Prctica 1. Factores que influyen en las separaciones cromatogrficas.

Polaridad del disolvente

Disolvente

Colorant
e

AcOEt

Rojo de 0.7
metilo
2
Safranina 0.9
0
Rojo de 0.4
metilo
1
Safranina 0.9
0
Rojo de 0.1
metilo
7
Safranina 0.8
5

AcOEt:hexan
o (1:1)

AcOEt:hexan
o (3:7)

Rf

Volumen
de
muestra
Ancho
l de
banda
(mm)
1 4

Concentracin de Efecto de matriz

la muestra
g/m
L

Asimetr
a

Disolvent
e

Rf

No

MeCN

0.30 NaCl

MeOH

0.31 Sacaros
a

10

H2O

0.31 H2O

RESULTADOS
ANLISIS DE RESULTADOS.
1.

Efecto de la polaridad del disolvente: En las

cromatoplacas y en los resultados de Rf, se observa
como el disolvente ejerce su efecto de polaridad ante
los analitos, por consiguiente, cuanto mayor sea la
polaridad del disolvente, mayor ser su capacidad para
desalojar y desplazar un compuesto polar de la
superficie estacionaria, en cambio si el disolvente es menos polar ser retenido por
la fase estacionaria. El acetato de etilo solo como disolvente ejerce polaridad de
esta forma es quien alcanzo a eluir mejor, sin embargo la mezcla acetato de
etilo:hexano (3:7) al ser mas no polar que polar tendr una mayor retencin por la
fase estacionaria y si elucin ser menor.

2.

Efecto del volumen de muestra aplicada: En este experimento al no cambiar el

disolvente la polaridad se mantiene contante y la elucin ser igual en los tres
puntos de aplicacin del analito, sin embargo el volumen de cada punto ser
diferente, de esta forma si el volumen de la muestra es grande, la superficie que

Otros
analitos

tendr interaccin con la fase estacionaria ser ms grande y al ir

disminuyendo el volumen la superficie de interracion se ira haciendo
ms pequea.
3.

Efecto de la concentracin de la muestra: En la tabla, as como

en la cromatoplaca del experimento 3 se observa que la mancha
circular pertenece a la concentracin de 1 mg/mL, las manchas
coleadas del centro y de la derecha pertenecen a las
concentraciones de 5 y mg/mL respectivamente. Discutiendo que a
mayor concentracin de la muestra, mayor asimetra en la mancha,
esto es debido a que a mayor concentracin de las molculas, stas
se quedaran retenidas en la fase estacionaria de manera desigual
observndose el coleo.
4. Efecto de matriz
a) Efecto de la naturaleza del disolvente de la muestra: En este experimento se
observa que la mancha de la izquierda fue de color rojo intenso, la mancha de en
medio fue de color rojo y la de la derecha de color rojo claro, que corresponden a las
muestras de rojo de metilo disueltas en MeCN, metanol y agua respectivamente, esto
es debido a que el acetonitrilo es menos polar que los otros dos disolventes haciendo
que este no interacciones muy bien con la fase mvil observndose un color intenso,
como el agua es el disolvente ms polar de los tres, este interacta con la fase mvil
observndose una mancha de color claro.
b) Presencia de otros analitos: Al haber otros analitos en la muestra se presenta
una competencia al momento de eluir la muestra por lo que se pueden observar
unas bandas delgadas cuando eluye la muestra. Tal es como se observa en la
cromatoplaca del experimento 4b en donde hay unas bandas delgadas cuando se
eluy la muestra por la presencia de otros analitos como la sacarosa y el NaCl.

Conclusiones

Cuanto mayor sea la polaridad del disolvente, mayor ser su capacidad

para desalojar y desplazar un compuesto polar de la superficie estacionaria,
La anchura de la banda es directamente proporcional al volumen que se
administr.
a mayor concentracin de la muestra, mayor asimetra en la mancha
la interaccin fase estacionaria-analito depende de la polaridad del analito

se presenta competencia en la alusin por la presencia de otros analitos

CUESTIONARIO.
a) Defina brevemente los siguientes trminos:
Tipos de interacciones moleculares: Interacciones que hay entre el analito con
la fase mvil y fase estacionaria. Estas pueden ser: puentes de hidrgeno, fuerzas
de dispersin de London, fuerzas de Van der Waals, etc.
Resolucin: Separacin entre dos bandas cromatogrficas.
Coeficiente de particin: Constante de equilibrio que describe la distribucin de
un soluto entre dos fases.
Asimetra de pico: Es la plasmacin de la desviacin del comportamiento de un
soluto respecto al modelo terico.
Efecto de matriz: consiste en una disminucin o aumento de la respuesta
instrumental del analito debido a la presencia de otros componentes.
b) Aplicaciones de la cromatografa en el anlisis ambiental

Anlisis de pesticidas por cromatografa de gases

deteccin y/o cuantificacin de substancias diferentes en una diversidad
de matrices. Estos anlisis pueden ser hidrocarburos aromticos
polinucleares (PAHs), compuestos clorados mezclados en el aire, agua y
tierra.

c) Mecanismos de separacin en cromatografa

Separacin por adsorcin: diferente afinidad de los componentes de la
muestra sobre la superficie de un slido activo. (componentes con
polaridad baja o media.
Separacin por reparto: diferente solubilidad en fases estacionaria y
mvil (comoponentes con polaridad media o alta)
Separacin por exclusin: a mayor masa molecular menor tiempo de
elucin. Este mtodo permite separar por tamaos moleculares siendo
posible obtener incluso distribuciones de masas moleculares a distintos
tiempos de elucin.
Separacin por intercambio inico: Las especies cargadas
negativamente se unen a la matriz slida cargada positivamente y son
retenidas, mientras que las especies positivas son rechazadas. De esta
manera en funcin de la carga las especies se eluyen a distintos tiempos
dando lugar a la correspondiente separacin.

BIBLIOGRAFA
Boqu Ricard. La Selectividad en Anlisis Qumico. Grupo de Quimiometra y
Cualimetra. Universidad Rovira i Virgili. 2008. Pp 6
Valcrcel Cases M, Gmez Hens A. Tcnicas Analticas de Separacin. Editorial
Revert. Espaa. 1988. Pp 357.
Durst.h,Garkel g., Quimica Organica Experimental. Editorial Reverte. Espaa.
2007. Pp 83
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/cromatografia_de_gases.pdf