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Ayudas didcticas para el curso de Biologa Celular

Autor: Elas Balm Gonzlez Camacho


Nombre del alumno: _________________________________________________

INTRODUCCIN AL ESTUDIO DE LA CLULA


NIVELES DE ORGANIZACIN
Fig. 1.1. Niveles de organizacin de la
materia
A los seres vivos se los define por sus
caractersticas, una de stas es su
organizacin. Esta organizacin biolgica
representa el patrn complejo que nos
muestra el camino que ha seguido la
evolucin, desde formas sencillas a otras
ms complejas.
Los seres vivos estn formados por
materia. La materia est formada por
elementos (92 elementos naturales,
como el Cloro, por ejemplo) y se
caracteriza por poseer determinadas
propiedades intensivas, tales como el
punto de fusin, punto de ebullicin,
conductividad
elctrica,
etc.
Los
elementos estn formados por tomos.
Un tomo es la porcin ms pequea de
un
elemento
que
conserva
sus
propiedades
qumicas.
Las
investigaciones de los fsicos han
descubierto un variado nmero de
partculas
subatmicas
(Nivel
Subatmico), para nuestros fines
mencionaremos slo tres: protones,
neutrones y electrones. Los protones
son partculas con carga positiva; los
electrones, en cambio, tienen carga
negativa y masa muy pequea; los
neutrones son partculas neutras, sin
carga, y su masa es casi idntica a la de
los protones; los protones y neutrones
forman casi toda la masa de un tomo y
se localizan en el ncleo atmico. Si
combinamos un protn y un electrn se
forma un tomo de Hidrgeno, entidad

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con propiedades diferentes a las de un protn y un electrn (Nivel Atmico). Si
combinamos tomos de Hidrgeno entre s obtenemos Hidrgeno molecular (H 2), que es un
gas incoloro; si, en cambio, combinamos el H 2 con Oxgeno, otro gas, obtenemos agua, una
molcula (Nivel Molecular) cuyas propiedades todos conocemos y que no son las mismas que
las del H2 y el O2 y que tambin difieren de las propiedades de las partculas subatmicas y
de los tomos que stas forman.
La vida surgi a partir de tomos y molculas. Si combinamos molculas entre s, formamos
grandes y complejas molculas: las macromolculas, como las protenas y los cidos
nucleicos (Nivel Macromolecular). Estas macromolculas constituyen la materia prima que
forman los virus (Nivel Prebitico o Supramolecular) y las clulas (Nivel Celular). En el
Nivel Subcelular mltiples molculas se ensamblan y dan lugar a estructuras especializadas
como los organoides (mitocondrias, cloroplastos, etc). Podemos decir que la vida aparece
como propiedad definitoria en el Nivel Celular, o de otro modo, la clula es la porcin ms
sencilla de la materia viva que es capaz de realizar todas las funciones imprescindibles
para la vida.
En la mayor parte de los individuos pluricelulares, las clulas se organizan de acuerdo a sus
caractersticas y funciones conformando tejidos como el conectivo, muscular, epitelial,
nervioso (Nivel Tisular). Los tejidos estn ordenados en estructuras funcionales,
denominadas rganos como el corazn y los pulmones en los animales, o las hojas y las
races en las plantas. Las funciones biolgicas bsicas se llevan a cabo por un sistema o
aparato, que es una asociacin coordinada de tejidos y rganos. Los organismos o
individuos pluricelulares estn formados por sistemas que actan en forma coordinada y
rigurosa.
Existen otros niveles de organizacin biolgica, adems de los nombrados anteriormente,
donde las propiedades provienen de la relacin entre los organismos. Por ejemplo, el Nivel
de organizacin POBLACIN rene a todos los individuos de una misma especie que viven
en un mismo lugar, en el mismo tiempo, y que comparten el mismo hbitat. Estas
poblaciones interactan de distinta manera con otras poblaciones del lugar constituyendo
una COMUNIDAD, por ejemplo la poblacin de seres humanos de la ciudad de Buenos Aires
y el conurbano, aprovecha para alimentarse a las distintas poblaciones de animales y
plantas de la zona y se halla parasitada por las mismas poblaciones de parsitos
intestinales.
Esta comunidad comparte el mismo lugar fsico que presenta caractersticas particulares.
La unin de estos factores fsicos con los factores biolgicos constituyen los
ECOSISTEMAS.
Todos los ecosistemas de la Tierra estn relacionados, directa o indirectamente. Es por
ello que un cambio drstico o continuo de alguno de ellos indefectiblemente acarrear
cambios en los restantes. Del mantenimiento de un equilibrio entre los distintos
ecosistemas, depende la vida en el planeta.

Tabla 1.1- Niveles de Organizacin

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1. Nivel Subatmico

2. Nivel Atmico

3. Nivel Molecular (Monosacridos, Aminocidos, Nucletidos, etc.)

4. Nivel Macromolecular (Polisacridos, Protenas, cidos nucleicos, Lpidos complejos, etc. )

5. Nivel Prebitico o Supramacromolecular (Virus )

6. Nivel Subcelular (Organoides: Mitocondrias, Cloroplastos, Ribosomas, etc.)

7. NIVEL CELULAR {Clula Procarionte, Clula Eucarionte) Individuos Unicelulares: Bacterias,


Algas unicelulares, Levaduras, Protozoos, etc.

8. Nivel Tisular (Tejidos: Conectivo, Epitelial, Muscular, etc.)

9. rganos (Corazn. Pulmones. Estmago, etc.)

10. Sistemas y Aparatos (Aparato Circulatorio, Sistema digestivo, etc. )

11. Organismos (Individuos Pluricelulares, Animales y Vegetales Superiores).

12. Poblacin

13. Comunidad.

14. Ecosistema

15. Universo

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Durante el desarrollo de nuestra materia, nos ocuparemos de los niveles de organizacin


ms sencilla y haremos hincapi en el Nivel Celular de Organizacin.

ORGANIZACIN CELULAR
TEORA CELULAR
La clula es la unidad de vida ms pequea. Es la unidad anatmica y fisiolgica de todos los
seres vivos. Dos cientficos alemanes el botnico Mattias Schleiden (1804-1881) y el
zologo Theodor Schwann (1810-1882) fueron los primeros en sealar que " Los cuerpos de
las plantas y de los animales estn compuestos por clulas y por productos celulares "
enunciando el postulado inicial de la Teora Celular
Posteriormente, Rudolph Virchow (1821-1902) amplio la Teora Celular y afirm: " Todas las
clulas proceden de otra preexistente". Por lo tanto, las clulas no surgen por generacin
espontnea a partir de materia inanimada.
Otra importante conclusin de la Teora Celular afirma que todas las clulas actuales,
tienen un origen comn. La evidencia ms importante, sobre el origen comn de todas las
formas celulares, radica en las similitudes bsicas de sus estructuras y principalmente de
su composicin molecular.

Tabla 1.2 Postulados de la Teora Celular

1- Todos los seres vivos estn formados por clulas y productos celulares (unidad anatmica)

2- Las funciones de un ser vivo son el resultado de la interaccin de las clulas que lo componen
(unidad fisiolgica)

3- Toda clula slo puede tener origen en una clula progenitora.

4- Toda clula tiene la informacin hereditaria del organismo del cual forma parte, y esta informacin
pasa de una clula progenitora a una clula hija.

CARACTERSTICAS DE LAS CLULAS


Todas las clulas estn cubiertas por una membrana externa, llamada membrana

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plasmtica, que las separa de otras clulas y del medio circundante con el cual
intercambian materia y energa. Este intercambio est altamente regulado y es selectivo.
De esta forma la membrana plasmtica debe actuar no slo como limite celular sino
tambin como barrera selectiva. Por lo tanto la clula, mantiene una composicin qumica
muy ordenada y diferente a la del entorno.
Todas las clulas poseen un metabolismo o conjunto de reacciones qumicas, que posibilitan
el mantenimiento de la vida. Este metabolismo para sustentarse necesita de una o ms
fuentes de energa. Las clulas, necesitan de distintivos tipos de molculas energticas:
* Monedas energticas, como el ATP
* Molculas combustibles, como la glucosa o los cidos grasos
* Molculas de reserva de energa, como el glucgeno o el almidn
Dentro de las reacciones para obtener e interconvertir diferentes forma de energa, son
muy importantes las reacciones de oxido-reduccin o reacciones REDOX. En este tipo de
reacciones es esencial la participacin de las coenzimas de oxido-reduccin, como el NAD+
y el FAD.
Todas las clulas, almacenan en forma de ADN, cido desoxirribonucleico, a informacin
necesaria para controlar sus actividades (reproduccin, metabolismo), y para establecer su
propia estructura. El ADN, es un polmero formado por una secuencia lineal, de monmeros,
llamados nucletidos. Esta secuencia de nucletidos, especifica una secuencia de
aminocidos (estructura primaria de una protena). La especificidad de la secuencia de
aminocidos determinada por la secuencia de bases del ADN est regida por el cdigo
gentico. La secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, es un GEN. Las
protenas, son molculas que llevan a cabo gran parte de las funciones celulares. Muchas
protenas son enzimas, molculas encargadas de dirigir y regular el metabolismo celular.
Las enzimas aceleran las reacciones qumicas, hacindolas compatibles con la vida. De esta
manera las enzimas, dirigen la sntesis y degradacin de todas las molculas biolgicas,
incluidos lpidos, glcidos, protenas y los mismos cidos nucleicos. De esta forma, el ADN
al almacenar la estructura de las enzimas y otras protenas reguladoras, ejerce el control
del metabolismo celular.
El ADN utiliza un segundo cido nucleico, el ARN, cido ribonucleico, como intermediario. A
partir de la secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, se sintetiza una
secuencia de bases de ARN. Este proceso es llamado transcripcin. EL cido ribonucleico
encargado de transportar la informacin, recibe la denominacin de ARN mensajero. Este
ARN mensajero, porta la informacin necesaria para la sntesis de protenas, proceso
llamado traduccin, el cual tiene lugar en el citoplasma con la intervencin de dicho ARNm,
los ribosomas y el ARNt que porta los aminocidos.
Las clulas para perpetuarse necesitan reproducirse. Esto significa que la informacin
almacenada en el ADN debe duplicarse para poder ser transmitida a las clulas hijas. El
ADN tiene la excepcional caracterstica de ser una molcula capaz de autorreplicarse, es
decir de generar una copia de s misma. Este proceso es llamado duplicacin o replicacin.

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DIMENSIONES DE LAS CLULAS
Por qu son tan pequeas las clulas? Las clulas deben captar alimento y otros materiales
a travs de su membrana plasmtica y deben eliminar los productos de desecho, generados
en las distintas reacciones metablicas rpidamente antes de que estos se acumulen hasta
niveles txicos para la supervivencia celular. Por lo tanto, las clulas son pequeas, de
modo que en ellas las molculas recorren distancias cortas, lo que acelera las actividades
celulares.
Adems, a mayor superficie celular, mayor es el transporte de molculas a travs de la
membrana, siendo importante para la continuidad de los procesos metablicos la
proporcin superficie celular sobre volumen celular. Supongamos una clula de forma
cbica, cuanto ms grande es, su superficie crece proporcionalmente lado x lado, es decir a
la segunda potencia de la longitud de un lado, en cambio el volumen celular aumenta
proporcionalmente a la tercera potencia. Por lo tanto, el volumen celular aumenta ms que
su superficie a medida que la clula crece, determinando el lmite superior al tamao de la
clula en cuestin. Est clula slo podr iniciar el proceso de divisin celular (previa
duplicacin de su ADN) o perecer.
Por otra parte, debemos recordar que en las clulas el material Gentico (localizado en el
ncleo, en clulas eucariontes), posee un rea limitada de influencia sobre el citoplasma
circundante, que es el que incrementa marcadamente su tamao durante el crecimiento
celular, siendo otra limitante del tamao celular la relacin ncleo/citoplasma.

CLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS

CARACTERSTICAS PRINCIPALES
Todas las clulas se parecen y responden a un patrn comn por ms diversas que sean. Las
clulas de organismos pluricelulares son diferentes en su funcin, por ser distintas
estructuralmente, pero todas concuerdan con un patrn comn. Por ejemplo, aquellas
especializadas en la sntesis de lpidos, tendrn mayor desarrollo del retculo
endoplasmtico liso y sern distintas de las neuronas especializadas en la transmisin del
impulso nervioso, cuya especializacin es tan grande que pierden su capacidad de
reproducirse.
A pesar de las semejanzas y diferencias entre las clulas y que todas cumplen con los
postulados de la Teora Celular, se distinguen dos grandes tipos de clulas:

PROCARIOTAS (sin ncleo verdadero) y EUCARIOTAS (con ncleo).

Tabla 1.3- Principales caractersticas comunes entre clulas eucariotas y procariotas

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1- En ambos tipos celulares el ADN es el material gentico.

2- Ambos tipos celulares poseen membranas plasmticas como lmite celular.

3- Poseen ribosomas para la sntesis proteica.

4- Poseen un metabolismo bsico similar

5- Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.

Los eucariontes son organismos cuyas clulas poseen un sistema de endomembranas


(membranas internas) muy desarrollado. Estas membranas internas forman y delimitan
organelos donde se llevan a cabo numerosos procesos celulares. De hecho l ms
sobresaliente de estos organelos es el ncleo, donde se localiza el ADN. Justamente, el
trmino eucarionte, significa ncleo verdadero (eu: verdadero, carion: ncleo). Por lo tanto,
las clulas eucariontes, poseen diversos compartimentos internos, rodeados por
membranas. De esta forma es ms eficiente reunir a los sustratos y sus enzimas, en una
pequea parte del volumen celular total. Adems de conseguirse una mayor velocidad, las
membranas favorecen la aparicin de estructuras reguladoras que orientan el flujo de
molculas y su posterior conversin en otros productos. Ciertos procesos como la
fotosntesis y la cadena respiratoria estn altamente organizados gracias a la localizacin
de las enzimas en diferentes estructuras de membrana. Por otra parte, las membranas
tambin impiden la aparicin de sustratos en forma inespecfica en distintas regiones de la
clula, ya que actan como barrera selectiva. En cuanto al tamao, podemos decir que en
promedio una clula eucarionte es diez veces mayor que una clula procarionte. En cuanto al
material gentico, podemos decir que el ADN eucariota posee una organizacin mucho ms
compleja que el ADN procarionte.
Las clulas procariotas carecen de ncleo y generalmente son mucho menores que las
clulas eucariontes. El ADN de las clulas procariontes no est rodeado por una membrana,
pero puede estar limitado a determinadas regiones denominadas nucleoides. Las clulas
procariontes, al igual que las clulas eucariontes, poseen una membrana plasmtica, pero
carecen de membranas internas, que formen organelos. Sin embargo, debemos precisar que
en algunas clulas procariontes, la membrana plasmtica forma laminillas fotosintticas.
Las clulas procariontes poseen una caracterstica nica, una pared de peptidoglicanos, un
gran polmero de glcidos y aminocidos.

Tabla 1.4- Caractersticas Diferenciales entre el Modelo Celular Procariota y Eucariota

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Caracterstica

Clula Procariota

Clula Eucariota

Ncleo

No posee membrana nuclear

Posee membrana nuclear

Cromosomas

Un nico cromosoma circular y


desnudo

Posee uno o ms cromosomas


lineales unidos a protenas
(cromatina)

ADN extracromosmico

Puede estar presente como


plsmidos

Presente en organelas

Organelas citoplasmticas

No posee

Mitocondrias y cloroplastos, (los


cloroplastos presentes slo en
clulas vegetales)

Membrana plasmtica

Contiene las enzimas de la cadena Semipermeable, sin las funciones


respiratoria, tambin puede
de la membrana procariota
poseer los pigmentos
fotosintticos

Sistema de endomembranas

No posee

Presenta REG, REL, Golgi,


lisosomas, vacuolas y vesculas.

Pared celular

Capa rgida de peptidoglucano


(excepto micoplasmas)

No poseen pared de
peptidoglucano. Pueden poseer una
pared de celulosa o quitina

Esteroles

Ausentes (excepto micoplasmas)

Generalmente presentes

Citoesqueleto

Ausente

Presente. Formado por filamentos


proteicos.

Exocitosis y Endocitosis

Ausente

Presente

Ribosomas

70 S en el citoplasma

80 S en el retculo endoplsmico y

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en el citosol

Divisin

Fisin Binaria (amitosis)

Mitosis - Meiosis

Tamao

0,2 a 10 mm

Siempre superior a 6 mm

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS PROCARIOTAS

Fig. 1.2- Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

BACTERIAS, MICOPLASMAS Y ALGAS CIANOFCEAS

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Cuadro 1.1- Estructura de una Clula procariota
Las bacterias pueden definirse como organismos unicelulares procariontes que se
reproducen por fisin binaria. Contienen toda su informacin gentica en un nico
cromosoma bacteriano circular. Tambin poseen sistemas productores de energa y
biosintticos necesarios para el crecimiento y la reproduccin. Poseen como caracterstica
particular una pared rgida de peptidoglucano. Son generalmente de vida libre y poseen
ADN extracromosmico en forma de plsmidos, estos codifican genes de resistencia a
antibiticos o factores "sexuales" como los pili.
Los micoplasmas son las bacterias ms pequeas de vida independiente. Son muy flexibles y
deformables por lo que atraviesan los filtros de esterilizacin. Entre sus caractersticas
principales se encuentran: a) carecen de pared celular, b) en su membrana plasmtica
poseen esteroles, que no son sintetizados por la bacteria sino que son absorbidos del
medio de cultivo o del tejido donde se desarrolla. Los micoplasmas son resistentes a la
penicilina (carecen de pared de peptidoglucano) y por la misma razn no toman la coloracin
de Gram.
Las cianobacterias, anteriormente llamadas algas cianofceas (azulverdosas), son bacterias
Gramnegativas. Se encuentran presentes en estanques, lagos, suelo hmedo, cortezas de
rboles, ocanos y algunas en fuentes termales. La mayor parte de las cianobacterias son
auttrofos fotosintticos. Contienen clorofila a, que tambin se encuentra en plantas y
algas. La clorofila a y pigmentos accesorios se localizan en membranas fotosintticas,
llamadas laminas internas o laminillas fotosintticas. Muchas especies de cianobacterias
fijan nitrgeno, este proceso enriquece el suelo.
En la Tabla 1.4 se aprecian las diferencias ms importantes entre las clulas procariotas
(bacterias) y eucariotas
PLSMIDOS
Un plsmido es una molcula de ADN extracromosmico que se replica en forma autnoma,
por lo que al igual que el cromosoma es un replicn. Puede haber hasta 50 copias de un
plsmido en una bacteria. Funcionalmente los plsmidos son elementos genticos
accesorios, es decir que la bacteria puede vivir sin ellos. Sin embargo, la informacin que
contienen puede contribuir a la adaptacin de la bacteria al medio y a la evolucin de la
misma. Los plsmidos pueden contener genes que codifican factores de resistencia a
antibiticos (los plsmidos R) y factores de patogenicidad como exotoxinas. La evolucin
bacteriana a travs de los plsmidos es factible, ya que pueden ser intercambiados entre
distintas bacterias (por ejemplo, el plsmido F). Es decir que ciertos genes pueden
transferirse de una bacteria otra mediante el pasaje de plsmidos, a este mecanismo se lo
denomina conjugacin. Para que la conjugacin pueda llevarse a cabo las dos bacterias
deben ponerse en contacto fsico. Esto es posible debido a que una de las bacterias, posee
pili sexuales (pelos) en su envoltura. Estos pili se encuentran codificados en el mismo
plsmido F (plsmido conjugativo).
La bacteria que transfiere el plsmido es la que posee pili y se la denomina F+, la clula
receptora es F-.

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TRANSPOSONES
Los transposones son elementos genticos movibles, que se encuentran presentes en los
procariontes (aunque tambin en las clulas eucariontes). El descubrimiento de los
transposones se lo debemos a Barbara McClintock. Los transposones son fragmentos de
ADN que se mueven de una localizacin a otra del cromosoma. Esta transposicin es
catalizada por una enzima llamada transposasa. El gen de la transposasa est incluido
dentro del mismo transposn. Los transposones al ser elementos mviles, dentro del
genoma, pueden provocar mutaciones al insertarse en nuevas regiones del ADN.
PARED CELULAR. BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS
Por fuera de la membrana celular, se encuentra una pared celular rgida de peptidoglicano,
que est presente en todas las bacterias excepto los micoplasmas. La presencia de la pared
protege a la bacteria de la diferencia de presin osmtica entre el medio interno de la
bacteria y el medio exterior. De no existir la pared la bacteria estallara. Adems la pared
cumple funciones de proteccin como por ejemplo contra sustancias txicas.
Existen dos tipos de pared bacteriana que pueden diferenciarse por la Tincin de Gram
(siglo XIX). El primer grupo de bacterias son aquellas capaces de retener el colorante
cristal violeta luego de la decoloracin con alcohol-cetona. Estas bacterias son llamadas
Grampositivas. El segundo grupo est conformado por aquellas bacterias incapaces de
retener el colorante luego del tratamiento decolorante, por lo tanto son llamadas
Gramnegativas.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAM
POSITIVAS

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Autor: Elas Balm Gonzlez Camacho

Fig. 1.3- Esquema de la parecelular de una bacteria Grampositiva


La pared celular de las Grampositivas es ms gruesa que la de los Gramnegativas. Posee
peptidoglicano, cidos teicoicos y lipoteicoicos. El componente fundamental es la murena,
un peptidoglicano que solo se encuentra en los procariontes. La murena consiste en una
cadena lineal de dos azcares alternados N-acetilglucosamina y cido acetilmurmico. A
cada residuo de cido murmico se encuentra unido un tetrapptido compuesto de D- y Laminocidos. Aproximadamente un tercio de los tetrapptidos presentes participan de la
unin lateral entre cadenas adyacentes de murena. La pared celular es biolgicamente
estable, resiste el ataque de las enzimas de los mamferos, excepto de la lisozima que la
degrada. La sntesis de la pared puede ser afectada por antibiticos como la penicilina. Los
cidos teicoicos son el principal determinante antignico de las bacterias Grampositivas y
por lo tanto definen la individualidad inmunolgica de estas bacterias.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMNEGATIVAS

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Fig. 1.4- Esquema de la pared celular de una bacteria Gramnegativa


El espesor de la pared celular de una bacteria Gramnegativas es considerablemente menor
que el de una Grampositivas. La cantidad de murena es mucho menor en los Gramnegativas.
Los cidos teicoicos no estn presentes en las bacterias Gramnegativas. A ambos lados de
la fina pared de murena se encuentra un gel periplsmico, que define al llamado periplasma
(antes llamado espacio periplasmtico).
Por fuera del periplasma se encuentra una estructura exclusiva de las Gramnegativas, la
denominada membrana externa. Si bien es estructuralmente similar a una bicapa lipdica,
su composicin es diferente de la de otras membranas biolgicas. Esta bicapa es muy
asimtrica, la semicapa interna est compuesta por fosfolpidos, pero la semicapa externa
est compuesta por lipopolisacridos (LPS), altamente txico para el ser humano
(endotoxina).
Para obtener nutrientes las bacterias Gramnegativas, poseen porinas que son protenas que
forman poros en la membrana externa.
CPSULAS
Por fuera de la membrana externa de las Gramnegativas y de la gruesa pared de las
Grampositivas, se encuentra presente, en algunas bacterias, una cpsula o matriz
exopolisacrica, formada por un gel hidroflico. En general esta cpsula o matriz est
formada por polmeros de azcares. Las cpsulas permiten a las bacterias evadir los
mecanismos de defensa de los organismos pluricelulares, tambin tienen funciones de
adherencia a epitelios permitiendo de esta manera colonizar los tejidos del husped.

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS EUCARIOTAS

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Cuadro 1.2- Estructura de una Clula eucariota

Fig.1.5- Esquema de la ultraestructura tridimensional de una clula animal y sus


principales componentes

Presentan este modelo celular, los organismos de los reinos Protista, Hongos, Plantas y
Animales.
Si bien existe una gran diversidad entre estas clulas, el modelo bsico es similar,
presentando como estructura sobresaliente el ncleo celular.
NCLEO CELULAR

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Las diversas partes de una clula eucaritica interactan de forma integrada.
Esto es posible porque existe un centro primordial de control: el ncleo celular. Una
membrana doble, la envoltura nuclear (constituida por dos unidades de membrana), controla
el transporte, muy selectivo, de sustancias entre el ncleo y el citoplasma. El pasaje se
realiza a travs de los poros nucleares. La envoltura nuclear posee ribosomas adheridos a
la cara citoplasmtica y una estructura proteica en su parte interna llamada lamina nuclear,
que sirve como esqueleto al ncleo.
En el interior del ncleo, se encuentra el material gentico (ADN) asociado a protenas
bsicas llamadas histonas, formando una estructura fibrilar muy enrollada denominada
cromatina y el nuclolo, sitio de ensamblaje de los ribosomas (estructuras esenciales para
la sntesis de protenas, formados por ARN ribosomal y protena). El ARN ribosmico se
sintetiza en el nuclolo, y las protenas ribosmicas en el citoplasma, para pasar despus al
ncleo y de all al nuclolo, donde se unen al ARN ribosomal para formar los ribosomas.

Tabla 1.5- Caractersticas del Ncleo Celular y sus Componentes

Estructura : Ncleo Celular

Descripcin

Funcin

Ncleo

Estructura rodeada por una doble Regular la funcin celular.


membrana con poros. Contiene
Control del metabolismo,
cromatina/cromosomas y nuclolo. reproduccin (ciclo celular) y
diferenciacin celular.

Envoltura Nuclear

Estructura formada por dos


unidades de membrana unidas a
nivel de los poros nucleares.

Continuacin del REG. Posee


poros que regulan el pasaje
entre ncleo y citoplasma

Nuclolo

Cuerpo granular en el ncleo, que


consiste en ARN y protenas.

Sitio de sntesis del RNA


ribosmico y de ensamble de
los ribosomas.

Cromatina

ADN asociado a protenas, tanto


estructurales (histonas) como a
protenas regulatorias. La
cromatina es visible durante la
interfase celular

Empaquetamiento (plegamiento)
de ADN. El ADN compone los
genes. Funciones regulatorias
de la transcripcin gentica.

Cromosomas

ADN asociado a protenas, en

Contienen los genes que son las

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estado superenrrollado. Visible en unidades de informacin, que
forma de estructuras cilndricas rigen las funciones y
cuando la clula se divide, ya sea estructura celular.
en mitosis o meiosis.

Rodeando al ncleo encontramos el CITOPLASMA, coloide donde predominan como


constituyentes agua, iones, enzimas y donde se encuentran incluidos los organelos
celulares. El citoplasma se encuentra separado del ambiente exterior por la membrana
plasmtica.
MEMBRANA PLASMTICA
Estructuralmente est compuesta por una bicapa fosfolipdica. El colesterol est presente
en las clulas animales, pero est ausente, en general, en plantas, hongos y procariontes
(salvo micoplasmas). La membrana plasmtica tambin contiene mltiples protenas con
diversas funciones. Podemos dividirlas en dos grandes grupos: a) protenas integrales de
membrana y b) protenas perifricas de membrana. Las primeras atraviesan la membrana
de lado a lado, mientras que las segundas estn en contacto con la membrana, pero no la
atraviesan. Algunas son enzimas reguladoras, otros receptores hormonales. Existen
tambin protenas transportadoras y canales reguladoras del movimiento de iones y
molculas a travs de la membrana plasmtica, de all su enorme especificidad. Otra
funcin importante de la membrana es la comunicacin intercelular y el reconocimiento de
diversos tipos de molcula (hormonas, virus, anticuerpos, toxinas, etc.) que interactan con
ella. En general esta funcin es llevada a cabo por glucoprotenas y glucolpidos, que se
encuentran solo en el lado externo de la membrana plasmtica. Se cree que los glcidos
juegan un importante papel en la adhesin entre clulas. A esta capa, de glucolpidos y
glucoprotenas se la denomina glucoclix.
SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS
Este sistema se compone de sistemas membranosos interconectados entre s, como el
retculo endoplalmtico liso o agranular (REL), el retculo endoplasmtico rugoso o granular
(REG) y el aparato de Golgi. Estas estructuras permiten la circulacin de sustancias
siempre dentro de formaciones limitadas por membrana interactuando por medio de
vesculas.

Tabla 1.6 - Organizacin del Sistema de endomembranas

Estructura

Descripcin

Funcin

Retculo endoplasmtico rugoso


(REG)

Membranas internas en forma de Sntesis de Protenas destinadas a


sacos aplanados y tbulos. Con
secrecin (exportacin) o a la
ribosomas adheridos a su

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superficie externa. La envoltura
nuclear es parte del REG.

Retculo endoplasmtico liso (REL) Membranas internas donde


predominan los tbulos. Sin
ribosomas adheridos.

incorporacin de membranas.

Sitio de biosntesis de lpidos y


desintoxicacin de medicamentos.

Aparato de Golgi

Pilas de sacos membranosos


Modificacin de protenas
aplanados (dictiosomas). Funcional (glucosilacin). Empaquetamiento
y estructuralmente polarizado.
de protenas secretadas.
Clasificacin de las protenas que
se distribuyen a membrana
plasmtica, secrecin o lisosomas.

Lisosomas

Vesculas (sacos) membranosas

Vacuolas

Sacos membranosos
Transporte de materiales,
principalmente, en plantas, hongos deshechos y agua.
y algas.

Contienen enzimas hidrolticas, que


desdoblan materiales ingeridos,
secreciones y deshechos celulares.

ORGANELAS

Tabla 1.7 - Principales organoides membranosos de la clula eucariota

Estructura

Descripcin

Funcin

Mitocondria

Organelas semiautnomas. Poseen Metabolismo aerbico. Sitio


ADN y ribosomas tipo procarionte. de muchas de las reacciones
Una doble membrana les sirve de de la respiracin celular. All
envoltura. La membrana interna
se realizan el ciclo de Krebs,
forma las crestas mitocondriales. la cadena respiratoria y la
Fosforilacin oxidativa. Es
decir la transformacin de la
energa de lpidos o glucosa
(molculas combustibles) en

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ATP (moneda energtica).

Cloroplasto

Organela semiautnoma. Posee


La clorofila capta la energa
ADN y ribosomas tipo procarionte. luminosa para formar ATP y
Una doble membrana envuelve a
otros compuestos con gran
los tilacoides. La clorofila, se
cantidad de energa. Estos
encuentra en las membranas
compuestos altamente
tilacoidales.
energticos sirven para
sintetizar, glucosa a partir de
CO2.

Microcuerpos (Peroxisomas)

Vesculas membranosas que


contienen diversas enzimas
relacionadas con el metabolismo
del oxigeno y el perxido de
hidrogeno. No poseen ADN ni
ribosomas

Sitio de muchas reacciones


metablicas. Enzimas que
protegen de la toxicidad del
oxigeno, por ejemplo la
catalasa.

RIBOSOMAS Y POLIRRIBOSOMAS
Son estructuras redondeadas que a diferencia de las anteriores, carecen de unidad de
membrana.
Estn constituidos por dos subunidades, mayor y menor separadas entre s. Ambas
subunidades se unen cuando leen una molcula de ARNm. Las subunidades estn formadas
por ARNr y protenas, siendo ensambladas en el nuclolo. Cuando hay varios ribosomas
unidos a una molcula de ARNm, lo denominamos polirribosoma.
La funcin de los ribosomas es sintetizar protenas.
CITOESQUELETO
El citoesqueleto es una red de fibras protenicas. Esta red es dinmica encontrndose en
constante cambio. Sus funciones, son esenciales para las clulas eucariontes y abarcan
motilidad celular, forma, diferenciacin, reproduccin, regulacin, etc.

Tabla 1.8 - Organizacin General del citoesqueleto

Estructura

Microtbulos

Descripcin

Funcin

Tubos huecos compuestos por la

Sostn estructural,

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participan en el movimiento
de organelas y la divisin
forma monomrica de la protena
celular (aparato mittico),
tubulina. (monmero globular)
componentes de cilios,
flagelos y centriolos.

Filamentos de actina
(microfilamentos)

Filamentos intermedios

Estructura slida en forma de


huso consistente en la protena
actina. (monmero globular)

Sostn estructural,
participan en el movimiento
de la clula y sus organelos y
en la divisin celular.

Sostn estructural. Forman


Protenas filamentosas, en forma
redes que conectan la
de tubos. Compuestas por
membrana plasmtica con la
monmeros fibrosos.
envoltura nuclear.

Centrolos

El huso mittico se forma


entre los centrolos durante
Pares de cilindros huecos,
la divisin de clulas animales,
localizados cerca del centro de la
fija y organiza los
clula, formados por microtbulos.
microtbulos. Estn ausentes
en las plantas superiores.

Cilios

Movimiento de algunos
Proyecciones relativamente cortas
organismos unicelulares. Se
que se extienden desde la
utiliza para mover materiales
superficie celular. Compuestas por
en la superficie de algunos
microtbulos.
tejidos.

Flagelos

Proyecciones largas compuestas


por microtbulos. Cubiertos por
membrana plasmtica

Locomocin celular de
espermatozoides y algunos
organismos unicelulares.

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Fig. 1.6- Esquema de componentes del citoesqueleto

CLULA EUCARIOTA ANIMAL Y VEGETAL

Fig. 1.7- Esquemas de una clula vegetal (izquierda) y tridimensional de un cloroplasto con
sus componentes (derecha)

Cuadro 1.3- Modelos bsicos de clula eucariota


Las clulas eucariontes poseen dos modelos estructurales bsicos: a) clulas auttrofas
fotosintticas y b) clulas hetertrofas.
Las clulas auttrofas son aquellas que sintetizan su propio alimento, es decir sus propias

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molculas combustibles. En este caso las clulas eucariontes vegetales son clulas
auttrofas fotosintticas, por lo tanto utilizan la luz solar como fuente de energa.
Transforman la energa solar en energa qumica, este proceso es llamado fotosntesis. La
fotosntesis en las clulas vegetales se lleva a cabo en un organelo membranoso llamado
cloroplasto. Dentro del cloroplasto se encuentran sacos membranosos apilados,
denominados tilacoides, en cuyas membranas encontramos el pigmento llamado clorofila,
esencial para la fotosntesis.
Las clulas hetertrofas son aquellas que no sintetizan su propio alimento sino que
necesitan una fuente externa de energa tanto como de materiales de construccin de sus
propias molculas. Las clulas animales (y los hongos), son clulas eucariontes hetertrofas.
Las clulas animales y las clulas vegetales poseen unas organelas membranosas llamadas
mitocondrias, donde se lleva a cabo la respiracin celular. En este proceso son rotos los
enlaces de alta energa de las molculas combustibles orgnicas. Esta energa liberada es
utilizada para la sntesis de las monedas energticas como el ATP. El ATP es esencial para
las diferentes funciones celulares. Para que este proceso se lleve a cabo dentro de las
mitocondrias es necesaria la presencia de oxigeno.
Por lo tanto en ambos tipos celulares son necesarias las mitocondrias, para obtener energa
qumica en forma de ATP a partir de las molculas combustibles. Pero es diferente el
origen
De las molculas orgnicas utilizadas como combustibles. En el caso de las clulas vegetales
(auttrofas), ellas sintetizan sus propias molculas combustibles en los cloroplastos, en el
proceso de fotosntesis. En cambio las clulas animales (hetertrofas), necesitan una
fuente externa de molculas energticas que sirvan como combustible celular.

Tabla 1.9 - Principales diferencias entre clulas animales y clulas vegetales

Estructura

Clula animal

Clula vegetal

Pared celular

Ausente

Pared celular constituida por


celulosa.

Aparato mittico (Huso


acromtico )

Astral

Anastral

Centrolos

Presente

Ausente

Vacuolas

Vacuolas pequeas

Vacuolas grandes, puede ser una

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grande central

Metabolismo

Hetertrofo

Auttrofo

Mitocondrias

Presentes

Presentes

Cloroplastos

Ausentes

Presentes

Fig. 1.8- Esquema de la ultraestructura de una clula animal idealizada

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Fig. 1.9- Esquema de la ultraestructura de una clula vegetal idealizada

VIRUS
Hacia fines del siglo pasado se formulo la teora de que cada enfermedad era producida
por un germen especfico. Hasta ese momento los patlogos estaban convencidos de que
para cada enfermedad sera posible encontrar el microorganismo responsable, utilizando
las siguientes tcnicas: a) observacin del germen con la ayuda del microscopio, b) cultivo
sobre un medio nutritivo y c) retencin por filtros. Sin embargo, en 1892, Iwanowski (o
Ivanovsky?) pudo demostrar que el agente productor de la enfermedad del mosaico de
tabaco pasaba a travs de los filtros para bacterias y no poda ni verse ni cultivarse. Luego

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en 1898 Beijerinck, determin que la enfermedad del mosaico del tabaco era provocada por
un nuevo agente infeccioso a los que denomino virus filtrables (virus: palabra de origen
latino que significa veneno). Los virus estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y
afectan a todo tipo de organismos, tanto del reino animal, vegetal o protista.
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LOS VIRUS
La estructura de los virus est integrada por dos tipos de macromolculas: cidos nucleicos
y protenas, los que forman las partculas virales o viriones. Bsicamente existen dos tipos
de partculas virales: partculas virales simples (virus desnudo) o partculas virales
envueltas (virus envuelto). El virus desnudo consta de un cido nucleico (genoma) asociado a
protenas y una cubierta proteica o cpside. Por otra parte los virus envueltos aaden a
esta estructura bsica una envoltura lipoproteica de origen celular. La funcin de la
cpside es de servir al cido nucleico como proteccin y vehculo.
Postulado de Lwoff

"nicamente sern considerados virus aquellos agentes infecciosos cuya partcula


elemental contenga un solo tipo de cido nucleico". Es decir poseen ARN o ADN, pero no
ambos tipos de cidos nucleicos funcionales a la vez. Por lo tanto los virus pueden ser ADN
o ARN virus. Debido a la estructura simple de virus, para su multiplicacin dependen en
forma absoluta de la clula husped que infectan. Por lo tanto consideraremos a los virus
como parsitos intracelulares obligados.

REPLICACIN VIRAL
La clula husped, una vez infectada, sintetizar nuevas molculas de cido nucleico viral,
ya que el genoma viral tomara el control de las actividades metablicas de la clula. Bajo
este control, tambin se producirn gran cantidad de protenas virales. De esta manera el
ensamblado de nuevas partculas virales provendr de la asociacin de las nuevas molculas
de cido nucleico viral con las protenas. Este proceso es muy diferente de la reproduccin
celular, tanto de los procariontes como de los eucariontes. Por lo tanto es ms apropiado
hablar de REPLICACION VIRAL.
LOS VIRUS COMO PARSITOS INTRACELULARES
Hasta el momento no se ha podido demostrar que ningn virus aislado pueda utilizar o
almacenar energa mediante procesos similares a la respiracin, tampoco pueden sintetizar
protenas. Es decir no tienen metabolismo propio, dependiendo en forma absoluta del medio
ambiente celular.
El parasitismo de los virus se ejerce a nivel gentico, ya que el genoma viral dentro de la
clula desplaza al genoma de la clula hospedadora del control celular.
PROVIRUS
Anteriormente hemos explicado que los virus, infectan las clulas y hacen replicas de si
mismos. Luego abandonan la clula husped y pasan a otra, recomenzando su ciclo. Pero

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tambin puede ocurrir que el genoma viral se integre al ADN del husped. Cuando el
genoma viral se integra al genoma celular y se replica junto con este se lo denomina
PROVIRUS. Un provirus puede activarse espontneamente o bien expuesto a diversos
estmulos, una vez activado puede inducir la produccin de virus completos. Los provirus
pueden modificar la morfologa celular y su metabolismo, esto puede deberse a la
produccin de alguna protena viral. Estos cambios en la estructura celular, generalmente
asociados a cambios en la membrana celular, inducidos por un provirus reciben el nombre de
transformacin. En algunos casos estas clulas transformadas por los provirus pueden ser
cancerosas.
LOS VIRUS COMO AGENTES INFECCIOSOS
El parasitismo celular obligado es la causa bsica por la cual un virus puede causar dao. La
relacin que establece un virus y su clula husped es variable. El resultado de la
interaccin depende tanto del virus en cuestin como de la clula husped. Por ejemplo, se
denominan virus citocdicos, a los que como resultado de su multiplicacin, producen una
rpida induccin hacia la muerte celular. Por otra parte se encuentran los virus no
citocdicos, que son aquellos que no provocan la muerte celular. Ejemplos de virus no
citocdicos serian los virus moderados y los virus oncognicos. Los virus moderados son
aquellos que producen partculas virales y no producen la muerte celular. Han llegado con la
clula husped a un estado de equilibrio ms o menos estable. Luego estn los virus
oncognicos, capaces de estimular la divisin celular, estos cambios pueden ser
irreversibles si la clula pierde la capacidad de regular su ciclo celular. Este estado se
denomina transformacin celular.
Los virus no citocdicos pueden causar dos tipos de infecciones:
1- Las infecciones latentes, donde el virus permanece sin manifestarse, alojado en clulas
no productoras. Ante determinados estmulos, estrs, enfermedades, exposicin a la luz
solar, el virus se reactiva, recomenzando la sntesis de cidos nucleicos y protenas virales.
Ejemplos: L Herpes simplex, Varicela zoster.
2- Las infecciones crnicas, donde de una persona enferma siempre es posible obtener
virus infeccioso, aun por periodos muy prolongados de tiempo. Por ejemplo, virus de la
hepatitis B, Epstein-Barr, virus de la rubola.

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Fig. 1.10- Virus del Mosaico del Tabaco (ARN virus) y Bacterifago T4 (ADN virus)
MORFOLOGA VIRAL
Los virus poseen gran variedad de formas y tamaos. Por ejemplo los virus que al
microscopio electrnico aparecen aproximadamente esfricos se denominan isomtricos. En
estos virus el cido nucleico est rodeado por una cpside (caja) proteica. Las subunidades
estructurales que forman la cpside, visibles al microscopio electrnico, se denominan
capsmeros. A su vez los capsmeros estn formados por subunidades proteicas. La
cpside por su naturaleza antignica es la que determina la identidad viral.
El cido nucleico viral no se encuentra desnudo, sino que est asociado a protenas distintas
de las de la cpside, cuya funcin puede ser estructural (plegado del ADN) o enzimtica
(polimerasa). Al conjunto de cido nucleico y protenas asociadas se lo denomina "core". Por
ltimo diremos que los virus donde la cpside rodea directamente al cido nucleico (es
decir que no hay un "core" evidente), el conjunto de cpside y cido nucleico recibe la
denominacin de nucleocpside.
GENOMA VIRAL
El genoma, que puede encontrase en los distintos tipos de virus, puede sistematizarse de
acuerdo a diversos criterios:
1- Tipo de cido nucleico: ADN o ARN
2- Polaridad o sentido: + o - (aplicado principalmente a los ARN virus)
3- Nmero de cadenas: monocatenario o bicatenario
4- Genoma circular o desnudo
5- Genoma entero o fragmentado
Debemos recordar que las cadenas de un cido nucleico de doble cadena, son de polaridad

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(sentido) opuesto. Por convencin se considera que si una tiene sentido + la otra ser -.
De acuerdo a este criterio se considera que un virus es + (o cadena +), cuando su genoma
monocatenario tiene la misma polaridad que un ARNm. Es decir el mismo genoma viral,
puede actuar dentro de la clula como ARNm y llevar a cabo directamente la sntesis de
protenas virales. Los "virus +", pueden infectar con el cido nucleico solo, salvo los
retrovirus que siendo +, necesitan una transcriptasa reversa asociada al genoma para poder
infectar. Por el contrario, se denomina "virus -" cuando el genoma no puede actuar
directamente como mensajeros. El ARN - puede actuar como molde, para la sntesis de
ARN +, el ARNm viral.

Fig. 1.11- Esquema y microfotografa electrnica de un Bacterifago


BACTERIFAGOS
Los Bacterifagos son virus especficos de las bacterias. Bacterifagos, significa que se
"alimenta" o multiplica a expensas de bacterias.
Los Bacterifagos que infectan clulas husped, pueden establecer dos tipos de procesos:
1- Ciclo Ltico: en este tipo de ciclo el virus produce inmediatamente gran cantidad de
cidos nucleicos virales y protenas de la cpside. Estos se ensamblan produciendo nuevas
partculas virales que son liberadas al medio al producirse la lisis celular.
2- Ciclo Lisognico: en este ciclo la relacin entre clula husped y virus, puede prolongase
por periodos variables de tiempo. El virus integra su genoma al cromosoma bacteriano,
replicndose conjuntamente el cido nucleico del parsito y el del husped. Un virus
bacteriano integrado al cromosoma se denomina profago. Por lo tanto el profago se replica
junto con el ADN bacteriano. En determinadas circunstancias (por ejemplo ruptura del
ADN bacteriano por luz ultravioleta o agentes qumicos), el profago se activa, y comienza la
produccin de cido nucleico viral y protenas virales, produciendo luego la lisis celular. Las
bacterias que portan profagos se denominan lisognicas. Los Bacterifagos que pueden
integrarse como profagos y que no lisan inmediatamente a las clulas se denominan fagos

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atenuados.

Fig. 1.12- Esquema del Ciclo Ltico Viral (de multiplicacin) y del Ciclo Lisognico Viral
LOS VIRUS COMO VECTORES
Los virus pueden servir como vehculos (vectores), para transferir material gentico de una
clula a otra. Este fenmeno se denomina transduccin. Durante el ciclo ltico, el ADN del
husped queda fragmentado y alguno de esos fragmentos puede ser tomado al azar y
quedar dentro de la cpside. De esta forma, cuando el virus infecta una nueva clula,
transporta genes de una antigua clula husped a otra nueva.
VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (HIV)
El SIDA (sndrome de inmunodeficiencia humana), es una enfermedad infecciosa crnica
producida por el virus HIV. Esta enfermedad est caracterizada por una deficiencia
inmunolgica progresiva, con la expresin clnica de infecciones oportunistas y/o tumores.
El HIV es un retrovirus. Los retrovirus son virus cuyo material gentico es ARN. Una vez

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que el virus ha penetrado en una clula, una enzima llamada retrotranscriptasa, produce
ADN a partir del ARN viral. El ADN recin sintetizado viaja al ncleo y se integra al ADN
cromosmico. En este punto la infeccin se ha hecho permanente, y la forma integrada del
virus se denomina provirus. El HIV es un LENTIVIRUS. Por lo tanto su ciclo vital
intracelular (ciclo de infeccin) puede prolongarse por aos. Sus genomas son complejos y
sus mecanismos regulatorios son solo parcialmente conocidos. Los Lentivirus causan
infecciones crnicas.
El sistema inmune del hombre reconoce las protenas del HIV como antgenos y produce
anticuerpos contra ellas. Por lo tanto una persona infectada tendr circulando en sangre
anticuerpos contra las protenas del HIV. En este aspecto se basa el test de diagnstico
ms utilizado en la actualidad: el test de ELISA (inmunoensayo ligado a enzima).

Fig. 1.13- Esquema del Virus de la Inmunideficiencia Hunama (HIV)

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El virin del HIV, est recubierto por una membrana lipdica, por lo tanto se trata de un
virus envuelto. De la membrana sobresalen glicoprotenas: la gp41 y la gp120. La membrana
compuesta por lpidos y protenas recubre el ncleo (core) del virin, formado por las
protenas p28 y p24. En el core se encuentran el ARN del virus y la enzima transcriptasa
inversa.

Ciclo Vital Intracelular de un retrovirus


Empieza cuando un virin o partcula vrica, se une a la superficie externa de una clula
susceptible. Este primer estadio del ciclo se lo denomina adsorcin. Luego el virus fusiona
su envoltura lipoproteica con la membrana celular, introduciendo en la clula su
nucleocpside junto con el ARN que constituye su dotacin gentica. En cada partcula viral
se encuentran dos cadenas de ARN vrico. A este proceso se lo conoce como penetracin.
La enzima transcriptasa inversa es una ADN polimerasa que primero produce una copia de
ADN simple cadena que a continuacin se copia a si misma obtenindose ADN doble cadena.
Por lo tanto este ADN doble cadena se obtuvo a partir de ARN. La sntesis del ADN doble
cadena ocurre junto con la degradacin del ARN original. El ADN doble cadena (provirus),
emigra hacia el ncleo y se integra en el propio ADN celular. La integracin de este ADN
doble cadena en el cromosoma del husped es necesaria para la sntesis de nuevas
molculas de ARN, por la ARN polimerasa celular, ya que el virus carece completamente de
la maquinaria metablica necesaria para realizar la transcripcin y la sntesis de protenas
necesarias para la cpside y la misma transcriptasa reversa.

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Autor: Elas Balm Gonzlez Camacho

Fig. 1.14- Esquema del Ciclo Vital Intracelular de un Retrovirus


VIRUS DE LA HEPATITIS B (VHB)
La hepatitis B en s misma, es un problema sanitario grave y muy extendido. Pero encierra
una amenaza peor. El virus que la produce es el carcingeno humano ms importante
despus del tabaco. Trescientos millones de personas, la mayora habitantes con escasos
recursos asistenciales, estn crnicamente infectados con el virus y tienen una
probabilidad muy elevada de contraer cncer de hgado. En el tercer mundo, el virus suele
transmitirse de madre a hijo, durante el primer mes de vida, y principalmente durante el
nacimiento. Si el pequeo es nia, se convertir probablemente en portadora crnica y
transmitir el virus de la hepatitis B (VHB) a su descendencia cuando alcance la edad
frtil. En cambio en los pases desarrollados su incidencia es mayor en adultos, que por su
profesin tienen contacto directo con la sangre (cirujanos, enfermeras, dentistas), los
receptores de sangre u hemoderivados o personas que reciben tratamientos de dilisis o
drogadictos intravenosos.
El virus de la hepatitis B (VHB) es mucho ms contagioso que el HIV.
EXPERIMENTO DE FRENKEL-CONRAT Y SINGER

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Fig. 1.15- Esquema del experimento de Frenkel - Conrat y Singer


Este experimento demostr que el ARN es el material gentico del virus del mosaico del
tabaco. Los resultados del experimento son extensibles a otros tipos de virus con genoma a
ADN.
VIROIDES
Los viroides son agentes infecciosos que poseen al igual que los virus un solo tipo de cido
nucleico y son parsitos absolutos, pero y esta es la gran diferencia con los virus, carecen
de cpside y envoltura. Por lo tanto los viroides estn constituidos solo por una secuencia
de nucletidos, adems los viroides carecen de informacin para la sntesis de protenas,
en cambio los virus siempre poseen dicha informacin.

PRIONES

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Las partculas infecciosas llamadas priones, estn constituidas nicamente por una protena
de aproximadamente 250 aminocidos. Es decir carecen completamente de cidos
nucleicos. Es esta la razn por la cual fue resistida durante mucho tiempo, la hiptesis de
que las protenas por si solas podan ser la causa de enfermedades infecciosas. De acuerdo
al dogma imperante hasta 1980, las enfermedades transmisibles (infecciosas) necesitaban
material gentico, para que la infeccin se asentara en el husped. Hasta ese momento
eran los virus los agentes infecciosos ms pequeos conocidos, y todos ellos poseen ADN o
ARN como material gentico necesario para codificar sus protenas y dirigir la replicacin
viral en el husped.
Pero ahora sabemos que las partculas protenicas infecciosas (priones), pueden ser el
sustrato de diversas enfermedades, hereditarias o contagiosas. Este comportamiento dual
tanto infeccioso como hereditario era desconocido. Posteriormente se descubri que los
priones se multiplican por una va increble y desconocida hasta ese momento: convierten
protenas normales en MOLECULAS INFECCIOSAS, con solo alterar la estructura
proteica.
Las encefalopatas espongiformes transmisibles (EET), son las enfermedades
degenerativas del sistema nervioso central que afectan a animales y seres humanos
causadas por los priones. Se denominan espongiformes ya que el cerebro adquiere un
aspecto parecido al de una esponja. Las EET que sufren los seres humanos son el Kuru (o
muerte de la risa), la enfermedad de Creutzfeldt -Jakob (ECJ), el sndrome de GerstmanStraussler-Scheinker (GSS) y el insomnio Familiar Fatal (IFF); las EET de animales,
incluyen el scrapie (del ingls to scrape, raspar, por la tendencia de los animales infectados
a rasparse contra postes , troncos o cercas para combatir la picazn) de ovejas y cabras, la
enfermedad de agotamiento crnico de mulas y ciervos en cautiverio y la encefalitis
espongiforme bovina (EEB), o enfermedad de la vaca loca.
Las EET se caracterizan por su prolongado periodo de incubacin (en el hombre puede
tener un periodo de incubacin de 30 o ms aos), generalmente asociadas a declives
progresivos de las funciones motoras y cognitivas (enfermedad activa), y por su evolucin
inevitablemente fatal. Las EET en el ser humano generalmente aparecen en personas de
edad avanzada.
Aparentemente todas las EET son causadas por el cambio en la estructura de una protena
normalmente presente en las membranas celulares, denominada protena prinica (PrP). La
forma anormal de la PrP se designa PrPsc (scrapie), para diferenciarla de la forma normal
llamada PrPc (celular). La secuencia de aminocidos (estructura primaria) de la PrP c y la
PrPsc es idntica lo que varia es su conformacin (plegamiento en el espacio). De acuerdo a
esta teora la protena alterada (PrP sc), puede unirse a la protena normal (PrP c) y cambiar
su conformacin, transformndola a su vez en una protena alterada. De esta forma se
propagara la enfermedad y se generaran nuevas protenas infecciosas. De esta forma el
pasaje de la forma normal a la patolgica es catalizada por el mismo prin (PrP sc), por lo
tanto solo hace falta una pequea cantidad de este para provocar la transformacin de
toda la protena normal, ya que se trata de un fenmeno de crecimiento exponencial.
Recientemente, se ha aceptado que los priones pueden ser transmitidos, posiblemente por
comida, inoculacin directa en el cerebro, piel, msculo o estmago. Por esto la epidemia de
EEB, ocurrida en Gran Bretaa provoco un enorme inters en todo el mundo.

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Desafortunadamente han aparecido en ese pas una nueva variedad de la ECJ (casos en
personas mucho ms jvenes que lo usual), lo que probara una relacin causal entre la EEB
y los casos seres humanos. El gobierno britnico tuvo que admitir la posibilidad de que la
aparicin de estos extraos casos de la ECJ hubieran sido provocados al ingerirse carne
vacuna infectada (tejido nervioso).
Al principio habamos hablado de la dualidad de los priones, por un lado partculas
infecciosas y por los otros responsables de enfermedades hereditarias. Esto es
naturalmente confuso. Por ejemplo, ciertas enfermedades prinicas como la GSS, son
hereditarias. Esta enfermedad tiene una herencia autosomal y dominante, lo cual significa
que si un padre desarrolla la enfermedad, los hijos tienen un 50 por ciento de
probabilidades de desarrollarla. La explicacin a estos hechos vino dado por el
descubrimiento de mutaciones gnicas puntuales en la secuencia de nucletidos del gen que
codifica la PrP . Estos genes mutados provocan cambios en la secuencia de aminocidos de
la protena PrP. Estos cambios podran incrementar la probabilidad de la transformacin de
la protena PrP mutante de una forma normal a una anormal patgena. Diferentes
mutaciones en el gen provocaran diferentes protenas mutantes, con mayor o menor
tendencia a transformarse en la forma aberrante patgena. Esto explica tambin las
distintas enfermedades prinicas hereditarias, la ECJ espordica, un 15 por ciento de los
casos hereditaria y la GSS autosomal dominante.

Tabla 1.10- Principales Enfermedades causadas por Priones

Enfermedad

Sntomas tpicos

Va de Propagacin

Distribucin

Kuru

Prdida de coordinacin, Infeccin, probablemente Nueva Guinea


demencia
por canibalismo
2600 casos

ECJ

Demencia, prdida de
coordinacin

De ordinario desconocida 1 persona por milln en


(espordica)
todo el mundo
En un 15 por ciento de los 100 familias identificadas
casos hereditaria, por
(forma heredada)
mutacin del gen que
determina la protena PrP Forma infecciosa 80
casos
Raramente por infeccin
(por ejemplo por un
transplante u otro
tratamiento mdico)

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EGSS

Prdida de coordinacin, Herencia de una mutacin 50 familias identificadas


demencia
en gen de la PrP

IFF

Trastornos del Sueo,


insomnio demencia

Herencia en una mutacin 9 familias identificadas


del gen de la PrP

TCNICAS DE ESTUDIO DE LA CELULA


UNA COMBINACIN DE MTODOS AYUDA AL ESTUDIO DE LA CLULA
El desarrollo de la biologa celular y molecular se produce en forma paralela a la invencin
de instrumentos y tcnicas biofsicas y bioqumicas que extienden los sentidos a nuevos
lmites y acrecientan el conocimiento de la estructura y funcionamiento de la clula. El
acceso a este tipo de conocimiento resulta dificultoso pues las clulas son pequeas y
transparentes. El ojo humano slo puede discriminar dos puntos separados por ms de 0,1
mm 100 micrmetros (mm). La mayora de las clulas son mucho ms pequeas y se
necesita del microscopio ptico cuyo lmite de resolucin es de 0,2 mm. Para estructuras
ms pequeas, que midan entre 0,4 y 200 nanmetros (nm), se requiere del microscopio
electrnico. Para mayores detalles, consulte la Tabla 1a.2
Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean corrientemente en
microscopia no son las de uso cotidiano. En la siguiente tabla se expresan aquellas unidades
y sus equivalencias:

Tabla 1.11-Medidas utilizadas en microscopia

Unidad

Smbolo

Equivalencia en metro (m) Utilizacin principal en citologa

Centmetro

cm

0,01 metro

Objetos macroscpicos
Huevos grandes.

simple

vista.

Milmetro

mm

0,001m

Objetos macroscpicos
Clulas muy grandes.

simple

vista.

Micrmetro

mm

10-6 m

Microscopia de luz (ptica)


Casi todas las clulas y organelos grandes.

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Nanmetro

nm

10-9 m

Microscopia electrnica.
Organelas
grandes.

Angstrom

10-10 m

pequeas,

macromolculas

Microscopia
electrnica.
Mtodos
de
difraccin de rayos X. Molculas y tomos.

Por lo tanto: 1m=102 cm=102 mm=103 mm=106 nm=109


Por otra parte, la mayora de los componentes de la clula viva son transparentes debido a
su alto contenido de agua. Al disecarla no presenta un significativo contraste. Entonces la
tincin selectiva de ciertos componentes celulares resuelve el problema del contraste. Sin
embargo la mayora de estas tcnicas conduce a la muerte de la clula y an ms, a cambios
qumicos y morfolgicos que no se encuentran en las clulas activas y en la matriz
extracelular.
Cabe destacar que algunos pigmentos del citoplasma y de organoides vegetales pueden
absorber determinadas longitudes de onda (l) [1] y no necesitan de previo tratamiento para
su observacin al microscopio ptico.
Para el estudio de la clula viva se emplean tcnicas pticas especiales como, por ejemplo,
la microscopia de contraste de fase o la de interferencia.

Fig. 1.16 Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de organizacin a nivel


microscpico.

En el nivel macromolecular, la difraccin de rayos X resulta ser la tcnica ms adecuada


para estudiar la configuracin molecular de protenas, de cidos nucleicos y de algunos
entes prebiticos tales como los virus.
Los compuestos qumicos que constituyen la clula pueden ser detectados, descriptos y
localizados dentro y fuera de la clula mediante mtodos adaptados de la Qumica
Analtica.

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Autor: Elas Balm Gonzlez Camacho

Las tcnicas aislamiento y separacin especfica de clulas, organelas y macromolculas y el


preparado de cultivos celulares para el estudio detallado son herramientas invalorables
para el avance de la biologa celular y molecular.
LOS MICROSCOPIOS PROVEEN VENTANAS PARA EL MUNDO DE LA CLULA

Fig. 1.17- Esquema de un Microscopio ptico


El descubrimiento y estudio temprano progres con la invencin y mejora de los
microscopios en el siglo XVII. Los microscopios de varios tipos son an herramientas
indispensables para el estudio de las clulas.
Los microscopios primeramente usados en el Renacimiento tanto como los que son
utilizados en los laboratorios hoy, son microscopios pticos. La luz visible pasa a travs de
la muestra y de las lentes de vidrio por donde la luz es refractada (doblada) de tal
manera, que la imagen del espcimen es amplificada cuando se proyecta en el ojo.
Dos valores importantes en microscopia son el aumento y el poder de resolucin.
Entendemos por aumento a las dimensiones aparentes de los objetos comparados con su

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tamao real. El poder de resolucin es la medida de la nitidez de la imagen; es la capacidad
del instrumento para brindar imgenes distintas de dos puntos cercanos.
El microscopio ptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2mm, la medida de una
pequea bacteria. Esta resolucin es limitada por la longitud de onda de la luz visible usada
para iluminar la muestra.
Los microscopios pticos o de luz pueden aumentar efectivamente alrededor de 1000 a
1500 veces el tamao de la muestra real; si se incrementase el aumento la imagen
proyectada sera borrosa. La mayora de las mejoras en microscopia de luz del comienzo de
este siglo ha involucrado nuevos mtodos para aumentar el contraste. Sin estas tcnicas
sera imposible para el ojo humano el conocimiento del mundo celular.
La mayora de las organelas son demasiado pequeas para ser visualizadas por la
microscopia de luz. La Biologa Celular avanz rpidamente hace un poco ms de cincuenta
aos con la introduccin del microscopio electrnico. En lugar de luz visible, el microscopio
electrnico utiliz un haz de electrones [2] a travs de la muestra. El poder de resolucin
est inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiacin que un microscopio
usa y un haz de electrones tiene longitudes de onda mucho ms cortas que la luz visible.
Para mayores precisiones al respecto, consulte el cuadro 1.4

Cuadro 1.4- Poder de resolucin del Microscopio

En cualquier tipo de microscopio, el poder de resolucin depende de la longitud de onda (l) y de la


apertura numrica (AN) del objetivo (la capacidad de colectar la luz). As, el lmite de resolucin, que es
la distancia mnima que debe existir entre dos puntos para que puedan ser discriminados como tales, y
responde a la siguiente ecuacin:
Lmite de resolucin=0,61 l /AN
A su vez,
AN = n . seno a
donde, n es el ndice de refraccin del medio que atraviesa el haz y a es el ngulo de apertura
Ntese que el lmite de resolucin es inversamente proporcional al poder resolutivo del instrumento, de
modo tal que cuanto mayor sea ste, menor ser el lmite de resolucin conseguido.

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Fig. 1.18- Comparacin entre un Microscopio ptico y Electrnico

La mayora de los microscopios electrnicos modernos pueden lograr una resolucin de 0,2
nm, unas 1000 veces mejor que la obtenida con el microscopio ptico.
Los bilogos usan el trmino ultraestructura celular para referirse a la anatoma celular
cuando se resuelve por un microscopio electrnico.
Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de transmisin (MET)
y el microscopio electrnico de barrido (MEB):
El MET permite develar la ultraestructura de las clulas y de la matriz extracelular. El
haz de electrones es desviado por un campo electromagntico (que actuara como lente). En
este tipo de microscopia se requiere que las muestras tengan un grosor de 100 nm.
El MEB es especialmente til para estudios de superficie del espcimen. El haz de
electrones explora la superficie de la muestra la que usualmente se recubre con una
pelcula de oro. El haz excita a los electrones sobre la superficie de la misma muestra y
estos electrones secundarios se recolectan y enfocan sobre una pantalla. Esto forma una
imagen de la topografa del espcimen. Un importante atributo del MEB es su gran
profundidad de campo, la cual resulta en una imagen tridimensional.
El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero el MO ofrece
muchas ventajas especialmente para el estudio de la clula viva. Una desventaja de ME es
que los mtodos qumicos y fsicos usados para preparar la muestra, no slo matan a las
clulas sino que puedan introducir artefactos, estructuras peculiares vistas en
micrografas que no existe en una clula viva.
La preparacin de la muestra para el MO y el ME resulta similar si se trabaja con las
clulas muertas.

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En la tabla 1.9 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de microscopia para la
preparacin de la muestra:

Tabla 1.12 -Tcnicas para Preparar una Muestra en Microscopia ptica y Electrnica

Paso

Microscopia ptica

Microscopia Electrnica

OBTENCIN: Se hace
cuidadosamente con instrumental
adecuado.

FIJACIN: se destina a impedir


la autodegradacin enzimtica
(autolisis) de las clulas tratando
de evitar, en lo posible, la
alteracin de las estructuras
originales y su autodigestin.

Pueden usarse fijadores qumicos Se realiza con paraformaldehdo,


(formol, etanol, metanol o
con tetrxido de osmio o,
mezclas fijadoras). Tambin se ltimamente, con glutaraldehido,
utilizan mtodos fsicos como la en soluciones acuosas de pH
desecacin, el calor seco, el fro neutro y concentracin salina
o la congelacin.
semejante al medio. Luego se lava
la pieza y se post-fija con
tetrxido de osmio durante una
hora; el osmio se une a
estructuras lipoproteicas
(membranas celulares) ofreciendo
mayor contraste en la imagen.
Esto se conoce como coloracin o
contrastado.

DESHIDRATACIN: retira elPasajes sucesivos por alcoholes


agua de las piezas fijadas, parade concentracin creciente.
que luego puedan ser incluidas en
un elemento que es insoluble en
solventes acuosos.

ACLARACIN

Baos con alcohol o acetona.

Se realiza para eliminar de la


No requiere
muestra restos de alcohol y toda
sustancia hidrosoluble. Se
impregna la muestra con un
solvente no acuoso, orgnico y
soluble en parafina, como xileno,
tolueno o benceno.

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INCLUSIN

Se incluye el material en parafina Se utilizan resinas sintticas tipo


o celoidina previamente
epoxi que luego de secarse se
calentada, la que al solidificarse transforman en un material muy
sirve de sostn de la muestra y duro, apto para que se le
posibilita su corte. Se forma el efecten cortes extremadamente
taco.
delgados.

CORTE

Es lo suficientemente delgado
como para ser atravesado por la
luz. Esto se logra utilizando el
micrtomo con el que se realiza
cortes uniformes del tejido a un
dado espesor.

REHIDRATACIN

Se retira la parafina con xilol y


se lava con alcoholes de
concentracin creciente. Al ser
los colorantes solubles en agua
resulta indispensable rehidratar

COLORACIN

Las clulas y los tejidos son


coloreados para lograr mayores
contrastes facilitando la
observacin. La coloracin de
hematoxilina-eosina es una de las
ms comnmente utilizadas. Tie
el ncleo de azul y el citoplasma
de rosa.

Debe obtenerse un corte de la


muestra tal que el haz de
electrones logre atravesarla. El
ultramicrtomo realiza cortes de
20 a 100 nm de espesor con
cuchillas de vidrio o diamante.

MONTAJE

El corte se monta sobre un


Estas muestras se montan en
portaobjetos. El cubreobjetos
pequeas grillas de cobre
El corte se coloca sobre ciertas puede colocarse por encima para
clases de estructuras.
proteger el preparado. Este
puede conservarse durante
dcadas si el cubreobjetos se
sella.

CONTRASTADO

La pieza se impregna en acetato


de uranilo, citrato de plomo u
otras sustancias.

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Las diferencias ms notables de los principales componentes del MO y del ME y sus


caractersticas singulares se especifican en la siguiente tabla.

Tabla 1.13 - Diferencias entre el MO y ME

MICROSCOPIO PTICO

CARACTERSTICA

MICROSCOPIO ELECTRNICO

De interferencia de rayos
luminosos

1) IMAGEN DADA POR


MECANISMO:

De dispersin de electrones

Simple con aire

2) TUBO

Al vaco con gran diferencia de


potencial

Luz (fotones)

3) FUENTE

Filamento de tungsteno
(electrones)

Lentes: Ocular, objetivo y


condensador

4) ELEMENTOS

Bobinas electromagnticas

Clulas vivas o muertas

5) ESTUDIAN

Clulas muertas

Coloreadas o no

6) OBSERVACIN DE LA IMAGEN Distintas tonalidades de gris. En la


actualidad se ven imgenes
"sombreadas" electrnicamente.

0,25m

7) LIMITE DE RESOLUCIN

3 a 5 (terico)
10 (en la prctica)

5.500 (trmino medio)

8) LONGITUD DE ONDA

0,056

500 X a 1500 X

9) AUMENTO (el signo X significa


aumento)

30.000 X a 1.000.000 X

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Carnoy u otros fijadores

10) FIJACIN

Bicromato de potasio, tetrxido


de osmio, formaldehdo.

Parafina o coloidina

11) INCLUSIN

Acrlicos o resinas de epoxi.

Con el micrtomo. (cuchilla de 12) CORTES


acero). Cortes de 10m

Con ultramicrtomo. (cuchilla de


diamante o vidrio) Cortes de 100 a
500 .

De vidrio

13) PORTAOBJETO

Placas de Colodion, aluminio o


berilio.

Nivel microscpico:

14) NIVEL DE OBSERVACIN

Nivel submicroscpico:

ESTRUCTURA

ULTRAESTRUCTURA

LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER OBSERVADAS A TRAVS DEL MICROSCOPIO


Se pueden utilizar ingeniosamente las propiedades ondulatorias de la luz aumentando el
contraste de las estructuras transparentes. As surgieron varias clases de microscopios
pticos convirtindose en herramientas destacadas en el estudio de la clula. Ms an, si
se considera la posibilidad de que algunos componentes de la clula puedan perderse o
distorsionarse durante la preparacin de la muestra. En consecuencia, el examen de la
clula viva (sin fijacin ni congelacin) resulta til.
Los microscopios de contraste de fase y de interferencia son sistemas pticos especiales
que logran intensificar la escasa interferencia [3] y proporcionan mayor contraste que el
obtenido con un MO comn.
En el microscopio de campo oscuro, el haz luminoso se proyecta oblicuamente y los sistemas
de lentes detectan la luz reflejada por la muestra que se ve como un objeto brillante
contra un fondo oscuro, logrndose un gran relieve de rasgos de la clula que son invisibles
en el MO.
El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a nivel molecular
de las clulas y los tejidos no slo en las clulas vivas sino en preparados post-mortem.
Ciertos componentes celulares y tisulares se comportan peculiarmente cuando la luz
polarizada (luz que gira nicamente en un plano) los atraviesa.
LAS ORGANELAS PUEDEN AISLARSE PARA ESTUDIARLAS MS PROFUNDAMENTE
La descripcin de las diversas organelas dentro de la clula revela poco acerca de su

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funcin. La Biologa Celular actual desarrolla la integracin de la Citologa con la Bioqumica,
es decir el estudio de la estructura celular junto con el anlisis de los procesos qumicos de
la vida (metabolismo). El fraccionamiento celular ha sido particularmente importante en
esta ciencia.
El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las clulas separando las organelas
principales de modo que, sus funciones individuales puedan ser estudiadas. El instrumento
usado para fraccionar las clulas es la centrfuga capaz de girar a diversas velocidades. La
ms poderosa, llamada ultracentrfuga puede dar vueltas tan rpidamente como 80000
revoluciones por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partculas de 500000 veces
mayores que la fuerza de la gravedad (500000g).

Fig. 1.19- Esquema del Proceso de Fraccionamiento Celular


El fraccionamiento celular comienza con la homogeneizacin, o sea la ruptura de la clula. El
objetivo es romper las clulas sin daar severamente sus organelas. El homogenado se
centrifuga logrndose la separacin de las partes de la clula en dos fracciones: el pellet
que consiste en las estructuras ms grandes depositadas en el fondo del tubo y el
sobrenadante constituido de partes ms pequeas suspendidas en el lquido por encima del
pellet. El sobrenadante es transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez. El proceso es
repetido incrementando la velocidad en cada paso. De esta manera se consigue recolectar
componentes ms pequeos de los sucesivos pellets.

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Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.
El fraccionamiento celular permite preparar los componentes especficos de la clula tanto
cualitativa como cuantitativamente.
LAS POBLACIONES CELULARES PUEDEN SER SEPARADAS POR EL CITMETRO DE
FLUJO
Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a las clulas una
tras otra. Un determinado tipo celular emitir fluorescencia, previo tratamiento con
fluorocromo (pigmento fluorescente). Esto permite la discriminacin y, por lo tanto, la
separacin de las clulas as tratadas de acuerdo a la fluorescencia que emitan.
LAS CLULAS
CELULAR

VIVAS

PUEDEN

SER

ESTUDIADAS

MEDIANTE

EL

CULTIVO

Con el objetivo de preservar toda la informacin que sea posible sobre todos los tipos
celulares, se han desarrollado tcnicas de disociacin de las clulas.
En los primeros tiempos, la tcnica consista en colocar un explante de un pequeo trozo de
tejido en un medio compuesto por suero sanguneo, extracto de embriones y solucin salina.
Hoy se conocen los requerimientos nutricios de las clulas eucariontes. Se las mantienen y
hacen crecer en un medio sinttico enriquecido de suero. Se distinguen tres tipos de
cultivos:
Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido se separa en
condiciones aspticas y se corta en pequeos trozos y se los trata con tripsina (enzima
proteoltica) que disocia los agregados celulares y genera una suspensin de clulas libres
que se cultivan en un medio apropiado.
Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con tripsina de un cultivo
primario, seguido de un nuevo cultivo en una caja de Petri.
Cultivos de lneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga debido a las condiciones
cancerosas de las clulas. Entre las ms usadas se encuentran las clulas HeLa. A pesar de
tales anomalas son muy tiles para el estudio del cncer.
LAS MOLCULAS ORGNICAS SON ESTUDIADAS DENTRO Y FUERA DE LA
CLULA
A nivel molecular, los organismos estn formados por relativamente pocos tipos de
compuestos. El agua constituye alrededor del 70% de la mayora de los seres vivos. De los
dems compuestos, los principales son los glcidos, los lpidos, las protenas y los
nucletidos, muchos de ellos combinados para formar los cidos nucleicos, cido
ribonucleicos (ARN) y cido desoxirribonucleico (ADN). Aunque hay muchos otros
compuestos presentes, estas cuatro categoras constituyen la mayora de las molculas
orgnicas de los seres vivos y son los actores de los procesos metablicos. Por lo tanto, su
localizacin y funcin dentro de la clula como un estudio ms detallado fuera de ella se
hace necesario.

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Algunos ejemplos de tcnicas para el estudio, la ubicacin y la cuantificacin de molculas
orgnicas se mencionan a continuacin:
RECONSTRUCCIN DE IMGENES A PARTIR DE ELECTROMICROGRAFAS
Las microfotografas electrnicas poco claras de cristales de molculas o estructuras
supramoleculares se colocan en la trayectoria de un haz de rayos lser para obtener un
diagrama de difraccin ptica. Este diagrama es procesado por un programa de
computacin consiguiendo la reconstruccin de las molculas individuales en las fases y
amplitudes correspondientes a un rea de la microfotografa.
DIFRACCIN DE RAYOS X
Este mtodo consiste en el bombardeo de la molcula por un delgado haz de rayos X y
provoca la dispersin (difraccin) de la radiacin a travs de los electrones de los tomos
de la muestra. Este haz disperso debe alcanzar una placa fotogrfica. La estructura
molecular tridimensional se deduce de las posiciones y las intensidades de las manchas
registradas en la placa fotogrfica.
LOS MTODOS CITOQUMICOS
Los compuestos qumicos se identifican "in situ" por medio de mtodos citoqumicos.
Este objetivo es cualitativo y cuantitativo y muchas veces persigue el estudio de los
cambios dinmicos producidos en el contenido qumico celular en las distintas etapas del
metabolismo.
Para ello, el compuesto qumico debe ser:
a) inmovilizado en posicin original e,
b) identificado por un procedimiento especfico para el compuesto o para un grupo qumico
caracterstico que posea.
Los mtodos fsicos y reacciones qumicas similares a las implementadas en Qumica
Analtica pero adaptadas a tejidos se usan para llevar a cabo este tipo de identificacin.
LAS DIVERSAS MOLCULAS DE LA CLULA PUEDEN LOCALIZARSE POR LAS
TCNICAS INMUNOHISTOQUMICAS
Cuando los vertebrados superiores, los animales e incluso el hombre, son expuestos a la
actividad de los microorganismos o a molculas ajenas a sus ultraestructuras, ya sea
naturalmente o por inyeccin, aquellos sintetizan anticuerpos. Estos son protenas que
pueden fijarse selectivamente a los materiales extraos que desencadenaron su sntesis.
Por lo tanto, el organismo produce tantos anticuerpos como partculas extraas ( antgenos)
son reconocidas. As, se puede obtener una gran variedad de anticuerpos.
Los anticuerpos son herramientas experimentales muy verstiles para reconocer y
manipular clulas y molculas. Si un animal de una especie determinada es inyectado con un

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componente celular o molecular de otra especie, el primero logra fabricar anticuerpos


capaces de reconocer y fijar fuertemente aquel componente (el del segundo animal). A
estos anticuerpos se acoplan colorantes fluorescentes que son visibles al MO. De modo
similar, con el M.E. se pueden detectar molculas trazadoras acopladas en anticuerpos. De
esta manera, los componentes celulares y moleculares quedan teidos en forma
diferencial por los anticuerpos que se fijan a ellos.

Como todava no se han presentado los aspectos fundamentales de las molculas orgnicas,
otros mtodos fisicoqumicos de ms fina determinacin, purificacin y cuantificacin de
las biomolculas se mencionarn en las prximas unidades. Como se ver, dichas tcnicas
son de uso corriente en el diagnstico mdico rutinario.

CUESTIONARIO DE AUTOEVALUCIN

1.

Cul de los siguientes organoides no forman parte del Sistema de Endomembranas?:

a.

envoltura nuclear

b.

cloroplasto

c.

aparato de Golgi

d.

retculo endoplasmtico

2. Un determinado veneno destruye el citoesqueleto. Cul de las siguientes funciones


sera afectada directamente?:
a.

la divisin celular

b.

la respiracin celular

c.

la fotosntesis

d.

la sntesis de protenas

3.

Cul de las siguientes organelas est presente en la clula animal y vegetal?:

a.

cloroplasto

b.

pared celular

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c.

mitocondria

d.

centrolos.

4.

Qu organela est presente en una clula procarionte?:

a.

mitocondria

b.

ribosoma

c.

cloroplasto

d.

retculo endoplasmtico

5.

En qu parte de la mitocondria aparecen las crestas?

6.

Qu organela carece de membrana?

7.

En qu parte de la bacteria se realiza la respiracin?

8. Si Ud. tuviera que argumentar acerca de que los virus son organismos vivos, qu
caractersticas estructurales y funcionales del virus podra utilizar para apoyar su
argumentacin?
9. Qu tipo de clulas pensara Ud. que alcanzaran el mayor tamao: una clula muy
aplanada o una esfrica? Por qu?
10. Por qu casi todas las clulas casi siempre son microscpicas?
11. Cules son las propiedades fundamentales que comparten todas las clulas? Describa
la importancia de cada una de ellas.
12. Compare en un cuadro las diferencias estructurales, funcionales y metablicas entre
las clulas procariontes y eucariontes.
13. Qu propiedades distinguen a un virus de una bacteria?
14. Enumere los pasos de la infeccin viral, y describa brevemente cada paso.
15. Utilizando el Sistema Mtrico Decimal resuelva las equivalencias en metros de: a) 1
nm; b) 1 mm.
16. Indique el poder de resolucin del: a) M.O. b) M.E.T. c)M.E.B.
17. Cuntas veces son mayores los aumentos del M.E. en relacin a los del M.O.?
18. A qu es igual el poder de resolucin?:

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a.

AN / 0.61 x l

b.

0.61 x l / AN

c.

0.61 / AN x l

d.

0.61 x AN /l.

19. Qu compuesto se usa como fijador en microscopia electrnica? Y en microscopia


ptica?
20. Explique qu tcnicas utilizara para crear suficiente contraste cuando se usa el M.O.
y el M.E.
21. Qu tipo de microscopios se usan para la observacin de las clulas vivas?
22. Cules son las ventajas de estudiar las clulas con el M.E.T. y el M.E.B.?
23. Cundo utilizara la microscopia de contraste de fase? Por qu?
24. Para qu se utiliza la tcnica de fraccionamiento celular? Qu se obtiene en cada
paso?
25. Qu es un anticuerpo? Por qu es una herramienta til en la investigacin biolgica?
26. Para qu se utiliza la difraccin de rayos X?
27. Cuando una clula de forma esfrica crece, los mm 2 de superficie de la membrana
plasmtica por mm3 del volumen celular:
a.

decrece

b.

aumenta

c.

se mantiene constante

d.

se vuelve ms delgada

28. El microscopio de interferencia es:


a.

una variante del M.O.

b.

una variante del M.E.

c.

til cuando se colorea la muestra

d.

utilizado para visualizar tomos

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29. La ultracentrfuga se emplea en:
a.

citometra de flujo

b.

b) microscopia electrnica

c.

fraccionamiento celular

d.

difraccin de rayos

30. Las muestras de clulas vivas o preparados fijados se pueden estudiar indistintamente
con:
a.

microscopia electrnica

b.

microscopia de interferencia

c.

microscopia de luz polarizada

d.

difraccin de rayos X.

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Solomon y col. (1998) . Biologa de Villee. 4. Ed. Mex. McGraw-Hill. Interamericana

[1] La longitud de onda (l) es la distancia entre dos puntos consecutivos que vibran en fase.
Siempre que dos puntos estn separados por una distancia igual a la que recorre la onda en
un perodo, o a un mltiplo de ella, los dos puntos vibrarn en fase.
[2] Los electrones pueden considerarse como una variedad de radiacin de pequea
longitud de onda.
[3] Interferencia: Es un fenmeno fsico producido entre ondas cuyos "picos" y "valles" no
coinciden, es decir no estn en fase.

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