INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR DE

APATZINGAN
PRACTICA # 4 CLOROPLASTOS E IDENTIFICACIN DE CLOROFILA

MATERIA: BIOLOGIA

CARRERA: INGENIERA BIOQUIMICA

MAESTRA: ELISA VILLASEOR

SEMESTRE: 1
Equipo #4
INTEGRANTES DEL EQUIPO:
JOS MARA MURILLO VARGAS
SANDRA LUZ OCHOA QUEZADA
LORENA ORTIZ RAYO

PRCTICA 4

CLOROPLASTOS E IDENTIFICACIN DE CLOROFILA

OBJETIVOS

Conocer la ubicacin de los cloroplastos en la clula vegetal, con ayuda del microscopio.
Comprobar la presencia de la clorofila y distinguir los distintos tipos de la misma que existen en los
vegetales, por medio de una cromatografa en papel.
II

INTRODUCCIN

Uno de los procesos metablicos ms importantes para la vida es el que realizan las plantas, que se
conoce como fotosntesis, en el que a partir de molculas simples agua y el bixido de carbono- y la
energa luminosa, se producen sustancias complejas como los carbohidratos. Este proceso se realiza en
los cloroplastos, organismos exclusivos de las plantas. Este organillo membranoso presenta una
estructura particular, pues presenta sacos apilados llamados grana, conectados por una membrana
denominada tilacoidal o tilacoide. Dentro de los grana se encuentra la molcula responsable de la
fotosntesis: la clorofila. Este es un pigmento fotosinttico que se encarga de atrapar los fotones que se
emplearan en la produccin de energa necesaria para formar los enlaces qumicos de la glucosa.

III

MATERIAL Y REACTIVOS

1 Microscopio compuesto con objetivos de

10x, 40x , 100x

1 Soporte universal con pinzas o anillo

para embudo.

4 Portaobjetos

2 Gasas

4 Cubreobjetos

2 tubos de ensayo

Solucin limpiadora de lentes.

1 Gradilla

1 Papel seda o micro fibra para limpieza

de lentes

2 Vaso de precipitados de 250 ml

Alcohol al 96%

Palillos largos

Acetona

Regla graduada

Tijeras

Cuaderno de laboratorio

Elodea

2 hojas de espinaca

1 Parrilla elctrica

Mortero y pistilo de porcelana

Filtro (Banda de papel filtro de 2 x 10 cm)

1 Pipeta Pasteur

1 Probeta 100 ml

1 Embudo de vidrio

PROCEDIMIENTO
I. OBSERVACIN DE CLOROPLASTOS
1 Cortar una punta de la hoja de Elodea y colocarla con el lado inferior hacia arriba en un portaobjetos,
agregar una gota de agua y cubrir
2 Observa al microscopio con el objetivo de 10x y dibuja lo observado.
3 Los cuerpos verdes son cloroplastos. Observar con el objetivo o 40x. Dibujar la forma de un cloroplasto y
su ubicacin en la clula.

SEPARACIN DE CLOROFILAS POR CROMATOGRAFA

1 Cortar la hoja de espinaca en trozos y colocar en el mortero, macerarla con el pistilo e ir agregando
acetona previamente calentada en la parrilla, hasta que quede una plasta uniforme.
2 Filtrar el macerado con ayuda de la gasa en uno de los tubos de ensayo
3 Marcar la banda de papel filtro con una lnea a 2 centmetros de ambos bordes, procurando no tocar
demasiado el papel con las manos para no contaminarlo.
4 Con la pipeta Pasteur tomar un poco del filtrado y colocar una pequea gota en la parte media de la lnea
que se marc, repetir la operacin dos veces sobre el mismo lugar.
5 Vaciar alcohol en el vaso de precipitados de manera que cubra aproximadamente 1 cm de altura
6 Colocar la tira de papel filtro con la muestra sin que esta toque las paredes del vaso ni la muestra., esto
se puede hacer con ayuda de un doblez y colocando los palillos para sostener el papel, dejar que se
seque sostenindolo con unas pinzas.
7 Observar las manchas, deben observarse tres o cuatro bandas, las cuales corresponden de abajo hacia
arriba a: clorofila b; clorofila a; xantofila y carotenos. Dibujar lo observado, si es posible tomar fotografa.

V CUESTIONARIO
Preguntas iniciales:
1 Qu es la cromatografa y en qu consiste?
2 Investiga la estructura de la molcula y el peso molecular de la clorofila a, la clorofila b, xantofila y
caroteno.
3 Qu longitudes de onda de energa luminosa absorbe la clorofila y a qu colores corresponde?
4 Realiza un esquema de un cloroplasto indicando las estructuras que lo integran?
Pregunta sobre las observaciones:
1 Si observaste cuidadosamente, pudiste haber notado movimiento de los cloroplastos.
2 Cmo crees que puedan moverse si no tienen medios de locomocin?
3 Cuntas bandas presenta la tira de papel y qu color tiene cada una? Explica la causa de esto