Trabajo Avellano TODO

LABORATORIO DE ANÁLISIS INDUSTRIAL Y DEL MEDIO AMBIENTE
Informe de trabajo semanas 1 y 2
ÍNDICE
PRIMERA SEMANA
1. Determinación de la dureza total del agua por valoración complexométrica....2
2. Determinación potenciométrica de la concentración de ácido fosfórico en

refrescos de cola..........................................................................................16
3. Comparación de las prestaciones de espectrofotómetros de absorción.........29
4. Determinación de la concentración de manganeso en un acero por

espectroscopia de absorción atómica.............................................................49
5. Separación de colorantes en alimentos por cromatografía de capa fina.........60
SEGUNDA SEMANA
6. Determinación de la cantidad de Fósforo en hojas de avellano.....................66
Alvaro Olano y Alain Senar Página 1 de 77

1. DETERMINACIÓN DE LA DUREZA TOTAL

DEL AGUA POR VALORACIÓN
COMPLEXOMÉTRICA
1.1. OBJETIVOS
• Introducir las valoraciones de formación de complejos de metales con
EDTA
• Analizar la dureza total del agua por valoración complexométrica.
• Proponer un ejercicio práctico para aplicar procedimientos de validación
de métodos analíticos
• Evaluar los errores experimentales mediante el ensayo de colaboración
de Youden.
1.2. SÍNTESIS TEORICA

Se denomina dureza del agua A la concentración de compuestos minerales
que hay en una determinada cantidad de agua, en particular sales de magnesio y
calcio. Son éstas las causantes de la dureza del agua, y el grado de dureza es
directamente proporcional a la concentración de sales metálicas.
En principio, el agua dura no supone riesgo para la salud. De hecho, la
presencia de calcio y magnesio se considera como un suplemento en la dieta
recomendada de ambos elementos. Sin embargo, las aguas duras son
perjudiciales en numerosos campos. Por ejemplo las tuberías pueden llegar a
obstruirse.
Tipos de dureza: La dureza del agua tiene una distinción compartida entre
dureza temporal (o de carbonatos). y dureza permanente (o de no-carbonatos). A
continuación explicaremos ambas:
Dureza temporal
La dureza temporal se produce por carbonatos y puede ser eliminada al hervir
el agua o por la adición de CaOH (hidróxido de calcio).
El bicarbonato de calcio es menos soluble en agua caliente que en agua fría,

por esta razón al hervir que hervir se precipitará el carbonato de calcio fuera de
la solución, dejando el agua menos dura.
Los carbonatos pueden precipitar cuando la concentración de ácido carbónico
disminuye, con lo que la dureza temporal disminuye, y si el ácido carbónico
aumenta puede aumentar la solubilidad de fuentes de carbonatos, como piedras
calizas, con lo que la dureza temporal aumenta. Todo esto está en relación con el
pH de equilibrio de la calcita y con la alcalinidad de los carbonatos. Este proceso
de disolución y precipitación es el que provoca las formaciones de estalagmitas y
estalactitas.

Dureza permanente
Esta dureza no puede ser eliminada al hervir el agua, es usualmente causada
por la presencia del sulfato de calcio y magnesio y/o cloruros en el agua, que son
más solubles mientras sube la temperatura. Puede ser eliminada utilizando el
método SODA (Sulfato de Sodio). También es llamada "dureza de no carbonato".
1.3. MATERIAL Y REACTIVOS

Material
• 2 muestras de agua
• 1 matraz aforado de 250mL
• 1 matraz erlenmeyer de 250mL
• 1 pipeta de 2mL
• 1 pipeta de 10mL
• 1 bureta de 25mL
• 1 embudo pequeño
Reactivos
• sal disódica de EDTA
• disolución patrón de Ca 0.01M
• disolución tampón pH 10
• negro de eriocromo-T
• NaOH disolución acuosa al 50% en peso
• calcón o murexida
1.4. PARTE EXPERIMENTAL
A) Preparación de una disolución patrón 0,01 M de la sal disódica del

ácido etilen-diamino-tetraacético, Na2H2Y2.

1. Calculamos la masa de NaH2Y2∙2H2O (M = 372,24 g/mol) necesaria para

preparar 250 ml de disolución 0,01 M y anotamos el valor. Pesamos la
cantidad calculada del reactivo y lo transferimos a un matraz aforado de 250
ml que contiene unos 100 ml de agua desionizada, agitamos la mezcla para
favorecer la disolución del sólido, y diluimos con agua desionizada hasta el
aforo.
2. Guardamos la disolución de EDTA 0,01 M en un frasco de plástico.
3. Preparamos una bureta para la valoración. Homogeneizamos la bureta con un

pequeño volumen de disolución antes de enrasarla
B) Determinación del blanco. Procedimiento general de valoración.
4. Añadimos 25 ml de agua desionizada a un matraz erlenmeyer de 250 ml, 2 ml

de la disolución tampón de pH 10 y 3 gotas de disolución de indicador negro
de eriocromo T (el indicador debe contener una pequeña cantidad de MgY2-).
Si la disolución tiene color azul quiere decir que no tiene iones Ca2+ y Mg2+
en concentración que podamos detectar con el indicador. En este caso no es
necesario adicionar EDTA y consideraremos que el volumen gastado por el
blanco es cero.
5. Si nuestra disolución tiene color rojizo adicionamos lentamente la disolución

de NaH2Y2 mientras agita el matraz erlenmeyer. En el punto de equivalencia
el indicador vira de rojo-vino a color azul. Anotamos el volumen de disolución
añadido para alcanzar el punto de equivalencia.
6. Repetimos el procedimiento dos veces más.
C) Estandarización de la disolución de EDTA.
7. Para conocer la concentración real de la disolución preparada empleamos

una disolución de concentración conocida de una sustancia como el carbonato
de calcio que es patrón primario. Pipeteamos 10 ml de la disolución 0,01 M de
CaCO3, añadimos 2 ml de una disolución tampón de pH 10 y 3 gotas de
indicador negro de eriocromo T.
8. Enrasamos la bureta con una disolución de la disolución de Na2H2-

EDTA∙2H2O y valoramos la muestra. En el punto de equivalencia el indicador
vira de rojo-vino a color azul. Anotamos el volumen de disolución añadido
para alcanzar el punto de equivalencia. En ese punto los moles de EDTA
añadidos serán los mismos que los de iones Ca en disolución. Como se conoce
el volumen y la molaridad del CaCO3 y el volumen consumido de EDTA,
podemos calcular la molaridad corregida de la disolución.

9. Repetimos el procedimiento con otras dos alícuotas de 10ml de la disolución

patrón de CaCO3.
D) Valoración de Ca y Mg. Dureza total del agua.
10. Pipeteamos 25 ml de la muestra de agua que se desea analizar en un matraz

erlenmeyer de 250 ml. A continuación añadimos 2 ml de una disolución
tampón de pH 10 y 3 gotas de indicador negro de eriocromo-T.
11. Enrasamos la bureta con una disolución de la disolución de Na2H2EDTA∙2H2O

y valoramos la muestra. En el punto de equivalencia el indicador vira de rojo-
vino a color azul. Anotamos el volumen de disolución añadido para alcanzar el
punto de equivalencia. El volumen de EDTA en la valoración corresponde a la
reacción de complejación de Ca y Mg. Realizamos tres réplicas en total.
12.El volumen neto de EDTA es la diferencia entre el volumen de EDTA

consumido con la muestra menos el consumido por el blanco.
13.Repetimos la valoración con una segunda muestra de agua.
E) Valoración de Ca.
14.Para la valoración de calcio, pipeteamos 10ml de la muestra en un matraz

erlenmeyer de 250ml, añadimos 15ml de agua desionizada y 1,5ml de NaOH
al 50%. Agitamos el matraz durante aproximadamente 2 minutos para que
precipite Mg(OH)2. Añadimos unos 0.2g de indicador (murexida o calcón) al
erlenmeyer y valoramos la muestra con la disolución de EDTA. De vez en
cuando dejamos de añadir EDTA y agitamos la disolución para que se
redisuelva Ca(OH)2 que pudiera haber precipitado. Continuamos la adición de
EDTA hasta que el indicador vire a azul. Anotamos el volumen de EDTA
añadido. Repetimos la valoración dos veces más.
15.Realizamos un blanco empleando 10ml de agua desionizada en lugar de la

muestra. La diferencia entre el volumen consumido en la valoración menos el
volumen del blanco corresponde al volumen de EDTA consumido para
complejar el Ca.
1.5. RESULTADOS
Para empezar calculamos la masa de sal disódica de EDTA y preparamos 250

ml de disolución a 0.01 M:

Mediante una balanza pesamos los 0.9306 g de reactivo e introducimos a un

matraz aforado de 250 mL donde se mezclan con aproximadamente 100 mL de
agua desionizada para que sea diluida.
Guardamos la disolución en un vaso de plástico y homogenizamos para reducir
también un posible error por sustancias que podrían aparecer en la bureta y
desvirtuar las medidas.
Para determinar el blanco no añadimos ningun volumen de EDTA ya que al
añadir algunas gotas de indicador negro de eriocromo-T la disolución ya estaba
de color azul.
1. Calcule la concentración molar de la disolución de NaH 2Y2. El

resultado debe incluir la media aritmética y la desviación típica o
estándar.
a) Calcule el volumen neto de EDTA gastado en cada valoración.
b) Empleando la disolución patrón de Ca como referencia, calcule el

número de moles de Ca presentes inicialmente en la valoración de
EDTA. Como la estequiometría de la reacción es 1:1, los moles de
EDTA serán los moles correspondientes a los iones Ca añadidos.
c) Calcules la concentración molar de EDTA.
a) El volumen de EDTA que obtenemos de las valoraciones son los siguientes:

V1 = 10.9 ml
V2 = 11.2 ml
V3 = 10.8 ml
b)
10mL( EDTA) ⋅ 0.01 mol (Ca) = 1 ⋅10 − 4 mol (Ca)
L
c)
M CaCO 3 ⋅ VCaCO3
M EDTA ⋅ VEDTA = M CaCO3 ⋅ VCaCO 3 ⇒ M EDTA =
V EDTA
V EDTA = 10 .9mL → M EDTA = 0.009174 M

V EDTA = 11 .2mL → M EDTA = 0.008928 M

V EDTA = 10 .8mL → M EDTA = 0.009259 M
x = 0.009116
0.009116 ± 0.0008 M
σ = 0.0008
2. Una vez que haya comprobado la concentración de EDTA, calcule los

moles totales (Ca2+ + Mg2+) en las muestras de agua a partir del
volumen neto gastado en la muestra de agua y la molaridad del
complejante.
3. Exprese los resultados como mg de carbonato de calcio por litro, e

indique el valor medio, la desviación típica, la desviación típica
relativa y el intervalo de confianza.
Para analizar las nuestras de agua, pipeteamos 25ml de las muestras en un

matraz erlenmeyer. Luego añadimos 2ml de disolución tampón de pH 10 y
otras 3 gotas de indicador negro.
EDTA = 0.0099116mol( EDTA) ⋅ V EDTA

L
EDTA ⋅ 10 5
Dureza =
25 ⋅ 10 −3 L
Muestra A Réplica
1 2 3
Volumen inicial de EDTA 25 25 25
(mL)
Volumen final de EDTA 20. 21. 20.8
(mL)
Muestra B 9
Réplica1
Volumen de EDTA 1 4.1 23.9 4.2
3
gastado (mL)
Volumen inicial de 25 25 25
EDTA
EDTA (mL) consumido 0.0 0.0 0.04
(mmol) 406 387 16
Volumen final de 17.8 18 18
Dureza
EDTA (mL) total (mg 16 15 166.
CaCO3/L) 2.55 4.62 515
Valor medio y límites 161.23 ± 15
(mg CaCO3/L)
Volumen de EDTA 7.2 7 7

gastado (mL)
EDTA consumido 0.07 0.06 0.06
(mmol) 136 94 94
Dureza total (mg 283. 275. 275.
CaCO3/L) 042 188 188
(mg CaCO3/L)
4. Represente las concentraciones de CaCO3 como un punto en un

diagrama donde se representan la concentración de la muestra 1 en
el eje de abscisas y la de la muestra 2 en el de ordenadas. Incluya en
el diagrama los puntos correspondientes a los resultados de los otros
grupos de prácticas.
Manejamos los datos sin decimales debido a la precisión de los aparatos de

medida utilizados.
Muestra Muestra
A B
196 ± 15 375 ± 19
165 ± 15 329 ± 17
78 ± 15 265 ± 5
154 ± 15 311 ± 19
161 ± 15 278 ± 17
159 ±37 307 ± 6
Hacemos el gráfico de la tabla anterior:

Concentraciones
420
370
320
Muestra B
270
220
170
120
70 90 110 130 150 170 190 210 230
Muestra A
Si nos fijamos en los resultados obtenidos saltan a la vista dos medidas que
difieren del resto de los grupos. Si no nos fijamos en ellas podemos apreciar que
la región determinada por las medidas es bastante concentrada y como
conclusión podemos comentar que los errores cometidos en las distintas
mediciones no son demasiado importantes.
5. Dibuje dos líneas perpendiculares a cada uno de los ejes con los
valores de las medias aritméticas. El gráfico quedará dividido en
cuatro cuadrantes y permitirá evaluar la existencia de errores
aleatorios y de sesgo. Si sólo existieran errores aleatorios el número
de puntos en cada uno de los cuadrantes sería igual. Sin embargo, la
existencia de errores sistemáticos se reflejará en la abundancia de
puntos en los cuadrantes superior derecho e inferior izquierdo del
diagrama. En el caso imposible de ausencia de errores aleatorios,
todos los puntos deberían caer sobre la diagonal de 45º con los ejes
del diagrama, de manera que cuando en la práctica tales errores
están presentes, la distancia de la perpendicular de un punto desde
esa línea proporciona una medida del error aleatorio.

Concentraciones
420
370
320
Muestra B
270
220
170
120
70 90 110 130 150 170 190 210 230
Muestra A
Tenemos errores sistemáticos puesto que la mayoría de los puntos caen en los
cuadrantes superior derecho e izquierdo. No tenemos errores aleatorios.
6. Calcule la diferencia entre cada par de valores y obtenga la varianza

de los errores aleatorios (s2ea) y la varianza total (s2t)
∑( Di − D )
2
2
s ea = i
2(n − 1)
Donde Di es la diferencia entre cada par de valores y D es el valor

medio de las diferencias.
∑(Ti − T )
2
st2 = i
2(n − 1)
Donde Ti es la suma de cada par de valores y T es el valor medio de

las sumas. Se incluye un 2 en el denominador porque son pares de
puntos.
Asumiendo que los resultados siguen una distribución normal,
Youden estableció que los puntos que caen dentro de la
circunferencia con centro en el punto de intersección de las medias
aritméticas y radio 1,552 s son aceptables. Son dudosos los valores
comprendidos entre la circunferencia anterior y otra de radio 2,448 s,
y rechazables los puntos que caen fuera de esta circunferencia. Las
dos circunferencias incluyen el 70 y el 95% de los resultados.

Varianzas Muestra A
Di D (Di-
D)2
31 40 81
87 40 2209
76 40 1296
7 40 1089
2 40 1444
37 40 9
∑(Di-D)2= 6128
Varianza de los errores aleatorios: 612.8
Varianzas Muestra B
Di D (Di-D)2
46 47.67 2.789
64 47.67 16.33
46 47.67 2.789
33 47.67 215.20
9
29 47.67 348.56
9
68 47.67 413.30
9
∑(Di-D)2= 998.995
Varianza de los errores aleatorios: 99.899

Total:
Ti T (Ti-T)2
571 463 11664
494 463 961
343 463 14400
465 463 4
439 463 576
466 463 9
∑(Ti-T)2= 27614
Varianza total: 2761.4
En nuestro caso concreto, s = 52.54. Luego según Youden, el radio para el que
son aceptables es de 81.55, los valores dudosos se encontrarán entre este valor
y 128.617, y los que caen fuera de esta última circunferencia son rechazables.
1.6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
1. Comentes los resultados obtenidos. Tenga en cuenta los valores

medios, las desviaciones típicas y la desviación típica relativa.
Muestra A Réplica
1 2 3
Dureza total (mg 16 15 166.
CaCO3/L) 2.55 4.62 515
(mg CaCO3/L)
Muestra B Réplica
1 2 3
Dureza total (mg 283. 275. 275.
CaCO3/L) 042 188 188
(mg CaCO3/L)
2. ¿Son aguas duras o blandas? Desde su punto de vista ¿Podrían dar

problemas si se utilizaran como alimentación en calderas de vapor
industriales?
Las muestras de agua analizadas en el laboratorio se caracterizan por tener
una dureza elevada. La muestra A, tal y como recoge la tabla posee una dureza
de 161,23 mg CaCO3/L aproximadamente y la podríamos englobar en el grupo
de aguas duras.
Por otro lado el agua de la muestra B posee una dureza de 277.81 mg
CaCO3/L y por tanto se engloba en el grupo de aguas muy duras ya que es >
180 mg.
La utilización de cualquiera de estas dos aguas para su utilización en calderas
industriales podría dar un gran problema ya que su dureza es elevada.
Se ha comprobado que las muestras tienen importantes cantidades de
minerales, los cuales se van depositando sobre las tuberías, disminuyendo su
sección útil y reduciendo por tanto la cantidad de agua o vapor que puede
atravesar la misma, incluso llegando a obstruirlas.
Además el hecho de que contengan minerales es significativo de que se
necesitara más energía para evaporar el agua por lo que no este tipo de agua no
será apropiada para un uso industrial en calderas.
3. A partir de la representación de Youden con los resultados del

grupo de clase, analizamos y proponemos mejoras que consideramos
oportunas para reducir los errores.
Como rara vez en nuestra vida hemos utilizado material del laboratorio puede
haber errores en las medidas realizadas.

Por otro lado, los errores cometidos en la práctica pueden provenir de distintas
razones, entre ellas destacan las siguientes:
1. Disolución patrón de CaCO3 con diferente concentración que 0,01M.

2. Instrumentos sucios y contaminados.
3. Error al medir la cantidad gastada de disolución patrón de CaCO3.
4. Error al valorar la cantidad de Ca y Mg en la muestra
Como mejoras proponemos:

a) Realizar un número mayor de muestreos.
b) Uso de instrumentos con mayor precisión
c) Limpieza total del material.
4. Un estudiante tiene un blanco distinto de cero, pero no lo tiene en

cuenta en el cálculo de la dureza total. ¿Cómo afectaría al resultado
final?
El análisi realizado no sería válido, ya que la calibración del método sería

incorrecto, el resultado obtenido tendría una cantidad de iones inferior de los que
posee en realidad.

2. DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE
LA CONCENTRACIÓN DE ÁCIDO FOSFÓRICO
EN REFRESCOS DE COLA
2.1. OBJETIVOS
• Obtener la gráfica de valoración potenciométrica: variación del pH en

función del volumen de reactivo añadido.
• Determinar la concentración de fósforo en refrescos de cola.
2.2. SÍNTESIS TEÓRICA

Los refrescos de cola contienen ácido fosfórico que imparte un sabor ácido
característico. Como estas bebidas son coloreadas, es muy difícil determinar la
concentración de ácido fosfórico por valoración con una base y un indicador
colorimétrico para detectar el punto final, ya que el color de la bebida enmascara
el cambio de color en el punto final de valoración. No obstante, si se mide el pH
durante la valoración, se puede representar la variación de pH en función del
volumen de reactivo añadido y determinar la concentración de ácido fosfórico a
partir de la gráfica siguiente:

Se pueden usar varios procedimientos para determinar el punto final de una

valoración potenciométrica. El más sencillo es el registro directo de pH o del
potencial en función del volumen de reactivo. El punto final corresponde al punto
medio o punto de inflexión en el tramo de mayor pendiente. Un segundo
procedimiento para la determinación del punto final es calcular el cambio de pH,
o de potencial, por unidad de volumen valorante, ΔpH/ΔV. Una representación de
estos datos en función del volumen da una curva con un máximo
correspondiente al punto de inflexión. También la segunda derivada de los
cambios puede utilizarse para detectar el punto final, ya que cambia de signo en
el punto de inflexión.
Los métodos anteriores de evaluación del punto final suponen que la curva de
valoración simétrica en torno al punto de equivalencia, y que la inflexión de la
curva corresponde a este punto. Esta suposición es válida siempre que las
especies que intervienen en la valoración reaccionen entre sí en una relación
equimolar y también que la reacción de electrodo sea reversible.
Las valoraciones potenciométricas proporcionan resultados más fiables que

cuando se usan indicadores químicos. Resultan particularmente útiles en el caso
de disoluciones coloreadas o turbias. Tienen el inconveniente de ser más lentas
que las valoraciones con indicadores, aunque es fácil automatizar los análisis.
El pH de una disolución se determina con un potenciómetro que se denomina

pHmetro, un instrumento que mide la diferencia de potencial entre un electrodo
de referencia y un electrodo que es sensible a la variación de la concentración de
iones H3O+ en disolución. Aunque antiguamente ambos electrodos estaban

separados, actualmente se juntan en un solo electrodo; de ahí el nombre de

electrodo combinado de vidrio. La figura siguiente muestra un esquema de un
electrodo combinado de vidrio.
El electrodo indicador (A) consiste en una delgada membrana de vidrio

sensible al pH sellada en el extremo de un tubo de vidrio o de plástico de
paredes gruesas. El tubo contiene ácido clorhídrico diluido saturado con cloruro
de plata (e). En esta disolución un alambre de plata (f) forma un electrodo de
referencia de plata/cloruro de plata, que se conecta a una de las terminales de
un dispositivo para medir el potencial (d). El electrodo de referencia (B) más
común es el de plata/cloruro de plata. El tubo interno está formado por un
alambre de plata recubierto de una delgada capa de cloruro de plata. Este
alambre está sumergido en una disolución de cloruro de potasio saturada con
cloruro de plata (g). Este tubo está en contacto con la disolución cuyo pH se
desea medir a través de una pequeña abertura de porcelana fritada porosa (j).
Este tipo de unión tiene una resistencia entre 2000 y 3000 Ω y evita la
contaminación de la disolución del analito debido a la pérdida de cloruro
potásico.
Material
• pH metro
• Electrodo combinado de vidrio
• agitador magnético
• 1 magneto
• 1 matraz erlenmeyer de 250mL
• 1 probeta de 100mL
• 2 vasos de precipitados de 50-75 mL
• 1 bureta de 25 ó 50 mL
• 1 embudo de vástago estrecho para bureta
• 1 vidrio de reloj
• Soporte de bureta y pinzas
Reactivos
• Refresco de cola
• Disolución estándar de NaOH 0,05M
• Disolución amortiguadora pH 4,0
• Disolucion amortiguadora pH 7,0
A) Preparación de la muestra para análisis

1.- Transferimos 150ml del refresco a un erlenmeyer de 250ml. Luego

metemos el iman en la muestra y lo colocamos en un agitador.
2.- Después tapamos el erlenmyer con el vidrio de reloj para disminuir la

evaporación del líquido.
3.- Calentamos la muestra para que eliminar el dióxido de carbono disuelto.

Posteriormente esperamos hasta que la muestra llegue a temperatura ambiente.
B) Calibrado del pH-metro
5.- Encendemos el equipo y lo dejamos unos minutos para que se estabilice la

medida.
6.- Utilizamos las disoluciones tampón de pH 4,0 y 7,0 para calibrar el equipo.
7.- Mientras no realizamos medidas lo mantenemos sumergido en agua. Todo

esto realizado con cuidado ya que los electrodos de vidrio son frágiles y pueden
deteriorarse con rapidez si no se cuidan apropiadamente. Para lo cual
inmediatamente después de la medida lo lavamos con agua desionizada.
C) Valoración potenciométrica.
8.- Después de lavar la bureta con agua desionizada, homogeneizamos la

bureta con la disolución de NaOH 0,05 M, la enrasamos con NaOH y la colocamos
en el soporte.
9.- Transferimos 50 ml de la disolución descarbonatada a un vaso de

precipitados teniendo un volumen suficiente para cubrir el tabique poroso del
electrodo ya que si no es así la medida será errónea.
10.- Colocamos un imán en el vaso de precipitados y colocamos el vaso con la

muestra encima del agitador magnético, ajustando la velocidad del agitador de
modo que la disolución sea homogénea y no se pierda muestra por salpicaduras.
11.- Comenzamos la valoración con adiciones de la disolución de NaOH 0,05 M

de 0.5 ml, anotando el volumen añadido y el pH después de cada adición.

Conforme se acerca al punto final de la valoración, que se conoce porque el

aumento de pH es más pronunciado, disminuimos el volumen de las adiciones.
Cerca del punto de equivalencia añadimos 0,1 ml cada vez ya que la pendiente
es más pronunciada en estos puntos. Continuamos la valoración hasta que el pH
sea mayor de 10.5.
12.- Repetimos la valoración con otras dos alícuotas.

2.5. RESULTADOS
1. Represente el ph en función del volumen de NaOH añadido.
Medida 1
V añadido
(ml)
0,00
0,50
1,00
1,50
Alvaro Olano y Alain Senar
2,00
Página 20 de 77
Medida 2
V añadido
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00Página 21 de 77
Medida 3
V añadido
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00Página 22 de 77
12

10 Página 23 de 77
2.- Localice los puntos de equivalencia correspondientes
En la gráfica podemos observar como el primer protón es liberado en pH

ácidos y el segundo protón en pH más básicos.
De la representación gráfica mencionada se extrapolan los puntos de
equivalencia de las diferentes medidas.
PRUEBA 1 PRUEBA 2 PRUEBA 3

Vol: pH: 4,36 Vol: 5,6 pH: 4,66 Vol: pH: 4,88
5,5ml 5,4ml
Vol:11,8 pH: 8,10 Vol:12ml pH: 8,18 Vol:12,4 pH: 8,63
ml ml
3.- A partir de los volúmenes necesarios para alcanzar los puntos de

equivalencia y la molaridad del NaOH, determine la concentración de
ácido fosfórico en la muestra. Calcule la media y los límites de confianza
de la concentración.
Calculamos los mg/l de la siguiente manera:
98000 mg / mol
mg / L = mLNaOH ⋅ 0.05 M ⋅
50 mL
Si hacemos los cálculos para las tres pruebas realizadas, obtenemos los
siguientes valores:
Prueba1: 539mg/L
Prueba2: 549mg/L
Prueba3: 529mg/L
x = 439 mg / L
σ = 10

4. Localice el punto medio correspondiente a los puntos de

equivalencia y determine las constantes de disociación del ácido
fosfórico.
Obtenemos los puntos de equivalencia anteriores y calculamos su punto medio

y las constantes de disociación mediante interpolación:
Prueba 1:
Punto1: 5,5ml
Punto medio: 2,75ml
pKa: 2,53
Punto2: 11,8ml
Punto medio: 5,9ml
pKa: 5,31
Prueba 2:
Punto1: 5,6ml
Punto medio: 2,8ml
pKa: 2,62
Punto2: 12ml
Punto medio: 6ml
pKa: 5,40
Prueba 3:
Punto1: 5,4ml
Punto medio: 2,7ml
pKa: 2,83
Punto2: 12,4ml
Punto medio: 6,2ml
pKa: 5,67
PRIMERA CONSTANTE DE DISOCIACION

x = 2,66
σ = 0,154
SEGUNDA CONSTANTE DE DISOCIACION

x = 5,64
σ = 0,489
1. Compare las constantes de disociación experimentales con las

teóricas.
Las constantes teóricas indicadas en el guión de prácticas son:

pKa = 2,2
pKa = 7,2
Experimentalmente, obtenemos las siguientes constantes de disociación:

pKa = 2,66
pKa = 5,64
Observamos que la primera constante está ligeramente por encima de la

teórica. Sin embargo, la segunda constante de disociación se encuentra más
notablemente por debajo de la esperada.
Esta no coincidencia de valore teóricos y experimentales puede deberse a una

falta de precisión del método empleado cerca del punto de equivalencia.
Esto puede ser perfectamente razonable ya que la variación en pH es muy

grande a poca variación de volumen de NaOH, y esto, lógicamente aumenta las
posibilidades de errores a la hora de medir.
2. Si hubiera errores sistemáticos, indique algún procedimiento para

eliminarlos.

La principal causa de errores sistemáticos en la práctica son los

provenientes del aparto de medida, el pH-metro.
Anteriomente a su uso, éste debería ser calibrado, y además, el proceso de

calibración está sujeto a errores por suciedad de electrodos, errores en pH de los
patrones...
3. Indique los errores que se derivarían en los siguientes casos:
a) Las curvas se realizan sin calibrar el pH-metro.

La referencia sobre la cual se estamos midiendo una muestra puede no ser
precisa, y por tanto, todas las medidas derivadas de ella carecerían de certeza.
Como consecuencia, se producirían errores sistemáticos.
b) La desgasificación de CO2 fue incompleta.

Se produciría una interacción entre el CO 2 no eliminado y el NaOH, ya que
el CO2 es de carácter ácido. Por tanto, habría una neutralización extra, que haría
que midiésemos un volumen de base mayor del que correspondería en realidad
al ácido fosfórico.
c) Se pierde disolución durante la desgasificación.

El error que se produciría sería el siguiente: al haber menos disolución, se
neutralizaría con menos NaOH del que en realidad le correspondería, dando pie a
un error por defecto en la medida del volumen de NaOH siempre.
2.8. CONCLUSIONES
Hemos aprendido un nuevo método para llegar a determinar concentraciones
mediante el proceso de neutralización. Al ser el color de la cola oscuro, utilizar
métodos de adición de indicadores sería poco efectivo en este caso, y hace muy
interesante el método aprendido. Nos ha resultado muy interesante conocer la
forma en que es posible medir lo que deseábamos mediante el pH, debido al
fenómeno por el cual las bases neutralizan los ácidos.

3. COMPARACIÓN DE LAS PRESTACIONES DE

ESPECTROFOTÓMETROS DE ABSORCIÓN
3.1. INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS
Los espectrofotómetros son una herramienta muy empleada en los

laboratorios ya que permiten de una manera rápida, sencilla, limpia y bastante
precisa obtener las concentraciones de distintas muestras. Basta con añadir una
sustancia indicadora a cada una de las muestras y seleccionar la longitud de
onda apropiada a dicho indicador. Mediante unas concentraciones conocidas se
establece una curva de calibración, a partir de la cual podemos determinar las
concentraciones de otras muestras.
Dicha curva de calibración requiere una calibración precisa y las probetas

empleadas deben estar perfectamente cuidadas para evitar rayaduras que
puedan distorsionar el haz de luz del equipo y obtener mediciones erróneas.
Dada la sencillez de la práctica y el interés por conocer el equipo en sí, a
continuación vamos a describir un poco el equipo y su funcionamiento.
La radiación electromagnética es una forma de energía que se transmite por el

espacio, cuya magnitud se determina por la ecuación que se expresa más
adelante. Los términos de la misma son los siguientes: h es la constante de
Planck, μ es la frecuencia de la radiación, c la velocidad de la luz y λ la longitud
de onda.
h ⋅c
E = h⋅µ =
λ
Cuanto mayor es la frecuencia, menor la longitud de onda y mayor la energía.

El espectro electromagnético se clasifica en diferentes zonas según su longitud
de onda (energía o frecuencia): zona de ondas de radio, microondas, infrarrojo,
visible, ultravioleta, y rayos X. Esta radiación electromagnética puede ser
absorbida por una substancia (el analito en nuestro caso) y utilizada de diferente
forma según la energía que ello le aporte. Si la radiación es poco energética
como la radiación de microondas le permitirá variar los niveles de rotación
molecular; si es radiación infrarroja podrá variar los niveles de los estados de
vibración de los enlaces; y si es radiación visible o ultravioleta le permitirá
producir transiciones electrónicas de los electrones de valencia.
La ley de Beer:

Cuando un haz de luz de intensidad I0, atraviesa una disolución de espesor b

que contiene especies capaces de absorber luz, la intensidad transmitida, I, será
inferior a la incidente. Se define transmitancia como el cociente entre la
intensidad incidente y la transmitida:
I
T=
I0
La transmitancia de una disolución varía entre 0 cuando la intensidad

transmitida es cero, y 1 que cuando se transmite toda la luz incidente. La
transmitancia se expresa generalmente en porcentaje y se define como:
I0
A = log 10 = −log 10 T
I
La absorbancia es cero cuando I=I0, la muestra no absorbe luz. Si la muestra

absorbe parte de la radiación incidente, I<I0. Los valores de absorbancia pueden
emplearse para la determinación cuantitativa de iones y moléculas, ya que según
la ley de Beer la absorbancia es directamente proporcional a la concentración de
las especies absorbentes.
A =b
C ε
Donde ε es la absortividad molar, b es el camino óptico expresado en cm, y C

es la concentración molar. La absortividad molar es una constante característica
de cada especie química y de la longitud de onda empleada. Normalmente no es
necesario determinar el valor de la constante. Basta con medir la absorbancia de
disoluciones de referencia que contienen concentraciones conocidas de analito.
Luego se comparan estos resultados con la absorbancia obtenida bajo las
mismas condiciones instrumentales para la muestra desconocida.
La ley de Beer describe de forma correcta el comportamiento de absorción de

un medio que contiene concentraciones de analito bajas. A concentraciones
superiores a 0,01 M, aunque el valor depende de cada sustancia, la distancia
media entre las moléculas responsables de la absorción disminuye hasta tal
punto que cada molécula altera la distribución de carga de las moléculas vecinas.
Esta interacción altera la capacidad de las moléculas para absorber radiación de
una determinada longitud de onda. Como la magnitud de la interacción depende
de la concentración, la aparición de este fenómeno da lugar a desviaciones de la
linealidad entre la absorbancia y la concentración.
La espectroscopia de absorción en regiones visible y ultravioleta tiene grandes

aplicaciones debido a su elevada sensibilidad, alta selectividad, gran exactitud, y
facilidad y comodidad de uso. Para analizar una sustancia cuantitativamente

debemos determinar la longitud de onda (λ) de máxima absorbancia del analito

que nos interese. Si representamos en una gráfica la absorción, por un analito,
frente a longitud de onda (o frecuencia) de la radiación empleada, obtendremos
el espectro de absorción de dicho analito. La representación de la absorbancia a
una longitud de onda determinada, frente a la concentración de una serie de
disoluciones de concentración conocida, o patrones, debería dar una línea recta
que pase por el origen de coordenadas. Las rectas de calibrado se utilizan
ampliamente para conocer la respuesta de un equipo y determinar la
concentración de una muestra desconocida. Los espectrofotómetros constan en
general de los siguientes elementos (Fig. 2):
Fuente de radiación: debe generar un haz de radiación continua, estable

y de suficiente potencia. Debe contener todas las frecuencias de la zona que
queremos estudiar. Para la zona visible se usan lámparas de filamento de
wolframio y para la zona de ultravioleta lámparas de hidrógeno y deuterio.
Obturador: cierra o no el paso de la luz.
Monocromador: dispositivo que dispersa el haz de radiación

policromática para obtener bandas espectrales estrechas. Permite elegir una
longitud de onda para un analito concreto; una a la cual el analito absorba
radiación, pero no absorban otras substancias que puedan interferir. La calidad
de un monocromador está definida por la pureza de la radiación de salida, la
capacidad para resolver longitudes de onda adyacentes, el poder de captación de
luz y la anchura espectral. Los componentes de un monocromador son:
i) rendija de entrada que reduce la luz difusa y evita que la luz dispersa
entre la red de difracción;
ii) lente colimadora para producir un haz paralelo de radiación
electromagnética;
iii) red de difracción o prisma, que dispersan la radiación electromagnética;
iv) lente de enfoque;
v) rendija de salida que impide que la luz difusa atraviese la cubeta.
Recipientes, celdas o cubetas: contienen la muestra problema y el

blanco de referencia. Deben ser idénticos y transparentes a la radiación de la
zona de trabajo. En la región visible se emplean cubetas de vidrio y plástico,
mientras que en la región ultravioleta las cubetas son de cuarzo.
Atenuador o filtro: mecanismo móvil que ajusta la potencia de la luz que

pasa por la muestra problema con la que pasa por el blanco, comenzando el
registro en ese momento.

Detector o transductor: convierte la energía electromagnética en señal

eléctrica. Suelen usarse fotocélulas (región visible), fototubos y tubos
fotomultiplicadores (ultravioleta hasta infrarrojo próximo).
Medida de la transmitancia y de la absorbancia
La radiación procedente de una lámpara de wolframio incide sobre una red de

difracción que con la ayuda de un diafragma permite seleccionar la longitud de
onda de la radiación. Posteriormente el haz atraviesa otro diafragma variable,
que permite ajustar la potencia de la radiación que alcanza la cubeta
transparente que contiene la muestra. Se puede colocar un obturador enfrente
del diafragma para bloquear completamente la radiación. Con el obturador
abierto, la radiación incide sobre un dispositivo fotoeléctrico que convierte la
energía radiante del haz en una corriente continua que se detecta y se mide con
un microamperímetro. El medidor tiene una escala lineal que va de 0 a 100%.
Para realizar medidas directas en tanto por ciento de transmitancia y de

absorbancia con este tipo de instrumento, se realizan dos ajustes preliminares,

denominados ajuste de la corriente oscura o del 0% de transmitancia y ajuste del

100% de transmitancia. El ajuste del 0% se realiza con el detector apantallado
respecto de la fuente, para ello se cierra el obturador mecánico. Cualquier
pequeña corriente oscura en el detector se anula eléctricamente hasta que la
aguja del detector lea cero.
El ajuste del l00% de transmitancia se realiza con el obturador abierto y con la

cubeta llena del disolvente en el camino óptico. El disolvente debe estar
contenido en una cubeta similar a la cubeta que contiene la muestra. El ajuste
del 100% supone variar la potencia del haz por medio del diafragma variable. En
algunos instrumentos, este mismo efecto se realiza variando la señal eléctrica de
salida. La potencia radiante que llega al detector varía hasta que la escala
marque l00%. Tras ajustar el 0% y el l00% puede leerse directamente la
absorbancia de los patrones y muestras.
Materiales
• 2 espectrofotómetros de diferentes modelos.
• Cubetas.
• Pipetas de precisión.
• Matraces aforados de 50 ó 100 mL
Reactivos
• Azul de metileno 1,0 x 10-3 M

• Disolución de concentración desconocida de azul de metileno
•
• 3.4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. En matraces aforados de 100 mL, preparamos disoluciones de azul de

metileno de las siguientes concentraciones: 0 M; 5·10-6 M; 10-5 M; 2·10-5 M;
3·10-5 M; 4·10-5 M y 5·10-5 M, por dilución de la concentración de azul de
metileno 1,0 x 10-3 M.
2. Añadimos unos mililitros de cada disolución patrón y de la disolución de

concentración desconocida a las cubetas para el espectrofotómetro. Las
cubetas elegidas estaban perfectamente limpias y nos fijamos que no
tuvieran rayas que pudieran distorsionar los resultados.
3. Seleccionamos la longitud de onda a la que deseamos realizar la

medida, colocamos la cubeta con el blanco en el portamuestras del
aparato y ajustamos el 0 y el 100% de transmitancia.

4. Medimos la absorbancia de la cubeta a diferentes longitudes de

onda, en el rango 400 - 800nm.
5. Repetimos las mediciones con las demás cubetas que poseen

concentraciones diferentes.
6. Repetimos el procedimiento con otro espectrofotómetro (Perkin-

Elmer, modelo Lambda 3).
3.5. RESULTADOS
1. Completamos la tabla siguiente para cada espectrofotómetro; para

ello utilizamos una hoja de cálculo.
Espectrofotómetro 1:
Concentración
400
Espectrofotómetro Perkin-Elmer:
500
550
575
600
400 0,0
410 0,0
420 0,0
430 0,0
440 0,0
450 0,0
460 0,0
470 0,0
2. Representamos la variación de la absorbancia frente a la longitud
de onda, para las distintas concentraciones. Deducimos la longitud de
onda de máxima absorbancia.

480 Página 34 de 77
0,0
2 ,5 0 0
Para el Espectrofotómetro 1, observamos que la longitud de onda para la

cual se obtiene una absorbancia mayor se corresponde en la tabla con una
longitud de onda de 650 nm. Observamos que en el gráfico este dato pudiera

ser ligeramente superior, pero ya que no existen datos exactos nos

quedamos con el anterior.
3 ,5 0 0 0
3 ,0 0 0 0
En cuanto al Perkin-Elmer, la tabla nos indica que la mayor absorbancia se
obtiene para 660 nm para todas y cada una de las concentraciones.

3. Representamos la absorbancia frente a la concentración de los

patrones, para la longitud de onda de máxima absorbancia.
Para el Espectofotómetro 1 elegimos por tanto 650 nm como longitud de onda

de máxima absorbancia ya que no disponemos de información más precisa.

2 ,5 0 0

Ahora, a partir de la recta ajustada, y basándonos en la ley de Beer, podemos

deducir la absortividad molar del azul de metileno. La ley de Beer dice:
A=b·ε ·C
donde A es la absorbancia, b es el camino óptico en cm, ε es la

absortividad molar y C es la concentración molar.
Como hemos representado Absorbancia (A) frente a Concentración (C), la

pendiente de la recta es b·ε :
0,0509 · 106 = b · ε = 50,9 · 103

Como el camino óptico es 1 cm, tenemos que la absortividad molar es:
ε = 50,9 · 103 M-1cm-1
Para el Espectrofotómetro Perkin-Elmer elegimos 660 nm como longitud de

onda de máxima absorbancia al disponer de información más precisa.

3 ,5 0 0 0
3 ,0 0 0 0
Repetimos para este espectrofotómetro, a partir de la recta ajustada, y

deducimos la absortividad molar del azul de metileno. La ley de Beer dice:
A=b·ε ·C
donde A es la absorbancia, b es el camino óptico en cm, ε es la

absortividad molar y C es la concentración molar.
Como hemos representado Absorbancia (A) frente a Concentración (C), la

pendiente de la recta es b·ε :
0,0683 · 106 = b · ε = 68,3 · 103

Como el camino óptico es 1 cm, tenemos que la absortividad molar es:
ε = 68,3 · 103 M-1cm-1
4. Calculamos la desviación típica o estándar de la recta de calibrado.
Espectrofotómetro 1:
Datos obtenidos a través del análisis de datos de regresión de la herramienta

Excel:
Estadísticas de la regresión
Coeficiente de correlación múltiple 0,996773
Coeficiente de determinación R2 0,993557
2
R ajustado 0,992268
Error típico 0,082975
Observaciones 7

VARIANZA
Grado Suma Promedio

s de de los Valor
cuadrados F
de cuadra crítico
libertad dos de F
Regres 771,058 0,00000113
ión 1 5,308706 5,308706 641 4
Residu
os 5 0,034424 0,006884
Total 6 5,343131
Err
Coefic or Probabi
Infe Sup
ient lidad
típ Estadí rior erior
ico stico t 95% 95%
Interce 0,0900 0,0 1,7676 0,04 0,22
pción 71 5095 2 0,13736 0915 105
Variabl 0,0503 0,0 27,767 0,000001 0,04 0,05
eX1 64 0181 94 134 5702 502
RESIDUALES
Observaci Pronóstico Residuos

ón para Y Residuos estándares
1 0,090071 -0,090071 -1,189126
2 0,341894 -0,026894 -0,355057
3 0,593716 0,042283 0,558224
4 1,097361 0,085638 1,130596
5 1,601006 0,047993 0,633606
6 2,104651 0,049348 0,651494
7 2,608296 -0,108296 -1,429736

Como podemos observar la desviación típica para la variable x1 es 0,001813 y

para la intercepción es de 0,05095.
X1 Residuales
0,1
0,05
Residuos
0
0 10 20 30 40 50 60
-0,05
-0,1
-0,15
X1
X1 Curva regresión ajustada
3
2,5
2
1,5
Y
1
0,5
0
0 10 20 30 40 50 60
X1
Espectrofotómetro Perkin-Elmer:
Datos obtenidos a través del análisis de datos de regresión de la

herramienta Excel:
Estadísticas de la regresión
Coeficiente de correlación múltiple 0,99143
Coeficiente de determinación R2 0,98293

R 2
ajustado 0,97952

Error típico 0,14932

Observaciones 7
VARIANZA
Suma
Grados de Valor
de cuadra Promedio de crítico
libertad dos los cuadrados F de F
Regresi 0,00001
ón 1 6,42161 6,42161 287,975 2998
Residuo
s 5 0,1114 0,02229
Total 6 6,53310
Err
or
Coefici típ Estadís Probabil Inferio Superi
ent. ico tico t idad r 95% or 95%
Intercep 0,09 -
ción 0,06621 170 0,72209 0,50258 0,16951 0,30195
Variable 0,00 0,0000129
X1 0,05539 326 16,9698 9 0,04700 0,06378
RESIDUALES
Observaci Pronóstico Residuos

ón para Y Residuos estándares
1 0,06621 -0,06621 -0,48577
2 0,34318 0,12111 0,88848
3 0,62014 -0,21344 -1,56579
4 1,17407 0,11242 0,82474
5 1,72799 0,13320 0,97713
6 2,28192 0,03617 0,26536
7 2,83585 -0,12325 -0,904155

Como podemos observar la desviación típica para la variable x1 es

0,003264 y para la intercepción es de 0,091704.
X1 residuales
0,2
0,1
Residuos
0
0 10 20 30 40 50 60
-0,1
-0,2
-0,3
X1
X1 Curva regresión ajustada
2
Y
0
0 10 20 30 40 50 60
X1
5. Determinamos la concentración de la muestra problema.
Para el Espectrofotómetro 1:
Ecuación de la recta: y = 0,0509x + 0,0075

La absorbancia medida para la muestra de concentración desconocida es

1,603. Entrando en la ecuación, obtenemos la concentración de la muestra
multiplicada por 106:
1,603 = 0,0509x + 0.0075 x = 31,346
La concentración es: Cdesconocida = 31,346·10-6 M

Para el Espectrofotómetro Perkin-Elmer:
Ecuación de la recta: y = 0,0683x – 0,0988
La absorbancia medida para la muestra de concentración desconocida es

2,354. Entrando en la ecuación, obtenemos la concentración de la muestra
multiplicada por 106:
2,354 = 0,0683x – 0,0988 x = 35,912
La concentración es: Cdesconocida = 35,912·10-6 M
Los factores instrumentales que pueden originar las desviaciones de

la ley de Lambert-Beer son:
Si trabajamos con altas concentraciones, no se garantiza que los resultados

sean los correctos ya que la Ley de Labert-Beer funciona bien para
concentraciones bajas.
A menudo, las rectas de calibrado no pasan por el origen de modo

que la ordenada en el origen tiene un valor alto, ¿cuáles pueden ser las
causas de que las rectas no pasen por el origen?
Una causa muy común y la vez muy fácil de entender y de solucionar es que
se haya hecho una mala calibración del espectrofotómetro. Por ejemplo, que el
blanco lo volvamos a meter en el espectrofotómetro y obtenemos un valor
positivo. Habrá que asegurarse que todas las cubetas están perfectamente

limpias y sin ningún tipo de ralladura. También será importante limpiarlas al final
de la sesión para que los compañeros no tengan este problema al día siguiente.
Explicamos como varía la precisión de las medidas en función de la

magnitud experimental de la absorbancia.
Las medidas son mejores en las longitudes de onda cercanas a la de máxima

absorbancia del azul de metileno, ya que estos valores se ven menos afectados
por otros factores que pueden inducir a error.
Comentamos el rendimiento de los dos espectrofotómetros, teniendo

en cuenta la sensibilidad, precisión, exactitud…
En función de la longitud de onda obtenemos un comportamiento diferente,

obtenemos una mayor o menor linealidad. En principio, trabajar en la zona lineal
sería más apropiado.
El espectrofotómetro Perkin-Elmer tiene dos claras y grandes ventajas con

respecto al otro espectrofotómetro, ya que es capaz de realizar un barrido de
longitudes de onda, por lo que localiza la longitud de onda que nos proporciona la
máxima absorbancia para la sustancia a estudiar, y también, este aparato nos
permite recoger los datos en un diskette y trasladarlos a una hoja de Excel, por
tanto, se está inmediatamente en disposición de toda la información para realizar
un exhaustivo análisis.
La mayor sensibilidad (en los dos aparatos) la obtenemos para las mayores
longitudes de onda y pequeñas concentraciones.

4. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN
DE MANGANESO EN UN ACERO POR
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA
4.1. OBJETIVO
Determinar la concentración de Mn en aceros por Espectroscopia de Absorción

Atómica (EAA).
Comparar las técnicas de cuantificación de la recta de calibrado con las
adiciones patrón.
La espectroscopia de absorción atómica es uno de los métodos dentro de la

espectroscopía atómica general. Se basa en la medida de la absorción de
radiación electromagnética por parte de átomos en medio gaseoso. Los
diferentes métodos se clasifican según el método de atomización que emplean
para que la solución problema se convierta en átomos o iones elementales
gaseosos. Nosotros utilizaremos técnicas basadas en atomización “en llama”. En
esta técnica se pulveriza la disolución acuosa que se desea y se mezcla con aire
y acetileno en un mechero de flujo laminar. En la base de la llama se evapora el
disolvente y las partículas sólidas son arrastradas al centro de la llama (cono
interior) donde se disocian en átomos o iones elementales (Figura 1). La
temperatura de esta llama varía de 1700 a 3000 ºC. Una vez que el analito está
en forma de átomos vaporizados, puede sufrir procesos de absorción o emisión
de radiación electromagnética, que permite identificarlos y cuantificarlos.

Los átomos absorben la radiación y la utilizan para excitar los electrones

desde su estado fundamental hasta un nivel energético superior. Como resultado
se obtienen espectros sencillos con pocas líneas de absorción a unas longitudes
de onda λ características y únicas para cada elemento, por lo que su utilización
analítica es muy específica. Como fuentes de radiación se usan lámparas de
cátodo hueco que emiten la radiación específica. Aunque existen numerosos
modelos, la construcción básica de la lámpara se muestra en la Figura 2. Dos
electrodos de trabajo, el ánodo y el cátodo están en el interior de un envoltorio
de vidrio sellado que contiene una ventana transparente a la radiación visible-
ultravioleta. El cátodo contiene el elemento analito. La lámpara contiene también
un gas inerte como neón o argón. La presión del gas se mantiene baja, alrededor
de 5 mm de Hg, para minimizar el ensanchamiento de líneas. La lámpara de
cátodo hueco trabaja típicamente con voltajes de 200 voltios, y con corrientes
dentro del intervalo de 2 a 35 mA. Cuando se aplica potencia eléctrica a la
lámpara de cátodo hueco, la descarga produce una corriente de electrones que
ionizan los átomos del gas noble. Los cationes del gas golpean al cátodo
excitando los átomos que lo componen. Los átomos excitados emiten fotones de
energía al volver a su estado fundamental.

Un instrumento de absorción atómica contiene los mismos componentes

básicos que un instrumento diseñado para medidas de absorción molecular: una
fuente de radiación, un recipiente de muestra, que en este caso es la llama, un
selector de longitud de onda y un sistema de detección/lectura. Existe en el
mercado una gran variedad de equipos por su sofisticación y precio. La radiación
procedente de la lámpara de cátodo hueco se corta y se divide mecánicamente
en dos haces, de los cuales uno pasa a través de la llama y el otro no. Un espejo
semiplateado reconduce de nuevo los haces a un nuevo camino, que recorren
ambos de forma alternada, y que pasando por el monocromador lleva al
detector. El procesador separa la señal procedente de la fuente, convertida en
alterna por el cortador, y la señal de corriente continua producida por la llama.
Se calcula entonces el logaritmo de la relación de las señales alternas de la
referencia y de la muestra, y se envía a un dispositivo de lectura para mostrarla
como absorbancia.

Material
• 1 placa calefactora
• 2 vasos de precipitados de 100mL
• 2 vidrios de reloj
• 13 matraces aforados de 100mL
• 1 micropipeta 100 microlitros
• 1 embudo para los matraces de 100mL
• papel de filtro
Reactivos
• Acero comercial que contenga Mn
• Disolucion patrón de Mn 1000mgL-1
• HNO3 concentrado (60-70%) o acido nítrico 1:1 (volumen)
• Lampara de catodo hueco de Mn
A) Disolución y preparación de las muestras para el análisis.
1.- En vasos de precipitados, pesamos con precisión de mg, aproximadamente,

0,500 g de una muestra de acero que contiene manganeso.
2.- En la campana extractora añadimos a cada vaso de precipitados 5 ml de

agua desionizada y 5 ml de ácido nítrico concentrado. Colocamos los vasos de
precipitados en una placa calefactora, los cubrimos con un vidrio de reloj y
calentamos las muestras lentamente hasta que se disuelve el acero. Algunos
aceros dejan un residuo de sílice y carbono tras la disolución de los metales con
ácido nítrico.
3.- Dejamos enfriar las disoluciones y las filtramos sobre un matraz aforado de
100 ml, para posteriormente lavar el papel del filtro y enrasar el matraz hasta el
aforo con agua destilada.
4.- En matraces aforados de 100 ml, diluimos 5 ml de cada disolución de los

aceros hasta el enrase etiquetando los matraces como M1 y M2.

5.- Para cada muestra pipeteamos dos alícuotas de 5 ml en dos matraces

aforados de 100 ml y añadimos respectivamente 0,100 y 0,200 ml de la
disolución patrón de Mn de concentración 1000 mg/l. Etiquetamos estas
disoluciones como ApM1-1, ApM1-2, ApM2-1 y ApM2-2.
B) Preparación de las disoluciones patrón.
6.- Preparamos disoluciones patrón de Mn que contienen 1,00; 2,00; 3,00; 4,00
y 5,00 mg l-1 por dilución de la disolución estándar de Mn (1000 mg l-1).
C) Análisis de las muestras
7.- Bajo la supervisión del profesor ajustamos el espectrofotómetro de

absorción atómica según las instrucciones recomendadas por el fabricante para
la determinación de Mn. La longitud de onda debe ser de 279,5 nm y la rendija
0,2 nm.
8.- Realizamos el ajuste a cero de la absorbancia para lo cual aspiramos agua

desionizada para a continuación determinar la absorbancia de las disoluciones
patrón. Entre cada lectura aspiramos agua desionizada en el mechero.
9.- Comprobamos que el agua desionizada da una absorbancia cero e

introducimos el capilar para que aspire disolución de las muestras M 1, M2 así
como de las adiciones patrón ApM1-1, ApM1-2, ApM2-1 y ApM2-2.

4.5. RESULTADOS
1. Construimos una tabla que incluya la absorbancia de cada uno de

los patrones y las disoluciones.
Disolución
Patr
2. Dibujamos una gráfica de la variación de la absorbancia en función
de la concentración de Mn en los patrones. Utilizamos la gráfica para
obtener la ecuación de regresión, y la concentración de Mn en las
disoluciones M1 y M2.
Patr
Patr
Patr
Patr
0 ,3 0 0
Ecuación de regresión: y = 0,0506x + 0,0078

R2: 0,9997
Cálculo: sustituimos en la ecuación
y = 0,035 y obtenemos M1 = 0,537mg/l
y = 0,038 y obtenemos M2 = 0,597mg/l

3. Calculamos la concentración de Mn en el acero, expresada en

porcentaje.
Ahora calculamos el porcentaje en masa de Mn en el acero de la siguiente
manera:
M1:
1l 0,537 mgMn 0,0537 mgMn

100 ml • • = 0,0537 mgMn % Mn = • 100 = 0,01074 %
1000 ml 1l 500 mgAcero
M2:
1l 0,597 mgMn 0,0597 mgMn

100 ml • • = 0,0597 mgMn % Mn = • 100 = 0,01194 %
1000 ml 1l 500 mgAcero
4. Anotamos las absorbancias de las muestras y adiciones patrón.
Disolución
5. Representamos el gráfico correspondiente a las adiciones patrón,
debe incluir los valores de absorbancia de las disoluciones M1, M2, ApM1-
1, ApM1-2, ApM2-1, ApM2-2, en función de la masa de Mn añadida (o de la
concentración de Mn añadida en el matraz).
M
M
Disolució
0 ,1 6 0

M1:
2
R: 0,9643
M2:
R2: 0,9537
6. Trazamos una recta para cada adición estándar. Extrapolamos la

recta hasta que corte con el eje de abscisas, el punto de corte
corresponde a la concentración de Mn en la muestra problema.
Calculamos el porcentaje de Mn en la muestra, expresado en porcentaje.
1.- Comparamos los resultados obtenidos con la recta de calibrado y las

adiciones patrón. Teniendo en cuenta la precisión, sensibilidad, errores
sistemáticos y tiempo de análisis. ¿Qué ventajas e inconvenientes posee
cada técnica?
En las pruebas realizadas con adiciones de patrón, los porcentajes de Mn son

menores. Esto puede ser debido a algún error operativo al pesar. Además, este
Mn tiene que disolverse, con lo que sumamos otra operación más en la que
podemos realizar errores.
De todas formas, la técnica de la adición tiene una gran ventaja, ya que podemos
trabajar con disoluciones que nosotros queramos, desde una muy concentrada
hasta una muy diluida, ya que somos nosotros quienes decidimos cuanto acero
diluir. Con la recta de calibrado, trabajamos con disoluciones estándar y luego
aproximamos los valores que nos interesan, por tanto, aquí estaremos

cometiendo un error sistemático cada vez. Nos ha parecido más precisa y

entretenida la forma de operar mediante adición de patrón.
3. Según los resultados obtenidos, ¿puede haber alguna interferencia

en el análisis por absorción atómica?
Los resultados de ambas muestras son casi idénticos, por lo que no creemos
que haya habido ningún tipo de interferencia. De hecho, en el método por adición
de patrón, los porcentajes son prácticamente iguales.
4. Suponiendo que debemos analizar la concentración de dos aceros,

uno que contiene el 25% de Mn y el otro 0.005%. ¿Qué cambios
debemos introducir en el procedimiento experimental?
Con esas concentraciones no podríamos utilizar la recta de calibrado, ya que la

recta no es precisa en esas concentraciones. Tendríamos que extrapolar para
conseguir un valor fiable.
Lo mejor sería utilizar la adición de patrón. Habría que diluir más en el caso de
0,005% y concentrar más en el caso de 25%. Análogamente a esta solución,
podríamos variar la concentración de la muestra.
5. ¿Qué parámetros instrumentales se deben optimizar para

conseguir la máxima sensibilidad del equipo?
• Longitud de onda: para lograr que sea de máxima absorción.

• Lámpara: provoca radiación para mediciones.
4.7. CONCLUSIONES
Los datos obtenidos mediante los dos métodos difieren bastante. Esto nos
indica que hemos realizado algún error durante las prácticas. Uno de los errores
ha podido ser al pesar el acero, ya que recordamos que la báscula oscilaba al
realizar la medición. De todas formas, nos ha servido para conocer más métodos
para medir la absorbancia, ya que solamente conocíamos el espectrofotómetro.

5. SEPARACIÓN DE COLORANTES EN
ALIMENTOS POR CROMATOGRAFÍA DE CAPA
FINA
5.1. OBJETIVOS
• Aplicar la técnica de separación “Cromatografía de Capa Fina” para

la separación de mezclas de colorantes.
• Optimizar la separación cromatográfica de una mezcla de colorantes
de alimentos.
• Entender los fundamentos teóricos de esta técnica.
La técnica de cromatografía es un método de separación para la

caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación, en todas las
ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de
retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una
mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos
componentes.
Las técnicas cromatográficas son muy variadas, pero en todas ellas hay una
fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico) que
arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido
o un líquido fijado en un sólido. Anteriormente se utilizaban los métodos clásicos
como lo son: la precipitación, extracción, decantación entre otros. Aunque ahora
en la actualidad se utiliza la cromatografía electroforesis.
Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase

estacionaria y con la fase móvil. De este modo, los componentes atraviesan la
fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Después de que los
componentes hayan pasado por la fase estacionaria, separándose, pasan por un
detector (en nuestro caso es un papel de celulosa en el cual determinamos la
concentración por medición de las alturas con respecto a un punto de
referencia).
En nuestro caso utilizaremos cromatografía de capa fina más comúnmente TLC

(thin-layer chromatography, en inglés), que es una técnica cromatográfica
utilizada, entre otros posibles usos, para separar los componentes puros que
forman parte de una mezcla.
Existen una gran variedad de micropipetas y microjeringuillas para realizar el

proceso de siembra de la muestra a analizar. También pueden usarse tubos
capilares. El proceso de siembra se realiza tocando con la punta del capilar
(micropipeta, jeringuilla, etc.) sobre la placa preparada. Dejando una distancia al
borde inferior de un centímetro aproximadamente. El punto de aplicación de la
muestra se denomina toque.

La elección del eluyente dependerá lógicamente del componente que se va a

separar y del material en que la separación se lleva a cabo.
Material
• Placas de cromatografía TLC de celulosa

• Papel para cromatografía
• 3 Cubetas de vidrio con tapa
• 1 Secador de pelo
• 8 Capilares de vidrio
• 1 Tubo de ensayo
• 1 Frasco 2-5 mL
Reactivos
• Refrescos coloreados
• Mermeladas
• Riboflavina, E101
• Tartrazina, E102
• Amarillo ocaso FCF, E110
• Rojo Allura AC
• Indigotina, carmín de índigo E132
• Carmín
• Citrato sódico, 2,5% disolución acuosa
• NH3(ac) 25%
• acetona
• 2-Propanol (isopropanol)
• Etanol

A) Extracción de los colorantes (de los lacasitos)
1. Pusimos en un tubo de ensayo 10 lacasitos de color marrón.
2. Añadimos 10ml de agua desionizada y agitamos el tubo de ensayo hasta

que se decoloraran los lacasitos. Cuenta que cuanto menos tiempo utilicemos
esta operación mejor, así reduciremos la disolución de azúcares que pueden
interferir en el desarrollo de la práctica.
3. Transferimos la disolución a un tubo de centrífuga y lo centrifugamos a

4000 revoluciones por minuto, durante 5 minutos. Transferimos la disolución
centrifugada a un vaso de precipitados de 100ml.
4. Añadimos 1ml de ácido acético 5M al vaso de precipitados e introdujimos

una tira de lana blanca de unos 20cm de longitud.
5. Colocamos el vaso de precipitados encima de una placa con agitación,

pusimos un imán y calentamos la disolución para que la lana absorbiese los
colorantes.
6. Sacamos la tira de lana, dejamos enfriar en un vidrio de reloj y transferimos

la tira a un vaso de precipitados de 50ml. Añadimos el imán y 5ml de
amoniaco 0,5M. Colocamos el vaso de precipitados en una placa calefactora y
calentamos hasta que la lana liberase los colorantes.
7. Una vez absorbidos los colorantes, retiramos la lana y calentamos la

disolución hasta que se evaporase la disolución casi hasta sequedad.
8. Retiramos los vasos de la placa calefactora, dejamos enfriar y añadimos

1ml de isopropanol a cada uno. Transferimos el extracto de colorante a un
frasco de 1ml y lo cerramos para que no se evaporase el disolvente.
B) Separación cromatográfica.
9. Añadimos a la cubeta cromatográfica 10mL de mezcla eluyente formada

por 2mL de NH3 6M, 2mL de H2O desionizada, 2mL de etanol y 3mL de 1-
butanol. Colocamos la tapa y dejamos que el disolvente sature la atmósfera
de la cámara. Mientras tanto, preparamos las placas cromatográficas como se
indica en los apartados siguientes.
10. Con un lápiz, marcamos una línea suave en la placa cromatográfica, a una
altura aproximada de 1 cm por encima del borde inferior.
11. Introducimos un capilar en la disolución acuosa de los colorantes y

aplicamos la muestra sobre la línea base de la placa de sílica gel, evaporando

el disolvente con un secador de pelo. ¡Cuánto menor sea el diámetro de la

mancha, mayores son las probabilidades de éxito! Si la intensidad de color es
baja, puede repetir la aplicación de la muestra.
12. En ningún caso el eluyente debe sobrepasar la línea de aplicación de las

muestras.
13. Introducimos en la cubeta la placa cromatográfica con la muestra y

dejamos que el eluyente ascienda por la placa, hasta que el frente haya
alcanzado una posición aproximada a 1 cm del borde superior de la placa.
14. Sacamos la placa cromatográfica de la cámara de desarrollo y marcamos

con un lápiz la altura que ha alcanzado el disolvente.
15. Secamos la capa fina con un secador de pelo.
16. Marcamos las manchas que aparezcan con un lápiz y dibujamos un

esquema del cromatograma en el cuaderno del laboratorio.
17. Calculamos los Rf de cada sustancia.
18. Si los distintos componentes de la muestra se han separado, podemos

intentar la identificación de estas sustancias. En caso contrario, a la vista de
los cromatogramas, cambiamos la composición de la fase móvil y repetimos
el desarrollo anterior hasta que los componentes de la mezcla se hayan
separados completamente.
19. Para identificar los colorantes que componen el color marrón, colocamos
en una misma placa una mancha de color marrón y otras de distintos
colorantes primarios.
5.5. RESULTADOS

1. Preparar una tabla con los Rf obtenidos con las fases móviles
empleadas.
Observando las distancias medidas en el papel, obtenemos:
1,5
AZUL: Indigotina → Rf = • 100 = 24%
6,25
5
AMARILLO: Rivoflavina → Rf = • 100 = 80%
6,25
3,75
ROJA: Amaranto → Rf = • 100 = 60 %
6,25
2. Indicar la composición de la fase móvil optimizada.
De 10 ml de fase móvil:
• Citrato sódico (2,5%): 7,1ml
• Amoniaco (al 25%): 1,8 ml
• 2-Propanol: 1,1 ml
3. Identificamos los compuestos de la mezcla.
Los compuestos que hemos obtenido a través del estudio cromatográfico son:
AZUL: Indigotina
AMARILLO: Rivoflavina
ROJA: Amaranto
Los porcentajes y medidas obtenidos en el papel están incluidos en la tabla.

1. justifique la diferente movilidad de las sustancias atendiendo a las

diferentes polaridades de los componentes a separar y los eluyentes
empleados.
Justificamos la diferente movilidad de las sustancias atendiendo a las
diferentes polaridades de los componentes a separar y los eluyentes empleados.
Por causa de la capilaridad las sustancias apolares son arrastradas por el papel
de celulosa o la placa de sílice. Sin embargo, para que podamos separa los
distintos colores las sustancias con carácter más polar quedan retenidas en la
fase estacionaria. Por este motivo unos colores ascienden más rápido que otros.
Las diferentes sustancias que forman el disolvente influyen de manera distinta
sobre el proceso. Los alcoholes ayudan a controlar la polaridad, el amoniaco
aumenta los valores del factor de retraso de los aminoácidos básicos y el agua
aumenta ligeramente el factor Rf.
2. ¿Sería posible cuantificar la concentración de los componentes de la

mezcla por cromatografía de capa fina? Proponemos un posible método.
La altura alcanzada dependerá tanto del color como también de la

concentración. Como viene siendo lógico a mayor concentración se tendrá mayor
dificultad para desplazarlo y por tanto subirá menos. Por esta razón, variando la
concentración se pueden hacer distintos experimentos con el mismo eluyente.
Midiendo las diferentes alturas que se alcanzan se puede deducir al menos qué
muestras están más concentradas y cuáles menos.
5.7 CONCLUSIONES
Una de las conclusiones que hemos obtenido es que la cromatografía es un

método sumamente interesante para conocer la composición de determinados
elementos. En nuestro caso hemos utilizado para determinar los componentes
que conforman el colorante de los lacasitos, pero también se puede utilizar en
diferentes ambitos de la quimica.
En cualquier caso, se trata de adecuar la práctica a cualquier compuesto cuya

composición queramos determinar y así conseguir resultados fiables.

6. DETERMINACIÓN DE LA CANTIDAD DE
FÓSFORO EN HOJAS DE AVELLANO
2.1. INTRODUCCIÓN
El objetivo principal de este trabajo es la determinación de la cantidad de
Fósforo (P) en hojas de avellano.
El fósforo es un elemento esencial para el crecimiento y el desarrollo del
potencial genético de las plantas.
Sin embargo, el fósforo no es abundante en el suelo, además, mucho del
fósforo presente en el suelo no está en formas disponibles para la planta. La
disponibilidad de este elemento depende del tipo de suelo, según este, una
pequeña o gran parte del fósforo total puede estar “fijado” (no disponible) en los
minerales del suelo. Esto significa que la planta no puede absorberlo.
En la naturaleza, el fósforo forma parte de las rocas y los minerales del suelo.
Las fuentes de fósforo como nutriente para las plantas son los fertilizantes
minerales y los fertilizantes orgánicos. Los fertilizantes minerales son
compuestos inorgánicos de fósforo que se extraen de los grandes yacimientos de
“roca fosfórica”. Estos compuestos minerales, son tratados para hacerlos más
solubles para que así, sean disponibles para las plantas y puedan ser utilizados
por estas en la formación de tejidos y órganos vegetales.
La figura inferior muestra el ciclo del fósforo en la naturaleza y la intervención
del hombre en el mismo. Se puede observar que se pierde fósforo por:
escurrimiento, erosión, lavado y extracción en la cosecha.

Por otro lado se regresa fósforo al suelo por medio de adición de fertilizantes
minerales (que es la más importante y significativa), retorno de residuos de
animales y plantas y por deposición atmosférica.
Las plantas absorben únicamente el fósforo que esta en la solución del suelo
en forma de HPO4-2 (ión fosfato monoácido) y H2PO4-1 (ión fosfato diácido).
Por lo explicado anteriormente, es de gran importancia el conocer dicha
cantidad (o concentración,) ya que deficiencias muy marcadas del contenido en
Fósforo, producen una escasa floración y retardan la maduración de los frutos.
Estas deficiencias de nutrientes, pueden ser suplidas en las plantas mediante
la utilización de fertilizantes. Por tanto, es indispensable conocer el contenido de
nutrientes de una planta para suministrarle el fertilizante adecuado en la
cantidad precisa, con el objetivo de obtener una floración óptima.
Además de obtener un rendimiento óptimo de las plantas, la práctica tiene
otro objetivo. Este es conocer la variabilidad de la concentración de Fósforo en
las plantas de avellano según los siguientes factores:
- Edad del árbol.
- Terreno de localización de la planta.
- Altura de las hojas en un mismo árbol.
Las hipótesis adoptadas a priori son:

- El contenido total de Fósforo en las hojas de avellano debe estar
entre 0,14-0,6%, para tener una floración óptima.
- El contenido total de Fósforo en las hojas de avellano puede variar en
función de la edad del árbol.
función del terreno en el que crezca.
función de la altura de las hojas en una misma planta.
Para poder determinar la concentración de P en las plantas, utilizamos la

técnica analítica de espectrofotometría. Este método se basa en la determinación
de la disminución de potencia (atenuación) que sufre una radiación
electromagnética como consecuencia de la absorción que experimenta al
interaccionar con un analito (la sustancia a analizar).
La radiación electromagnética es una forma de energía que se transmite por el
espacio, cuyo valor se determina por la ecuación E = h·μ = hc/λ (a mayor
frecuencia μ o menor longitud de onda λ, más energía) y que se clasifica en
diferentes zonas según su longitud de onda λ: zona de ondas de radio,
microondas, infrarrojo, visible ultravioleta, rayos X… (en orden creciente de
longitud).

2.2. DESARROLLO EXPERIMENTAL

2.2.1. MATERIAL Y REACTIVOS
Material:
- Nevera portátil
- Pinzas para la extracción de hojas
- Horno de secado
- 6 Bolsas de plástico herméticas para la recogida de muestras
- Molinillo “Culatti”
- Espectrofotómetro
- Balanza analítica
- 6 Matraces erlenmeyer de 250ml
- 6 Embudos de vidrio de unos 5cm de diámetro (para el reflujo de los
erlenmeyer)
- Placa calefactora
- 1 Embudo BÜchner
- 1 Cono de goma
- 1 kitasatos
- Papel filtro
- 18 matraces aforados de 100ml
- 1 pipeta de 10ml
- 2 pipetas de 5ml
- Tubos de ensayo o cubetas para espectrofotómetro
- Gradilla
- 6 lentes de vidrio
Reactivos:
- Ácido nítrico concentrado (60-70%)
- Metavanadato amónico al 0,25%
- Molibdato amónico al 5%
- Disolución patrón de KH2PO4 100mg/l en fósforo
2.2.2. RECOGIDA DE MUESTRAS

Las hojas fueron adecuada y cuidadosamente seleccionadas pues esto es

fundamental a la hora de obtener resultados satisfactorios.
Recogimos 6 muestras diferentes:
- Muestra 1 (T1I): muestra de árbol de terreno nº 1 (huerta) y de la
zona inferior de la planta.
- Muestra 2 (T1S): muestra de árbol de terreno nº 1 (huerta) y de la
zona superior de la planta.
- Muestra 3 (T2JI): muestra de árbol de terreno nº 2 (monte), joven
(10 años) y de la zona inferior de la planta.
- Muestra 4 (T2JS): muestra de árbol de terreno nº 2 (monte), joven
(10 años) y de la zona superior de la planta.
- Muestra 5 (T2MI): muestra de árbol de terreno nº 2 (monte),
mediano (22 años) y de la zona inferior de la planta.
- Muestra 6 (T2MS): muestra de árbol de terreno nº 2 (monte),
mediano (22 años) y de la zona superior de la planta.
2.2.3. PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS

Con las muestras de hojas seleccionadas y convenientemente transportadas
(en una nevera), realizamos las siguientes operaciones:

1) Lavado: lo más rápidamente posible, con agua que contenga una pequeña
cantidad de detergente exento de cualquiera de los elementos químicos que se
van a analizar.
2) Secado: en un horno a 70ºC durante 6 horas, hasta cerciorarnos de que
están debidamente deshidratadas.
3) Trituración: en un molinillo “Culatti”, utilizando un tamiz de 1mm. Después
se guardamos las muestras en un frasco herméticamente cerrado.
4) Ataque ácido:
- Pesamos todas las muestras de aproximadamente 0,4g. Después,
añadimos a las muestras 10ml de HNO3 concentrado (60-70%) a matraces
erlenmeyer de 250ml. Posteriormente, colocamos un embudo de vidrio en la
boca de los matraces erlenmeyer para que actuase como reflujo de los
vapores desprendidos y lo calentamos suavemente en una placa
calefactora. En este punto, fue muy importante vigilar la operación, para
evitar que se carbonizasen las muestras (se tuvo que añadir una pequeña
cantidad de HNO3).
- Filtramos las disoluciones resultantes del ataque ácido en un embudo
BÜchner, trasvasando el filtrado a matraces aforados. Añadimos agua
destilada al filtro para arrastrar los restos de disolución. Por último,
añadimos agua destilada a los matraces aforados de 100ml hasta
enrasarlos. Con esto, preparamos las “Disoluciones madre”.
2.2.4. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE P EN LA DISOLUCIÓN PROBLEMA

1) Preparción de las disoluciones patron y muestra: siguiendo las indicaciones
de la siguiente tabla.
2)Agitación de los matraces: agitar y esperar 30min hasta que se complete la

reacción.
Reactivos
3)Medidas de la absorción en espectrofotómetro:
- Para calibrar el cero del espectrofotómetro, añadimos unos ml de
disolución patrón P0 a un tubo de vidrio específico para ello.
HNO3 (1:1) ml
- Se fueron colocando tubos de ensayo en el portamuestras del equipo
y fuimos midiendo y anotando los valores de absorbancia, tanto para las
disoluciones patrón como para las disoluciones de muestra. Estas medida,
las tomamos en un rango de longitud de onda (λ) de 380nm hasta 460nm,
en intervalos de 10nm.
Metavanadato amón
2.3. RESULTADOS
2.3.1. REPRESENTACIÓN DE LA ABSORCIÓN FRENTE A LA LONGITUD DE ONDA
De esta forma, logramos el espectro de absorción del fósforo.
- Disoluciones Patrón (datos recogidos):
3
- Disoluciones de Muestra (datos recogidos):
3
Longitud 4
de 4
3
onda 4
- Disoluciones Patrón (representación gráfica):
0 ,8 0 0

- Disoluciones de Muestra (representación gráfica)::
0 ,7 0 0

2.3.2. OBTENCIÓN DE RECTAS DE CALIBRADO

Obtención de la recta, pendiente y ordenada en el origen de la representación,
así como el error cuadrático.
Esto lo realizamos para dos longitudes de onda: 380nm y 420nm.
0 ,8 0 0
- Recta patrón para λ=380nm:

· Ecuación: y = 138,94x - 0,0042
· Pendiente: 138,94
· Ordenada en el orígen: - 0,0042 ≈ 0
· Error cuadrático: R2 = 0,9985

· Ecuación: y = 54,114x - 0,0033
· Pendiente: 54,114
· Ordenada en el orígen: - 0,0033 ≈ 0
· Error cuadrático: R2 = 0,9976
2.3.3. CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE LAS MUESTRAS

Obtención de la concentración de P en las hojas de avellano en porcentaje
de masa:
Primero, calculamos la concentración en g/l de las disoluciones de muestra
utilizando las rectas de calibrado obtenidas de las disoluciones patrón, cuya
concentración es conocida.
Después, calculamos la concentración en % de masa conociendo la cantidad
de disolución madre contenida en cada disolución de muestra.

· Ecuación: y = 138,94x - 0,0042
Cálculo de la concentración en g/l:
(Absorbancia medida + 0,0042) / 138,94
Cálculo de la concentración en % de masa:

(Concentración en g/l*0,1/0,4)

· Ecuación: y = 54,114x - 0,0033
Cálculo de la concentración en g/l:
(Absorbancia medida + 0,0033) / 54,114
Cálculo de la concentración en % de masa:

(Concentración en g/l*0,1/0,4)


2.4. DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS Y CONCLUSIONES

2.4.1. HIPÓTESIS INICIALES
A la hora de discutir los resultados, éstos los compararemos con las
hipótesis planteadas inicialmente.
Para ello, utilizaremos como base para esta discusión la siguiente tabla, que
recoge el % en masa de P en las diferentes muestras analizadas:
Para λ = 380nm
1) El contenido total de Fósforo en las hojas de avellano debe estar
Para λ = 420nm
entre 0,14-0,6%, para tener una floración óptima.
Observamos que las concentraciones en % de masa para las distintas
disoluciones de muestra están en un rango entre 0,064% y 0,108%.
Según el libro “Plant Analysis, an Interpretation Manual” (editors: D.J. Reuter
& J.B. Robinson), en % de masa de P en plantas de avellano (Hazel-Nut) es:
Longi
Deficiente: si %P < 0,1%
Marginal: si 0,1% < %P < 0,13%
Adecuado: si 0,14% < %P < 0,6%
de
En nuestro caso, las plantas analizadas tendrían un contenido de P
deficiente, llegando en algún caso a ser marginal.
Esto puede ser debido a diversos factores: la composición de la tierra, la
variedad de avellano, la ausencia de abonos/fertilizantes, la época del año en
que nos encontramos…
ond
Para poder obtener una mejor floración y un mejor crecimiento de los
árboles, se podrían utilizar abonos fosfóricos.
2) El contenido total de Fósforo en las hojas de avellano puede

variar en función de la edad del árbol.
λ (nm
En los datos mostrados anteriormente, se puede observar que no hay
cambios significativos según la edad del árbol (estando ambos en el mismo
terreno).


variar en función del terreno en el que crezca.
Según los datos obtenidos del estudio, se observa que el %P en los árboles
del terreno 2 (monte) es superior al %P en los árboles del terreno 1.
Este fenómeno puede tener su explicación en la diferencia de tierras,
alturas, abono natural (debido al ganado y animales en el monte)… entre los dos
terrenos estudiados.

variar en función de la altura de las hojas en una misma planta.
Ateniéndonos a los resultados obtenidos, se aprecia una leve diferencia en
la concentración de P entre las partes superior e inferior de la misma planta.
No se sabe exactamente cual puede ser la causa que origina dicha
variabilidad, pero quizás tenga que ver con fenómenos atmosféricos como la
radiación solar, el viento…

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LABORATORIO DE ANÁLISIS INDUSTRIAL Y DEL MEDIO AMBIENTE

Informe de trabajo semanas 1 y 2

1. Determinación de la dureza total del agua por valoración complexométrica....2

2. Determinación potenciométrica de la concentración de ácido fosfórico en

3. Comparación de las prestaciones de espectrofotómetros de absorción.........29

4. Determinación de la concentración de manganeso en un acero por

5. Separación de colorantes en alimentos por cromatografía de capa fina.........60

6. Determinación de la cantidad de Fósforo en hojas de avellano.....................66

Alvaro Olano y Alain Senar Página 1 de 77

1. DETERMINACIÓN DE LA DUREZA TOTAL

1.2. SÍNTESIS TEORICA

El bicarbonato de calcio es menos soluble en agua caliente que en agua fría,

Alvaro Olano y Alain Senar Página 2 de 77

1.3. MATERIAL Y REACTIVOS

1.4. PARTE EXPERIMENTAL

A) Preparación de una disolución patrón 0,01 M de la sal disódica del

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1. Calculamos la masa de NaH2Y2∙2H2O (M = 372,24 g/mol) necesaria para

2. Guardamos la disolución de EDTA 0,01 M en un frasco de plástico.

3. Preparamos una bureta para la valoración. Homogeneizamos la bureta con un

B) Determinación del blanco. Procedimiento general de valoración.

4. Añadimos 25 ml de agua desionizada a un matraz erlenmeyer de 250 ml, 2 ml

5. Si nuestra disolución tiene color rojizo adicionamos lentamente la disolución

6. Repetimos el procedimiento dos veces más.

C) Estandarización de la disolución de EDTA.

7. Para conocer la concentración real de la disolución preparada empleamos

8. Enrasamos la bureta con una disolución de la disolución de Na2H2-

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9. Repetimos el procedimiento con otras dos alícuotas de 10ml de la disolución

D) Valoración de Ca y Mg. Dureza total del agua.

10. Pipeteamos 25 ml de la muestra de agua que se desea analizar en un matraz

11. Enrasamos la bureta con una disolución de la disolución de Na2H2EDTA∙2H2O

12.El volumen neto de EDTA es la diferencia entre el volumen de EDTA

13.Repetimos la valoración con una segunda muestra de agua.

14.Para la valoración de calcio, pipeteamos 10ml de la muestra en un matraz

15.Realizamos un blanco empleando 10ml de agua desionizada en lugar de la

Para empezar calculamos la masa de sal disódica de EDTA y preparamos 250

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Mediante una balanza pesamos los 0.9306 g de reactivo e introducimos a un

1. Calcule la concentración molar de la disolución de NaH 2Y2. El

a) Calcule el volumen neto de EDTA gastado en cada valoración.

b) Empleando la disolución patrón de Ca como referencia, calcule el

c) Calcules la concentración molar de EDTA.

a) El volumen de EDTA que obtenemos de las valoraciones son los siguientes:

V EDTA = 10 .9mL → M EDTA = 0.009174 M

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V EDTA = 10 .8mL → M EDTA = 0.009259 M

2. Una vez que haya comprobado la concentración de EDTA, calcule los

3. Exprese los resultados como mg de carbonato de calcio por litro, e

Para analizar las nuestras de agua, pipeteamos 25ml de las muestras en un

EDTA = 0.0099116mol( EDTA) ⋅ V EDTA

Volumen de EDTA 7.2 7 7

4. Represente las concentraciones de CaCO3 como un punto en un

Manejamos los datos sin decimales debido a la precisión de los aparatos de

Hacemos el gráfico de la tabla anterior:

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6. Calcule la diferencia entre cada par de valores y obtenga la varianza

Donde Di es la diferencia entre cada par de valores y D es el valor

Donde Ti es la suma de cada par de valores y T es el valor medio de

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Varianza de los errores aleatorios: 612.8