INSTITUTO TECNOLGICO DE ZACATEPEC

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRACTICA 1: DESNATURALIZACIN DE ENZIMAS

DOCENTE: ERIK GUILBERT GARCA

INTEGRANTES:
BARRERA VILA JESUS RHODE
GUTIERREZ BAHENA LUIS NGEL
MORENO ELGUEA VICTOR MANUEL
VARGAS SNCHEZ JOS DANIEL

FECHA DE INICIO: 9 DE FEBRERO

FECHA DE ENTREGA: 12 DE FEBRERO

BIOQUIMICA GRUPO WA
Marco terico

Accin Enzimtica: Actividad de la Catalasa

Muchos organismos pueden descomponer el perxido de hidrgeno (H2O2) por la accin de las
enzimas. Las enzimas son protenas globulares responsables de la mayor parte de la actividad
qumica de los organismos vivos. Actan como catalizadores, que son sustancias que aceleran las
reacciones qumicas sin ser destruidas o alteradas durante el proceso. Las enzimas son
extremadamente eficientes y se pueden utilizar una y otra vez repetidamente. Una enzima puede
catalizar miles de reacciones en cada segundo. Tanto los valores de pH como de la temperatura a
los que trabaja la enzima son extraordinariamente importantes. La mayora de los organismos tienen
un intervalo de temperatura preferente en el cual sobreviven y sus enzimas funcionan mejor dentro
de dicho intervalo de temperatura. Si el ambiente donde se encuentra la enzima es demasiado cido
o demasiado bsico, la enzima puede desnaturalizarse de forma irreversible o transformarse de
modo que su forma no le permita ms realizar su funcionamiento apropiado.
El H2O2 es txico para la mayora de los organismos vivos. Muchos organismos son capaces de
destruir el H2O2 mediante la accin de enzimas antes de que pueda realizar mucho dao. El H2O2
se convierte en oxgeno y agua segn la siguiente reaccin:
2 H2O2 2 H2O + O2
Aunque esta reaccin ocurre espontneamente, las enzimas incrementan la velocidad de reaccin
de forma considerable. Se conoce que al menos dos enzimas diferentes catalizan esta reaccin: a)
catalasa, que se encuentra en animales y protistas; b) peroxidasa, que se encuentra en las plantas.
Mucho se puede aprender sobre las enzimas mediante el estudio de la rapidez de reacciones
catalizadas por enzimas.
La rapidez de una reaccin puede estudiarse de muy diversas formas como:
Midiendo la presin de los productos que aparecen (en este caso, O2)
Midiendo la velocidad de desaparicin del substrato (en este caso, H2O2)
Midiendo la velocidad de aparicin del producto (en este caso, O2 que se desprende como
gas)
En este experimento se medir la rapidez de la actividad de la enzima bajo diferentes condiciones
como: distintas concentraciones de la enzima, distintos valores de pH y distintas temperaturas. Se
puede medir la presin del oxgeno gaseoso formado mientras el H2O2 se destruye. Si se obtiene un
grfico, ste debe ser similar al que se muestra en la figura a la derecha. Al inicio de la reaccin no
existe an un producto de la misma, por lo que la presin es igual a la atmosfrica. Despus de un
corto tiempo se acumula oxgeno a una velocidad bastante constante. La pendiente de la curva en
este periodo inicial es constante y de denomina velocidad inicial. A medida que se destruye el
perxido, queda menos para reaccionar y el O2 se produce a menor velocidad. Cuando se termina el
perxido ya no se produce ms O2.

Material:
Material:
1 hgado fresco

Reactivos:

3 tubos de ensayo de 15 ml
1 pinzas para tubo de ensayo
1 bao maria
1 gradilla
1 pipeta de 5 ml
1 jeringa
1 bistur

5 ml de HCl a 1M
5 ml de NaOH a 1M
Agua destilada

15 ml de agua oxigenada ( H 2 O 2 )

PROCEDIMIENTO
1. Nos conducimos a escuchar las indicaciones del profesor para as, tener una mejor
perspectiva sobre cmo llevar a cabo la prctica. Posterior a eso se realizaron las
preparaciones de los reactivos, debido a que el agua oxigenada estaba al 30% se hizo una
relacin de 1:5 para bajarla al 5% aproximado.

2. tomamos nuestro hgado y lo cortamos en pedazos finos para colocarlos en los tubos de
ensayo en los cuales utilizamos 3 muestras

3. Siguiendo con el procedimiento en la primer muestra colocamos los trozos de hgado de

pollo y agregamos 5 ml de agua oxigenada, esto para ver cmo acta el agua sobre el
hgado y en efecto notamos que desnaturaliza la enzima que tiene el hgado, este proceso lo
dejamos por 5 min y ver la reaccin.

4. Para la segunda muestra se realiza los mismos pasos con el hgado, la diferencia que ahora
se le agrega agua destilada y se pone a hervir la muestra durante 5 minutos, hay que tomar
en cuenta que el agua debe estar en su punto de ebullicin (100C) o cercano a para poder
ingresar la muestra.

5. Despus de retirarlo del agua retiramos el sobrante de agua destilada que tenia dentro y se
coloc agua oxigenada y observamos que no pasa lo mismo que con el primer caso ya que,
en este hace poca efervescencia y no se presentan muchas burbujas.

5. Y por ltimo la tercera muestra, en la cual vertimos 5 ml de cido clorhdrico a 1 M mezclamos y

despus de este tiempo se neutraliza la solucin con la solucin con 5 ml de Hidrxido de sodio 1M
(tened en cuenta que las soluciones se prepararon con anticipacin), retiramos el sobrante y
nuevamente, en el tubo de ensayo incorporamos agua oxigenada.

Y por ltimo juntamos nuestras 3 muestras para poder observar con mayor detenimiento y hacer
nuestras observaciones y resultados de la prctica.

RESULTADOS

HGADO
NORMAL

En la figura 1 podemos observar el hgado crudo en el tubo de ensaye

con agua oxigenada podemos observar que inmediatamente vertiendo el agua el hgado y
el agua empiezan a interactuar ya que se empieza a burbujear (fig. 2).Presento burbujeo
lento pero luego comenz un poco ms rpido y abundante, en el hgado se not un
cambio
de
color
un
poco
plido.
Fig.1 hgado crudo con agua oxigenada

Fig. 2 hgados en contacto con agua oxigenada

HIGADO A TEMPERATURA

El hgado que estuvo hirviendo durante 5 minutos (fig. 3) y despus se le verti el agua oxigenada
presento poco burbujeo, el hgado cocido tenia apariencia ms pequea, ms blanda y con menor
pigmentacin luego de ser hervido.

Fig.3 hgado cocido durante 5 minutos

HGADO PH

fig.4 hgado con HCl

fig.5 hgado con HCl y agua oxigenada

El hgado con HCl presenta una pigmentacin plida (fig. 4) y presenta una cosion, cuando se le
agrega el agua oxigena no aparece burbujeo como en los otros casos se puede decir que no hay
reaccin (fig. 5)

CONCLUSIN
Al hacer una observacin y anlisis podemos deducir lo siguiente: En el hgado crudo, hubo una
reaccin rpida, en la cual hubo una produccin moderada de burbujas, las cuales representan el O2
liberado a partir de la descomposicin de H2O2.
En el hgado crudo hubo una mayor produccin de O2, representado visiblemente por el burbujeo
experimentado, esto fue debido a que hubo ms espacios libres fciles de penetrar para el H2O2, y
esto tambin dio como resultado una produccin ms acelerada .En el hgado cocido, no pudimos
observar una generacin de O2, debido que al hervir el hgado, se present la desnaturalizacin de
protenas provocada por la exposicin a altas temperaturas, pues al perder su estructura terciaria,
perder tambin la funcin, y como consecuencia su funcin cataltica, por ello no pudo
descomponer el H2O2.

BIBLIOGRAFA:

Mader, s. s. (2008). Biologia. Mexico,D.F.: McGRAW-HILL.

REECE, N. A. (2007). BIOLOGIA. Madrid, Espaa: Medica panamericana, s.a.

http://www2.vernier.com/sample_labs/CMV-03-enigma.pdf