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Introduccin
Haemophilus parasuis es una de las bacterias ms importantes que afectan cerdos. La
enfermedad causada por este patgeno se caracteriza por poliserositis y se conoce como
la enfermedad de Glasser [1]. H. parasuisest presente en todos los principales pases de
cerdos de cra y sigue siendo un patgeno importante en los sistemas de produccin
porcina contemporneas [1]. Adems de causar enfermedad, H. parasuis est aislada
con frecuencia del tracto respiratorio superior de los cerdos sanos [2, 3]. Mltiples
genotipos y serotipos diferentes de H. parasuis se han descrito. Sin embargo, no hay
una clara asociacin entre la virulencia y H.parasuis fenotipos o genotipos [4]. El xito
de la vacunacin resulta en reduccin de la mortalidad se ha logrado mediante
bacterinas y vacunas autgenas, pero fracasos son frecuentes debido a la mala
proteccin cruzada [5 - 8]. La capacidad de H. parasuis para interactuar con el anfitrin
porcina, causando o no la enfermedad, es un tema que necesita ms
investigacin. Recientemente, invertir vacunologa y anlisis immunoproteomic
identificado varios genes asociados con la virulencia putativos y protenas
inmunognicas en diferentes H. parasuis cepas [9 - 12]. Los estudios de seguimiento de
la vacuna en ratones y lechones utilizando antgenos recombinantes revelaron fuerte
seroconversin, pero la proteccin parcial contra el desafo homlogo y dbil o
inexistente proteccin cruzada [13, 14].
Debido a la eficacia de las vacunas incompleta, se necesitan agentes antimicrobianos
para tratar H. parasuisinfecciones [1]. Los cerdos que recibieron antimicrobianos
temprano durante la infeccin con H. parasuissuelen ser capaces de sobrevivir a una
infeccin sistmica [1]. Ms especficamente, enrofloxacino es una fluoroquinolona
activa contra las bacterias Gram-negativas y Gram-positivas [15]. La enrofloxacina
inhibe la girasa bacteriana de ADN (una topoisomerasa de tipo II), la prevencin de
superenrollamiento del ADN y la replicacin, lo que conduce a la muerte
celular [16]. Adems, enrofloxacina se ha demostrado que disminuye temporalmente la
carga de H. parasuis colonizar de forma natural el tracto respiratorio superior de los
cerdos convencionales [3].
A pesar de que no es un mtodo estndar para evaluar la susceptibilidad antimicrobiana
contra H. parasuis[17], algunos estudios que incluyeron espaol [18] y el
chino [19] cepas han demostrado resistencia a los antimicrobianos a la enrofloxacina
usando puntos de corte recomendados por la Clnica y Laboratorio Standard Institute
(CLSI) para otras especies bacterianas. Aunque muchos H. parasuis cepas se consideran
susceptibles a la enrofloxacina, es importante hacer hincapi en el uso prudente de los
antimicrobianos para el tratamiento de la enfermedad de Glasser y controlar los patrones
de susceptibilidad de H. parasuis asla antes de la administracin de una terapia dada.

El enrofloxacino tambin se ha demostrado para obstaculizar la inmunidad a varias

especies bacterianas, incluyendo Actinobacillus pleuropneumoniae en cerdos [20]. Por
otra parte, a principios de eliminacin de diversos patgenos bacterianos de
antimicrobianos obstaculizado el desarrollo de respuestas inmunes protectoras
necesarias para superar futuras infecciones [21 - 23]. Si bien es claro que el uso de los
antimicrobianos ejercen un efecto perjudicial directo sobre las infecciones bacterianas,
los recientes hallazgos se describen a continuacin estn arrojando luz sobre su
potencial efecto sobre la respuesta inmune. Sin embargo, la interaccin entre
antimicrobianos y las respuestas inmunes a H. parasuis no se conoce. El propsito de la
presente revisin es resumir los conocimientos existentes en relacin con la respuesta
inmune porcina a H. parasuis y se discuten los posibles mecanismos de interaccin
entre la enrofloxacina y la inmunidad.
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La inmunidad protectora contra H. parasuis
Ha habido una gran expansin en el conocimiento en lo que respecta al sistema inmune
del cerdo y su efecto en la enfermedad y la inmunidad protectora contra las
infecciones. Los cerdos pueden responder casi inmediatamente a un agente infeccioso a
travs de mecanismos inmunes innatos, que podran controlar la infeccin hasta la
activacin del sistema inmune adaptativo [23]. Poco despus de la infeccin, las
bacterias se encuentra con el sistema inmune innato, que se activa cuando los receptores
de reconocimiento de patrones (PRRS), incluidos los receptores toll-like (TLRs),
contactar patrones moleculares asociados a patgenos (PAMPs) y inducen diferentes
vas de sealizacin [24]. La invasin bacteriana tambin activa el sistema del
complemento [25], induce la migracin de las clulas fagocticas y la produccin de
diversas citoquinas, que proporciona la defensa antimicrobiana, recluta de ms clulas a
travs del proceso inflamatorio y ayuda en la activacin de la inmunidad adquirida [23].
La activacin de los resultados respuesta inmune adquirida en la produccin adicional
de citoquinas, las clulas T y la activacin de clulas B, y la produccin de
anticuerpos. La respuesta inmune adquirida tambin proporciona el host con memoria
especfica para la proteccin contra posteriores infecciones homlogas [23]. Reactivos
especficos, la mejora de la tecnologa y el conocimiento ms detallado de las
poblaciones de clulas inmunes porcinos ahora permiten un anlisis detallado de las
respuestas inmunes especficas de antgeno en cerdos [26 - veintinueve]. Aunque la
inmunidad protectora contra las bacterias extracelulares depende en gran medida
anticuerpos, respuestas celulares a menudo se requieren para la expresin completa de
la inmunidad [23].
Mecanismos de defensa innatos a H. parasuis

Macrfagos alveolares porcinos (PAMs) son considerados una importante lnea de

defensa contra H.parasuis la infeccin [30]. PAMs aisladas de cerdos inoculados

con H. parasuis fueron capaces de diferencialmente hasta de regular varios genes

relacionados con la produccin de citocinas, fagocitosis, la formacin de fagolisosoma,
transduccin de seales y la produccin de xido ntrico [31].
Los estudios in vitro han demostrado que las cepas no virulentas son susceptibles a la
fagocitosis por los PAMs, mientras que virulenta H. parasuis cepas son
resistentes [30]. A diferencia del mecanismo de la fagocitosis de las cepas no virulentas,
la fagocitosis de cepas virulentas no depende de los filamentos de actina [30]. Adems,
ensayos de competicin han demostrado que la fagocitosis
de H. parasuisprobablemente no es dependiente de un receptor especfico, ya que la
fagocitosis de las cepas no virulentas no se vio afectada por la presencia de cepas no
virulentas o virulentos [30].
Por otra parte, estudios in vivo han demostrado que existe un retraso en el
procesamiento de virulenta H.parasuis cepas de PAM y un 24 h retraso en la activacin
de los macrfagos por H. parasuis cepas virulentas en comparacin con las cepas no
virulentas [32]. Mientras que no hay diferencia en la asociacin de cepas virulentas y no
virulentas con los endosomas tempranos, las cepas no virulentas se encontraron ms
frecuentemente asociados con los endosomas maduros que cepas virulentas despus de
la incubacin de una hora [33]. Esta inhibicin de las respuestas de acogida temprana
para virulento H. parasuis puede conducir al desarrollo de la enfermedad de
Glasser [32]. Interferencia de la fagocitosis por H. parasuis cepas virulentas es probable
asociados con la presencia de la cpsula [30]. Adems, dos autotransporter (VtaA)
antgenos trimricas virulentas asociado, VtaA 8 y 9 VtaA, identificadas en
el H. parasuis membrana externa, retardados interacciones con los macrfagos, a pesar
de que no impidieron la fagocitosis [33].
Tcnicas de inmunohistoqumica e inmunoperoxidasa tambin han demostrado que
despus de la infeccin sistmica, H. parasuis antgenos se encuentran como bacterias
degenerado en fagosomas dilatados en lesiones serosas [34, 35]. Al parecer, las
respuestas de leucocitos finales que se activan despus de la infeccin con cepas
virulentas son capaces de fagocitar eficiente H. parasuis, que est de acuerdo con los
estudios in vitro que han demostrado que virulenta H. parasuis cepas no sobreviven
dentro de los macrfagos cuando internalizado [30].
Las citocinas que participan en la respuesta inflamatoria a H. parasuis incluyendo la
interleucina (IL) -8 y IL-6, fueron producidos por las clulas endoteliales porcinas
traqueales y al entrar en contacto con H. parasuis[36, 37]. Respuesta de fase aguda
estimulada por IL-6 produccin y quimioatraccin de leucocitos estimulados por IL-8
representan papeles esenciales de estas citoquinas en la respuesta inflamatoria
a H.parasuis [36]. Adems, el aumento de expresin de IL-1 en el pulmn ha sido
reportado en cerdos sometidos a la enfermedad de Glasser severo despus de la
infeccin experimental, mientras que la IL-4, IL-10, factor de necrosis tumoral (TNF)
-, y el interfern (IFN) se expresa en - niveles significativamente ms altos en el bazo,

los ganglios linfticos farngeos, de pulmn y el cerebro de los supervivientes [38]. Del
mismo modo, los estudios in vivo con cerdos desafiados con muy
virulenta H. parasuis mostraron un aumento proporcin de CD163 + monocitos, que
son capaces de producir altas cantidades de citoquinas proinflamatorias, tales como
TNF-, IL-1 e IL-6 [39].
Como parte de otra lnea de defensa de la respuesta inmune innata, no se encontraron
clulas T delta gamma en nmeros reducidos en los cerdos despus del desafo con una
dosis letal de un altamente virulenta H.parasuis cepa [39]. clulas T delta gamma
representan una numerosa poblacin subconjunto de linfocitos en cerdos capaces de
reconocer antgenos no peptdicos no procesados [26]. Estas clulas pueden causar
citotoxicidad y producir T helper (Th) -1 y Th-2 citoquinas que contribuyen a la
respuesta inmune inflamatoria y anti-inflamatorios [31]. Una reduccin en el delta
gamma clulas T podra hacer que los cerdos ms susceptibles a H. parasuis infeccin,
lo que sugiere que esto podra ser uno de los mecanismos de patognesis
de H. parasuis cepas virulentas a pesar de que ese mecanismo todava tiene que ser
dilucidado[39].
La activacin de anticuerpos independiente de la cascada del complemento es el
mecanismo de defensa de un hospedador inicial, causando vasodilatacin y aumento de
la permeabilidad vascular que resulta en la atraccin de las clulas fagocticas para el
sitio de infeccin [23]. La cascada del complemento tambin se traduce en la formacin
de un complejo de protenas que acta como un poro en la pared bacteriana provocando
en ltima instancia, la lisis bacteriana. La activacin del complemento se puede hacer
por endotoxinas bacterianas tales como lipopolisacridos (LPS), peptidoglicano y cidos
teicoicos [23]. No virulenta H. parasuis cepas fueron susceptibles a complementar de
una manera-anticuerpo independiente, mientras que las cepas virulentas evadir esta
respuesta del husped y se resisten a la destruccin mediada por el complemento
a [40]. Por lo tanto, la resistencia a-anticuerpo independiente del complemento matanza
parece ser un mecanismo de la patogenicidad de H. parasuis cepas virulentas [40] y se
ha demostrado que elH. parasuis se requiere la protena de la membrana externa P2
(OmpP2) para la resistencia en suero [41].
Mecanismos de defensa adquiridos contra H. parasuis

Mientras que el sistema inmune innato porcino confiere proteccin inicial, el sistema
inmune adquirido proporciona una segunda, ms especfica y de larga duracin, lnea de
defensa contra organismos infecciosos[25]. De acuerdo con estudios realizados en
ratones, despus de la estimulacin del antgeno, las clulas Th se diferencian en clulas
Th-1 o Th-2. Las funciones de las clulas Th-1 y Th-2 se correlacionan con la
produccin de sus citoquinas. Th-1 clulas estn implicadas en las funciones
inflamatorias mediadas por clulas a travs de la secrecin de IL-2 e IFN-. Clulas Th2 estimulan la produccin de anticuerpos, y tambin mejoran la proliferacin y la
funcin de eosinfilos mediante la secrecin de IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10 e IL-

13 [42]. En consecuencia, Th-2 citoquinas se encuentran comnmente en asociacin con

las respuestas de anticuerpos [42], a pesar de que en los cerdos la citoquina Th-2, IL-4,
no fue capaz de estimular la produccin de clulas B y el anticuerpo porcino in
vitro [43].
Aumentos significativos en la proporcin total de las clulas Th-1 y Th-2 (CD4 +) se
observaron en todos los cerdos que sobrevivieron reto con vivo H. parasuis, mientras
que los cerdos susceptibles mostr una disminucin de las clulas T CD4
+ [44]. Clulas citotxicas (CD8 +) T y clulas B se incrementaron significativamente
en todos los cerdos entre 1 y 3 das despus del desafo, independientemente de la
supervivencia [39]. Se necesitan ms estudios para dilucidar la respuesta inmune celular
a H. parasuisinfeccin que estn relacionadas con la proteccin.
Una respuesta inmune humoral generalmente se activa cuando los cerdos estn
infectados con H. parasuis[35]. Tal respuesta est frecuentemente asociada con el
desarrollo de una respuesta IgM transitoria seguida de una respuesta de anticuerpos IgG
aumentando slida y progresivamente [45]. Adems, la inmunizacin pasiva de cerdos
con suero que contiene anticuerpos especficos contra H. parasuis confirm el papel de
la respuesta humoral en la proteccin contra el desafo letal [46]. El mecanismo de
proteccin por anticuerpos parece ser debido a la funcin de los anticuerpos en la
opsonizacin de H. parasuis cepas para facilitar la fagocitosis [30]. En particular,
virulenta H. parasuis cepas requieren opsonizacin previo con anticuerpos especficos
para ser fagocitadas por PAM y, de ser interiorizado, se les mata con xito por
PAM [30].
En comparacin con la cantidad de informacin disponible en la respuesta inmune
a H. parasuis infeccin sistmica, el conocimiento sobre la respuesta inmune
a H. parasuis colonizacin es limitada, a pesar de queH. parasuis es un colonizador
comn de los cerdos. Se ha demostrado que no virulento H. parasuis cepas poseen
mecanismos de evasin inmune, tales como la formacin de biopelculas [47]. La
formacin de biopelculas podra proteger a las bacterias del ataque de la respuesta
inmune del husped y facilitar la colonizacin del tracto respiratorio superior por cepas
no virulentas. Adems, las cepas no virulentas son generalmente susceptibles a la
fagocitosis por los PAMs [30] y sensibles a los efectos bactericidas de suero[48], lo que
podra evitar que las bacterias que sobreviven en los pulmones e invadiendo
sistmicamente los anfitriones. Adems, un aumento en H. parasuis tasa de
colonizacin se asoci con una disminucin en H.parasuis anticuerpos sricos [2]. Por
lo tanto, los anticuerpos sricos en lechones podran ser capaces de modular el tiempo y
el nivel de colonizacin por H. parasuis, y ser relevante para evitar la enfermedad
sistmica causada por H. parasuis [2].
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Efectos de enrofloxacina en la respuesta inmune

La mayora de los hallazgos de informes las interacciones de los antimicrobianos con el

sistema inmune se descubrieron usando modelos de ratn [21, 22]. Estos resultados
contribuyen a la comprensin de cmo el uso de frmacos antimicrobianos puede
interferir con la proteccin contra una infeccin bacteriana especfica, ya sea mediante
la interaccin con el celular y / o humoral respuesta inmune o disminuyendo el antgeno
responsable de desencadenar una respuesta inmune. Sin embargo, los mecanismos por
los que actan todava necesitan de mayor investigacin, especialmente para los
animales grandes.
La enrofloxacina, una fluoroquinolona, se acumula activamente en los fagocitos, pero
no interfiere con la accin quimiotctica de los leucocitos polimorfonucleares de la
especie porcina (PMNs) o la fagocitosis de A.pleuropneumoniae, Pasteurella
multocida y Staphylococcus aureus por PMNs y PAMs en comparacin con los
controles no tratados [49]. Sin embargo, el asesinato intrafagoctica
de A. pleuropneumoniae fue significativamente mayor de enrofloxacina en ambos PMN
y PAM [49]. Se necesita ms investigacin, sin embargo, para investigar si estos efectos
tambin se aplicaran a H. parasuis.
En los cerdos, una respuesta inmune humoral protectora para A. pleuropneumoniae fue
impedida por el tratamiento con enrofloxacina, pero no por el tratamiento con penicilina
o tetraciclina [20]. La ausencia de seroconversin podra haber estado relacionado con
la alta eficiencia de enrofloxacina en la eliminacin de la
inoculado A. pleuropneumoniae con la suficiente rapidez para evitar la activacin de
una respuesta inmune adquirida. En cuanto a H. parasuis, a pesar de que no existe
informacin especfica disponible en la interferencia antimicrobiana sobre la respuesta
inmune, se sabe que la enrofloxacina es capaz de reducir la carga de H. parasuis en el
tracto respiratorio superior de los cerdos colonizados naturalmente [3].Interferencia
con H. parasuis colonizacin podra estar asociado con la interferencia con el desarrollo
de una respuesta inmune protectora a las bacterias colonizadoras, ya que los cerdos
inoculados experimentalmente con una dosis baja de virulenta H. parasuis cepa fueron
menos susceptibles a la enfermedad de Glasser en el campo [50, 51].
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Conclusiones
Proteccin contra H. parasuis enfermedad implica la activacin de varios elementos del
sistema inmune porcino innata y adquirida, la mayora de los cuales son todava
desconocidos. Especfica H. parasuisfactores virulentos permiten esta bacteria para
evadir el sistema inmune innato e invadir tejidos sistmicos, causando inflamacin
severa de serosas por la activacin de citoquinas y la atraccin de los fagocitos. Una
respuesta de anticuerpos sricos suele estar presente en los cerdos sobrevivan a la
infeccin sistmica o despus de la vacunacin y est altamente asociada con la
proteccin contra H. parasuis la enfermedad, a pesar de la proteccin heterloga es

limitado. Desde el uso de antimicrobianos est muy extendido en la industria porcina y

antimicrobianos se utilizan como una opcin para el control de H. parasuis la
enfermedad, sus efectos sobre la respuesta inmune necesita ser tenido en
cuenta. Mientras que el tratamiento antibitico puede ser muy eficaz en el control
de H. parasuis infecciones, tambin puede interferir con el desarrollo de respuestas
inmunitarias protectoras contra H. parasuis. Por lo tanto, una mejor comprensin de
cmo H. parasuis ceba una respuesta inmune protectora y las funciones especficas de
la respuesta inmune humoral y celular en la proteccin a H. parasuis se necesitan
enfermedad. Una mejor comprensin de los efectos de los antimicrobianos en la
respuesta inmunitaria contribuir al desarrollo de mejores programas de control
de H. parasuis y ayudarn a desarrollar prcticas sensatas de tratamiento antibitico.