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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Praktikum der Ionenchromatographie


Eine Einfhrung

Claudia Eith
Prof. Dr. Maximilian Kolb
Prof. Dr. Andreas Seubert
Dr. Kai Henning Viehweger (Hrsg.)

Metrohm Monographie
8.792.2001 d
8.792.2003 e

khv

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Inhaltsverzeichnis
1
2
3

Die Autoren ...................................................................................................................................... 4


Einfhrung ........................................................................................................................................ 5
Theoretischer Teil............................................................................................................................. 6
3.1
Historie und Bedeutung der Ionenchromatographie ................................................................. 6
3.2
Grundlagen der Chromatographie ............................................................................................ 7
3.2.1
Einteilung und Begriffe der Chromatographie ................................................................... 7
3.2.2
Theoretische Konzepte zur Beschreibung der Chromatographie ................................... 10
3.3
Grundlagen der Ionenchromatographie (IC)........................................................................... 14
3.3.1
Terminologie und Einordnung in die LC .......................................................................... 14
3.3.2
Der Ionenaustausch......................................................................................................... 15
3.3.3
Die Ionenpaarbildung....................................................................................................... 16
3.3.4
Der Ionenausschluss ....................................................................................................... 17
3.4
Retentionsmodelle in der Ionenchromatographie ................................................................... 18
3.4.1
Retentionsmodelle in der Anionenchromatographie........................................................ 18
3.4.2
Retentionsmodelle in der Kationenchromatographie....................................................... 23
3.5
Detektionssysteme in der Ionenchromatographie .................................................................. 26
3.5.1
Elektrochemische Detektoren.......................................................................................... 27
3.5.2
Spektroskopische Detektionen ........................................................................................ 31
3.6
Stationre Phasen in der Ionenchromatographie ................................................................... 32
3.6.1
bersicht gebruchlicher stationrer Phasen.................................................................. 32
3.6.2
Stationre Phasen fr die Anionenchromatographie....................................................... 33
3.6.3
Stationre Phasen in der Kationenchromatographie....................................................... 34
3.6.4
Kationenaustauscher auf Silicagelbasis .......................................................................... 34
3.6.5
Kationenaustauscher auf Basis von organischen Polymeren ......................................... 35
3.6.6
Pellikulare Kationenaustauscher ..................................................................................... 35
3.6.7
Stationre Phasen in der Ionenausschlusschromatographie .......................................... 35
3.6.8
Die Bedeutung der Kapazitt von Ionenaustauschern .................................................... 35
3.7
Eluenten in der Ionenchromatographie................................................................................... 36
3.7.1
Anionenchromatographie................................................................................................. 37
3.8
Kationenchromatographie....................................................................................................... 39
3.8.1
Kationenchromatographie von Alkali-, Erdalkali- und Ammonium-Ionen mit
Leitfhigkeitsdetektion.................................................................................................................... 39
3.8.2
Kationenchromatographie von bergangs- und Erdalkalimetall-Ionen mit
Nachsulenderivatisierung und photometrischer Detektion........................................................... 40
3.8.3
Ionenausschlusschromatographie ................................................................................... 41
4 Praktischer Teil............................................................................................................................... 42
4.1
Hinweise zum praktischen Arbeiten........................................................................................ 42
4.2
Versuche zur Theorie der Ionenchromatographie .................................................................. 45
4.2.1
Versuch 1 Ionenchromatographie mit und ohne chemische Suppression ................... 45
4.2.2
Versuch 2 Kapazitt von Trennsulen.......................................................................... 49
4.2.3
Versuch 3 Selektivitt von Trennsulen ....................................................................... 52
4.2.4
Versuch 4 Kalibration, Nachweis- und Bestimmungsgrenzen in der
Ionenchromatographie ................................................................................................................... 57
4.2.5
Versuch 4a Bestimmung von Anionen mit chemischer Suppression ........................... 58
4.2.6
Versuch 5 Vernderung der Selektivitt mit Hilfe von Kronenethern (18 Crown-6) ..... 60
4.2.7
Versuch 6 Vernderung der Selektivitt mit Hilfe von Komplexbildnern ...................... 63
4.2.8
Versuch 7 Anreicherungstechnik .................................................................................. 68
4.3
Versuche fr die Bestimmung von Anionen............................................................................ 71
4.3.1
Versuch 8 Bestimmung von Anionen in Trinkwasser ................................................... 71
4.3.2
Versuch 9 Anionen in Ethanol ...................................................................................... 74
4.3.3
Versuch 10 Anionen in Kopfsalat.................................................................................. 80
4.3.4
Versuch 11 Phosphorsure in Cola.............................................................................. 83
4.3.5
Versuch 12 Anionen im Wein ....................................................................................... 88
4.3.6
Versuch 13 Bestimmung von Verunreinigungen in Borat Chlorid und Sulfat in Borax
93
4.3.7
Versuch 14 Bestimmung von Anionen in Abwasser..................................................... 96
4.3.8
Versuch 15 Fluorid in Zahnpaste................................................................................ 101
4.3.9
Versuch 16 Anionen in braunem und weissem Zucker .............................................. 105
4.3.10 Versuch 17 Verunreinigungen im Wasserstoffperoxid ............................................... 110
4.4
Versuche fr die Bestimmung von Kationen......................................................................... 115
khv

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4.4.1
Versuch 18 Alkli- und Erdalkalimetalle in Trinkwasser und Mineralwasser ............... 115
4.4.2
Versuch 19 Bestimmung der bergangsmetalle ........................................................ 119
4.4.3
Versuch 20 Verunreinignungen im Silikagel Bestimmung von Calcium- und
Magnesiumionen .......................................................................................................................... 125
4.4.4
Versuch 21 Kosmetik und Korrosionsschutz: Bestimmung von Ethanolamin und
Alkalimetallen ............................................................................................................................... 128
4.4.5
Versuch 22 Alkali- und Erdalkalimetalle im Wein ....................................................... 132
5 Literatur ........................................................................................................................................ 136
5.1
Literatur zum Praktikumsbuch .............................................................................................. 136

khv

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Die Autoren

Claudia Eith
Chemiestudium an der Fachhochschule Aalen, Praxissemester im Bereich der Trinkwasser und
Abwasseranalytik in Adelaide (Australien), seit 2000 im Bereich Forschung & Entwicklung der
Metrohm AG.
Maximilian Kolb
Chemiestudium an der Technischen Universitt Mnchen, Promotion auf dem Gebiet der homogenen
Katalyse, danach fr 5 Jahre Leiter des Sachgebiets Gewssergte am Wasserwirtschaftsamt
Traunstein. Seit 1982 Professor an der Fachhochschule Aalen; Arbeitsgebiete: Umwelttechnik,
Umweltanalytik und Chemometrie.
Andreas Seubert
Chemiestudium an der Universitt Hannover, Promotion 1990: Ultraspurenanalytik in hochreinen
Refraktrmetallen mit ionenchromatographischer Spuren-Matrix-Trennung. Habilitation 1995:
Einsatzgebiete der On-line Kopplung HPLC-Atomspektrometrie in der Elementanalytik, 1998 bis
2000 Vertretungsprofessur fr Analytische Chemie an der Universitt Gh Kassel, seit Mrz 2000
Professur fr Analytische Chemie an der Philipps-Universitt Marburg.
Kai Henning Viehweger
Studium der Chemie an der Universitt Hamburg, Diplomarbeit in organischer Analytik. Promotion im
Bereich der marinen und stuarinen kosystemforschung, seit 1996 im Bereich Marketing der
Metrohm AG International Sales Manager Ionenchromatographie.

khv

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Einfhrung

Es ist immer eine Herausforderung, Einblick in Dinge zu nehmen, die sich nicht direkt offenbaren. Die
Grnde hierfr reichen von einfacher Neugier bis zur schlichten Notwendigkeit zu berleben. Es gibt
viele Mglichkeiten hinter die Kulissen zu schauen. Die einfachste ist, sich der menschlichen Sinne zu
bedienen: hren, fhlen, riechen, schmecken und sehen. Die Alchemie hat sich dieser menschlichen
Sinne frher gerne bedient. Deshalb schmecken Suren heute sauer und Brom hat seinen Namen von
bromos, griechisch fr stinken. Chrom zeigt sich dem Auge farbig, da chroma sprachgeschichtlich gleich Farbe ist. Gefhlsbetont wird die Alchemie mit Schimpfwrtern wie Du Nickel und Kobold
bzw. Kobalt. Beide haben die Eisenherstellung unsere Vorfahren empfindlich gestrt.
Viele einzelne Dinge zeigen sich nicht direkt. Sie sind gut gemischt oder die menschliche Sensorik
reicht nicht aus, sie zu identifizieren. Dies ist der Moment an dem die Analytik ins Spiel kommt. Sie
kann aus einer undefinierten Gemengelage heraus przise Informationen extrahieren, die mit den
menschlichen Sinnen zu verstehen sind.
Obwohl der Organismus voll davon ist, zeigen sie sich den menschlichen Sinnen nicht direkt. Gemeint
sind Ionen, jene geladenen Atome oder Molekle, die integraler Bestandteil fast aller lebender und
toter Materie sind. Ionen sind dafr verantwortlich, dass die Nerven Informationen weiterleiten, dass
die Verdauung funktioniert, dass der Blutdruck stimmt und genug Sauerstoff ins Blut gelangt. Ionen
bringen das Salz ins Meer, sie regeln den Durst und ionische Bestandteile dienen als Nahrung fr alle
Lebewesen von der Bakterie bis zum Menschen.
Das Wissen um Art und Menge von Ionen, die sich in Umwelt befinden, hilft biochemische und
kologische Zusammenhnge zu verstehen. Die Kenntnis der Ionenkonzentrationen in Lebensmitteln
gibt Hinweise darauf, ob diese gesund oder vielleicht schdlich sind.
Es gibt viele Mglichkeiten, Ionen qualitativ nach ihrer Art und quantitativ nach ihrer Menge zu
bestimmen. Beide Informationen sind wichtig. Ein Verfahren, um an diese Information zu gelangen ist
die Ionenchromatographie. Chromatographie heisst eigentlich Schreiben mit Farbe. In der
traditionellen Analytik bedeutet dies, Substanzen nach ihrer Farbe zu trennen und nachher mit dem
Auge zu bestimmen. Obwohl sich nicht alle Ionen durch sichtbare Farbe auszeichnen, ist der Begriff
geblieben, nur werden heute andere Verfahren zur Bestimmung eingesetzt.
Die Ionenchromatographie ist ein Mitglied in der grossen Familie dieser chromatographischen
Verfahren. Mit ihr lassen sich sehr vereinfacht dargestellt alle Ionen bestimmen, die ein bzw. zwei
Ladungen tragen. War die Ionenchromatographie oder IC in der Vergangenheit ein sehr teures
Verfahren, so ist sie heute wesentlich preiswerter geworden. Sie entwickelt sich deshalb zu einem
universellen und leistungsfhigen analytischen Werkzeug, das leicht zu verwenden ist.
Das Praktikum der Ionenchromatographie zeigt, dass die IC keine abgehobene analytische Spielart
ist, sondern auf ganz alltgliche Fragen schnell Antworten geben kann: Ist das Trinkwasser fr die
Suglingsernhrung geeignet? Wie viel Nitrat ist im Spinat? Warum verkalkt die Waschmaschine?
Belastet das Abwasser die Umwelt? Da eine genaue analytische Praxis ohne theoretischen
Hintergrund nur schwerlich mglich ist, enthlt die vorliegende Monographie auch hierzu detaillierte
Informationen in einem eigenen theoretischen Teil.
Mit dem Praktikum der Ionenchromatographie ist es mglich, nicht nur die Grundzge der IC
kennen zu lernen. Es dient auch dazu, einen generellen Einblick in die generellen Prinzipien der
Chromatographie zu geben. Und die Chromatgraphie leistet vieles: sie stillt naturwissenschaftliche
Neugier und sie sichert das gesunde berleben in einer belasteten Umwelt.

khv

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Theoretischer Teil

3.1

Historie und Bedeutung der Ionenchromatographie

Die
Anfnge
der
Ionenchromatographie
(IC)
oder
genauer
gesagt
der
Ionenaustauschchromatographie reichen bis in die Mitte des vorigen Jahrhunderts zurck. In den
Jahren von 1935 bis 1950 wurde das Wissen um Ionenaustauscher und deren Anwendung durch das
Manhattan-Project erheblich erweitert. Die 50er und 60er Jahre dienten der Erarbeitung von
theoretischen Modellen zum Verstndnis des Ionenaustauschs und der darauf basierenden
Ionenchromatographie. In den 70er Jahren wurden kontinuierliche Detektoren eingesetzt und damit
der Schritt von der Niederdruck- zur Hochleistungschromatographie vollzogen.
Tabelle 1

Geschichte des Ionenaustausches und der darauf basierenden Ionenchromatographie


Ackerbden als Ionenaustauscher fr Mg2+,
Ca2+ und NH4+

Thomson u. Way

1935

Sulfonierter u. aminierter Kondensationspolymere (Phenol/Formaldehyd)

Adams, Holmes

1942

Sulfonierte PS/DVB-Harze als


Kationenaustauscher (Manhattan-Projekt)

dAlelio

1947

Aminierte PS/DVB-Harze als


Anionenaustauscher

McBurney

1953

Ionenausschlusschromatographie

Wheaton, Baumann

1957

Makroporse Ionenaustauscher

Corte, Meyer, Kunin u.a.

1959

Grundlagen fr das theoretische Verstndnis

Helfferich

1967-70

Pellikulare Ionenaustauscher

Horvath, Kirkland

1975

Ionenaustauschchromatographie mit
Leitfhigkeitsdetektion mittels Stripper

Small, Stevens,
Baumann

1979

Leitfhigkeitsdetektion ohne Stripper

Gjerde, Fritz,
Schmuckler

1976-80

Ionenpaarchromatographie

Waters, Bidlingmeier,
Horvath u.a.

um 1850

LC

HPLC

Der Begriff der Ionenchromatographie wurde im Jahre 1975 mit der Einfhrung der
Leitfhigkeitsdetektion kombiniert mit einer chemischen Leitfhigkeitsreduzierung durch Small,
Stevens und Bauman entwickelt und danach lange Zeit als Handelsname fr Vermarktungszwecke
eingesetzt. Mittlerweile hat sich der abkrzende Begriff Ionenchromatographie als Oberbegriff fr die
Methoden Ionenaustausch- , Ionenausschluss- und Ionenpaar-Chromatographie innerhalb der
Hochleistungsflssigchromatographie
(HPLC)
etabliert
[1].
Gerade
im
Bereich
der
Anionenbestimmung nimmt die IC heute die dominierende Stellung ein, whrend die zur Bestimmung
von bevorzugt kationisch vorliegenden Elementen gebruchlichen atomspektrometrischen Verfahren
bei den elektronegativen Anionenbildnern der fnften bis siebten Hauptgruppe des Periodensystems
nur eine eingeschrnkte Leistungsfhigkeit besitzen.
Das wichtigste Einsatzgebiet der Anionenchromatographie stellt heute die routinemige
Untersuchung wssriger Systeme dar, in der die Trinkwasseranalytik eine zentrale Bedeutung besitzt
[2,3,4]. Daneben wird die IC fr die Elementspeziesanalyse von anionisch auftretenden Elementen
oder Komplexen eingesetzt, wobei berwiegend umweltrelevante Fragestellungen bearbeitet werden.
Das dritte grosse Anwendungsgebiet der Anionenchromatographie ist die Ultraspurenanalytik in
hochreinen Prozesschemikalien, wie sie vor allem in der Halbleiterindustrie bentigt werden.
blicherweise bestehen Anionenaustauscher fr die HPLC heute aus sphrischen Polymerpartikeln
mit einem Durchmesser von etwa 5 bis 15 m. Auf die Polymeroberflche werden mit Hilfe
unterschiedlicher Verfahren sogenannte Ankergruppen aufgebracht, die als Abstandhalter (Spacer)
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zwischen dem Basispolymer und den eigentlichen funktionellen Gruppen dienen. Diese bestehen im
Regelfall aus quartren Ammonium-Ionen, welche an den Ankergruppen chemisch fixiert sind. Die
Gesamtzahl der funktionellen Gruppen wird als Austauschkapazitt bezeichnet und stellt allgemein ein
zentrales Charakteristikum von Ionenaustauschern dar.
Kommerzielle Packungsmaterialien fr die Anionenchromatographie sind mit Austauschkapazitten
zwischen 50 und 100 Mol pro Trennsule von niederkapazitiver Natur. Dies ist in der dominierenden
Anwendung der fr Ionen universell einsetzbaren Leitfhigkeitsdetektion (LF) begrndet, weil eine
empfindliche Detektion der Analyten eine mglichst geringe Eigenleitfhigkeit der verwendeten
Elutionssysteme erfordert. Bei niederkapazitiven Anionenaustauschern gengen dafr in der Regel
sehr verdnnte wrige Lsungen von NaOH oder Carbonat-Puffern, deren Eigenleitfhigkeit zudem
noch chemisch unterdrckt (suppressiert) werden kann [2,4].
Heute werden in der Anionenchromatographie grsstenteils funktionelle Gruppen vom Typ I
(Trimethylammonium, TMA) und Typ II (Dimethylethanolammonium, DMEA) verwendet. Da die
eigentliche Wechselwirkung zwischen der stationren Phase und den Analyt-Anionen an den
funktionellen Gruppen stattfindet, hat deren Struktur einen entscheidenden Einflu auf das
Selektivittsverhalten der Packungsmaterialien. Nach den bisherigen Erkenntnissen ist dabei
insbesondere die Polaritt der funktionellen Gruppen, die durch die Zahl der Hydroxyethylreste (CH2CH2OH) am quartren Stickstoff gesteuert werden kann, von Bedeutung [2,4].
Der Begriff Ionenchromatographie umfasst alle Trennungen ionischer Spezies innerhalb der HPLC
mit online-Detektion und ist somit von apparativen Limitierungen weitgehend befreit [5]. Die IC hat sich
wegen der mittlerweile vielfltigen Auswahl an Trennsulen, Elutionssystemen und Detektoren vor
allem in der Anionen-Analytik zur Methode der Wahl entwickelt. Grund hierfr ist, dass fr Anionen nur
wenige Trennungsgnge existieren, die in der Praxis kaum sinnvoll zu verwenden sind.
Gravimetrische und volumetrische Verfahren sind durch ihre Empfindlichkeit und ihre Selektivitt
limitiert. Auch die strmische Entwicklung der Gaschromatographie ab 1965 brachte fr Anionen keine
grossen Vorteile, da die nichtflchtigen Ionen zunchst derivatisiert werden mssen und die
Empfindlichkeit nicht den heutigen Anforderungen an die Spurenanalytik gerecht wird [6]. Fr die
Kationenanalytik existieren leistungsfhige atomspektrometrische Alternativen zur IC, z.B. die ICPAES/MS,
so
dass
der
Stellenwert
der
Kationenchromatographie
verglichen
zur
Anionenchromatographie wesentlich geringer ist. Im Bereich der Analytik der Alkali- und
Erdalkalimetalle sowie bei der Bestimmung von Ammonium-Stickstoff (Trinkwasseranalytik) hat die
Kationenchromatographie aber eine gewisse Bedeutung. Bei der Speziierung von ionischen
Verbindungen ist die IC in Verbindung mit elementspezifischen Detektoren unverzichtbar. Einen guten
berblick ber die Anwendungen der IC in den verschiedensten Bereichen der Analytik geben die
Werke von Haddad et al. und Weiss [2,4].

3.2

Grundlagen der Chromatographie

stationre Phase

3.2.1 Einteilung und Begriffe der Chromatographie


Die Chromatographie ist ein physikalisch-chemisches Verfahren zur Trennung von
Substanzgemischen. Der Trenneffekt beruht auf einer wiederholten Verteilung zwischen zwei Phasen,
von denen eine Phase als stationr (ruhend) betrachtet wird, whrend die zweite, mobile Phase sich in
einer bestimmten Richtung bewegt [7,8]. Nach dem Aggregatzustand der beiden beteiligten Phasen
werden chromatographische Techniken eingeteilt in:

Abbildung 1
Phase
khv

mobile Phase
flssig
gasfrmig
fest

LSC

GSC

flssig

LLC

GLC

Einteilung chromatographischer Methoden nach Aufbau von stationrer und mobiler

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Eine weitere Unterscheidung chromatographischer Verfahren kann nach den grundlegenden


Vorgngen whrend des Trennvorganges, wie etwa Adsorption oder Verteilung, bzw. nach der Art der
Ausfhrungstechnik (Sulen- oder Planarchromatographie) erfolgen [9].
Retentionsparameter
Betrachtet man ein Stoffgemisch und unterwirft dieses einer chromatographischen Trennung, so wird
sich fr jede Komponente ein Verteilungsgleichgewicht zwischen mobiler und stationrer Phase
ausbilden. Eine Stofftrennung ist nur dann erfolgreich, wenn sich die Verteilungskoeffizienten D der
Komponenten hinreichend voneinander unterscheiden. D ist definiert als das Verhltnis der
Konzentrationen eines Stoffes A in der stationren (Index S) und der mobilen Phase (Index M):

DA =

[A] S
[A] M

(1)

Dementsprechend werden Stoffe mit einem hohen Verteilungskoeffizienten D strker zurckgehalten


(retardiert) als solche mit einem kleinen D. Der Vorgang der chromatographischen Trennung wird in
Form eines Chromatogrammes dargestellt, welches die Aufzeichnung eines Detektorsignals als
Funktion des Elutionsvolumens der mobilen Phase oder der Zeit darstellt. Somit entspricht es einem
Konzentrations- oder Massenprofil als Funktion der Zeit. Das Detektorsignal soll dabei proportional zur
Konzentration eines Analyten am Ende der Trennstrecke sein [8]. Die Verweil- oder
Bruttoretentionszeit tR eines Stoffes auf der stationren Phase setzt sich, wie in Gleichung 2
dargestellt, additiv aus der Nettoretentionszeit tS, welche dem realen Aufenthalt auf der Trennstrecke
entspricht, und der Durchflusszeit der mobilen Phase ohne Wechselwirkung, der Totzeit tM,
zusammen.

tR = t S + tM

(2)

Aufgrund von Kanalbildungen, Diffusionsprozessen oder Unregelmssigkeiten in der


Gleichgewichtseinstellung zwischen mobiler und stationren Phase knnen einige Teilchen die
stationre Phase aber langsamer oder schneller passieren als nach der Nettoretentionszeit tS zu
erwarten wre. Ein Chromatogramm besteht daher nicht aus unendlich schmalen Signalen, sondern
im Idealfall aus gaussfrmigen Peaks (Abbildung 2).

Analyt 1
tR,2
Analyt 2

Signal

t0

Totzeit

tR,n

Retentionszeit Analyt n

tR = tR t0

Nettoretentionszeit

k = tR / t0

Retentionsfaktor

T = b/a

Tailingfaktor

R = tR / w

Auflsung

= k1 / k2

Selektivitt

Flche
Auflsung
Hhe
Tailing

w
t0

a b

tR,2
Zeit oder Volumen

Abbildung 2 Elutionschromatogramm einer ionenchromatographischen Trennung mit Skizzierung


der wichtigsten Kenngrssen

khv

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Durch Diffusionsprozesse, die mit zunehmender Verweilzeit auf der stationren Phase an Einfluss
gewinnen, beobachtet man eine mit der Retentionszeit einer Substanz zunehmende
Bandenverbreiterung. Dieses Phnomen ist fr alle chromatographischen Verfahren charakteristisch.
Wie bereits erwhnt, stellt ein Peak in einem Chromatogramm idealerweise eine Gaussverteilung dar.
Abbildung 3 zeigt schematisch eine Gaussverteilung.

Abbildung 3

Gaussverteilung mit den wichtigsten Kenngrssen

Die Breite bei halber Hhe wird als Halbwertsbreite b0,5 bezeichnet und entspricht der 2,354-fachen
Varianz der Verteilung. Die Basisbreite w ist definiert durch die Differenz der Schnittpunkte der
Wendetangenten mit der y-Achse, gleichbedeutend der 4-fachen Varianz der Gauss-Funktion. Beide
Grssen sind ein Mass fr die Leistungsfhigkeit einer chromatographischen Trennsule und knnen
bei idealer Peakform zur Berechnung der Bodenzahlen herangezogen werden.
Abweichungen von der idealen Peakform lassen sich durch einen sogenannten Asymmetriefaktor T
beschreiben. Er ist definiert als das Verhltnis der Strecken A und B zwischen der Mittelsenkrechten
und den Flanken der Verteilung bei 10 % ihrer Hhe (Abbildungen 2 und 3) und berechnet sich zu:

T=

B
.
A

(3)

Fr Gauss-Peaks ist T = 1. Abweichungen zu grsseren T-Werten werden als Tailing, zu kleineren als
Fronting bezeichnet. In der Praxis strebt man Symmetriefaktoren von T = 0,9 bis 1,1 an.
Retentionsfaktor, Selektivitt und Auflsung
Da die Bruttoretentionszeit tR massgeblich von den chromatographischen Bedingungen abhngt, ist
sie nur unter definierten Bedingungen fr eine Substanz charakteristisch und damit zur qualitativen
Identifizierung geeignet. Man fhrt daher eine dimensionslose Grsse ein, den Retentionsfaktor k,
welcher den Vergleich verschiedener chromatographischer Systeme erlaubt. Er gibt an, wieviel lnger
sich eine Substanz auf der Trennstrecke aufhlt als in der mobilen Phase [8]. Mathematisch ist der
Retentionsfaktor
definiert
als
Produkt
des
Verteilungskoeffizienten
D
und
dem
Phasenvolumenverhltnis von mobiler und stationrer Phase bzw. als das Verhltnis von
Nettoretentionszeit zur Totzeit. Auch mglich ist eine Berechnung ber die Lnge der Trennstrecke L
und der Geschwindigkeit der mobilen Phase u (Gleichung 4).

k' = D

khv

t
VS
u tR
-1
= S =
L
tM
VM

(4)

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Bei kleinen Werten von k eluiert eine Substanz nahe an der Totzeit bzw. am Totvolumen des
chromatographischen Systems, was gleichbedeutend mit einer schlechten Trennung ist. Ist k sehr
gross, bedeutet dies zwar eine gute Trennung, gleichzeitig aber auch eine hohe Verweilzeit auf der
Trennstrecke und damit eine Peakverbreiterung. Im Realfall sollte der Retentionsfaktor zwischen 2
und 5 liegen.
Zwei Stoffe werden nur dann ausreichend getrennt, wenn sich ihre Retentionsfaktoren hinreichend
voneinander unterscheiden. Der Selektivittskoeffizient , auch relativer Trennfaktor genannt, gilt
als Mass fr die Trennbarkeit zweier Substanzen und ist wie folgt definiert:

t R2 - t M
t R1 - t M

t S2

t S1

k' 2
k' 1

mit k' 2 > k' 1

(5)

Lassen sich zwei Substanzen nicht auftrennen, ist = 1 und es kommt zur Koelution. Je grsser ist,
desto besser die Trennung. Allerdings vergrssert sich mit zunehmendem auch der Zeitaufwand fr
die Trennung, so dass man in der Praxis Selektivittskoeffizienten von = 1,5 anstrebt [10].
Der Selektivittskoeffizient beschreibt nicht die Gte eines Trennvorganges. Die Auflsung R
(Resolution) bercksichtigt nicht nur die relativen Lagen der Peaks zueinander, sondern auch ihre
Halbwertsbreiten (b0,5) bzw. die Basisbreiten (w), wie aus Gleichung 6 hervorgeht.

R =

t R2 - t R1
(w 1 - w 2 )
2

2 t R
t R2 - t R1
= 1,198
w1 w 2
b (0,5) 1 - b (0,5)2

(6)

Ist die Differenz der Retentionszeiten zweier Peaks gross im Verhltnis zu ihren Basis- oder
Halbwertsbreiten, erhlt man eine hohe Auflsung. Unter Voraussetzung einer idealen Peaksymmetrie
knnen zwei Stoffe bei R = 0,5 noch identifiziert werden. Fr qualitative Trennungen sollte R = 1
betragen (4-Trennung), fr eine Quantifizierung strebt man eine Auflsung von R = 1,2 bis 1,5 an
[25]. Auflsungen von R 2 (8-Trennung) sind aufgrund der damit verbundenen langen
Analysezeiten nicht erwnscht.
3.2.2

Theoretische Konzepte zur Beschreibung der Chromatographie

Das Modell der theoretische Trennstufen


Das dem Destillationsprozess entstammende Modell der theoretischen Trennstufen dient der
Beschreibung chromatographischer Trennungen [11]. Es unterteilt die stationre Phase in einzelne
Abschnitte, den theoretischen Trennstufen oder Bden, auf denen prinzipiell genau einmal eine vllig
reversible und unendlich schnelle Gleichgewichtseinstellung zwischen mobiler und stationrer Phase
erfolgt. Die Leistungsfhigkeit (Effizienz) eines chromatographischen Systems wird daher durch eine
mglichst hohe Anzahl theoretischer Trennstufen charakterisiert.
Die theoretische Trennstufenzahl N kann unter Verwendung der Varianz sowie der Basis- und
Halbwertsbreiten direkt aus einem Chromatogramm ermittelt werden und berechnet sich wie folgt [12]:
2

t
t
N = 16 R = 8 ln (2) R
w
b 0,5

t
= R

(7)

Anstelle der Trennstufenzahl kann auch die Trennstufenhhe HETP (Height Equivalent to a
Theoretical Plate) zur Beschreibung der Trennleistung herangezogen werden.

b 0,5
2
L
L
HETP =
=
=

N
L
8 ln (2) t R

L tR
=

16 w

(8)

Aus den Gleichungen 5 ... 8 lsst sich ableiten, dass eine stationre Phase mit einer sehr grossen
Zahl an theoretischen Trennstufen auch dann noch Substanzen voneinander separieren kann, wenn
deren Selektivittskoeffizienten oder Auflsung sich kaum voneinander unterscheiden. Die
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Gleichungen erlauben ebenso die Berechnung der Zahl an theoretischen Bden, die zur Bewltigung
eines Trennproblems zwingend notwendig ist.
Das Modell der theoretischen Trennstufen kann zur Erklrung des Auftretens gaussfrmiger Signale in
der Chromatographie herangezogen werden, wenn man zugrunde legt, dass es aufgrund von
Strmungs- und Diffusionsprozessen nur zu einer endlich schnellen und unvollstndigen
Gleichgewichtseinstellung zwischen mobiler und stationrer Phase kommt. Daraus resultiert eine
Bandenverbreiterung, da eine am Anfang der Trennstrecke schmale Substanzzone mit zunehmender
Verweilzeit auf der stationren Phase deutlich auseinandergezogen wird.
Die Berechnung der theoretischen Trennstufenzahl gemss Gleichung 7 setzt eine ideale Peakform
voraus, welche aber im Realfall nur sehr selten gegeben ist. Bei asymmetrischen Peakformen muss
die Berechnung ber die Momentenmethode erfolgen [13]. Gleichung 9 ergibt unter Einbeziehung des
Symmetriefaktors nherungsweise sinnvolle Werte.
2

tR

b 0,5
N = 41,7
T + 1,25

(9)

Eine effektive Trennstufenzahl n, welche der realen Trennleistung nher kommt als die theoretische
Trennstufenzahl N, ist um den Retentionsfaktor k korrigiert und berechnet sich zu:

k'
n =N

k'+1

(10)

Die dynamische Theorie (Van-Deemter-Theorie)


Die entscheidende Schwche des Modells der theoretischen Trennstufen besteht insbesondere darin,
dass der Destillation und der Chromatographie zwei grundlegend verschiedene physikalischchemische Prozesse zugrunde liegen. Ausserdem werden keine Annahmen ber den Einfluss
wichtiger experimentell zugnglicher Parameter gemacht, die nicht die Art oder Qualitt der
stationren Phase selbst betreffen [14,15]. Dies knnen sein:

Flussrate der mobilen Phase


Partikeldurchmesser in der stationren Phase
Schichtdicke von Oberflchenfilmen auf dem Packungsmaterial

Daneben haben auch Grssen wie die Diffusionskoeffizienten in der mobilen und stationren Phase,
die Temperatur oder das Detektorvolumen in der Flssigchromatographie eine grosse Bedeutung fr
die Trennleistung.
Die von van Deemter entwickelte dynamische Theorie stellt im Prinzip eine Erweiterung des
theoretischen Trennstufenmodells unter Einbeziehung von nichtidealen Randbedingungen dar [16].
Folgende Annahmen werden gemacht:

Keine spontane und ungehemmte Einstellung von Gleichgewichten


Verzgerter Massentransport in der stationren und mobilen Phase
Keine ber den Sulenquerschnitt homogene Geschwindigkeit der mobilen Phase
Auftreten von Streudiffusion und Ausbildung von Kanlen in der stationren Phase
Longitudinaldiffusion unabhngig von der Geschwindigkeit der mobilen Phase und direkt
proportional zur Verweilzeit auf der Trennstrecke

Der Zusammenhang zwischen den genannten dynamischen Effekten und der theoretischen
Trennstufenhhe wird durch die Van-Deemter-Gleichung hergestellt.

HETP = A +

B
+ Cu
u

(11)

Die drei Terme A, B und C hngen dabei in unterschiedlicher Weise von der
Strmungsgeschwindigkeit u der mobilen Phase ab. Die Terme A und B beschreiben den gesamten
Massentransport durch die stationre Phase, whrend der Term C durch Strungen bei der
Gleichgewichtseinstellung zwischen mobiler und stationrer Phase bestimmt wird.
khv

11

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Durch den Term A wird die Streudiffusion (Eddy-Diffusion) beschrieben, welche aufgrund eines
Mehrwege-Effektes als eine Ursache fr die Bandenverbreiterung anzusehen ist. Dieser auch
Packungsfaktor genannte Term ist von der linearen Geschwindigkeit u der mobilen Phase zumindest
in erster Nherung unabhngig. Fr den Term A gilt folgende Beziehung:

A = 2 dp

(12)

In Gleichung (12) ist dp der mittlere Teilchendurchmesser in der stationren Phase, kennzeichnet die
statistische Unregelmssigkeit der Packung, welche mglichst homogen sein und aus uniformen
Teilchen bestehen sollte.
Der Term B beschreibt die Longitudinaldiffusion in oder entgegen der Strmungsrichtung der mobilen
Phase. Er ist insbesondere bei Verwendung von Kapillarsulen in der Gaschromatographie (GC) von
Bedeutung, da die Diffusionskoeffizienten in Gasen um 4 bis 5 Dekaden grsser sind als in
Flssigkeiten. B berechnet sich als Produkt aus dem Diffusionskoeffizienten in der mobilen Phase DM
und dem Labyrinthfaktor , welcher die Porositt der stationren Phase beschreibt.

B = 2 DM

(13)

Da die Bedeutung der Diffusion mit zunehmender Strmungsgeschwindigkeit der mobilen Phase
abnimmt, ist B umgekehrt proportional zu u.
Der Term C wird als Massenbergangsterm bezeichnet. Der verzgerte Massentransfer zwischen
mobiler und stationrer Phase hat zumeist den grssten Anteil an der Bandenverbreiterung. Die
Strungen in der Gleichgewichtseinstellung zwischen mobiler und stationrer Phase werden mit
zunehmendem u grsser, weshalb sich eine direkte Proportionalitt zur linearen Fliessgeschwindigkeit
ergibt. Die Verzgerungen im Massentransfer resultieren aus den im Vergleich zur mobilen Phase
sehr kleinen Diffusionskoeffizienten DS in der stationren Phase, weshalb Teilchen, die sich gerade in
den Poren der stationren Phase aufhalten, hinter dem Peakmaximum, welches sich mit der mobilen
Phase weiterbewegt, zurckbleiben. Durch kurze Diffusionswege und schnelle Austauschvorgnge
lsst sich der Term C deutlich verringern. Dies kann ber eine Lokalisierung der Poren vor allem an
der Oberflche erfolgen, die so nur wenig in das Innere der stationren Phase hineinreichen. Der
Massenbergangsterm C berechnet sich wie folgt:

16 k' dp 2
C=

(1 + k' ) D S

(14)

Die graphische Darstellung der Van-Deemter-Gleichung ergibt eine hyperbelartige Kurve, in deren
Minimum sich die Fliessgeschwindigkeit u fr die minimale Bodenhhe (maximale Trennstufenzahl)
bestimmen lsst (Abbildung 4).

Abbildung 4 Darstellung der Einzelterme aus der van-Deemter Theorie mit der resultierenden VanDeemter-Kurve mit Optimum der Fliessgeschwindigkeit
Auch die dynamische Theorie geht letztendlich von idealisierten Voraussetzungen aus. Im Realfall
sind die drei Terme A, B und C nur in erster Nherung unabhngig voneinander, wobei es zustzlich
einen Einfluss der Fliessgeschwindigkeit u auf die Streudiffusion (Term A) gibt. Der Term C lsst sich
khv

12

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

in die Terme CM und CS differenzieren, die den Massentransfer in der mobilen Phase (CM) bzw. zur
stationren Phase und zurck beschreiben (CS). Daher ist die ursprngliche Van-Deemter-Gleichung
in zahlreichen Anwendungsfllen fr die HPLC, GC und die TLC modifiziert worden [17,18].
Moderne Flssigchromatographie (LC)
Die Flssigkeitschromatographie LC (Liquid Chromatography) ist als Oberbegriff fr zahlreiche
moderne flssigchromatographische Trennverfahren zu betrachten. Sie lsst sich auf die
verschiedensten Substanzklassen anwenden und zeichnet sich durch eine exzellente analytische
Leistungsfhigkeit aus. Die Ionenchromatographie (IC) ist ein Bestandteil der LC, welche die wohl zur
Zeit wichtigste Trennmethode in der modernen Analytischen Chemie darstellt [3].
Die HPLC stellt eine konsequente Weiterentwicklung der klassischen Flssigkeitschromatographie
(Liquid Chromatography, LC) dar. In der klassischen LC, von Tswett im Jahre 1906 eingefhrt, wurden
Glasssulen mit 1 bis 5 cm Durchmesser und einer Lnge von bis zu 500 cm verwendet, die mit
Trennphasen von 150 bis 200 m Partikelgrsse gefllt waren. Trennungen auch einfacher
Stoffgemische dauerten bei mssiger Trennleistung oft mehrere Stunden. Aufgrund des in der
Folgezeit entwickelten Verstndnisses der Chromatographie (Gleichung 11) wurde deutlich, dass eine
Leistungssteigerung nur durch eine drastische Verringerung des Partikeldurchmessers in der
stationren Phase mglich war, was allerdings vllig neue Anforderungen an das chromatographische
Equipment stellte.
Seit etwa 1970 steht eine spezielle und leistungsfhige Gertetechnik zur Verfgung, die in der Lage
ist, die hohen Gegendrcke von 10 bis 50 MPa zu bewltigen, welche bei Verwendung von
Packungsmaterialien mit einem Durchmesser von 3 bis 10 m und Trennsulen von 125 bis 250 x 4
mm ID auftreten knnen.
Die HPLC hat sich aufgrund der drastischen Miniaturisierung zu einer rein analytischen Trennmethode
entwickelt, wohingegen die klassische LC heute praktisch nur noch fr prparative Zwecke
angewendet wird. Die Vorteile der HPLC gegenber der klassische LC sind dabei vor allem:

Exzellente chromatographische Effizienz


Kontinuierliche Arbeitsweise
Online-Detektion der getrennten Substanzen
Hohe Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit
Nutzung der Retentionszeit zur qualitativen Identifizierung von Stoffen
Kurze Analysenzeiten

Ein HPLC-System besteht unabhngig vom Einsatzgebiet im wesentlichen aus den in der Abbildung 5
dargestellten Komponenten der Hochleistungspumpe mit Vorrat fr die mobile Phase (Eluent), Injektor
(Probenaufgabe), Trennsule und Detektionssystem (inklusive Derivatisierung, Datenaufnahme und verarbeitung):

Abbildung 5

Aufbau einer HPLC- bzw. IC-Anlage mit den wichtigsten Komponenten

Die Pumpe ist neben der Trennsule das Kernstck eines jeden HPLC-Systems. Sie muss in der Lage
sein, den Eluenten mglichst konstant und pulsationsfrei auch gegen hohe Staudrcke zu frdern.
Diese machen auch die Verwendung eines speziellen Schleifen-Injektors zur Probenaufgabe
notwendig. blich ist ein 6-Wege-Ventil, das in der Lage ist, die Probe unter Normaldruck in einer
Schleife mit definiertem Volumen aufzunehmen und in das unter hohem Druck stehende HPLCkhv

13

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

System zu berfhren. Die Zusammensetzung der mobilen Phase muss wie die Art der Trennsule an
die analytische Fragestellung angepasst werden. Dies trifft ebenso auf die Auswahl des
Detektionssystems zu. Die Datenaufnahme und -verarbeitung erfolgt heute ausschliesslich
computergesteuert. Je nach Problemstellung lsst sich dieser grundlegende Aufbau einer HPLCApparatur nahezu beliebig erweitern.
Trennprinzipien in der LC
Die HPLC lsst sich anhand der verschiedenen physikalisch-chemischen Wechselwirkungen zwischen
den Substanzen in einer Probe und der stationren Phase differenzieren. Obwohl im Realfall meist
mehrere Mechanismen fr eine erfolgreiche Trennung verantwortlich sind [9], ist eine grobe
Klassifizierung nach den folgenden Trennmechanismen mglich:

Adsorption
Verteilung
Grssenausschluss
Affinitt
Ionenaustausch
Ionenpaarbildung
Ionenausschluss

Die Adsorptionschromatographie ist definiert durch Grenzflchenreaktionen, bei denen flssige


oder gasfrmige Stoffe an einer festen Phase angereichert werden. Zur qualitativen und quantitativen
Beschreibung von Adsorptionsprozessen existieren verschieden Modelle, wobei an dieser Stelle auf
die einschlgige Literatur der Physikalischen Chemie verwiesen sei [19]. In der Anwendung lassen
sich zwei Ausfhrungstechniken unterscheiden. Bei der Normalphasen-Chromatographie ist die
stationre Phase meist ein Silicagel und damit wesentlich polarer als das Laufmittel
(Kohlenwasserstoffe). In der Umkehrphasenchromatographie (Reversed-Phase) sind die Verhltnisse
genau entgegengesetzt. Aus praktischen Grnden, welche vor allem die Handhabung der Eluenten
betreffen, wird heute fast nur noch die RPC eingesetzt [3,9].
Bei der Verteilungschromatographie ist die stationre Phase eine mit der mobilen Phase nicht
mischbare Flssigkeit. Die Trennung beruht auf den unterschiedlichen Lslichkeiten der Analyten in
beiden Phasen. Dabei gilt im Idealfall das Nernstsche Verteilungsgesetz. Dieser Trennmechanismus
spielt vor allem in der Gaschromatographie eine bedeutende Rolle, wenn mit Trennflssigkeiten
beschichtete Kapillaren als stationre Phasen verwendet werden. Verteilungschromatographie kann
auch in der HPLC vorliegen, wenn mit unpolaren Kohlenwasserstoffen modifizierte Silicagele, z.B.
sogenannte Octadecyl-Phasen, als Trennmaterialien zum Einsatz kommen.
Die Grssenausschlusschromatographie, auch Size-Exclusion-Chromatography (SEC) genannt,
ermglicht eine Trennung nach der Moleklgrsse aufgrund von Siebeffekten. Als stationre Phasen
werden Silicagele oder organische Polymerharze mit definierter Porenstruktur verwendet. Kleinere
Analyten knnen in die Poren diffundieren und werden retardiert. Mit zunehmender Moleklgrsse
wird eine Wechselwirkung mit den Poren immer unwahrscheinlicher, bis ab einer bestimmten Grsse
Molekle ganz ausgeschlossen werden und praktisch im Totvolumen eluieren. Die SEC findet vor
allem in der Polymer- und Bioanalytik breite Anwendung.
Die Affinittschromatographie ermglicht die Trennung von Stoffgemischen durch selektive oder
spezifische Wechselwirkungskrfte. Vor allem bei Enzymen und ihren Substraten beobachtet man
hochspezifische Wechselwirkungen, ebenso zwischen Antikrpern und Antigenen (Schlssel-SchlossPrinzip). In der Praxis werden Enzyme oder Antikrper auf einer stationren Phase chemisch
immobilisiert. Befindet sich nun ein entsprechendes Substrat oder Antigen in der Probe, so wird dieses
mit extremer Selektivitt retardiert. Daher ist die Bioaffinittschromatographie im Bereich der
Wirkstoffanalytik (Pharmakologie) ein unverzichtbares Verfahren.
Die Ionenaustauschchromatographie (IC) wird ebenso wie die
Ionenausschlusschromatographie im folgenden Kapitel ausfhrlich behandelt.

3.3

Ionenpaar-

und

Grundlagen der Ionenchromatographie (IC)

3.3.1 Terminologie und Einordnung in die LC


Die Ionenaustausch- oder Ionenchromatographie (IC) stellt eine Untergruppe der HPLC dar. Laut
IUPAC ist die Ionenaustauschchromatographie wie folgt definiert [7,8]:
khv

14

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Bei der Ionenaustauschchromatographie beruht die Trennung auf Unterschieden in den


Ionenaustauschaffinitten der einzelnen Analyten. Wenn anorganische Ionen getrennt und mit
Leitfhigkeitsdetektoren oder durch indirekte UV-Detektion nachgewiesen werden, bezeichnet man
dies auch als Ionenchromatographie.
Diese Definition ist aus verschiedenen Grnden unglcklich gewhlt. Die Detektionstechnik sollte
unabhngig vom vorliegenden Trennmechanismus betrachtet werden. Ausserdem ist eine
Beschrnkung des Begriffes Ionenchromatographie auf anorganische Ionen nicht nachvollziehbar, da
in der Praxis mit einem gegebenen System oft sowohl organische wie auch anorganische Ionen
gleichzeitig getrennt und identifiziert werden knnen.
Besser geeignet zur Definition der Ionenchromatographie ist eine ltere, allgemeinere Definition [20]:
Die Ionenchromatographie umfasst alle schnellen flssigkeitschromatographischen
Trennungen von Ionen in Sulen in Online Kopplung mit Detektion und Quantifizierung in
einem Durchflussdetektor.
Diese Definition charakterisiert die Ionenchromatographie unabhngig von Trennmechanismus und
Detektion, grenzt sie aber gleichzeitig vom klassischen Ionenaustausch ab. Als Trennprinzipien wirken
in der Ionenchromatographie:

Ionenaustausch
Ionenpaarbildung
Ionenausschluss

Chromatographische Methoden werden durch den berwiegend vorliegenden Trennmechanismus


definiert. Die Ionenaustauschchromatographie wird dabei heute vereinfacht Ionenchromatographie
(IC) genannt, wobei die Ionenpaarchromatographie (IPC) und Ionenausschlusschromatographie (IEC,
Ion Exclusion Chromatography) als speziellere Anwendungen gelten.
3.3.2 Der Ionenaustausch
Die Ionenaustauschchromatographie (IC) beruht auf einer stchiometrisch verlaufenden chemischen
Reaktion zwischen Ionen in einer Lsung und einem blicherweise festen Stoff, der funktionelle
Gruppen trgt und Ionen aufgrund elektrostatischer Krfte fixieren kann. In der
Kationenchromatographie sind dies im einfachsten Fall Sulfonsuregruppen, in der
Anionenchromatographie quarternre Ammoniumgruppen. Zwischen beiden Phasen knnen Ionen
gleichsinniger Ladung theoretisch vllig reversibel ausgetauscht werden. Der Prozess des
Ionenaustausches fhrt zu einem Gleichgewichtszustand. Auf welcher Seite dieses Gleichgewicht
liegt, hngt von der Affinitt der beteiligten Ionen zu den funktionellen Gruppen der stationren Phase
ab. Die Abbildung 6 zeigt schematisch die Austauschvorgnge fr Kationen und Anionen. Dabei
werden die Analyt-Ionen mit A bezeichnet, die mit diesen um die Austauschpltze konkurrierenden
Eluent-Ionen mit E.

Abbildung 6 Schematische Darstellung des Ionenaustauschprozesses in der Ionenchromatographie. Links: Kationenaustausch, rechts: Anionenaustausch
Thermodynamische Aspekte des Ionenaustauschprozesses
Ionenaustauscher bestehen im Normalfall aus festen Phasen, an deren Oberflche ionische Gruppen
fixiert sind. Aufgrund der Elektroneutralittsbedingung befindet sich immer ein entgegengesetzt
khv

15

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

geladenes Gegen-Ion in der Nhe der funktionellen Gruppe. Das Gegen-Ion stammt in der Regel aus
dem Laufmittel und wird deshalb auch als Eluent-Ion bezeichnet.
Wird eine Probe aufgegeben, die zwei Analyt-Ionen A- und B- enthalten, so verdrngen diese
kurzzeitig die Eluent-Ionen E- und werden an der fixierten Ladung zurckgehalten, bevor sie ihrerseits
wieder durch das Eluent-Ion ausgetauscht werden. Fr die Anionenchromatographie ergeben sich
damit folgende reversiblen Gleichgewichte:
Harz - N+R3 E- + A-

Harz - N+R3 A- + E-

(15)

Harz - N+R3 E- + B-

Harz - N+R3 B- + E-

(16)

Durch die unterschiedlichen Affinitten von A- und B- zu den funktionellen Gruppen ist eine Trennung
der Komponenten mglich. Die Gleichgewichtskonstante K wird auch Selektivittskoeffizient genannt
und berechnet sich fr das Anion A- wie folgt:

KA =

[Harz - N + R 3 A ] [E ]
[Harz - N + R 3 E ] [A ]

[A ] S [E ] M
[E ] S [A ] M

(17)

Unter der Voraussetzung, dass die Konzentration der Eluent-Ionen normalerweise um mehrere
Grssenordnungen hher ist als die der Analyt-Ionen, kann [E-] in mobiler und stationrer Phase als
konstant betrachtet werden. Damit lassen sich der Verteilungskoeffizient DA (Gleichung 1) und der
Retentionsfaktor kA (Gleichung 4) berechnen. Derartige Berechnungen sind aber strenggenommen
nur dann zulssig, wenn die Konzentrationen in Gleichung 17 den Aktivitten entsprechen, was nur
bei unendlicher Verdnnung der Fall ist [19]. Die Aktivitten der Ionen in der stationren Phase sind
prinzipiell nicht zugnglich [4]. Fr die am hufigsten eingesetzten Ionenaustauscher geringer
Kapazitt, die nur mit sehr verdnnten Elektrolyten als Laufmittel verwendet werden knnen, behilft
man sich mit der Vernachlssigung der Aktivitten. Diese sehr grobe Nherung trifft fr
Packungsmaterialien mit hherer Kapazitt (> 200 mMol/g) und konzentriertere Eluenten nicht mehr
zu, bei denen sich deutliche Abweichungen vom idealen Verhalten zeigen.
3.3.3 Die Ionenpaarbildung
Mit Hilfe der Ionenpaarchromatographie knnen die gleichen Analyten getrennt werden wie mit der
Ionenaustauschchromatographie, der Trennmechanismus ist jedoch ein vllig anderer. Als stationre
Phasen werden die aus der Verteilungschromatographie bekannten, vllig unpolaren ReversedPhase-Materialien verwendet. Dem Eluenten wird ein sogenanntes Ionenpaarreagenz zugefgt, dass
aus anionischen oder kationischen Tenside wie Tetraalkylammonium-Salzen bzw. n-Alkylsulfonsuren
besteht. Die Ionenpaarreagenzien bilden mit Analyt-Ionen entgegengesetzter Ladung ein ungeladenes
Ionenpaar, welches an der stationren Phase durch hydrophobe Wechselwirkungen retardiert werden
kann. Aufgrund der Bildungskonstanten der Ionenpaare und ihrer unterschiedlich starken Adsorption
ist eine Stofftrennung mglich. Abbildung 7 zeigt vereinfacht das statische Ionenaustausch-Modell, bei
dem angenommen wird, dass es erst nach Adsorption des Ionenpaarreagenzes an der stationren
Phase zu Wechselwirkungen mit den Analyten kommt.

khv

16

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Abbildung 7 Schematische Darstellung des statischen Ionenaustausch-Modells in der


Ionenpaarchromatographie (IPC). Das Trennprinzip gilt sowohl fr Anionen als auch fr Kationen.
3.3.4 Der Ionenausschluss
Die Ionenausschlusschromatographie (IEC) dient vor allem zur Trennung von schwachen Suren oder
Basen [2,4]. Den grssten Stellenwert besitzt die IEC bei der Analytik schwacher Suren wie
Carbonsuren, Kohlenhydraten, Phenolen oder Aminosuren. Die Abbildung 8 zeigt das Trennprinzip
der IEC am Beispiel einer Carbonsure R COOH.

Abbildung 8
(IEC)

Der Donnan-Ausschluss als Trennprinzip in der Ionenausschlusschromatographie

Als Packungsmaterial wird in der IEC hufig ein vollstndig sulfonierter Kationenaustauscher
verwendet, dessen Sulfonsuregruppen mit Protonen als Gegen-Ionen elektrisch neutral sind. Bei
wssrigen Eluenten sind die funktionellen Gruppen hydratisiert. Die Hydrathlle wird durch eine
(gedachte) negativ geladene Membran (Donnan-Membran) begrenzt. Sie ist nur fr ungeladene, nicht
dissoziierte Molekle wie Wasser passierbar. Organische Carbonsuren knnen getrennt werden,
wenn starke Mineralsuren wie Salzsure als Laufmittel verwendet werden. Aufgrund der niedrigen
Surekonstanten (pkS-Werte) der Carbonsuren liegen diese im stark sauren Eluenten nahezu
vollstndig undissoziiert vor. Sie knnen die Donnan-Membran durchqueren und an der stationren
Phase adsorbieren, whrend die Chlorid-Ionen der vollstndig dissoziierten Salzsure
ausgeschlossen werden.
Die Abbildung 9 zeigt eine typische Abhngigkeit des Elutionsvolumens einer Sure von deren pKsWert fr die Trennung durch Ionenausschluss. Deutlich sind berlagerte Adsorption (lngerkettige
Carbonsuren, H2S) und die Grenzen des praktischen Arbeitsbereiches zu erkennen. Die Trennung
von Carbonsuren erfolgt letztlich aufgrund ihrer unterschiedlichen pkS-Werte.

khv

17

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Abbildung 9 Abhngikeit des Elutionsvolumens in der Ionenausschlusschromatographie vom


jeweiligen pKs-Wert der Sure

3.4

Retentionsmodelle in der Ionenchromatographie

Im Idealfall wird die Retention eines Analyten in der Ionenchromatographie nur durch dessen Affinitt
zu den funktionellen Gruppen des Ionenaustauschers bestimmt. Diese Affinitt lsst sich durch die
Formulierung einer chemischen Reaktion, der Ionenaustauschreaktion, beschreiben und mit den
Mitteln des Massenwirkungsgesetzes erklren.
Die im folgenden vorgestellten Retentionsmodelle versuchen, auf Basis des Massenwirkungsgesetzes
Voraussagen ber das Retentionsverhalten der beteiligten Analyten unter bestimmten
chromatographischen Bedingungen zu treffen. Sind die resultierenden Modelle geeignet, die
makroskopischen Beobachtungen zu erklren, kann mit ihrer Hilfe z.B. ein Elutionssystem auf das
jeweilige Trennproblem hin optimiert werden.
3.4.1 Retentionsmodelle in der Anionenchromatographie
Die folgenden Betrachtungen befassen sich zunchst mit der Elution durch gleichionische
Verdrngung als einfachstem Elutionsmechanismus in der Ionenchromatographie. Das konkrete
Beispiel ist auf die Anionenchromatographie bezogen, die gleichen berlegungen gelten aber analog
auch fr die Kationenchromatographie. Erst bei Ergnzung des Eluenten mit Komplexbildnern muss
das Retentionsmodell erweitert werden, was im Kapitel: Retentionsmodell fr die Elution in
Gegenwart von Komplexbildnern (Seite 24) passieren wird.
Retentionsmodell fr Eluenten mit einem Anion
Unter der Voraussetzung der Elektroneutralitt ist der einfachste Ansatz fr ein Retentionsmodell die
gleichionische Verdrngung, bei der nur ein einziges Eluent-Ion Ey- mit einem Analyt-Anion Ax- um die
funktionellen Gruppen der stationren Phase konkurriert [4]. Die Konzentration des Eluent-Anions Eyist dabei zeitlich konstant (isokratische Elution).
Die Austauschpltze der Trennsule mit der Kapazitt Q sind zu Beginn des chromatographischen
Prozesses mit den Eluent-Anionen Ey- belegt. Wird eine Probe mit dem Analyt-Anion Ax- aufgegeben,
so kommt es zwischen stationrer Phase (Index S) und mobiler Phase (Index M) zur Einstellung des
folgenden Gleichgewichtes:
y AMx- + x ESy-

y ASx- + x EMy-

(18)

Das Gleichgewicht lsst sich nach dem Massenwirkungsgesetz durch eine thermodynamische
Gleichgewichtskonstante beschreiben. Man erhlt bei Bercksichtigung der Aktivitten der beteiligten
Ionen die folgende thermodynamische Gleichgewichtskonstante:
khv

18

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

K A,E

y
x
[A Sx ] y [E My ] x A Sx EMy
=

[A Mx ] y [E Sy ] x yA x Ex y
M

(19)

Die Aktivitten der beteiligten Ionen in stationrer und mobiler Phase werden mangels Bestimmbarkeit
in der stationren Phase im allgemeinen vernachlssigt und gleich Eins gesetzt.
Fhrt man nun fr das Analyt-Anion Ax- zwei aus Kapitel 3.2.1 bekannte Grssen ein, den
Verteilungskoeffizienten DA und den Retentionsfaktor kA .

DA =

[A] S
[A] M

VS
VM

mit k' A = D A

(20)

so lsst sich Gleichung 19 durch diese Beziehungen und unter Vernachlssigung der Aktivitten
umformen zu:

K A,E

V
= k' A M
VS

[E My ]
y
[E ]
S

(21)

Da die Konzentration der Eluent-Ionen E im Regelfall um mehrere Zehnerpotenzen grsser ist als die
der Analyt-Anionen Ax-, kann man in guter Nherung annehmen, dass alle funktionelle Gruppen mit Eybelegt sind. Die nicht bestimmbare Konzentration von Ey- in der stationren Phase lsst sich unter
dieser Annahme durch die leichter zugnglichen Parameter Austauschkapazitt Q und Ladung des
Eluent-Anions y ersetzen:

[E Sy ] =

Q
y

(22)

Damit geht Gleichung 21 ber in:


y

K A,E

V Q
= k 'A M [E My ]
VS y

(23)

Der Retentionsfaktor kA des Analyt-Anions Ax- ist aus einem Chromatogramm leicht zugnglich.
Gleichung 23 wird daher nach dieser Grsse aufgelst.

V
k = S (K A,E )
VM
'
A

1
y

x
y

Q
[E My ] y
y

(24)

Diese Gleichung ist von entscheidender Bedeutung fr die Anionenchromatographie, da durch sie ein
quantitativer Zusammenhang zwischen dem Retentionsfaktor kA und einigen experimentell
zugnglichen Parametern wie der Konzentration des Eluenten und der Austauschkapazit hergestellt
wird. In der Praxis arbeitet man aus Grnden der bersicht mit der logarithmierten Form der
Gleichung 24.

log k' A =

1
x
Q
x
log K A,E + log
+ log log [E My ]
y
y
y
y

mit

VS
VM

(25)

Aus Gleichung 25 ergeben sich zunchst folgende Konsequenzen:

khv

Eine Erhhung der Eluentenkonzentration [E y-] beschleunigt die Elution


19

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Grssere Retentionsfaktoren werden verursacht durch grssere


Gleichgewichtskonstanten KA,E, hhere Austauschkapazitten Q und ein grsseres
Phasenvolumenverhltnis .
Multivalente Analyten Anx- werden strker retardiert als monovalente Ax-,
o zumindest solange die Eluentkonzentration [E y-] realtiv niedrig ist. Dies wird auch als
Elektroselektivitt bezeichnet.
Multivalente Eluenten E ny- haben eine hhere Elutionskraft als monovalente E yo Die Elution multivalenter Analyten Anx- wird durch gesteigerte Konzentrationen
monovalenter Eluent-Ionen E y- strker beeinflusst als die monovalenter Analyten Ax-.
o

In erster Nherung kann angenommen werden, dass die Selektivittskoeffizienten bei konstantem
unabhngig von Q sind, womit sich folgende Proportionalitt ergibt:

Q
[E My - ]

k' A

(26)

Aus Gleichung 26 ist ersichtlich, dass bei einer Steigerung der Austauschkapazitt Q die
Konzentration des Eluenten [Ey-] proportional erhht werden muss, damit konstante
Retentionsfaktoren erreicht werden. Dies ist der Grund, warum in der Ionenchromatographie
blicherweise niederkapazitive Trennphasen verwendet werden, da hohe Elektrolytkonzentrationen
die wichtigste Detektionsmethode in der Ionenchromatographie, die Leitfhigkeitsdetektion, praktisch
unmglich machen.
Zur Optimierung von Trennproblemen wird oft die Eluentenkonzentration [E y-] variiert. Werden alle
anderen in Gleichung 25 auftretenden Parameter konstant gehalten, vereinfacht sich diese zu:

log k' A = C1

x
log [E My ]
y

(27)

Die graphische Auftragung der Gleichung 27 ergibt eine Gerade mit der Steigung m = - x/y und dem
Achsenabschnitt C, der die Grssen Q, und KA,E enthlt. Bei Verwendung monoanionischer
Eluenten wird m auch als effektive Ladung bezeichnet. Abbildung 10 stellt schematisch das Ergebnis
der Gleichung 27 fr verschiedene Kombinationen unterschiedlich geladener Eluent- und AnalytAnionen dar.

Abbildung 10 Graphische Darstellung von Gleichung 28 fr verschiedene Kombinationen


unterschiedlich geladener Eluent- und Analyt-Anionen [4].
Gleichung 27 wurde bisher in einer Vielzahl von Publikationen besttigt, allerdings unter der
Voraussetzung, dass niederkapazitive Trennmaterialien und verdnnte Eluenten verwendet wurden.
Variiert man dagegen unter konstanten Bedingungen die Austauschkapazitt Q, vereinfacht sich
Gleichung 25 zu:

khv

20

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

log k' A = C +

x
Q
log
y
y

(28)

Die graphische Darstellung dieser Gleichung hnelt Abbildung 10, allerdings mit positiven
Geradensteigungen. Chromatographische Untersuchungen zur Variation von Q wurden bisher nur
einmal bei der Trennung von divalenten Kationen durchgefhrt. Dabei zeigte sich, dass im Gegensatz
zu den bisherigen Annahmen der Retentionsfaktor und auch die Selektivittskoeffizienten nicht
unabhngig von der Austauschkapazitt betrachtet werden knnen. Es wird deutlich, dass zur
Optimierung von Trennproblemen neben der Konzentration des Eluenten [E y-] auch die
Austauschkapazitt Q eine wichtige Grsse darstellt.
Die bisherigen Betrachtungen gelten nur fr ein Analyt-Anion. Konkurrieren dagegen zwei
unterschiedliche Anionen Ax und Bz um die funktionellen Gruppen, so gilt fr den
Selektivittskoeffizienten KA,B:

K A,B

[A Sx ] z [B Mz ] x
=
[A Mx ] z [A Sz ] x

(29)

Unter Bercksichtigung von Gleichung 20 erhlt man zunchst die Selektivitt ,

A,B

[A Sx ] [B Mz ]
k' A
=
=
k' B
[A Mx ] [B Sz ]

(30)

und dann nach Umformen die Gleichungen 31 a und b,

log A.B =

k' V
xz
1
log K A,B +
log B M
z
z
VS

(31a)

log A.B =

k' V
xz
1
log K A,B +
log A M
z
x
VS

(31 b)

die sich fr gleichgeladene Analyten (x = z) vereinfachen zu:

log A,B =

1
log K A,B
z

(32)

bzw.

log A,B =

1
log K A,B
x

(33)

Fr die Selektivitt zwischen zwei gleichgeladenen Analyt-Anionen bedeutet dies:

sie ist nur eine Funktion des Selektivittskoeffizienten KA,B und der Ladungen z bzw. x,
sie hngt bei konstantem KA,B weder von der Konzentration [E y-] noch von der chemischen
Beschaffenheit des Eluent-Anions ab (!)

Bei unterschiedlichen Ladungen von A und B ergibt sich:

hngt vom Retentionsfaktor einer der beiden Analyten ab,


die beiden Retentionsfaktoren kA und kB sind nicht unabhngig voneinander (!)

An den Gleichungen 31 bis 33 ist besonders bemerkenswert, dass die Selektivitten zweier Anionen
zunchst weder von der chemischen Beschaffenheit noch von der Ladung des Eluent-Anions abhngt,
solange das Phasenvolumenverhltnis und der Selektivittskoeffizient konstant sind. In der Praxis
lsst sich aber dennoch eine Vernderung von durch die Variation von [E y-] erreichen, da sich zwei
Analyten trotz gleicher Ladung deutlich in ihren chemischen Eigenschaften, z.B. Polarisierbarkeit und
Hydratation, unterscheiden knnen, was unterschiedliche Affinitten zur stationren Phase zur Folge
hat. Diese Wechselwirkungen werden aber in der klassischen Ableitung nicht bercksichtigt.

khv

21

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Retentionsmodelle fr Eluenten mit mehreren Anionen


Die bisherigen Betrachtungen bezogen sich auf Elutionssysteme mit nur einem Eluent-Anion. In der
Praxis liegen aber meist mehrere eluierende Spezies vor, etwa bei Carbonat/HydrogencarbonatPuffern oder bei mehrbasigen Suren wie Phosphorsure, deren Dissoziation und damit
Speziesverteilung stark vom pH-Wert abhngt.
Selbst in einfachen Fllen, wenn keines der beteiligten Eluent-Anionen an Sure-Base-Gleichgewichten beteiligt ist, kann der Zusammenhang zwischen dem Retentionsfaktor k und der
Eluentkonzentration [E-] nicht in Form einer einfachen log-log-Beziehung nach Gleichung 28
dargestellt werden. Dies wre nur dann mglich, wenn die Konzentration oder die Elutionskraft der
brigen Eluent-Anionen zu vernachlssigen ist, was dem Retentionsmodell fr monoanionische
Eluenten entsprechen wrde.
In der Literatur werden mehrere Modelle beschrieben, die sich mit polyanionischen Eluenten befassen
und im folgenden kurz diskutiert werden:

Modell des dominanten Gleichgewichtes [21]


Modell der effektiven Ladung [22-24]
Modell der vielfachen Eluentspezies [25,26]

Bei Betrachtung eines auf Phosphat basierenden Eluenten H2PO4-, HPO42- und PO43-, (im weiteren
H2P-, HP2- und P3-) und dem monovalenten Analyt-Ion A- bilden sich folgende Gleichgewichte aus:

A M + H 2PS

A S + H 2 PM

; x1

(34)

A M +

1
2

HPS2

A S +

HPM2

; x2

(35)

A M +

1
3

PS3

A S +

PM3

; x3

(36)

1
2

1
3

Die Grssen x1..3 entsprechen dabei den Anteilen der jeweiligen Reaktionen an der Retention,
weshalb gilt:
x1 + x2 + x3 = 1

(37)

Sowohl das Modell des dominanten Gleichgewichtes als auch das der effektiven Ladung postulieren,
obwohl mehrere Spezies vorhanden sind, eine bestimmte Ladung fr das Eluent-Anion, so dass das in
Kapitel 4.1.1 fr monoanionische Eluenten abgeleitete Retentionsmodell verwendet werden kann.
Das Modell des dominanten Gleichgewichtes nimmt an, dass Gleichung 36 ganz auf der rechten
Seite liegt, da P3- aufgrund der hheren Ladung wesentlich strker als H2P- und HP2- an der
stationren Phase gebunden wird. Damit ist P3- allein fr die Elution massgeblich, so dass sich die
Ladung des Eluent-Anions zu -3 ergibt. Dieses Modell erzielt allerdings nur bei multivalenten Analyten
eine gute bereinstimmung mit der Praxis [4].
Beim Modell der effektiven Ladung wird unter Bercksichtigung des pH-Wertes aus den
Molenbrchen der mglichen Spezies H2P-, HP2- und P3- eine effektive Ladung berechnet [22]. Mit
dieser und den vorliegenden Konzentrationen der Eluentspezies lsst sich eine Beziehung analog
Gleichung 27 aufstellen. Voraussetzung fr derartige Berechnungen ist aber, dass sich die
Selektivitten der Eluent-Spezies bezglich des Analyt-Ions A- nicht wesentlich unterscheiden. Das
Modell der effektiven Ladung lsst sich vor allem bei monovalenten Analyten sinnvoll anwenden [4].
In der Realitt ist das Modell der vielfachen Eluentspezies zur Beschreibung von Eluenten, deren
Komponenten sich chemisch voneinander ableiten, am besten geeignet. Die folgenden Betrachtungen
basieren auf dem Modell von Mongay et al. [27], welches eine Weiterentwicklung der Arbeiten von
Jenke und Pagenkopf darstellt [25].
Aus den Gleichungen 34 bis 36 lsst sich das globale Gleichgewicht auf der Trennsule darstellen
(Gleichung 38). Unter Bercksichtigung von Gleichung 37 lsst sich bei Vernachlssigung der
Aktivitten die Gleichgewichtskonstante KA,P fr den Austauschprozess definieren (Gleichung 39).

khv

22

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

(x 1 + x 2 + x 3 ) A M +

x
x1
x
H 2 PS + 2 HP2 + 3 PS3
1
2
3

KA,P

(x 1 + x 2 + x 3 ) A S +

K A,P

(38)

x
x1
x
H 2 PM + 2 HPM + 3 PM3
1
2
3

[A S ] [H2PM ] X1/1 [HPM2 ] X2 /2 [HPM3 ] X3 /3


=
[A M ] [H2PS ] X1/1 [HPS2 ] X2 /2 [HPS3 ] X3 /3

(39)

Die weitere mathematische Behandlung erfolgt wie bei der Ableitung des Retentionsmodells fr
monoanionische Eluenten. Bercksichtigt werden mssen vor allem:

Die (mgliche) Dissoziation des Analyt-Anions A


Die Gesamtkonzentration der Eluentspezies: cP = [H3P] + [H2P-] + [HP2] + [P3]
Das Ausmass der Wechselwirkungen der Eluentspezies mit den funktionellen Gruppen

Die Einfhrung des Retentionsfaktors kA (Gleichung 20) und der Kapazitt Q (Gleichung 22) liefert
nach weiterer mathematischer Umformung einen komplizierten Ausdruck fr kA [28], der hier nur in
seiner logarithmierten und weiter vereinfachten Form dargestellt wird:

x
x
x
log k' A = C 3 1 + 2 + 3 log c P
2
3
1

(40)

C3 ist eine Konstante, die analog Gleichung 27 Grssen wie das Phasenvolumenverhltnis, die
Kapazitt und die Gleichgewichtskonstante enthlt, cP die Summe der Konzentrationen der
Eluentspezies. Aus Gleichung 40 lsst sich folgern, dass die Steigungen der Geraden bei einer
doppelt logarithmischen Auftragung immer kleiner sein mssen als nach dem einfachen
Retentionsmodell fr monoanionische Eluenten (Gleichung 27), da die Summe in der Klammer stets
kleiner als Eins ist. Weiterhin wird deutlich, dass der pH-Wert einen entscheidenden Einfluss auf das
Ausmass der Beeinflussung der log-log-Beziehung hat.
Fr Eluentspezies, die sich chemisch nicht voneinander ableiten, existiert ein Modell von Jano et al.,
welches zur Beschreibung von Eluenten entwickelt wurde, die einen Phosphatpuffer und zustzlich
Perchlorat enthalten [29]. Die Ableitung dieses Modells erfolgt analog den obigen berlegungen,
allerdings muss zustzlich ein Austauschgleichgewicht fr ein weiteres, monovalentes Eluent-Ion
betrachtet werden. Die Berechnungen liefern sehr komplizierte Ausdrcke fr den Retentionsfaktor,
die sich aber fr neutrale oder saure Eluenten drastisch vereinfachen lassen. Fr den Fall, dass neben
dem Perchlorat nur eine weitere monovalente Eluent-Spezies vorliegt, erhlt man Gleichung 41, in der
x und y die Beitrge der entsprechenden Gleichgewichtsreaktionen (x: Phosphatpuffer, y: Perchlorat)
an der Retention reprsentieren. C ist wie in den brigen Modellen eine Konstante, whrend der nicht
nher bestimmte Faktor a bercksichtigen soll, um wieviel strker das Perchlorat-Ion an der
stationren Phase gebunden wird als die betreffende Phosphat-Spezies.

x
x
log k' A = C1 y + i log a y + i log [E - ]
i
i

(41)

Da die Klammerterme in Gleichung 41 stets kleiner als Eins sind, ist die Steigung in der log-logAuftragung immer geringer als nach dem einfachen Retentionsmodell zu erwarten. Das Modell liefert
im konkreten Anwendungsfall gute bereinstimmungen mit den experimentellen Daten. Es kann
allerdings in der beschriebenen Form nicht auf alkalische Elutionssysteme angewendet werden.
3.4.2 Retentionsmodelle in der Kationenchromatographie
Die Kationenchromatographie muss fr die Betrachtung der Retentionsmodelle in zwei Untergruppen
geteilt werden. Die eine Gruppe befasst sich mit Alkali und Erdalkalimetallkationen als Analyten und
bentigt nur ein Elutionsystem auf Basis der gleichionischen Verdrngung. Dabei trgt die stationre
khv

23

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Phase Carbonsure-Gruppen als Funktionalitt. Bei der Trennung von zwei- und hhergeladenen
Metallionen kommt man um den Einsatz eines Komplexbildners nicht herum, dessen Einfluss auf die
Retention im Kapitel Retentionsmodell fr die Elution in Gegenwart von Komplexbildnern auf Seite
24 beschrieben wird.
Retentionsmodell fr Eluenten mit einem Kation
Die Erluterungen des Abschnitts Retentionsmodell fr Eluenten mit einem Anion gelten in analoger
Weise fr die Kationenchromatographie mit Elution durch gleichionische Verdrngung. In der Praxis
relevant ist dies fr die Bestimmung von Alkali- und Erdalkalimetalle, Ammonium und kurzkettigen
Aminen. Als Eluentkationen werden neben H+ auch organische Kationen wie die 2,3Diaminopropionsure (DAP) in Verbindung mit verdnnter Salzsure eingesetzt. Je nach
eingestelltem pH-Wert des Eluenten liegt die DAP in den ionischen Formen (1) und (2) vor (Abbildung
11). Nach einer Suppression erhlt man die zwitterionische Form (3), die keine Eigenleitfhigkeit
besitzt.

Abbildung 11 Ionische Spezies der Diaminopropionsure


Retentionsmodell fr die Elution in Gegenwart von Komplexbildnern
In der Kationenchromatographie werden zur Trennung von Erdalkali-, bergangs- und SchwermetallIonen Eluenten eingesetzt, die zustzlich zum Eluentkation En+ noch einen Komplexbildner enthalten.
Als Komplexbildner werden hauptschlich Dicarbonsuren H2L wie Weinsure, Oxalsure,
Citronensure und auch Pyridindicarbonsure, eingesetzt. Die Analyten bilden mit den Anionen der
Komplexbildner HL sowie L2 unterschiedlich stabile Komplexe mit verschiedenen Stchiometrien.
Durch die Komplexierung wird die effektive, d.h. im zeitlichen Mittel vorliegende Ladung der Analyten
herabgesetzt. Da dies entsprechend der Kinetik der Komplexbildung und der Stabilittskonstanten der
Komplexe erfolgt, nehmen die Selektivittsunterschiede zu und eine Trennung auch hnlicher
Analyten wird mglich. Neben dem Ionenaustausch ist daher die Komplexbildung entscheidend fr die
Trennung der hhergeladenen Metall-Ionen.

[MeL ]
=
[Me ][L ]
x 2

x+

Me + L

MeL

mit K MeL

x-2

x+

mit K MeL 2 =

MeLx-2 + L2

MeL2x-4

MeLx-2 + L2

MeL2x-4 mit K MeL 2 =

Mex+ + HL

MeHLx-1

[MeL ]
[MeL ][L ]
x 4

x -2

[MeL ]
[MeL ][L ]

mit K HL =

(42)

(43)

x4

x 2

(44)

[MeHL ]
[Me ][HL ]
x 1

x+

(45)

Um den Einfluss des Komplexbildners auf die ionenchromatographische Trennung zu bercksichtigen,


wird das Retentionsmodell der gleichionischen Verdrngung (siehe Kapitel Retentionsmodell fr
Eluenten mit einem Anion auf Seite 18) erweitert. Als Einflussgrsse, die das Ausmass der
khv

24

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Komplexierung des Analyten beschreibt, wird der M-Wert eingefhrt. Der Bruchteil M der freien
Analyt-Ionen in der mobilen Phase ist gegeben als

M =

[Me ]
[Me ]
=
] + [MeHL ] + [MeL ] + [MeL ] [Me']
x+

[Me

x+

x+

x 1

x 2

x4
2

(45)

mit der Gesamtkonzentration [Me] der Metall-Ionen. Der M-Wert lsst sich aus den
Komplexbildungskonstanten, den Suredissoziationskonstanten der Carbonsure und dem pH-Wert
des Eluenten berechnen. Fr den Verteilungskoeffizienten DMe erhlt man unter Bercksichtigung der
Komplexbildung:

DMe =

[MeR x ] = [MeR x ]
M
[Me']
[Me x+ ]

(46)

Setzt man voraus, dass nur freie Analyt-Ionen Mex+ mit den Carbon- oder Sulfonsure-Gruppen
wechselwirken und c(Ez+) >> c(H+), so ergibt sich fr Gleichung 21:

K Me, E

k'
= Me
M

Q

y

[E ]

y+ x

(47)

In der logarithmierten Form erhlt man fr Gleichung 47 analog zu Gleichung 25:

log k' Me = log M +

1
x
Q
x
log K Me,E + log + log log [E My + ]
y
y
y
y

(48)

Liegen nebeneinander mehrere kationische Metall-Spezies vor, z. B. Mex+ und MeHL(x-1)+, resultiert
daraus im Chromatogramm in der Regel jedoch nur ein Peak fr den betreffenden Analyten. Die
Anzahl der auftretenden Peaks ist abhngig von der Kinetik der Komplexierungs- und
Dekomplexierungs-Gleichgewichte in der mobilen Phase. Man erhlt nur einen Peak fr den Fall, dass
sich die Komplexgleichgewichte in der mobilen Phase schnell einstellen im Vergleich zur
Aufenthaltszeit des Komplexes in der stationren Phase. Verluft die Umkomplexierung hingegen nur
langsam, knnen asymmetrische oder multiple Peaks auftreten.
Unter der Annahme, dass alle in der mobilen Phase vorliegenden Metall-Spezies mit der stationren
Phase wechselwirken knnen, ergibt sich fr den experimentell bestimmten Kapazittsfaktor kexp des
Analyten:

k ' exp = k'Mx + Me x + + k'MeHLx 1 MeHLx -1 + k'MeLx 2 MeLx - 2

(49)

Bei der Betrachtung der Abhngigkeit des Kapazittsfaktors von den Einflussgrssen Q, [Ey+] sowie
M wird jedoch der in Gleichung 48 dargestellte Zusammenhang zugrunde gelegt, da die divalenten
Analyten mit starken Komplexbildnern berwiegend neutrale oder anionische Komplexe bilden.
Berechnung von M-Werten
Der M-Wert ist nach Gleichung 45 definiert als das Verhltnis der Konzentration der freien MetallIonen zur Gesamtkonzentration der Metall-Ionen. Die Konzentrationen der in der mobilen Phase
vorliegenden Metall-Spezies lassen sich mit den jeweiligen Komplexbildungskonstanten und den
Suredissoziationskonstanten der verwendeten Carbonsure berechnen.
Bei der Verwendung von Weinsure als Komplexbildner im Eluenten werden von den Erdalkali-,
bergangs- und Schwermetallen vornehmlich die neutralen 1:1-Komplexe MeL sowie in geringerem
Masse die Hydrogentartrat-Komplexe MHL+ gebildet. Fr die Berechnung von M ergibt sich fr
Weinsure-Eluenten:

khv

25

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

M =

[Me ]
] + [MeL ] + [MeHL ] = 1 + K
2+

[Me

2+

1
MeL L c L + K MeHL HL c L

(50)

wobei cL die Gesamtkonzentration der Weinsure und HL sowie L die Molenbrche der SureAnionen HL- und L2- sind.
Mit Oxalsure und/oder Pyridindicarbonsure bilden einige Metall-Ionen neben den 1:1-Komplexen
auch stabile MeL22--Komplexe, so dass sich M wie folgt berechnet:

M =

[Me ]
2+

[Me ] + [MeL] + [MeL ]


2+

2
2

1 + K MeL L c L + K MeL K MeL 2 L c L

(51)

Berechnung der Suredissoziation


Der pH-Wert und die Konzentration des Komplexbildners in der mobilen Phase bestimmen die
Konzentration an Ligand und damit das Ausmass der Komplexierung der Analyten. Eine zweiprotonige
Sure dissoziiert in zwei Stufen:
H2L

HL- + H+

HL-

L2- + H+ mit K S 2 =

mit den Surekonstanten

mit K S1 =

[HL ][H ]

(52)

[H2L]

[L ][H ]
[HL ]
2

(53)

KS1 und KS2 . Die zur Berechnung des M-Wertes verwendeten

Molenbrche H 2 L , HL sowie L ergeben sich aus den Massenwirkungsgesetzen der einzelnen


Deprotonierungsschritte:

H2L =

[H2L] + [HL ] + [L2 ] [H+ ]2 + K S

[H ]
[H ] + K

[HL ]
=
[H L] + [HL ] + [L ] [H ]

[ ]
[H ] + K

[H2L]

+ 2

HL =

L =

3.5

+ 2

[L ]
=
[H L] + [HL ] + [L ] [H ]
2

+ 2

K S2

K S1 H +

S1

+ K S1

S1

K S2

K S1 K S2

[ ]

+ K S1 H + + K S1 K S2

(54)

(55)

(56)

Detektionssysteme in der Ionenchromatographie

Zur Detektion von Substanzen stehen im Bereich der HPLC eine Reihe von unterschiedlichen
Verfahren zur Verfgung, wobei die Wahl eines geeigneten Detektors im Hinblick auf die analytische
Fragestellung erfolgen muss. Die Anforderungen an einen Detektor lassen sich wie folgt
zusammenfassen:

khv

Hohe Messempfindlichkeit und kurze Ansprechzeiten


Proportionalitt des Messsignals zur Analytkonzentration (grosser linearer Bereich)
Geringe Vernderung der Basislinie (Drift)
Geringes Eigenrauschen
Mglichst kleines Eigenvolumen zur Verminderung der Bandenverbreiterung
26

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Allgemein werden selektive und nicht selektive Detektoren unterschieden. Whrend ein selektiver
Detektor direkt auf eine Eigenschaft des Analyten anspricht, reagieren unselektive Detektoren auf eine
durch den Analyten hervorgerufene nderung einer physikalischen Eigenschaft des gesamten
Elutionssystems. Da sich die Detektoren zur Verwendung mit der Ionenchromatographie im Prinzip
nicht von denen fr die konventionelle HPLC unterscheiden, werden die wichtigsten
Detektionssysteme in diesem Abschnitt zumindest angesprochen. Der universellste und
gebruchlichste Detektor in der IC ist der Leitfhigkeitsdetektor.
3.5.1

Elektrochemische Detektoren

Leitfhigkeitsdetektion
Die Leitfhigkeitsdetektion oder auch konduktometrische Detektion hat in der Ionenchromatographie
einen Anteil von etwa 55 % [4]. Aus Sicht der verkauften Ionenchromatographen drfte dieser Anteil
heute noch wesentlich hher liegen. Die Leitfhigkeitsdetektion ist ein unselektives Detektionsprinzip,
wobei auch in diesem Fall direkte und indirekte Bestimmungen mglich sind. Da in der
Ionenchromatographie wssrige Elektrolyte als Laufmittel verwendet werden, muss der Detektor auf
die relativ geringe, durch die Analyt-Ionen verursachte Vernderung der Gesamtleitfhigkeit des
Eluenten ansprechen.
Durch die Verwendung sogenannter Suppressionstechniken kann die
Eigenleitfhigkeit bestimmter Eluenten drastisch reduziert werden, wodurch im Falle der starken
Sureanionen eine deutliche Empfindlichkeitssteigerung erreicht wird.
Die Leitfhigkeit einer Lsung wird messtechnisch als Kehrwert des Widerstandes R bestimmt, den
eine Lsung zwischen zwei Elektroden der Flche A und des Abstandes L verursacht.
=L/AR

(57)

Die quivalentleitfhigkeit einer Lsung ermittelt sich zu:


=/c

(58)

Die Grenzleitfhigkeit und die Abhngigkeit der Leitfhigkeit von der Konzentration kann anhand
der Gleichung 59 ermittelt werden. Die Konstanten A und B sind empirische Stoffkonstanten.
= - (A + B )

(59)
-

Die Leitfhigkeit eines Elektrolyten setzt sich additiv aus den Ionenleitfhigkeiten Anion und Kation
zusammen
-

= c (Anion- + Kation+)

(60)

Abbildung 12 Aufbau einer Leitfhigkeitsmesszelle.


Nach dem Kohlrauschschen Gesetz gilt, dass die Leitfhigkeit einer verdnnten Lsung proportional
zur Summe der Leitfhigkeiten aller Ionen multipliziert mit deren Konzentrationen ist.
khv

27

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

ci

(61)

1000

wobei die Leitfhigkeit in S cm-1, die Grenzleitfhigkeit in S cm2 (z mol L-1)-1 und c die
Konzentration in z mol L-1 (z entspricht der Ladung des Ions) ist. Der Faktor 1000 resultiert daraus,
dass 1 Liter 1000 cm3 entspricht.
Die Leitfhigkeitsnderung durch den Analyten ist proportional zu dessen Konzentration im Effluat.

( S E ) c S

(62)

1000

wobei S und E fr die Analyt- bzw. Eluent-Ion steht. Da bei der Leitfhigkeitsdetektion die nderung
der Leitfhigkeit gemessen wird, treten in der Anionenchromatographie bei hohen Grundleitfhigkeiten
nur geringe Leitfhigkeitsnderungen auf. Es ist daher meist gnstig, die Grundleitfhigkeit mglichst
gering zu halten.

Abbildung 13 Verlauf der Leitfhigkeit des Eluates einer ionenchromatographischen Trennung eines
Mehrstoffgemisches. Gezeigt sind die Verlufe fr einen Eluenten mit hoher (rot) bzw. niedriger (blau)
Leitfhigkeit
Die Leitfhigkeit eines Eluates in der Ionenchromatographie kann entweder direkt oder nach
Durchlaufen eines Suppressors bestimmt werden. Diese Varianten werden auch als Ein- bzw.
Suppressortechnik bezeichnet. Welche der beiden Ausfhrungsformen zu bevorzugen ist, kann
anhand von berschlagsrechnungen ermittelt werden.
Verwendet man im Bereich der Anionenchromatographie die direkte Leitfhigkeitsdetektion, so erhlt
man fr Empfindlichkeit der Bestimmung Peak ausgedrckt als Differenz zwischen der Leitfhigkeit
von Analyt und Eluentanion fr den Fall Chlorid als Analyt und Carbonat als Eluent-Anion folgende
Gleichungen:
-

Peak cAnalyt (Cl- - CO


Peak

2- )
3

Peak cAnalyt (76 - 72)

cAnalyt 4

Wird der Eluent an die Bedrfnisse der direkten Leitfhigkeitsdetektion angepasst, so erhlt man fr
das obige Beispiel durch Ersatz des Carbonat-Eluenten durch einen Phthalat-Eluenten folgende
Empfindlichkeit:
-

Peak cAnalyt (Cl- - Phthalat2- )


Peak

khv

Peak cAnalyt (76 - 38)

cAnalyt 38

28

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Im Fall der chemischen Suppression der Leitfhigkeit des Eluenten ist die Empfindlichkeit des
Verfahrens nur noch durch die quivalentleitfhigkeit der zu detektierenden Substanz bestimmt. Im
Fall von Cl- gilt dann:
-

Peak cAnalyt (Cl- + H+ )


Peak

Peak cAnalyt (76 + 350)

cAnalyt 426

Aus obigen berschlagsrechnung folgt fr Anionen, dass die direkte Leitfhigkeitsdetektion um den
Faktor 10 unempfindlicher ist als die Leitfhigkeitsdetektion nach chemischer Suppression.
Fr die Kationenchromatographie ergibt sich analog die folgende berschlagsrechnung, wobei als
Analyt Na+ und als Eluent H+ eingesetzt wird. Im Fall der direkten Leitfhigkeitsdetektion (HCl/NaCl)
gilt
+

Peak cAnalyt ( Na+ - H+ )


Peak

Peak cAnalyt (50 350)

cAnalyt 300

Bei chemischer Suppression der Leitfhigkeit des H+-Ions durch Umsatz zu Wasser gilt:
+

Peak cAnalyt ( Na+ + OH-)


Peak

Peak cAnalyt (76 + 198)

cAnalyt 248

Damit ergibt sich fr die direkte Leitfhigkeitsdetektion von Kationen eine hhere Empfindlichkeit als
fr die Leitfhigkeitsdetektion nach chemischer Suppression.
Tabelle 2

quivalentleitfhigkeit einiger Ionen


Kationen
H+
Li+
Na+
K+
NH4+
Mg2+
Ca2+
Sr2+
Ba2+
Zn 2+
Hg 2+
Cu 2+
Pb 2+
Co 2+
1
/3 Fe3+
N(Et)4+

+ (S cm2 eq-1)
350
39
50
74
73
53
60
59
64
52
53
55
71
53
70
33

Anionen
OH
F
Cl
Br
I
NO2
NO3
HCO3
CO32
H2PO4
HPO42
1
/3 PO43
SO42
CN
SCN
Acetat
Phthalat
Propionat
Benzoat
Salicylat
Oxalat

(S cm2 eq-1)
198
54
76
78
77
72
71
45
72
33
57
69
80
82
66
41
38
36
32
30
74

Die Suppressoren fr die Ionenchromatographie knnen entweder als diskontinuierlich arbeitetende


Packed-Bed-Suppressoren gemss Abbildung 14 oder als kontinuierlich arbeitende Membransuppressoren ausgelegt sein. Der Packed-Bed-Suppressor in der von Metrohm verwendeten Revolverausfhrung, besitzt drei gleichartige Suppressoreinheiten, von denen jeweils eine Einheit als Suppressor
khv

29

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

dient, die zweite regeneriert und die dritte mit Wasser gesplt wird. Nach Ablauf einer Analyse wird
der Revolver um 120o gedreht und die zuvor gesplte Sule wird als Suppressor benutzt. Auf diese
Weise wird eine quasi-kontinuierliche Arbeitsweise ermglicht.
Eluat

H2SO4

Wasser

1 3

Waste

Abbildung 14
Arbeitsweise

Detektor

Waste

Schematischer Aufbau eines Packed-Bed-Suppressors fr eine quasi-kontinuierliche

Der in Abbildung 15 skizzierte Membransuppressor ermglicht eine kontinuierliche Arbeitsweise, ist


aber durch den Einsatz von Ionenaustauschermembranen anfllig gegenber Belegungen der
Membranoberflche, die dann eine reduzierte Suppressionskapazitt und schliesslich ein Versagen
des Suppressors zur Folge haben.
H2SO4
Detektor

Abfall
Eluat

IonenaustauschMembran

Abfall

H2SO4

Abbildung 15 Schematischer Aufbau eines kontinuierlich arbeitenden Membransuppressors


Amperometrische Detektion
Voltammetrische Detektoren knnen im Prinzip auf alle Verbindungen angewendet werden, die leicht
reduzierbare oder oxidierbare funktionelle Gruppen tragen. Der amperometrische Detektor ist die
wichtigste Variante. Bei ihm wird zwischen einer Arbeits- und einer Referenzelektrode eine bestimmte
Spannung angelegt. Passiert nun ein elektrochemisch aktiver Analyt die Messstrecke, dessen
Halbstufenpotential so liegt, dass bei der angelegten Spannung eine Reduktion oder Oxidation
abluft, fliesst ein Strom, der das Messsignal darstellt. Die Amperometrie ist sehr empfindlich, wobei
der Stoffumsatz nur etwa 10 % betrgt. Im Bereich der Ionenanalytik lassen sich neben einigen
Kationen (Fe3+, Co2+) vor allem Anionen wie Nitrit, Nitrat, Thiosulfat sowie Halogene und
Pseudohalogene bestimmen. Die wichtigsten Anwendungsflle liegen jedoch in der Analytik von
Zuckern mittels Anionenchromatographie und in der klinischen Analytik. Der coulometrische
Detektor liefert aufgrund einer anderen Arbeitsweise einen quantitativen Stoffumsatz, woraus
allerdings keine gesteigerte Empfindlichkeit resultiert.
Potentiometrische Detektion
Bei der potentiometrischen Detektion wird mit ionensensitiven Elektroden gearbeitet, die teilweise
eine sehr hohe Selektivitt besitzen. Die Sensoren mssen trotz ihrer notwendigen starken
Miniaturisierung zuverlssig arbeiten knnen, was in der Praxis immer noch Probleme bereitet. Daher
bleibt die Anwendung der potentiometrischen Detektion, insbesondere in der Ionenchromatographie,
bisher auf wenige Spezialflle beschrnkt.
khv

30

22/12/2000

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3.5.2

Spektroskopische Detektionen

Photometrische Detektion
Die photometrische oder UV/VIS-Detektion ist aufgrund ihres sehr grossen Anwendungsbereiches
in der HPLC die wichtigste Detektionsvariante, da nahezu alle organischer Molekle ber
chromophore Gruppen verfgen, die im UV- oder im VIS-Bereich zu absorbieren vermgen.
Voraussetzung ist, dass der verwendetet Eluent im betreffenden Wellenlngenbereich keine
Absorption zeigt. Bei einer direkten Detektion im Absorptionsmaximum eines Analyten ist die UV/VISDetektion praktisch selektiv. Substanzen, die im betrachteten Wellenlngenbereich nur eine geringe
oder gar keine Absorption zeigen, knnen indirekt bestimmt werden, indem man im
Absorptionsmaximum des Elutionssystems misst. Im Bereich der Analytik anorganischer Ionen spielt
die UV/VIS-Detektion eine geringere Rolle. Whrend von den einfachen Anionen nur Analyten wie
Nitrat, Bromid oder Iodid absorbieren, sind wichtige Analyten wie Fluorid, Sulfat oder Phosphat nur
indirekt zugnglich [4]. Viele Kationen absorbieren berhaupt nicht, aber insbesondere multivalente
und bergangsmetalle knnen in einer Nachsulenderivatisierung mit Chelatbildnern wie 4-(2Pyridylazo)-Resorcinol (PAR) oder Tiron umgesetzt werden, wodurch farbige Komplexe entstehen.
Redoxaktive Analyten wie Bromat und andere Oxohalogenid-Ionen knnen durch eine
Nachsulenreaktion mit einem elektrochemisch aktiven Indikator der UV/VIS-Detektion zugnglich
gemacht werden.
Fluoreszenzdetektion
Die Fluoreszenzdetektion ist sehr empfindlich und immer dann mglich, wenn Analyten zur
Fluoreszenz angeregt werden knnen, was vor allem bei organischen Verbindungen mit
ausgedehnten -Elektronensystemen der Fall ist. Typische Anwendungen liegen daher im Bereich der
medizinischen bzw. organischen Analytik. Im Zusammenhang mit der Ionenchromatographie wird die
Fluoreszenzdetektion in einigen Spezialfllen angewandt, da nur besondere Ionen wie Ce3+ direkt
zugnglich sind und nicht fluoreszierende Ionen erst nach einer Derivatisierung detektiert werden
knnen. Die Entwicklung von Elutionssystemen fr diese Detektionsmethode ist wegen ihrer starken
Anflligkeit gegen Strungen durch Verunreinigungen sehr schwierig. Weiterhin ist der lineare Bereich
des Verfahrens aufgrund von Selbstabsorptionseffekten mit oft weniger als 2 Grssenordnungen recht
gering.
Kopplungstechniken
Die sogenannten Kopplungstechniken stellen die Verbindung eines chromatographischen Systems
mit einer eigenstndigen Analysenmethode, zumeist spektrometrische Verfahren, dar [3]. Diese
Verfahren haben in den letzten Jahren deutlich an Bedeutung gewonnen. Whrend im Bereich der
Gaschromatographie Kopplungen mit der Massenspektrometrie (GC-MS) wohl etabliert sind, bereitet
die Kopplung der HPLC mit spektrometrischen Verfahren grssere technische Probleme. Fr die
klassische HPLC, also der Analytik von organischen Verbindungen, stehen heute Kopplungen mit der
Massenspektrometrie (LC-MS), der IR-Spektroskopie (LC-FTIR) und der Kernresonanzspektroskopie
(LC-NMR) zur Verfgung [3]. Fr die Ionenchromatographie (IC) finden insbesondere leistungsfhige
atomspektrometrische Detektoren Verwendung. Beispiele sind die Atomemission und die
Massenspektrometrie mit dem induktiv gekoppelten Plasma (IC-ICP-AES, MS), welche aufgrund ihrer
Elementspezifitt und Empfindlichkeit ausgezeichnete Leistungsdaten liefern. Daher werden solche
Kopplungen trotz der vergleichsweise hohen Anschaffungskosten im Bereich der Spezies- und
Ultraspurenanalytik von Elementen angewendet.
Refraktometrie
Die Differentialrefraktometrie ist eine weitere auf einem optischen Verfahren beruhende
Detektionsmethode. Dieser Detektor wird auch RI-Detektor genannt (engl. Refractive Index). Er ist
vllig unspezifisch und kann universell eingesetzt werden, da die Messgrsse eine vom Analyten
bewirkte nderung des Brechungsindex des reinen Eluenten ist. Allerdings resultiert daraus auch
aufgrund der starken Temperaturabhngigkeit des Brechungsindex eine grosse Anflligkeit gegenber
Strungen. Das Verfahren ist, absolute Temperaturkonstanz vorausgesetzt, ber drei
Grssenordnungen linear. Da einfache anorganische Ionen einen extrem niedrigen Brechungsindex
besitzen, knnen diese nur indirekt unter Verwendung eines mit stark brechenden Verbindungen
versetzten Eluenten bestimmt werden.

khv

31

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

3.6

Stationre Phasen in der Ionenchromatographie

Eine effiziente Ionenchromatographie verlangt Packungsmaterialien, die aus sehr kleinen, mglichst
sphrischen Teilchen mit enger Teilchengrssenverteilung bestehen. Verwendet werden
Partikeldurchmesser im Bereich von 2 bis 10 m. Weiterhin soll das Packungsmaterial eine mglichst
schnelle Kinetik des Ionenaustausches zeigen. Dies bestimmt neben der Teilchengrsse die
Leistungsfhigkeit von Ionenaustauschern.
3.6.1 bersicht gebruchlicher stationrer Phasen
Fr die Ionenchromatographie eignen sich die unterschiedlichsten Materialien anorganischer und
organischer Natur. Allen ist gemeinsam, dass sie an ihrer Oberflche funktionelle Gruppen tragen, die
Ionen auszutauschen vermgen. Folgende Stoffklassen knnen verwendet werden [4]:

Modifizierte organische Polymerharze


Modifizierte Silicagele
Anorganische Salze (z.B. Polyphosphate)
Glser
Zeolithe
Metalloxide (z.B. Al2O3)
Cellulosederivate

Daneben sind auch sehr komplex zusammengesetzte Systeme mglich, etwa Anionenaustauscher,
deren funktionelle Gruppen aus Alkalimetall-Ionen bestehen, die durch Kronenether an eine stationre
Phase gebunden sind. Die wichtigsten Vertreter in der Praxis basieren auf modifizierten organischen
Polymer-Harzen und Silicagelen. Abbildung 16 gibt eine bersicht ber die in der IC eingesetzten
Trennmaterialien:

Ionenaustauscher
Silicagele
polymerbeschichtet

Polymerharze
oberflchen funktionalisiert

makropors

mikropors

oberflchenfunktionalisierte Materialien
PS/DVBCopolymere

Agglomerierte Materialien

PS/MACopolymere

elektrostatische
Bindung

hydrophobe
Bindung

mechanische

Abbildung 16 Gebruchliche stationre Phasen in der Ionenchromatographie [4]


Alle stationren Phasen lassen sich je nach Anwendungsbereich (Anionen- oder
Kationenchromatographie) oder der Struktur der funktionellen Gruppe noch weiter differenzieren. Die
Packungsmaterialien auf der Basis von Silicagel wurden ursprnglich fr die Ionenchromatographie
verwendet. Sie besitzen zwar eine sehr gute Trennleistung und sind mechanisch extrem stabil,
knnen aber aufgrund ihrer chemischen Labilitt nur im pH-Bereich zwischen 2 und 7 eingesetzt
werden.
Etwa ab 1980 standen erstmals Ionenaustauscher auf Basis organischer Polymere zur Verfgung, die
in der Ionenchromatographie verwendet werden konnten und durch Modifikation handelsblicher
Adsorberharze hergestellt wurden. Heute werden blicherweise Packungsmaterialien eingesetzt, die
entweder auf Polystyrol-Divinylbenzol-Copolymeren (PS-DVB) oder Methacrylat-Polymeren (MMA)
beruhen.
Die beiden Grundtypen der Copolymere unterscheiden sich vor allem in ihrer Polaritt. Whrend die
PS-DVB-Copolymere vllig unpolar sind und RP-Phasen darstellen, sind die MMA-Polymere recht
khv

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

polar. Dieser Umstand ist in der IC von Vorteil, da polarere Trennphasen weniger zu sekundren
Wechselwirkungen wie Adsorption neigen.
Der grsste Vorteil der organischen Polymerharze liegt in ihrer grossen chemischen Stabilitt ber
den gesamten pH-Bereich. Ihre chromatographische Effizienz ist nach anfnglichen Problemen im
Bereich der Silicagele einzuordnen. Bei MMA-Phasen muss allerdings mit einer eingeschrnkten
mechanischen Stabilitt gerechnet werden, die die Lnge der zu verwendenden Trennsule oder die
maximal mgliche Flussrate des Eluenten begrenzt.
In der Ionenchromatographie werden heute zwei prinzipiell unterschiedlich aufgebaute Arten von
stationren Phasen verwendet, die oberflchenfunktionalisierten und die pellikularen
Ionenaustauscher. Bei den ersteren sind die funktionellen Gruppen direkt auf der Polymeroberflche
oder in den Poren lokalisiert, whrend bei den pellikularen Materialien sehr kleine, ebenfalls
oberflchenfunktionalisierte Partikel an grssere Kernteilchen gebunden sind [4]. Die Bindung kann
mechanisch oder durch hydrophobe bzw. elektrostatische Wechselwirkungen erfolgen. Abbildung 17
zeigt schematisch den Aufbau beider Typen von Packungsmaterialien am Beispiel von
Anionenaustauschern.
N+R3
N+R3
+

R3 N

R3+N

Polymerpartikel

R3+N

N R3

Bindungsmaterial

N+R3

R3+N

N+R3

Polymerpartikel

N+R3
+

N R3

a)

N+R3

R3+N

R3+N

b)

aminiertes
Latexparikel

N+R3
N+R3

Abbildung 17 Prinzipieller Aufbau von oberflchenfunktionalisierten (a) und pellikularen


Anionenaustauschern mit mechanischer Bindung (b)
Die pellikularen Packungsmaterialien besitzen eine hhere chromatographische Effizienz, da durch
die grssere Entfernung der funktionellen Gruppen vom Basismaterial die Diffusionswege sehr kurz
gehalten werden, woraus ein exzellenter Massentransfer resultiert. Die chemische Stabilitt dieser
Trennphasen ist aber deutlich geringer als die der oberflchenfunktionalisierten Materialien.

3.6.2

Stationre Phasen fr die Anionenchromatographie


Die eigentliche funktionelle Gruppe im Bereich der Anionenchromatographie wird blicherweise durch
die Umsetzung einer Ankergruppe mit einem geeigneten Amin erzeugt. Dadurch entstehen auf der
Polymeroberflche fixierte Ammonium-Ionen. Zur Trennung von Anionen mittels IC werden fast
ausschliesslich auf Stickstoff basierende funktionelle Gruppen verwendet. Dies ist vor allem in ihrer
ausserordentlichen chemischen Stabilitt und der fast unbegrenzten Zahl der mglichen Substituenten
am Stickstoffatom begrndet.
Die Generierung von Ammoniumgruppen auf Polymeroberflchen erfolgt durch Umsetzung einer
Ankergruppe mit einem Amin.
Die Alkylreste am positiv geladenen Stickstoff knnen in weiten Grenzen variiert werden. Im
einfachsten Fall ist R = H und es entsteht ein primres (1) Ammonium-Ion. Dieses kann aber bei
hheren pH-Werten deprotoniert werden und damit seine Ladung verlieren. Bei Packungsmaterialien
dieser Art ist die Austauschkapazitt vom pH-Wert des Eluenten abhngig, weshalb sie auch als
schwach basisch bezeichnet werden. Substituiert man nun sukzessive die Wasserstoffatome durch
Alkylgruppen, entstehen zunchst sekundre (2) und tertire (3) Ammoniumgruppen, die ebenfalls
noch deprotoniert werden knnen. Erst wenn alle Reste R aus Alkylgruppen bestehen, ist die
Kapazitt oder Ladung vom pH-Wert des Eluenten unabhngig und man erhlt stark basische,
quartre (4) Anionenaustauscher. Fr die Chromatographie strebt man blicherweise eine pHunabhngige Kapazitt an, so dass nur vollstndig alkylierte Materialien verwendet werden. Bei
khv

33

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

speziellen Anwendungen wie der Protein-Analytik oder Anreicherungstechniken kommen aber auch
schwach basische Materialien zum Einsatz.
Die beiden wichtigsten funktionellen Gruppen in der Anionenchromatographie leiten sich vom
Trimethylamin (TMA) und Dimethylethanolamin (2-Dimethylaminoethanol, DMEA) ab. Praktisch alle
kommerziell verfgbaren Trennmaterialien verwenden eine dieser Gruppen. TMA-Gruppen werden in
der Literatur auch als Typ I, DMEA-Gruppen als Typ II bezeichnet. Weitere Funktionalitten, die mit
den beiden erstgenannten in enger Beziehung stehen, sind in der Abbildung 18 gezeigt:

Abbildung 18 bersicht ber die wichtigen bzw. in Rahmen dieser Arbeit verwendeten funktionellen
Gruppen
TMA:
EDMA:
DMEA:

Trimethylamin (Typ I)
Ethyldimethylamin
Dimethylethanolamin (Typ II)

DEMA:
TEA:

Diethanolmethylamin
Triethanolamin

Bei kommerziellen Materialien, die sich ohnehin meist vom Typ I oder II ableiten, ist der genaue
Aufbau der funktionellen Gruppe ein gut gehtetes Geheimnis [4].
3.6.3 Stationre Phasen in der Kationenchromatographie
Im der Kationenchromatographie sind sowohl Materialien auf Basis Silicagel als auch auf Basis von
Polymeren im Gebrauch. Im Gegensatz zur Anionenchromatographie mit ihren meist alkalischen
Eluenten sind die Bedingungen der Kationenchromartographie auch fr Silicagele geeignet.
3.6.4

Kationenaustauscher auf Silicagelbasis

Bei Kationenaustauschern auf Silicagelbasis wird unterschieden zwischen direkt funktionalisierten


Materialien und solchen, die mit einem Polymer beschichtet sind.
Bei den direkt funktionalisierten Materialien wird praktisch nur von stark sauren Austauschern mit der
Sulfonsuregruppe berichtet [a2,a4]. Diese zeigen eine gute chromatographische Effizienz, sind aber
fr eine simultane Bestimmung von Alkali- und Erdalkalimetallen aufgrund der grossen
Affinittsunterschiede nicht geeignet.
Bei polymerbeschichteten Silicagelen, sog. Schomburg-Phasen, wird die Silikat-Oberflche mit einem
Prepolymer belegt, welches anschliessend durch Quervernetzung immobilisiert wird. Durch
nachtrgliche Funktionalisierung sind verschiedene Austauschertypen darstellbar. Zur Darstellung von
schwach sauren Kationenaustauschern wird Polybutadienmaleinsure (PBDMA) verwendet, die dann
in-situ radikalisch quervernetzt wird [30]. Aufgrund der dnnen Polymerschicht von etwa 1 bis 5 nm
[31] sind die Diffusionswege der Analyten kurz, dies fhrt zu einer hohen chromatographischen
Effizienz.
Es gibt eine grosse Anzahl von Applikationen fr die Ionenaustauscher auf Silicagelbasis vorhanden.
Die simultane Trennung von Alkali- und Erdalkalimetallen gehrt zu der hufigsten Anwendung, die
Trennung von bergangs- und Schwermetall-Ionen ist ebenfalls mglich. Der universellen Anwendung
der Ionenaustauscher auf Silicagelbasis stehen jedoch einige Nachteile entgegen:

khv

Bei pH-Werten <2 wird die Bindung zwischen Silizium-Grundgerst und funktioneller Gruppe
zunehmend geschwcht, was zu einer allmhlichen Auswaschung der Funktionalitten und
damit zu einem Kapazittsverlust fhrt.

Bei pH-Werten >7 nimmt die Lslichkeit des Silicagels deutlich zu, was die mechanische
Stabilitt der Packung herabsetzt, zu einem Brechen der Partikel fhrt und ein Totvolumen am
Sulenanfang verursacht.

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3.6.5

Kationenaustauscher auf Basis von organischen Polymeren

Es werden berwiegend Harze aus Styrol-Divinylbenzol-Copolymerisaten als Grundgerst verwendet.


Die fr Silicagel-Austauscher angefhrten Einschrnkungen bestehen hier nicht, sie sind ber den
gesamten pH-Bereich von 0-14 einsetzbar und auch inert gegenber Fluorid. Die Druckbestndigkeit
ist zwar geringer als bei den Silicagelen, aber ausser bei einigen Methacrylat-Harzen im allgemeinen
ausreichend.
Als funktionelle Gruppen werden in kommerziell erhltlichen Kationenaustauschern berwiegend
Sulfonsuregruppen verwendet. Diese knnen direkt oder ber einen Spacer variabler Lnge an das
aromatische System gebunden sein. Die Sulfonsureaustauscher mit Spacer zeigen eine deutlich
hhere chromatographische Effizienz, die Lnge des Spacers hat aber eher untergeordnete
Bedeutung. Fr die simultane Bestimmung von Alkali- und Erdalkalimetallen sind sie aufgrund der
grossen Affinittsunterschiede nicht geeignet.
3.6.6

Pellikulare Kationenaustauscher

Neben den direkt funktionalisierten Harzen gibt es noch pellikulare Austauscher. Sie haben einen
doppelten Schichtaufbau, da es nicht mglich ist, einen vollstndig aminierten Substratpartikel
darzustellen. Darum wird ein totalsulfonierter Substratpartikel erst mit einer Schicht aus aminierten
und dann mit einer Schicht aus sulfonierten Latexteilchen umgeben. Die Fixierung erfolgt ber
elektrostatische und van-der-Waals-Wechselwirkungen. Der relativ grosse Durchmesser des
Substratpartikels (10-30m) bewirkt einen vergleichsweise geringen Staudruck. Der kleine
Durchmesser (20-250 nm) der Latexteilchen ermglicht kurze Diffusionswege mit entsprechend
schnellen Austauschprozessen und damit eine hohe Effizienz der Trennsule. Nachteilig bei den
pellikularen Materialien ist ihre Empfindlichkeit gegenber organischen Lsungsmitteln [32] und
gegenber mobilen Phasen mit hoher Ionenstrke, da hier allmhlich die Latexteilchen verdrngt
werden.
Die simultane Bestimmung von Alkali- und Erdalkalimetallen ist mit einer abgewandelten Variante
mglich, hier ist die aminierte Schicht kovalent gebunden. Jedoch sind die Selektivittsunterschiede
zwischen Kalium, Magnesium und Calcium unntig gross, so das relativ lange Analysenzeiten bentigt
werden. Dies ist auf die verwendete, stark saure Sulfonsuregruppe zurckzufhren.
3.6.7 Stationre Phasen in der Ionenausschlusschromatographie
Die Auswahl stationrer Phasen fr die IEC ist recht begrenzt. Wichtig fr den Trennprozess ist die
Ausbildung der Donnan-Membran durch dissozierte funktionelle Gruppen. Deren Anzahl sollte recht
hoch sein. Weiterhin soll das Packungsmaterial eine Adsorption der Analyten auf der stationren
Phase mglichst vermeiden. Da sich die Analyten im wesentlichen aus den Gruppen der
Carbonsuren und Zucker gruppieren, ist hier eine mglichst polare Oberflche wnschenswert. An
die Kinetik der Ionenaustauschreaktion wird praktisch keine Anforderung gestellt, da die Trennung auf
einem Ausschlussmechanismus basiert. Eingesetzt werden praktisch ausschliesslich niedrig
quervernetze PS/DVB Polymere, die vollstndig sulfoniert werden.
3.6.8 Die Bedeutung der Kapazitt von Ionenaustauschern
Neben der Natur des Grundgerstes und der Art der funktionellen Gruppe ist die Austauschkapazitt
Q die entscheidende Grsse zur Charakterisierung von Ionenaustauschern. Durch sie lsst sich
angeben, wie viele Pltze fr einen Ionenaustausch zur Verfgung stehen.
Die Austauschkapazitt wird blicherweise pro Gramm trockenes Packungsmaterial angegeben,
entweder in Mikroequivalenten (eq/g) oder Mikromolen (Mol/g) [2]. Daneben sind auch eine Reihe
weiterer Angaben gebruchlich [33]. Fr analytische Zwecke lassen sich Ionenaustauscher grob nach
ihrer Kapazitt einstufen in:

niederkapazitive Materialien:
mittelkapazitive Materialien:
hochkapazitive Materialien:

Q < 100 Mol/g


100 < Q < 200 Mol/g
Q > 100 Mol/g

Die im klassischen Ionenaustausch verwendeten Trennphasen sind mit 3 bis 5 mMol/g durchweg
hochkapazitiver Natur [4].
Die obige Definition der Kapazitt beruht auf einer vollstndigen Gleichgewichtseinstellung zwischen
stationrer und mobiler Phase, weshalb sie auch als statische Kapazitt bezeichnet wird. Unter der
khv

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

dynamischen (effektiven) Kapazitt versteht man dagegen die Zahl der funktionellen Gruppen, die
tatschlich whrend eines chromatographischen Prozesses zur Verfgung steht. Sie wird immer
kleiner sein als die statische Kapazitt [2,4].
Die Austauschkapazitt lsst sich auf verschiedene Arten bestimmen [33]:

volumetrisch bzw. titrimetrisch


durch Elementaranalyse
ber die Bestimmung von Retentionszeiten

Alle Verfahren werden bei demselben Material unterschiedliche Werte fr Q liefern. In der Praxis
werden volumetrische Verfahren am hufigsten angewendet. Bei Anionenaustauschern wird dabei
eine gepackte Trennsule oder eine definierte Menge an Harz z.B. mit einer Chlorid-Lsung beladen.
Nach Auswaschen der Chlorid-Reste kann mit Nitrat eluiert werden. Die eluierte Menge an Chlorid,
welche der statischen Austauschkapazitt unter Gleichgewichtsbedingungen entspricht, wird dann mit
einer AgNO3-Lsung titriert und quantifiziert.
Die pH-Abhngigkeit von Anionenaustauschern ist meist zu vernachlssigen. Bei
Kationenaustauschern ist die Kapazitt der schwach sauren Carbonsure-Gruppen (R-COOH) nur bei
hheren pH-Werten gegeben (Deprotonierung), whrend die stark sauren Sulfonsure-Gruppen (RSO3H) stets vollstndig deprotoniert vorliegen und eine pH-unabhngige Kapazitt liefern.
Im Zusammenhang mit den Retentionsmodellen (Kapitel 3.4) ist die Bedeutung von Q fr die Auswahl
von Elutions- und Detektionssystemen deutlich geworden. Die universelle Leitfhigkeitsdetektion war
mit Eluenten hoher Ionenstrke praktisch nicht zu realisieren, gleichgltig welche speziellere Technik
angewendet wurde. Dies ist der Grund, warum seit Einfhrung der Ionenchromatographie 1975 fast
nur niederkapazitive Trennsulen verwendet werden. Hochkapazitive Ionenaustauscher sind in der IC
bisher nur in Verbindung mit Detektionstechniken beschrieben worden, die nicht so stark vom
Elutionssystem limitiert werden, wie etwa die UV/VIS-Detektion [2,4].
Whrend niederkapazitive Trennmaterialien recht gut zur Analytik von Proben geringer Ionenstrke,
also geringer Matrixbelastung, geeignet sind, erreichen sie bei hohen Ionenstrken schnell ihre
Grenzen. Aufgrund ihrer geringen Anzahl an funktionellen Gruppen kommt es zu berladungseffekten
und damit zur Peakdeformation und einem drastischen Einbruch der Effizienz. Auch treten Probleme
auf, wenn die Analyten in sehr unterschiedlichen Konzentrationsverhltnissen vorliegen, was im
Bereich der Ultraspurenanalytik nahezu immer der Fall ist.

3.7

Eluenten in der Ionenchromatographie

Wie bei allen flssigchromatographischen Trennungen stellt auch in der Ionenchromatographie die
mobile Phase denjenigen Parameter dar, der am leichtesten variiert werden kann, um eine Trennung
zu beeinflussen. Die Trennsule oder das Detektionssystem sind dagegen in den meisten Fllen
vorgegeben.
Die Auswahl eines geeigneten Elutionssystems kann anhand der verschiedensten Kriterien erfolgen.
Zu beachten sind fr die Anionenchromatographie unter anderem folgende Parameter [4]:

Kompatibilitt mit der Detektionsmethode


Chemische Natur und Konzentration des Eluent-Ions
pH-Wert
Pufferkapazitt
Gehalt an organischen Lsemitteln (Modifier)

In der gngigen Literatur [2,4,5] erfolgt die Diskussion der mobilen Phasen im wesentlichen unter dem
Aspekt, ob sie fr die sogenannte Einsulen- oder Suppressortechnik geeignet sind. Dies soll auch im
folgenden durchgefhrt werden, wobei der Schwerpunkt aber im Hinblick auf die Thematik dieser
Arbeit auf die Austauschkapazitt Q der Trennsulen gelegt wird. Zunchst erfolgt eine kurze
Erluterung der Begriffe Einsulentechnik und Suppressortechnik. Die Betrachtungen beschrnken sich wie in den vorausgehenden Kapiteln hauptschlich auf die Anionenchromatographie.

khv

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

3.7.1

Anionenchromatographie

Einsulentechnik
Bei der Einsulentechnik, welche durch Gjerde und Mitarbeiter 1979 in der Ionenchromatographie
etabliert wurde [33], ist der Ausgang einer Trennsule direkt mit einem Detektor verbunden, was dem
klassischen Aufbau einer HPLC-Apparatur entspricht. In Abgrenzung zur zweiten prinzipiellen Variante
der IC wird diese Technik auch als Nicht-Suppressierte-Ionenchromatographie bezeichnet. Der die
Trennsule verlassende Eluent und die darin enthaltenen Analyten werden chemisch nicht verndert.
Die Anzahl mglicher Elutionssysteme der unterschiedlichsten chemischen Natur ist praktisch
unbegrenzt. Zu bercksichtigen ist, vom eigentlichen Trennproblem abgesehen, lediglich die
Kompatibilitt des Eluenten mit dem Detektor. Wenn z.B. die direkte UV-Detektion angewendet
werden soll, darf der Eluent nicht im betreffenden Spektralbereich absorbieren. Bezglich der
Detektionsmethoden gibt es bei der Einsulentechnik keine Beschrnkungen, so dass im Prinzip alle
gngigen HPLC-Detektoren Verwendung finden knnen.
Fr niederkapazitive Anionenaustauscher (Q < 100 Mol/Trennsule) stehen fr die Einsulentechnik
eine ganze Reihe von Eluenten unterschiedlicher chemischer Natur zur Verfgung. Die Konzentration
der Eluenten liegt dabei blicherweise im unteren mMol/kg-Bereich oder noch darunter. Verwendet
werden knnen unter anderem die unten genannten Substanzklassen [4]. Daneben knnen in
spezielleren Fllen auch Komplexbildner wie EDTA oder Borat-Mannitol-Komplexe zum Einsatz
kommen.

Aromatische Carbonsuren
Aliphatische Carbonsuren
Sulfonsuren
Alkalihydroxide
Anorganische Suren wie H2SO4, HCl oder H3PO4

Die wichtigste Verbindungsklasse stellen die aromatischen Carbonsuren und ihre Salze dar. Die am
hufigsten verwendeten Vertreter sind in Abbildung 19 dargestellt.

Abbildung 19 Strukturen der wichtigsten aromatischen Carbonsuren zur Verwendung mit der
Einsulentechnik.
Diese Substanzklasse findet deshalb so starke Verwendung, da die Lsungen der Suren und deren
Salze eine sehr hohe Elutionskraft bei relativ geringer Eigenleitfhigkeit besitzen, so dass sie zur
direkten LF-Detektion eingesetzt werden knnen. Bei den mehrbasigen Suren kann die Ladung und
damit die Elutionskraft ber den pH-Wert gesteuert werden. Dieser muss allerdings sehr exakt
eingehalten werden. Aromatische Carbonsuren besitzen eine hohe Absorption im UV-Bereich, so
dass sie auch vorteilhaft mit der indirekten UV/VIS-Detektion angewendet werden knnen.
Fr aromatische Sulfonsuren wie p-Toluolsulfonsure gelten im Prinzip die gleichen Aussagen,
wobei diese aber immer deprotoniert vorliegen und daher keine Pufferkapazitt besitzen. Ihre
Elutionskraft lsst sich nur ber die Konzentration steuern.
Aliphatische Carbonsuren wie Oxalsure und Citronensure zeigen hohe Eigenleitfhigkeiten, sind
aber UV-transparent, so dass sie mit der direkten UV/VIS-Detektion eingesetzt werden. Dies gilt
ebenso fr aliphatische Sulfonsuren, von denen Methansulfonsure am hufigsten verwendet wird.
Die hheren Homologen beider Verbindungsklassen bieten aufgrund ihrer langen
Kohlenwasserstoffketten und der damit verbundenen geringen Equivalentleitfhigkeiten die
Mglichkeit der Anwendung der direkten LF-Detektion [2,4].
Alkalihydroxide lassen sich nur sehr begrenzt in der Einsulentechnik einsetzen, da das OH-Ion von
allen mglichen Eluent-Anionen die geringste Affinitt zu quartren Ammonium-Gruppen besitzt.
khv

37

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Daher sind selbst bei niedrigen Kapazitten hohe Eluentkonzentrationen notwendig, so dass allenfalls
die indirekte LF-Detektion verwendet werden kann. Gut mglich ist dagegen die direkte UV/VISDetektion, wobei aber auch das eigentlich UV-transparente Hydroxid-Ion bei hheren Konzentrationen
eine deutliche Absorption unterhalb 220 nm zeigt.
Bei Verwendung von anorganischen Suren oder deren Salzen ist man aufgrund ihrer nahezu
vollstndigen Dissoziation und damit hohen Leitfhigkeit auf photometrische Detektoren angewiesen.
Beim Einsatz von Phosphorsure oder Phosphaten lsst sich aber die Pufferkapazitt und die
Elutionskraft ber den pH-Wert des Eluenten steuern.
Die meisten der hier genannten Eluenten lassen auch andere Detektionssysteme wie Amperometrie,
Fluorimetrie oder Kopplungstechniken zu. Zur Verwendung der genannten Elutionssysteme mit diesen
Detektoren sei aber an dieser Stelle auf die einschlgige Literatur verwiesen [2,4,5].
Suppressortechnik
Die Suppressortechnik ist die bei der Einfhrung der IC ursprnglich verwendete Detektionstechnik
[1]. Im Gegensatz zur Einsulentechnik verwendet diese Methode ausschliesslich die
Leitfhigkeitsdetektion (LF-Detektion). Bei der Suppressortechnik wird zwischen Trennsule und
Detektor ein sogenannter Suppressor geschaltet, weshalb diese auch als SuppressierteIonenchromatographie bezeichnet wird [2,4]. Im Suppressor werden sowohl der Eluent als auch die
Analyten chemisch modifiziert, was im Hinblick auf die nachfolgende Leitfhigkeitsdetektion von
besonderer Bedeutung ist. Der Suppressor hat die Aufgabe, die Eigenleitfhigkeit des Eluenten zu
reduzieren und, wenn mglich, die Detektierbarkeit der Analyten zu erhhen.
Das Prinzip der chemischen Suppression ist in den Gleichungen 63 und 64 fr einen Anwendungsfall
aus der Anionenchromatographie dargestellt. Verwendet wird ein NaHCO3-Eluent, als Analyt fungiert
das Chlorid-Ion. Die Suppression erfolgt mit einem stark sauren Kationenaustauscher in der H+-Form.
R-SO3-H+ + Na+ + HCO3R-SO3-H+ + Na+ + Cl-

R-SO3-Na+ + H2O + CO2


R-SO3-Na+ + H+ + Cl-

(63)
(64)

Die Suppressoreinheit besteht im einfachsten Fall aus einer der Trennsule nachgeschalteten Sule,
woraus sich der alte Begriff Zweisulentechnik erklrt. Der Eluent Natriumbicarbonat wird gemss
Gleichung 63 neutralisiert, da die Natrium-Ionen durch Protonen ersetzt werden. Dadurch wird die
Eigenleitfhigkeit des Eluenten drastisch herabgesetzt. Der Analyt Cl- wird selbst nicht verndert
(Gleichung 64), allerdings wird sein Gegen-Ion Na+ durch H+ ausgetauscht, welches eine deutlich
grssere Equivalentleitfhigkeit besitzt [19]. Da der Detektor die Summe der Leitfhigkeiten von
Analyt- und Gegen-Ion als Signal registriert, ergibt sich also aus beiden ablaufenden Reaktionen ein
deutlicher Empfindlichkeitsgewinn.
Die ursprnglich als Suppressoren verwendeten Sulen mit Kationenaustauschern in der H+-Form
tragen deutlich zur Bandenverbreiterung bei. Ausserdem knnen sie nur diskontinuierlich betrieben
werden, da der Kationenaustauscher regeneriert werden muss. Deshalb werden heute berwiegend
kontinuierlich arbeitende Membransuppressoren verwendet, bei denen der Regenerant,
normalerweise verdnnte Schwefelsure, und der Eluent im Gegenstromprinzip aneinander vorbei
gefhrt werden [6].
Die Suppressortechnik hat trotz ihrer Vorzge aber auch einige entscheidende Nachteile. In der Praxis
lassen sich in der Anionenchromatographie nur solche Eluenten erfolgreich suppressieren, die auf
Alkalihydroxiden oder -carbonaten basieren. Anionen schwacher Suren, z.B. Acetat oder Fluorid,
liegen nach der Suppressionsreaktion praktisch vollstndig protoniert vor, so dass ihre
Detektierbarkeit im Vergleich zur Einsulentechnik wesentlich geringer ist. Hherwertige Kationen
mssen vor der Analyse entfernt werden, da sie schwer lsliche Hydroxide bilden, die auf der
Trennsule ausfallen und zur Verstopfung fhren knnen.
Wie bereits deutlich wurde, ist die Suppressortechnik gleichbedeutend mit der chemischen
Suppression des Eluenten und der Anwendung der direkten LF-Detektion [2,4]. Diese Technik ist in
der Anionenchromatographie ausserordentlich weit verbreitet, vor allem weil sie in vielen Fllen
empfindlicher als die direkte LF-Detektion in der Einsulentechnik ist. Die Eigenleitfhigkeit von
klassischen Eluenten (z.B. 2 mMol/kg Phthalat, pH = 8) in der Einsulentechnik liegt bei etwa 200
S/cm. Bei suppressierbaren Eluenten ist sie mindestens um eine Grssenordnung niedriger.
khv

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Die chemische Unterdrckung der Eigenleitfhigkeit ist nur bei sehr wenigen Eluenten mglich. Dies
sind Lsungen von [4]:

Alkalihydroxiden
Alkalicarbonaten und -hydrogencarbonaten
Boraten (z.B. B4O72)
Aminosuren

In der Praxis haben von den genannten Eluenten aber nur die Alkalihydroxide und die Carbonat-Puffer
eine grssere Bedeutung, womit die Auswahl an potentiellen mobilen Phasen sehr beschrnkt ist.
Das Hydroxid-Ion ist ein extrem schwaches Eluent-Ion, so dass auch bei niederkapazitiven
Trennmaterialien bereits mit hohen Konzentrationen oberhalb von 50 mMol/kg gearbeitet werden
muss. Bei Anwendung sehr polarer funktioneller Gruppen kann die relative Retentionskraft des OHIons unter Ausnutzung der Hydroxid-Selektivitt deutlich erhht werden. Bei OH-Eluenten ist eine
Manipulation von Retentionszeiten oder Selektivitten nur ber die Konzentration mglich.
Der Einsatz von Alkalicarbonaten und- Alkaliydrogencarbonaten ermglicht wesentlich flexiblerer
Elutionssysteme. Beide Spezies, HCO3 und CO32, liegen nach der Suppression als Kohlensure
H2CO3 vor, die nur zu einem sehr geringen Anteil dissoziiert ist. Hydrogencarbonat ist in seiner
Elutionskraft nur geringfgig strker als Hydroxid, whrend Carbonat einen relativ starken Eluenten
darstellt. Beide Anionen werden blicherweise zusammen verwendet, was zu einem Eluenten mit
Pufferwirkung fhrt, dessen Elutionskraft sehr leicht ber die Konzentrationen der beiden
Komponenten und deren Konzentrationsverhltnis gesteuert werden kann. Aufgrund der Ladungen
der Eluent-Spezies lassen sich die Selektivitten fr mono- und multivalente Analyten sehr gezielt
beeinflussen. Das Konzentrationsverhltnis beider Eluent-Ionen lsst sich zudem sehr genau ber den
pH-Wert einstellen, weshalb der sinnvolle pH-Bereich fr HCO3/CO32-Eluenten zwischen 8 und 11
liegt. Wie auch bei den OH--Eluenten kann die Elution durch Verwendung stationrer Phasen mit
polaren funktionellen Gruppen beschleunigt werden.
Beide Elutionssysteme lassen sich bei oberflchenfunktionalisierten Anionenaustauschern mit Erfolg
nur dann anwenden, wenn entweder das Grundgerst (Methacrylat-Copolymere) oder aber die
funktionellen Gruppen eine hohe Polaritt besitzen. Bei auf PS-DVB basierenden Trennsulen werden
fr weiche Analyten (Nitrat, Bromid) auch bei Anwendung polarer Funktionalitten sehr schlechte
Peaksymmetrien und lange Retentionszeiten beobachtet. Bei pellikularen Materialien treten diese
Effekte nicht so stark hervor, was ihre ausserordentlich grosse Verbreitung in der Suppressortechnik
erklrt [2,4].

3.8
3.8.1

Kationenchromatographie
Kationenchromatographie von Alkali-, Erdalkali- und Ammonium-Ionen mit Leitfhigkeitsdetektion

Fr die ionenchromatographische Trennung von Alkalimetall- und Ammonium-Ionen sowie


kurzkettigen aliphatischen Aminen auf sulfonierten Trennphasen verwendet man vorwiegend
Mineralsuren wie HCl oder HNO3 als Eluent [4]. Die Surekonzentration des Eluenten richtet sich
dabei nach Art und Kapazitt des eingesetzten Kationenaustauschers und liegt bei einigen mMol/l.
Divalente Kationen wie die Erdalkalimetalle knnen mit Mineralsuren nicht eluiert werden, da sie eine
deutlich hhere Affinitt zur stationren Phase aufweisen und eine drastische Erhhung der
Surekonzentration die Detektion zu unempfindlich machen wrde, bzw. die Suppression nicht mehr
gewhrleistet wre. Alternativ knnen zur Trennung der Erdalkalimetall-Ionen auch organische Basen
wie das Ethylendiamin verwendet werden. Dies liegt bei niedrigen pH-Werten protoniert als
zweiwertiges Kationen vor.
Die simultane Analyse von Alkali- und Erdalkalimetall-Kationen an stark sauren Kationenaustauschern
erfolgt hauptschlich mit Eluenten, die Salzsure und 2,3-Diaminopropionsure enthalten [2]. Durch
Variation des pH-Wertes ist es mglich, den Protonierungsgrad der Amino-Gruppen und damit die
Elutionskraft der 2,3-Diaminopropionsure zu verndern (siehe Kapitel: Retentionsmodell fr Eluenten
mit einem Kation).
In ionenchromatographischen Systemen ohne Suppression knnen neben den Mineralsuren
schwache organische Suren als Eluenten eingesetzt werden. Anwendung finden z.B. Oxalsure,
Citronensure, Weinsure. Komplexbildner wie 2,6-Pyridindicarbonsure (PDCA) und 18-Krone-6, um
die Analysenzeiten einzelner Kationen selektiv zu beeinflussen.
khv

39

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Bei der Durchfhrung der Leitfhigkeitsdetektion unterscheidet man zwei Arten. Ist die Grundleitfhigkeit des Eluenten hoch, z. B. bei verdnnten Mineralsuren aufgrund der hohen Leitfhigkeit der H+Ionen, bietet sich die Mglichkeit der direkten Leitfhigkeitsdetektion an, wobei die Analyten eine
deutlich geringere Leitfhigkeit als der Eluent aufweisen. Es werden daher negative Peaks erzeugt,
die aber durch Umpolung des Detektors oder durch eine einfache Invertierung in bliche Chromatogramme verwandelt werden knnen. Lsst die Qualitt des Leitfhigkeitsdetektors die empfindliche
Leitfhigkeitsmessung auf hohem Niveau nicht zu, so wird auch in der Kationenchromatographie mit
Suppression gearbeitet. Die Konstruktion von Supressoren fr die Kationenchromatographie ist weitaus schwieriger als in der Anionenchromatographie und auch ihre Lebensdauer ist deutlich geringer.
3.8.2

Kationenchromatographie von bergangs- und Erdalkalimetall-Ionen mit Nachsulenderivatisierung und photometrischer Detektion

Fr die Trennung von bergangs- und Schwermetall-Ionen sind monovalente Kationen wie H+ oder
Na+ als Eluent ungeeignet, da sich die Selektivittskoeffizienten der Analyten bei gleicher Ladungszahl
kaum unterscheiden. Die Trennung lsst sich jedoch durch Einfhrung eines Sekundrgleichgewichts
realisieren. Hierzu werden als Eluent komplexierende Carbonsuren (siehe Abbildung 20) wie Citronensure, Oxalsure und Weinsure eingesetzt. Diese bilden mit den Metall-Ionen neutrale oder anionische Komplexe (siehe Kapitel Retentionsmodelle in der Ionenchromatographie).

OH

OH O
HO

O
OH

HO

OH

OH
O

HO

OH
O

Oxalsure

Weinsure

O
OH O

Citronensure

Abbildung 20 Verschiedene Carbonsuren als Eluenten in der Kationenchromatographie.


Durch die Komplexierung der Metall-Kationen wird die effektive Ladungsdichte der Analyten verringert.
Zudem erhht man durch die unterschiedlichen Komplexbildungskonstanten fr die einzelnen MetallIonen die Selektivitt der Trennung. Der Elutionsmechanismus resultiert aus der gleichionischen
Verdrngung durch das Gegenion (pushing-Effekt) und aus der Komplexbildung (pulling-Effekt)
durch den komplexierenden Liganden [4].
In Abbildung 21 werden die am Elutionsmechanismus beteiligten Gleichgewichte zwischen dem
Analyten M2+, dem Komplexbildner L2- und den Gegenionen E+ schematisch dargestellt.

Me L
"pulling"-Effekt des Komplexbildners

2-

L +2H

H2L

+
2+
Me
-

SO3

2E
-

SO3

"pushing"-Effekt des Gegenions

Abbildung 21 Schematische Darstellung der am Austauschprozess beteiligten Gleichgewichte [4].


Das Ausmass der gleichionischen Verdrngung durch die Gegenionen E+ wird durch die Affinitt des
Kations zur stationren Phase bestimmt. Bei monovalenten Gegenionen wirkt das Kation mit der
grsseren Affinitt zur stationren Phase strker eluierend. Den Einfluss des Komplexbildners kann
khv

40

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

man durch pH-Wert und Konzentration des Eluenten variieren. Zudem kann man das
Elutionsvermgen durch den Einsatz mehrerer Komplexbildner sowie durch Verwendung eines
zweiwertigen Kations als Gegenion beeinflussen.
Whrend fr die Detektion von Alkali- und Erdalkalimetallen beide Anwendungsformen der
Leitfhigkeitsdetektion geeignet sind, kann man bergangs- und Schwermetall-Ionen nur durch
direkte Leitfhigkeitsmessung ohne Suppressor bestimmen. Bei der Anwendung der SuppressorTechnik werden diese Metalle durch die Suppressorreaktion in meist unlsliche Hydroxide berfhrt.
Die direkte Leitfhigkeitsdetektion ist nur mglich, wenn man beim Einsatz von niedrigkapazitiven
Kationenaustauschern Eluenten mit geringer Grundleitfhigkeit verwendet.
Zur Detektion von bergangs- und Schwermetall-Ionen wird daher hauptschlich die
Nachsulenderivatisierung zu photometrisch detektierbaren Metall-Komplexen eingesetzt. Dabei wird
dem Effluat nach der analytischen Trennsule in einem Nachreaktor ein metallochromes Reagenz
beigemischt, das sich mit den Analyten zu farbigen Metall-Komplexen umsetzt, die photometrisch
detektiert werden. Als Farbreagenz lassen sich eine Vielzahl von Azofarbstoffen einsetzen [2,4], die
mit einer grossen Anzahl an Metall-Kationen reagieren. bergangsmetalle und die Lanthanide
reagieren mit 4-(2-Pyridylazo)resorcinol (PAR) (Abbildung 22) zu farbigen Komplexen. Lanthanide und
Actinide lassen sich mit 2,7-bis(2-Arsenophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalin-3,6-disulfonsure
(Arsenazo III) detektieren. Brenzkatechin-3,5-disulfonsure (Tiron) ist zur Nachsulenderivatisierung
von Aluminium geeignet.

HO
N N

OH

N
4-(2-Pyridylazo)resorcin (PAR)
Abbildung 22 Struktur des Metallindikators PAR
Zur Detektion der bergangs- und Schwermetall-Ionen wird hauptschlich PAR verwendet. PAR bildet
mit Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Mn, Pb und Cd farbige Komplexe, die bei Wellenlngen von 490 bis 520 nm
mit Absorptionskoeffizienten bis zu 104 l mol-1 cm-1 absorbieren und photometrisch detektiert werden
knnen. Die Empfindlichkeit des Verfahrens beruht darauf, dass die Extinktionskoeffizienten der
Metall-PAR-Komplexe gross sind gegenber dem Absorptionskoeffizienten des Reagenzes bei der
verwendeten Wellenlnge.
3.8.3

Ionenausschlusschromatographie

Die Auswahl des Elutionsmittels in der IEC ist wie die Wahl des Packungsmaterials wenig aufregend.
Angefangen von reinem Wasser bis hin zu verdnnten Mineralsuren reicht die Palette. Fr die
Auswahl des jeweils am besten geeigneten Systems muss die Detektion beachtet werden. Die
hufigsten Detektionen sind die photometrische und die Leitfhigkeitsdetektion. Im Fall der
Photometrie wird hufig verdnnte Schwefel- oder Perchlorsure aufgrund ihrer absoluten UVTransparenz eingesetzt. Soll die Leitfhigkeitsdetektion verwendet werden, so findet meist verdnnte
Salzsure in Verbindung mit einem Kationenchromatographie-Suppressor Anwendung.
Die Konzentration der Sure bestimmt die Dissoziation der Analyten und damit auch deren Retention.
Allgemein verringert sich die Retention mit steigender Surekonzentration. Die Peakform wird ebenso
von der Surekonzentration beeinflusst. Fr organische Suren ist reines Wasser aufgrund einer
steigenden Adsorption meist nicht geeignet, fr Carbonat und Borsure liefert es dagegen
hervorragende Resultate.

khv

41

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Praktischer Teil

Im praktischen Teil des Lehrbuches werden Versuche vorgestellt, die einen ausfhrlichen Streifzug
durch die Welt der Ionenchromatographie ermglichen. Begonnen wird mit den Versuchen zur Theorie
der Ionenchromatographie (Seite 45), es geht weiter im zweiten Teil auf Seite 71 mit der Analyse von
Anionen und im dritten und letzten Teil ab Seite115 werden organische und anorganische Kationen
analysiert.
Die Versuche knnen prinzipiell auf jedem Ionenchromatographen durchgefhrt werden. Einige
Anforderungen an die Ausstattung des Gertes sollten trotzdem erfllt sein:

pulsationsarme Doppelkolbenpumpe, die mglichst ohne externe Stickstoff-/oder Heliumversorgung auskommt


Flussregelung entsprechend den Sulenanforderungen
elektrisches Injektionsventil
Anschlussmglichkeiten fr verschiedene Probenschleifen und Anreicherungssulen
elektronische Suppression fr Anionen und Kationen
chemische Suppression fr Anionen
temperaturstabilisierter Leitfhigkeitsdetektor, mglichst besser 0.01 C
thermisch und elektronisch abgeschirmtes Gehuse
Anionen- und Kationenbetrieb
PC-Kontrolle ist empfehlenswert

Alle aus dem Hause Metrohm stammenden kompakten oder modularen C-Systeme erfllen
selbstverstndlich diese Anforderungen. Der Basic IC 792 ist allerdings speziell fr Ausbildung und
Lehre konzipiert und deshalb fr die nachfolgenden Versuch besonders zu empfehlen.

Abbildung 23 Der Metrohm Basic IC 792: speziell fr Forschung und Lehre entwickelt

4.1

Hinweise zum praktischen Arbeiten

Bakterielles Wachstum
Um bakterielles Wachstum zu verhindern sollten Eluenten, Spl- und Regenerationslsungen immer
frisch angesetzt und nicht nach lngerer Zeit wiederverwendet werden. Sollten sich trotzdem
Bakterien oder Algen bilden, kann dem Eluenten 5 % Methanol oder Aceton zugesetzt werden. Dies
ist bei der Verwendung von Membransuppressoren nicht mglich, da diese durch organische
Lsungsmittel zerstrt werden knnen. Das Metrohm Suppressor Modul MSM aber ist 100 %
lsungsmittelbestndig.

Chemikalienqualitt
Smtliche Chemikalien sollten mindestens die Qualitt p.a. oder puriss. besitzen. Die Standards
mssen speziell fr die Ionenchromatographie geeignet sein.

khv

42

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Entgasen des Eluenten


Um Blasenbildung zu verhindern, wird empfohlen, das fr die Eluentenherstellung verwendete Wasser
vor Zugabe der Chemikalien zu entgasen. Hierfr wird fr circa 10 Minuten ein Wasserstrahl- oder
lpumpenvakuum oder ein Ultraschallbad verwendet

Kationenanalysen
Bei allen durchgefhrten Analysen mssen die Proben mit Salpetersure (circa 100 L einer 2 mol/L
HNO3 auf 100 mL Probe) angesuert werden (pH 2.5 3.5), da ansonsten fr die zweiwertigen
Kationen keine reproduizierbaren Resultate erhalten werden.

Lagerung der Trennsulen

METROSEP IC Anionensule Anion Dual 1 (6.1006.020)

Die Sulenkartusche wird kurzfristig (Tage) im verschlossenen Halter gelagert. Bei langfristiger
Lagerung (Wochen) wird die Sule im mitgelieferten Aufbewahrungsgefss in Aceton/Wasser (1:9) im
Dunkeln gelagert.

Abbildung 24 METROSEP IC Anionensule Anion Dual 1 (6.1006.020) mit Sulenhalter

METROSEP IC Anionensule A SUPP 5 (6.1006.530)

Die Sule wird im Eluenten gelagert.

METROSEP IC Kationensule C2 (6.1010.210)

Die Sule wird im Eluent im Khlschrank (4 C) gelagert. Es ist unbedingt darauf zu achten, dass die
Sule nicht austrocknet.

Abbildung 25 METROSEP IC Kationensule C2 (6.1010.210

khv

43

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

METROSEP IC Kationensule Nucleosil S5A (6.1007.000)

Die Sule wird kurzfristig (Tage) im Eluenten gelagert, langfristig (Wochen) in Methanol/Wasser (1:4).

METROSEP Organic Acids (6.1005.200)

Die Sule wird fr kurze Zeit (Tage) im Eluenten und fr lngere Zeit (Wochen) in aq. demin gelagert.

Trennsulen anderer Hersteller

Bitte beachten Sie die Angaben der Hersteller.

Sulenauswahl
Die meisten der vorgestellten Versuche, werden auf sehr kostengnstigen Sulen ausgefhrt
METROSEP Dual 1 fr die Anionen und METROSEP C2 fr die Kationen. Diese Sulen liefern eine
ausreichend gute Trennung fr alle beschriebenen Experimente. Selbstverstndlich gibt es aus der
METROSEP-Produktlinie Trennsulen, die wesentlich leistungsfhiger, deshalb aber auch teurer sind.

Sicherheitshinweise
Bei der Durchfhrung aller Versuche sind Schutzbrille, Schutzkittel und ggf. Schutzhandschuhe zu
tragen. Die Sicherheitshinweise fr die Chemikalien (R/S-Stze) sind unbedingt zu beachten.

Stillegen des Gertes


Wird ber lngere Zeit (> 1 Woche) mit dem Ionenchromatographen nicht gearbeitet, so sollte die
Trennsule ausgebaut und der Ionenchromatograph mit Methanol/Wasser (1:4) gesplt werden. Dabei
ist darauf zu achten, dass auch alle drei Kammern des Suppressors gesplt sind.

Umweltschutz
Ein grosser Vorteil der Ionenchromatographie ist, das meistens mit wssrigen Medien gearbeitet wird.
Die in der Ionenchromatographie verwendeten Chemikalien sind deshalb weitestgehend ungiftig und
belasten die Umwelt nicht. Trotzdem muss darauf geachtet werden, wenn mit Suren, Basen,
organischen Lsungsmitteln oder Schwermetallstandards gearbeitet wird, dass diese nach Gebrauch
ordnungsgemss entsorgt werden.

Wasserqualitt
In der Ionenchromatographie wird vorwiegend mit wssrigen Medien gearbeitet. Die Wasserqualitt ist
deshalb ganz entscheidend fr eine gute Chromatographie. Ist die Qualitt ungengend, so sind es
die Ergebnisse definitiv auch. Zustzlich besteht die Gefahr, Gerte und Trennsulen zu beschdigen.
Das verwendete demineralisierte Wasser aq. demin. sollte deshalb eine Widerstand grsser 18 M
aufweisen und partikelfrei sein. Es ist deshalb zu empfehlen, das Wasser ber einen 0.45 m Filter zu
filtrieren.

khv

44

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2
4.2.1

Versuche zur Theorie der Ionenchromatographie


Versuch 1 Ionenchromatographie mit und ohne chemische Suppression

Die quivalentleitfhigkeit setzt sich immer additiv aus den quivalentleitfhigkeiten aller Anionen
und Kationen + in der Lsung zusammen:
= + +
Generell gilt, dass die Leitfhigkeit mit der Elektrolyt- bzw. Ionenkonzentration steigt. Ein linearer
Zusammenhang ergibt sich nur fr verdnnte Lsungen, da konzentrationsabhngig ist
(Kohlrausches Gesetz). Die tabellierten Werte (vergl. Kapitel Leitfhigkeitsdetektion) gelten fr
quivalentleitfhigkeit in unendlich verdnnten Lsungen.
Die Grsse der quivalentleitfhigkeit ist stark temperaturabhngig ( 2 % / C). Vor allem bei
Messungen ohne chemische Suppression, das heisst auf einem hohen Hintergrund, machen sich
Fehler aus einer Temperaturnderung besonders stark bemerkbar. Die Temperaturschwankungen
sollten deshalb unbedingt kleiner 0.01 C sein.
In der Ionenchromatographie ohne chemische Suppression, bei der die Hintergrundleitfhigleit nur
elektronisch unterdrckt wird, sollten die Eluenten eine mglichst geringe Leitfhigkeit aufweisen.
Hierfr kommen die Salze schwacher Suren wie der Phthalsure, Salicylsure und Benzoesure in
Frage. Der ohne Suppression bestimmte Messwert ist von Differenz der quivalentleitfhigkeiten
zwischen Probeion und Eluentuion abhngig.
~ (P E)
Negative Peaks treten immer dann auf, wenn die Leitfhigkeit des Probeions niedriger als die des
Eluentions ist. Ein Beispiel dafr ist das Phosphatanion. Bei einem pH = 5 liegt es berwiegend als
H2PO4 vor. Da die quivalentleitfhigkeit des H2PO4 mit 33 S*cm2/mol niedriger ist als die
quivalentleitfhigkeit des Phthalats mit 38 S*cm2/mol ist, erhlt man einen kleinen, negativen
Peak. Abhilfe schafft ein hherer pH-Wert, bei dem das Phosphat als HPO42 vorliegt, dessen
quivalentleitfhigkeit 57 S*cm2/mol betrgt
Ionenchromatographie mit chemischer Suppression bedeutet, dass die Hintergrundleitfhigkeit
chemisch herabgesetzt wird. Ein Eluent mit hoher Leitfhigkeit wird in einer Nachsulenreaktion der
Suppressionsreaktion zu einem Eluenten mit geringer Leitfhigkeit umgesetzt.
In der Anionenanalytik werden hierfr im Eluenten die Salze schwacher Suren eingesetzt z. B.
HCO3, CO32 und BO33. Im Suppressor werden alle Kationen im Eluenten und in der Probe gegen H+
ausgetauscht. Gemss nachfolgender Reaktion entstehen aus dem Eluenten schwach dissoziierte
Suren:
Na+ + HCO3-

+H Na

H2CO3

Die entstehende Kohlensure liegt berwiegend als CO2 + H2O vor. Daher ist die Restleitfhigkeit
sehr gering. Da auch die Gegenionen der zu bestimmenden Anionen im Suppressor gegen H+
ausgetauscht werden lsst sich folgende Gleichung formulieren:
Na+ + Cl-

+H Na

H+ + Cl-

Statt des ursprnglich in der Probe vorhandenen Na+ und Cl wird nun die wesentlich hhere
quivalentleitfhigkeit von H+ und Cl gemessen und dies zustzlich noch auf einer geringen
Hintergrundleitfhigkeit. Theoretisch lsst sich ein Signal erwarten, dass um den Faktor 10 hher liegt
als bei einer Messung ohne chemische Suppression. In der Praxis gefunden wird hingegen nur ein
Empfindlichkeitszuwachs im Bereich eines Faktors von 2 bis 4.
Im Gegensatz zur linearen Kalibration beim Arbeiten ohne chemische Suppression, erhlt man beim
Arbeiten mit chemischer Suppression eine quadratische Kalibrationsfunktion, deren Berechnung die
Kalibration mehrerer Punkte erforderlich macht. Der Konzentrationsbereich, in dem man mit linear
khv

45

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

arbeiten kann ist wesentlich geringer (ca. 1/20 bis 1/50) als beim Arbeiten ohne chemische
Suppression.
Lerninhalte

Prinzipieller Aufbau eines IC-Systems

Unterschiede zwischen dem Arbeiten mit chemischer und ohne chemische Suppression

Bestimmung der unterschiedlichen Empfindlichkeiten der beiden Methoden

Versuch 1a Messung ohne chemische Suppression


Tabelle 3

Parameter Versuch 1a

Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


8 mmol/L Phthalsure, 2% Acetonitril; pH = 4.1 (TRIS)
Leitfhigkeit ca. 400 S/cm
Standard (Fluorid, Chlorid, Nitrit, Bromid, Nitrat, Phosphat, Sulfat)
exp_01_n.mtw
anonsupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
20 min
100 L
+

Herstellung des Eluenten


1.33 g Phthalsure in 20 ml Acetonitril und etwas Wasser lsen, danach auf 1 L auffllen. Durch
Zugabe von TRIS (fest) (ca. 1 g) den pH-Wert auf 4.1 einstellen. Das verwendete Wasser vor der
Zugabe der Chemikalien fr 10 min am Wasserstrahlpumpenvakuum oder im Ultraschallbad
entgasen.

Chromatogramm 1 Standardlsung (versuch1a.gif)

khv

46

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 4
Peak
1

2
3
4
5
6
7

Komponenten Versuch 1a
Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrit
Bromid
Nitrat
Sulfat
Systempeak

tR [min]
3.6
4.9
5.7
6.7
7.8
10.9
17

Konz. [mg/L]
5
5
5
10
10
10

Bodenzahl
2310
3680
3670
3960
3890
3430

Area [S/cm*sec]
51
71
36
63
74
88

Versuch 1b Messung mit chemischer Suppression


Tabelle 5

Parameter Versuch 1b

Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Standard (Fluorid, Chlorid, Nitrit, Bromid, Nitrat, Phosphat, Sulfat)
exp_01_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
16 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Herstellung des Eluenten


265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL
Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.

Chromatogramm 2 Standardlsung (versuch1b.gif)

khv

47

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 6
Peak
1

2
3
4
5
6
7

khv

Komponenten Versuch 1b
Komponente
Fluorid
Chlorid
Systempeak
Nitrit
Bromid
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
3.8
5.7
6.8
7.3
8.6
10.4
11.7
14.4

Konz. [mg/L]
2
5

Bodenzahl
2780
4100

Area [S/cm*sec]
48
81

5
10
10
10
10

3900
4510
4480
3220
3660

46
69
87
43
113

48

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2.2 Versuch 2 Kapazitt von Trennsulen


Abgeschnittene Peaks, Peaks in der Form von Haifischflossen, vernderte Retentionszeiten fr
gleiche Ionen, Peaks die Tailing oder Fronting zeigen all dies kann eine gemeinsame Ursache
haben: berladung der Sule.
Jede Sule hat eine endliche Zahl von Ionentauscherpltzen. Bevor die Probe injiziert wird, sind diese
vollstndig mit Eluentionen belegt. Wird die Probe aufgegeben beginnt der Ionenaustausch:
Eluentionen werden gegen Probeionen und Probeionen gegen Eluentionen ausgetauscht. Da sich die
Ionenspezies in ihren Bindungskonstanten unterscheiden, eluieren sie unterschiedlich schnell von der
Sule. Das gewnschte Ergebnis ist die Trennung des Substanzgemisches und damit das
Chromatogramm.
Dieser Prozess funktioniert nur dann einwandfrei, wenn die Zahl der Austauschpltze hher als die
Zahl der von der Probe bentigten Bindungspltze ist. Als Beispiel: eine Sule mit einer Kapazitt von
1 mEq (Milli-Equivalent) kann maximal 1 mmol einwertiger Ionen binden und trennen. Ist die
Ionenkonzentration der Probe hher, ist die Interaktion zwischen Probeionen und den
Austauscherpltzen der stationren Phase nicht mehr fr alle Ionen mglich und die Ionen werden
nicht mehr ausreichend getrennt In der Praxis verschlechtert sich die Chromatographie bereits bei
einem Belegungsgrad grsser drei Viertel der theoretischen Sulenkapazitt.
Ein zweiter Effekt, der die Trennung negativ beeinflusst, ist der Umstand, das jedes Ion prinzipiell
auch als Eluention agieren kann. Mit der berladung der Sule werden zu viele Eluentionen durch die
Probeionen ersetzt. Damit kommt es zu unkalkulierbaren Vernderungen der Sulengleichgewichte
und die Trennung verschlechtert sich.
Die Kapazitt einer Sule kann bestimmt werden, in dem sie vollstndig mit Chloridionen belegt wird.
Nach einem Splschritt mit demineralisiertem Wasser werden die Chloridionen mit einem
Carbonateluenten eluiert und dann mittels Ionenchromatographie oder argentometrischer Titration
quantifiziert.
Im nachfolgenden Experiment wird die Chloridkonzentration bis zur berladung der Sule gesteigert.
Einige Effekte, die mit der berladung der Sule einhergehen werden im folgenden beschrieben:
die Retentionszeiten der nachfolgenden Ionen verkrzen sich,
der Peak des dominaten Ione wird abgeschnitten,
der Peak des dominanten Ions tailt,
die Anzahl der theoretischen Bodenzahl theoretical plate counts (TP) wird geringer,
das Area/Hight- Verhltnis wird schlechter und
die Peaksymmetrie verschlechtert sich.
Die Peaksysmmetrie verschlechtert sich auch bei verstopfter Sulenfritte, erhhtem Totvolumen und
bedingt durch Absorptionserscheinungen auf dem Sulenmaterial.
Lerninhalte

khv

Erklren der chromatographischen Parameter: Retentionszeit,


Bodenzahlen, Symmetrie und Area-Hight-Verhltnis

Einfluss einer dominanten Hauptkomponente auf Komponenten wesentlich geringerer


Konzentration: Vernderung der o.a. Parameter

49

Auflsung,

Flche,

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 7

Parameter Versuch 2

Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Standard (Fluorid, Chlorid, Nitrit, Bromid, Nitrat, Phosphat, Sulfat)
+ NaCl (ca. 1 g eingewogen)
exp_02_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
16 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Herstellung des Eluenten


265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL
Reinstwasser lsen und danach 20 mL Aceton zugeben.

Chromatogramm 3 Standardlsung mit sehr hoher Chloridkonzentration (versuch2.gif)

khv

50

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 8
Peak

1
2
3
4
5
6

Komponenten Versuch 2
Komponente

Chlorid
Nitrit
Bromid
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]

Konz. [mg/L]

Bodenzahl

7.4
9.4
9.7
10.9
11.8
13.9

n.b.
5
10
10
10
10

n.b.
35540
15710
7350
4540
1360

4.2.2.1.1

Area
[S/c
m*sec
]

n.b.
16
52
87
19
109

Bemerkungen
Natriumchlorid wird eingewogen. Die Retentionszeiten und die Werte fr Bodenzahl und Flche (Area)
knnen je nach eingewogener NaCl-Konzentration variieren.

khv

51

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2.3 Versuch 3 Selektivitt von Trennsulen


Wird die Strke des Eluenten gegen den Logarithmus der Retentionszeit von ein- und zweiwertigen
Ionen aufgetragen, so erhlt man eine Gerade. Die Steilheit dieser Geraden ist grsser fr
zweiwertige als fr einwertige Ionen. Die Steigerung der Elutionsstrke des Eluenten hat damit einen
grsseren Einfluss auf die Retentionszeit der zweiwertigen als auf die Retentionszeit der einwertigen
Ionen.
Dieser Einfluss ist am Sulfat-Ion zu beobachten. Sulfat wird mit gesteigerter Eluentkonzentration
verhltnismssig strker beschleunigt, als die einwertigen Ionen.
Generell eluieren zweiwertige Ionen im Eluenten strker als einwertige Ionen, da sie zwei Bindungen
mit der stationre Phase eingehen knnen und so strker mit dieser in Wechselwirkung treten knnen.
Natronlauge hat bei gleicher Molaritt einen grsseren Einfluss auf den pH-Wert des Eluenten als
Carbonat/Bicarbonat. Die Elutionskraft des OH-Ions ist aber verglichen mit der des
Hydrogencarbonats niedriger, da das Hydroxyl-Ion eine geringere Wechselwirkung mit der stationren
Phase aufweist.
Die Retentionszeit des Phosphats ist stark pH-abhngig. Bei hohem pH-Wert verschiebt sich das
Gleichgewicht von PO42 in Richtung PO43. Damit verlngert sich die Retentionszeit des Phosphats
whrend sich die Retentionszeiten aller anderen Ionen weiter verkrzen.
Lerninhalte

Vergleich von Eluenten mit einwertigen und zweiwertigen Anionen

Vergleich von Natronlauge- und Carbonat/Hydrogencarbonateluenten

Einfluss des Eluent-pH-Wertes auf die Retention des Phosphats

Tabelle 9

Parameter Versuch 3a bis 3d

Sule
Eluenten

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer

Loop
Suppressor
Polaritt

khv

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


a)
1 mmol/L Na2CO3 / 4 mmol/L NaHCO3
b)
4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaHCO3
c)
4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaOH
(pH=11-12)
d)
5 mmol/L Na2CO3 / 5 mmol/L NaOH
(pH=11-12)
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 17 S/cm
Standard (Fluorid, Chlorid, Nitrit, Bromid, Nitrat, Phosphat, Sulfat)
exp_03_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
a)
30 min
b)
12 min
c)
10 min
d)
8 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

52

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 3a 1 mmol/L Na2CO3 / 4 mmol/L NaHCO3


Herstellung des Eluenten
106 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 336 mg Natriumhydrogencarbonat in 1 L Reinstwasser
lsen.

Chromatogramm 4 Standardlsung 1 mmol/L Na2CO3 / 4 mmol/L NaHCO3 (versuch3a.gif)


Tabelle 10 Komponenten Versuch 3a
Peak
1

2
3
4
5
6
7

khv

Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrit
Bromid
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
4.5
7.2
9.5
11.4
14.0
20.4
26.5

Konz. [mg/L]
2
5
5
10
10
10
10

53

Bodenzahl
3340
4730
4360
1830
4660
3530
4120

Area [S/cm*sec]
49
83
47
69
92
46
118

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 3b 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaHCO3


Herstellung des Eluenten
424 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 84 mg Natriumhydrogencarbonat in 1 L Reinstwasser lsen.

Chromatogramm 5 Standardlsung 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaHCO3 (versuch3b.gif)


Tabelle 11 Komponenten Versuch 3b
Peak
1

2
3
4
5
6

khv

Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrit
Bromid
Nitrat + Phosphat
Sulfat

tR [min]
3.4
5.1
6.5
7.5
9.0
10.1

Konz. [mg/L]
2
5
5
10
10
10

54

Bodenzahl
2820
4350
3980
4690
2840
3750

Area [S/cm*sec]
50
84
47
71
139
117

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 3c 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaOH


Herstellung des Eluenten
424 mg Natriumcarbonat (wasserfrei), 40 mg NaOH in 1 L Reinstwasser lsen.

Chromatogramm 6 Standardlsung 4 mmol/L Na2CO3 / 1 mmol/L NaOH (versuch3c.gif)


Tabelle 12 Komponenetentabelle Versuch 3c
Peak
1

2
3
4
5
6

khv

Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrit
Bromid
Nitrat
Phosphat + Sulfat

tR [min]
3.3
4.5
5.6
6.3
7.5
8.3

Konz. [mg/L]
2
5
5
10
10
10 / 10

55

Bodenzahl
2390
3010
3650
4220
3790
2510

Area [S/cm*sec]
51
86
49
74
96
171

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 3d 5 mmol/L Na2CO3 / 5 mmol/L NaOH


Eluentherstellung
424 mg Natriumcarbonat (wasserfrei), 200 mg NaOH in 1 L Reinstwasser lsen und entgasen.

Chromatogramm 7 Standardlsung 5 mmol/L Na2CO3 / 5 mmol/L NaOH (versuch3d.gif)


Tabelle 13 Komponenten Versuch 3d
Peak
1

2
3
4
5
6
7

khv

Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrit
Bromid
Sulfat
Nitrat
Phosphat

tR [min]
3.0
4.1
5.0
5.6
6.2
6.6
7.7

Konz. [mg/L]
2
5
5
10
10
10
10

56

Bodenzahl
2470
3850
3600
4200
2990
5130
2570

Area [S/cm*sec]
49
86
48
71
120
103
46

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2.4

Versuch 4 Kalibration, Nachweis- und Bestimmungsgrenzen in der


Ionenchromatographie
Wesentliche Parameter fr analytische Bestimmungsmethoden sind Linearittsbereich, Nachweisgrenze, Bestimmungsgrenze. Die mathematischen Verfahren hierzu sind z.B. in der DIN-Norm 32645
festgelegt.
Werden Chromatogramme mit einem Leitfhigkeitsdetektor aufgenommen, so wird meist die
Peakflche zur Auswertung herangezogen. Die Peakflche ist proportional der Substanzmenge. Trgt
man die Peakflche gegen die Konzentration auf, so erhlt man die Kalibrationsfunktion. Sie ist linear
fr Messungen ohne chemische Suppression. Sie folgt in erster Nherung einer quadratischen
Funktion bei Messungen mit chemischer Suppression. Auswertungsprogramme berechnen die
Kalibrationsfunktionen automatisch.
Mit der Nachweisgrenze ist die minimale Konzentration eines Analyten gemeint, bei der dieser mit
bekannter statistischer Sicherheit noch nachgewiesen werden kann. So berechnet man die theoretisch
niedrigste Konzentration, die gerade noch von einem Blindwert zu unterscheiden ist.
Es gibt zwei Methoden, die Nachweisgrenze (NG) zu bestimmen:
- die Leerwert- oder Blindwertmethode.
Die Blindprobe sollte eine Probe sein, die das zu bestimmende Ion nicht enthlt. Die wiederholte
Messung einer Blindprobe ergibt zu einer Konzentration 0 (X-Wert) Messwerte (Y-Werte), deren
Dichtemittel als Leer- oder Blindwert bezeichnet wird. Dem maximalen Y-Wert wird mittels der
Kalibriergerade auf der X-Achse ein Konzentrationswert zugeordnet, der gleich der Nachweisgrenze
ist.
- Kalibrierkurvenmethode
Diese Methode kommt zur Anwendung, wenn effektiv kein Blindwert bestimmt werden kann, da das zu
untersuchende Ion in der Probe nicht nachweisbar ist. Fr die Kalibrierkurvenmethode werden
unterschiedliche Konzentrationen eine Ions mehrfach vermessen. Aus der Standardabweichung ergibt
sich ein Vertrauensbereich. Damit entspricht der Konzentration 0 ein bestimmtes Y-Intervall. ber
die Kalibrierfunktion wird dem Y-Intervall eine Konzentrationsintervall gleichgesetzt, dessen Maximum
die Nachweisgrenze ist.
Oft wird zur Ermittlung der Nachweisgrenze auch das Signal-/Rauschverhltnis herangezogen. Zum
Beispiel wird als Nachweisgrenze die Analytkonzentration bezeichnet, bei der das Messsignal 2x oder
3x grsser als das Rauschen der Basislinie ist.
Die Bestimmungsgrenze (BG) ist erst dann erreicht, wenn der Messfehler im Vergleich zum
Analysenwert einen bestimmten Wert unterschreitet, z. B. 1/3. Erst dann wird ein Zahlenwert im
Analysenbefund angegeben, da andernfalls der Messfehler als zu gross im Vergleich zum
Analysenwert betrachtet wird. Als Abschtzung gilt, dass die Bestimmungsgrenze um den Faktor drei
hher als die Nachweisgrenze ist
Lerninhalte

khv

Was bedeutet Kalibration

Vergleich einer Einpunkt- mit einer Mehrpunktkalibration Fehlerabschtzung

Bestimmung des Systemrauschens

Abschtzung der Nachweisgrenzen

57

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2.5

Versuch 4a Bestimmung von Anionen mit chemischer Suppression

Tabelle 14 Parameter Versuch 4a


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Standard (Fluorid, Chlorid, Nitrit, Bromid, Nitrat, Phosphat, Sulfat)
exp_04_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
16 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Herstellung des Eluenten


265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL
Reinstwasser lsen. Danach 20 ml Aceton zugeben.

Chromatogramm 8 Merge Standardlsungen unterschiedlicher Konzentration (versuch4a.gif)


Tabelle 15 Komponenten Versuch 4a
Peak
1

2
3
4
5
6
7
8
khv

Komponente

tR [min]

Fluorid
Chlorid
Systempeak
Nitrit
Bromid
Nitrat
Phosphat
Sulfat

3.9
5.6
6.8
7.5
8.6
10.3
11.7
14.3

Level 1
1
1
1
1
1
1
1
58

Konz. [mg/L]
Level 2
Level 3
5
25
5
25
5
5
5
5
5

25
25
25
25
25

Level 4
50
50
50
50
50
50
50
22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 4b Bestimmung von Anionen ohne Suppression


Tabelle 16 Parameter Versuch 4b
Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


8 mmol/L Phthalsure, 2% Acetonitril; pH = 4.1
Leitfhigkeit ca. 400 S/cm
Standard (Fluorid, Chlorid, Nitrit, Bromid, Nitrat, Phosphat, Sulfat)
exp_04_n.mtw
anonsupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
20 min
100 L
+

Herstellung des Eluenten


1.33 g Phthalsure in 20 ml Acetonitril und etwas Wasser lsen, danach auf 1 L auffllen. Durch
Zugabe von TRIS (fest) den pH-Wert auf 4.1 einstellen.

Chromatogramm 9 Merge Standardlsungen unterschiedlicher Konzentration (versuch4b.gif)


Tabelle 17 Komponenetentabelle Versuch 4b
Peak
1

2
3
4
5
6
7

khv

Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrit
Bromid
Nitrat
Sulfat
Systempeak

tR [min]
3.6
4.9
5.7
6.6
7.7
11.0
17.0

Level 1
1
1
1
1
1
1

59

Konz. [mg/L]
Level 2
Level 3
5
25
5
25
5
25
5
25
5
25
5
25

Level 4
50
50
50
50
50
50

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2.6 Versuch 5 Vernderung der Selektivitt mit Hilfe von Kronenethern (18 Crown-6)
Mit der Zugabe von Komplexbildnern knnen die Retentionszeiten der Kationen verndert werden.
Der Komplexbildner fungiert als Ligand, das Analytkation wird als Zentralmetallion eingebaut. Je
selektiver ein Ligand bezglich eines Zentralmetallions ist, desto strker wird seine Retentionszeit
beeinflusst. Die Retentionszeiten der brigen Kationen werden im Idealfall nur geringfgig verndert.
Komplexbildner werden zur besseren Trennung von Alkalimetallionen eingesetzt. Der Zusatz des
Kronenethers 18 Crown6 zum Eluenten fhrt zu einer besseren Trennung von Na+, Ammonium und
K+. Besonders drastisch ist die Erhhung der Retentionszeit von K+. Dies lsst sich durch die Bildung
des Komplexes aus K+ und Dibenzo-18-Krone-6-ether (18 Crown-6) erklren. K+ passt genau in den
Kfig des Ethers. Es wird ber die Elektronenpaare der Sauerstoffatome komplexiert. Bei gleicher
Ladung wird nach der Komplexierung ein wesentlich grsseres Molekl getrennt. Bedingt durch die
sterische Hinderung, verlngert sich so die Retentionszeit des Kaliums.
O
O

O
K+

O
O

Abbildung 26 Kalium 18 Crown 6


Die Bezeichnung 18 Crown-6 zeigt an, dass das Ringsystem aus 18 Atomen besteht, von denen 6
Sauerstoffatome sind. Kronenether spielen aber nicht nur in der Ionenchromatographie eine wichtige
Rolle, sie werden auch als ionenselektive Phase in Kaliumelektroden verwendet. Des weiteren sind
sie fr den Transport von Kaliumatomen durch Zellmembranen verantwortlich.
Lerninhalte

Auswirkung eines sehr selektiven Komplexbildners auf die Retentionszeiten

Erklrung des Effekts im Vergleich mit Versuch 6

Versuch 5a Eluent ohne Kronenether


Tabelle 18 Parameter Versuch 5a und 5b
Sule
Eluent

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1010.210 IC-Kationensule Metrosep C2 100/4.0 - 7 m


a) 4 mmol/L Weinsure/ 0.75 mmol/L Dipicolinsure
b) 4 mmol/L Weinsure/ 0.75 mmol/L Dipicolinsure
+ 0.25 mmol/L Kronenther
Leitfhigkeit ca. 590 S/cm
Standard (Lithium, Natrium, Ammonium, Kalium, Calcium, Magnesium
+ 2 mmol/L HNO3)
exp_05_c.mtw
cation.smt
1 mL/min
8 MPa
12 min
17 min
10 L

Herstellung des Eluenten


600 mg Weinsure und 125 mg Dipicolinsure in 100 mL Reinstwasser unter Erwrmen lsen, danach
mit Reinstwasser auf 1 L auffllen.

khv

60

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 10

Standardlsung Eluent ohne Kronenether (versuch5a.gif)

Tabelle 19 Komponenten Versuch 5a


Peak
1

2
3
4
5
6

khv

Komponente
Lithium
Natrium
Ammonium
Kalium
Calcium
Magnesium

tR [min]
2.7
3.6
4.2
6.1
8.1
9.9

Konz. [mg/L]
1
5
5
10
10
10

61

Bodenzahl
4270
4640
3640
2890
2950
2310

Area [S/cm*sec]
14
18
19
17
33
65

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 5b Eluent mit Kronenether


Herstellung des Eluenten
600 mg Weinsure und 125 mg Dipicolinsure in 100 mL Reinstwasser unter Erwrmen lsen, danach
132 mg Kronenether zugeben und mit Reinstwasser auf 1 L auffllen.

Chromatogramm 11

Standardlsung Eluent mit Kronenether (versuch5b.gif)

Tabelle 20 Komponenten Versuch 5b


Peak
1

2
3
4
5
6

khv

Komponente
Lithium
Natrium
Ammonium
Calcium
Magnesium
Kalium

tR [min]
2.8
4.1
5.1
9.3
10.6
14.9

Konz. [mg/L]
1
5
5
10
10
10

62

Bodenzahl
4250
4550
3260
2170
2200
1910

Area [S/cm*sec]
14
18
19
33
66
17

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2.7 Versuch 6 Vernderung der Selektivitt mit Hilfe von Komplexbildnern


Bei der Analyse von Magnesium-, Natrium- und Kaliumionen neben Zink- und Calciumionen macht
man sich die Eigenschaft von Zink- und Calciumionen zu nutze, mit Dipicolinsure (DPA, 2,6Pyridindicarbonsure) Komplexe zu bilden.
Me 2+ - Dipicolinkomplex
O

Me

C
2+

Die aus der Komplexbildung


Me2+ + (DPA) [MeDPA]2+
resultierende Konstante ist fr jedes Metall unterschiedlich.
In Abhngigkeit vom pH-Wert, aber unabhngig von der Komplexbildungskonstante, knnen sich die
folgenden Komplexe bilden: (zunehmende Dissoziation von H+ mit steigendem pH-Wert):
+

2+

2+

[Me (DPA)]

saurer Bereich

+H

2+

[Me (DPA)]

2+

schwach saurer Bereich

[Me (DPA)]

+H

alkalischer Bereich

Je nach pH-Wert liegt also ein 2-fach positiver, 1-fach positiver oder ungeladener Komplex vor.
Primres Trennkriterium auf einer Kationentauschersule ist die Ladung der zu trennenden Ionen.
Ungeladene Komplexe werden nicht zurckgehalten. Komplexe mit dreifach positiver Ladung wrden
nahezu irreversibel gebunden. Bedingt durch die Komplexbildungskonstante und den eingestellten
pH-Wert liegt eine bestimmte mittlere Gleichgewichtsladung des Komplexes vor. Diese
Gleichgewichtsladung bestimmt die Retentionszeit. Deshalb knnen die zweiwertigen Metallionen
durch die Zugabe von Dipicolinsure und einen bestimmten pH-Wert beschleunigt werden.
Einwertige Metallionen, die keinen Komplex mit der Dipicolinsure bilden knnen, werden in ihrer
Retentionszeit nicht beeinflusst.
Lerninhalte

khv

Einfluss der Komplexbildungskonstante auf die Retentionszeit Vergleich Zink und Calcium

Einfluss des pH-Wertes auf die Gesamtladung des Komplexes

Erklrung des Effekts im Vergleich mit Versuch 5

63

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 21 Parameter Versuch 6a bis 6d


Sule
Eluent

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer

Loop
Polaritt

6.1010.210 IC-Kationensule Metrosep C2 100/4.0 7 m


a)
4 mmol/L Weinsure
Leitfhigkeit ca. 500 S/cm
b)
4 mmol/L Weinsure + 0.1 mmol/L Dipicolinsure
Leitfhigkeit ca. 500 S/cm
c)
4 mmol/L Weinsure + 0.25 mmol/L Dipicolinsure
Leitfhigkeit ca. 520 S/cm
d)
4 mmol/L Weinsure + 0.75 mmol/L Dipicolinsure
Leitfhigkeit ca. 590 S/cm
Standard (Natrium, Zink, Kalium, Calcium, Magnesium + 2 mmol/L HNO3)
exp_06_c.mtw
cation.smt
1 mL/min
7 MPa
a)
23 min
b)
20 min
c)
16 min
d)
13 min
10 L
-

Versuch 6a 4 mmol/L Weinsure


Herstellung des Eluenten
600 mg Weinsure in 1L Reinstwasser lsen.

Chromatogramm 12

khv

Standardlsung Eluent 4 mmol/L Weinsure (versuch6a.gif)

64

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 22 Komponenten Versuch 6a


Peak
1

2
3
4
5

Komponente
Natrium
Kalium
Zink
Magnesium
Calcium

tR [min]
4.3
7.8
11.2
14.4
19.5

Konz. [mg/L]
5
10
5
10
10

Bodenzahl
4450
2330
2330
2010
2640

Area [S/cm*sec]
17
16
11
63
34

Versuch 6b 4 mmol/L Weinsure + 0.1 mmol/L Dipicolinsure


Herstellung des Eluenten
600 mg Weinsure und 17 mg Dipicolinsure unter Erwrmen in 100 mL Reinstwasser lsen, danach
auf 1L auffllen.

Chromatogramm 13
(versuch6b.gif)

Standardlsung Eluent 4 mmol/L Weinsure + 0.1 mmol/L Dipicolinsure

Tabelle 23 Komponenten Versuch 6b


Peak
1

2
3
4
5

khv

Komponente
Zink
Natrium
Kalium
Magnesium
Calcium

tR [min]
1.9
4.4
7.6
14.8
17.9

Konz. [mg/L]
5
5
10
10
10

65

Bodenzahl
554
4390
2750
2100
2720

Area [S/cm*sec]
6.7
17
16
64
33

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 6c 4 mmol/L Weinsure + 0.25 mmol/L Dipicolinsure


Herstellung des Eluenten
600 mg Weinsure und 42 mg Dipicolinsure unter Erwrmen in 100 mL Reinstwasser lsen, danach
auf 1L auffllen.

Chromatogramm 14
(versuch6c.gif)

Standardlsung Eluent 4 mmol/L Weinsure + 0.25 mmol/L Dipicolinsure

Tabelle 24 Komponenten Versuch 6c


Peak

1
2
3

khv

Komponente
Zink
Natrium
Kalium
Calcium + Magnesium

tR [min]
1.1
4.3
7.8
14.4

Konz. [mg/L]
5
5
10
10 + 10

66

Bodenzahl

Area [S/cm*sec]

4450
2330
2010

18
17
98

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 6d 4 mmol/L Weinsure + 0.75 mmol/L Dipicolinsure


Herstellung des Eluenten
600 mg Weinsure und 125 mg Dipicolinsure unter Erwrmen in 100 mL Reinstwasser lsen, danach
auf 1L auffllen.

Chromatogramm 15
(versuch6d.gif)

Standardlsung Eluent 4 mmol/L Weinsure + 0.75 mmol/L Dipicolinsure

Tabelle 25 Komponenten Versuch 6d


Peak

1
2
3
4

Komponente
Zink
Natrium
Kalium
Calcium
Magnesium

tR [min]
1.1
3.8
6.4
8.5
10.5

Konz. [mg/L]
5
5
10
10
10

Bodenzahl

Area [S/cm*sec]

4540
2900
2630
2190

17
17
33
67

Bemerkungen
Smtliche Lsungen mssen in Kunststoffbehltern aufbewahrt werden. Fr eine korrekte NatriumBestimmung muss jeglicher Kontakt mit Glas vermieden werden. Der pH-Wert der Standard- und
Probelsungen muss zwischen 2.5 und 3.5 liegen.
Bei Wechsel des Eluenten das System einige Zeit laufen lassen bis Grundlinie konstant ist.
Zink wird durch die Dipicolinsure komplexiert und eluiert im Frontpeak.

khv

67

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.2.8 Versuch 7 Anreicherungstechnik


Die Probenaufgabe in der Ionenchromatographie erfolgt mit einer Probenschleife bzw. einem Sample
loop, der auf dem Injektionsventil angebracht ist. Das Volumen der Probenschleife betrgt unter
Standardbedingungen fr Anionen 20 L und fr Kationen 10 L. Mit Probenschleifen dieser Grsse
erschliessen sich auf einem einfachen IC-System problemlos Nachweissgrenzen von 100 g/L bzw
100 ppb.
Durch Vergrsserung des Sample loops z.B. auf 100 L lassen sich die Nachweisgrenzen nur
teilweises verringern: Wird ein grsseres Probenvolumen auf die Sule gebracht wird, so
verschlechtert sich die Peakform und damit wiederum die Nachweisgrenze.
Eine einfache Methode zur Verringerung der Nachweisgrenzen ist dagegen die Probenanreicherung.
Statt des Sample loops wird eine Anreicherungssule auf das Injektionsventil montiert. Ein
gesteigertes Probenvolumen in unserem Beispiel 5 mL wird auf die Anreicherungssule gegeben.
Diese Sule ist prinzipiell mit dem gleichen Material versehen, dass sich auch in der Trennsule
befindet. Dadurch wird gewhrleistet, dass alle Anionen bzw. Kationen auf ihr vollstndig
zurckgehalten werden. Es wird wie blich mit einem NaHCO3/Na2CO3-Eluenten gearbeitet.
Ist die Anreicherung erfolgt Ventilposition fill wird im Gegenstrom injiziert Ventilposition
inject. Das Gegenstromverfahren wird angewendet, um den Einfluss der Anreicherungssule auf
die chromatographische Trennung zu minimieren.

Abbildung 27 Anreicherungstechnik: Abbildung links Position fill, Abbildung rechts: Position


inject
Mit der Anreicherungstechnik erschliessen sich selbst auf einem einfachen chromatographischen
System Konzentrationen im unteren ppb-Bereich
Lerninhalte

khv

Was ist Probenvorbereitung?

Wo ist die Schnittstelle zwischen Ionenchromatographie und Probenvorbereitung?

Was ist der Vorteil von Probenanreicherung?

Was sind die Grenzen des Verfahrens?

68

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 26 Parameter Versuch 7


Sule
Eluent

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Reinstwasser
exp_07_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
4 MPa
16 min
5 mL auf METROSEP IC Anion Anreicherungssule 6.1006.300
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt
Herstellung des Eluenten

265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL


Reinstwasser lsen und 20 ml Aceton zugeben.

Chromatogramm 16

Standardlsung (1 ppb) (versuch7a.gif)

Tabelle 27 Komponenten Versuch 7a


Peak
1

2
3
4
5
6
7
8

khv

Komponente
Fluorid + Acetat
Chlorid
Systempeak
Nitrit
Bromid
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
3.8
5.7
6.8
7.4
8.6
10.3
11.6
14.1

Konz. [g/L]
1+1
1

Bodenzahl
1620
3090

Area [S/cm*sec]
5.4
5.2

1
1
1
1
1

3270
3970
3600
3290
2980

2.3
1.3
1.9
0.7
1.1

69

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 17

Reinstwasser (versuch7b.gif)

Tabelle 28 Komponenten Versuch 7b


Peak
1
2

Komponente
Chlorid
Systempeak

tR [min]
5.7
6.8

Konz. [g/L]
0.030

Bodenzahl
2240

Area [S/cm*sec]
0.17

Bemerkungen
Gefsse, Spritze und System mehrmals grndlich splen, Plastikgefsse verwenden.

khv

70

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3

Versuche fr die Bestimmung von Anionen

4.3.1 Versuch 8 Bestimmung von Anionen in Trinkwasser


Trinkwasser ist unser wichtigstes Lebensmittel. Es wird vor allem aus Grundwasser und
Oberflchenwasser gewonnen. Als Oberflchenwasser wird See- und Talsperrenwasser, Uferfiltrat,
mit Oberflchenwasser angereichertes Grundwasser sowie Flusswasser verwendet.
Nach DIN 2000 muss Trinkwasser folgende Grundanforderungen erfllen:
Es soll farblos, klar, khl und frei von fremdartigem Geruch und Geschmack sein.
Es soll mglichst von Natur aus frei von Krankheitserregern und gesundheitsschdlichen Stoffen sein.
Es soll nicht zu viele Salze, namentlich Hrtebildner, Eisen, Mangan, sowie organische Stoffe (Moorund Huminstoffe) enthalten.
Es soll tunlichst keine Korrosion hervorrufen.
Es soll stets auch der Menge nach allen Bedrfnissen der zu versorgenden Bevlkerung gerecht
werden.
Je nach Verschmutzungsgrad werden verschiedene Verfahren zur Trinkwasseraufbereitung
eingesetzt.
Rechen, entfernt grobe Verschmutzungen und grssere Partikel
Sandfilter, dient der Filtration ausserdem finden in Sand biologische Abbauprozesse statt, die der
Reinigung dienen
Aktivkohlefilter adsorbieren gelste organischen Substanzen, z. B. Pestizide
Enteisenung, Entmanganung durch Oxidation von Fe(II) und Mn(II); dieser Prozess wrde
andernfalls in der Trinkwasserleitung stattfinden und zu braunen Trbungen oder Flocken im
Trinkwasser fhren.
Desinfektion ist immer dann ntig, wenn das Wasser nicht frei von Krankheitserregern ist. Verwendet
werden Chlor, Ozon, Chlordioxid, UV-Licht.
Sicherheitschlorung vor Abgabe in die Trinkwasserleitung zur Vermeidung einer Wiederverkeimung
auf dem Weg zum Verbraucher

Abbildung 28 Schema der Trinkwasseraufbereitung Graphik von Thomas Seilnacht Tuttling


(wasserwerk.gif)

khv

71

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Lerninhalte

Untersuchung des Lebensmittels Nummer 1

berprfung der Angaben auf Mineralwasserflaschen

Tabelle 29 Grenzwerte fr Trinkwasser (D)


Fluorid
Nitrat
Nitrit
Chlorid
Sulfat

1,5
50
0,1
250
250

mg/l als Fmg/l als NO3mg/l als NO2mg/l


mg/l

Tabelle 30 Parameter Versuch 8


Sule
Eluent

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Trinkwasser
exp_08_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
16 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt
Herstellung des Eluenten

265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL


Reinstwasser lsen und 20 mL Aceton zugeben.

Chromatogramm 18

khv

Trinkwasser aus Herisau (Schweiz) (versuch8a.gif)

72

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 31 Komponenten Standard


Peak
1

2
3
4
5

Komponente
Fluorid
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Sulfat

tR [min]
3.7
5.8
6.8
10.3
14.4

Konz. [mg/L]
0.05
6.5

Bodenzahl
2680
2500

Area [S/cm*sec]
1.2
104

8.4
14.4

4560
3670

74
68

Abbildung 29 Chromatogramm Mineralwasser ohne Kohlensure (versuch8b.gif)


Tabelle 32 Komponenten Mineralwasser ohne Kohlensure
Peak
1

2
3
4
5
6

Komponente
Fluorid
Chlorid
Systempeak
Bromid
Nitrat
Sulfat

tR [min]
3.7
5.7
6.8
8.5
10.3
14.3

Konz. [mg/L]
1.5
14.1

Bodenzahl
2560
2980

Area [S/cm*sec]
35
226

0.075
1.4
300

4810
4400
3830

0.5
12
3400

Bemerkungen
Mineralwasser mit Kohlensure muss vor der Messung entgast werden.

khv

73

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.2 Versuch 9 Anionen in Ethanol


Die Bestimmung von Anionen in organischen Lsungsmitteln ist mglich, obwohl zu Beginn des
Chromatogramms oft ausgeprgte Systempeaks auftreten. Als Beispiele soll die Analyse in folgenden
Matrices dienen:
Anionen in Methanol knnen im ppb-Bereich bestimmt werden nach direkter Injektion (ohne
Anreicherungssule) und chemischer Suppression.
Ebenfalls direkt knnen Anionen im sub-ppb-Bereich in Butyrolacton bestimmt werden, und zwar ohne
chemische Suppression. Butyrolacton ist ein wichtiges Lsungsmittel und Ausgangssubstanz fr z. B.
N-Methyl-pyrolidon, das fr grosstechnisch wichtige Extraktionen (z. B. Butadien) verwendet wird.
Auch in unpolaren Lsungsmitteln, wie z. B. Toluol knnen Anionen bestimmt werden. Hier muss
allerdings eine Extraktion mit ultrareinem Wasser durchgefhrt werden. Die Analyse ist ohne
chemische Suppression im ppm-Bereich mglich.
Enthlt die wssrige Analysenlsung Spuren von organischen Lsungsmitteln, knnen diese mittels
einer RP-Sule entfernt werden.
Lerninhalte

Lebensmittelanalytik

Einfluss der Matrix auf die Chromatographie

Matrixeliminierung

Tabelle 33 Parameter Versuch 9a bis 9c


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop

Suppressor
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
a)
Gin
b)
Whisky
c)
Ethanol
exp_09_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
5 MPa
a)
17 min
b)
33 min
c)
17 min
a)
100 L
b)
100 L
c)
500 L auf METROSEP IC Anion Anreicherungssule 6.1006.300
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Herstellung des Eluenten


265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL
Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.

khv

74

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 9a Bestimmung von Anionen in Gin

Chromatogramm 19

Standardlsung fr die Bestimmung von Gin (versuch9a_std.gif)

Tabelle 34 Komponenten Versuch 9a Standard


Peak
1

2
3
4
5

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Sulfat
Oxalat

Chromatogramm 20
khv

tR [min]
5.5
7.0
9.6
13.0
14.9

Konz. [mg/L]
0.1

Bodenzahl
4240

Area [S/cm*sec]
7.8

0.02
0.4
0.02

2980
3320
3710

0.9
22
0.7

Bestimmung von Gin (versuch9a_gin.gif)


75

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 35 Komponenten Versuch 9a Gin


Peak
1

2
3
4
5

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
5.6
7.0
9.7
13.0
14.9

Konz. [mg/L]
0.11

Bodenzahl
2230

Area [S/cm*sec]
8.8

0.014
0.43
0.013

3360
3260
3920

0.6
23.5
0.5

Versuch 9b Bestimmung von Anionen in Whisky

Chromatogramm 21

khv

Standardlsung fr die Bestimmung von Whisky (versuch9b_std.gif)

76

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 36 Komponenten Versuch 9b Standard


Peak
1

2
3
4
5
6
7

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Malat
Sulfat
Oxalat

Chromatogramm 22

tR [min]
5.5
7.0
9.6
10.8
12.1
13.0
14.9

Konz. [mg/L]
1

Bodenzahl
4700

Area [S/cm*sec]
84

0.5
0.5
0.5
1
1

3640
2960
3730
3350
3250

20
11
306
56
41

Bestimmung von Whisky (versuch9b_whisky.gif)

Tabelle 37 Komponenten Versuch 9b Whisky


Peak
1

2
5
6
7
8
9

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Malat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
5.6
7.3
9.8
10.9
12.4
13.1
15.1

Konz. [mg/L]
1.3

Bodenzahl
3300

Area [S/cm*sec]
167

0.22
0.43
0.81
0.88
1.91

4000
3510
4580
3040
3540

8.7
9.6
5.8
49
79

Bemerkungen
Peaks 3, 4 und 10 sind unbekannt

khv

77

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 9c Bestimmung von Anionen in Ethanol mit Anreicherung und Matrixeliminierung

Chromatogramm 23
(versuch9c_elim.gif)

Bestimmung von Anionen in Ethanol mit Matrixeliminierung

Tabelle 38 Komponenten Versuch 9c mit Matrixeliminierung


Peak
1

2
3
4
5

khv

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
5.3
6.8
9.3
12.3
14.1

Konz. [mg/L]
0.021

Bodenzahl
3570

Area [S/cm*sec]
9.5

0.013
0.046
0.018

3940
2130
3250

2.8
14
3.8

78

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 24

Bestimmung von Anionen in Ethanol ohne Matrixeliminierung (versuch9c.gif)

Tabelle 39 Komponenten Versuch 9d ohne Matrixeliminierung


Peak

Komponente
keine Peaks

tR [min]

Konz. [mg/L]

Bodenzahl

Area [S/cm*sec]

Bemerkungen
Gefsse, Spritze und System mehrmals grndlich splen. Plastikgefsse verwenden.

khv

79

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.3 Versuch 10 Anionen in Kopfsalat


Nitrat gelangt ber das Trinkwasser, aber auch durch Aufnahme pflanzlicher Nahrungsmittel
(Gemse) in den menschlichen Krper. Von der WHO (World Health Organization
Weltgesundheitsorganisation) wird empfohlen, dass die tgliche Nitrataufnahme 220 mg nicht
berschreiten soll. Zur Zeit betrgt diese in der BRD etwa 130 mg. Ca. 5 % davon werden mit Fleischund Wurstwaren, der Rest etwa je zur Hlfte mit Trinkwasser und Gemse aufgenommen.
Nitrat kann sich auf verschiedene Arten auf die Gesundheit des Menschen negativ auswirken. Es ist
selbst relativ ungiftig. Erst bei Aufnahme von grsseren Mengen kann es Entzndungen des MagenDarm-Trakts bewirken. Unter bestimmten Voraussetzungen aber, nmlich dem Vorliegen von
Bakterien, wie sie beim Menschen im Mund vorhanden sind, wird durch das Enzym Nitratreduktase
Nitrat zu Nitrit reduziert:
NO3

Enzym

NO2

Nitrit ist in der Lage, Hmoglobin, den roten Blutfarbstoff, zu Methmoglobin umzuwandeln (Fe2+ wird
zu Fe3+ oxidiert). Methmoglobin kann im Gegensatz zu Hmoglobin keinen Sauerstoff im Blut
transportieren. Bei erwachsenen Menschen kann dieser Schaden durch Stoffwechselreaktionen
wieder behoben werden. Der Stoffwechsel von Suglingen bis zum fnften Lebensmonat ist dazu
jedoch nicht fhig. Durch den entstandenen Sauerstoffmangel im Blut verfrbt sich die Haut des
Suglings blulich. Diese Blausucht oder auch Methmoglobinmie kann mitunter tdlich sein.
Aus Nitrit knnen durch Reaktion mit verschiedenen sekundren Aminen (zwei H-Atome des
Ammoniakmolekls sind durch Alkylreste ersetzt), welche durch Medikamente und Nahrung in den
Krper des Menschen gelangen, im sauren Milieu des Magens Nitrosamine entstehen.

R
R

NO2

R
R

Bei R = CH3: Dimethylnitrosamin


Nitrosamine gehren zu den am strksten krebserzeugenden Stoffen. Sie werden im Organismus aus
nicht kanzerogenen Verbindungen hergestellt.
Lerninhalte

Lebensmittelanalytik

berprfung von Lebensmitteln unter besonderer Beachtung von Nitrit und Nitrat

Tabelle 40 Parameter Versuch 10


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Kopfsalat
exp_10_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
5 MPa
20 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Herstellung des Eluenten


265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL
Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.
khv

80

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Probenvorbereitung
Salat zerkleinern, dispergieren, Reinstwasser (Verdnnung 1:100) zugeben und filtrieren.

Chromatogramm 25

khv

Standardlsung fr die Bestimmung von Kopfsalat (versuch10a.gif)

81

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 41 Komponenten Versuch 10 Standardlsung


Peak
1

2
3
4
5
6
7

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Malat
Sulfat
Oxalat

Chromatogramm 26

tR [min]
5.3
6.7
9.3
10.4
11.8
12.7
14.6

Konz. [mg/L]
5

Bodenzahl
4480

Area [S/cm*sec]
80

5
5
10
2
0.1

4320
2990
3140
3330
3500

42
24
26
22
0.9

Bestimmung von Kopfsalat (Verdnnung 1:100) (versuch10b.gif)

Tabelle 42 Komponenten versuch 10 Kopfsalat


Peak
1

2
4
5
6
7
8

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Malat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
5.3
6.6
9.4
10.4
11.8
12.6
14.5

Konz. [mg/L]
540

Bodenzahl
4260

Area [S/cm*sec]
86

410
540
1160
206
10

4240
2960
2180
2800
2300

34
25
30
23
1

Bemerkungen
Peaks 3, 9 und 10 sind unbekannt

khv

82

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.4 Versuch 11 Phosphorsure in Cola


Coca-Cola ist ein alkoholfreies, kohlensure- und coffeinhaltiges Getrnk. Es wurde 1885 von dem
amerikanischen Apotheker Pemberton hergestellt. Zu den Bestandteilen gehren Extrakte von
Kolanssen, bitteren Pomeranzen, Johannisbrotbaum, Ingweressenz, 12 % Zucker, 0.28 %
Phosphorsure (pH 2.7), Caramelfarbe und Kohlendioxid. Der Coffeingehalt betrgt 16 mg/100 ml.
Es ist eine Vielzahl von Colagetrnken auf dem Markt (Pepsi Cola, Club Cola, River Cola, Afri Cola
etc.), die sich in ihren Zusammensetzungen von Coca Cola unterscheiden knnen.
Die Phosphorsure ist eine 3-basige Sure ( pKS1= 2.161; pKS2= 7.207; pKS3= 12.325). Der Anteil der
verschiedenen Spezies in Abhngigkeit vom pH-Wert ergibt sich aus folgender Abbildung:

Abbildung 30 Pufferwirkung der Phosphorsure


Hufig wird ein Gemisch aus primren und sekundrem Phosphat verwendet, dass im pH-Bereich
6 ... 8 (90 % H2PO4 + 10 % HPO42 bis 10 % H2PO4 + 90 % HPO42) puffert.
Vergleiche auch Henderson-Hasselbach-Gleichung (Puffergleichung)

pH = pK S + lg

c( A )
c( HA)

Lerninhalte

Lebensmittelanalytik

Chemie der Phosphorsure

Einfluss des pH-Wertes auf die chromatographische Trennung

Statistik: Reproduzierbarkeit

Tabelle 43 Parameter Versuch 11


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
khv

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Cola
exp_11_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
83

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Analysendauer
Loop
Suppressor

18 min fr Coca-Cola, 30 min fr Coca-Cola light


20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Polaritt
Eluentherstellung

265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL


Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.

Chromatogramm 27
(versuch11.gif)

Chromatogramm Standardlsung fr die Bestimmung von Cola

Tabelle 44 Komponenten Versuch 11 Standardlsung


Peak
1
2
3

4
5

khv

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
5.3
6.7
9.4
10.5
12.7

Konz. [mg/L]
1

Bodenzahl
4140

Area [S/cm*sec]
15

1
50
1

4220
3250
2950

8.0
261
13

84

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 11a Bestimmung von Cola (1:10 Verdnnung)

Chromatogramm 28

khv

Bestimmung von Cola (Verdnnung 1:10) (versuch11a.gif)

85

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 45 Komponenten Versuch 11a


Peak
1
2
3

4
5

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
5.3
6.8
9.5
10.5
12.8

Konz. [mg/L]
5.9

Bodenzahl
3100

Area [S/cm*sec]
8.9

5.9
510
11.0

5000
3370
3520

4.7
266
14

Versuch 11b Bestimmung von Cola-Light (1:10 Verdnnung)

Abbildung 31 Chromatogramm Bestimmung von Cola light (Verdnnung 1:10) (versuch11b.gif)


Tabelle 46 Komponenetentabelle Versuch 11b
Peak
1
2
3

4
5

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
5.3
6.7
9.4
10.5
12.8

Konz. [mg/L]
6.0

Bodenzahl
2990

Area [S/cm*sec]
9.2

7.3
663
14.4

4290
1850
1630

5.8
346
19

Bemerkung
Peaks 6, 7 und 8 unbekannt

khv

86

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 11c Reproduzierbarkeit der Phosphatmessungen in Cola

Chromatogramm 29

Merge von 8 Messungen (unverdnnt) (versuch11_merge.gif)

Tabelle 47 Reproduzierbarkeit der Messungen


Chromatogramm
1
2
3

4
5
6
7
8

Area Phosphat
[S/cm*sec]
3627
3629
3626
3626
3636
3638
3639
3638

Konz. Phosphat
[mg/L]
519
520
519
519
521
521
521
521

Standardabweichung = kleiner 0.2 %


Bemerkung
Die Cola muss entgast werden. Bei Cola light liegt unter dem Phosphatpeak der Ssstoff Cyclamat.

khv

87

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.5 Versuch 12 Anionen im Wein


Wein ist das Erzeugnis, das ausschlielich durch vollstndige oder teilweise alkoholische Grung der
frischen, auch eingemaischten Weintrauben oder des Traubenmostes gewonnen wird, heisst es im
Deutschen Weingesetz. Most enthlt u. a. 12 25 % Kohlenhydrate (Glucose, Fructose) und 0.9
1.5 % Suren, die wichtigsten sind L-(+) Weinsure (2R, 3R) und pfelsure, daneben Citronensure,
Ketoglutarsure, Bernsteinsure und Milchsure.
Wichtig fr die Beurteilung des Mosts ist der Oechsle-Grad (Oe); er ist umso hher, je grsser der
Zuckergehalt ist und zeigt an, wie viel Gramm 1 L Most bei 20 C mehr wiegt als 1 L destilliertes
Wasser. Zum Beispiel besitzt Most mit dem spezifischen Gewicht 1,115 kg/l (115 g mehr als 1 L
Wasser) 115 Oechsle. Aus dem Oechsle-Grad lsst sich durch einfache Rechnung der Zucker- und
auch der Alkoholgehalt ermitteln. Aus 1,7 g Zucker entsteht 1 mL (0,794 g) Ethanol. Bei 12 15 Vol%
Alkohol kommt die Grung zum Stillstand, da sich die Hefen mit Alkohol selbst vergiften und
absterben.
Das Aroma des Weins besteht aus 600 800 Komponenten: Kohlenwasserstoffe, Alkohole, Aldehyde,
Ketone, Suren, Ester, Lactone, Ether, Phenole und vieles mehr.
Analytisch von Interesse sind 2R-, 3R-Weinsure, pfelsure, Citronensure, Milchsure und
Bernsteinsure. Der Gesamtsuregehalt (berechnet als Weinsure) betrgt ca. zwischen 5,5 und
8,5 g/l. Essigsure, Propionsure, hhere Fettsuren und anomale Mengen an Milchsuren kommen
im kranken Wein vor und werden vornehmlich durch Mikroorganismen gebildet.
Von Weinfehler spricht man bei einem unausgeglichenem Zucker-/Sureverhltnis. Zum Beispiel
muss bei trockenen Weinen der Zuckergehalt unter 9 g/L liegen; der Suregehalt darf nicht zu niedrig,
nmlich hchstens 2 g unter dem Zuckergehalt sein.

COOH
2

H C OH

L-(+) Weinsure

HO C H
(2R, 3R)-Form

COOH

Die alkoholische Grung luft nach folgender Gleichung ab:


Hefe
C6H12O6 + 2 ADP + 2 P 2 C2H5OH + 2 CO2 + 2ATP

Abbildung 32 Abkrzungen: ADP = Adenosindiphosphat, ATP = Adenosintriphosphat, P = Phosphat

khv

88

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 48 Suregehalt (mg/l) deutscher Weine


Qualittswein
bestimmter
Anbaugebiete Portugieser
Rotwein
M
M
Oxalsure
Bernsteinsure
Fumarsure
Glutarsure
c- bzw. t- Aconit-sure
Glycolsure
D- + L-Milchsure
Anglycerinsure
Triglycerinsure
3-M-2,3-DHBS
pfelsure
Weinsure
Citramalsure
-Hydroxyglutarsure
Citronensure
Glyoxylsure
Brenztraubensure
-Ketoglutarsure
Gluconsure
Schleimsure
Glucuronsure
Galacturonsure
L-Ascorbinsure
Gesamt-Suren
Abbildung 33 Anmerkungen
- = nicht nachweisbar
+ = in Spuren

khv

Riesling
Kabinett

Sptlese

Auslese
M

Mller-Thurgau

Beerenauslese, Eiswein
M

Silvaner
Kabinett
M

Sptlese
M

Auslese
M

Beerenauslese
M

15,7
194,0
44,2
3,7
2,1
1,8
1789
43,5

3971
1586
94,5
24,9
138,9
+
20,6
41,1
59,0

2,1
11,1
12,9

13,0
260,1
31,9
1,9
1,9
1,3
2364
62,6

5080
994
53,7
27,5
150,2
1,0
29,8
45,7
357,2
+
3,4
11,7
9,0

11,0
205,8
24,6
4,5
+
+
319,8
50,1

3850
1428
63,0
18,2
241,1
+
17,8
38,6
54,5

3,8
14,1
13,7

45,8
282,1
28,3
2,6
5,5
+
159,8
39,5

3871
1431
18,6
24,5
222,8
+
12,4
36,8
95,9

5,8
19,7
10,1

16,0
230,2
20,8
2,3
4,9
1,4
151,0
59,0

4235
817
46,8
28,4
298,6
4,0
16,8
55,7
452,1
4,1
7,9
22,0
9,8

21,7
149,2
36,0
7,0
6,4
6,9
2141
53,0

2251
1251
48,2
20,6
287,3
6,1
8,6
35,6
337,2
20,4
14,5
43,4
9,6

16,7
243,8
20,9
2,6
1,4
3,7
793
49,6

2893
1280
31,3
18,8
200,7
2,9
17,6
41,0
53,9

1,7
10,0
12,0

40,9
215,1
51,8
2,2
2,5
3,4
221,0
87,0

3163
1014
33,8
15,3
221,7
1,8
22,7
33,7
131,1
+
6,0
17,3
10,4

15,4
264,9
27,0
1,9
1,6
1,7
208,1
68,8

3410
805
24,2
26,9
240,2
1,1
18,6
40,3
373,9
4,5
7,6
23,2
9,7

19,5
269,2
40,6
6,2
4,5
5,8
2096
49,9

2897
887
41,0
22,2
335,1
3,1
33,0
27,5
540
11,2
10,2
34,3
8,5

7977

9491

6349

6302

6474

6744

5685

5284

5565

7333

M = Mittelwert (mg/l) aus 4 bzw. 2 Einzelanalysen


= in Spuren (ca. 5 mg/l) vorhanden, nicht ausgewertet

89

3-M-2,3-DHBS = 3-Methyl-2,3-dihydroxybuttersure

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Lerninhalte

Lebensmittelanalytik

Ionenausschlusschromatographie

Welche Ionen knnen mittels Ionenaustauschchromatographie bestimmt werden?

Tabelle 49 Parameter Versuche 12a bis 12c


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1005.200 Metrosep Organic Acids


0.5 mmol/L H2SO4 / Aceton (85:15)
Wein
exp_12_o.mtw
orgacids.smt
0.5 mL/min
3 MPa
20 min
20 L
+

Eluentherstellung
0.5 mmol H2SO4 (850 mL) und Aceton (150 mL) mischen.
Probenvorbereitung
Probe 1:100 verdnnen, Wein filtrieren durch 45 m Filter.
Versuch 12a Bestimmung von Anionen in Weisswein

Chromatogramm 30

khv

Standard fr die Bestimmung von organischen Suren in Wein (versuch12.gif)

90

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 50 Komponenten Versuch 12a Standardlsung


Peak
1

2
3
4
5
6
7

Komponente
Citrat
Tartrat
Malat
Succinat
Lactat
Acetat
Systempeak

Chromatogramm 31
(versuch12a.gif)

tR [min]
7.2
7.5
8.3
9.9
10.8
13.1
15.9

Konz. [mg/L]
5
20
5
5
20
10

Bodenzahl
26200
7990
9210
7140
8830
11500

Area [S/cm*sec]
1.1
31
4.5
1.2
11
1.2

Bestimmung organischer Suren in Weisswein (Verdnnung 1:100)

Tabelle 51 Komponenten Versuch 12a Weisswein


Peak
1
2

4
7
8
9
10

Komponente
Citrat
Tartrat
Malat
Succinat
Lactat
Acetat
Systempeak

tR [min]
7.2
7.5
8.2
9.8
10.7
13.0
15.8

Konz. [mg/L]

Bodenzahl

Area [S/cm*sec]

1210

8430

19

350
2190
710

5660
8820
5200

0.8
13
0.8

Bemerkung
Peaks 3, 5, 6 nicht identifiziert

khv

91

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 12b Bestimmung von Anionen in Rotwein

Abbildung 34 Chromatogramm Bestimmung organischer Suren in Rotwein (Verdnnung 1:100)


(versuch12b.gif)
Tabelle 52 Komponenten Versuich 12b Rotwein
Peak
1
2

4
7
8
9
10

Komponente
Citrat
Tartrat
Malat
Succinat
Lactat
Acetat
Systempeak

tR [min]
7.2
7.5
8.2
9.9
10.8
13.1
15.9

Konz. [mg/L]

Bodenzahl

Area [S/cm*sec]

2230

8300

34

410
1560
1010

10500
9570
7950

1.0
8.9
1.1

Bemerkung
Peaks 3, 5, 6 nicht identifiziert; Citrat und Malat knnen nicht korrekt quantifiziert werden.

khv

92

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.6 Versuch 13 Bestimmung von Verunreinigungen in Borat Chlorid und Sulfat in Borax
Borax (Dinatriumtetraborat, Na2B4O710 H2O, Na2[B4O5(OH)4]8H2O) hat folgende Struktur:
OH
O
HO

B
O

B
O
B

O
B

2 Na

OH

8 H2O

OH
Abbildung 35 Borax (Dinatriumtetraborat, Na2B4O710 H2O, Na2[B4O5(OH)4]8H2O)
Borax lst beim Schmelzen zahlreiche Metalloxide unter Bildung charakteristischer Frbungen. Die
Boraxperle ist aus dem anorganischen Praktikum bekannt. Borax wird u. a. fr die Herstellung von
Glsern, Glasuren fr Steingut, Porzellan und als Flussmittel beim Hartlten verwendet. Bei 100C
verliert Borax 5 Wassermolekle und geht in das Pentahydrat Juwelierborax ber. Durch die
zugesetzten Ltflussmittel werden Oberflchenverunreinigungen berwiegend Oxidschichten
zerstrt. Sie wrden die oberflchliche Legierungsbildung zwischen Lot, dies sind Legierungen aus
Silber, Kupfer und Zinn, und dem Grundwerkstoff beeintrchtigen.
Fr die Bestimmung von Cl und SO42 wird die Boraxlsung auf einen pH-Wert < 4 eingestellt. Bei
diesem pH-Wert liegt praktisch ausschliesslich die Borsure H3BO3 oder (B(OH)3) vor. Die Borsure
ist eine sehr schwache, einbasige Sure, deren pKS-Wert mit 9.25 etwa dem von HCN entspricht.
Borsure ist kein H+-Donor (Brnsted-Suredefinition), sondern ein OH-Akzeptor (LewisSuredefinition).
+

H + B(OH)4

B(OH)3 + HOH

Die Ionenchromatographie ohne chemische Suppression verwendet fr die Bestimmung der


Verunreinigungen im Borat einen saure Eluenten mit einem pH = 4.1. Bei diesem pH liegt das Borat
als Borsure B(OH)3 vor. Die Borsure zeigt im Gegensatz zu den negativ geladenen Anionen keine
Interaktion mit der stationren Phase der Trennsule. Sie wird daher im Totvolumen eluiert.
Wird hingegen mit chemischer Suppression gearbeitet, so kommt der schwach alkalische Carbonat/Bicarbonateluent zum Einsatz. So ist es zwar mglich Borat als Anion zu trennen, jedoch schlgt die
Detektion fehl. Der Grund hierfr liegt im Suppressor. Dieser tauscht alle Na+-Ionen gegen H+-Ionen
aus. Es bildet sich die nur sehr schwach dissoziierte Borsure, die mit einem Leitfhigkeitsdetektor
nicht reproduzierbar bestimmt werden kann.
Lerninhalte

khv

Starke und schwache Suren

Vergleich zwischen Messungen mit elektronischer und chemischer Suppression

93

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 13a Messung ohne chemische Suppression (mit elektronischer Suppression)


Tabelle 53 Parameter Versuch 13a
Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


8 mmol/L Phthalsure, 2% Acetonitril; pH = 4.1 (TRIS)
Leitfhigkeit ca. 400 S/cm
1 g/L Borax in Reinstwasser aufgestockt mit 1 ppm Chlorid und Sulfat
exp_13_n.mtw
anonsupp.smt
0.5 mL/min
2 MPa
23 min
100 L
+

Eluentherstellung
1.33 g Phthalsure in 20 ml Acetonitril und etwas Wasser lsen, dann in entgastes Wasser geben und
auf 1 L auffllen. Durch Zugabe von TRIS (fest) (ca. 1 g) den pH-Wert auf 4.1 einstellen.

Chromatogramm 32 Borat aufgestockt mit 1 ppm Chlorid und 1 ppm Sulfat ohne chemische
Suppression (versuch13a.gif)
Tabelle 54 Komponenten Versuch 13a
Peak
1
2
3

Komponente
Chlorid
Sulfat
Systempeak

tR [min]
4.4
9.0
19

Konz. [mg/L]
1
1

Bodenzahl
2790
3270

Area [S/cm*sec]
12
8.4

Versuch 13b Messung mit chemischer Suppression


Tabelle 55 Parameter Versuch 13b

khv

94

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Sule
Eluent

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
1 g/L Borax aufgestockt mit 1 ppm Chlorid, Sulfat
exp_13_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
2 MPa
16 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt
Eluentherstellung

265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL


Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.

Chromatogramm 33
Suppression

Borat aufgestockt mit 1 ppm Chlorid und 1 ppm Sulfat mit chemischer

Tabelle 56 Komponenten Versuch 13b


Peak
1
2

khv

Komponente
Chlorid
Sulfat

tR [min]
5.4
13.7

Konz. [mg/L]
1
1

95

Bodenzahl
4170
3290

Area [S/cm*sec]
15
11

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.7 Versuch 14 Bestimmung von Anionen in Abwasser


Abwasser wird berwiegend in biologischen Klranlagen mit Hilfe von Bakterien gereinigt. Organische
Substanzen werden dabei unter Sauerstoffverbrauch weitgehend oxidiert.
Bakterien
CO2 + H2O + Zellmasse
Org. Substanzen + O2

Neben der Oxidation von organischen Substanzen kann bei entsprechender Auslegung der Anlage
auch Ammonium zu Nitrat oxidiert werden (Nitrifikation).
Bakterien
NO3- + H2O + 2 H+
NH4+ + 2 O2

In sauerstofffreien Becken benutzen Bakterien den Nitratsauerstoff zur Oxidation von organischen
Substanzen (Denitrifikation).
Bakterien
2 CO2 + 2 OH- + 2 H2O + N2
Org. Substanzen + 2 NO3-

Phosphat wie NH4+ und NO3 ein Pflanzennhrstoff kann z. B. durch Zusatz von Fe3+Salzlsungen ausgefllt werden. Neben den sogenannten Summenparametern Biochemischer
Sauerstoffbedarf (BSB), Chemischer Sauerstoffbedarf (CSB), Total Organic Carbon (TOC) die ein
Ma fr die organische Belastung des Abwassers bzw. auch Gewssers darstellen, ist also vor allem
die Analyse von NH4+, NO3-, PO43- wichtig. Cl, SO42 werden nur in Sonderfllen analysiert.
Fr kommunale Klranlagen von mehr als 100 000 sogenannten Einwohnergleichwerten (1
Einwohnergleichwert entspricht der Schmutzfracht eines Einwohners) sind die folgenden Grenzwerte
(D) festgelegt:
BSB
CSB
NH4-N
NGes
PO4-PGes

15 mg/l
75 mg/l
10 mg/l*
18 mg/l*
1 mg/l

( aus NH4-N, NO2-N, NO3-N)

Gilt nur fr Abwassertemperaturen 12 C, da die Nitrifikation stark durch die Temperatur beeinflusst
wird.
NH4-N, NO2-N, NO3-N bedeutet, dass sich die Werte auf den in den Ionen enthaltenen Stickstoff
beziehen, analoges gilt fr PO4-P.
Lerninhalte

khv

Umweltanalytik

Probenvorbereitungstechnik

Analytik von Substanzgemischen mit grossen Konzentrationsunterschieden dynamischer


Bereich

96

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 57 Parameter Versuch 14a und 14b


Sule
Eluent

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Herisau Abwasser
exp_14_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
2 MPa
15 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt
Eluentherstellung

265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL


Reinstwasser lsen und 20 mL Aceton zugeben.
Probenvorbereitung
Probe filtrieren
Versuch 14a Zulauf der Klranlage

Chromatogramm 34
(versuch14a1.gif)

Standardchromatogramm fr die Bestimmung des Klranlagenzulaufs

Tabelle 58 Komponenten Versuch 14a Standard


Peak
1

2
3
4

khv

Komponente
Chlorid
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
5.2
9.1
10.3
12.5

Konz. [mg/L]
100
2
5
100

97

Bodenzahl
3470
4330
3040
3820

Area [S/cm*sec]
2270
16
21
1470

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 35

Bestimmung des Klranlagenzulaufs (versuch14a2.gif)

Tabelle 59 Komponenten Versuch 14a Klranlagenzulauf


Peak
1

5
6
7

Komponente
Chlorid
Nitrat
Phosphat
Sulfat

tR [min]
5.2
9.2
10.3
12.5

Konz. [mg/L]
128
2.1
7.0
132

Bodenzahl
2980
4620
3040
3720

Area [S/cm*sec]
2910
16
30
1940

Bemerkungen
Peaks 2, 3, 4 und 8 nicht bestimmt

khv

98

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 14b Ablauf der Klranlage

Chromatogramm 36
(versuch14b1.gif)

Standardchromatogramm fr die Bestimmung des Klranlagenablaufs

Tabelle 60 Komponenten Versuch 14b Standard


Peak
1

2
3
4

khv

Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrat
Sulfat

tR [min]
3.6
5.2
9.1
12.5

Konz. [mg/L]
0.1
5
10
5

99

Bodenzahl
2900
4140
4210
3420

Area [S/cm*sec]
2.1
78
87
53

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 37

Bestimmung des Klranlagenablaufs (versuch14b2.gif)

Tabelle 61 Komponenten Versuch 14b Klranlagenablauf


Peak
1

2
4
5

Komponente
Fluorid
Chlorid
Nitrat
Sulfat

tR [min]
3.6
5.2
9.2
12.5

Konz. [mg/L]
0.05
7.3
8.5
6.8

Bodenzahl
2900
3870
4390
3460

Area [S/cm*sec]
1.1
114
73
71

Bemerkungen
Peak 3 nicht bestimmt

khv

100

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.8 Versuch 15 Fluorid in Zahnpaste


Zahnpasten sind aus unterschiedlichen Bestandteilen zusammengesetzt:
Wasser 30-40 %
Putzkrper sind unlsliche, anorganische Substanzen, die die Reinigungswirkung der Zahnbrste
verstrken. Die Partikelgrsse ist < 15 m. Verbreitete Putzkrper sind Al2O3, CaCO3, CaHPO42H2O,
SiO2H2O, Natriumaluminiumsilikat.
Fluorid verstrkt die Resistenz der Zahnschmelze gegen den Angriff von Suren, die von
bakteriellem Plaque (Zahnbelag) stammen. Ausserdem ermglichen Fluoride die Mineralisierung des
Zahnschmelzes (der anorganische Anteil des Zahnschmelzes besteht im wesentlichen aus
Calciumphosphat, Hydroxyapatit, Calciumcarbonat, Magnesiumphosphat, Calciumfluorid und
Calciumchlorid). Fluorid ist daher wichtig fr die Kariesprophylaxe. Die am meisten verwendeten
Fluor-Verbindungen sind Natriumfluorid, Natriummonofluorphosphat und quartre Ammoniumfluoride,
die ebenfalls freie Fluoridionen enthalten. In einigen Lndern wird Fluorid dem Trinkwasser zugesetzt.

OH
F

O- Na+

Natriummonofluorphosphat

Tenside (z. B. Natriumlaurylsulfat) erniedrigen die Oberflchenspannung und tragen zur


gleichfrmigen Verteilung der Zahnpasta bei. Sie verstrken die Reingungswirkung, besonders an
Stellen, die mit der Zahnbrste schwierig zu erreichen sind. Weitere Bestandteile von Zahnpasten sind
z. B.:
Feuchtemittel (z. B. Glycerin, Sorbit, Polyethylenglycol) verbessern die Stabilitt in der Klte und
verhindern das Austrocknen.
Binde- und Verdickungsmittel (z. B. Natriumcarboxymethylcellulose) verhindern die Trennung in
Feststoff und flssige Phase.
Sstoffe (z. B. Natriumsaccharin) verbessern den Geschmack der Zahnpasta.
Konservierungsmittel (z. B. 4-Hydroxybenzoesure) werden eingesetzt, um die Zahnpasta vor
mikrobieller Zersetzung zu schtzen.
Aromatisierungsmittel werden zugesetzt, um die Akzeptanz der Zahnpasta und das
Hygienebewusstsein zu erhhen. Verwendet werden u. a. Pfefferminzle, Menthol, Anisl,
Eucalyptusl, Gewrzle, Zitronenl.
Mit der ionenchromatographischen Analytik wird sowohl Fluorid aus Natriumfluorid wie auch
Natriummonofluorphosphat erfasst.
Bemerkung
Citrat eluiert auf der Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150) erst nach ca. 90 min.
Zur berprfung ob Citrat in der Zahnpasta vorhanden ist, wird in Versuch 15 b anstelle der Anion
Dual 1 die Vorsule Metrosep Anion Precolumn cartridge (6.1006.030) verwendet.
Lerninhalte

khv

Qualittskontrolle

Probenvorbereitung

101

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 15a Zahnpasta (1) ohne Citrat


Tabelle 62 Parameter Versuch 15a
Sule
Eluent

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Standard (Fluorid, Chlorid, Phosphat, Sulfat, Saccharin)
Zahnpasta
exp_15_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
50 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt
Herstellung des Eluenten

265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL


Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.
Probenvorbereitung
1 g Zahnpasta wird in 19 mL Reinstwasser gelst, danach durch einen 45 L Filter filtriert.

Chromatogramm 38

khv

Zahnpaste (1) ohne Citrat (Verdnnung 1:20)(versuch15a.gif)

102

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 63 Komponenten Versuch 15a


Peak
1

2
3
4
5
6
7
8

Komponente
Fluorid
Formiat
Chlorid
Systempeak
Monofluorphosphat
Phosphat
Sulfat
Saccharin

tR [min]
3.9
4.5
5.6
6.7
10.2
11.5
14.1
42.6

Konz. [mg/L]
1304
52
66

Bodenzahl
1357
1643
4325

Area [S/cm*sec]
1663
19.8
55.3

260
1346
160

4527
3047
3831
1917

3.1
55.4
880
179

Versuch 15b Zahnpasta (2) mit Citrat


Tabelle 64 Parameter Versuch 15b
Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt

6.1006.030 Metrosep Anion Precolumn cartridge


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Zahnpasta
exp_15b_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
3 MPa
25 min
20 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Eluentherstellung
265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL
Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.
Probenvorbereitung
1 g Zahnpasta wird in Reinstwasser gelst (Verdnnung 1:20), danach durch einen 45 L Filter filtriert.

khv

103

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 39

Zahnpaste (2) mit Citrat (Verdnnung 1:20)(versuch15b.gif)

Tabelle 65 Komponenten Versuch 15b


Peak
1
2

khv

Komponente
Saccharin
Citrat

tR [min]
8.2
16.2

Konz. [mg/L]
160
2600

104

Bodenzahl
510
267

Area [S/cm*sec]
177
360

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.9 Versuch 16 Anionen in braunem und weissem Zucker


Zucker sind organische Verbindungen mit einer Halbacetal-bildenden Carbonylgruppe und mehreren
Hydroxygruppen. Im allgemeinen Sprachgebrauch versteht man unter Zucker das Disaccharid
Saccharose.
CH2OH
O

H
OH

OH

OH

CH2OH

OH

OH

CH2OH

Abbildung 36 Disaccharid Saccharose


Fr die Herstellung von Zucker aus Zuckerrben werden diese zunchst gewaschen und geschnitzelt
und dann in sogenannten Diffusionsanlagen im Gegenstrom mit Wasser ausgelaugt. Dabei gehen die
lslichen Bestandteile Zucker, Salze, Suren, Proteine, Pektine in Lsung. Durch Zugabe von
gebranntem Kalk (CaO) wird der grte Teil der Nichtzuckerstoffe ausgefllt. Im Anschluss wird
Kohlendioxid CO2 zur Fllung des berschssigen Calciumhydroxids als CaCO3 verwendet. Nach
einer Filtration wird die Zuckerlsung in mehrstufigen Verdampfern zu Dicksaft aufkonzentriert,
filtriert und noch weiter eingedickt bis sich der Zucker als Weisszuckerfllmasse ausscheidet.
Dieser Zucker wird in Zentrifugen abgetrennt und nach Reinigung (Umkristallistaion) als schneeweier
Kristallzucker mit 99,95 % Reinheit erhalten. Als Zentrifugenablauf der letzten Stufe fllt ein
braungefrbter Sirup die Melasse an.
Brauner Zucker wird weniger intensiv gereinigt und u. U. durch Zusatz von Melasse eingefrbt. Er
enthlt neben Verunreinigungen Alkali- und Erdalkaliionen sowie Anionen und weist anderen
Geschmack als weier Kristallzucker auf.
Vor der Bestimmung von Anionen knnen diese Verunreinigungen mittels RP-Sule abgetrennt
werden.
Lerninhalte

khv

Lebensmittelanalytik

Prozesskontrolle

berprfung stark zuckerhaltiger Lebensmittel z.B. Honig

105

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 66 Parameter Versuch 15a und 15b


Sule
Eluent

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
a)
Brauner Zucker
b)
Weisser Zucker
exp_16_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
4 MPa
17 min
100 L
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt
Herstellung des Eluenten

265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL


Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 mL Aceton zugeben.
Probenvorbereitung
Zucker in Reinstwasser (Verdnnung 1:10) lsen und ber 0.45 m filtrieren.
Versuch 16a Brauner Zucker

Chromatogramm 40

khv

Standardlsung fr die Bestimmung von braunem Zucker (versuch16a1.gif)

106

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 67 Komponenten Versuch 16a Standardlsung


Peak
1

2
3
4
5
6
7

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Malat
Sulfat
Oxalat

Chromatogramm 41

tR [min]
5.3
6.9
9.6
10.7
12.1
13.0
14.9

Konz. [mg/L]
20

Bodenzahl
3640

Area [S/cm*sec]
2200

0.1
10
5
5
1

3700
3330
3430
3600
3220

3.9
245
62
294
40

Bestimmung von braunem Zucker (Verdnnung 1:10) (versuch16a2.gif)

Tabelle 68 Komponenten Versuch 16a brauner Zucker


Peak
1

2
3
4
5
6
7

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Phosphat
Malat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
5.4
7.2
9.7
10.8
12.2
13.0
14.9

Konz. [mg/L]
217

Bodenzahl
3480

Area [S/cm*sec]
2380

1.8
84
55
74
6.9

2870
3320
3840
3980
3530

7.0
205
68
435
28

Bemerkungen
Bei braunem Zucker knnen zu spteren Retentionszeiten Verunreinigungen eluieren, welche die
nachfolgenden Chromatogramme unter Umstnden stren knnten. Es ist deshalb ratsam erst den
weissen und dann den braunen Zucker zu vermessen.

khv

107

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 16b Weisser Zucker

Chromatogramm 42

Standardlsung fr die Bestimmung von weissem Zucker (versuch16b1.gif)

Tabelle 69 Komponenten Versuch 16b Standardlsung


Peak
1

2
3
4
5
6

khv

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Malat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
5.5
7.0
9.6
12.0
12.9
14.8

Konz. [mg/L]
0.1

Bodenzahl
4408

Area [S/cm*sec]
8.1

0.1
0.1
0.1
0.1

3682
3587
2995
3260

4.0
1.2
5.9
3.7

108

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 43

Bestimmung von weissem Zucker (Verdnnung 1:10) (versuch16b2.gif)

Tabelle 70 Komponenten Versuch 16b weisser Zucker


Peak
1

2
3
4
5
6

khv

Komponente
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Malat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
5.5
7.2
9.8
12.2
13.1
15.0

Konz. [mg/L]
1.3

Bodenzahl
4183

Area [S/cm*sec]
10.3

0.8
1.5
0.9
1.4

4157
2833
3404
3432

3.2
1.8
5.2
5.3

109

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.3.10 Versuch 17 Verunreinigungen im Wasserstoffperoxid


Reines Wasserstoffperoxid (H2O2) schmilzt bei 0.4 C und siedet bei 150 C. Es kann im Labor nur
unter hohem Sicherheitsaufwand durch fraktionierte Kristallisation rein hergestellt werden. Als
Industriechemikalie steht H2O2 als wssrige Lsung in Konzentrationen von 35, 50, 60 und 70 % zur
Verfgung. Die stark exotherme Zersetzung von H2O2 in H2O und O2 erfolgt nicht spontan, sie wird
jedoch durch Schwermetalle katalysiert.
2 H2O2

2 H2O + O2 + 196,2 kJ

Durch den Zusatz von Stabilisatoren werden die Schwermetallionen komplexiert. Die Zersetzung wird
so gehemmt. Die charakteristische Eigenschaft von H2O2 ist seine oxidierende Wirkung. Das
Normalpotential (E0) betrgt + 1.8 V bei pH = 0 und + 0,78 V bei einem pH = 14.
Wasserstoffperoxid zhlt zu den wichtigen Produkten der Grundstoffchemie mit einer
Jahresproduktion von 2,7 Millionen Tonnen. Es wird grosstechnisch durch Umsetzung von
Anthrahydrochinon mit O2 aus der Luft hergestellt. Dabei entsteht das entsprechende Anthrachinon
und H2O2. Anthrachinon wird durch elementaren Wasserstoff am Palladium-Katalysator wieder zu
Anthrahydrochinon reduziert und zurck in den Kreislauf gefhrt.
Ein Grossteil des H2O2 wird fr die Papier- und Zellstoffbleiche verwendet. In vielen Lndern ist die
Chlorbleiche (mit Cl2 oder ClO2), bei der biologisch schwer abbaubare chlorierte organische
Verbindungen ins Abwasser gelangen, ganz oder teilweise durch andere Verfahren ersetzt. Dabei hat
H2O2 eine grosse Bedeutung.
Weitere Anwendungsgebiete sind:
Enteisenung und Entmanganung von Trinkwasser
Entgiftung cyanidhaltiger Abwsser (CN CNO) z. B. Galvanikabwasser mit H2O2 oder H2O2/H2SO4
Die Kombination H2O2 und UV liefert HO-Radikale (Hydroxylradikale), die usserst starke
Oxidationsmittel sind (E0 = + 2,8 V). Sie sind daher fr die Reinigung spezieller Abwsser von
Interesse
Vielversprechend ist die Entwicklung eines Verfahrens zur Herstellung von Propylenoxid aus Propen
und H2O2 (Titanschichtkatalysatoren) anstelle des abwasserbelastenden Chlorhydrinverfahrens.
Unter den H2O2-Folgeprodukten sind Natriumperborat und Natriumpercarbonat am wichtigsten; sie
werden als Bleichmittel in Pulverwaschmittel eingesetzt.
H2O2 wird in der Elektronikindustrie bei der Herstellung gedruckter Schaltungen und zur Reinigung von
Silizium-Wafern verwendet.
Die Bestimmung von Verunreinigungen im H2O2 hat vor allem in der zuletzt angefhrten
Elektronikindustrie grosse Bedeutung. Schon kleinste Mengen (ng/L oder ppt) von Fremdionen
verschlechtern die Ausbeute an Wafern signifikant, da zum Beispiel Phosphat und Nitrat als nFehlstellen im Siliziumkristall wirken.
Lerninhalte

khv

Prozesskontrolle

Matrixeliminierung

Probenvorbereitung

Selektivitt unterschiedlicher Sulen

110

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 71 Parameter Versuch 17a und 17b


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt

6.1006.020 Metrosep Anion Dual 1 (3 x 150 mm)


2.4 mmol/L NaHCO3/ 2.5 mmol/L Na2CO3 + 2% Aceton
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 16 S/cm
Wasserstoffperoxid 30 %, suprapur
exp_17_s.mtw
asupp.smt
0.5 mL/min
2 MPa
17 min
1 mL auf METROSEP IC Anion Anreicherungssule 6.1006.300
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

Eluentherstellung
265 mg Natriumcarbonat (wasserfrei) und 201.5 mg Natriumhydrogencarbonat in 980 mL
Reinstwasser lsen und entgasen. Danach 20 ml Aceton zugeben.
Probenaufgabe
System mit Reinstwasser gut splen, dann 1 mL Probe aufgeben und mit 1 mL Reinstwasser splen.

Chromatogramm 44
(versuch_17.gif)

khv

Standardlsung fr die Bestimmung von Anionen in Wasserstoffperoxid

111

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 72 Komponenten Versuch 17 Standardlsung


Peak
1

2
3
4
5
5
6

Komponente
Acetat
Formiat
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
4.2
4.4
5.3
6.9
9.2
12.4
14.2

Konz. [g/L]
5
1
1

Bodenzahl
2620
2940
3300

Area [S/cm*sec]
108
222
587

0.1
0.5
0.1

3730
3160
3010

31
163
21

Versuch 17a Wasserstoffperoxid mit Matrixeliminierung

Chromatogramm 45
(versuch_17_a.gif)

Bestimmung von Wasserstoffperoxid (30 %) mit Matrixeliminierung

Tabelle 73 Komponenten Versuch 17a


Peak
2
3
5
6
7
8
10

Komponente
Acetat
Formiat
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
4.2
4.4
5.3
7.2
9.3
12.5
14.1

Konz. [g/L]
8.8
0.83
0.86

Bodenzahl
1780
2170
2960

Area [S/cm*sec]

0.15
0.44
0.05

4560
2520
2480

47
142
10

507

Bemerkung
Gefsse, Spritze und System mehrmals grndlich splen. Plastikgefsse verwenden. Unbedingt
Schutzbrille tragen! Peaks 1, 4 und 9 nicht quantifiziert.

khv

112

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Versuch 17b Wasserstoffperoxid ohne Matrixeliminierung

Chromatogramm 46
(versuch_17_b.gif)

Bestimmung von Wasserstoffperoxid (30 %) ohne Matrixeliminierung

Versuch 17c Bestimmung von Wasserstoffperoxid mit Matrixeliminierung auf einer


Hochleistungssule
Tabelle 74 Parameter Versuch 17c
Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Suppressor
Polaritt

khv

METROSEP A SUPP 5-250; 6.1006.530


1 mmol/L NaHCO3/ 3.2 mmol/L Na2CO3
Leitfhigkeit nach chemischer Suppression ca. 15 S/cm
Wasserstoffperoxid 30 %, suprapur
exp_17c_s.mtw
asupp5.smt
1.0 mL/min
11 MPa
30 min
6.1006.300 Metrosep Anreicherungssule
Regeneriermittel: 50 mmol/L H2SO4, Reinstwasser
Autostep mit Fill
+

113

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 47 Bestimmung von Wasserstoffperoxid (30 %) mit Matrixeliminierung auf der


METROSEP A SUPP 5 Sule (versuch_17_c.gif)
Tabelle 75 Komponenten Versuch 17c
Peak
3
4
6
7
8
10
13

Komponente
Acetat
Formiat
Chlorid
Systempeak
Nitrat
Sulfat
Oxalat

tR [min]
6.3
6.7
8.9
13.0
16.4
23.3
27.0

Konz. [g/L]
6.8
0.77
0.78

Bodenzahl
2850
8740
17810

Area [S/cm*sec]
219
123
380

0.15
0.35
0.04

19100
16640
12100

37
86
7.7

Bemerkung
Peaks 1, 2, 5. 9, 10, 11 und 12 nicht identifiziert

khv

114

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.4

Versuche fr die Bestimmung von Kationen

4.4.1 Versuch 18 Alkli- und Erdalkalimetalle in Trinkwasser und Mineralwasser


Natrliches Wasser enthlt neben den gelsten Gasen O2, N2 und CO2 auch Salze, die primr aus
Bden und Gesteinen herausgelst werden und so ins Trinkwasser gelangen. Verunreinigungen
durch Abwsser kommen ebenso als Quelle fr unterschiedliche Salze in Frage. Die wichtigsten Salze
sind Chloride, Sulfate und Hydrogencarbonate des Calciums und Magnesiums.
Ein wichtiger Parameter des Trinkwassers sowohl was den Gebrauch als Lebensmittel wie auch seine
Verwendung fr Waschprozesse oder industrielle Anwendungen betrifft, ist die sogenannte
Wasserhrte.
Unter Gesamthrte des Wassers versteht man die Summe der Stoffmengenkonzentration (mmol/l)
von Calcium- und Magnesiumionen. Den Teil der Hrte, der durch Kochen entfernt werden kann,
bezeichnet man als Carbonathrte (frher temporre Hrte). Die bleibende Hrte wird durch Sulfatund Chloridionen verursacht, deren Ca- und Mg-Salze nicht durch Kochen ausgefllt werden knnen.
Calcium- und Magnesiumionen bilden mit den klassischen Seifen Natriumsalze der Fettsuren
schwerlsliche Calcium- bzw. Magnesiumseifen. Diese sind zum einen wasch-unwirksam zum
anderen setzen sie sich als Grauschleier auf Textilien ab. Moderne Waschmittel enthalten
Alkylsukfate, die keine schwerlslichen Calcium- und Magnesiumsalze mehr bilden knnen. Diesen
Waschmitteln ausserdem noch zugesetzte Zeolithe fungieren als Ionentauscher und entfernen Ca2+
und Mg2+-Ionen. Die Fllung von schwerlslichem CaCO3 und basischem Magnesiumcarbonat beim
Erwrmen wird so wirkungsvoll verhindert.
Erhhte Zufuhr von Natriumionen bewirkt u. a. beim Menschen Bluthochdruck. Der tgliche Na+Bedarf von 1 g wird z. Zt. deutlich berschritten (3 7 g).
In der Trinkwasserverordnung (TVO), die eine Umsetzung der EG-Trinkwasserrichtlinie (80/778/EWG)
ist, sind u. a. folgende Werte fr die Kationen enthalten:
NH4+
Na+
K+
Mg2+
Ca2+

0,5
150
12
50
400

mg/l
mg/l
mg/l
mg/l
mg/l

Bei allen durchgefhrten Analysen mssen die Proben mit Salpetersure angesuert werden (pH 2.5
3.5), da ansonsten fr die zweiwertigen Kationen keine reproduizierbaren Resultate erhalten
werden.
Lerninhalte

khv

Untersuchung des Lebensmittels Nummer 1

berprfung der Angaben auf Mineralwasserflaschen

115

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 76 Parameter Versuche 18


Sule
Eluent

6.1010.210 Metrosep C2 100 x 4.0 mm 7 m


4 mmol/L Weinsure/ 0.75 mmol/L Dipicolinsure
Leitfhigkeit ca. 590 S/cm
Standard (Natrium, Ammonium, Kalium, Calcium, Magnesium +
2 mmol/L HNO3)

Leitungswasser (+ ca. 100 L 2 mol/L HNO3 auf 100 mL Probe)


bis pH = 2.5 ... 3.5)

Mineralwasser (+ ca. 100 L 2 mol/L HNO3 auf 100 mL Probe)


bis pH = 2.5 ... 3.5)
exp_18_c.mtw
cation.smt
1 mL/min
7 MPa
12 min
10 L
-

Probe

Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt
Herstellung des Eluenten

600 mg Weinsure und 125 mg Dipicolinsure in 100 mL Reinstwasser unter Erwrmen lsen, danach
mit Reinstwasser auf 1 L auffllen.

Chromatogramm 48

khv

Standardlsung (versuch_18.gif)

116

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 77 Komponenten Versuch 18 Standard


Peak
1

2
3
4

Komponente
Natrium
Kalium
Calcium
Magnesium

Chromatogramm 49

tR [min]
3.8
6.5
8.4
11.0

Konz. [mg/L]
0.5
0.2
20
5

Bodenzahl
4200
3090
1960
2700

Area [S/cm*sec]
1.5
0.9
66
34

Leitungswasser (Verdnnung 1:10) (versuch_18_a.gif)

Tabelle 78 Komponenten Versuch 18 Leitungswasser


Peak
1

2
3

khv

Komponente
Natrium
Calcium
Magnesium

tR [min]
3.8
8.7
11.2

Konz. [mg/L]
5
85
19

117

Bodenzahl
4840
2640
3520

Area [S/cm*sec]
1.4
29
13

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 50

Mineralwasser (Verdnnung 1:10) (versuch_18_b.gif)

Tabelle 79 Komponenten Versuch 18 Mineralwasser


Peak
1

2
3
4

Komponente
Natrium
Kalium
Calcium
Magnesium

tR [min]
3.7
6.4
8.3
10.9

Konz. [mg/L]
4.3
0.8
344
62

Bodenzahl
4190
6350
1520
2550

Area [S/cm*sec]
1.3
0.3
113
43

Bemerkungen
Smtliche Lsungen mssen in Kunststoffbehltern aufbewahrt werden. Fr eine korrekte NatriumBestimmung muss jeglicher Kontakt mit Glas vermieden werden. Der pH-Wert der Standard- und
Probelsungen muss zwischen 2.5 und 3.5 liegen.

khv

118

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.4.2 Versuch 19 Bestimmung der bergangsmetalle


Zur Trennung von bergangsmetallionen werden der mobilen Phase Komplexbildner zugesetzt. Sie
vermindern die Ladungsdichte und bewirken eine Verbesserung der Selektivitt der Trennung, die fr
bergangsmetallionen gleicher Ladung gering ist. Neben dem Gleichgewicht Austauscherharz /
Analytion liegt bei Zusatz von Komplexbildnern ein weiteres Gleichgewicht, nmlich Metallion /
Komplexbildner vor. Dieses Gleichgewicht wird ausserdem vom pH-Wert der Lsung beeinflusst.
Als Komplexbildner werden hufig schwache organische Suren verwendet, z. B. Weinsure,
Zitronensure, Oxalsure, Pyridin-2,6-dicarbonsure (Dipicolinsure vgl. Versuch 6 Vernderung
der Selektivitt mit Hilfe von Komplexbildnern auf Seite 63). Die Zahl der Liganden L um das
Zentralmetallion (Koordinationszahl) kann variieren, z. B. MeL, MeL2, MeL3. Auch die resultierende
Ladung kann unterschiedlich sein. Je nach Ladung des Metallions, der Liganden und deren Zahl
knnen kationische, neutrale und anionische Komplexe entstehen. Die Komplexe knnen daher an
Kationenaustauschern oder Anionenaustauschern getrennt werden. Theoretisch ist auch die
Verwendung von Austauschern mit Kationen- und Anionenaustauschergruppen mglich.
Durch Variation der Komplexbildner auch 2 verschiedene Komplexbildner knnen der mobilen
Phase zugesetzt werden und des pH-Wertes kann die Trennung beeinflusst und optimiert werden.
Die Einflsse sind zum Teil gegenlufig und schwer vorauszusagen. Im folgenden werden einige
allgemeine Hinweise gegeben:

Unterschiedliche
Trennung.

Der Zusatz eines organischen Lsungsmittels, z. B. Aceton zum Eluenten beeinflusst


ebenfalls die Trennung. Lipophile Ionen eluieren nach der Zugabe schneller.

In der Kationenaustauschchromatographie hat sich Ethylendiamin als eluierendes


Agens bewhrt. Es liegt bei den blichen Bedingungen als 2-fach protoniertes Kation
vor.

In der Kationenaustauschchromatographie bewirkt die Erhhung des pH-Werts ber


die Abnahme der Gesamtladung eine Abnahme der Retentionszeit.

In
der
Kationenaustauschchromatographie
wird
durch
Erhhung
der
Ligandenkonzentration in der mobilen Phase neben der Verschiebung des
Komplexgleichgewichts auch die Konzentration des Gegenions H+ oder Na+ erhht
und die Verdrngung des Komplexes von den negativ geladenen Austauscherpltzen
beschleunigt, d. h. die Trennleistung wird durch diesen Effekt geringer.

In
der
Anionenaustauschchromatographie
bewirkt
die
Erhhung
der
Ligandenkonzentration einerseits eine Zunahme der Retentionszeit, da sich die
Koordinationszahl der Komplexe erhht. Andererseits frdern die freien anionischen
Liganden die Elution der anionischen Metallkomplexe, so dass 2 gegenlufige Effekte
bezglich der Retentionszeit vorhanden sind.

Stabilitten

(Komplexbildungskonstanten)

beeinflussen

die

Die Detektion der Komplexe kann sowohl ber die Leitfhigkeit als auch photometrisch erfolgen.
Bei der Leitfhigkeitsdetektion kommt nur die Detektion ohne chemische Suppression in Frage, da
bei der Suppressorreaktion zum Teil schwer lsliche Hydroxide entstehen wrden.
Die photometrische Detektion wird i. a. nach einer Nachsulenderivatisierung durchgefhrt, bei der
ein zugesetzter Komplexbildner den ursprnglich vorhandenen (z. B. Weinsure, Oxalsure...)
verdrngt. Der neu gebildete und UV-oder VIS-absorbierende Komplex wird detektiert.
Lerninhalte

khv

Einfluss des Eluenten auf die Selektivitt

Komplexierung von bergangsmetallionen

119

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 80 Parameter Versuche 19a und 19b


Sule
Eluent

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1007.000 IC Kationensule Nucleosil 5SA (4 x 125 mm)


a)
4 mmol/L Weinsure, 0.5 mmol/L Zitronensure,
3 mmol/L Ethylendiamin, 5 % Aceton
Leitfhigkeit ca. 500 S/cm
b)
3.5 mmol/L Oxalsure
5 % Aceton
pH = 4 (ca. 120 L Ethylendiamin)
Leitfhigkeit ca. 350 S/cm
Standard
Leitungswasser
exp_19_c.mtw
nucleosil.smt
1.5 mL/min
13 MPa
a)
12 min
b)
13 min
100 L
-

Versuch 19a Bestimmung der bergangsmetalle mit einem Weinsure-, Zitronensure-,


Ethylendiamin- und Acetoneluenten
Eluentherstellung
600 mg Weinsure und 105 mg Zitronensure in Reinstwasser lsen. 200 L Ethylendiamin und 50
mL Aceton zugeben und auf 1 L auffllen.

Chromatogramm 51 Chromatogramm Standardlsung 1 fr die Bestimmung der


bergangsmetalle (Eluent a) (versuch_19_a_std_1.gif)

khv

120

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 81 Komponenten Versuch 19a Standardlsung 1


Peak
1

2
3
4
5
6

Komponente
Nickel
Zink
Kobalt
Eisen (II)
Calcium
Magnesium

tR [min]
3.4
4.4
5.6
8.1
9.8
10.8

Konz. [mg/L]
5
5
5
10
5
5

Bodenzahl
1020
5640
4370
6150
6340
6390

Area [S/cm*sec]
40
36
34
30
29
39

Chromatogramm 52 Standardlsung 2 fr die Bestimmung der bergangsmetalle (Eluent a)


(versuch_19_a_std_2.gif)

khv

121

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 82 Komponenten Versuch 19a Standardlsung 2


Peak
1
2

3
4
5
6

Komponente
Blei
Nickel
Zink
Kobalt
Cadmium
Mangan

tR [min]
2.9
3.4
4.3
5.6
8.6
9.9

Konz. [mg/L]
5
5
5
5
5
10

Bodenzahl
2680
930
5510
4310
6600
6270

Area [S/cm*sec]
8.6
43
37
34
15
45

Abbildung 37 Chromatogramm Bestimmung von Leitungswasser (Eluent a Verdnnung 1:10)


(versuch_19_a_probe.gif)
Tabelle 83 Komponenten Versuch 19a Leitungswasser
Peak
1
2
3

Komponente
Zink
Calcium
Magnesium

tR [min]
4.2
9.8
10.6

Konz. [mg/L]
0.12
9.0
1.9

Bodenzahl
6360
5750
7460

Area [S/cm*sec]
0.9
53
17

Versuch 19b Bestimmung der bergangsmetalle mit einem Oxalsure-, Ethylendiamin-,


Acetoneluenten
Eluentherstellung
315 mg Oxalsure in Reinstwasser lsen, 50 mL Aceton zugeben und mit Reinstwasser auf 1 L
auffllen. Mit Ethylendiamin (ca. 120 L) auf pH = 4 einstellen.

khv

122

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 53 Standardlsung fr die Bestimmung der bergangsmetalle (Eluent b)


(versuch_19_b_std.gif)
Tabelle 84 Komponenten Versuch 19b Standard
Peak
1
2
3
4

Komponente
Eisen
Mangan
Magnesium
Calcium

tR [min]
2.2
4.0
7.5
12.3

Konz. [mg/L]
10
10
5
5

Bodenzahl
2110
1830
3110
6000

Area [S/cm*sec]
50
110
98
45

Chromatogramm 54 Bestimmung von Leitungswasser (Eluent b, Verdnnung 1:10)


(versuch_19_b_probe.gif)

khv

123

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 85 Komponenten Versuch 19b Leitungswasser


Peak
1
2

Komponente
Magnesium
Calcium

tR [min]
7.3
12.4

Konz. [mg/L]
41
83

Bodenzahl
4690
4780

Area [S/cm*sec]
2.1
9.1

Bemerkung
Calcium und Mangan coeluieren bei der Verwendung von Eluent a. Mit Eluent b sind Calcium und
Mangan getrennt, Nickel, Zink und Kobalt werden stark komplexiert und eluieren im Wasserpeak.

khv

124

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.4.3

Versuch 20 Verunreinignungen im Silikagel Bestimmung von Calcium- und


Magnesiumionen
Silicagel (Kieselgel) wird z. B. durch Hydrolyse von Natriumsilikat und dessen weitgehende
Entwsserung hergestellt und weist die folgende Struktur auf:

O
Si

O
O

Si
O

Si

OH

Si

O
Si

OH

OH
Neben seiner Verwendung als technisches Adsorptionsmittel wird Silicagel sowohl in der
Gaschromatographie wie auch in der Hochdruckflssigchromatographie eingesetzt.
In der Gaschromatographie wurden zunchst in geringem Ausmass auch noch heute
ausschliesslich gepackte Sulen eingesetzt. Dabei wird eine flssige Phase, z. B. Siliconl auf einen
krnigen Trger, z. B. Silicagel aufgebracht. Die Trennstufenzahl dieser Sulen ist im Vergleich zur
Trennstufenzahl der heute berwiegend verwendeten Kapillarsulen gering.
Im Bereich der Hochdruckflssigchromatographie (HPLC) wird Silicagel als stationre Phase fr
Adsorptions-, Umkehr- (Reversed Phase, RP), Normalphasen- und Ionenchromatographie eingesetzt.
Auch in der Adsorptionschromatographie dient Silicagel neben Al2O3 als stationre Phase. Die
chromatographische Trennung beruht auf Dipol-induzierten Dipolbindungen, Dipol-Dipolbindungen,
Wasserstoffbrckenbindungen und -Komplexbindungen. Die Adsorptionschromatographie wird zur
Trennung unpolarer Substanzen, die sich in Wasser schlecht lsen, eingesetzt.
Fr die RP-Chromatographie werden die freien Silanolgruppen des Silicagels durch chemische
Bindung von Octyl- oder Octadecylgruppen hydrophobiert, z. B.
CH3

CH3
Si

OH + Cl

Si

Si

CH3
Abbildung 38 Silcagel
C18H37)

Si

CH3
+

Chlorsilan

R = (C8H17 bis

Bei dieser Umsetzung verbleiben freie Restsilanolgruppen, die polare Verbindungen adsorbieren und
zu Peak-tailing fhren knnen. Diese Restsilanolgruppen lassen sich mit Trimethylchlorsilan
deaktivieren End capping.
In der Normalphasenchromatographie werden polare Reste an die Silanolgruppen chemisch
gebunden, z. B:
(CH2)n C

N oder

(CH2)n NH2 (fr die Zuckeranlaytik).

Mit dieser polaren stationren Phase wird eine wenig polare oder unpolare mobile Phase fr die
chromatographische Trennung eingesetzt. In der RP-Chromatographie, die ca. 75 % aller HPLCAnwendungen ausmacht, sind die Polaritten vertauscht und eine unpolare stationre Phase wird mit
einer polaren mobilen Phase verwendet. Der Name Umkehrphase bzw. Reversed Phase ist somit rein
historisch begrndet, da diese Methode erst spter entwickelt wurde.
In der Ionenchromatographie wird Kieselgel, an das Sulfonsuregruppen gebunden sind, als
Kationenaustauscher fr die Analyse divalenter Kationen eingesetzt.
Fr den Einsatz von Silicagel in der Chromatographie ist die Verunreinigung mit Metallionen von
Bedeutung, da diese zu unspezifischen Wechselwirkungen bzw. Blindwerten fhren. Zur Analyse
dieser Verunreinigungen wird ein stark saurer Kationenaustauscher verwendet, bei dem die

khv

125

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

monovalenten Kationen im Totvolumen eluieren und nur die divalenten Kationen getrennt werden
knnen. Fe(III) muss vor der Analyse durch Ascorbinsure zu Fe(II) reduziert werden.
Lerninhalte

Qualittskontrolle

Zusatzversuch: Spiken des Extraktes mit Fe(III);


Bestimmung mit und ohne Zugabe von Ascorbinsure (Vitamin C)

Tabelle 86 Parameter Versuch 20


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1007.000 IC Kationensule Nucleosil 5SA (4 x 125 mm)


4 mmol/L Weinsure, 0.5 mmol/L Zitronensure,
3 mmol/L Ethylendiamin, 5 % Aceton
Leitfhigkeit ca. 500 S/cm
Silikagel (Lsung 5 %)
exp_20_c.mtw
nucleosil.smt
1.5 mL/min
13 MPa
12 min
100 L
-

Eluentherstellung
600 mg Weinsure und 105 mg Zitronensure in Reinstwasser lsen. 200 L Ethylendiamin und 50
mL Aceton zugeben und auf 1 L auffllen.

Chromatogramm 55
20a.gif)

khv

Standardlsung fr die Bestimmung von Kationen in Kieselgel (versuch

126

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 87 Komponenten Versuch 20 Standardlsung


Peak
1

Komponente
Calcium
Magnesium

Chromatogramm 56

tR [min]
9.6
10.5

Konz. [mg/L]
0.5
0.1

Bodenzahl
6990
7260

Area [S/cm*sec]
3.1
0.7

Bestimmung von Kationen in Kieselgel (versuch20b.gif)

Tabelle 88 Komponenten Versuch 20 Kieselgel


Peak
1

khv

Komponente
Calcium
Magnesium

tR [min]
9.7
10.6

Konz. [mg/L]
9.4
1.4

127

Bodenzahl
6850
10100

Area [S/cm*sec]
2.9
0.4

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.4.4

Versuch 21 Kosmetik und Korrosionsschutz: Bestimmung von Ethanolamin und


Alkalimetallen
Die nachfolgenden drei Ethanolamine, deren systematische Namen Aminoethanol, Iminodiethanol und
Nitrilotriethanol sind, werden durch Umsetzung von Ammoniak und Ethylenoxid hergestellt.

H2N

CH2

CH2

OH

Abbildung 39 Monoethanol
amin

CH2

CH2

OH

CH2

CH2

OH

HO

CH2

CH2

CH2

CH2

OH

CH2

CH2

OH

Abbildung 40 Diethanolamin Abbildung 41 Triethanolamin

Alle 3 Substanzen werden u. a. zur Entfernung von CO2 und H2S aus Gasgemischen verwendet, z. B.
zur Kohlendioxidentfernung aus Synthesegas und bei der Ammoniaksynthese oder aber fr die
Entfernung von Schwefelwasserstoff aus Raffineriegasen.
NR3 + H2O + CO2

HNR3 + HCO3

Bei hherer Temperatur wird CO2 wieder freigesetzt und das Ethanolamin NR3 in den
Absorptionsprozess zurckgefhrt.
2NR3 + H2S

(HNR3)2S

Das bei hherer Temperatur wieder freigesetzte H2S wird in Claus-Anlagen zu flssigem Schwefel
oxidiert, der ber SO2 und SO3 zur Schwefelsure umgesetzt wird.
Monoethanolamin (MAK-Wert 3 ppm) wird als Fettsureester in Tensiden verwendet. Diethanolamin
kommt in Mbel- und Bodenpflegemitteln, Schuhcremes und Schmiermittel zum Einsatz.
Triethanolamin bildet mit Fettsuren Triethanolaminseifen, z. B. mit Stearinsure C18H35COOH. Diese
sind in Wasser und Minerallen leicht lslich und werden deshalb als Emulgatoren verwendet. Des
weiteren knnen sie in kosmetischen Zubereitungen (z. B. Rasierschaum) enthalten sein. In
Kraftwerken werden sie als Korrosionsinhibitoren eingesetzt, da sie einen schwach alkalischen pHWert stabilisieren und berschssige H+-Ionen wegpuffern.
Fr die ionenchromatographisch Bestimmung werden die Ethanolamine durch Surezusatz protoniert
und knnen so als Ammoniumderivate nachgewiesen werden.
Lerninhalte

khv

Bestimmung von anorganischen und organischen Kationen

Selektivittsnderung durch Zugabe von Komplexbildnern

128

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 89 Parameter Versuch 21a bis 21c


Sule
Eluent

Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1010.210 Metrosep C2 100 x 4.0 mm 7 m


a ) 4 mmol/L Weinsure/ 0.75 mmol/L Dipicolinsure Leitfhigkeit ca.
600 S/cm
b) 4 mmol/L Weinsure/ 0.5 mmol/L Dipicolinsure Leitfhigkeit ca.
570 S/cm
Ethanolamin, Triethanolamin + Standardkationen
exp_21_c.mtw
cation.smt
1 mL/min
6 MPa
a) 10 min
b) 13 min
c) 14 min
10 L

Eluentherstellung
a) 600 mg Weinsure und 125 mg Dipicolinsure in 100 mL Reinstwasser unter Erwrmen lsen,
danach mit Reinstwasser auf 1 L auffllen.
b) 600 mg Weinsure und 84 mg Dipicolinsure in 100 mL Reinstwasser lsen, danach mit
Reinstwasser auf 1 L auffllen.

Chromatogramm 57

khv

Standard 1 Eluent a (versuch_21_a.gif)

129

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 90 Komponenten Versuch 21a Standard 1 (Eluent a)


Peak
1

2
3
4
5

Komponente
Natrium
Ammonium
Monoethanolamin
Kalium
Triethanolamin

Chromatogramm 58

khv

tR [min]
3.8
4.3
4.9
6.4
9.0

Konz. [mg/L]
2
2
7
5
20

Bodenzahl
4520
4340
4120
3070
2230

Area [S/cm*sec]
6.8
6.8
10.8
7.9
6.9

Standard 2 Eluent a (versuch_21_b.gif)

130

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 91 Komponenten Versuch 21 Standard 2 (Eluent a)


Peak Komponente
1
Natrium
2
Ammonium
3
Monoethanolamin
4
Kalium
5
Calcium + Triethanolamin
6
Magnesium

Chromatogramm 59

tR [min]
3.7
4.3
4.9
6.4
8.7
11.0

Konz. [mg/L]
2
2
7
5
5 + 20
5

Bodenzahl Area [S/cm*sec]


4500
7.2
4190
7.0
4380
9.8
2930
8.6
2070
24
2970
32

Standard 2 Eluent b (versuch_21_c.gif)

Tabelle 92 Komponenten Versuch 21 Standard 2


Peak
1

2
3
4
5
6
7

Komponente
Natrium
Ammonium
Monoethanolamin
Kalium
Triethanolamin
Calcium
Magnesium

tR [min]
3.9
4.5
5.1
6.6
9.3
10.8
12.2

Konz. [mg/L]
2
2
7
5
20
5
5

Bodenzahl
4700
4110
4400
2920
2400
3240
2820

Area [S/cm*sec]
7.2
7.0
9.6
8.4
7.3
16
32

Bemerkungen
Bei Verwendung von Eluent a koeluieren Calcium und Monoethanolamin.
Smtliche Lsungen mssen in Kunststoffbehltern aufbewahrt werden. Fr eine korrekte NatriumBestimmung muss jeglicher Kontakt mit Glas vermieden werden. Der pH-Wert der Lsungen muss
zwischen 2.5 und 3.5 liegen.

khv

131

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

4.4.5 Versuch 22 Alkali- und Erdalkalimetalle im Wein


Die Mineralstoffe des Mostes sind vor allem Phosphate des Calciums, Magnesiums und Kaliums. Die
Konzentrationen dieser Verbindungen betragen 3 5 g/L. Der Mineralstoffgehalt, auch als Asche
bezeichnet, des Weins ist niedriger als der des Mostes, da ein Teil der Mineralstoffe im Stoffwechsel
der Hefe aufgenommen wird. Ausserdem wird der Mineralstoffgehalt durch die Abscheidung
weinsaurer Salze vermindert. Weine enthalten daher nur etwa 1.8 2.5 g/L Asche. Wichtige
kationische Bestandteile werden als Oxide angegeben und sind K2O (ca. 40 %), MgO (ca. 6 %), CaO
(ca. 4 %) und Na2O (ca. 2 %).
(Vgl. Versuch 12 Anionen im Wein, Seite 88)
Lerninhalte

Lebensmittelanalytik

Prozessanalytik Kontrolle der Weinsurefllung

Tabelle 93 Parameter Versuch 22


Sule
Eluent
Probe
Methode
System
Fluss
Druck
Analysendauer
Loop
Polaritt

6.1010.210 IC-Kationensule Metrosep C2 100/4.0 - 7 m


4 mmol/L Weinsure/ 0.75 mmol/L Dipicolinsure
Leitfhigkeit ca. 600 S/cm
Standard (Natrium, Kalium, Calcium, Magnesium + 2 mmol/L HNO3)
Rotwein (Pinot Noir, Schweiz), Weisswein (Fechy, Schweiz)
exp_22_c.mtw
cation.smt
1 mL/min
6 MPa
20 min
10 L
-

Eluentherstellung:
600 mg Weinsure und 125 mg Dipicolinsure in 100 mL Reinstwasser unter Erwrmen lsen, danach
mit Reinstwasser auf 1 L auffllen.
Probenvorbereitung:
Proben filtrieren und verdnnen (1:10).

khv

132

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 60

Standardlsung fr die Bestimmung von Kationen in Wein (versuch22.gif)

Tabelle 94 Komponenten Versuch 22 Standard


Peak
1

2
3
4

Komponente
Natrium
Kalium
Calcium
Magnesium

tR [min]
3.7
5.9
8.6
10.8

Konz. [mg/L]
1
100
5
10

Bodenzahl
4360
1480
2950
2150

Area [S/cm*sec]
3.5
180
16
66

Bemerkung
Smtliche Lsungen mssen in Kunststoffbehltern aufbewahrt werden. Fr eine korrekte NatriumBestimmung muss jeglicher Kontakt mit Glas vermieden werden. Der pH-Wert der Standard- und
Probelsungen muss zwischen 2.5 und 3.5 liegen.

khv

133

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Chromatogramm 61

Bestimmung von Kationen in Weisswein (Verdnnung 1:10) (versuch22a.gif)

Tabelle 95 Komponenten Versuch 22 Weisswein


Peak
1

5
6
8

Komponente
Natrium
Kalium
Calcium
Magnesium

tR [min]
3.7
6.0
8.6
11.0

Konz. [mg/L]
24
590
72
59

Bodenzahl
4220
1860
2920
2880

Area [S/cm*sec]
8.4
106
23
39

Bemerkung
Peaks Nr. 2, 3, 4 und 7 sind nicht bestimmt.

Chromatogramm 62
khv

Bestimmung von Kationen in Rotwein (Verdnnung 1:10) (versuch22b.gif)


134

22/12/2000

Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

Tabelle 96 Komponenten Versuch 22 Rotwein


Peak
1

6
8
10

Komponente
Natrium
Kalium
Calcium
Magnesium

tR [min]
3.7
5.8
8.6
10.8

Konz. [mg/L]
10
1380
50
80

Bodenzahl
2000
1300
3030
2520

Area [S/cm*sec]
3.6
248
16
53

Bemerkung
Peaks Nr. 2, 3, 4, 5, 7 und 9 sind nicht bestimmt.

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Praktikum der Ionenchromatographie Version 12

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