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PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIBIOTICOS (ATIBIOGRAMA)

I.

INTRODUCCION

La resistencia de las bacterias es el principal obstculo para la eficacia teraputica


de los antibiticos, pues no slo puede anular la accin curativa si se manifiesta
en el curso del tratamiento, sino que tiene a la larga consecuencia todava ms
grave para el conjunto de la poblacin, ya que provoca la desaparicin de las
cepas susceptibles y la propagacin de las resistentes. Ese es el motivo por el
cual la determinacin de la sensibilidad de las bacterias a los antibiticos haya
adquirido tanta importancia y sea indispensable para hacer de los antibiticos un
uso racional y para preservar la eficacia de este grupo tan valioso de agentes
teraputicos.
El conocimiento de la sensibilidad a los antibiticos, del microorganismo causante
de una enfermedad, no es slo importante para hacer la seleccin inicial del
agente teraputico correspondiente, sino que adems en aquellos casos en los
cuales el paciente presente intolerancia a determinado frmaco, permite
seleccionar el ms adecuado para ese paciente en particular.

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II.

MARCO TEORICO

El diagnstico y tratamiento de un paciente son muy complejos. Desde su llegada


a un establecimiento de salud hasta el alta reciben la prestacin de muchos
profesionales. Esto a su vez genera diferentes procesos, siendo el laboratorio uno
de los ms importantes. Para que los resultados de laboratorio sean tiles en el
manejo del paciente, debemos asegurar la confiabilidad y validez de stos. Es
necesario entonces, asegurar el cumplimiento adecuado de todos los pasos
involucrados, desde la solicitud del tipo de examen y muestra, su transporte,
procesamiento, la emisin de un resultado, y la adecuada interpretacin de ste.
De un examen solicitado y mal orientado, se obtendr una muestra inadecuada y
por tanto una informacin errada. La resistencia bacteriana es un tema de
importancia en la salud pblica. Su extensin a nivel mundial, desarrollo de
resistencia a nuevos agentes antimicrobianos, as como su presencia en
patgenos relacionados con enfermedades prevalentes, como son la enfermedad
diarreica aguda, las infecciones respiratorias agudas y las infecciones
intrahospitalarias, le dan el carcter de problema prioritario. Por ello, el
conocimiento de los perfiles de susceptibilidad Antimicrobiana debe orientar a la
elaboracin de esquemas de tratamiento ms eficaces y adems, la informacin
proporcionada por la vigilancia debe servir de insumo para la elaboracin de un
programa de uso racional de antibiticos. El primer objetivo del antibiograma es el
de medir la sensibilidad de una cepa bacteriana que se sospecha es la
responsable de una infeccin a uno o varios antibiticos. En efecto, la sensibilidad
in vitro es uno de los requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento
antibitico. El antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones
teraputicas individuales. El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la
evolucin delas resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento
epidemiolgico, a escala de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin
o un pas, es como puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse
regularmente los espectros clnicos de los antibiticos y adoptarse ciertas
decisiones sanitarias, como el establecimiento de programas de prevencin en los
hospitales.

Cundo realizar un antibiograma?

Siempre que una toma bacteriolgica de finalidad diagnstica haya permitido el


aislamiento de una bacteria considerada responsable dela infeccin.
Establecer esta responsabilidad exige una colaboracin entre el bacterilogo y el
clnico. En efecto, en ciertas circunstancias, el microbilogo no podr determinar
con certeza que el aislamiento de una bacteria exige un antibiograma, sin los
datos clnicos que le aporta el mdico. Por ejemplo, una bacteria no patgena
puede ser responsable de la infeccin de un enfermo inmunodeprimido o en un
lugar determinado del organismo. La presencia de signos clnicos puede ser
tambin determinante para la realizacin de un antibiograma (por ejemplo: la
infeccin urinaria con un nmero reducido de grmenes).Sensibilidad bacteriana a
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los antibiticos La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es
la base de la medida de la sensibilidad de una bacteria a un determinado
antibitico. La CIM se define como la menor concentracin de una gama de
diluciones de antibitico que provoca una inhibicin de cualquier crecimiento
bacteriano visible. Es el valor fundamental de referencia que permite establecer
una escala de actividad del antibitico frente a diferentes especies bacterianas.
Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina, y
de manera semicuantitativa, las CIM (mtodos manuales y mtodos
automatizados o semiautomatizados). Estos diferentes mtodos de rutina permiten
categorizar una cierta cepa bacteriana en funcin de su sensibilidad frente al
antibitico probado. Esta cepa se denomina Sensible (S), Intermedia (I) o
Resistente (R) al antibitico. Para un determinado antibitico, una cepa bacteriana
es, segn la NCCLS: Sensible, si existe una buena probabilidad de xito
teraputico en el caso de un tratamiento a la dosis habitual. Resistente, si la
probabilidad de xito teraputico es nula o muy reducida. No es de esperar ningn
efecto teraputico sea cual fuere el tipo de tratamiento. Intermedia, cuando el xito
teraputico es imprevisible. Cada antibitico se caracteriza por un espectro natural
de actividad antibacteriana. Este espectro comprende las especies bacterianas
que, en su estado natural, sufren una inhibicin de su crecimiento por
concentraciones de su antibitico susceptibles de ser alcanzadas in vivo. A estas
especies bacterianas se les dice naturalmente sensibles a dicho antibitico. Las
especies bacterianas que no se encuentran incluidas dentro de dicho espectro se
denominan naturalmente resistentes.
Mtodo de difusin en agar
Una vez demostradas las grandes ventajas de las tcnicas de dilucin en caldo, el
paso siguiente, pensando sobre todo en poder realizar fcilmente pruebas de
sensibilidad de un microorganismo frente a mltiples antibiticos a la vez, consisti
en buscar la manera de aplicar la idea directamente a las placas de agar. Las
primeras pruebas se realizaron inoculando la superficie de una placa de agar con
el microorganismo en estudio, colocando pequeas cubetas (de metal o vidrio)
sobre el agar y agregando las soluciones de los diferentes antimicrobianos dentro
de dichas cubetas. Los agentes antimicrobianos difundan en el medio en forma
radial alrededor de la cubeta e inhiban el desarrollo del microorganismo en la
zona donde su concentracin era suficientemente alta. Las reas de inhibicin
grandes indicaban una actividad antimicrobiana ms efectiva. Este mtodo fue
modificado en 1947 por Bondi y col. incorporando el agente antimicrobiano a
discos de papel de filtro. Fue un paso adelante gigantesco ya que el uso de los
discos de papel permita preparar un gran nmero de pruebas idnticas y
almacenarlas para uso futuro. En 1966, despus de los estudios realizados por
Bauer, Kirby, Sherrisy Turk, ensayando diferentes cepas bacterianas, el empleo de
los discos de papel de filtro para las pruebas de sensibilidad fue estandarizado y
correlacionado definitivamente con las CMI correspondientes. Durante muchos
aos, y a pesar de ser una tcnica puramente cualitativa, el mtodo de difusin
por disco (o mtodo Kirby-Bauer), en funcin sobre todo de su comodidad,
economa y fiabilidad, ha sido, y aun es, uno de los ms utilizados en los
laboratorios de todo el mundo.
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El microorganismo a investigar se inocula en una o varias placas de agar y sobre
su superficie se disponen los discos correspondientes a varios antibiticos. Se
incuban las placas durante 16-24 horas a 35Cy al cabo de este tiempo se estudia
el crecimiento en ellas. Se valora el dimetro de la zona de inhibicin que se forma
alrededor de cada disco y se compara con las referencias oportunas publicadas
por el NCCLS. Con esta referencia podemos informar si el microorganismos
Sensible, Intermedio o Resistente (S, I, R) a cada uno de los antibiticos
ensayados en las placas.

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III.

OBJETIVOS

Conocer a que antibitico es sensible un determinado microorganismo.

Realizar la tcnica de difusin en Agar simple para la determinar la


susceptibilidad a los antibiticos.

Interpretar los resultados del mtodo utilizado.

Precisar las indicaciones y limitaciones de la tcnica empleada.

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IV.

DESARROLLO EXPERIMENTAL
MATERIALES:

Placas de Agar Mller- Hilton o tripticase soya


Discos impregnados con diferentes antibiticos o quimioterapicos
Pinza
Mechero
Hisopo
Tubo de ensayo con pseudmona

PROCEDIMIENTO:
1.- Con un marcador enumerar del 1 al 7 la caja preti, luego destapar el
tubo de ensayo que contiene pseudomona, colocar la boquilla del tubo
por el fuego del mechero

2.- Con un hisopo extraer la pseudomona que se encuentra en el tubo


para luego esparcirlo por toda la caja preti y luego el tubo se vuelve a
colocar en las llamas del mechero se repite este paso 2 veces

3.-El hisopo se coloca en la leja, luego con la piza previamente colocada


en las llamas del mechero se procede a extraer los discos con cada
antibitico y se coloca en los nmeros ya marcados en la caja preti
con un respectivo orden:
Penicilina,gentamicina,amikacina,cloranfenicol,ceftriaxona,
clindamicina , norfloxacina
4.- Para finalizar se procede al sellado de la caja preti

V.

CONCLUSIONES

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VI.

CUESTIONARIO

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1. Cul es la importancia de su aplicacin


El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una
cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infeccin a uno
o varios antibiticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los
requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibitico. El
antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones
teraputicas individuales.
El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las
resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento epidemiolgico, a
escala de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un pas,
es como puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse regularmente
los espectros clnicos de los antibiticos y adoptarse ciertas decisiones
sanitarias, como el establecimiento de programas de prevencin en los
hospitales.
Hay pues un doble inters: Teraputico y epidemiolgico
2.- En qu casos usted indicara esta prueba

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http://es.scribd.com/doc/31999516/practica1-antibiograma

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