Bioquímica: Guía práctica de bioseguridad

Universidad Nacional San Luis Gonzaga de Ica
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DANIEL ALCIDES CARRION
B I O Q U I M I C A
GUIA PRCTICA DE BIOQUIMICA

Dra. Luz Chacaltana Ramos
Dra. Bertha Pari Olarte

Laboratorio
de
Bioqumica
B I O Q U I M I C A
Primer
Parcial

BIOSEGURIDAD
I.-INTRODUCCIN
Las normas de bioseguridad en el laboratorio de Bioqumica son un conjunto de
medidas y normas preventivas, destinadas a mantener el control de riesgos
laborales procedentes de agentes biolgicos, fsicos o qumicos, logrando la
prevencin de impactos nocivos frente a riesgos propios de su actividad diaria,
asegurando que el desarrollo o resultado final de dichos procedimientos no atente

contra la seguridad del trabajador.
En el laboratorio de Bioqumica se manipula y experimenta con componentes
moleculares (protenas, cidos nucleicos y otras), para lo cual se utilizan agentes
fsicos y qumicos que puedan causar dao si no se manipulan adecuadamente. En
este sentido se exige seguir todas las normas de manipulacin y conducta del
personal que asiste al laboratorio de Bioqumica, las cuales constituyen las guas
El curso de Bioqumica es fundamental ya que permite comprender los procesos

qumicos que ocurren en el organismo como por ejemplo la formacin y
transformacin de los nutrientes que componen un determinado alimento.
II. HISTORIA
La bioseguridad, como disciplina naci durante la dcada del 70, en
respuesta operativa hacia los riesgos potenciales de los agentes biolgicos
modificados por Ingeniera Molecular, a partir de los trabajos de P. Berg (1974)
se cre el Comit Asesor de ADN recombinante.
En 1983 la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) edita el Manual de
Bioseguridad en el laboratorio que pasa a ser la publicacin internacional de
referencia.

B I O Q U I M I C A
de bioseguridad.

En 1985 el CDC desarroll una estrategia de "Precauciones Universales para

sangre y fluidos corporales" para referirse a las preocupaciones que existan acerca
de la transmisin de HIV en el lugar de trabajo.
La aparicin del virus HIV origin la publicacin de Normas de
Bioseguridad Internacionales, Nacionales, Regionales, Provinciales, de
Instituciones Cientficas y Asistenciales
III.- PRINCIPIOS BASICOS DE BIOSEGURIDAD
Los Principios de la Bioseguridad, tiene tres pilares que sustentan y dan origen a
las Precauciones Universales.
Estos son: Universalidad, Barreras de proteccin y Medidas de eliminacin.
Universalidad:
De este principio nace el concepto de potencialidad, es
decir, que sin importar si se conoce o no la serologa de un individuo, el
universales
ya
que
potencialmente
puede
portar
transmitir
microorganismos patgenos.
Barreras:
Son los elementos que protegen al auxiliador de la transmisin
de infecciones. Se clasifican en dos grandes grupos, la inmunizacin activa

(vacunas) y el uso de barreras fsicas.
Barreras fsicas:
o Guantes: Para todo proceso referido a la manipulacin de sangre o
fluidos corporales y manejo de pacientes sin excepcin.
o Proteccin Va respiratoria. - Indicacin de uso: Cuando se prevea la
formacin de aerosoles, manejo de pacientes que tengan hemorragias en
boca o nariz al toser o estornudar pueden formar aerosoles.

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estrato social, sexo, religin, etc., uno debe seguir las precauciones

o Gafas: Proteccin en la mucosa del ojo. Las Indicaciones de uso: cuando

se prevea la formacin de aerosoles y en todo proceso referido a la
manipulacin de sangre o fluidos corporales.
o Mascarillas de reanimacin: Proteccin en la mucosa bucal y vas
respiratorias. Se usar siempre que se deba proporcionar ventilacin
asistida a una persona y no se disponga de un respirador.
Medidas de Eliminacin: mediante este principio se establece la manera

de descartar los elementos de riesgo patolgico protegiendo a los individuos
IV.- RECOMENDACIONES PERSONALES DE CONDUCTA

Las recomendaciones para todo personal que labora en un laboratorio de
Bioqumica son:
1. Manipular con cuidado los reactivos qumicos que generalmente son
altamente txicos.
2. Seguir las recomendaciones indicadas en los frascos de reactivos en lo
referente precauciones y a su grado de toxicidad.
3. No ingerir alimentos adentro del laboratorio.
4. Utilizar con mesura los materiales y reactivos porque son muy costosos.

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y al medio ambiente.

5. Realizar las pruebas con sumo cuidado porque son altamente sensibles a la
contaminacin.
6. Utilizar proteccin corporal (mandil, mascarilla, guantes, etc.)
7. Mantener el mximo cuidado de atencin cuando se aplican las tcnicas
porque son de cuidado.
8. Asegurarse de no presentar cortes, raspones u otras lastimaduras en la

piel y en caso de que as sea cubrir la herida de manera conveniente.
9. Usar guantes de ltex de buena calidad para todo manejo de material
biolgico.
10. No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas
11. No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar
de trabajo con los
guantes puestos.
trabajo.
13. No detener manualmente la centrifuga, no destaparla antes de que cese
de girar.
14. No permitir la entrada de personas ajenas al laboratorio y/o que no
tengan sus implementos de bioseguridad adecuados.
15. Emplear en todo momento las medidas de bioseguridad en el laboratorio.

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12. Lavar las manos con jabn y agua inmediatamente despus de realizar el

V.-NORMAS DE BIOSEGURIDAD
NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD
o Mantener el lugar de trabajo en ptimas
condiciones de higiene y aseo
o No es permitido fumar en el sitio de
trabajo.
o Las condiciones de temperatura, iluminacin
y ventilacin de los sitios de trabajo deben
ser confortables.
o Utilice en forma sistemtica guantes
plsticos o de ltex en procedimientos que conlleven manipulacin de
elementos. Hacer lavado previo antes de quitrselos y al terminar el
o Lvese cuidadosamente las manos antes y despus de cada procedimiento e

igualmente si se tiene contacto con material patgeno.
o
Evite deambular con los elementos de proteccin personal fuera de su

rea de trabajo.
o Emplee
mascarilla,
protectores oculares y
delantal
plstico
durante
procedimientos que puedan generar salpicaduras o gotitas aerosoles de

sangre u otros lquidos corporales.
o Realice desinfeccin y limpieza a las superficies, elementos, equipos de
trabajo, al final de cada procedimiento y al finalizar la jornada de acuerdo a
el proceso descrito en el manual de limpieza y desinfeccin.
o Los
recipientes
para
transporte
de
muestras
debe
ser
de
material
irrompible y cierre hermtico.

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procedimiento.

o Restrinja el ingreso a las reas de alto riesgo biolgico al personal no

autorizado, al que no utilice los elementos de proteccin personal necesarios
y a los nios.
o Disponga el material patgeno en las bolsas de color rojo, rotulndolas con
el smbolo de riesgo biolgico.
VI.- ELEMENTOS DE PROTECCIN PERSONAL

USO DE LOS ELEMENTOS DE PROTECCIN PERSONAL
Los elementos de proteccin personal son un complemento indispensable de los
mtodos de control de riesgos para proteger al trabajador colocando barreras en
las puertas de entrada para evitar la transmisin de infecciones.
1.-Protectores oculares:
En los procedimientos que
se generen gotas de sangre o lquidos corporales. Con

boca, nariz y ojos, evitando que se reciban inculos
infectados.
2.-Mascarilla
buco nasal:
protege de eventuales
contaminaciones con saliva, sangre o vmito, que

pudieran salir del paciente y caer en la cavidad oral y
nasal del trabajador. Al mismo tiempo, la mascarilla
impide que gotitas de saliva o secreciones nasales del
personal de salud contaminen al paciente, debe usarse
en los pacientes en los cuales se halla definido un plan de aislamiento de gota.
3.-Braceras:
Para evitar el contacto del
antebrazo y brazo con sangre o lquidos

corporales.

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esta medida se previene la exposicin de mucosas de

4.-Guantes: Reducen
el riesgo de contaminacin por fluidos en las manos.

Los guantes deben ser de ltex bien ceidos para
facilitar la ejecucin de los procedimientos. Si el
procedimiento a realizar es invasivo de alta exposicin,
se debe utilizar doble guante.
5-Gorro: Se
usa con el fin
de evitar en el trabajador de laboratorio el contacto
por salpicaduras por material contaminado y adems

evita la contaminacin de las sustancias o reactivos
que se manejan con los cabellos del trabajador de
laboratorio.
VII. El RIESGO BIOLGICO

El Riesgo Biolgico es aquel susceptible de ser producido por una exposicin no
a Agentes
Biolgicos.
representa el Riesgo Biolgico. Este

peligro
biolgico
manipulen
debe colocarse
en
Existe un smbolo internacional que

smbolo
las puertas
signo
de
los
internacional
locales
donde
de
se
Agentes Biolgicos del grupo de riesgo 2 o superior .
Smbolo Internacional de Riesgo Biolgico

B I O Q U I M I C A
controlada

Las vas de infecciones ms frecuentes

adquiridas en el laboratorio.
A travs de la boca
Comer, beber y fumar en el laboratorio. Pipetear con la boca.
Transferencia
de microorganismos
a la boca
mediante
los dedos
utensilios contaminados (bolgrafos, lpices, etc.).
A travs de la piel
Inoculacin accidental con una aguja hipodrmica, otros instrumentos
punzantes o vidrios.
Cortes, rasguos.
A travs de los ojos
Transferencia
de
microorganismos
los
ojos
mediante
dedos contaminados.
A travs de los pulmones
Inhalacin de microorganismos transportados por el aire
VIII NIVELES DE BIOSEGURIDAD.

Nivel 1:
Trabajo que involucra a agentes de peligro potencial mnimo para el personal y
el medio ambiente. Representa un sistema bsico de contencin que se basa
en prcticas microbiolgicas estndar sin ninguna barrera primaria o secundaria
especialmente recomendada, salvo una pileta para lavado de manos.
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Salpicaduras de materiales infecciosos en los ojos.

Nivel 2:
Trabajo que involucra a agentes de moderado peligro potencial para el personal
y el medio ambiente.
Es adecuado cuando se trabaja con sangre derivada de humanos, fluidos
corporales, tejidos, etc. donde puede desconocerse la presencia de un agente
10
infeccioso.
Se deben utilizar las dems barreras primarias y secundarias que correspondan,
tales como mscaras contra salpicaduras, proteccin facial, delantales y guantes
Nivel 3:
Trabajo que involucra a agentes que pueden causar enfermedades serias o
letales como resultado de la exposicin.
barreras primarias y secundarias para proteger al personal en reas contiguas,

a
la
comunidad
al
medio
ambiente
de
la
exposicin
aerosoles
potencialmente infecciosos.
Nivel 4:
Trabajo con agentes peligrosos o txicos que representan un alto riesgo
individual que ponen en peligro la vida.
personal
que
trabaja
Los
riesgos
principales
para
el
con agentes del Nivel de Bioseguridad 4 son la
exposicin respiratoria a aerosoles infecciosos, la exposicin de membranas

mucosas o piel lastimada a gotitas infecciosas y la auto inoculacin.

B I O Q U I M I C A
Al manipular agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se pone mayor nfasis en las

IX USO DE PRODUCTOS QUMICOS.

Los productos qumicos generalmente
presentan pictogramas de peligrosidad,
los
cuales
indican
los
riesgos
de
manipular un producto en particular.

Considerar la combustin y rango de
11
inflamabilidad de los distintos tipos de

gases,
lquidos
slidos.
Muchos
agentes qumicos son combustibles por

lo que su manipulacin debe realizarse
lejos del fuego.
Considerar los criterios de toxicidad en
el caso de productos corrosivos, irritantes, nocivos y txicos. Muchos reactivos
son agentes cancergenos y mutgenos.
El almacenamiento de reactivos debe ser el apropiado y acorde con su grado de
armarios de seguridad, el control de reactivos muy txicos, cancergenos y
mutgenos.
Uso de gases comprimidos y licuados. Considerar los tipos de gases que se
emplean en el laboratorio, sus propiedades fsicas, tipos, riesgos y medidas de
seguridad.
X. MANIPULACIN DE AGENTES INFECCIOSOS.

Infecciones accidentales en laboratorios. La manipulacin de agentes biolgicos
tiene un riesgo potencial de contaminacin. Lo ms frecuente se relaciona con el
personal no calificado o descuidos de la normas de conducta.
Situaciones de riesgo en el manejo de agentes infecciosos: pipeteo, apertura de
recipientes hermticos; centrifugacin; homogeneizacin; agujas y jeringas.

B I O Q U I M I C A
peligrosidad. Es importante considerarla incompatibilidad de reactivos, el tipo de

Medida de proteccin. Diseo de los experimentos. Diseo de los laboratorios

segn el tipo de agente infeccioso.
Desinfeccin y esterilizacin. Medidas elementales en la esterilizacin por vapor.
Causas ms frecuentes de esterilizaciones inadecuadas. Desinfeccin con agentes
qumicos lquidos o en solucin: niveles de desinfeccin y precauciones bsicas en
12
B I O Q U I M I C A
el empleo de agentes desinfectantes.


FIOLA
13
La fiolas, tambin llamados "matraces
aforados" son recipientes de vidrio de
cuello muy largo y angosto, en el cual
tienen una marca que seala un volumen
exacto a una temperatura determinada
que est grabada en el mismo
recipiente y generalmente es 20c.
Se emplean en operaciones de anlisis
qumico cuantitativo, para preparar
definidas.
PROBETA
Recipiente de vidrio para medir
volmenes que consiste en un cilindro
graduado; su precisin es bastante
aceptable, aunque por debajo de la
pipeta.
Las hay de capacidades muy diferentes:
10, 25, 50 y 100 ml.

B I O Q U I M I C A
soluciones de concentraciones

Recipientes de vidrio para medir

volmenes, son de gran precisin. Las hay
de capacidades muy diferentes: 0'1, 1'0,
2'0, 5'0, 10'0...
14
Al vaciar la pipeta se debe hacer

lentamente para evitar que quede lquido
pegado a las paredes. La ltima gota no es
necesario recogerla porque ya viene
aforada para que quede sin caer (salvo que
B I O Q U I M I C A
se indique lo contrario en la propia pipeta).
Pueden ser de dos formas: altos o bajos;

Sin graduar o graduados. Nos dan un
volumen aproximado (los vasos al tener
mucha anchura nunca dan volmenes
precisos).
Se pueden calentar sustancias en el
(pero no directamente a la llama) con
ayuda de una rejilla.


Se emplea para trasvasar lquidos

o disoluciones de un recipiente a
otro de boca estrecha sin
15
desperdiciar contenido.
Tambin para filtrar, en este
caso se coloca un filtro de papel
B I O Q U I M I C A
cnico o plegado sobre el embudo.
Conocido como Matraz de Sntesis

Extrema de Qumicos.
Matraz de vidrio donde se pueden agitar
disoluciones, calentarlas (usando rejillas),
etc. Las graduaciones sirven para tener un
volumen aproximado.
En una valoracin es el recipiente sobre el
cual se vaca la bureta.


Puede ser de vidrio o plstico.

Es un Recipiente de volumen variable,
normalmente pequeo. Sirven para hacer
16
pequeos ensayos en el laboratorio.

Se pueden calentar, con cuidado,
directamente a la llama. Se deben colocar
en la gradilla y limpiarlos una vez usados,
se colocan invertidos para que escurran. Si
por algn experimento se quiere mantener
Consiste en una varilla de vidrio, que se utiliza para mezclar o disolver

las sustancias, pueden ser de diferentes dimetros y longitud. Pueden
prepararse agitadores o baguetas de diferentes tamaos de 6 o ms
milmetros de dimetro para evitar que se rompan fcilmente.

B I O Q U I M I C A
el lquido, se utilizan con tapn de rosca.

Es una lmina de vidrio en forma circular

cncava convexa. Se utiliza en qumica
para evaporar lquidos, pesar productos
slidos o como cubierta de vasos de
17
precipitados, y contener sustancias
B I O Q U I M I C A
parcialmente corrosivas..
Las pinzas o tenazas estn hechas de

metal, con ellas podemos tomar los tubos
de ensayo para fijarlos al fuego y
aumentar la temperatura de las soluciones
que estn contenidas en l.
Tambin hay otras pinzas para tubos
buretas u otros recipientes.


Es una pieza del equipamiento de
18
laboratorio, que se usa para sujetar

pinzas, tubos de ensayo, buretas,
embudos,
Tambin se usa para montar aparatos
de destilacin y otros equipos similares
B I O Q U I M I C A
ms complejos.
Se utiliza cuando no se tiene el soporte

universal para sostener objetos con
firmeza. Es ampliamente utilizado en
varios experimentos. La finalidad que
cumple en el laboratorio es solo una, ya
que su principal uso es como herramienta
de sostn a fin de evitar el movimiento.
Sobre la plataforma del trpode se
coloca una tela de amianto para que la
llama no d directamente sobre el vidrio
y se difunda mejor el calor.


19
Tambin llamada micro placa. Es una placa

con mltiples pocillos que se utilizan como
pequeos tubos de ensayo; puede ser de
plstico o porcelana. Se ha convertido en un
utensilio estndar en la investigacin
analtica y clnica en microbiologa, y en
frecuentemente en el ensayo de
inmunoabsorcin ligado a enzimas (ELISA).
Es un instrumento de laboratorio usado

para succionar y transferir pequeos
volmenes de lquidos y analizarlos. Suelen
ser de 20000 o 1000u.
Se presionar un poco para succionar y para
desechar la punta se presiona el botn
lateral.
B I O Q U I M I C A
laboratorios de diagnstico. Se usa muy

Tambin llamada Pera de Succin.

Es un instrumento de laboratorio que se usa junto
a una pipeta para trasvasar lquidos sin la
20
necesidad de pipetear con la boca.
Una gradilla es una herramienta que
B I O Q U I M I C A
forma parte del material de

laboratorio y es utilizada para
sostener y almacenar gran cantidad
de tubos de ensayo.
Su principal funcin es facilitar el
manejo de los tubos de ensayo.
Normalmente es utilizado para
sostener y almacenar este material.
Se encuentra hecho de madera,
plstico o metal .


21
Instrumento de laboratorio creado por

calentar muestras (reactivos) y para
esterilizar sustancias.
Se coloca un trpode sobre ste junto a una
rejilla de amianto y encima de estos
componentes se coloca el recipiente a
calentar.
Es un equipo que crea un campo

magntico rotatorio que calienta
soluciones. No funciona muy bien en
soluciones espesas ni viscosas.

B I O Q U I M I C A
Robert Bunsen en 1857. Se usa para

Es un equipo de laboratorio que se usa

para realizar pruebas serolgicas,
aglutinacin, incubacin,
22
procedimientos bioqumicos,
Se utiliza en agua y a veces en aceite.
B I O Q U I M I C A
Su To va desde 37 a 100 grados.
Es un equipo que pone en rotacin una

muestra para acelerar la decantacin
o sedimentacin de sus componentes
(por la fuerza centrfuga) segn
densidad.
As se separa en dos fases:
Fase Slida
Fase Lquida


Tambin se le llama Horno de

Secado.
Es un equipo de laboratorio que se
23
utiliza para secar y esterilizar

recipientes de vidrio y metal; as
mismo para secar sustancias.
Su temperatura oscila entre 37 a
Balanza de laboratorio destinada a medir

pequeas masas.
Como mximo pesa 250gr.
Si se pesa una masa menor a 50mg, se anota el
peso del recipiente y se le suma el peso del
recipiente.
Si se pesa una masa mayor a 50mg, se desprecia
el peso del recipiente con el botn TARA.

B I O Q U I M I C A
300 grados centgrados.

24
Es un recinto o espacio de trabajo cerrado y ventilado para trabajar
de modo seguro con materiales contaminados, agentes patgenos o
compuestos voltiles.
B I O Q U I M I C A
Forma parte del equipo biomdico de muchos laboratorios.


Informe
25
B I O Q U I M I C A
Segundo

Medicin glucmica
I.
OBJETIVO GENERAL:
Determinar la glucemia e importancia en la salud
II.
OBJETIVOS ESPECFICOS:
Determinar la concentracin de glucosa en suero o plasma
26
Conocer los valores de glucemia normales

Identificar factores que modifican la glucemia
III. MARCO TERICO:

Glucemia :
Medida de concentracin de glucosa libre en la sangre, suero o plasma sanguneo
La glucosa es la principal fuente de energa en los seres vivos. Por tal razn es
metabolito
fundamental
en
los
procesos
biolgicos.
La
determinacin
cuantitativa de este biocompuesto, ha sido objeto de muchos estudios y la

literatura ofrece diversas tcnicas de anlisis que varan de acuerdo con
diferentes factores como la naturaleza de la muestra, los contenidos de glucosa y
la viabilidad experimental.
Mantener los niveles de glucosa (azcar) en la sangre dentro de los valores
adecuados puede prevenir o retrasar los problemas de salud que surgen por la
diabetes. La mayora de las cosas que se requiere para cuidarse de diabetes son
cosas que usted mismo har.
Use un plan de alimentos.
Mantngase activo fsicamente.
Tome sus medicinas.
Trate de lograr los niveles deseados de glucosa en la sangre la
mayor parte del tiempo.
Lleve un registro de sus niveles de glucosa en la sangre con los
resultados de sus pruebas diarias y de las pruebas de A1C.
B I O Q U I M I C A
un

Qu ocasiona que suban o bajen mis niveles de glucosa?

Los niveles de glucosa en la sangre suben y bajan durante el da. Una de las
claves para cuidarse de la diabetes es que entienda lo que ocasiona estas subidas
y bajadas. Si lo sabe, entonces puede tomar medidas para mantener la glucosa
en la sangre en un nivel adecuado.
Una comida o merienda con ms carbohidratos de lo usual
La inactividad fsica
No tomar suficiente medicamento para la diabetes
Los efectos secundarios de otros medicamentos
Infecciones u otras enfermedades
Cambios en los niveles hormonales, como los de la menstruacin
Estrs
Qu hace que baje la glucosa en la sangre?
Perderse una comida o merienda, o comer una comida o merienda

con menos carbohidratos de los planeados
Bebidas alcohlicas, sobre todo si se toman con el estmago vaco
Ejercitarse ms de lo planeado
Tomar demasiado medicamento para la diabetes
Los efectos secundarios de otros medicamentos
Valores normales
Suero o Plasma: 75 115 mg/dL
En los nios pequeos se aceptan valores de 40 a 100 mg/dL
L.C.R: 40 80 mg/Dl

B I O Q U I M I C A
Qu hace que se eleve la glucosa en la sangre?
27

IV.
Reacciones qumicas que ocurren en la prctica
La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidacin de glucosa a cido glucnico. El

perxido de hidrgeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor
cromognico de oxgeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD):
28
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de glucosa

presente en la muestra ensayada.
Reactivos Provistos
S. Standard*: solucin de glucosa 100 mg/dl (1 g/l).
A. Reactivo A: solucin conteniendo glucosa oxidasa (GOD), peroxidasa (POD),
4-aminofenazona (4-AF), buffer fosfatos pH 7,0 y 4-hidroxibenzoato en las
siguientes concentraciones:
GOD (microbiana) ................................................ 10 kU/l
POD (rbano) ......................................................... 1 kU/l
4-AF....................................................................0,5 mmol/l
Fosfatos................................................ 100 mmol/l, pH 7,0
Hidroxibenzoato...................................................12 mmol/l

B I O Q U I M I C A
Glicemia enzimtica AA

V.
Materiales, Equipos y Reactivos :

agua destilada 1 lt.
jeringa de 5 cc 3 c/u
alcohol
algodn
ligadura 2-3 x mesa
tubos de ensayo de 13 x 100
29
micro pipeta
gradilla
cubetas de espectofotrometro
centrifuga
bao maria
espectofotometro
reactivo:
Procedimiento
1 lavamos los tubos de ensayo con agua destila y luego los secamos.

B I O Q U I M I C A
VI.

2 Vamos a extraer 3 muestras de sangre teniendo en cuenta las

medidas de bioseguridad y con mucho cuidado vamos a colocar de manera
pausada la sangre extrada en los tubos de ensayo
B I O Q U I M I C A
30


3Vamos a llenar un
cuarto tubo de ensayo
con la misma cantidad
que tienen los otros
pero con agua destilada
31
esta vez para que

pueda compensar el
peso al momento de
ponerlos en la
4 Colocamos los
tubos de ensayo en la
centrifuga durante 5
min a 2500 RPM

B I O Q U I M I C A
centrifuga

5en otros 3 tubos

de ensayo con ayuda de
la micro pipeta vamos a
echar la glucosa es decir
el reactivo estndar
6Una vez terminado

el proceso de
centrifugado procedemos
a sacar los tubos de
ensayo y vamos a ver
que la sangre se
encuentra dividida en
eritrocito, plasma.

B I O Q U I M I C A
32

7Con ayuda de la
micropipeta vamos a
sacar una pequea
cantidad de plasma de
8luego vamos a llevar

los tubos de ensayo al
equipo de bao mara
durante 5 minutos a
37C mientras los
movemos lentamente,

B I O Q U I M I C A
33
cada muestra

9luego vamos a
vaciar el contenido de
los tubos en unas
cubetas de
34
10luego esperamos
que termine el
espectrofotmetro y
vemos las cifras que dio y
procedemos a calcular.
Luego limpiamos nuestra
rea de trabajo.

B I O Q U I M I C A
espectrofotmetro

VII. Clculos
Muestra de compaero que lleva una hora de haber comido
35
Como podemos ver a pesar del hecho de haber comido
B I O Q U I M I C A
recientemente se mantiene dentro de los valores normales
Muestra de una compaera
Observamos que se mantiene dentro de los valores normales


Muestra de un compaero
36
muestras observamos que an se mantiene dentro del

rango promedio establecido.

B I O Q U I M I C A
A pesar de ser una cifra un poco menor a la de las dems

VIII.
Aplicaciones en su profesin
La patologa ms comn relacionada con el metabolismo de los hidratos de

carbono es la diabetes mellitus. El diagnstico precoz y el control de los
pacientes diabticos, tienen por objeto evitar la cetoacidosis y las
complicaciones resultantes de la hiperglicemia, mediante el tratamiento
37
adecuado. Dado que existen mltiples factores causales de hiper o

hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condicin fisiolgica y/o la
patologa presente en el paciente.
El valor de glucemia proporcionado es un

importante dato para la valoracin de un
adecuado control de la diabetes.
Este valor puede verse influido o incluso
modificado por algunas variables resumidas
en este trabajo, algo importante a tener en
cuenta en la prctica clnica y cuando se realizan estudios comparativos
con las glucemias obtenidas en el laboratorio.

B I O Q U I M I C A
IX. Conclusiones

X.
Recomendaciones
Si sus mediciones de glucosa en la sangre son frecuentemente ms

altas que las deseadas, consulte a su proveedor de atencin mdica.
Hable con su equipo de cuidado de la salud sobre cmo hacer cambios
en su plan alimenticio, su actividad fsica o sus medicamentos para la
38
diabetes.
Si sus mediciones de glucosa en la sangre son frecuentemente ms
bajas que las deseadas, la llamada hipoglucemia, cuando baja la glucosa
en la sangre, ocurre cuando su nivel de glucosa en la sangre disminuye
a menos de 70 mg/dl. Tener baja la glucosa en la sangre puede hacer
que se sienta hambriento, tembloroso, nervioso, sudoroso, mareado,
glucosa en la sangre, mdasela con su medidor. Si el resultado es

menor de 70mg/dl, siga estas recomendaciones para regresar a un
nivel ms seguro. Consuma una de las opciones de carbohidratos de
esta
lista
cuanto
antes
(cada
una
tiene
unos
15
gramos
de
carbohidratos) para elevar su nivel de glucosa en la sangre:

3 4 pastillas de glucosa
Media taza (4 onzas) de jugo de fruta
Media taza (4 onzas) de refresco regular (no de dieta)
8 onzas de leche 5 7 piezas de dulces de caramelo

B I O Q U I M I C A
adormilado, ansioso o confuso. Si piensa que tiene demasiado baja la

1 cucharada de azcar o miel Vulvase a medir la glucosa en la sangre

despus de quince minutos. Si an la tiene en menos de 70 mg, tome
otra porcin de carbohidratos. Repita los pasos hasta que su nivel de
glucosa sea de por lo menos 70 mg/dl. Qu debo hacer si a menudo
tengo baja la glucosa en la sangre? Si su promedio de glucosa en la sangre
39
es bajo frecuentemente, deber hacer cambios en su plan de alimentos,

actividad fsica o medicinas para la diabetes. Lleve un registro de cundo
tuvo episodios de glucosa baja en la sangre. Anote las causas posibles,
tales como una actividad fsica no planeada, y luego hable al respecto con
su equipo de cuidado de la salud.
Utilizar guantes
B I O Q U I M I C A
No desechar los residuos en el lavadero


CUESTIONARIO
1 Por qu se produce mayor concentracin de lactato en los msculos, en el
cual hace que cause dolor en periodo largo de ejercicios?
Importancia del lactato sobre el sistema muscular
Cuando se produce lactato en los msculos, se producen iones de hidrgeno excesivos
40
junto con el lactato. Si existe una acumulacin sustancial, los msculos se vuelven muy
cidos. Estos iones de hidrgeno causan problemas con la contraccin de los msculos
durante el ejercicio.
Los atletas describen una sensacin de "quemar" o "apretar" en los msculos cuando el
esfuerzo es extremo. Cuando el lactato es producido, el ion de hidrgeno es producido;
cuando el lactato sale de la clula, los iones de hidrgeno salen de la clula con el
lactato. Por lo tanto, el lactato no es la causa de la fatiga muscular. Pero est
directamente relacionado con la acidez que se cree ser la verdadera causa de ella.
Aunque a los atletas no les gusta esta sensacin de quemar, realmente es un mecanismo
de defensa contra dao al msculo. Demasiada acidez puede descomponer la fibra
muscular. Se teoriza que una de las causas del entrenamiento excesivo ("over-training")
Los atletas pueden producir menos lactato o despejar el lactato ms rpidamente de sus
msculos, el proceso reducir los iones de hidrgeno problemticos que inhiben su
desempeo.
La investigacin en los ltimos aos ha demostrado que aunque es importante una
produccin menor, la clave para el xito atltico es poder despejar el lactato del msculo
donde es producido.
Si el atleta entrena bien, su cuerpo mover o transportar el lactato a otro lugar
rpidamente y resolver el problema de tener niveles muy altos de lactato en los
msculos. Esto significa que cuando un atleta compite en un alto nivel podr mantener
niveles altos de esfuerzo durante ms tiempo si su cuerpo despeja el lactato
rpidamente.
Segundo, para los eventos que duran menos de 10 minutos (por ejemplo, la natacin, el
remo, el ciclismo en pista, el patinaje, y muchos eventos de correr), la habilidad de
producir grandes cantidades de energa hacia el final del evento es crtica para el xito.
El lactato sanguneo es una indicacin de cunta energa ha sido generada. Por lo tanto,
una de las mejores maneras para probar si el atleta ha generado niveles altos de energa
hacia el final de un evento, es medir los niveles de lactato en la sangre despus de un
esfuerzo mximo. Mientras ms alto, mejor.

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es demasiado entrenamiento en niveles que producen altos niveles de cido.

Mediciones del lactato

Debido a que el lactato juega un papel tan importante en la produccin de energa y el
desempeo deportista, los fisilogos del deporte y los entrenadores han desarrollado
varias maneras de medir y controlarlo.
La manera ms comn de medir el lactato es mediante una prueba de ejercicio graduado
2 Dnde se efectuara la regulacin en la glucolisis y cules son los que inhiben su

mecanismo?
41
La gluclisis est regulada por tres reacciones catalizadas por la HEXOCINASA

FOSFOFRUCTOCINASA y PIRUVATO CINASA.
Se inhibe la FOSFOFRUCTICINASA por concentraciones altas de ATP.
EN CONCLUSIN, SE FORMAN 2 ATP Y 2 NADH AL BALANCEAR LAS

REACCIONES QUE CONSUMEN ENERGA CON LAS QUE LA GENERAN
4 Qu ruta de glucolisis se efecta por la fermentacin?

Las fermentaciones son, igual que la glucolisis, rutas metablicas caractersticas
de la falta (o insuficiencia) de oxgeno ambiental. En esas condiciones, el
NADH+H+ no puede ser utilizado por la clula para transformarlo en ATP, sino
que su funcin celular consiste simplemente en recibir los protones y los
electrones desprendidos en otras reacciones celulares. Una vez conseguido esto, su
papel se agota, y lo que la clula necesita es regenerar el NAD+, cuya sntesis es
costosa, para seguir realizando su metabolismo. Algo similar ocurre con el
piruvato.

B I O Q U I M I C A
3 Realiza el balance de energa de glucolisis y Cul es el balance neto en ATP y

caloras?

Mientras que las clulas aerobias pueden seguir degradndolo y obteniendo la

energa que an contiene, si no hay oxgeno disponible es una molcula que
resulta "intil" para la clula, por lo que su destino final es su eliminacin. Las
fermentaciones van a dar solucin a ambos problemas cuando la clula se
encuentra en un ambiente anaerobio: por una parte, van a ceder los electrones y
los protones del NADH+H+ al piruvato (o a una sustancia relacionada con l),
regenerando as la coenzima que necesitan para seguir funcionando, y por otra
42
van a sintetizar un derivado del piruvato, que incluya esos protones y esos
electrones, que va a ser eliminado como sustancia de desecho.
5 Realiza un cuadro con las diferencias ente la glucolisis anaerbica y la glucolisis

aerobia?
GLUCOLIS
AEROBICA
El producto glucoltico
El producto glucoltico
dominante en la mayora de
dominante en la mayora
los tejidos es el actato
de los tejidos es el piruvato
Se realiza sin oxigeno
Se realiza con la presencia

del oxigeno
Hay dos ATP netos
Es metabolizada por el ciclo

de Krebs
6 Para qu sirve los NADH+?

Su funcin principal es el intercambio de electrones e hidrogeniones en la
produccin de energa de todas las clulas
Acta como coenzima en las reacciones redox.
Est implicado en reacciones de oxidacin y reduccin llevando los
electrones de una a otra.
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GLUCOLIS
ANAEROBICA

7 Qu aporta el ciclo de Krebs y por qu es importante?

Es una ruta metabolica, es decir, una sucesin de reacciones qumicas, que
forma parte de la respiracin celular en todas las clulas aerobicas.
El ciclo de Krebs tambin proporciona precursores para muchas biomolculas,
como ciertos aminocidos. Por ello se considera una via anfibolica es decir,
catablica y anablica al mismo tiempo.
43
Es importante el ciclo de Krebs porque es el proceso centrl de la obtencin de

energa en todos los organismos de planeta
B I O Q U I M I C A
8 Grafique Ud. La etapa de la hemostasia de la glucosa


9 Existen individuos que no digieren disacridos, presentan intolerancia a la leche y a los

pasteles, debido a la lactosa y a la sacarosa que contienen. Estos individuos pueden tomar
miel natural, pero no miel adulterada, si la miel natural la fbrica las abejas a partir de la
sacarosa y la adulterada tambin se hacen con la sacarosa. A que puede ser debida esta
diferencia en su aceptacin digestiva?
44
Debido a que la miel adulterada est mezclada con otros aditivos como glucosa
comercial o jarabe de alta fructosa y por ello no tiene la misma aceptacin digestiva
que la miel natural.
10 Habitualmente para las conservas de frutas se utiliza sacarosa Por qu la glucosa

no es adecuada como conservante?
La glucosa se comporta como reductor, dado que el grupo aldehdo (-CHO) de la forma
abierta se oxidara hasta cido (-COOH) por la actividad de bacterias aerobias, originando
La sacarosa, al ser un azcar no reductor, resiste durante ms tiempo la acidificacin de

las conservas dulces.
11 Cuando la sangre se extravasa, por ejemplo en un hematoma, se destruyen hemates y

se libera hemoglobina, explicar porque la zona se pone primero morada y posteriormente se
vuelve amarillo
Las extravasacin consiste en la salida de la sangre de las venas por rupturas de las
venas. La sangre empieza a migrar en zonas adyacentes donde ocurri el accidente
siempre en el plano del tejido celular subcutneo que es donde se le localizan las venas
superficiales, la sangre venosa hace que la coloracin de la piel cambie a un tono morado,
luego de unos das la sangre se va reabsorbiendo cambiando a un tono verdoso para
finalmente cambiar a color amarillento y luego restaurar el color normal de la piel

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fermentaciones no deseadas.

12 En estos febriles, al agotarse el glucgeno, y no ingerir alimento, se produce un

exceso de cuerpos cetnicos, sealar que tipo de biomolculas se estn degradando para
originarlos
Los cuerpos cetnicos se producen principalmente en las mitocondrias de las clulas del
hgado. Su sntesis ocurre en la respuesta a bajos niveles de latidos, y despus del
agotamiento de las reservas celulares de glucgeno. la produccin de cuerpos cetnicos
comienza para hacer disponible energa que es guardada como cidos grasos. Los cidos
grasos son enzimticamente descompuestos de la beta oxidacin para formar acetil CoA
45
13 si la membrana celular es impermeable a los azucares fosforilados, que integrantes de

la glucolisis podrn atravesarla y cuales no podrn.
Atraviesan todos los azucares glucosa fructuosa y galactosa. Una vez adentro se
fosforilan lo cual, significa que no podrn escapar hacia el exterior y estarn preparados
para su metabolismo. Es decir, las formas fosforiladas de estos azucares simples no
B I O Q U I M I C A
pueden atravesarla


XI.
Bibliografa
http://professional.diabetes.org/
46
http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bi
oquimica/guia_1_3.pdf
http://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20e
spanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdf
http://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS17_GLU_TR_201
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representa el Riesgo Biolgico. Este

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Smbolo Internacional de Riesgo Biolgico

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utensilios contaminados (bolgrafos, lpices, etc.).

A travs de los ojos

VIII NIVELES DE BIOSEGURIDAD.

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