O uso de biotecnologias da reproduo em

BFALOS
Novas tecnologias

bfalo tem se tornado uma

fonte vivel de protena no
Brasil. Esta espcie tem se
adaptado bem s condies brasileiras,
mostrando bons resultados tanto na
produo de carne como na de leite.
Entre os fatores responsveis por

Visintin, J.A.; Assumpo, M.E.O.A.;

Baruselli, P.S.; Mello, M.R.B.;
Rodrigues Alves, D.O.; Tavares, L.M.T.
Departamento de Reproduo Animal,
Faculdade de Medicina Veterinria e
Zootecnia, Universidade de So Paulo.
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estes resultados, os mais importantes

so as biotecnologias da reproduo e
a seleo dos animais de produo. A
adoo dos programas de melhoramento gentico, auxiliados pelas tcnicas da inseminao artificial (IA) e da
transferncia de embries (TE), importante para conseguir aumento nas
taxas de produo.
No Brasil, bfalas com bom Escore
de Condio Corporal (ECC) no parto
apresentaram melhor performance
reprodutiva. O primeiro estro aps o
parto influenciado pelo ECC, pois
bfalas com alto escore ( 4,0) mos-

tram sintomas de estro mais cedo do

que bfalas com menor ECC ( 3,5). A
porcentagem de anestro afetada pelo
ECC; resultando em maior nmero de
bfalas em anestro com baixo ECC.
Bfalas com ECC entre 4,0 e 4,5 no
parto apresentaram menor intervalo
entre partos do que bfalas com ECC
entre 2,0 e 2,5. O nmero de doses de
smen por concepo variou de acordo com o ECC, onde animais muito
magros (ECC 2,5) ou muito gordos
(ECC = 5) necessitaram de maior nmero de doses de smen por concepo do que animais com ECC entre 3,0
e 4,5 (tabela 1). Desta forma, o ECC no
parto indicador confivel na
performance reprodutiva de fmeas
no ps-parto (tabela 2). O bfalo tem
comportamento sexual sazonal, pois
animais que vivem distantes da regio
equatorial tm este comportamento
influenciado positivamente pela diminuio de horas-luz dirias.
De acordo com Baruselli o manejo
eficiente consiste em concentrar a
deteco de cio, a Inseminao Artificial (IA) e a Transferncia de Embries
(TE) em poucos meses do ano, de
maro a julho.
A deteco de cio um fator
muito importante no processo de implantao da IA e da TE. A deteco
deficiente diminui as taxas de fertilidade e aumenta os custos da IA e TE.
Portanto, o uso de rufies para deteco
de cio indispensvel.
Baruselli reportou que 37,93% dos
animais apresentaram sinais de cio s
6h da manh, 17,24% ao meio-dia,
20,68% s 6h da tarde e 24,13%
meia-noite. Porm, as bfalas apresentam
sintomas
de
cio
mais
freqentemente noite, provavelmen-

te influenciados pelo meio ambiente.

Durante o outono, tanto a temperatura
como a umidade relativa do ar permitem pastoreio e locomoo dos animais sem estresse trmico. Em locais
com temperatura e umidade relativa
do ar altas durante o dia, h aumento
dos sintomas de estro durante a noite.
Baruselli sugere a observao de cio s
6h da manh e s 6h da tarde com
60,26% e 39,74% de deteco de cio,
respectivamente.
Para alcanar os melhores resultados, a inseminao artificial deve ser
realizada no final do estro, quando o
animal no est mais aceitando a cobertura. Portanto, recomendvel que
as fmeas que apresentarem sintomas
de estro s 6h da manh sejam
inseminadas s 6h da tarde ou viceversa, uma vez que o estro destes
animais dura em mdia de 12 horas
(63,23%).
A inseminao artificial realizada
entre 6 e 8h da manh apresentou taxa
de concepo de 54,27%, entre 11 e
13 horas de 50% e entre 17 e 19h de
45,35%.
Baruselli et al. inseminaram 831
fmeas em final de estro, quando no
mais aceitavam cobertura, observando
intervalo entre o incio do estro e a
inseminao artificial (durao do estro)
de 12h (76,24%), 24h (20,44%) e 36h
(3,32%).
O ciclo estral que tem durao
mdia de 21 dias, variando de 18 a 26
dias, pode ser sincronizado para facilitar o manejo da IA e da TE, sendo que
o intervalo entre a administrao da
prostaglandina e o estro varia de 24 a
96 horas, predominando o tempo de
48 a 84 horas em 90% dos animais.
Ainda, os fatores climticos e sazonais tm forte efeito sobre as caractersticas fsicas e morfolgicas do smen. Na Regio Amaznica, um ambiente quente, mido e tropical, o melhor perodo para congelar smen
entre janeiro e junho. Bfalos so sensveis ao estresse trmico, portanto,
comum a queda na qualidade do smen durante a estao quente.
Juntamente com a IA, a transferncia de embries tem se tornado
uma das mais poderosas ferramentas
para os criadores. Muitos pases tm
incorporado a superovulao e a transferncia de embries em programas
de testes de prognie para impulsionar
o melhoramento gentico dos rebanhos produtores de carne. Com a seleo de machos e fmeas, tanto adultos
como jovens, foi esperada uma melho-

ra de 12% sob o aspecto gentico.

Posteriormente, um aumento de 22%
nas taxas de melhoramento gentico
foram previstas com o uso de tcnicas
de fecundao in vitro (FIV) para produzir embries de bezerras de 1 a 5
meses de idade.
O desenvolvimento do embrio
bubalino mais rpido do que o bovino, implicando a colheita e transferncia ao redor de 5 ou 6 dias aps o estro.

A resposta superovulao e
recuperao embrionria em bfalos
geralmente baixa (tabela 3).
Avanos considerveis tm sido
atingidos em termos de resposta
superovulatria e de produo de embries, mas estudos adicionais em
foliculognese, produo de embries
in vitro, imunologia da interao materno-fetal e desenvolvimento do feto
devem ser realizados para que estas

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tgios de mrula e de blastocisto foi

maior (17,83% e 8,10%, respectivamente).
As baixas taxas de recuperao de
ocitos por ovrio podem ser atribudas ao baixo nmero mdio de folculos
primordiais no ovrio.
Os benefcios da tecnologia de
FIV para o melhoramento gentico
podem ser alcanados se os ocitos
forem aspirados de animais vivos com
alto potencial gentico. Uma alternativa para a produo de embries pode
ser a fecundao in vitro a partir de
ocitos imaturos aspirados por ultrasom transvaginal, tanto de animais adultos quanto em fase pr-pbere tratados com gonadotrofinas.
Kitiyanant et al. obtiveram ocitos
de bfalas Swamp adultas pela aspirao folicular por ultra-som, os quais
foram desenvolvidos in vitro at os
estgios de mrula ou blastocisto. No
Brasil, Tavares et al. recuperaram 1,35
ocitos por animal pela aspirao por
ultra-som de 5 bfalas durante 8 semanas (tabela 4).
Agradecimentos
Os autores agradecem aos criadores de Bfalos do Vale do Ribeira e
FAPESP (96/5845-1) e ao CNPq (52/
1773-96.2) pelo fornecimento de infraestrutura e de animais.
REFERNCIAS
BIBLIOGRFICAS
tcnicas possam ser usadas nessa espcie.
A literatura escassa quanto a FIV
em bfalos, no entanto o primeiro
bfalo nascido a partir de maturao,
fecundao de ocito e cultivo at o
estgio de blasto cisto in vitro prova a
possibilidade desta tcnica em bfalos.
Em bfalos, a taxa de in vitro
(MIV) foi significativamente maior
(81,7%) em meios suplementados com
LH, FSH e estradiol do que em meios
sem hormnios. A taxa de maturao
de 41% e 52% foi reportada para animais adultos e pr-pberes. Tavares et
al., no Brasil, observaram taxa de
maturao de 80,20% (tabela 4).
Em bfalos, as baixas taxas de
fecundao (19,6%) e de clivagem
(8,9%) foram obtidas com smen congelado e capacitado com 10mg de
heparina por ml em meio Hepes-Talp.
A capacitao envolve mudanas fisiolgicas
no
acrossomo
do
espermatozide, necessrias para sua
penetrao na zona pelcida do ocito.
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No entanto, foram significativamente aumentadas quando o smen

congelado foi capacitado com 5mMol
de cafena mais 10mg de heparina por
ml em meio de Bracket e Oliphant BO (fecundao de 29,8% e clivagem
de 27,6%) e posterior aumento quando espermatozides frescos foram capacitados da mesma maneira (fecundao de 50% e clivagem de 34%).
Estudos relacionados maturao
e fecundao in vitro em bfalos so
necessrios, incluindo tratamento com
gonadotrofinas de bfalas em fase
puberal associado a aspirao folicular
transvaginal com ultra-som.
A porcentagem de embries que
se desenvolveram at os estgios de
mrula e de blastocisto foi baixa (4,04%
e 0,52%, respectivamente), quando
estes foram co-cultivados com clulas
do cmulus. No entanto, quando zigotos
foram cultivados em monocamada de
clulas do cmulus juntamente com
clulas epiteliais do oviduto, a porcentagem de desenvolvimento at os es-

1. BARUSELLI, P.S. (1992). Atividade ovariana e comportamento reprodutivo no perodo ps-parto em

bfalos (Bubalus bubalis). (Ovarian
activity and reproductive behaviour in
pospartum period in buffaloes). So
Paulo, (Thesis), 99p. Faculdade de
Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de So Paulo.
2. BARUSELLI, P.S. (1993). Manejo
reprodutivo de bubalinos. (Reproductive management in buffaloes) SECRETARIA DA AGRICULTURA E ABASTECIMENTO, INSTITUTO DE ZOOTECNIA. Registro, 46p.
3. BARUSELLI, P.S. (1994a). Basic
requirements for artificial insemination
and embryo transfer in buffaloes. Buffalo J., (Suppl 2):53-60.
4. BARUSELLI, P.S. (1994b). Sexual behaviour in buffaloes. Proc. IV World
Buffalo Congress, 1:158-173.
5. BARUSELLI, P.S. (1996). Reproduo de bubalinos. I Simpsio Brasileiro de Bubalinocultura. Cruz das Almas- BA, 29p.