INTRODUCCIN

Una protena bacteriana es una protena que puede ser parte de la estructura de una
bacteria, o producida por una bacteria, como parte de su ciclo de vida
Las protenas estn formadas por una cadena de aminocidos con una secuencia
particular. La naturaleza de una protena est determinada tanto por la cadena de
aminocidos, como por la forma en que se pliega la protena.
En funcin de las diferentes capacidades de la bacteria, sus protenas tendrn
caractersticas modificadas, as, por ejemplo, en las bacterias termfilas el plegamiento
est reforzado por un mayor nmero de puentes de hidrgeno, puentes salinos y dems
(como t bien dices), otros factores que ayudan a la estabilidad de las protenas termofilas
es que la presencia de aminoacidos sensibles al calor es menor.
Adems de ser una estructura nica, una protena bacteriana tambin tiene la capacidad
de unirse con otras protenas. La unin a protenas implica la formacin de vnculos muy
fuertes entre dos protenas diferentes. Una vez que las protenas se unen, pueden
desencadenar una reaccin que puede variar de una respuesta del sistema inmune a una
infeccin a la aparicin de una enfermedad.
Una protena bacteriana puede ser txico, causando la enfermedad o la muerte en un
organismo que ha sido infectado por la bacteria, las protenas y bacterias tambin pueden
unirse a protenas especficas del cuerpo para causar una variedad de sntomas.
De la misma forma, esta especificidad de las protenas bacterianas permiten que los
investigadores desarrollen inhibidores de stas, actuando como antimicrobianos o
antibiticos.
Las bacterias comensales, habitan el intestino, ejercen una funcin beneficiosa al marcar
los patgenos activando el sistema inmune humano para su eliminacin.
H. pylori y el cncer de estmago ahora se han vinculado inequvocamente.
La nueva investigacin determin que la protena de virulencia llamada Cag A, que puede
desarrollar cepas de Cag A positivo H. pylori, es una de las principales armas que el
patgeno utiliza en la produccin de sus efectos. La molcula se inserta en las clulas
que recubren la pared estomacal, donde comienza a secuestrar diversas vas qumicas.
En ltima instancia, se modifica la funcin de las clulas, y, a continuacin, la celda por s
mismo puede convertirse en cancerosa. El equipo UIUC (Illinois, Urbana-Champaign)
tambin encontr que la Cag A puede destruir la protena importante de supresin de
tumor llamada RUNX3, que desempea un papel muy importante en combatir el
desarrollo del cncer de estmago. De hecho la inactivacin de esta protena est
directamente relacionada con el desarrollo de tumores gstricos.

La importancia de la produccin protica bacteriana controlada en medicina ve uno de sus

mayores exponentes en la insulina, producida por los microorganismos ha reemplazado
las preparaciones antiguas que provenan de la vaca y de cerdo. Estas insulinas adems
eran diferentes de la protena humana por tanto antignicas. Tambin se han producido la
hormona del crecimiento, anticuerpos y vacunas.
En el propsito mdico del cultivo bacteriano es frecuente encontrar bacterias
transgnicas.
Para producir una bacteria transgnica, se introduce un plsmido que contiene el transgen
y una secuencia que sirve para la seleccin de las bacterias transformadas. El mtodo
utilizado es descrito a propsito del plsmido.
Si la bacteria retiene el plsmido y si la protena que expresa el transgen no es txica para
su desarrollo, se obtiene una bacteria transgnica, con nuevas caractersticas
determinadas por el gen introducido. La bacteria ms utilizada es la Escherichia Coli ( E.
Coli).
Para ser activas, muchas protenas deben ser glicosiladas.
Los procariontes fueron considerados por mucho tiempo incapaces de glicosilar protenas,
ya que esta actividad, en eucariontes, se lleva a cabo en el retculo endoplsmico y
aparato de Golgi, orgnulos que los procariontes no tienen. Sin embargo, la presencia de
protenas glicosiladas ya ha sido demostrada en los dominios Bacteria y Arquea, lo
queresalta su gran importancia biolgica.
Por su inters biomdico, la caracterizacin de protenas glicosiladas, as como el estudio
de sus mecanismos de glicosilacin se ha inclinado ms hacia las bacterias patgenas.
Algunas de las bacterias donde se ha reportado la presencia de protenas glicosiladas son
Campylobacter spp. (causa diarrea), siendo Campylobacter jejuni un patgeno que infecta
la mucosa del intestino humano y agente causal de gastroenteritis en todo el mundo.
Helicobacter pylori, patgeno que infecta la mucosa gstrica causando ulceraciones,
Treponema pallidum, agente causal de la sfilis, Pseudomonas aeruginosa, bacteria que
infecta individuos inmunodeprimidos y a pacientes con fibrosis qustica y Mycobacterium
tuberculosis, agente causal de la tuberculosis, muy comn en pacientes
inmunodeprimidos por la infeccin con VIH.
En general, las protenas glicosiladas en bacterias se encuentran siempre expuestas en la
superficie de las clulas, por lo que su funcin biolgica podra tener un importante papel
en la patognesis. Recientes estudios han demostrado el papel de la glicosilacin en la
adhesin, en la proteccin contra la degradacin proteoltica, en el incremento de la

solubilidad, en la variacin antignica, en el ensamble de protenas y en la proteccin

contra el sistema inmune.
Otra aplicacin beneficiosa de las protenas bacterianas es la elaboracin de pesticidas,
que constan de una mezcla de esporas de la bacteria y de sus protenas, en forma
cristalina, todo ello acompaado de diversos ingredientes como fotoprotectores, geles y
espumas.
TABLA EJEMPLO DE APLICACIONES DE LA SNTESIS PROTICA BACTERIANA
SNTESIS DE PROTENAS
La diferencia ms importante con la sntesis eucariota es que los genes bacterianos
relacionados con una misma funcin gentica suelen estar agrupados de forma contigua,
formando una unidad de transcripcin y de regulacin gentica que se denomina opern.
TRANSCRIPCION
La transcripcin es la fase que produce copias del mensaje codificado en el ADN en forma
de ARN mensajero. Las enzimas que realizan este proceso se denominan genricamente
ARN-polimerasas.
Durante la transcripcin la ARN polimerasa emplea las reglas de emparejamiento de
bases entre los desoxirribonucletidos del ADN-molde y los ribonucletidos que va
incorporando al ARN:
Estos emparejamientos son transitorios (mientras est actuando la ARN polimerasa). El
resultado final es una cadena de ARN libre cuya secuencia es complementaria de la
cadena de ADN-molde.
La ARN polimerasa de bacterias consta de:
Debido a la estructura en operones de los genes bacterianos, los ARN correspondientes a
muchos operones son policistrnicos, es decir, en un mismo ARNm est transcrita la
informacin de los distintos genes de ese opern.
TRADUCCIN
Tan pronto como ha comenzado la transcripcin de un opern, los ribosomas se unen al
extremo del mensajero naciente, y da comienzo enseguida la traduccin del mensaje.
Esto constituye otro rasgo distintivo de la expresin gentica en procariotas: la
transcripcin y la traduccin estn estrechamente acopladas. Tambin caracterstico de
las bacterias es el hecho de que el primer aminocido que se incorpora no es la
metionina, sino la N-formil-metionina.
RIBOSOMAS PROCARIOTAS
Son de 70 S y su masa molecular es de 2.500 kilodalton. Las molculas de ARNr forman
el 65% del ribosoma y las protenas representan el 35%. Las molculas de ARN
ribosmico son ricas en adenina y guanina y forman una hlice alrededor de las protenas.

Los ribosomas estn formados por dos subunidades:

1. Subunidad mayor: es 50 S. Est formada por dos molculas de ARN, una de 23 S y
otra de 5 S. Adems hay 34 protenas bsicas de las cuales slo una se repite en la
subunidad menor.
Interviene fundamentalmente en la formacin del enlace peptdico entre el aminocido
inicial y el pptido que se forma.
2. Subunidad menor: es de 30 S y tiene una molcula de ARNr de 16 S adems de 21
protenas.
Implicada directamente en decodificar la informacin del ARNm.
Contiene los sitios de union para el ARNt
A partir del ADN cromosmico se transcriben diferentes molculas de ARNr que,
combinadas con protenas especficas, forman los ribosomas, los diferentes tipos de
molculas de ARNt correspondientes a los distintos aminocidos y los ARNm, que llevan
la informacin para la secuencia de aminocidos de las protenas.
Cuando un ARNm se une a la subunidad menor del ribosoma, comienza el proceso de
sntesis de protenas
PROTENAS CELADORAS
Tanto el correcto plegamiento de las protenas como su adecuado ensamblaje en
complejos requiere el concurso de unas protenas especiales, conocidas como protenas
celadoras o "carabinas moleculares", debido a que su papel es vigilar y eventualmente
corregir el plegamiento. Estas protenas estn presentes en todos los seres vivos. Algunas
de ellas se inducen ante determinados estrs Dambientales. e hecho se descubrieron
como protenas inducibles ante un aumento de temperatura, por lo que se denominaron
como protenas del choque trmico.
TIPOS DE PROTENAS
En las Gram negativas, segn su localizacin (exoplasmtica) sern:
- PERIPLASMICAS ( se encuentran en el entorno celular. Efectan el procesamiento de
macromolculas para la formacin de subunidades que se transportan al interior de la
clula.
- OTRAS PROTENAS( se encuentran en el entorno celular.
Simportadores. Transportan las dos sustancias en la misma direccin.
Antiportadores. Transporta una de las sustancias en un sentido, y la otra en sentido
opuesto.
- PROTEINAS PERIFERICAS DE MEMBRANA( se localizan en el citoplasma celular.
Tienen como funcin la obtencin de energa, principalmente.
Actan directamente con las protenas integrales de la membrana.

- Existen protenas que se encuentran en el interior de la clula y se encuentran

asociadas con la cara interna de la membrana citoplasmtica.
- Otras protenas perifricas de membrana (LIPOPROTEINAS). Poseen una cola lipdica
unida al extremo aminoterminal de la protena.
PROTEINAS DE MEMBRANA
Constituyen la mayor parte de la membrana bacteriana (hasta el 80% en peso seco).
Existe una gran variedad de tipos de protenas en una misma bacteria (hasta 200), pero la
composicin y proporcin concreta vara segn las condiciones de cultivo.
Segn su localizacin en la membrana se distingue entre:
Protenas integrales de membrana (=endoprotenas): son protenas estrechamente unidas
a la membrana, por lo general atravesadas en plena bicapa lipdica. Son difciles de
extraer, tenindose que recurrir a detergentes y/o disolventes orgnicos para separarlas
respecto de los lpidos. Las protenas integrales pueden desplazarse lateralmente en la
bicapa lipdica, pero no son capaces de rotar, por lo que siempre presentan una
determinada orientacin o polaridad. Algunas presentan hidratos de carbono que
sobresalen hacia la superficie externa (glucoprotenas).
Existen dos tipos:
- Las que tienen regiones transmembranales alfa-hlices ampliamente distribuidas.
- Las que poseen mltiples plegamientos beta, que se encuentran predominantemente en
las membranas de las bacterias Gram negativas.
Protenas perifricas (= epiprotenas): unidas a la superficie de la membrana, de forma
ms dbil, por lo que son ms fciles de extraer y purificar. Incluso algunas establecen
contactos slo transitorios con la membrana.
[pic]
TRANSPORTE DE PROTEINAS
La tercera parte de las protenas de las clulas es secretada a travs o insertada en las
membranas. Las protenas a exportar, antes de su transporte se suelen denominar preprotenas.
Se expulsan enzimas hidrolticas, lipoprotenas periplasmticas, toxinas, apndices de
superficie. En otro orden encontramos las protenas integrales de membrana con
funciones de transporte, produccin de energa, divisin celular, receptores de seales
extracelulares o biognesis.
1. Translocacion. Transporte de protenas intra o a travs de la membrana.
2. Exportacion. Cuando la protena es traslocada al periplasma (compartimento que rodea
al citoplasma en Gram negativas, comprendido entre la membrana plasmtica y la pared
celular).
3. Secreccin. Cuando la protena es tansportada al medio extracelular, dentro de otra

clula o a la superficie celular

Los sistemas generales de secrecin son:
- sistema Sec. (General Secretory Pathway GSP). Sistema de translocacin y
exportacin de protenas no plegadas.
o SecA: es una protena perifrica ligada al lado citoplsmico de la membrana. Cuando se
une a ATP adquiere una configuracin que la capacita para unirse a la pre-protena y a la
SecY.
o SecY: es una protena grande, integral de membrana, a la que atraviesa 10 veces.
o SecE: tambin es una protena integral (atraviesa tres veces), muy conservada
evolutivamente en todas las eubacterias, lo que indica que es un componente central del
aparato de exportacin. Puede que forme de alguna manera un "canal para la
exportacin".
- Sistema Tat. (Twin arginine translocation). Sistema de translocacin y exportacin de
protenas plegadas. Las bacterias tambin usan muchos otros sistemas de transporte
especiales como el desplazamiento de arginina gemela al contrario que la exportacin
dependiente de Sec, transporta protenas totalmente plegadas a travs de la membrana.
- Translocasa YidC. Sistema de translocacin de protenas de membrana interna. Las
bacterias Gram- forman de vesculas en la membrana externa. Partes de la membrana
externa forman estructuras esfricas, compuestas de una bicapa de lpidos, que encierran
sustancias periplsmicas. Las vesculas de varias especies bacterianas pueden contener
sustancias patgenas, tener efectos inmunomoduladores, y tambin adherirse
directamente e intoxicar las clulas husped. Mientras que la liberacin de vesculas es
una respuesta general a condiciones de estrs, el proceso de cargar protenas
transportadoras parece ser selectivo.
Aunque lo que requiere ms atencin debido a su componente aadido es el estudio en
las bacterias Gram negativo.
Las bacterias Gram negativas (G-) tienen dos membranas, haciendo as la secrecin
topolgicamente ms compleja. Hay al menos seis sistemas de secrecin especializados
en bacterias Gram -. Dentro de los sistemas generales de secreccin encontraremos:
Sistema de secrecin de tipo I
Con protenas adiccionales a la protena ABC, forma un canal contiguo que cruza las
membranas interiores y exteriores de las bacterias Gram negativas. Este es un sistema
simple, que consiste de slo tres subunidades de protena: la protena ABC, protena de
fusin a la membrana y protena de la membrana externa. Este sistema de secrecin
transporta diversas molculas, como iones, medicamentos y protenas de varios tamaos
(de 20 a 100 kDa).

Sistema de secrecin de tipo II

Las protenas secretadas por este sistema, dependen del sistema Sec para el transporte
inicial en el periplasma. Una vez all, pasan por la membrana externa a travs de un
complejo de protenas secretinas. Adems de las secretinas, otras 10-15 protenas de la
membrana interior y exterior forman el aparato de secrecin completo, muchas con
funcin an desconocida
Sistema de secrecin de tipo III
Este sistema es homlogo al del cuerpo basal flagelar bacteriano. Se parece a una
jeringuilla molecular por la cual una bacteria (por ejemplo, ciertos tipos
de Salmonela, Shigella, Yersinia) puede inyectar protenas en clulas eucariticas. Una
baja concentracin de Ca2+ en el citosol abre la puerta que regula el sistema. Este
sistema de secrecin fue descubierto en la bacteria Yersinia pestis, causante de la peste
bubnica, y mostr que las toxinas podan ser inyectadas directamente desde el
citoplasma bacteriano al citoplasma de las clulas del anfitrin ms que a travs del
medio extracelular.
Sistema de secrecin de tipo IV
Es un sistema homlogo a la maquinaria de conjugacin de las bacterias (y los flagelos de
Archaea). Es capaz de transportar tanto ADN como protenas. Fue descubierto en
Agrobacterium tumefaciens, que usa este sistema para introducir el plsmido Ti y
protenas en el anfitrin, lo que desarrolla un tumor. Las Helicobacter pylori usan este
sistema de secrecin para inyectar Cag A en clulas epiteliales gstricas. La Bordetella
pertussis, bacteria causante de la tos ferina, secreta la toxina pertussis en parte por el
sistema tipo IV. La Legionella pneumophila, causante de la legionela, utiliza tambin este
sistema para translocar numerosas protenas efectoras a su anfitrin eucaritico.
Sistema de secrecin de tipo V
A este sistema tambin se le llama sistema autotransportador, ya que la secrecin de tipo
V implica el uso del sistema Sec para cruzar la membrana interior. Las protenas que usan
esta ruta tienen la capacidad de formar un barril beta con su terminal C, que se inserta en
la membrana externa permitiendo al resto del pptido alcanzar el exterior de la clula.
Sistema de secrecin de tipo VI
La secrecin de varias protenas de este sistema ha sido descrita recientemente en Vibrio
cholerae y Pseudomonas aeruginosa. Estas proteinas carecen de las secuencias
sealizadoras con terminal N.

DEGRADACIN DE PROTENAS
Las protenas, pero debido a su gran tamao generalmente no son asimilables. Por lo
tanto, esas protenas se hidrolizan antes, para romperlas en pptidos ms pequeos que
sean asimilables por los microorganismos, quienes acabarn de degradarlos obteniendo
los aminocidos individuales.
Aerobios: escinden las protenas en compuestos ms simples por medio de la
reacciones oxidativas; los productos finales estn totalmente oxidados y no producen
olor.
Anaerobios: los productos finales no estn nunca completamente oxidados sino que
forman compuestos intermedios como indol, mercaptanos, c. sulfhdrico y amoniaco, que
proporcionan al producto un olor caracterstico.
Es un mtodo de determinacin del tipo de microorganismo la atencin a la produccin de
las diferentes enzimas proteolticas o capacidades de oxidacin / fermentacin, como
pueden ser las pruebas de produccin de catalasa, indol, ureasa, o la capacidad de
licuacin de gelatinas o hidrolizar almidn.
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