CENTRO INTERDISCIPLINARIO DE CIENCIAS DE LA SALUD SANTO TOMS

DEPARTAMENTO DE FORMACIN BSICA INTERDISCIPLINARIA

BIOQUMICA

MTODOS CUALITATIVOS PARA LA DETERMINACIN DE

BIOMOLECULAS
OBJETIVOS:
Determinar mediante mtodos cualitativos la
presencia de carbohidratos, lpidos, protenas y
enzimas.
Reconocer la composicin qumica de los
reactivos que se utilizan en la identificacin de
las biomolculas.
Investigar las reacciones que se producen en
la identificacin de las biomolculas
MATERIALES:
Tubos de ensayos
Pipetas
Gradillas para tubos de ensayo
Mechero
Pinzas para tubo de ensayo
Reactivo de Fenhilg
Solucin de glucosa al 3%
Lugol
Hidrxido de sodio al 10%
Sulfato de cobre al 0.5%
Sudan III o IV
Bao de mara
Agua destilada
Solucin reactivo de almidn al
1%

Levadura activa
Almidn
Macerado de pan
Solucin de clara de huevo
Solucin de grenetina
Suero fisiolgico
Aceite vegetal
Grasa animal
Suspensin de levadura activa
Papel filtro
Colores

Prueba para monosacaridos

POLISACRIDOS:
PROCEDIMIENTO

a) Haga una suspensin acuosa de

b)

PRCTICA # 1
DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS:

MONOSACRIDOS:

c)

PROCEDIMIENTO:

a) En un tubo de ensayo se vierten

5ml del reactivo Fehling A y B y se
calienta hasta ebullicin. No debe
cambiar de color.
b) Se aade al mismo tubo de ensayo
1ml de una solucin de glucosa y
se calienta hasta ebullicin. Qu
color aparece? Una turbidez verde
indica de 0.1 a 0.3% de azcar
reductor, y un precipitado rojo
naranja o rojo ladrillo, indica que la
concentracin de azcar supera el
1.5%.
c) Macere un pedacito de muestra y
adicinela a un tubo de ensayo que
contiene 5 ml de reactivo de
Fehling A y B Caliente hasta
ebullicin. Nota algn cambio?

Analice sus resultados y saque

conclusiones

d)
e)

almidn y vierta en un tubo de

ensayo 2 ml de ella.
Agrguele a la anterior solucin
dos gotas de solucin de lugol.
Qu cambio se experimenta?
Anote los resultados.
Caliente hasta ebullicin esta
solucin por dos minutos, Se
experimenta algn cambio?
Deje el tubo de ensayo en reposo
hasta que se enfre. Qu
sucede?
Deposite dos gotas de lugol en una
solucin acuosa de un macerado
de pan, Qu sucede? Saque
conclusiones

Determinacin de Almidn

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MTODOS CUALITATIVOS PARA LA DETERMINACIN DE

BIOMOLECULAS

PRCTICA # 2
DETERMINACIN DE PROTENAS
PROCEDIMIENTO:
a) Diluya la clara de huevo en 50ml
de suero fisiolgico o en agua.

b) A 1ml de la solucin anterior se

aaden dos gotas de sulfato de
cobre al 0.5% y 1ml de hidrxido
de sodio al 10%, Se produce
algn cambio?
c) En un tubo de ensayo, coloque 2ml
de solucin de gelatina sin sabor, y
proceda como en el caso anterior.
Agregue dos gotas de sulfato de
cobre y 1ml de hidrxido de sodio
agite y anote los resultados.

Determinacin de Lpidos

PRCTICA # 4
DETERMINACIN DE ACTIVIDAD
ENZIMATICA:

PROCEDIMIENTO
a) En un tubo de ensayo limpio y seco

b)

c)
d)
Determinacin de Protenas
PRCTICA # 3
DETERMINACIN DE LPIDOS:

e)

PROCEDIMIENTO

a) Coloque en un tubo de ensayo

3ml de agua. Agregue una pizca
del reactivo Sudan III agite y
observe, anote los resultados.
b) En el mismo tubo de ensayo
adicione 1ml de aceite vegetal,
agite nuevamente y deje en
reposo por unos minutos. Luego
observe y anote los resultados.
c) En otro tubo de ensayo coloque
2ml de grasa animal y agregue una
pizca de Sudan III. Si la grasa est
solidificada caliente un poco para
derretirla. Agite y anote los
resultados, comparndolos con los
del
tubo
anterior.
Saque
conclusiones.

f)

coloque un embudo pequeo con

papel filtro. Enjuguese la boca con
suero fisiolgico y descarte.
S es necesario mastique un trocito
de parafina y/o chicle y la saliva
secretada
virtala
sobre
el
embudo, recogiendo la saliva
filtrada en el tubo.
Coloque, en una serie de 5 a 10
tubos de ensayo, dos gotas de
lugol en cada uno.
En otro tubo coloque 10mL de
suspensin acuosa de almidn y
aadale 1ml de saliva y agite.
Cada 20 segundos pase 1mL de la
mezcla almidn ms saliva a cada
uno de los tubos de la serie, hasta
que no se produzca coloracin.
Observe la variacin de los colores
a lo largo de la serie.
Caliente a ebullicin otra muestra
de saliva y repita todo el
experimento.

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BIOMOLECULAS

CUESTIONARIO:
1.
2.
3.
4.

Qu es un azcar reductor?
Cite ejemplos de azucares reductores y no reductores
Cules son los componentes del reactivo de Benedict?
Qu reaccin se produce cuando se calienta el tubo de ensayo que contiene
el reactivo de Benedict y glucosa?
5. Cul es la naturaleza del precipitado de color rojo ladrillo que se forma en la
anterior reaccin?
6. Cul es la composicin qumica del lugol?
7. A qu se debe la desaparicin del color azul violceo de la solucin de
almidn cuando se calienta hasta ebullicin?
8. Por qu aparece nuevamente el color cuando la anterior solucin se enfra?
9. En qu consiste la reaccin del Biuret?
10. En qu consiste la reaccin xantoproteica?
11. Qu es el Sudan III?
EL REPORTE POR PRCTICA DEBE INCLUIR (POR EQUIPO):

OBSERVACIONES

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

BIBLIOGRAFIA: http://academic.uprm.edu/~jvelezg/labmoleculas.pdf