UNIDAD ACADMICA DE CIENCIAS QUMICO BIOLGICAS.

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE GUERRERO.

LABORATORIO DE LA UNIDAD DE APRENDIZAJE DE LA OPTATIVA DE
CITOPATOLOGA GINECOLGICA.
PRCTICA 2.

Ttulo: Mtodo de tincin de Papanicolaou de citologa

convencional y fondo de saco laterales
Responsable: DRA LUZ DEL CARMEN ALARCN ROMERO.
Adjunta de la prctica de laboratorio: Wendy Aide Castro Mora
Fecha: 25-01-16 Hora: 10:10 a 12:50.
Objetivos
Al finalizar esta prctica el alumno ser capaz de:
1.- Conocer, identificar, diferenciar y aplicar los pasos de la tincin de Papanicolaou para
el estudio de la citologa convencional del crvix uterino y del fondo de saco laterales.

Introduccin
La coloracin de Papanicolaou es la tcnica por excelencia de la citologa general como la
hematoxilina eosina lo es para el mtodo histolgico. Para lograr una buena preparacin
citolgica es necesario que la toma o recoleccin del material sea adecuada, en el caso
del crvix uterino la toma de muestra tiene que realizarse de la zona de transformacin
escamocolumnar, asegurando clulas planas, cilndricas y de metaplasia escamosa
endocervical. Tambin debe realizarse una correcta y rpida fijacin, y un buen proceso
de coloracin.
Para la Coloracin de Papanicolaou es necesario que los preparados sean previamente
fijados en alcohol 96. El material extendido en el portaobjeto debe fijarse inmediatamente
antes que comience la desecacin. Lo ideal es sumergirlo en alcohol 96 no menos de 10
minutos.
Los preparados fijados de esta manera pueden conservarse hasta dos semanas antes de
colorear y esto hace posible la remisin a distancia en caso de no contarse con un
laboratorio prximo. El Mtodo de Tincin segn Papanicolaou es de gran nobleza y ha
tolerado infinidad de variaciones resultantes en productos de buena calidad, aptos para la
observacin microscpica minuciosa que requiere la citologa. Es un mtodo de
coloracin muy refinado, cientficamente probado y comprobado que requiere en su
frmula original una gran cantidad de pasos y da un producto de absoluta sutileza de
colores y transparencia. La tcnica de Papanicolaou es muy noble, ha tolerado infinidad
de modificaciones y es muy til para ser aplicada no slo en citologa ginecolgica sino
tambin en todo el resto. Por esta razn es la coloracin fundamental de la citologa
general. Se ve con claridad detalles en la flora de los extendidos crvico vaginales,
detalles que expresan la maduracin en el epitelio escamoso (evaluacin hormonal),

alteraciones morfolgicas nucleares (lesiones pre neoplsicas y neoplsicas), sustancias

qumicas (glucgeno, moco), otros elementos infecciosos (Parsitos, hongos y virus entre
otros).
Materiales

Muestra biolgica: Extendido citolgico del crvix uterino

Colorantes de Papanicolaou: OG-6 y EA-50.
Hematoxilina de Harris.
OH-96 y OH-70
Alcohol absoluto
Agua amoniacal
Xilol.
Resina (entellan)
Cubreobjetos
Microscopio
Aceite de inmersin.
Pequeo trapo de algodn para limpiar laminillas

PROCEDIMIENTO
1.- Realizar la tincin de Papanicolaou. Los pasos y tiempos descritos en la tcnica abajo citada,
son susceptibles de cambios

Tcnica de Papanicolaou modificada (LAB. DE INVESTIGACIN EN CITOPATOLOGA E

HISTOQUMICA. UACQB-UAG).

Reactivos

Tiempos

OH al 96%

1 minuto

OH al 70%

1 minuto

Agua de garrafn

5 baos

Hematoxilina de Harris

45 segundos

Agua corriente

5 baos

Agua de garrafn

5 baos

Agua amoniacal

2 baos

Agua corriente

5 baos

Agua de garrafn

5 baos

OH al 96%

5 baos

OH al 96%

5 baos

Orange

1 minuto

OH al 96%

4 baos

OH al 96%

3 baos

OH al 96%

3 baos

EA-50

5 minutos

OH al 96%

5 baos

OH al 96%

5 baos

OH al 96%

5 baos

OH absoluto

5 baos

OH- Xilol

8 baos

Xilol

4 baos

Xilol

10 minutos

Resultado de las tinciones celulares:

Ncleos---------------------------------------en azul o morado
clulas acidfilas--------------------------rojo a naranja
clulas basfilas---------------------------verde o azul verdoso
clulas o fragmentos de tejido impregnados de sangre---------------- Naranja o naranja verdoso

2.- De manera general, revise el extendido citolgico de Papanicolaou y anote los

elementos celulares presentes y las diferencias entre los colores que presentan. Tambin
anote el aumento en el que realiza las observaciones.
Disposicin de desechos y limpieza del rea
Tener mucho cuidado de no romper las preparaciones, ya que son muy costosas, en
caso de que por descuido se rompan envolverlas en papel, esterilizar en autoclave y
desecharlas en el contenedor exclusivo para material roto de vidrio. . Los portaobjetos
rotos o daados que se encuentren limpios se colocan directamente en el mismo
contenedor
Te recordamos que:
Los desechos de colorantes se colocan en los contenedores dispuestos para este
fin en cada laboratorio.
Entregar todo el material limpio y seco y si es necesario desinfectado.
Terminada la prctica limpiar perfectamente el rea, con una franela y alcohol o
cloro diluido.
No dejar residuos o basura en vertederos y mesa de trabajo.

RESULTADOS.
DISCUSIN (Contestar las preguntas del siguiente cuestionario)
1..- Porque consideras que es importante la tincin de extendidos cervicovaginales por
el mtodo de Papanicolaou?
2.- Qu importancia tiene la fijacin del material biolgico en la tincin de Papanicolaou?

3.- Para que se realiza el montaje con resina sinttica de los extendidos citolgicos?
4.- Por qu es importante diferenciar la coloracin de los elementos celulares de un
extendido de la zona de transformacin escamocilndrica del crvix uterino?
5..- Cual es el fundamento de la tincin de Papanicolaou y porque se tiene que hacer un
control de calidad de la misma?
CONCLUSIN.

REFERENCIAS.
Lacruz PC., Faria GJ. Citologa Ginecolgica de Papanicolaou a Bethesda. Madrid:
Editorial complutense, 2003.