Relatrio de Biologia Celular Geral

Extrao de cido Nucleico

Alunos:
Agna Ferreira Tavares Vieira
Davi de Castro Gomes
Germana Nogueira Bezerra
Professora:
Dra. Maria Izabel Gallo

Introduo
Neste experimento do laboratrio de Biologia Celular, foi ministrado os
mtodos necessrios para extrao de cidos nucleicos da ma. Os cidos
nucleicos podem ser DNA ou RNA, sendo o primeiro o local onde so
armazenadas as informaes genticas dos organismos, neste caso, vegetal, e
o ltimo responsvel por, a partir da transcrio do DNA, traduzi-lo para
protenas, fenmeno conhecido como sntese proteica. Com materiais simples,
possvel realizar o procedimento, que ocorre em trs etapas: ruptura das
clulas para a liberao dos ncleos, desmembrao dos cromossomos em
DNA e protenas e a bifurcao do DNA dos demais elementos celulares,
permitindo a visualizao do DNA a olho nu, em forma de uma massa fibrosa e
descorada.

Material
O material utilizado na extrao do cido nucleico foi:

Ma
Detergente
NaCl (sal de cozinha)
gua destilada
Faca
Peneira
Tbua de alimentos
Bquer
Proveta
Basto de vidro
lcool
Mtodo
O mtodo utilizado foi dividido em etapas:

1. Cortar o material, no caso a ma, em pequenos pedaos.

2. Preparar a soluo de lise no bquer, misturando 10 ml de detergente com 2g
de NaCl e, em seguida, completar o recipiente at 100 ml com gua destilada.
3. Acrescentar o material junto ao bquer com a soluo, logo aps, leva-lo um
banho maria com durao de 15 minutos, sempre mexendo vagarosamente o
contedo do recipiente.
4. Promover um banho de gelo, com tambm durao de 15 minutos e nas
mesmas condies do banho anterior.
5. Filtrar a soluo com a peneira em outro bquer
6. Adicionar 100 ml de lcool no recipiente contendo o filtrado.
Justificativas e Resultado
A prtica tinha o objetivo de extrair os cidos nuclicos da ma e o
material foi cortado em pedaos para aumentar a superfcie de contato e para
dividir as clulas (membranas) da ma.
Na soluo de lise, o uso do detergente foi necessrio para dissolver as
membranas lipdicas das membranas alm de desintegrar os ncleos e os
cromossomos das clulas da ma, liberando o DNA, devido a presena de
lauril sulfato de sdio no detergente que responsvel por esse processo. Com
a ruptura, o contedo celular (DNA e protenas) solta se e fica disperso na
soluo. O sal ajudou na neutralizao da carga negativa do DNA, devido aos
ons positivos do Na+ do sal que ajudam na estabilizao das fitas simples de
DNA, favorecendo, assim, o ambiente favorvel para a extrao dos cidos
nuclicos.
O aquecimento em banho maria acelerou a desnaturao das molculas
de DNA (aumento da velocidade da reao) e promoveu a agitao das
molculas, facilitando a ao do detergente na desestabilizao das
membranas lipdicas. O banho de gelo permitiu a precipitao do DNA e a

constante agitao feitas nos dois ltimos processos tem como funo a
separao das organelas membranosas a partir da concentrao na clula.
A filtrao necessria para separar a parte slida da lquida para uma
melhor anlise, a adio de lcool gelado logo aps a filtrao proporciona uma
mistura heterognea em ambiente salino e promove a aglutinao das
molculas de DNA, formando uma massa filamentosa e esbranquiada e a
adio em modo lento para auxiliar na eficincia da precipitao do DNA.
Aps o acrscimo do lcool, o resultado a visvel formao de duas fases,
uma mais aquosa, constituda de polissacardeos e mais ao fundo uma soluo
mais concentrada. Entre essas duas solues, estar o cido nucleico extrado,
de forma condensada. Os grumos esbranquiados observados no experimento
so os filamentos de DNA e essa observao s possvel porque a
quantidade de DNA muito grande e os filamentos esto todos agrupados.
Imagens da prtica:

Referncias Bibliogrficas

http://educador.brasilescola.com/estrategias-ensino/atividade-pratica-paraextracao-dna.htm. Acesso em 21 de abril de 2015

http://www.ebah.com.br/content/ABAAAA1ugAI/fundamentos-extracao-dnarna. Acesso em 21 de abril de 2015.

http://ead.hemocentro.fmrp.usp.br/joomla/index.php/programa/adote-umcientista/270-aprenda-a-fazer-extracao-de-dna-em-casa. Acesso em 21 de
abril de 2015.

http://www.cdcc.usp.br/exper/medio/biologia/8dna.extracao_op.pdf. Acesso
em 21 de abril de 2015.