia%20general/20-bacterias
%20lacticas.htm
Defina:
-Antisptico:
Un antisptico es un tipo de desinfectante que, cuando se aplica
sobre superficies del cuerpo o en tejidos expuestos, destruye o inhibe
el crecimiento de microorganismos en tejidos vivos, sin causar
efectos lesivos. Algunos antispticos se aplican sobre piel intacta o
membranas mucosas, quemaduras y heridas abiertas para prevenir la
sepsis al desbridar o excluir los microbios de estas reas.
-Desinfectante:
Un desinfectante es un producto que permite eliminar las bacterias,
los virus o los microorganismos. La utilizacin de un desinfectante
permite limitar o, incluso, hacer desaparecer completamente,
los riesgos de contaminacin de una enfermedad. En medicina
un desinfectante sirve para limpiar o dar asepsia a todo lo que est
en contacto con un paciente como el material mdico, las camas, los
suelos, las camillas o los pomos de las puertas. Entre los
desinfectantes ms utilizados encontramos la cal viva, el etanol, el
yodo y el cloruro de sodio.
-Bactericida:
Un efecto bactericida es aquel que produce la muerte a una
bacteria. Un efecto bactericida est producido por sustancias
bactericidas. Estas sustancias son secretadas por los organismos
como medios defensivos contra las bacterias. antimicrobianos de
efecto lsico o ltico (Lisis) en las bacterias, provocan una reduccin en
la poblacin bacteriana en el husped o en el uso de sensibilidad
microbiana.
Los
bactericidas
antispticos o antibiticos.
pueden
ser desinfectantes,
-Bacteriosttico:
Sustancia que dificulta la reproduccin bacteriana. Una sustancia
bacteriosttica no produce la muerte de las bacterias, pero al
dificultar o impedir su reproduccin la cepa bacteriana envejece y
desaparece.
-Plasmlisis:
En los vegetales, la semipermeabilidad de la membrana
citoplasmtica y la permeabilidad de la pared celular originan, entre
otros, el fenmeno de plasmlisis. Se produce ya que las
condiciones del medio extracelular son hipertnicas; debido a esto, el
agua que hay dentro de la vacuola sale al medio hipertnico
(osmosis) y la clula se deshidrata ya que pierde el agua que la
llenaba. Finalmente se puede observar cmo la membrana celular se
separa de la pared (la clula se plasmoliza). Si es que este
fenomeno ocurre, la planta corre el riesgo de una muerte segura. Al
menos hasta que consiga agua que llene la vacuola, volvindose la
clula turgente nuevamente y que se recupere.
Bibliografa:
BROOKS,Geo.JanetS.Butel.MicrobiologamdicadeJawetz,Editorial:Mxi
co.ElManualModerno,2005.Pag.48-51
Isabel Arias B1 , Jos Carlos Huguet, Rev Peru Med Exp Salud Publica
2002; 19 (4)
ROJASCAMPOS,Norman.ElLipopolisacaridobacteriano:unapotenteendot
oxinaconmltiplesactividadesbiolgicas.acultaddeMicrobiologa,Universid
addeCostaRica
Paginas web:
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/13agfisicos.htm#_Toc59451618
http://omarleo168-microbiologia.blogspot.pe/2011/02/accion-de-losagentes-quimicos-sobre.html
http://microbiologiaitt.es.tl/8-.--Efecto-de-factores-f%EDsicos-y-qu
%EDmicos-sobre-el-crecimiento-microbiano.htm