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Consideraes sobre a aplicao do Chronic Mild Stress em um experimentopiloto sobre estresse e alteraes de desempenho em encadeamento de
respostas de ratos Wistar.
*Josiane F. F. Knaut, Andr Monezi Andrade, Andressa Bach, Dhayana I. Veiga
Katia Daniele Biscouto, Mnica Las Camoleze.
Este trabalho objetivou verificar relaes entre a submisso ao Chronic Mild
Stress (CMS) e variaes no processo de aprendizagem de um encadeamento
de respostas em caixa de Skinner modificada. Foram sujeitos da pesquisa 20
ratos Wistar, machos, com aproximadamente 90 dias. Os sujeitos passaram
por seis prticas preparatrias ao experimento: Nvel Operante da Resposta
de Presso Barra, Treino ao Bebedouro, Modelagem da Resposta de
Presso Barra, Reforo Contnuo da Resposta de Presso Barra,
Esquema de Reforo Intermitente em Razo Fixa (FR10) e Discriminao de
Estmulos Luminosos. Os sujeitos foram divididos em dois grupos de dez. Um
grupo foi submetido ao CMS enquanto o outro no passou por outra atividade
neste perodo. Aps a aplicao do modelo, os 20 sujeitos foram submetidos
ao encadeamento. Utilizou-se o teste t-Student para amostras independentes.
Ambos os grupos apresentaram semelhana estatstica nas variveis
gotejamento, reforos/min, eventos/min ao longo das prticas preparatrias.
Aps a aplicao do CMS, o grupo experimental apresentou uma tendncia de
aumento do tempo de execuo das tarefas (29,4+18,6) em relao ao grupo
controle (26,4+10,0), assim como o nmero de erros (experimental=139,4+68,1;
controle=112,5+56,8). Porm, mesmo havendo uma tendncia diferena, no
foi possvel distinguir os dois grupos estatisticamente (p>0,05).
Palavras-chave: Encadeamento de respostas, Chronic Mild Stress, ratos
Wistar.

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1. REVISO DE LITERATURA
O objetivo desta pesquisa foi verificar possveis relaes entre o
estresse patolgico e variaes no processo de aprendizagem de um
encadeamento

de

respostas

em

ratos

Wistar,

utilizando

caixa

de

condicionamento operante. Para isso se torna necessria uma breve


explanao sobre os conceitos de aprendizagem e estresse.
KOLB & WHISHAW (2002, p. 490) afirmam que aprendizado uma
alterao relativamente permanente no comportamento de um organismo,
resultante de uma experincia, sendo a memria referente habilidade de
recordar ou reconhecer experincias anteriores. BRANDO (1991, p. 57)
afirma que a aquisio, o armazenamento e a evocao de informao so
aspectos centrais nos processos de aprendizagem e memria. Estudos sobre a
memria de animais de laboratrio so feitos a partir da obteno de
evidncias que revelem o que eles conseguem lembrar, sendo necessrio
desenvolver maneiras para que seus conhecimentos sejam mostrados (KOLB
& WHISHAW, 2002, p. 491).
J o estresse a capacidade de se adaptar s situaes. BALLONE
(1999)

conceitua

como

uma

resposta

fisiolgica,

psicolgica

comportamental de um organismo que procura adaptar-se a novas condies


internas e/ou externas.
O estresse se constitui de quatro grandes fases, de acordo com o
modelo quadrifsico de LIPP.

A primeira fase (alerta) se inicia quando a

pessoa se confronta com um estressor e ocorre a quebra do equilbrio interno


que acontece em decorrncia da ao exacerbada do sistema nervoso
simptico e da desacelerao do sistema nervoso parassimptico em
momentos de tenso (LIPP, 1996, p.22). Quando o estressor tem uma maior
durao e sua intensidade maior que a resistncia da pessoa, o organismo
tende a restabelecer a homeostase de um modo reparador e entrar na
segunda fase do estresse (resistncia), onde a energia adaptativa de reserva
utilizada na tentativa de reequilbrio (LIPP, 1996, p.23).
A terceira fase de estresse (quase-exausto) tem como caracterstica
principal uma flutuao entre as fases de resistncia e exausto. Se a reserva
for suficiente, a pessoa sai do processo de estresse, mas se o estressor exige
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mais esforo de adaptao para lidar com a situao de estresse, o processo
evoluir e chegar fase de exausto. Haver um aumento nas estruturas
linfticas, e uma exausto psicolgica e fsica aparecer, e conseqentemente
as doenas (LIPP, 1996, p.23).
Assim como os seres humanos, os animais tambm podem sofrer
devido exposio continua de estmulos estressores. Portanto, para RIVERA
(2002, em ANDRADE, PINTO e OLIVEIRA, 2002), as causas do estresse em
animais de laboratrio podem ser de diferentes naturezas, tais como ambiental,
experimental (decorrentes dos mtodos experimentais), internas ou fisiolgicas
e vinculadas dor. Um ambiente inadequado somado ao estresse experimental
causa alteraes fisiolgicas no animal, sendo que esta inadequao consiste
na falta das necessidades bsicas, que so os nutrientes, gua, temperatura
ambiental, umidade, iluminao, barulho e ciclos de luz e escuro (RIVERA,
2002, em ANDRADE, PINTO e OLIVEIRA, 2002). Para que seja possvel
diminuir o estresse indesejvel nesses animais, devem-se minimizar os custos
biolgicos deste.
RIVERA (2002, em ANDRADE, PINTO e OLIVEIRA, 2002)

afirma

ser importante que a temperatura das salas no sofra alteraes e que a


umidade relativa do ar no seja muito elevada, pois os ratos so animais
homeotrmicos, necessitando que sua temperatura corporal permanea
constante. A alimentao desses animais deve ser balanceada de acordo com
a espcie, pois tanto a falta quanto o excesso dos nutrientes necessrios
podem influenciar na resposta do animal. Tambm muito importante que os
rudos e a luz do ambiente sejam controlados, porque ambos em excesso so
prejudiciais e irritantes para esses animais. Todos esses fatores podem causar
estresse no rato e, por conseqncia, os resultados do experimento podem
sofrer alteraes.
H algumas maneiras que possibilitam ao animal se livrar de uma
situao estressante, como a fuga do estressor. Quando isso no possvel
ocorre uma alterao no estado biolgico, onde so usados o sistema nervoso
autnomo e o sistema neuroendcrino. Partindo do sistema neuroendcrino, o
sistema corticoadrenal monitora o estresse, pois os glicocorticides so
secretados em resposta a uma grande variedade de estressores (RIVERA,
2002, em ANDRADE, PINTO e OLIVEIRA, 2002).
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Segundo RIVERA (2002, em ANDRADE, PINTO e OLIVEIRA, 2002),
h algumas diferenas que podem ser observadas no animal, possibilitando
medir ou identificar o estresse. Essas alteraes podem ser comportamentais
(apetite, atividade, agressividade, etc), sinais fisiolgicos (respirao, perda de
peso, fluxo sanguneo, etc), leses patolgicas (ulcerao gstrica, leses
renais, amiloidose, etc) e indicadores bioqumicos.
A pesquisa foi realizada a partir da Anlise Experimental do
Comportamento, que uma rea da Psicologia inserida no contexto das
disciplinas das cincias naturais, tais como a Biologia, a Fsica e a Qumica. A
partir deste paradigma, os organismos que se comportam so vistos como
produtos

naturais

de

processos

biolgicos

evolutivos,

sendo

comportamento e o ambiente eventos naturais e independentes, em que a


relao entre eles pode ser interpretada como uma relao funcional entre
variveis tal como ocorre em qualquer cincia natural. Desta forma, o
comportamento considerado como sendo a varivel dependente e os fatores
do ambiente as variveis independentes, ou seja, em Anlise Experimental do
Comportamento, o comportamento produto de eventos do ambiente,
identificveis e passveis de controle (MATOS & TOMANARI, 2002, p. 5-6).
Segundo SKINNER (2002), a variao e a seleo de comportamentos
emitidos pelos organismos ocorrem em trs nveis. O primeiro deles o
filogentico, que representa a evoluo biolgica, ao longo do tempo, de
populaes

de

organismos

suas

caractersticas,

garantindo

sobrevivncia da espcie (CATANIA, 1999). O segundo o ontogentico,


que permite a aquisio de comportamentos por suas conseqncias
durante a vida de um organismo e o terceiro o nvel de seleo cultural,
pelo qual ocorre sobrevivncia de padres de comportamento medida
que so passados de um indivduo para outros, dependendo de
comportamentos que mudam tanto durante a ontogenia quanto durante a
filogenia.
A seleo filogentica pode ser evidenciada por meio de comportamentos
apresentados de maneira involuntria, ou seja, comportamentos reflexos (ou
respostas

incondicionadas)

gerados

por

estmulos

incondicionados

(SKINNER, 1931, citado por CATANIA, 1999). Segundo CATANIA (1999), o


reflexo uma relao incondicional entre um estmulo e uma resposta, ou
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seja, a relao no aprendida, filogentica. no condicionamento
respondente que uma relao pode se tornar condicional, ou seja,
aprendida. por meio dele que um estmulo pode desencadear uma
resposta que a priori no seria possvel de ser gerada por ele.
O

condicionamento respondente torna possvel,

por meio de um

emparelhamento, que um co salive diante de um som e no apenas diante


da viso de um pedao de carne; salivar diante do som torna-se uma
resposta ou reflexo condicional, pois foi aprendido (SKINNER, 1974). De
acordo com SKINNER (1974), o emparelhamento, neste caso, aconteceria
da seguinte maneira: o som (estmulo neutro, por no eliciar a resposta de
salivao) seria apresentado ao co ao mesmo tempo em que fosse
apresentada a carne (estmulo incondicional por eliciar a salivao), a partir
do momento que o estmulo neutro (som) comear a eliciar a resposta de
salivao, dizemos que o estmulo neutro agora um estmulo condicional,
pois, a resposta de salivar diante do som foi aprendida e agora se tornou
uma resposta ou reflexo condicional.
A

seleo

comportamentos

ontogentica

operantes

ocorre

emitidos

pelos

por

meio

da

organismos

emisso
e

que

de

geram

conseqncias no ambiente, as quais influenciam as prximas execues do


comportamento (SKINNER, 1974). Tais conseqncias podem aumentar
(reforo) ou diminuir (punio) a probabilidade futura de nova ocorrncia do
comportamento. Essa relao entre o organismo que se comporta e o ambiente
chama-se contingncia.
As conseqncias reforadoras podem ser positivas, tendo como
finalidade produzir uma conseqncia, ou negativas, com o objetivo de evitar
uma conseqncia aversiva (SKINNER, 1974). As conseqncias punitivas
tambm podem ser positivas ou negativas; nas positivas a ocorrncia do
comportamento tende a diminuir de freqncia porque a conseqncia
aversiva e, nas negativas porque conseqncia reforadora retirada. Assim, a
partir dos princpios da Teoria da Aprendizagem, se faz necessrio o
conhecimento de alguns procedimentos responsveis pela instalao, aumento
ou diminuio da emisso de comportamentos operantes.
O condicionamento operante modela o comportamento como o
escultor modela a argila. Um comportamento operante no algo que surja
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totalmente desenvolvido no comportamento do organismo. Ele resultante de
um contnuo processo de modelagem (SKINNER, 1998, p. 101). A modelagem
tem como objetivo moldar o comportamento e seu ponto inicial so respostas
simples que j fazem parte do repertrio do organismo (MATOS, 2002, p. 109).
Segundo CATANIA reforar um movimento tende a modelar o responder mais
eficientemente (CATANIA, 1999, p. 130). Este reforamento diferencial consiste
em selecionar algumas respostas, aquelas que se deseja reforar para que se
repitam, e no reforar as que no so compatveis com o comportamento
desejado. O critrio de reforamento deve ser mudado gradualmente, de tal
forma que ele reforce as respostas que, se aproximem da resposta desejada.
Assim elas aumentaro de freqncia e enquanto as outras entraro em
extino (MATOS e TOMANARI, 2002, p. 109). Portanto, devem ser definidas
quais respostas estaro mais prximas da resposta a ser modelada para serem
reforadas (CATANIA, 1999, p. 131-132). O reforo que desenvolve a
habilidade deve ser imediato, de outro modo, a preciso do efeito diferencial se
perde (SKINNER, 1998, p. 106).
No experimento foi utilizada a gua como reforo. Operantes
reforados com alimento tm implicaes para a sobrevivncia de cada
membro da espcie, sendo que a privao um procedimento que em geral
aumenta a probabilidade de um grupo de respostas. Em caso de privao de
gua a probabilidade da ocorrncia de comportamentos relacionados com gua
pode ser aumentada. J a saciao a operao que em geral diminui a
probabilidade

do

responder.

Normalmente,

um

organismo

bebe

intermitentemente para manter um estado estvel. Quando o organismo


privado da oportunidade de beber bvio que o beber tem uma maior
probabilidade de ocorrer na primeira oportunidade oferecida ao animal, pois
esta privao perturba o equilbrio do organismo. A este equilbrio do
organismo d-se o nome de homeostase. Isto explica porque a privao de
gua aumenta a freqncia de ocorrncia de todos os comportamentos
condicionados e incondicionados relacionados ingesto de gua (SKINNER,
1998, p. 155-156).
Outro procedimento utilizado para moldar o comportamento e que foi
usado na pesquisa a discriminao de estmulos luminosos. O termo
controle de estmulos utilizado no sentido de que a presena ou a ausncia
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de luz (outros estmulos tambm podem ser utilizados) controla o operante,
mudando a probabilidade de a resposta acontecer. O contexto do
comportamento operante chamado de estmulo discriminativo. De acordo
com BAUM (1999, p. 112-113) discriminao significa a mudana do
comportamento em funo da mudana dos estmulos do ambiente, podendo
ocorrer no laboratrio quando a presso barra apenas apresentada na
presena da luz acesa (estmulo discriminativo) e no quando apagada. Um
reforo na presena do SD (estmulo discriminativo luz acesa) aumenta sua
eficcia como indcio, mas tambm aumenta, em um grau menor, a eficcia do
S (estmulo delta luz apagada). A alterao continuada de SD e S que
provoca a separao do poder evocativo de ambos (BAUM, 1994, p. 114).
Por meio das informaes apresentadas pode-se dizer que uma
discriminao ocorre quando um organismo reage de modo diferente e
apropriado frente a dois ou mais estmulos antecedentes emisso do
comportamento, porm, quando uma generalizao ocorre dito que o inverso
predomina, ou seja, o organismo reage de maneira semelhante diante de dois
ou mais estmulos antecedentes, no havendo uma diferenciao significativa
na emisso do comportamento, como percebido na discriminao. Quanto
mais generalizao, menos discriminao e vice-versa (MATOS e TOMANARI,
2002, p. 182).
A Anlise do Comportamento envolve dois tipos de pesquisa: bsica e
aplicada. O programa de pesquisas bsicas tem o objetivo de produzir
conhecimento acerca das leis gerais que descrevem as relaes funcionais
entre o comportamento e o ambiente, sendo, geralmente, realizadas em
situaes de laboratrio experimentalmente controladas, como ser feito na
presente pesquisa. J o programa de pesquisas aplicadas enfatiza a
transposio e adaptao de tais leis para condies especficas ao ser
humano (MATOS & TOMANARI, 2002, p. 10-11).
Para a realizao da pesquisa, foi levantada a hiptese de que ratos
submetidos a estressores leves apresentariam um desempenho mais baixo do
que aqueles apenas submetidos apenas privao de gua necessria
realizao do condicionamento de respostas encadeadas.

Desta forma

utilizou-se o Chronic Mild Stress (CMS), um modelo animal experimental


proposto como um modelo de depresso por WILLNER e cols. (1987), citados
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por THOMAZ (2001). Aps passarem por um conjunto de "situaes de
estresse suave", o consumo de gua e de gua com sacarose dos ratos
submetidos ao modelo decresce. Considera-se que a submisso ao conjunto
de estressores modifica o organismo e, conseqentemente, a propriedade
recompensadora da gua e da gua com sacarose (THOMAZ, 2001).

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2. OBJETIVO
Foi verificar se havia alterao de desempenho na aprendizagem de um
encadeamento de respostas em ratos albinos submetidos cronicamente a
estressores leves em comparao a ratos no submetidos a tais condies,
utilizando caixa de condicionamento operante.

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3. MTODO

3.1.

SUJEITO

Foram submetidos ao experimento 20 ratos da espcie Rattus


norvegicus de linhagem Wistar, machos, ingnuos e com aproximadamente 90
dias de idade. Os sujeitos foram divididos em dois grupos compostos por 10
ratos cada. Um dos grupos foi submetido a um modelo de depresso (Chronic
Mild Stress) e o outro grupo, no submetido ao modelo, representou o grupocontrole. Todos estavam privados de gua por 48 horas antecedentes
realizao das sesses das prticas preparatrias e da prtica de
encadeamento de respostas.

3.2.

INSTRUMENTOS E APARELHOS
Foi utilizada uma caixa de condicionamento operante, caixa de Skinner

(Anexo 1). A caixa de Skinner corresponde a um objeto cbico de metal, com


aproximadamente 30x30x30 cm; parte inferior composta por barras cilndricas
metlicas espaadas entre si, sobposta por uma bandeja de detritos; possui
uma abertura lateral com uma porta de acrlico transparente; internamente
localiza-se a barra de resposta. A caixa controlada pela caixa de comandos,
externa a ela, controlada pelo experimentador, de acordo com os estmulos que
venham a serem utilizados durante o experimento, como luz, campainha e
liberao de gua no bebedouro. A caixa de comando conectada tomada
de energia eltrica e ligada caixa de condicionamento por meio de uma
fiao. Para a realizao do encadeamento de respostas foi acoplado ao teto
de caixa de Skinner, feito de acrlico, um trapzio de metal inoxidvel. Desta
forma, constaram na caixa dois manipulandos: a barra e o trapzio.

3.3.

PROCEDIMENTOS

a) Prticas preparatrias:
Os 20 sujeitos foram submetidos a trs sesses experimentais, sendo as
duas

primeiras

preparatrias

terceira

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de

condicionamento

ao

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encadeamento de respostas (MATOS e TOMANARI, 2002). Na primeira
sesso (Anexo 2) foi realizadas s prticas de Nvel Operante da Resposta de
Presso Barra, Treino ao Bebedouro, Modelagem da Resposta de
Presso Barra e Reforo Contnuo da Resposta de Presso Barra (CRF
I). Na segunda sesso (Anexo 3) foram realizadas as prticas de Esquema de
Reforo Intermitente em Razo Fixa (FR10) e Controle de Estmulos com um
Esquema Mltiplo FR-EXT. Antes de cada sesso experimental o sujeito foi
transportado do biotrio at o laboratrio de comportamento animal. Antes de
ser utilizada, a caixa de Skinner foi devidamente higienizada com lcool (70%)
e algodo, alm da verificao de seu funcionamento (caixa de controle) e do
nvel de gua no bebedouro. A experimentadora estava devidamente vestida
com jaleco e utilizou luvas de procedimento para a manipulao dos sujeitos.
b) Aplicao do Chronic Mild Stress:
Concludas as prticas preparatrias, foi realizado um sorteio aleatrio
dividindo os sujeitos em dois grupos com dez ratos cada. Um dos grupos foi
submetido ao Chronic Mild Stress (CMS), um modelo de estresse animal
proposto por WILLNER e cols. (1987), citados por THOMAZ (2001). Tal modelo
sugeriu a exposio dos animais a um conjunto de condies de estresse
suave, por seis semanas, tais como (Anexo 4): privao de gua e comida,
iluminao contnua, agrupamento de dois sujeitos na mesma gaiola, cheiro
(desodorizador de ambiente), apresentao de uma garrafa vazia aps
privao de gua, acesso restrito a comida, inclinao da gaiola e presena de
um objeto estranho (toco de madeira) na gaiola (THOMAZ, 2001). A tcnica de
biotrio foi instruda sobre o modelo e, em seguida, ela realizou a aplicao do
modelo em metade da amostra.
O

processo

de

distribuio

de

sujeitos

foi

cego

para

experimentadora, ou seja, apenas a tcnica de biotrio tinha conhecimento


sobre quais ratos foram submetidos ao modelo de estresse. Antes da terceira
sesso experimental os sujeitos foram entregues aleatoriamente pela bioterista
experimentadora para que fossem submetidos ao encadeamento sem que
esta soubesse quais estavam estressados e quais no estavam. A tcnica de
biotrio teve o controle dos integrantes de cada grupo por meio de uma lista de
sujeitos, compatvel com as informaes presentes nos crachs colocados na
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caixa de cada um. No crach constava apenas identificao dos sujeitos, o
que poderia ser visto pela experimentadora, j o controle da submisso ao
CMS foi feito por meio da lista, na qual constavam quais sujeitos faziam parte
de cada grupo.
c) Encadeamento de respostas:
O encadeamento de respostas consistiu em duas etapas. A primeira
teve o objetivo de propiciar, aos sujeitos, um desempenho de linha de base no
esquema mltiplo FR (razo fixa) Ext (extino), ou seja, perodos em SD e
S, na presena de um trapzio (caixa modificada). A segunda etapa objetivou
o condicionamento seqncia de comportamentos necessrios para a
realizao do encadeamento de respostas.
-

Completou-se na folha de registro (anexo 4) as intensidades


luminosas que foram utilizadas (0% = Ext ou S e 100% = FR ou SD);

A chave de controle do bebedouro ficou inicialmente desligada e a


chave de controle de luz na posio apagada (0%);

1 Parte: Linha de base na presena do trapzio:


A durao deste passo foi de 10 minutos, por meio do qual foram
registrados os seguintes comportamentos do animal:
-

Tocar

barra

(TB):

considerou-se uma

ocorrncia

deste

comportamento se o sujeito apenas tocasse qualquer parte da barra.


-

Farejar (FA): considerou-se uma ocorrncia se o sujeito aproximasse


o focinho de qualquer parte do manipulando alternativo (trapzio). A
cada dois segundo de durao desse comportamento foi contada uma
nova ocorrncia.

Morder (MO): considerou-se uma ocorrncia deste comportamento


quando o sujeito mordesse qualquer parte do manipulando alternativo
(trapzio).

Tocar trapzio (TT): considerou-se uma ocorrncia da resposta de


tocar sempre que o sujeito encostasse a parte do corpo (uma pata, duas
patas ou focinho, etc.) no trapzio.
Ao final dos dez 10 minutos, iniciou-se a fase do treino do

encadeamento de respostas (segunda parte).


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2 Parte: Encadeamento:
O encadeamento teve incio com a luz da caixa apagada. Em esquema
de reforamento intermitente em razo fixa (FR10), assim que o sujeito emitisse
uma resposta de tocar o trapzio, imediatamente a luz foi acesa na intensidade
100% (FR ou SD). A luz permaneceu acesa at que ocorresse o acionamento
do bebedouro (dez presses barra). Assim que o reforo foi liberado a luz foi
desligada.
Diagrama da cadeia de respostas estabelecido no laboratrio:
Luz 0%

Tocar trapzio

Luz 100%

Presso barra (FR5)

gua
Na presena da luz 100%, uma resposta de tocar o trapzio (encostar
uma parte do corpo no mesmo) foi registrada, mas no produziu qualquer
conseqncia; uma resposta de presso barra, no entanto, foi sempre
seguida de gua. Por isso, o controle do bebedouro foi colocado na posio
automtico aps a nona resposta de presso barra, sendo colocando na
posio desligado assim que ocorresse a dcima presso barra.
Ateno: Caso o sujeito no emitisse a resposta ao trapzio em at 3
minutos depois de iniciado o passo de encadeamento, era executada a
modelagem desta resposta. Para a realizao dessa modelagem foi adotado o
procedimento de aproximaes sucessivas, descrito na terceira prtica da
primeira sesso experimental (modelagem da reposta de presso barra),
considerando, neste momento, as respostas ao trapzio: olhar em direo ao
trapzio, farejar trapzio, tocar trapzio com o corpo, tocar trapzio com a
pata

apoiar-se

sobre

trapzio.

Tais

comportamentos

foram

conseqenciados com a apresentao do estmulo luz 100%, o qual controlava


a resposta de presso barra e, conseqentemente, a liberao do reforo
(gua) aps a nona resposta.
O registro de respostas de presso barra e toque ao trapzio foi feito
minuto a minuto, na seqncia em que foram sendo emitidas, utilizando a
seguinte classificao:

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-

A: respostas ao trapzio que foram seguidas pelo acender da luz


(emitidas com a luz apagada).

a: respostas ao trapzio que no foram seguidas pelo acender da


luz (emitidas com a luz acesa).

B: presses barra que foram seguidas pela apresentao de


gua (com a luz acesa).

b: presses barra que no foram seguidas pela apresentao de


gua (com a luz apagada).
Entre apresentao de luz e uma resposta A, anotou-se o tempo

transcorrido, pois indicava a latncia da nova resposta sendo instalada (tocar


trapzio), contada a partir da apresentao do estmulo discriminativo. Caso a
execuo de uma cadeia coincidisse com uma mudana na marcao de
minutos na folha de registro, marcavam-se as respostas no momento em que
efetivamente ocorreram, mesmo que isso implicasse em ter A e B em linhas
distintas.
A prtica foi finalizada aps a emisso de 50 cadeias de resposta
terem sido completadas.

3.4.

PROCEDIMENTO DE ANLISE DE DADOS


Em cada prtica realizada com cada sujeito foram registrados:
a) tempo de durao da prtica;
b) nmero de reforos (gotas de gua) necessrios para
concluso da prtica;
c) nmero de sesses necessrias para cumprir com os
critrios de finalizao de cada prtica.
Tais dados serviram de base para que o desempenho de cada sujeito

pudesse ser delineado. Aps a prtica de encadeamento de respostas


experimentadora soube quais sujeitos foram submetidos ao CMS e, com isso,
agrupou os dados de cada sujeito em seu respectivo grupo (experimental ou
controle). O desempenho foi definido a partir do tempo total, tempo mdio de
latncia e o nmero de erros apresentados durante a prtica de encadeamento
de respostas.
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Foi aplicado o teste estatstico Shapiro Wilk para saber se os dados
coletados apresentavam distribuio normal (maioria dos dados apresentavam
valores mdios) ou no (maiorias dos dados apresentavam valores mnimos ou
mximos). Diante de uma distribuio normal dos dados seria aplicado um
teste paramtrico (teste t-Student) e diante de uma distribuio apresentada
fora dos padres de normalidade estatstica seria aplicado um teste noparamtrico (Mann Whitney-U).

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4.0 RESULTADOS
4.1 DADOS COLETADOS
Com a aplicao deste experimento, hipotetizava-se que o grupo
exposto ao Chronic Mild Stress (CMS) apresentasse menor desempenho
durante a prtica de encadeamento de respostas. Ou seja, a hiptese inicial
era de que os sujeitos que foram expostos cronicamente a estressores leves
levariam mais tempo para aprender e apresentariam um maior nmero de erros
em comparao ao grupo controle.
Por meio da aplicao do teste Shapiro Wilk, verificou-se que os dados
coletados no apresentaram uma distribuio normal dos valores, ou seja,
grande parte dos dados apresentou valores mnimos ou mximos ao invs de
valores mdios. Desta forma, foi necessrio, para que fosse realizada a
comparao entre os grupos controle e experimental, aplicar o teste Mann
Whitney-U,

por

meio

do

qual

constatou-se

no

haver

diferenas

estatisticamente significativas entre os grupos. Entretanto, a partir das Figuras


2 e 3, pode-se observar uma tendncia diferena estatstica entre os grupos.
A Figura 2 refere-se ao tempo mdio transcorrido durante toda a prtica
de encadeamento de respostas necessrio para que os critrios de concluso
fossem cumpridos, ou seja, para que a cadeia de comportamentos fosse
aprendida. A partir do grfico apresentado, observa-se uma tendncia
diminuio do tempo total no grupo experimental. Em outras palavras, o grupo
experimental apresentou menor tempo de execuo total da prtica que o
grupo controle.

Experimental

Figura

Controle

de

Tempo

total

mdio

execuo da
0,0

5,0

10,0

15,0

20,0

25,0

tempo mdio

- 16 -

30,0

35,0

40,0

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prtica de Encadeamento de respostas.
No que se refere ao nmero de erros (pressionar barra no escuro e tocar
o trapzio no claro) apresentados pelos sujeitos durante a prtica de
encadeamento de respostas, como mostra a Figura 3, o grupo experimental
apresentou um maior nmero de erros, indicando haver uma tendncia
diferena entre os grupos.

Experimental

Controle

0,0

20,0

40,0

60,0

80,0

100,0

120,0

140,0

160,0

mdia de erros

Figura 3 Mdia de erros apresentados durante a prtica de


Encadeamento de respostas.
J por meio da Figura 4, pode-se observar que no houve qualquer
diferena relevante entre os grupos quanto mdia de latncia apresentada
durante a prtica de encadeamento de respostas. Ou seja, o tempo mdio
gasto pelos sujeitos durante a emisso das cadeias no foi diferente entre os
grupos.

Experimental

Controle

-2,0

-1,5

-1,0

-0,5

0,0

0,5

1,0

mdia de latncia

- 17 -

1,5

2,0

2,5

Figura

contedo retirado de WWW.CESTTRES.COM


Mdia de latncia apresentada durante a prtica de
Encadeamento de respostas.

Mesmo no havendo diferenas estatisticamente significativas nas


comparaes feitas entre os grupos: experimental e controle, pode-se afirmar
haver uma tendncia diferena entre os grupos quanto ao tempo total de
execuo da prtica de encadeamento de respostas (menor no grupo
experimental) e o nmero de erros apresentados durante a aprendizagem da
cadeia de respostas (maior no grupo experimental). Tais tendncias permitem
questionar a validade desses dados (no haver diferenas significativas) caso o
experimento fosse aplicado novamente em uma amostra maior de sujeitos.
Alm disso, no se teve um controle efetivo acerca do efeito causado pelo
CMS nos animais, o que impediu que se pudesse analisar se no houve
diferenas estatisticamente significativas por alguma falha ocorrida durante a
aplicao do modelo, se o nmero de sujeitos da amostra no foi suficiente
para que possveis diferenas fossem evidenciadas ou se, de fato, no h
diferenas relevantes entre os desempenhos de animais que foram expostos
ao CMS e os que no foram expostos a ele.
4.2 CONSIDERAES ACERCA DA APLICAO DO MODELO
Foram enfrentadas algumas dificuldades durante a aplicao do regime
de estresse do CMS. Essas dificuldades referiram-se principalmente
adaptao do procedimento (apresentao de estressores) s condies do
local onde a pesquisa foi realizada (Biotrio do Unicenp). Neste mesmo local
costumam ser realizadas diferentes pesquisas, de diferentes cursos, o que
acabou limitando o espao cedido para a aplicao do modelo. Alm disso, por
se tratar de um procedimento extenso (seis semanas consecutivas) e que
requeria modificaes constantes de estressores, foi exigido da pesquisadora e
auxiliares de pesquisa grande investimento de tempo e diferentes adaptaes
ao local.

- 18 -

contedo retirado de WWW.CESTTRES.COM


5.0 DISCUSSO
A proposta inicial deste estudo era de verificar se a submisso a
estressores leves (estresse moderado) durante um perodo prolongado de
tempo (cronicidade) alteraria a aprendizagem de ratos a uma cadeia de
respostas. Com isso, buscava-se obter evidncias para que novos estudos na
rea de estresse, mais especificamente sobre o cotidiano de universitrios,
pudessem ser estruturados.
Esperava-se que animais expostos ao modelo utilizado, o Chronic Mild
Stress (CMS), apresentariam desempenho menor do que ratos no submetidos
ao mesmo. Ou seja, hipotetizou-se que os animais que passassem pelo CMS
executariam a prtica de encadeamento de respostas em mais tempo e
apresentaria um maior nmero de erros.
De fato, os sujeitos que fizeram parte do grupo experimental
apresentaram um maior nmero de erros em comparao ao grupo controle.
No entanto, o grupo experimental executou a prtica, em questo em um
menor perodo de tempo. Ou seja, aprenderam a cadeia em menos tempo, mas
apresentaram mais erros.
Em geral, foram verificadas tendncias a diferenas quanto ao tempo
total de execuo da prtica final (encadeamento de respostas) e quanto o
nmero de erros apresentados. No entanto, no foi possvel evidenciar tais
diferenas estatisticamente. A essa questo foram levantadas algumas
hipteses. A primeira delas foi que o nmero de sujeitos da amostra
selecionada pode ter sido insuficiente para avaliar possveis diferenas entre os
grupos, sendo necessria uma nova aplicao do experimento em uma
amostra maior de sujeitos. A segunda hiptese referiu-se a possveis erros
cometidos durante a apresentao dos estressores aos sujeitos do grupo
experimental e, neste caso, poderia ser levantada possibilidade da aplicao
no ter induzido corretamente o efeito desejado (anedonia). E, alm disso, a
falta de controle sobre o efeito causado pelo modelo (no aplicao do teste de
consumo e preferncia de sacadore) contribuiu para que no se tivessem
parmetros para analisar a efetividade da aplicao do modelo. Por ltimo
(terceira hiptese), considerou-se tambm a possibilidade de no haver relao

- 19 -

contedo retirado de WWW.CESTTRES.COM


entre a exposio crnica a estressores leves e alteraes na aprendizagem de
um encadeamento de respostas.
Para que essas hipteses possam ser confirmadas ou refutadas sugerese que novos estudos sejam conduzidos, levando-se em consideraes as
dificuldades implicadas na aplicao do modelo utilizado (Chronic Mild Stress).
Segundo WILLNER (1997), que estruturou e props o procedimento deste
modelo (WILLNER e cols, 1987, p. 326), os laboratrios que pretendem aplicar
o procedimento do CMS no devem esperar que seus experimentos funcionem
perfeitamente em uma primeira tentativa. Alm disso, o autor afirma que em
algumas aplicaes do CMS (em seu prprio laboratrio) foi observado um
aumento no consumo e preferncia de soluo com sacarose ao invs de se
obter um decrscimo dos mesmos, como se esperaria em animais que
estivessem em estado anednico. WILLNER (1997) afirma no haver
evidncias que justifiquem esta variao, sendo esta uma questo a ser
analisada em novos estudos.
Mas, mesmo diante deste fato, WILLNER (1997) ressalta que a
aplicao do modelo mostrou-se predominantemente eficaz e confivel,
produzindo, em geral, resultados semelhantes, o que garante a validade,
confiabilidade e utilidade do modelo. Neste sentido, considera-se fundamental
a

reaplicao

do

presente

estudo,

levando-se

modificaes necessrias apontadas anteriormente.

- 20 -

em

considerao

as

contedo retirado de WWW.CESTTRES.COM


6.0 CONCLUSO
O presente estudo mostrou-se inconclusivo quanto s informaes a que
se esperava obter, no entanto, os resultados obtidos sinalizaram possveis
diferenas entre os grupos: experimental e controle sob diferentes condies
de

experimentao.

Ou

seja,

provavelmente

se

obtenha

diferenas

estatisticamente significativas se o procedimento sugerido for aplicado


novamente em uma amostra com nmero de sujeitos maior e com um maior
controle de dados sobre os efeitos causados pelo modelo (teste de consumo e
preferncia

de

sacarose).

Os

problemas

metodolgicos

apresentados

contriburam para que no se tivesse clareza sobre a relao entre a


submisso crnica a estressores leves e a aprendizagem. Desta forma, a
pesquisa realizada foi considerada um experimento-piloto, que servir de base
para uma nova proposta de pesquisa (j enviada em 2007), a qual foi
estruturada levando-se em considerao os problemas apresentados no
presente relatrio.

- 21 -

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7.0 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
ANDRADE, A; Pinto, S. C; Oliveira, R. S. Animais de laboratrio: criao e
experimentao. Rio de Janeiro: Fiocruz, 2002.
BALLONE, G. J. Estresse: curso de psicopatologia. Consultado em
25/05/2004: http://www.psiqweb.med.br/cursos/stress1.html.
BAUM, W. M. Compreender o behaviorismo: cincia, comportamento e cultura.
Porto Alegre: Artes Mdicas, 1999.
BRANDO, M. L. As bases psicofisiolgicas do comportamento. So Paulo:
EPU, 1991.
CATANIA, A.C. Aprendizagem: comportamento, linguagem e Cognio. 4. ed.
Porto Alegre: Artmed Editora, 1999.
COZBY, P. C. Mtodos de pesquisa em cincias do comportamento. So
Paulo: Atlas, 2003.
DAVIDOFF, L. L. Introduo psicologia. So Paulo: Makron books, 2001.
GOMIDE, P. I. C; Weber L. N. D. Anlise comportamental do comportamento:
manual de laboratrio. Curitiba: UFPR, 2001.
KOLB, B; WHISHAW, I. Q. Neurocincia do comportamento. Barueri: Manole,
2002.
LIPP, M. Pesquisas sobre stress no Brasil: sade, ocupaes e grupos de
risco. Campinas: Papirus, 1996.
SKINNER, B.F. Cincia e comportamento humano. So Paulo: Martins Fontes,
1998.
THOMAZ, C. R. C. O efeito da submisso ao 'chronic mild stress' sobre o valor
reforador do estmulo. ANDERY, M. A, 2001.
TOMANARI, G. Y. e Matos, M.A. Anlise do comportamento no laboratrio
didtico. So Paulo: Manole, 2002.
WILLNER, P. Validity, reliability and utility of the Chronic Mild Stress model of
depression: a 10-year review and evaluation. Psychopharmacology. 134. 319
329, 1997.
WILLNER, P.; TOWELL, D.; SAMPSON, S.; SOPHOKLEOUS, S.; MUSCAT, R.
Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress, and its
restoration by tricyclic antidepressant. Psychopharmacology. 93. 358 364,
1987.
- 22 -

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ANEXO 1

Fig 1 Caixa de Skinner


ANEXO 2 PRIMEIRA SESSO
Nesta primeira sesso experimental foram realizadas as prticas de
Mensurao do Nvel Operante, Treino ao Bebedouro, Modelagem e Reforo
contnuo de Resposta de Presso a Barra (CFR I).
Antes de dar incio s prticas dessa primeira sesso, foi realizada a
limpeza da caixa experimental onde o sujeito foi introduzido, para evitar
contaminaes, em seguida, o animal foi retirado do Biotrio e levado ao
laboratrio, sendo evitado que nesse caminho houvesse barulhos altos demais
e movimentos bruscos com a caixa onde o sujeito estava. Alm disso, o sujeito
deve estava privado de gua por um perodo de 48 horas.
Aps a realizao desses procedimentos e dos cuidados bsicos com o
animal, iniciou-se s prticas, pelo Nvel Operante.
O Nvel Operante consistiu na observao e registro minuto a minuto
durante

dez

minutos,

da

freqncia

dos

seguintes

comportamentos

apresentados pelo sujeito na caixa de condicionamento operante:


- Pressionar a barra: considerou-se uma ocorrncia quando animal tocou
a barra com uma ou duas patas dianteiras pressionando-a de tal forma que se
ouvisse o clique (som caracterstico da barra sendo pressionada).
- Tocar a barra: considerou-se uma ocorrncia quando o sujeito tocou a
barra com uma ou duas patas dianteiras sem que se ouvisse o clique que
indica presso barra.
- Farejar: considerou-se uma ocorrncia quando o sujeito aproximou o
focinho das paredes ou do piso da caixa de experimento, enrugando-o e
- 23 -

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movimentando as vibrissas, sem levantar-se nas patas traseiras, sendo que, a
cada dois segundos de durao deste comportamento contou-se uma nova
ocorrncia.
- Levantar-se: considera-se uma ocorrncia quando o animal levantar-se
sobre as patas traseiras aproximando o focinho do teto da caixa de
experimento.
- Limpar-se: considerou-se uma ocorrncia quando o sujeito esfregou as
patas dianteiras no focinho ou na cabea ou no corpo trs vezes, sendo que a
cada trs esfregadas foi contada uma nova ocorrncia.
O registro no nvel operante foi realizado antes que o sujeito fosse
submetido a qualquer manipulao experimental, tornando possvel uma
comparao desses comportamentos depois de ser submetido ao experimento.
Essa comparao possibilita a verificao dos efeitos da interveno
experimental sobre os comportamentos observados.
Aps a realizao da primeira prtica (Nvel Operante), foi dado incio
segunda prtica denominada Treino ao Bebedouro. De acordo com MATOS e
TOMANARI (2002) o treino ao bebedouro tem como objetivo fazer com que o
animal se aproxime do bebedouro quando ouvir o rudo de funcionamento
deste, isso foi feito por meio de um emparelhamento do som do bebedouro
com a presena de gua, ou seja, associou-se o som com a presena de gua,
sendo importante destacar que para que o sujeito aprendesse essa associao
ele estava privado de gua por um perodo de 48 horas.
Uma vez que o sujeito associou o som do bebedouro com a presena de
gua, iniciou-se a terceira prtica, a Modelagem de Resposta de Presso a
Barra. A modelagem foi baseada no reforo diferencial, em que apenas
algumas respostas receberam reforos, ou seja, repostas que so compatveis
com o desempenho que desejado que o sujeito apresentasse. Desta vez ele
aprendeu que ao pressionar a barra, que se encontrava no interior da caixa, o
reforo era liberado, ou seja, se ele pressionasse a barra uma gota de gua era
disponibilizada. Para que essa associao acontecesse foi necessrio
utilizao do mtodo de aproximaes sucessivas, em que no incio exigiu-se
do sujeito respostas mais simples de aproximao barra para que a liberao
do reforo (gua) acontecesse. Cada vez que o sujeito aprendia a relao da
resposta exigida com o reforo aumentava-se exigncia para respostas que
- 24 -

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se aproximassem mais da resposta final desejada (presso a barra). O sujeito
emitiu cinco vezes a resposta final de forma consecutiva e sem outras
respostas intermedirias, sendo importante destacar que para recebesse o
reforo em cada resposta, elas deveriam ser executadas com as duas patas
dianteiras.
Assim o sujeito aprendeu a relao entre pressionar a barra e liberao
de reforo (gua) iniciou-se quarta prtica, Reforo Contnuo de Resposta de
Presso a Barra (CRF I). Aqui foram fortalecidas todas as respostas de
presso a barra, ou seja, o sujeito recebeu reforo (gua) toda vez que
pressionou a barra, por isso o nome da prtica (Reforo Contnuo); tambm
foram anotadas as freqncias dos mesmos comportamentos do sujeito
(cheirar, tocar a barra, pressionar a barra ocasionalmente, levantar-se, e
limpar-se), na caixa de condicionamento operante, observados na primeira
prtica (NO), o que possibilitou a comparao destes comportamentos antes e
depois de terem sido submetido s prticas dois, trs e quatro.

ANEXO 3 SEGUNDA SESSO


Nesta segunda sesso experimental foram realizadas as prticas:
Esquema de Reforamento Intermitente em Razo Fixa, Controle de Estmulos
com um Esquema Mltiplo FR-EXT.
Em um Esquema de Reforamento Intermitente em Razo Fixa nem
todas as respostas de presso barra foram reforadas, portanto, o objetivo
desta prtica foi aumentar o nmero de emisses de respostas, at cinco
respostas, para que ele pudesse receber o reforo (gota de gua).
Sendo assim, iniciou-se prtica, com a chave de controle da caixa na
posio Desligada e ento, o primeiro critrio adotado foi de FR2, em que o
sujeito pressionou a barra duas vezes para receber reforo. Aps o animal ter
recebido reforo cinco vezes, mudou-se o critrio para FR3, em que o animal
pressionou a barra trs vezes para receber uma gota de gua. Ento, aps o
sujeito ter recebido oito gotas de gua neste critrio, passou-se ao FR5, em que
o sujeito pressionou a barra cinco vezes para receber uma gota de gua. Ento
o critrio foi novamente alterado para FR7, em que o sujeito pressionou a barra
- 25 -

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por sete vezes para receber uma gota de gua, aps o sujeito ter recebido
cinco reforos o critrio foi mudado para FR9, por mais cinco reforos, para
iniciar o critrio do FR10, sendo importante destacar que sempre que o sujeito,
em algum FR, permanecesse por cinco segundos ou mais sem emitir a
resposta, o critrio anterior foi retomado. A prtica foi encerrada aps terem o
sujeito no emitir respostas de presso a barra durante cinco minutos
consecutivos.
A prtica de Controle de Estmulos com um Esquema Mltiplo
dividida em duas partes, nos quais o esquema mltiplo entre FR (razo fixa) e
EXT (extino) foram usados para sinalizar a alterao da apresentao ou
no de luz na caixa, de forma a extinguir a resposta de presso a barra durante
o perodo de EXT, no qual no h apresentao de luz, isso s foi possvel
devido s respostas neste perodo nunca serem reforadas. Estes perodos
tiveram a durao de no mnimo um minuto, aumentando este tempo at que o
sujeito no apresentasse interesse pela barra, ou seja, at que o sujeito se
afastasse da barra e permanecesse por cinco segundos longe dela. Os
perodos de FR foram alternados aos de EXT, os sujeitos foram mantidos
nestes perodos em FR10, no qual a luz era apresentada, assim como o reforo
apos dcima resposta ter sido emitida.
Na primeira parte as respostas emitidas pelo sujeito foram anotadas
minuto a minuto durante 120 perodos, sendo estes 60 componentes de FR e
60 de EXT distribudos alternadamente, para evitar a discriminao temporal
por parte do sujeito. Nos primeiros 30 minutos neste esquema, a primeira
resposta emitida foi reforada assim como a dcima no mesmo componente de
FR, com o objetivo de manter a freqncia de respostas do sujeito. O
procedimento foi iniciado mantendo o esquema de FR10 por seis minutos em
que foi alternada apresentao ou no de luz, aps foi iniciado a seqncia de
componentes de FR e EXT.
A segunda parte da prtica foi continuao da anterior com 45
componentes de FR e 45 de EXT apresentados alternadamente tambm.
Apenas no foi apresentado o reforo na primeira resposta do componente de
FR10, sendo apresentado apenas na dcima resposta. A prtica foi encerrada
aps o sujeito alcanar um ID (ndice Discriminativo) superior a 80%.

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O ID (ndice Discriminativo) foi calculado pela seguinte frmula: ID =
RC1 / (RC1 + RC2), sendo RC1 as respostas do componente em FR e RC2 as
respostas do componente em EXT.
ANEXO 4
Tabela 1 Regime de estresse
2
H

feira

4
3 feira

feira

Dom
5 feira

6 feira

Sb.

PA/IC

PC

PA/IC

PC

PA/IC

PC

PA/IC

PC

PC/GS/P
6

PC

CH/IG

PC/IC

IG/OE

PC/O
7

PC/GS/P
CH/IG

PC/IC

IG/OE

PC/O
8

S
S

PC/O

PC/O

A
PC/GS/P

CH

PC/IC

PC/O
9

CH

PC/IC

IG/OE

IG/PA/O

PC/GS/P

A
PC/GS/P

PC/CH

PC/IC

PA

PA/IC

PC

PC/OS

PC/IC

PA

PC/PA

PA/IC

PC

PC

PC/OS

PC/IC

PA

PC/PA

PA/IC

PC

RC

PC/OS

PA

PC/PA

IC/GV

PC

1
2
1
3
1
4

GV/O
RC

PC/OS

PA

PC/PA

PC

RC

PC/OS

PA

PA

OS

PC

IC/PA

OS

PC

1
5
1
6

PC/OS/I
CH/IG

PC/GS/P
IG/OE

1
7

A
PC/GS/P

CH/IG

PC/IC

IG/OE

- 27 -

PC/O
PA/IC

PC

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1
8

PC/GS/P
CH/IG

PC/IC

IG/OE

CH/IG

PC/IC

IG/OE

CH/IG

PC/IC

IG/OE

2
1

PC

PA/IC

PC

PC

PA/IC

PC

PC

PA/IC

PC

PC

PA/IC

PC

PC

PC/GS/P
CH/IG

PC/IC

IG/OE

2
2

PC

PC/GS/P

2
0

PA/IC

PC/GS/P

1
9

A
PC/GS/P

CH/IG

PC/IC

IG/OE

Legenda:
PA - privao de gua
PC - privao de comida
IC - iluminao continua
IG - inclinao da gaiola
OS - permanncia na gaiola com outro sujeito
GS - gaiola suja
GV - exposio garrafa de gua vazia aps perodo de privao
RC - acesso restrito a comida
CH cheiro estranho
OE - presena de objeto estranho na gaiola

- 28 -

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