Efectos de la luz y la temperatura en la germinacin de semillas de Lactuca sativa

(lechuga) y Nicotiana tabacum (tabaco)

Benavides, M.1; Garca, D.1
1

Departamento de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad de Los Andes, 5101,

Mrida, Venezuela.

RESUMEN
La semilla es la estructura que contiene al embrin o esporofito joven de las
espermatofitas, puede estar acompaada de tejido nutritivo y protegido por una cubierta
seminal. La germinacin es una transicin del embrin latente (dentro de la cubierta
seminal), a la forma metablicamente activa, la plntula, comienza con la imbibicin o
el movimiento de las molculas de agua en sustancias como la madera o la gelatina. La
latencia es un mecanismo para optimizar la distribucin de semillas en el tiempo y en el
espacio, por lo general los individuos de las poblaciones exhiben una espordica
liberacin de la latencia y por lo tanto una germinacin irregular. La superacin de un
estado latente puede ser inducido por la accin de algunos factores ambientales como la
luz y la temperatura. Las semillas que requieren la luz para su germinacin son
fotolatentes, para que la luz controle el desarrollo de las plantas estas deben absorber
luz. Para probar el efecto de temperatura y grado de imbibicin en germinacin de
semillas de Lactuca sativa (lechuga), se colocaron semillas en 4 cajas de Petri
conteniendo cada una concentraciones distintas de sacarosa, y cada una de estas series
se hizo por duplicado (a 10-11C y a 26 C), y para probar el efecto de la luz se
realizaron tratamientos a semillas de Nicotiana tabacum (tabaco) en cajas de Petri a
distintas longitudes de onda (660nm y 730nm), a luz blanca y a oscuridad, y luego a una
de las rplicas a 730nm y una a oscuridad se cambiaron a 660nm y a luz. Los resultados
mostraron que altas concentraciones de sacarosa (en lechuga), oscuridad y luz a 730nm
(en tabaco) inhiben la germinacin, y la temperatura de 10-11C (en lechuga), as como
la luz blanca y a 660 nm (en tabaco) promueven la germinacin.
Palabras claves: fitrocromo, semillas fotolatentes, imbibicin, rojo y rojo lejano, Lactuca

sativa, Nicotiana tabacum.

INTRODUCCIN
La semilla es la estructura que contiene
al embrin o esporofito joven de las
espermatofitas, puede estar acompaada
de tejido nutritivo y protegido por una
cubierta seminal (la cual suele ser
impermeable) (Lindorf, De Parisca &
Rodrguez, 2006), en si se encuentra en
reposo, y deshidratada. Su estado de

interrupcin de la vida se debe

principalmente a la ausencia de oxgeno
y agua (Bidwell, 1993).
La germinacin es una transicin del
embrin latente (dentro de la cubierta
seminal), a la forma metablicamente
activa, la plntula, (Lindorf, De Parisca
& Rodrguez, 2006), comienza con la
imbibicin o el movimiento de las

molculas de agua en sustancias como

la madera o la gelatina. Las semillas
hidratadas pueden aumentar varias
veces su volumen, gracias a la
imbibicin (Hernndez, 2007), esto
puede ayudar al rompimiento de la testa
y al surgimiento de la radcula. Se dice
que ocurre germinacin cuando la
radcula emerge a travs del micrpilo.
Para que se de esta transicin se debe
reactivar todo el proceso metablico, y
la iniciacin del crecimiento, lo cual
desencadena una serie de cambios
fisiolgicos y morfolgicos, como el
consumo de reservas en el endosperma
por parte de los cotiledones, cuando
ellos mismos no las poseen. Al emerger
la radcula termina de romperse la
cubierta seminal, lo cual permite que se
despliegue los cotiledones, se alarga el

Ilustracin 1. Germinacin de una

semilla de frijol (dicotilednea)
(Tomado de Arnett, Jr. y Braungart,
D.C: An introduction of Plant Biology).
En la ilustracin 1 se muestra la
germinacin de una semilla de frijol, la
La latencia es un mecanismo para
optimizar la distribucin de semillas en
el tiempo y en el espacio, la latencia de
semillas puede lograr su extensa
distribucin a
mayores escala
temporales, por lo general los
individuos de las poblaciones exhiben
una espordica liberacin de la latencia
y por lo tanto una germinacin irregular,
esto
mejora
la
dispersin
y
sobrevivencia de las especies. La
superacin de un estado latente puede
ser inducido por la accin de algunos
factores ambientales como la luz y la

hipoctilo y se da la aparicin de
nuevas hojas, formando la plntula
(Lindorf, De Parisca & Rodrguez,
2006).

cual es una planta dicotilednea como

las especies empleadas en este
bioensayo.
Para
comprobar
la
germinacin se cultivaron semillas de
Lactuca sativa (lechuga) y Nicotiana
tabacum
(tabaco),
a
distintas
concentraciones de sacarosa. Cabe
destacar que la semilla de tabaco es una
semilla latente (Bouinot et al, 2000).
temperatura, por lo general, las semillas
que poseen una latencia sensible a la luz
no suelen germinar con la luz filtrada a
travs de las hojas de los rboles
superiores, sino que necesitan de un
lugar que est totalmente expuesto a la
luz para su germinacin (Bewley &
Black, 1982).
Las semillas que requieren la luz para
su germinacin son fotolatentes, para
que la luz controle el desarrollo de las
plantas estas deben absorber la luz, se
conocen cuatro tipos de fotorreceptores

que afectan la fotomorfognesis: el

fitocromo,
el
criptocromo,
fotorreceptores UV-B y protoclorofilida
a. Es importante resaltar que la luz ni lo
fotorreceptores tienen informacin
morfognica, sino es la capacidad de
respuestas o sensibilidad que tienen las
clulas cuando son expuestas a un
estmulo como la luz, los cuales pueden
activar un sistema de amplificacin que
desencadena una serie de respuestas en
las plantas, como es el crecimiento de
las plantas etioladas (Ross & Salisbury,
2000).

el fotorreceptor que ms absorbe

longitudes de ondas cercanas a 660 nm
(rojo) y 730 nm (rojo lejano), en los
aos 60 se demostr que el fitocromo
aislado cambia de color de manera
reversible cuando es expuesto a la luz
rojo o a la del rojo lejano, siendo de
color azul en su forma Pr (inactivo) la
cual absorbe la luz rojo y de color verde
oliva la forma Pfr (activa) la cual
absorbe el rojo lejano. Se han observado
en mltiples estudios que las respuestas
fisiolgicas de algunas plantas cuando
son expuestas a luz roja o al rojo lejano,
como son la promocin de la
germinacin de semillas de lechugas o
la apertura del gancho del hipoctilo de
juda estn relacionadas con la forma
activa del fitocromo, tambin dichos
estudios indican que las mismas
respuestas son anuladas posteriormente
cuando son expuestas a longitudes de
ondas de 720 nm (Ross & Salisbury,
2000). Por lo expuesto anteriormente en
este bioensayo se expusieron semillas
de N. tabacum a distintas longitudes de
ondas para comprobar el efecto de las
distintas longitudes de ondas sobre la
germinacin.

Ilustracin 2. 4OUR: estructura

cristalina del fitocromo B de
Arabidopsis
thaliana
mdulo
fotosensorial. (Tomado de Busell, A.N.
et al: 4OUR de RCSB Protein Data
Bank)

MATERIALES Y MTODOS

En la ilustracin 2 se observa el
fitocromo
un
homodmero
con
subunidades de 120 kDa, cada
polipptido posee un grupo prosttico
denominado cromforo (similar a la
ficobilina
en
algas
rojas
y
cianobacterias) el cual es el responsable
de la absorcin de luz. El fitocromo es

Para determinar el efecto de la

temperatura y el grado de hidratacin en
semillas se utiliz como material
vegetal semillas de Lactuca sativa
(lechuga). Se tomaron ocho cajas de
Petri dentro de las cuales se coloc una
especie de colchn compuesto de dos
capas de papel de filtro (estril)

Parte A. Efecto de la temperatura y

grado de imbibicin en la germinacin

intercaladas con una capa de algodn

(estril). Una vez armado este sistema
con el cuidado de evitar en lo posible la
contaminacin (manteniendo las cajas
tapadas), se procedi a colocar 15ml de
las soluciones (previamente preparadas)
de sacarosa a 0.2M, 0,3M, 0,4M y de
agua destilada, a las cajas de Petri, de
manera que se tenan dos cajas con la
solucin 0,2M, dos cajas con 0,3M, dos
cajas con 0,4M y dos cajas con agua
destilada. Los 15ml de cada solucin se
vertieron de manera tal, que quedara
completa y parejamente humedecido el
sistema algodn-papel. Terminado este
paso, se procedi a colocar 25 semillas
de lechuga, distribuidas parejamente, a
cada caja. Finalmente una de las
rplicas de cada solucin se llev al
cuarto de luz a 25C, y las rplicas
restantes se reservaron en la nevera a
una temperatura comprendida entre
10C y 11 C, y se dejaron all durante
14 das, esperando ver los efectos en la
germinacin ante la variacin de la
temperatura y concentraciones del
medio. Se tomaron las observaciones al
tercer, sptimo, decimo y finalmente, al
catorceavo da, obtenindose de esta
manera los porcentajes de germinacin
en cada tratamiento, los cuales fueron
corregidos (a partir del tratamiento con
mayor porcentaje de viabilidad), y
posteriormente tabulados.
Parte B. Requerimiento de luz y efecto
de la calidad de luz en la germinacin

RESULTADOS

El material biolgico utilizado consisti

en semillas de Nicotiana tabacum
(tabaco). El tratamiento consisti en
preparar seis cajas de Petri con un
sistema algodn-papel filtro (estril)
como el utilizado en la parte B, y se
humedeci cada una con 15 ml de agua
destilada. A cada caja se le colocaron
0,1mg de semillas de tabaco distribuidas
parejamente y se cubrieron con su
respectiva tapa. Posteriormente dos
cajas se sometieron a completa
oscuridad cubrieron completamente con
papel aluminio (cuidando que no pase
luz), dos cajas se sometieron
a
tratamiento con luz rojo lejano (longitud
de onda a 730 nm) cubriendo con una
capa de papel celofn rojo y una capa de
papel celofn azul, una de las cajas se
someti a tratamiento con luz roja (a
660 nm) cubrindola con dos capas de
papel celofn rojo, y la caja restante se
dej a luz blanca (como control). Todas
las cajas se llevaron al cuarto de luz a
25C. Tres das despus se observ la
ocurrencia de germinacin en los
tratamientos. Ese mismo da a una de
las capsulas en oscuridad se les retir el
papel aluminio y a una de las cajas a
rojo lejano se le retir el papel celofn
azul. Se hicieron registro de porcentajes
aproximados de germinacin en cada
tratamiento, como resultado de los
catorce das que dur el tratamiento.
Los datos fueron tabulados.

Ilustracin 3. Porcentajes corregidos de

germinacin
en
funcin
de
diferentes
concentraciones de sacarosa,
a temperaturas de 10-11C y 26C, en
semillas de Lactuca sativa.

*etioladas
Ilustracin
4.
Porcentajes
germinacin en funcin de

de

distintas longitudes de onda en semillas

Nicotiana tabacum.

DISCUSIN
La luz y la temperatura son factores
limitantes en el crecimiento de las
plantas y en muchos estadios de vidas o
la transicin entre los mismos, como se
observa en la ilustracin 3 cuando se
expusieron las semillas de L. sativa a
distintas temperaturas ambientales, se
observa que a temperaturas de 11C la
germinacin es promovida, ya que todas
las semillas que eran viables lograron
germinar mientras que las expuestas a
temperaturas de 26C solo germino el
86,67%. Segn Ross & Salisbury
(2000) algunas variedades de semillas
de lechugas provenientes de Grand
Rapids se mantienen latentes cuando
son expuestas a temperaturas de 35 C
bajo luz continua, y su exposicin a
temperaturas de 10 a 15C promueven

su germinacin, incluso algunos lotes de

semillas llegaron a germinar sin la
aplicacin de luz. La variacin que
existe entre las semillas de L. sativa
puede ayudarlas a su dispersin
temporal y a la sobrevivencia de la
especie, ya que al necesitar algunas
variedades de semillas la aplicacin de
temperaturas fras (10 a 15C) separa a
una pequea poblacin de semillas de
otras y las mantiene disponible para una
distinta poca anual.
Cabe destacar en esta ilustracin que en
los tratamientos que fueron expuestas
las semillas a una concentracin de
sacarosa de 0,4 M no ocurri la
germinacin, este hecho puede deberse
a que el potencial osmtico de la

solucin de sacarosa era menor o igual

que el potencial hdrico de las semillas
de lechuga, en este caso el agua
presente en el medio no entrara a la
semilla (Taz y Zeiger, 2003) y no
ocurrira el fenmeno de la germinacin
ya que el agua es un recurso
fundamental para la germinacin.

En la ilustracin 4 se muestra la
germinacin de las semillas de N.
tabacum con variedad en respuestas a la
luz, lo cual puede deberse a las
variaciones en la cantidad de fitocromo
(Reyes-Bautista & Trejo, 2005). Como
ya se mencion, el fitocromo (F) es una
cromoprotena hidroflica que existe en
dos formas principales: Pr y Pfr, con
picos de absorcin a 660 y 730 nm,
respectivamente (Ross & Salisbury,
2000). La forma Pfr (que es inducida
por la exposicin a la luz roja) se
considera que es la biolgicamente
activa y que induce la sntesis de
enzimas esenciales para la germinacin.
La exposicin a la luz roja convierte el
fitocromo a su forma fisiolgicamente
activa (Pfr) y la germinacin se da. La
exposicin a la radiacin infrarroja (rojo
lejano) reconvierte al fitocromo a su
forma inactiva (Pr) y la germinacin se
bloquea (Copeland y McDonald, 1995
extrado de Reyes-Bautista & Trejo,
2005). Para germinar en la oscuridad,
las semillas deben contar con suficiente
fitocromo activo (Pfr).
La germinacin de la mayora de las
semillas, puede ser inhibida por
exposiciones
largas
a
la
luz
(especialmente ante rojo lejano), como
se puede apreciar en la ausencia de
germinacin a 730 nm en la ilustracin

4.
Las semillas negativamente
fotoblsticas, en las que la germinacin
se inhibe por la luz (Reyes-Bautista &
Trejo, 2005), tienen esta respuesta
(respuesta a
irradiacin elevada)
bastante desarrollada. La germinacin
de semillas de N. tabacum en la
oscuridad, puede deberse a que posean
suficiente fitocromo Pfr, sin embargo,
una germinacin de tan solo el 4% y
semillas etioladas puede estar indicando
que la germinacin ocurri como
producto de una posible entrada de luz.
Exposiciones breves a la luz y a bajas
irradiaciones (como en las de luz roja),
no resultan inhibitorias, e incluso
pueden estimular la germinacin
(Lambers et al., 1998 extrado de
Reyes-Bautista & Trejo, 2005) de este
tipo de semillas, como se observ en el
tratamiento en rojo lejano que al
exponer las semillas a luz roja ocurri la
germinacin., y en el tratamiento bajo
luz roja que mostr un 100% de
germinacin. Se sugiere que las semillas
con mayor respuesta de germinacin en
ausencia de luz, probablemente tendran
mayor oportunidad de germinar en
sitios sombreados, ante la influencia las
variaciones de luz en condiciones
naturales.
CONCLUSIONES
- Para las semillas de Lactuca sativa el
mayor porcentaje de germinacin se
obtuvo en condiciones de temperatura
entre 10 y 11 C, mientras que
condiciones de temperatura a 26 C
reducen el porcentaje de germinacin
para las semillas estudiadas.
-Altas concentraciones de sacarosa
inhiben el proceso biolgico de
germinacin, mientras que en ausencia

de
sacarosa
ocurren
mayores
porcentajes de germinacin, en semillas
estudiadas de Lactuca sativa.
- En condiciones de luz blanca
permanente ocurre el mayor porcentaje
de germinacin en semillas de
Nicotiana tabacum, mientras que en
oscuridad y bajo la radiacin infrarroja

-En semillas de Nicotiana tabacum. el

cambio de influencia de luz de 730 nm
(rojo lejano) a 660 nm (rojo), produce
un cambio en el fitocromo de su estado
inactivo
a
un
estado
activo,
promoviendo as la germinacin en
estas semillas.

(rojo lejano) la germinacin se ve

inhibida, en las semillas ensayadas.

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