Introduo terica

As bactrias so conhecidas desde 1674, mas a sua estrutura ainda objecto de

estudo, so os seres vivos mais simples do ponto de vista estrutural, e de menor
tamanho, podendo ser conhecidas tambm como micrbios. As bactrias so
microorganismos unicelulares, procariontes, e algumas causam doenas. So
abundantes no ar, no solo e na gua, e na sua maioria inofensivas para o ser
humano, sendo algumas at benficas.
Por serem microrganismos procariontes, no apresentam um ncleo definido,
estando o seu material gentico compactado e enovelado numa regio do
citoplasma chamada de nucleide. As bactrias apresentam uma membrana
plasmtica recoberta por uma parede celular, o seu tamanho pode variar entre
0,2 a 5,0 micrmetros, sendo por isso observveis apenas ao microscpio.
As bactrias reproduzem-se por diviso celular, as causadoras de doenas
denominam-se patognicas. Estas possuem diversas formas, que podem variar
de acordo com o meio e com o tipo de associao.
A cultura de bactrias o crescimento de colnias de microorganismos induzida
pelo Homem para facilitar o seu estudo.
Para a realizao de uma cultura bacteriana, precisamos de um inoculo e de um
meio de cultura. O meio de cultura uma substncia lquida ou slida, simples
ou complexa, que permite a nutrio, o crescimento e a multiplicao dos
microorganismos do inoculo. Os meios de cultura so seleccionados consoante o
tipo de bactria a observar. As bactriasmultiplicam-se em meios de cultura
apropriados desde que sejam respeitadas as condies de temperatura, pH,
humidade e composio.
Esta

actividade

tem

como

objectivo

inocular,

introduzir

artificialmente

microrganismos num meio especfico, qualquer objecto de uso corrente num

meio de cultura esterilizado, com o intuito de as bactrias que se encontravam
nesse objecto se multiplicarem, formando colnias.

Procedimento experimental
Material utilizado:
- Bales de Erlenmeyer;
- Filtro de papel para caf;

- Funil;
- gua destilada;
- Fita adesiva;
- Lamparina de lcool;
- gua destilada;
- Vareta de vidro;
- Placa elctrica;
- Placas de Petri;
- Agar agar;
- Caldo de carne;
- Autoclave;
- Etanol 95 %;
- Algodo cardado;
- Papel de Kraft;
- Estufa;
- Contador de bactrias.
Protocolo experimental:
Preparao do meio de cultura:
1 Colocou-se um caldo de carne num litro de gua destilada a ferver. Deixouse ferver durante 5 minutos;
2 Filtrou-se e juntou-se, cuidadosamente, 20g de Agar Agar;
3 Baixou-se a temperatura e deixou-se ferver durante algum tempo,
mexendo sempre com a vareta de vidro;
Preparao das placas:
1 Tapou-se o erlenmeyer com uma rolha de algodo cardado e protegeu-se
com papel de Kraft;
2 Embrulhou-se as placas de Petri em papel Kraft;
3 Colocou-se as placas de Petri na autoclave a 1atm. durante 15 minutos
(em alternativa esterilizar as placas de Petri em estufa, a 160C durante
2horas ou 170C durante 1hora);

4 Distribuiu-se o meio de cultura, ainda quente pelas placas de Petri

esterilizadas: para o efeito levanta-se ligeiramente a tampa, de modo a ficar
destapado s o espao necessrio colocao do meio de cultura;
5 Manteve-se as placas tapadas e deixou-se arrefecer at o meio de cultura
solidificar;
Inoculao das placas:
1 Manteve-se uma das placas fechadas;
2 Retirou-se a tampa a uma das placas e deixou-se o meio de cultura em
contacto com o ar durante a execuo do resto do protocolo;
3 Levantou-se ligeiramente a tampa de uma das restantes placas e tocou-se
no meio de cultura com objectos de uso corrente (neste caso uma
lapiseira);
4 Fixou-se as tampas com fita adesiva e identificou-se a placa inferior com o
nome do grupo, turma, data e o processo de inoculao;
5 Colocou-se as placas na estufa a 30C durante 8 dias
Precaues:
As placas devem ser colocadas na estufa com a tampa para baixo. Se a gua
condensar cair na tampa e no no meio de cultura.
Podem formar-se colnias de bactrias patognicas, por isso, no devem abrirse as placas nem tocar nas colnias. A observao atravs da tampa.
Esterilizar novamente as placas no final do trabalho.

Resultados Obtidos
A placa de controlo, colocada com as restantes na estufa, no apresentava
colnias debactrias, enquanto que a placa exposta ao ar (fig.1) possua um
elevado nmero de colnias de bactrias de diferentes tipos.
Em relao inoculao preparada (fig.2), no se obteve resultados, ou seja no
se observou colnias de bactrias.
Foram recolhidos, resultados de outros colegas, para comparao:

Objecto inoculado

Nmero
observadas

de

colnias

Anel

150

Caneta

Fsforo

0 (apenas foram observados

fungos)

Lpis de carvo

61 (observou-se tambm um
fungo)

Lapiseira

Mos limpas

70

Mos sujas

Moeda

Moeda

Tampa da caneta

Tampa da caneta

Fig.1 placa exposta ao Ar

Fig.2 inoculao preparada na actividade

Discusso de resultados
Aps a realizao desta actividade prtica, os resultados obtidos no foram os
esperados.
Em relao placa de controlo, no se obteve nenhuma colnia, provando que o
meio de cultura estava bem esterilizado.
Quanto inoculao executada na actividade prtica conclumos, que a mesma
no foi bem executada por alguns colegas, dando origem a placas, nas quais no
observmos nenhuma colnia. Comparando os resultados obtidos, podemos
observar que o mesmo objecto, foi utilizado por pessoas diferentes, originando
resultados diferentes, enquanto que um apresenta colnias de bactrias, o outro
no apresenta qualquer tipo de desenvolvimento.
A existncia de fungos em algumas placas, um dos inconvenientes da
inoculao, normalmente quando as inoculaes so realizadas, utiliza-se um
anti-fungico para impedir que estes fungos cresam significativamente, mas
como a nossa cultura de tamanho reduzido, no valia a pena utiliz-lo.

Concluso
Aps a realizao desta actividade pratica, conclumos que os objectos normais,
de uso corrente possuem variados tipos de bactrias que em condies propcias
se podem desenvolver e at provocar doenas.
Recorre-se assim cultura, em meios apropriados, para se conseguir um
elevado nmero de microorganismos, de modo que seja possvel estudar as suas
caractersticas.

Observamos ainda que as bactrias em colnia so possveis de observar a olho

nu aps algum tempo de encubao.

RELATRIO DO TRABALHO LABORATORIA

Tema: Como pode testar-se a presena de bactrias em objectos que utilizamos
frequentemente?

Captulo I: Introduo
A actividade laboratorial tem como objectivo testar a presena de bactrias em
objectos que utilizamos no nosso quotidiano.
As bactrias so os seres vivos mais elementares a nvel estrutural (unicelulares)
e de menor tamanho. So procariontes, uma vez que no possuem membrana
nuclear, estando o seu material gentico (DNA na forma de molcula circular)
concentrado numa regio denominada nucleide. Muitas bactrias tm tambm
pequenos anis de DNA (plasmdeos) que contm genes acessrios. Apesar de
no possurem organelos como mitocndrias, plastos, retculo e complexo de
Golgi, possuem ribossomas e todas as estruturas necessrias realizao de
biossnteses e transformaes energticas, de maneira a garantirem a sua
autonomia quanto reproduo e obteno de energia.
Existem inmeras espcies de bactrias e em grande abundncia em nosso
redor, sendo algumas benficas ao ser humano e outras, pelo contrrio,
causadoras de doenas (patognicas) que podem comprometer a vida deste.

de salientar a importncia da cultura de bactrias, especialmente para proveito

do ser humano (como o caso da cultura da bactria E. coli modificada para a
produo de insulina).
Nesta actividade laboratorial, vai realizar-se a cultura de bactrias, ou seja,
promover o crescimento de colnias destes seres vivos de forma induzida pelo
Homem para facilitar o seu estudo. Para isso necessrio inocular (introduzir
artificialmente microorganismos num meio especfico), com um objecto de uso
corrente, um meio de cultura (substncia que permitir a nutrio, crescimento
e a multiplicao dos microorganismos). Para alm disso, procedeu-se ainda
inoculao do meio de cultura com alguns alimentos.

Captulo II: Resultados

Caixa de Petri

__________

X*

Ser vivo
encontrado
Bactrias

Fungos

* apesar de se tratar do controlo, foram observadas algumas colnias de bactrias

Fig. 1 Caixa de Petri n 1

(inoculao com telmovel)

Fig. 2 Caixa de Petri n 2

(inoculao com saliva)

Fig. 3 Caixa de Petri n 3

(inoculao com porta-chaves)

Fig. 4 Caixa de Petri n 4

(inoculao com dedo)

Fig. 5 Caixa de Petri n 5

(inoculao com iogurte)

Fig. 6 Caixa de Petri n 6

(inoculao com sopa)

Fig. 7 Caixa de Petri n 7

(inoculao com leite chocolatado)

Fig. 8 Caixa de Petri n 8

(inoculao com moeda)

Fig. 9 Caixa de Petri n 9

(controlo - sem inoculao)

Captulo III: Discusso e Concluso

Aps a realizao desta actividade laboratorial confirmou-se que, realmente, as
bactrias esto presentes em tudo o que nos rodeia.
De acordo com os resultados obtidos, verifica-se que todos os objectos e
alimentos utilizados na inoculao do meio de cultura possuam colnias de
bactrias.
Estas colnias, apesar de serem grupos de indivduos de dimenses
extremamente reduzidas, so claramente visveis a olho nu, uma vez que so
constitudas por um grande nmero de bactrias. ainda de realar que, em
boas condies ambientais (como o caso da actividade realizada, uma vez que
foi fornecido um meio de cultura), estes seres vivos reproduzem-se muito
rapidamente, podendo ocorrer uma diviso em cada 20-25 minutos.
Foi possvel observar colnias que possuam cores variadas (principalmente tons
amarelos, laranjas e esverdeados), pelo qual se conclui que se tratavam de
espcies de bactrias diferentes.
A existncia de fungos em algumas caixas de Petri deve-se ao facto de este
grupo de seres vivos existir em grande quantidade e contaminarem facilmente
um meio de cultura como aquele em que foi realizada a actividade experimental
(graas aos seus esporos). Normalmente, quando so realizadas inoculaes,
utiliza-se um anti-fngico para impedir o aparecimento destes fungos, mas como
a nossa cultura de tamanho reduzido no se justificava fazer este tipo de
tratamento.
A caixa de Petri n 9 serviu como controlo dos resultados da actividade, uma vez
que no se procedeu inoculao do meio de cultura presente nesta caixa. No
entanto, foi possvel observar algumas colnias de bactrias no controlo, o que

no de admirar, uma vez que, para se tratar de um controlo realizado nas

condies ideais, deveria ser executado num meio esterilizado de maneira a no
ser contaminado pelas bactrias do meio envolvente ou at pela pessoa que
procedeu preparao do meio de cultura desta caixa de Petri. Por outro lado,
para resultados mais correctos, todo o processo de inoculao deveria ter sido
realizado numa cmara esterilizada para evitar a contaminao do meio de
cultura com bactrias, o que no foi possvel na nossa actividade prtica.
Poderamos chegar ainda um pouco mais longe nesta actividade, tentando
identificar as diferentes espcies de bactrias presentes. Para isso seria
necessrio fazer uma nova inoculao com bactrias retiradas das colnias da
primeira inoculao, tentando garantir, assim, a presena apenas de indivduos
da mesma espcie para posteriormente serem analisados.

Sumrio:
Esta actividade laboratorial permite-nos testar a presena de bactrias em
objectos que usamos no nosso dia-a-dia e observar a reproduo destes seres
vivos quando em condies ambientais favorveis. Podemos, portanto, afirmar a
quase omnipresena das bactrias. Concluiu-se que se pode facilmente proceder
ao cultivo de bactrias, atravs da inoculao de um meio de cultura, e que este
processo tm algumas vantagens importantes para o ser humano.