Test de orina

La prueba de orina puede ser un inmunoanlisis cromatogrfico realizado en elhogar,

el centro mdico, o el laboratorio. Los umbrales de deteccin van de 20 a100 mUI/ml
(mili unidades internacionales por mililitro), dependiendo de lamarca del test. Cuanto
ms temprana sea la etapa del embarazo, ms precisossern los resultados que
pueden obtenerse mediante el uso de la primera orina dela maana, ya que es cuando
los niveles de hCG son ms altos. Cuando la orina esdiluida (gravedad especfica
inferior a 1.015), la concentracin de hCG puede noser representativa de la
concentracin en la sangre, y la prueba puede dar unfalso negativo.
REALIZACIN DE LA PRUEBA hCG
TIPO DE ENSAYO: CUALITATIVOMUESTRA: SUERO / ORINASENSIBILIDAD: 25 m
UI/MlESPECIFICIDAD: > 99 %MTODO : INMUNOCROMATOGRFICOPRESENTAC
IN: TIRAS REACTIVAS
MUESTRASOrina: recogido mediante procedimientos estndar en recipiente limpio y estrilNo es
preciso filtrar ni centrifugar a menos que presenten precipitados visibles.Se recomienda utilizar la
primera orina de la maana puesto que sta contiene la mximaconcentracin de hCG, aunque
puede utilizarse orina recogida a cualquier hora del da.La muestra debe ser analizada
preferiblemente el mismo da de su recoleccin, si esto noes posible consrvela en refrigeracin. Las
muestras son estables durante 2 das a 2-8Co hasta un mes si se congelan a

20C. Antes de realizar la prueba, la muestra debedescongelarse completamente, homogenizarla y

atemperarla. Evitar congelar ydescongelar repetidamente.Suero: tomarse mediante venopuncin
normal, recolectarse en un recipiente sinanticoagulante.Puede obtenerse en cualquier momento pues
no es necesario que el paciente est enayunas.No utilice muestras turbias ya que pueden estar
contaminadas por microorganismos.No utilice muestras hemolizadas.Manipular todas las muestras y
material utilizado como posiblemente infeccioso.PROCEDIMIENTO (Solo para uso
profesional.)1. Dejar atemperar los materiales y las muestras a temperatura ambiente.2. Extraiga
del recipiente de almacenamiento las tiras reactivas a utilizar e identificar cada una con los datos de
la muestra3. Dispensar 0,5 mL de muestra en un pequeo tubo o frasco.4. Sumerja la tira reactiva
durante 10 a 15 segundos
en la muestra de Suero/Orinamientras el extremo de la flecha apunta hacia abajo. No sumerja la tira
ms all de lalnea MAX (mxima) o roja.5. Retrela y colquela sobre una superficie plana, limpia,
seca y no absorbente.6. Examinar los resultados a los 3 minutos cuando analice una muestra
de orina o alos 5 minutos cuando analice una muestra de suero
Dependiendo de la concentracin de hCG en la muestra, los resultados positivos puedenobservarse
incluso antes de 40 segundos.Para confirmar los resultados negativos, se requiere el tiempo completo
de reaccin(cinco minutos).LECTURA DE RESULTADOS:La regin de control (C) es la ms
cercana al lado de sujecin de la tira (cubierto conpelcula coloreada) y la regin de prueba (T) es la
ms cercana al lado absorbente de latira reactiva.No interprete los resultados despus de 10
minutos de reaccin.Examinar la presencia de bandas coloreadas.
Resultado positivo.
Aparecen dos bandas de color (rojo, violeta o rosa): una en la zona de
test T y la otra en la zona de control C.
El resultado es positivo aunque las bandas sean dbiles, variar debido a que lasconcentraciones de
hCG varan en las diferentes etapas del embarazo.La intensidad del color de la lnea de la regin de la
prueba (T) puede variar dependiendola concentracin de hCG presente en la muestra. Por lo tanto,
cualquier coloracin, por muy dbil que sea sta, en la lnea de la regin de la prueba (T) deber
considerarsepositiva.
En los sueros con elevada concentracin de hCG, la banda en la zona de control C
puede ser dbil.El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracin de hCG mayor o
iguala 20 mUI/ml en la muestra.

Resultado negativo.
Aparece una banda de color nicamente en la zona de control C.
No hay una banda visible en la regin de prueba (T).
Resultado Incorrecto.
Ausencia de bandas de color o presencia de una nica banda en la
zona de test T.
Repita de nuevo el procedimiento utilizando una nueva prueba reactiva.
INMUNOCROMATOGRAFA EN UNA PRUEBA ESPECFICA DE EMBARAZO
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CONCLUSIN
Las tiras reactivas permiten la determinacin visual cualitativa en un slo paso de lapresencia de
Gonadotropina Corinica Humana (hCG) en muestras de suero u orinacomo ayuda para deteccin
temprana del embarazo mediante un inmunoensayo por cromatografa de flujo lateral en fase slida
donde la mezcla fluye por capilaridad a travsde la tira.La prueba utiliza dos lneas para indicar los
resultados. La lnea de la prueba utiliza unacombinacin de anticuerpos que incluyen un
anticuerpo monoclonal hCG-colorante
paradetectar selectivamente niveles elevados de hCG. La lnea de control est compuesta
por anticuerpos policlonales de cabra en fase slida y partculas coloidales de oro.Una vez
sumergida la tira en la muestra, un anti-hCG marcado con oro coloidal sesolubiliza y se
une a la hCG presente en la muestra.En menos de 5 minutos, pueden detectarse niveles de hCG tan
bajos como 10 mIU/ml.
El test se basa en la reaccin de inhibicin de la hemaglutinacin. Se
hanrevestido eritrocitos con hCG. Al aadirse anticuerpos contra hCG a
este reactivo tiene lugar una reaccin de aglutinacin y se forma un dibujo
de sedimentacin difuso en el fondo delt u b o . L a a d i c i n s i m u l t n e a
de hCG libre, que est presente en la orina de
l a s m u j e r e s embarazadas, bloquea los anticuerpos y evita la reaccin con
los eritrocitos. En tal caso loseritrocitos se sedimentarn en el fondo del tubo
formando un dibujo caracterstico en forma deanillo (reaccin positiva). Si en la
orina no hay hGC o est en pequea cantidad, se ver undibujo de
sedimentacin difuso (reaccin negativa). Los eritrocitos usados proceden de ovejasy
se han estabilizado. Los anticuerpos son de origen monoclonal.
La sensibilidad de la prueba es de 1000 UI de hCG/L. Con esta prueba es posible
detectar losniveles de hCG que se encuentran normalmente en las mujeres
embarazadas a partir del 8 da de la menstruacin esperada en adelante.NeoPlanotest 200 es una prueba de aglutinacin de ltex directa sobre
portaobjetos para ladeteccin de la gonadotropina corinica humana (hCG) en
orina.FUNDAMENTO.Mtodo en placa: La prueba esta basada en una
reaccin de aglutinacin de ltex directa,utilizando partculas de ltex
recubiertas con anti-hCG. La hGC, que se encuentra en la orinade
mujeres embarazadas, se mezcla con el reactivo de ltex y los anticuerpos
reacionarncon la hCG para formar un patrn de aglutinacin de ltex
granulosa (reaccn positiva). Si lahCG no est presente en la orina, no se
producir ninguna aglutinacin al mezclarla con el reactivo de ltex (reaccin
negativa).Mtodo en tubo : El test se basa en la reaccin de inhibicin de la
hemaglutinacin. Se hanrevestido eritrocitos con hCG. Al aadirse
anticuerpos contra hCG a este reactivo tiene lugar una reaccin de
aglutinacin y se forma un dibujo de sedimentacin difuso en el fondo
delt u b o . L a a d i c i n s i m u l t n e a d e h C G l i b r e , q u e e s t p r e s e n t e e n
l a o r i n a d e l a s m u j e r e s embarazadas, bloquea los anticuerpos y evita la
reaccin con los eritrocitos. En tal caso loseritrocitos se sedimentarn en el

fondo del tubo formando un dibujo caracterstico en forma deanillo (reaccin

positiva). Si en la orina no hay hGC o est en pequea cantidad, se ver
undibujo de sedimentacin difuso (reaccin negativa). Los eritrocitos usados proceden
de ovejasy se han estabilizado. Los anticuerpos son de origen monoclonal.
MATERIAL
1. Pipeta serolgica de 0.1mL2. Tubo de ensaye de 13X100mm3. Gradilla metlica
APARATOS1. Centrfuga2. Refrigerador REACTIVOS.Reactivo de ltex
(monoclonal)Tubo con anti hCG y glbulos rojosMUESTRA.OrinaDESARROLLO
(MTODO EN
PLACA)1. Colocar el portaobjetos sobre una superficie horizontal.2. Agitar suavemente
el reactivo de ltex durante 15 segundos para obtener una suspensinhomognea (no
es necesario llevar el reactivo a temperatura ambiente antes del
uso).3. Aspirar lentamente con una pipeta y una cpsula para succionar la cantidad suf
iciente delreactivo de ltex y transferir una gota cayendo libremente (25ml),
sobre el rea de prueba
delportaobjetos.4. Devolver al vial el reactivo de ltex restante de la pipeta.5. Utilizan
do la misma pipeta, apirar lentamente la muestra de orina y transferir dos
gotas,cayendo libremente (50ml), a la misma rea de
prueba.6. Mezclar con un aplicador el reactivo de ltex y la orina, y esparcir la mezcla
sobre toda elrea de prueba
7. Balancear suavemente el portaobjetos dejando que la mezcla fluya lentamente dentr
o delcirculo de prueba hasta 2 minutos8. Colocar el portaobjetos sobre una
superficie orizontal bien iluminada para la
lectura delresultado.INTERPRETACIN DE RESULTADOS.a ) U n a r e a c c i n
positiva viene indicada por la produccin de una aglutinacin de
l t e x granulosa y roja, en el plazo de 2 minutos.b ) U n a r e a c c i n n e g a t i v a
c o r r e s p o n d e a l m a n t e n i m i e n t o d e u n a s u s p e n s i n d e l t e x uniforme y
roja al final del perido de 2 minutos.c ) E n e l c a s o d e m u e s t r a s d e o r i n a
conteniendo concentraciones elevadas de hCG, laaglutinacin
o c u r r i r e n e l p l a z o d e u n m i n u t o y, p o r t a n t o , n o e s n e c e s a r i o
c o n t i n u a r e l balanceo hasta el final del perido de 2 minutosd) En el caso de
muestras de orina conteniendo concentraciones bajas de hCG, o en elcaso
de orinas negativas, el balanceo debe continuarse hasta 2 minutos.DESARROLLO
(MTODO EN TUBO)1. Fitrar por lomenos 5-8mL de orina
(de preferencia una muestra de las primeras horas dela maana) a
travs de papel de filtro suave o centrifugar durante 5-10
minutos.2. Abrir el tubo y colocar en una gradilla para la prueba con el espejo adecuad
o.3. Pipetear 400ml de agua destilada en el tubo.4. Aadir 100 ml de la orina centrifug
ada o filtrada en el tubo.5 . A g i t a r s u a v e n t e l a g r a d i l l a p a r a l a p r u e b a
( u n o s 3 0 s e g u n d o s ) p a r a c o n s e g u i r u n mezclado a fondo y colocar el tubo
fuera de vibraciones o del
calor.6. Efectuar la lectura del punto final precisamente dos horas ms tarde
Punto final.El espejo inclinado en la base de la gradilla de prueba permite
que el resultado pueda leerse sin perturbar los dibujos de sedimentacin . Un anillo
pardo clara mente definido indica que
elr e s u l t a d o e s p o s i t i v o . U n s e d i m e n t o p a r d o a m a r i l l e n t o d i f u s o i n d i
c a q u e e l r e s u l t a d o e s negativo.S i e l d i m e t r o d e l a n i l l o e s m a y o r
o d i c h o a n i l l o e s m s v a g o y e s t m e n o s c l a r a m e n t e definido, el
resultado debe considerarse negativa y la prueba debe repetirse unos das
depus.Diagnstico del embarazoLa sensibilidad de Pregnosticon All-in1000M de
1000Ul de hCG/l, lo cual significa quepuede esperarse un resultado positivo, en la
mayora de los embarazos, a partir del 8 da de

lam e n s t r u a c i n e s p e r a d a e n a d e l a n t e . Tod a s l a s p r u e b a s c o n r e s u l t
a d o s n e g a t i v o s d e b e n repetirse unos das despus a no ser que se presente la
menstruacin.Mtodo semicuantitativoLa concentracin dehCG puede medirse
semicuantitativamente prepararando una serie
ded i l u c i o n e s u s a n d o a g u a d e s t i l a d a y e n s a y a r c a d a d i l u c i n
d e l a f o r m a d e s c r i t a e n e l procedimento para la prueba. La dilucin
superior de la serie, con la que se sigue obteniendo u n r e s u l t a d o
positivo, se usa para medir el nivel de hCG en la orina. La
s e n s i b i l i d a d d e l a prueba es de 1000Ul/l. El nivel de hCG puede calcularse a partir
de la frmula. X = 1000N, enque N es el factor de dilucin y X es el nivel mnimo de
hCG en la orina sin diluir.El siguiente esquema ofrece un ejemplo de una
determinacin semicuantitativa:Dilucin. En caso de ser necesario repetir la pruebacon
dilucin1:8(N=8) no se formaanillo <8 000 lU /l 1:2 1:4
orina anillo >8 000 lU/l 1:16 1:321:64(N=64) no se formaanillo <64 000lU/lanillo >64 00
0lU/l 1:128 1:2561:512 1:1024Si se realiza esta anlisis semicuantitativo con
una muestra de la orina recogida en 24 horas. Se obtiene una idea de la
eliminacin diaria de gonadotrofina corinica