Revista de la Asociacin Colombiana de Ciencias Biolgicas

CARACTERIZACIN Y OBTENCIN DE CULTIVOS PUROS

DE ESPORAS NATIVAS DEL GNERO Glomus sp. ASOCIADAS
A RIZSFERA DE AGUACATE Persea americana MILL
CHARACTERIZATION AND OBTAINING PURE CROP OF SPORE
NATIVE OF GENDER Glomus sp. ASSOCIATED WITH AVOCADO
Persea americana MILL RHIZOSPHERE

1.

2.

3.

Ral Alexander Aranguren Aroca1, Martha Lily Ocampo Guerrero2, Neftal Mesa Lpez3
Tesista - Grupo de Investigacin GEBIUT, Facultad de Ciencias, Universidad del Tolima, +57 (8) 2-77-12-12, ext. 9343
E-mail: raranguren@misena.edu.co
Docente Investigador Grupo de investigacin GEBIUT, Facultad de Ciencias, Universidad del Tolima, +57 (8) 2-77-1212, ext. 9343, E-mail: mlocampo@ut.edu.co
Director Grupo de investigacin GEBIUT, Facultad de Ciencias, Universidad del Tolima, +57 (8) 2-77-12-12, ext. 9343,
E-mail: nmesa@ut.edu.co
Recibido: Octubre 10 de 2015
Aceptado: Octubre 20 de 2015
*Correspondencia del autor: Grupo de Investigacin GEBIUT, Facultad de Ciencias, Universidad
del Tolima, +57 (8) 2-77-12-12, ext. 9343 E-mail: raranguren@misena.edu.co

RESUMEN
El estudio de los Hongos Formadores de Micorriza Arbuscular (HFMA), microorganismos de importancia agronmica por su actividad como simbiontes, se fundamenta en la determinacin, caracterizacin y evaluacin de
factores de impacto y manejo de los mismos. De esta manera es posible formular alternativas de direccionamiento
sostenibles para los agroecosistemas basados en la implementacin de esta microbiota. El presente trabajo es una
investigacin que logr aislar, describir y obtener cultivos de 8 morfortipos de esporas nativas de HFMA asociadas a la rizsfera de Aguacate (Persea americana MILL) en el municipio de Fresno, departamento del Tolima. Las
descripciones generadas contemplan las caractersticas morfolgicas de estos hongos, de las condiciones sicoqumicas de los suelos donde estos se desarrollan y de las poblaciones de algunos microorganismos que conviven
con los morfotipos encontrados. Finalmente, se evaluaron las asociaciones de estos morfotipos en plantas husped con el n de determinar cul de los aislados presentaba caractersticas de micorrizacin importantes como
porcentajes de asociacin en raz y esporulacin ms altas. Se determin que el morfotipo inoculado, ms que el
tipo de suelo utilizado, era el factor que inua en los procesos de micorrizacin y que Glomus microaggregatum,
aparte de ser ms abundante y de mayor distribucin, era el morfotipo que mayor porcentaje de colonizacin y
esporas recuperadas generaba. Sin embargo, se observ la inuencia de ciertos factores abiticos como el pH, y
concentraciones de cobre, zinc y manganeso en este proceso.
Palabras claves: Inoculacin, Hongos Formadores de Micorriza Vesculo Arbscular, Plantas Trampa, Factores
de inuencia, Crecimiento Vegetal.

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Hongos formadores micorrizas nativos aislados en aguacate Persea americana MILL. Aranguren et al.

ABSTRACT
The study of Arbuscular mycorrhizal forming fungi (AMFF), microorganisms of importance in agronomic due to
its implementation as symbionts, is based on the identication, characterization and evaluation of impact factors
and their management. This makes it possible to formulate alternatives for addressing sustainable agro-ecosystems based on the implementation of this microorganism. This study could isolate, describe and obtain crops
of 8 morphotypes AMFF native spores associated with the rhizosphere of Avocado (Persea americana Mill)
in Fresno, Tolima. The descriptions show the morphological characteristics of these fungi, the physicochemical
conditions of the soils where they develop and populations of some microorganisms living with the morphotypes
found. Finally, associations of these morphotypes with host plants were evaluated in order to determine which
of the isolated exhibited important mycorrhizal characteristics such as percentages of association in higher root
and sporulation. It was determined that the inoculated morph rather than soil type used was the factor inuencing
the processes of mycorrhizae and Glomus microaggregatum; besides, it was the most abundant and most widely
distributed morphotyp. It was morphotype with the highest percentage of colonization and recovered spores
generated. However, the inuence of certain abiotic factors such as pH and concentrations of copper, zinc and
manganese in the process was observed
Keywords: Inoculation, mycorrhizal fungi vesicular arbuscular Trainers, Plant Trap, factors inuence plant
growth.

INTRODUCCIN
Las micorrizas son asociaciones mutualistas presentes
entre algunos hongos y las races de las plantas. Estas asociaciones son ampliamente estudiadas ya que
generan a la planta hospedadora benecios siolgicos y nutricionales. Entre las ms conocidas se encuentran los Hongos Formadores de Micorrizas Vesculo Arbusculares (HFMVA), denominadas as por la
formacin de estructuras arbusculares o vesiculares
dentro de las clulas de la raz de la planta al hacer
asociacin con hongos del phylum Glomeromycota.
De este phylum, el gnero Glomus es el que mayor
implementacin ha tenido en sistemas agrcolas por
los benecios directos e indirectos que genera sobre
la produccin. Las investigaciones al respecto, se enfocan en el reconocimiento, aislamiento y evaluacin
de las interacciones entre las poblaciones nativas de
estos HFMVA y la ora de diversas regiones, buscando obtener cepas simbiontes que mejoren los sistemas
de produccin locales. De esta manera, se logra determinar qu clase de HFMVA son los que se asocian de
forma eciente a los cultivares que se desean mejorar.
Sin embargo, es claro que existe cierta especicidad entre los taxones HFMVA y los taxones de plantas que los
hospedan. Estudios al respecto demuestran que esta
especicidad se ha correlacionado con los patrones de
distribucin de los HFMVA y la variacin del hbitat
(1). Por ejemplo, en sistemas de manejo como el monocultivo, la simbiosis con HFMVA del gnero Glomus,
no se puede llevar a cabo o es ineciente para cultivares
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de diversas especies vegetales (2), posiblemente por la

baja anidad de los organismos que se intenta asociar.
De la misma manera, como indica Schechter & Bruns
(3) el tipo de suelo inuye en parte de los patrones de
asociacin de los HFVMA y sus hospedadores vegetales. Siendo as, la identicacin, aislamiento y multiplicacin de HFVMA nativos para su posterior utilizacin
como inoculantes, puede ofrecer agentes simbiontes
ecientes que lleguen a formar asociaciones del tipo
HFMVA con mayor factibilidad y de benecios ms
marcados. Igualmente, es necesario determinar cules
son las caractersticas de los HFVMA presentes en los
sistemas de produccin locales, cuales ofrecen tasas de
esporulacin ms altas y cules son las cepas nativas que
garantizan facilidades para su manipulacin en laboratorio. As tambin, es posible propagar el material aislado de una manera prctica y limpia, tener control sobre
la calidad y la ecacia de los inculos obtenidos, para
establecer un sistema experimental selecto que d acceso a material ptimo para otro tipo de investigaciones.
El presente trabajo de se desarroll con el n de obtener y caracterizar esporas nativas de hongos del
gnero Glomus, asociadas a la rizsfera de aguacate (Persea americana MILL), uno de los cultivos de
mayor demanda interna y con mayor prospeccin al
mercado de exportaciones en la zona norte del Tolima. Aqu, a travs del anlisis microbiolgico y sicoqumico de suelos obtenidos en ncas productoras
del departamento, se describen los morfotipos de esporas encontrados y las caractersticas de los mismos

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al momento de intentar replicarlos en laboratorio.

MATERIALES Y MTODOS
Zona de estudio y recoleccin de suelos: Los suelos
utilizados se recolectaron de ncas productoras de
aguacate del municipio de Fresno. Este municipio se
encuentra localizado en la zona norte del departamento del Tolima a 1465 msnm. Se seleccionaron 4 ncas
productoras de aguacate que se identicaron con los
cdigos FED (1045 msnm), FLB (1270 msnm), FLC
(1370 msnm) y FER (1455 msnm). Se tom el suelo
de rboles adultos segn la metodologa del laboratorio
de suelos del IGAC (4) y se entregaron al Laboratorio
de Servicios de Extensin LASEREX para su anlisis
qumico. De igual manera se procedi para obtener
las muestras con el n de hacer el recuento de las comunidades microbianas y el aislamiento e identicacin de esporas de HFMVA Nativas en el Laboratorio
de Microbiologa y Micorrizas del Grupo GEBIUT.
Aislamiento y conteo de microorganismos: Los anlisis microbiolgicos se realizaron siguiendo el protocolo de conteo en placa por siembra de diluciones
seriadas para la cuanticacin de meslos aerbios,
actinomicetos, mohos y levaduras. Para el aislamiento de esporas, se implement el protocolo de Tamiz
Hmedo (5). El conteo se realiz mediante la metodologa de conteo por campo ocular del INVAM (6).
Las esporas de HFMVA se caracterizaron morfolgicamente y se seleccionaron para la inoculacin en planta
trampa, los 3 morfotipos que presentaron las mayores
abundancias. Estos morfotipos se identicaron con el
cdigo MA1, MA2 y MA3 siguiendo la metodologa de
propagacin de esporas por planta trampa (5), se trabajaron semilleros con plantas de Brachiaria decumbens.
Diseo experimental y anlisis de datos: Se implement un diseo de bloques completamente al azar con
arreglo 4 x 4, donde se tuvo en cuenta los siguientes
factores: Factor A (Suelos: FED, FLB, FLC y FER) y
Factor B (Inculos: MA1, MA2, MA3 y M0 Tratamiento control). 45 das despus del establecimiento de los
semilleros, se recolect el material vegetal. Con el n
de determinar los rasgos principales de la arquitectura de las races, se trabaj con el software programa
EZ-RHIZO (7) para anlisis RSA (Root System Architecture). Para este caso, se determinaron 4 variables en las plntulas para cada uno de los tratamientos
(Longitud de raz principal, nmero de races laterales
secundarias, longitud tallo y hojas y longitud total de
la plntula). Tambin, para cada uno de los tratamien-

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tos, se determin el nmero de esporas recuperadas.

Por otra parte, el porcentaje de colonizacin micorrzica se determin por el mtodo de conteo en lmina
(5). Los resultados de los conteos de microorganismos
asociados a la rizsfera se analizaron a travs de la comparacin de abundancias con una prueba de KruskalWallis como indica Zar (8). Los datos obtenidos en el
montaje de inoculacin con HFMVA y evaluacin de la
colonizacin en plantas trampa, se analizaron con una
ANOVA doble para determinar si existe inuencia de
los factores evaluados (suelo y morfotipo inoculado)
sobre las variables contempladas. As mismo, una prueba de componentes de varianza permiti cuanticar el
efecto sobre las variables respuesta de cada uno de los
factores. Adems, se determin si existan diferencias
signicativas entre cada uno de los tratamientos. Para
ello, se realizaron pruebas de comparacin empleando
el mtodo de Kruskal-Wallis. Finalmente, se corri un
test de rangos mltiples, con el n de agrupar los tratamientos segn el valor de las medias observadas. Todas las pruebas realizadas en este ensayo, se corrieron
utilizando el software Statgraphics Centurion XVI (9).
RESULTADOS
Caracterizacin sicoqumica y microbiolgica de
suelos: En general, los suelos analizados presentan valores de pH de 5,6 a 5,9, excepto el suelo FER que presenta un valor de 4,7. Los primeros suelos son cidos
pero se consideran adecuados para la mayora de cultivos. Respecto a los contenidos de Materia Orgnica
(MO), se observ que todos los valores se encuentran
por debajo del 2%. Por otro lado, es claro que las concentraciones fsforo para FLB, FLC y FER se encontraron muy por debajo de los que el suelo FED present
(64 mg/kg). En cuanto a las concentraciones de potasio, se observ que los valores se hallaban por debajo
de los 0,6 meq/100g, excepto en el suelo FLB, donde
la concentracin de este elemento es de 2,3 meq/100g.
Por otra parte, los recuentos realizados de meslos
aerobios arrojaron valores desde 15x10-5 UFC/g de
muestra, y 92 x10-5 UFC/g, para actinomicetos valores de 18x10-5 UFC/g, hasta 50x10-6 UFC/g muestra.
En mohos y levaduras se observ valores desde 11x102
UFC/g, hasta 45x10-3 UFC/g muestra. La prueba de
Kruskal-Wallis mostr que los valores obtenidos en
las cuatro ncas no presentan diferencias signicativas
entre s (P=0,1472). Por el contrario, el anlisis de varianza de los factores scoqumicos del sistema (edad
del rbol, temperatura ambiental, temperatura del sustrato, pH, concentraciones de micro y macro elementos y porcentajes de arcillas, limos y arenas) determin
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la existencia de diferencias estadsticamente signicativas (P< 0.0001) entre las cuatro ncas evaluadas.
Distribucin y abundancia de HFMVA: En la Tabla
1 se presenta la distribucin y abundancia de cada uno
de los 8 morfotipos identicados en la zona de estudio
(Ver Figura 1). Se observa que todos los morfotipos se
encuentran presentes en todos los puntos de muestreo,

a excepcin de las ncas FLC y FER en cuyos suelos

no se observaron esporas de Glomus sp1., G. microcarpum y G. mosseae. Esta distribucin puede obedecer
al rango altitudinal que abarc el estudio. Por lo que
se reere a las abundancias de estos morfotipos en la
zona, es claro que los valores ms altos se encontraron para los morfotipos G. microaggregatum (34,51%),
G. geosporum (21,01%) y G. macrocarpum (14,73%).

Tabla 1. Abundancia relativa especies HFMVA.

ESPECIE

ABUNDANCIA RELATIVA (%)

% Total

FED

FLB

FLC

FER

Glomus microaggregatum

8,67

9,25

8,96

7,63

34,51

Glomus geosporum

6,67

7,14

5,19

2,02

21,01

Glomus sp1.

0,58

0,45

0,00

0,00

1,03

Glomus microcarpum

1,10

1,08

0,00

0,00

2,18

Glomus macrocarpum

4,11

3,48

3,93

3,21

14,73

Glomus mosseae

2,83

2,90

2,40

0,00

8,13

Glomus. sp2.

2,33

2,00

2,56

1,82

8,71
9,70

Acaulospora rehmii

2,22

1,93

2,58

2,96

% Total /nca

28,51

28,22

25,62

17,65

Experimento inoculacin: Los valores promedio ms

altos para la variable longitud de tallo y hoja se encontraron en el tratamiento Suelo FER-G. geosporum (9,17
cm), por la longitud de la raz primaria, la longitud total
de las plntulas y nmero de races secundarias en el
tratamiento Suelo FER-G. microagregatum (14,99 cm;
23,37 cm y 16 respectivamente). Por otro lado, los va-

Figura 1. Morfotipos de esporas observadas en suelos asociados a cultivos de Aguacate en Fresno, Tolima. A= G. microaggregatum 40x; B= G. geospurum 40x; C= Glomus sp1
40x; D= G. microcarpum 40x; E= G. macrocarpum 40x; F=
G. mosseae 40x; G= G. sp2 40x; H= Acaulospora rehmii 40x.
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lores observados en los controles no superaron los valores de los tratamientos, a excepcin de la variable longitud de tallo y hoja, donde siempre se observ que los
tratamientos que incluan inoculacin G. macrocarpum
y G. microaggregatum arrojaron los valores ms bajos.
Las pruebas de varianza a (P<0.05) determinaron que el
factor morfotipo inoculado, podra inuir sobre todas
las variables analizadas. Por el contrario, para el tipo
de suelo, se observ que en el caso de la longitud total
de la planta (P=0,7835), el nmero de races secundarias
(P=0,8427) y el total de esporas recuperadas (P=0,7157),
este factor no presentara efectos signicativos. As
mismo, el anlisis de componentes de varianza indic
que la inuencia del factor morfotipo inoculado, es
mayor para cada una de las variables. El porcentaje de
variabilidad con el que contribuye este factor para la
longitud de tallo y hoja, longitud raz primaria, longitud
total de la planta y nmero de races secundarias respectivamente fue 37.28%, 58.54%, 54.95% y 58.72%.
Las pruebas KruskalWallis realizadas para cada uno
de los tratamientos, arrojaron diferencias signicativas
entre estos para las variables longitud de tallo y hoja
(P=6.92 x 10-11), longitud raz primaria (P<0.05), longitud total de la planta (P=5.46 x 10-5) y numero de races
secundarias (P=1.03 x 10-8). Finalmente, las pruebas de
rangos mltiples por el mtodo LSD identicaron los grupos homogneos de tratamientos y permitieron observar
como el tratamiento Suelo FER-G. microaggregatum se

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encontraba en todos los grupos con valores promedio

ms altos para las variables de crecimiento evaluadas.
En los resultados de los porcentajes de colonizacin micorrzica y esporas recuperadas por gramo de suelo, se
observ que todos los tratamientos donde el morfotipo
inoculado era G. microaggregatum, presentaban los valores promedios ms altos para cada variable analizada.
Especcamente, para la variable porcentaje de colonizacin radical, el tratamiento suelo FED-G. microaggregatum demostr los valores promedio ms altos. En
este caso, se observ hasta un 85.0% de colonizacin.
De manera similar, se determin que el tratamiento
Suelo FLBG. microaggregatum permita la recuperacin de un mayor nmero de esporas por gramo de
suelo (85 esporas /g suelo en promedio). La prueba de
varianza, realizada por el mtodo de Kruskall-Wallis,
determin que s existan diferencias estadsticamente signicativas para los 16 tratamientos evaluados.
De esta manera, las variables porcentaje de colonizacin radical y esporas recuperadas por gramo de
suelo (esporas/g suelo) arrojaron, para esta prueba,
un P<0.05, se corri el test de rangos mltiples por el
mtodo LSD y se observ que, para la variable porcentaje de colonizacin radical se formaron 6 grupos
y para la variable esporas/g suelo solo 5. En el caso
del porcentaje de colonizacin, el grupo de las mayores medias observadas present valores promedio de
85.0% a 68.0%. Para la variable esporas/g suelo present valores entre el rango 84.5 a 71.8. Finalmente, los
test de varianza y comparacin de medias indicaron que
el factor morfotipo inoculado inuy directamente
en las variaciones que presentaron los porcentajes de
colonizacin y el nmero de esporas/g suelo (P<0.05).
Sin embargo, el test tambin indic que el factor tipo
de suelo no presenta inuencia sobre la variable
esporas/g suelo (P=0,7157). Igualmente, las pruebas de
componentes de varianza, determinaron que el morfotipo inoculado, era el factor que aportaba ms variacin
en todas las caractersticas de la planta contempladas.
DISCUSIN
Caracterizacin sicoqumica y microbiolgica de
suelos: Para el caso del suelo FER, aunque su pH promedio fue de 4,7, se observ que era un sistema productivo que contaba con rboles de gran talla y de estado
tosanitario ptimo. En este punto, hay que hacer notar
que el descenso en el pH de estos suelos, puede ser producto de un periodo prolongado en el que no se aplicaron fertilizantes fosfricos y cal, dado que la aplicacin
continua y a largo plazo de este tipo de fertilizantes e
insumos, controlan la acidicacin de los suelos (10).

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Respecto a los resultados observados de MO, los bajos

valores reportados pueden ser producto de las sucesivas
rotaciones forestales que se ejecutan en las zonas muestreadas. Estas rotaciones, generan un empobrecimiento
de la calidad del suelo que queda reejada bsicamente
en la cada de los niveles de MO (11). Igualmente, es
claro que en suelos tropicales cultivados y en sistemas
intensivos, la MO disminuye entre 30 y 60% en pocos
aos, respecto de valores encontrados bajo vegetacin
natural, debido al cambio de calidad y cantidad de la
MO que se ingresa al suelo como indica Pulido, Flores, Rondn, Hernndez & Lozano en sus trabajos (12).
Por otra parte, a pesar de que las concentraciones de
fsforo en los suelos FLB, FLC y FER son inferiores
a las del suelo FED, estas no se encuentran por debajo
de los niveles crticos de este elemento (<10 mg/Kg)
para suelos asociados a sistemas productivos, como
se muestra en algunos trabajos (13). Sin embargo, los
valores excesivos que se evidencian en el suelo FED
dan cuenta de los procesos de acumulacin de este elemento. Esta acumulacin de fsforo es un hecho comn
en los suelos agrcolas y es producto de la fertilizacin excesiva (14). En cuanto a las concentraciones
de potasio, se observ que los valores se encuentran
por debajo de los 0,6 meq/100g, excepto en el suelo
FLB, donde la concentracin de este elemento es de
2,3 meq/100g. Al respecto, Graham (15), considera que
las concentraciones de potasio adecuadas para la produccin de cualquier cultivo se encuentran por encima
de los 0,001 meq/100g. Sin embargo, se dice que son
suelos pobres en este metal alcalino, cuando dichas
concentraciones estn por debajo de 0,25 meq/100g o
100 ppm (16). Los bajos niveles de este metal en el
suelo, pueden darse debido a la fuerte y eciente retencin de este elemento por las races de las plantas (17).
En lo que se reere a los conteos de microorganismos,
se debe tener en cuenta que estos desempean un importante rol en la solubilizacin, movilizacin y ciclaje
de nutrientes. Estudios denen una inuencia determinante de las caractersticas fsicas y qumicas del suelo
sobre estas poblaciones. Por ejemplo, en sistemas de
suelo intervenidos comparados con suelos no intervenidos como bosques (18) y zonas ribereas (19), la composicin microbiana y la actividad especca de estas,
diere signicativamente y tiende a disminuir segn el
grado de intervencin. Del mismo modo, evaluaciones
de las comunidades microbianas en suelos asociados a
diversos cultivos (20, 21, 22), demuestran que la mayora de los parmetros sicoqumicos del suelo generan
variaciones en las poblaciones y distribucin de microrRev. Asoc. Col. Cienc.(Col.), 27: 50-60; 2015

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ganismos. Sin embargo, los resultados obtenidos en este

estudio sealan un comportamiento de las poblaciones
microbianas contrario al reportado. Aqu, es necesario resaltar que algunos factores pueden inuir en los
resultados observados. Por ejemplo, factores como el
tamao de la muestra y la temporalidad de la misma.
As, la temporalidad del muestreo y por ende, el tamao de la muestra, acarrea variaciones en los resultados
que pueden denir la ausencia de una diferencia estadsticamente signicativa en las abundancias de estos
microorganismos. A fuerza de esto, se ha de tener en
cuenta que las estimaciones de los ndices de riqueza y diversidad si se ven afectados por el tamao de la
muestra (23). Igualmente, se parte del hecho de que
las poblaciones estudiadas son de un carcter dinmico,
competitivo, dependientes de factores biticos, abiticos y que se encuentran en constante cambio. As pues,
un muestreo que abarque diversos periodos en las zonas de estudio, permitira, primero, aumentar el nmero
de muestras, y segundo, ilustrar con mayor certeza los
factores y variaciones de los mismos que inuyen en la
conformacin de estas poblaciones, al igual que sus tendencias de proporcin, haciendo observables las diferentes conformaciones poblacionales que se generaran
producto de las variaciones de los factores temporales.
Distribucin y abundancia de HFMVA: Se debe tener
en cuenta que la composicin de las comunidades de
esporas de HFMVA sufren variaciones segn el rango
altitudinal que se estudie y que factores como el porcentaje de colonizacin de dichas esporas y la riqueza de especies se correlacionan negativamente con la
altitud (24). De esta manera, las ncas FLC y FER,
que son las locaciones de mayor altitud (1370 y 1455
msnm respectivamente), evidencian el menor nmero
de especies presentes y la menor cantidad de esporas
por gramo de suelo. Por el contrario, las ncas FED y
FLB, ubicadas entre los 1045 y 1270 msnm, presentan
la totalidad de los morfotipos identicados y las mayores concentraciones de esporas por gramo de suelo.
De igual forma, se debe tener en cuenta que la diversidad de especies en este tipo de organismos puede verse
afectada por las concentraciones de metales como el
plomo y el zinc, disminuyendo la riqueza de HFMVA
a medida que las concentraciones de estos metales aumentan como expone es su trabajo Zarei (25). Para el
caso, las comunidades de HFMVA en las ncas FLC
y FER, locaciones con los valores de zinc ms altos,
3,1 y 2,0 mg Zn/Kg suelo, respectivamente, la riqueza
y abundancia de morfotipos observados fue la menor.
En el caso de G. microaggregatum, morfotipo ms
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abundante, estudios reportan sus poblaciones como las

ms abundantes y las de mayor ocurrencia de observacin para diferentes usos de suelo. Por ejemplo, Stutz,
Copeman, Martin & Morton (26), en un estudio para
denir la composicin de las comunidades de HFMVA
en regiones ridas y de pradera, observaron que G. microaggregatum fue la nica especie que se encentr en
la totalidad de las locaciones muestreadas y a su vez era
la ms abundante. Igualmente, Whitcomb & Stutz (27)
y Strmer & Siquiera (28) reportan a esta especie como
la ms ocurrente en sus investigaciones sobre suelos urbanos dedicados a sistemas productivos hortcolas, sistemas agroforestales y en bosques secundarios jvenes.
Con relacin a las abundancias observadas para G.
geosporum y G. macrocarpum, se debe tener en cuenta la sensibilidad que las poblaciones de estas especies
puedan presentar a factores intrnsecos a las locaciones
donde se realice el estudio. Por ejemplo, en cultivos
de maz se observ que especies como G. geosporum,
mostraban modicaciones de menor grado en sus poblaciones, segn variaciones en las concentraciones de
fertilizacin fosfrica y nitrogenada, por ende, se le
considera y como una especie ligeramente sensible
(29). As mismo, Oehl et al., (30) reportan que estas especies se presentan de manera ms abundante en suelos
de baja labranza o con rotacin de cultivos y que pH
altos aumentan dichas abundancias. Este ltimo hecho
concuerda con las cuanticaciones realizadas para cada
una de las ncas, ya que se observ que en los puntos de
muestreo donde el pH era ms alto, las abundancias de
G. geosporum y G. macrocarpum tambin aumentaban.
Estudios determinan la correlacin entre factores sicoqumicos del suelo y la distribucin de especies de
HFMVA. Para el caso del pH, Lin et al., (31), reportan que las variaciones de este parmetro, inuyen de
manera directa las poblaciones de HFMVA en sistemas
agrcolas, y argumentan que dichas variaciones, puntualmente, la disminucin de los pH, pueden ser producto de las de las fertilizaciones nitrogenadas y aportes
de potasio a largo plazo. De hecho, trabajos donde se
implementaron modelos de regresin logstica para predecir el comportamiento de la esporulacin en HFMVA
del gnero Glomus y Acauloespora (32), indican que los
factores que explican las variaciones de la esporulacin,
son el pH y las concentraciones de potasio en el suelo .
Para este caso, y acorde a la revisin, los suelos donde
las concentraciones de potasio eran ms altas, presentaron las mayores cantidades de esporas por gramo de
muestra (FED=734; FLB=727) y por ende, las abundan-

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cias relativas ms altas (FED=28.51%; FLB=28.22).

Igualmente, el potasio, un macro elemento que participa
en la sntesis de almidones, la activacin de enzimas, la
sntesis de protenas y el movimiento estomtico, podra afectar la esporulacin de los HFMVA y, en consecuencia, las abundancia de estos. Se dice esto ya que
el crecimiento de la raz y la absorcin de agua, estn
reguladas positivamente por su concentracin, es decir,
el crecimiento de la raz, como la absorcin de agua se
da de mejor forma a concentraciones indicadas de potasio y por ende, se observa mayor exploracin de las
races como lo maniesta Goujard & Bayn (33). De
esta manera, se presentan dos factores favorables para
que el HFMVA colonice y esporule en mayor medida
en un nuevo hospedero. En primer lugar, aumentan las
posibilidades de que la raz de la planta y un inculo
de HFMVA hagan contacto, debido a la mayor longitud de races y elongacin continua de clulas radiculares. Y, en segundo lugar, el aumento en la eciencia
del manejo del agua y la absorcin de sales minerales,
en un sistema radicular con presencia de HFMVA y
disposicin idnea de potasio, garantizaran la formacin de ms carbohidratos en la planta, y dado que
los niveles de estas molculas en el hospedero estn
positivamente relacionados con los grados de colonizacin de HFMVA (34), es de esperar que aumente
el suministro de estos fotosintatos para el hongo y de
la misma forma la capacidad de esporular del mismo.
Experimento inoculacin: En cuanto a la inuencia del
morfotipo inoculado, en este tipo de ensayos, estudios
corroboran la relacin entre crecimientos superiores e
inoculacin con HFMVA en varias especies vegetales y
diferentes tipos de suelos. Por ejemplo, especies como
Carica papaya en asociacin con Glomus deserticola
y Glomus mossaea presentan mayor crecimiento y
engrosamiento de estructuras como tallo y hoja (35).
Del mismo modo, en cultivares y viveros de manzana y
maz, mejoras en el crecimiento y desarrollo de las races por asociacin con especies del genero Glomus han
sido reportadas (36, 37). En este caso, el crecimiento
de tallo y hojas aument en el tratamiento suelo FERG. geosporum, aproximadamente un 11,01% respecto
al crecimiento promedio de los controles. Adems, el
crecimiento de la raz primaria y la longitud total de
las plantas en el tratamiento suelo FER-G. microaggregatum aument un 27,79% y 15,86% respectivamente.
Finalmente, para el nmero de races secundarias observadas, este mismo tratamiento present un incremento del 128,57% en comparacin a los controles.

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En particular, y por lo que se reere a la inoculacin con

G. geosporum se debe resaltar que su inuencia sobre el
crecimiento en este ensayo, se vio direccionada al desarrollo de la parte foliar y tallo. As pues, los tratamientos
donde se inocul este morfotipo, evidenciaron valores
promedio de longitud de tallo y hoja superiores. Este
evento posiblemente se encuentre relacionado a los reportes de esta especie (38) como factor de desarrollo de
biomasa en brotes y aumento en la concentracin de fsforo y cobre en el tejido foliar. Dado que el cobre es un
micronutriente fundamental en la biosntesis de la clorola y de la actividad metablica de los cloroplastos,
es de esperar que las concentraciones de este elemento
regulen de cierta manera el desarrollo foliar y por ende,
si la absorcin de cobre aumenta en la planta, lo haga
tambin la tasa de crecimiento de los tejidos foliares.
Por otra parte, G. microaggregatum se reporta como
uno de los HFMVA de mayor abundancia y ocurrencia en diversos ecosistemas, por ejemplo, en cultivos
de cereales (39) y en parcelas dedicadas a la produccin de hortalizas (27). Tambin se menciona como
una de las especies con mayor distribucin altitudinal encontrndose, desde los 1990 msnm hasta los
4648 msnm (24). Sin embargo, los estudios que evalan su inuencia en el crecimiento de plntulas y el
desarrollo del sistema radicular son pocos. Algunos
trabajos mencionan a G. microaggregatum como una
de las especies que componen el inculo fngico utilizado para evaluar el crecimiento de plantas de tomate. Aqu, Copeman, Martin & Stutz (40) observan que
las plantas inoculadas con HFMVA, provenientes de
suelos no salinos, incrementan el crecimiento de estas.
No obstante, las propiedades fsicas y qumicas del suelo donde se realiz el montaje de los tratamientos que
mejores resultados de crecimiento arrojaron, bien podran inuir en el desarrollo de las races y crecimiento
de las plantas evaluadas. En este caso, el suelo recolectado en la locacin FER present los valores ms altos en todas las variables contempladas. Tomando en
cuenta esto, se revis el perl sicoqumico y se determin que FER present el suelo con las concentraciones de manganeso y materia orgnica ms altas (22,0
meq/100g y 1,5% respectivamente). Visto que el manganeso se considera un metal contaminante de suelos,
estudios demuestran que algunas especies como Koelreuteria paniculata (Sapindaceae) y Arabidopsis thaliana (Brassicaceae), desarrollan en mayor medida las
races secundarias o laterales como mecanismo de resistencia al estrs en presencia de este elemento y que a
su vez, el manganeso acta como inductor de la formaRev. Asoc. Col. Cienc.(Col.), 27: 50-60; 2015

Hongos formadores micorrizas nativos aislados en aguacate Persea americana MILL. Aranguren et al.

cin de pelos radiculares y de las races secundarias y

terciarias (41, 42). As, es de esperar que las pantas que
se desarrollaron en el suelo FER, gracias a la concentracin de manganeso, presentaran mayor crecimiento radicular, expresado en este caso como la longitud
de la raz primaria y el nmero de races secundarias.
En la evaluacin de los porcentajes de micorrizacin,
se debe tomar en cuenta que el tipo de HFMVA inoculado es el factor que determina en qu medida la formacin de la asociacin micorrzica es posible y a la
vez en qu grado el hongo simbionte se reproducir.
Estudios del fenmeno de la colonizacin micorrzica,
indican que el grado de colonizacin se debe, en gran
manera, a la anidad que la planta hospedera pueda
presentar con el HFMVA inoculado. Igualmente, variables como el porcentaje de colonizacin, el nmero
de hifas generadas y el nmero de esporas recuperadas,
son inuenciadas positivamente por este factor, segn
expone Carrenho, Botelho, Ramos & Schunk (43). As
pues, G. microaggregatum, reconocido como uno de
los HFMAV ms abundantes en diferentes ecosistemas,
podra presentar esta amplia distribucin y abundancia,
gracias a numerosos propgulos que dan cuenta de su
alta tasa reproductiva y de la resistencia de los mismos
a las condiciones naturales que llegaran a afectar su
viabilidad, y por ende su poder de colonizacin. Investigaciones dirigidas a determinar qu factores propios
de los HFMVA, regulan la colonizacin de las races
(44), determinaron que la densidad de esporas en el
suelo y el porcentaje de colonizacin, se correlacionan
positivamente. Como todos los tratamientos se inocularon con un nmero igual de esporas (20 esporas por
plntula), es de esperarse que la resistencia de estas y
su tasa reproductiva, hayan determinado el grado de
colonizacin de las races. De esta manera, las esporas de mayor tasa reproductiva, aumentaran la densidad de las mismas en los suelos trabajados, y en consecuencia, el porcentaje de colonizacin y el nmero
de esporas recuperadas, como se observ en los tratamientos que se inocularon con G. microaggregatum.
Por otro lado, como lo indic la prueba de comparacin
de medias, el tipo de suelo no present inuencia directa sobre el nmero de esporas recuperadas y sobre
el porcentaje de colonizacin. Estudios al respecto (45)
concluyen que en general, el tipo de suelo parece tener
poco o ningn efecto sobre ciertas grupos de HFMVA
y que por el contrario, factores como el uso, si podran
afectar estas comunidades. Del mismo modo, trabajos
donde se buscaba determinar la inuencia de los nuRev. Asoc. Col. Cienc.(Col.), 27: 50-60; 2015

trientes del suelo sobre la colonizacin de HFMVA

en algunos cultivares, demostraron que los niveles
de elementos como calcio, fsforo, magnesio y manganeso no presentaran inuencia sobre este proceso
(46). No obstante, tomar en cuenta variables abiticas
propias de los suelos donde se desarrolla esta asociacin, es relevante para poder determinar, ms acertadamente, el papel que los suelos juegan en la formacin de micorrizas, por ejemplo el efecto de la cantidad
de agua disponible y el pH, factores que son considerados inuyentes en esta simbiosis, hechos expuestos por Karst, Hoeksema, Jones & Turkington (47).
CONCLUSIONES
El estudio de suelos obtenidos de rizsfera de aguacate en cultivares del municipio de Fresno, norte
del departamento del Tolima, permiti identicar y
describir 8 morfotipos de hongos micorrzicos, de
los cuales 7 pertenecan al gnero Glomus y uno
al gnero Acaulospora. Estos morfotipos diferan
en su distribucin y abundancia en las locaciones muestreadas. Adems, se determin que G.
microaggregatum, G. geosporum y G. marocarpum, fueron los morfotipos ms abundantes y los
que se encontraron en todo el material analizado.

Las comunidades de microorganismos (meslos,

actinomicetos, bacterias solubilizadoras de fsforo, mohos y levaduras) en las que los morfotipos
encontrados de HFMVA se desarrollaban, no presentaban conformaciones diferentes, desde el punto
de vista estadstico. Por otro lado, los factores sicoqumicos de los suelos analizados, diferan en
gran manera, especialmente cuando se observaban
los niveles de fsforo, hierro, azufre, calcio, zinc
y magnesio. Sin embargo, todos eran suelos con
baja concentracin de materia orgnica, pH cidos
y de poca CIC. Es recomendable realizar muestreos en diversos periodos del ao, con el n de
contemplar tamaos de muestra ms amplios y variaciones de las poblaciones y factores estudiados.

Para las variables de crecimiento de la planta contempladas en este trabajo, los porcentajes de colonizacin y el nmero de esporas recuperadas, se
observ que el factor morfotipo inoculado era
el de mayor inuencia al respecto. Los tratamientos que presentaban a G. microaggregatum como
HFMVA inoculado, siempre arrojaron los valores
promedio ms altos. Sin embargo, se debe tomar
en cuenta el la inuencia de G. geosporum en el

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desarrollo foliar y el papel de factores abiticos y

nutrientes como cobre, manganeso y materia orgnica sobre la formacin de una simbiosis micorrzica, ya que posiblemente, estos elementos
regulen de alguna manera el crecimiento radical e indirectamente el proceso de colonizacin.
AGRADECIMIENTOS
Obviamente, en primer lugar, al dueo de la vida.
Sin la paz que esa presencia inspira, nada es posible. Del mismo modo, al seor Aniceto Aroca Aguja,
su seora esposa Mara Oliva Carvajal y su hija, Luz

trinidad Aroca, padres, consejeros y el ejemplo de

rectitud, entrega y paciencia. A mi cmplice incansable, Julietta. A los profesores Martha Lily Ocampo
Guerrero y Neftal Mesa Lpez por su mirada atenta
y gua frente a cada paso que se dio en este camino.
Igualmente a la Profesora Diana Beltrn, a todo el personal del grupo de investigacin GEBIUT y A COLCIENCIAS, por la nanciacin, al Comit Central de
Investigaciones de la Universidad del Tolima y a los
productores de aguate del norte del Tolima quienes
permitieron que esta investigacin se desarrollara.

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