PRCTICA No.

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DETERMINACIN DE LA GLUCOSA POR EL METODO ENZIMTICO
Integrantes: Jos Cayamcela, Mayra Crdova, Viviana Quilli; Docente: Dra. Maritza Lamulle
Universidad de Cuenca - Facultad de Ciencias Qumicas - Carrera de Bioqumica y Farmacia
Asignatura: Bioqumica II, Cuenca-Ecuador, Fecha de entrega: 25-11-2015

1. OBJETIVOS
Determinar la glucosa en suero por el mtodo enzimtico.
2. MARCO TEORICO
Diabetes
La diabetes es una enfermedad crnica en la cual el cuerpo no puede regular la cantidad de azcar
en la sangre.
Causas de la diabetes
Las personas con diabetes presentan hiperglucemia, debido a que su cuerpo no puede movilizar el
azcar desde la sangre hasta los adipocitos y clulas musculares para quemarla o almacenarla como
energa, y dado que el hgado produce demasiada glucosa y la secreta en la sangre. Esto se debe a
que:

El pncreas no produce suficiente insulina.

Las clulas no responden de manera normal a la insulina.

Hay dos tipos principales de diabetes. Las causas y los factores de riesgo son diferentes para cada
tipo:
Diabetes tipo 1: puede ocurrir a cualquier edad, pero se diagnostica con mayor frecuencia en nios,
adolescentes o adultos jvenes. En esta enfermedad, el cuerpo no produce o produce poca insulina.
Esto se debe a que las clulas del pncreas que producen la insulina dejan de trabajar. Se necesitan
inyecciones diarias de insulina. La causa exacta se desconoce.
Diabetes tipo 2: es mucho ms comn. Generalmente se presenta en la edad adulta; sin embargo,
ahora se est diagnosticando en adolescentes y adultos jvenes debido a las tasas altas de obesidad.
Algunas personas con este tipo de diabetes no saben que padecen esta enfermedad.
Hay otras causas de diabetes y algunos pacientes no se pueden clasificar como tipo 1 ni 2.
La diabetes gestacional es el nivel de azcar alto en la sangre que se presenta en cualquier momento
durante el embarazo en una mujer que no tiene diabetes. (Snook, 2003)
Sntomas de la diabetes
Un nivel alto de azcar en la sangre puede causar diversos sntomas, como:

Visin borrosa

Sed excesiva

Fatiga

Miccin frecuente

Hambre

Prdida de peso
Debido a que la diabetes tipo 2 se desarrolla lentamente, algunas personas con hiperglucemia son
asintomticas. Los sntomas de la diabetes tipo 1 se desarrollan en un perodo de tiempo corto y las
personas pueden estar muy enfermas para el momento del diagnstico.
Despus de muchos aos, la diabetes puede llevar a otros problemas serios. Estos problemas se
conocen como complicaciones de la diabetes y abarcan:
Problemas oculares

Problemas renales

Insuficiencia renal.

Ataque cardaco

Accidente cerebrovascular. (Aruz, 2006)

3. FUNDAMENTO
El esquema de la reaccin es el siguiente:
Glucosa + O2 + H2O

GOD

Acido glucornico + H2O2

2H2O2 + 4-AF + Fenol

POD

Quinona coloreada + H2O

4. EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos
Centrifugadora
Bao mara
Espectrofotmetro

Materiales
Material de vidrio(pipetas,
,tubos de ensayo)
Gradilla
Pipetas automaticas

Reactivos
B.M.GOD glucosa oxidasa
POD peroxidasa 4-AF
Solucin de 4amino fenazona
25 mml en buffer tris
0.92mol/L
Reactivo de fenol: solucin de
fenol 55mmol/l
Patrn de glucosa 1g/l

Tabla 1: Equipos, materiales y reactivos utilizados en la prctica de la determinacin de la glucosa en plasma.

5. Procedimiento

Trabajar con
suero o plasma

Disponer de 3
tubos marcados
con B, P, X

Realiar
disoluciones de
la siguiente
manera:

Dejar reposar
10 min. a
Toamb.

Calibrar el
equipo con el
blenco de
reactivo (B)

Medir la
Absorbancia de
P y X, anotar los
valores.

6. DATOS, CLCULOS y RESULTADOS

Lectura del patrn

Lectura de la muestra

Lecturas
0.319
0.291

Tabla 2: lecturas de la glucosa en el plasma

Lectura de muestra 100

Cx=

Lectura de patrn

mg
dL

0.291 100
=

0.319

mg
dL

=91.22

mg glucosa
dL suero

El paciente presenta niveles normales de glucosa en sangre.

7. CONCLUSIONES
Se ah logrado determinar el nivel de glucosa en sangre gracias al mtodo enzimtico; este mtodo
nos da resultados muy confiables si trabajamos inmediatamente luego de haber transcurrido los 10
minutos, pues si se alarga el tiempo el color de la muestra se alterar y por consiguiente se altera el
valor de la absorbancia dando valores de concentracin errneos al realizar los clculos.
Con respecto al valor obtenido se puede decir que el paciente presenta valores normales de glucosa
en sangre, ya que los valores de referencia estn entre los 60-100 mg/dL.
8. BIBLIOGRAFA
Aruz, A. (2006). American Diabetes Association. Recuperado el 21 de 11 de 2015, de sntomas del
diabetes : http://www.binasss.sa.cr/libros/diabeticas07.pdf
Snook, H. (2003). Entender las causas genticas del diabetes . Recuperado el 21 de 11 de 2015, de
https://www.idf.org/sites/default/files/attachments/article_16_es.pdf