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EXTRACCION DE PIGMENTOS NATURALES

I.

INTRODUCCIN

Entre todos los caracteres ms externos de los vegetales, el ms notable y caracterstico


es probablemente el color. El color no es nicamente un carcter llamativo de la
vegetacin, sino que, adems, algunos de los pigmentos que lo condicionan estn
estrechamente ligados a las actividades fisiolgicas del propio vegetal. Por consiguiente,
el estudio de como las plantas viven y se desarrollan, requieren el previo conocimiento de
los pigmentos vegetales.
Si es posible encontrar en el reino vegetal todos los matices y combinaciones de colores
del espectro, existe un predominio general de los colores primarios: verde, amarillo, rojo,
azul. Estos colores son conferidos a los vegetales por determinados compuestos qumicos
definidos, llamados pigmentos. El color particular que presenta un determinado rgano
vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro o la combinacin de ellos. Se
debe tener claro que cuando un vegetal presenta un color blanco, es debido a la falta de
tales pigmentos. La luz que se incide sobre ellas no es absorbida selectivamente como
ocurre en las partes coloreadas, sino que es transmitida o reflejada prcticamente sin
sufrir modificacin.
Las Clorofilas. El color verde tan uniformemente presente en los vegetales es debido a la
presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados clorofila a y
clorofila b. Se encuentran prcticamente en todas las plantas con semilla, helechos,
musgos y algas. Pueden formarse en las races, tallos, hojas y frutos a condicin de que
estos rganos estn situados por encima del suelo y queden expuestos a la luz. Tambin
aunque aparentemente falten en algunas hojas de color rojo o amarillo, cuando se extraen
las otras sustancias colorantes de estas, puede comprobarse incluso all la presencia de
las clorofilas, que estaban enmascaradas por los dems pigmentos.
Estos pigmentos se encuentran en el interior de las clulas vegetales especficamente en
una organela llamada cloroplasto. Los cloroplastos son simplemente plstidos que
contiene pigmentos cloroflicos. Los compuestos cloroflicos estn ligados qumicamente
con las estructuras internas del cloroplasto (membranas tilacoides) y se hallan retenidos
en estado coloidal. Asociados con las clorofilas, existen tambin en los cloroplastos dos
clases de pigmentos amarillos y amarillo-anaranjados que son las xantofilas y
carotenoides.

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II.
OBJETIVOS
Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcnica sencilla de
cromatografa en papel.
Extraer los principios colorantes del achote y la cochinilla.
Determinar el rendimiento de los pigmentos de acuerdo a la cantidad de materia prima
y a su humedad.
III.

MARCO TERICO

Un pigmento es cualquier molcula que produce color en las clulas animales, vegetales,
bacterias y hongos. Muchas estructuras biolgicas, como la piel, los ojos y el pelo en
mamferos contienen pigmentos como la melanina localizados en clulas especializadas
llamadas cromatforos. En mamferos, se denominan especficamente Melanocitos. Si
bien todos los cromatforos contienen pigmentos, no todas las celulas que presentan
pigmentos son cromatforos: el grupo hemo por ejemplo es responsable del color rojo de
la sangre y se encuentra en los eritrocitos. Esta denominacin diferencial est asociada al
origen embrionario de cada tipo de clula. Dentro de los cromatforos, los pigmentos se
localizan en vacuolas o vesculas. En los vegetales, los pigmentos pueden localizarse en
diferentes organelas denominadas plstidos. Estas molculas son capaces de absorber
ciertas longitudes de onda y reflejar otras, de acuerdo a su estructura qumica. Las
longitudes que se reflejan son aquellas que los ojos reciben y que el cerebro interpreta
como color.
La luz blanca es una mezcla del espectro visible de luz. Cuando esta luz se encuentra con
un pigmento, algunas ondas son absorbidas por los pigmentos, mientras otras son
reflejadas. El espectro de luz reflejado se percibe como color. Por ejemplo, un pigmento
azul marino refleja la luz azul y absorbe los dems colores. Por reflejar las longitudes de
onda en la gama del azul, el cerebro recibe y decodifica esa informacin.
Entre ellos encontramos:
a) Carotenoides: Los carotenoides son estructuras isoprenoides, presentes en
colorantes y pigmentos naturales en plantas superiores, algas, hongos y bacterias. La
estructura qumica bsica de estos compuestos poseen dobles enlaces insaturados y
la mayora son tetra-terpenos con 40 tomos de carbono. A los carotenoides que
poseen tomos de oxgeno en sus molculas se los conoce como xantofilas. Los

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restantes constituyen el grupo de los carotenos. Los colorantes y pigmentos de este
grupo presentan una paleta de colores que vara desde amarillo plido, pasando por
anaranjado, hasta rojo oscuro. Ejemplos de ello son el licopeno (color rojo del tomate y
la sanda) y el beta caroteno (color anaranjado de la zanahoria).
b) Cloroflicos: Los compuestos cloroflicos constan de una porfirina que lleva
incorporado un tomo de magnesio en el centro del ncleo tetrapirrlico. Son los
pigmentos ms abundantes en la naturaleza. Se encuentran en los cloroplastos de las
clulas vegetales, orgnulos exclusivos de las plantas donde se lleva a cabo la
fotosntesis y se conocen dos tipos importantes: clorofila A y clorofila B, que son las
responsables del color verde de las plantas. La clorofila A representa de manera
aproximada, 75% de toda la clorofila de las plantas verdes, pero tambin se encuentra
en las algas verde-azuladas.
La clorofila B es un pigmento que acompaa a la clorofila A. Absorbe luz de una
longitud de onda diferente (ms baja) y transfiere la energa a la clorofila A, que se
encarga de convertirla en energa qumica.
Otros tipos de clorofila como: C1, C2 y D, se hallan en algas y bacterias.
Los pigmentos cloroflicos son insolubles en agua, pero s en solventes orgnicos
como el alcohol etlico y la acetona (solventes extractivos) y en tetracloruro de carbono
y ter de petrleo (solventes separadores).
c) Antociannicos: Las antocianinas forman uno de los seis grupos de flavonoides
existentes. Los flavonoides son metabolitos secundarios de las plantas, esto es:
compuestos que la planta elabora, pero no son vitales, pues en su ausencia el
organismo puede continuar viviendo. Las antocianinas son verdaderos colorantes
naturales, ya que son pigmentos hidrosolubles. Son responsables de los colores rojo,
anaranjado, azul y prpura de las uvas, manzanas y fresas. Las funciones de las
antocianinas en las plantas son mltiples, y van desde la proteccin de la radiacin
solar hasta la de atraer insectos polinizadores. La estabilidad de las antocianinas est
condicionada por una serie de factores como el potencial redox, temperatura, el pH
del medio, la interaccin con otros radicales y molculas, entre otros. Se ha estudiado
que el cambio de un pH cido (mayor estabilidad) hacia otro alcalino hace variar de
color hacia el rojo (efecto batocrmico) dando compuestos inestables que se
decoloran rpidamente. Tambin las antocianinas son afectadas por la temperatura,

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producindose cambios en su estructura molecular (prdida del glicsido) que resulta
en una prdida del color.
d) Flavonoideos: El resto de los flavonoides no-antociannicos, se caracterizan por su
color amarillo, como se desprende de la etimologa del nombre (Del latn flavus:
amarillo). Los flavonoides en general se caracterizan por ser polifenoles solubles en
agua, algunos con una estructura de glucsidos (azcares) y otros de polmeros
naturales. A estos ltimos pertenecen los taninos condensados, polmeros naturales
formados por monmeros de antocianidina, presentes en semillas y tejidos vegetativos
de ciertas forrajeras. Otro grupo de flavonoides importantes son las flavonas,
colorantes amarillos presentes en ptalos de flores como la prmula, o en la piel de
frutos como las uvas, responsables del color amarillento de los vinos blancos.
Finalmente estn las flavononas, presentes en altas concentraciones de los zumos de
ctricos (naranja, mandarina y pomelo). Hasta hoy se conocen ms de 9000
flavonoides y quedan ms por identificar y aislar.
e) Betalanicos:

Las

betalanas

son

colorantes

naturales

constituidos

por

aproximadamente 70 pigmentos hidrosolubles con estructura de glucsidos y que se


han clasificado en dos grupos importantes: las betacianinas y las betaxantinas.
Las betacianinas son unos cincuenta colorantes naturales identificados de color rojo o
violeta que se encuentran en plantas como la remolacha (Beta vulgaris) y frutos de la
tuna (Opuntia sp) y en algunos basidiomicetos. Tienen una absorcin mxima en el
espectro visible entre 534 y 552 nm.
Las betaxantinas en cambio, cuentan con un grupo de casi 25 componentes de color
amarillo encontradas en algunas variedades de hongos venenosos (amanita
muscaria), y en las bayas de los cactus pitaya (Hylocereus). Tienen una absorcin
mxima en el espectro visible entre 260 y 320 nm.
f) Tannicos: Los taninos son colorantes naturales extrados de plantas superiores. Son
compuestos fenlicos coloreados en una gama que va desde colores amarillos hasta
el castao oscuro. Los taninos tienen olor caracterstico, sabor amargo y son muy
astringentes. Se agrupan en: taninos hidrolizables y taninos condensados (vistos
anteriormente en el grupo de Flavonoides).

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Los taninos hidrolizables son colorantes polmeros heterogneos formados por fenoles
y azcares simples. Son ms pequeos que los taninos condensados y se hidrolizan
sin dificultad en medio cido. El PM oscila entre los 600 y 3000.
Las plantas ms empleadas para la obtencin de taninos son: robles (Quercus robur),
castaos (Castanea sativa), paqui (Hymenaea courbaril), verdolaga (Terminalia
amazonia), quebracho colorado chaqueo (Schinopsis balansae), entre mucho ms.
IV.

V.

MATERIALES
Balanza analtica.
Estufa.
Cocina.
Materiales de vidrio (vasos, pipetas, etc.).
pH-metro.
Centrfuga.
Achiote.
Betarraga.
Zanahoria.
Hojas de espinaca.
Hidrxido de sodio al 50%.
cido sulfrico, citrato de sodio, alcohol etlico.
PROCEDIMIENTO

Espinaca
Lavar y retirar los
nervios
Ponerlo en un
mortero

Aadir alcohol
y triturar

Filtrar
El filtrado en
una placa Petri

Colocar
Dejar el montaje
y esperar

Observar
Zanahoria

Poner un rectngulo
sobre la placa

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Lavar

Rayar

Ponerlo en un
mortero

Aadir alcohol

Filtrar
El filtrado en
una placa Petri

Colocar

Poner un rectngulo
sobre la placa

Dejar el montaje
y esperar
Observar

Betarraga
Lavar

Rayar

Ponerlo en un
mortero

Aadir alcohol

Filtrar
El filtrado en
una placa Petri

Colocar

Dejar el montaje
y esperar
Observar

Achote
Pesado

Poner un rectngulo
sobre la placa

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40 ml agua + 1 ml
NaOH al 50 %

Extraccin con
agitacin 510 min.

Extracto 1

Solidos
insolubles
40 ml agua + 1 ml
NaOH al 50 %

Extraccin con
agitacin 5 min.

Extracto 1

Solidos
insolubles
40 ml agua + 1 ml
NaOH al 50 %

Extraccin con
agitacin 5 min.

Extracto 1

Solidos
insolubles
Extracto de achote Norbixina
Precipitacin acida
pH=2.5

H2SO4

Agua

Separacin

Agua + cidos

Lavado

Agua + cidos

Centrifugado

Agua + cidos

Secado y
molienda
Norbixina

VI.

RESULTADOS

HOJAS DE ESPINACA

CAROTEN
OSS

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CLOROFIL
AA

XANTOFI
LA
CLOROFIL
AB

BETERRAGA

ANTOCIANIN
AS
BETALAINA
S

ZANAHORIA

CAROTEN
OSS

ACHIOTE

Materia prima inicial = 10 g


Cantidad obtenida =0.332 g

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Rendimiento=

0.332 g
x 100=3.32
10 g

VII.
DISCUSIONES
En primer lugar al romper las clulas en el mortero los pigmentos que se hallaban
encerrados en los cloroplastos dentro de ellas pasan al metanol. En numerosas
ocasiones uno de los pigmentos es ms abundante y enmascara a los dems que no
se pueden observar. Como vimos en nuestra introduccin, el pigmento ms soluble en
el metanol es el que forma una banda coloreada en la parte superior.
Segn Bedui 1993 El color de los alimentos es un atributo que tiene mucho peso
dentro del juicio del consumidor, este puede llegar a ser determinante para que un
comestible sea aceptado o rechazado.
Segn Vzquez, 2001 El colorante obtenido de las semillas de achiote (Bixa orellana),
est compuesto en su mayora por el carotenoide bixina, que se utiliza en la industria
lctica, crnica, condimentara, cosmtica, farmacutica, etc.; es un colorante natural
exento de certificacin. La extraccin ms rudimentaria se basa en un lavado con
agua en ebullicin y a escala industrial se ha implementado un proceso de extraccin
alcalino que es de fcil aplicacin, pero que tiene el inconveniente de que el producto
final contiene al mximo 30 a 40% de pigmentos.
Segn Richter, 1972 y Barcel Coll et al., 1992 Cuando una solucin de clorofila es
iluminada con luz blanca o azul se produce un fenmeno de excitacin molecular,
observable por la emisin de luz de color rojo vinoso intenso. La luz emitida por
fluorescencia es siempre de mayor longitud de onda y de menor energa que la luz
incidente, pues siempre algo de esa energa se disipa en forma de calor.
Olga Murillo 2004, afirma que la bixina que es el caroteno que se encuentra en el
achiote es ms soluble en alcohol caliente, en la prctica se extrajo con una
temperatura al medio ambiente que genera un desmedro en el rendimiento en
extraccin del colorante.
VIII.
CONCLUSIONES
Se obtuvieron los pigmentos de los distintos materiales vegetales, que son los que le
dan color a estos, como las hojas de las plantas ya que la fotosntesis es un proceso
que permite a los vegetales obtener la materia y la energa que necesitan para

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desarrollar sus funciones vitales, se lleva a cabo gracias a la presencia en las hojas y
en los tallos jvenes de pigmentos, capaces de captar la energa lumnica.
Gracias a esta prctica se logr observar cmo cambian las tonalidades de estos
pigmentos vegetales que componen a las plantas y se encuentran en los cloroplastos
de la clula vegetal adems de que son los que constituyen el sustrato fisicoqumico
de la fotosntesis.
Se obtuvo un rendimiento de achiote de 3,32% en base al peso obtenido que fue de
0.332g y el peso inicial de 10g.
IX.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Olga Murillo 2004, EXTRACCIN INDUSTRIAL DE COLORANTE DE ACHIOTE,
Revistas Colombianas de Transferencia de Tecnologa.
http://www.joseacortes.com/practicas/pigmentos.htm
http://es.scribd.com/doc/52467344/16675209-6-EXTRACCION-Y-SEPARACION-DEPIGMENTOS-VEGETALES
http://www.angelfire.com/scifi/anarkimia/Biologia/tecnicas/separaciones_cromatografic
as.htm
http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/cromatografias.htm