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1. INTRODUCCION:
Existen muchos mtodos para la cuantificacin de microrganismo,
incluyendo mtodos microscpicos, electrnicos (contador Coulter),
qumicos (para estimar masa celular), y conteo en placas donde se
forman y crecen las colonias de bacterias.
El
recuento microscopico directo trata de un mtodo para el
"recuento de totales", dado que se contabilizan los microorganismos
vivos y muertos. Cuando el mtodo solamente recuenta organismos
vivos se denomina "recuento de viables
Entre las principales desventajas del recuento directo tenemos: se
pueden contar clulas muertas y vivas, dificulta el conteo de
bacterias mviles, se requieren concentraciones de bacterias
adecuadas
En esta tcnica un volumen definido se coloca en un portaobjetos
para luego ser observado al microscopio. El mtodo de recuento de
Breed es muy usado en la industria lctea, en ste se colocan 0.01 ml
de muestra sobre un portaobjetos con un recuadro de 1 cm 2 que se
tie con un colorante para luego contar las clulas observadas con el
objetivo de 100X, al final el nmero de bacterias contadas se
multiplica por 100. Los recuentos microscpicos tambin se realizan
usando la cmara de Petroff-Hausser; estos mtodos no requieren
tiempo de incubacin.
Los estudios relacionados con el anlisis de muestras como agua,
alimentos, leche y aire requieren de una enumeracin cuantitativa de
los microorganismos presentes en estos compuestos, ya que la
calidad microbiolgica de estos productos est en relacin directa con
la calidad sanitaria y la seguridad para el consumo de ellos.
2. OBJETIVOS:
Adiestrar al estudiante con el manejo del metodo de extension
de Breed
Determinar el numero total de microorganismos presentes en
una muestra de alimento por el metodo de breed.
3. MATERIAL
MATERIAL BIOLOGICO
Agua
MATERIAL DE LABORATORIO
Lamina porta objetos
Pipeta graduada
Mechero
Asa bacteriologica
COLORANTE Y REACTIVO
Violeta de genciana
Safranina
Alcohol acetona
Lugol
EQUIPO
Microscopio
4. PROCEDIMIENTO
Sobre un porta objetos limpio y desengrasado se dibujo con
un lpiz un cuadrado de un centmetro cuadrado.
Se homogenizo la muestra problema y con una pipeta se
coloco una gota de la muestra (aproximadamente 0,01 ml)
sobre el cuadrado y extendio bien sin salirse de l.
Se fijo la muestra y se coloreo mediante la tecnica de Gram
Se observo al microscopio.
Se conto el nmero de microorganismos en varios campos, no
menos de 10 campos.
Luego se sac un promedio del nmero de microorganismos
por campo y se multiplic por el factor microscpico.
Luego, como la muestra usada fue de 0.01 mL,
multiplicaremos el resultado anterior obtenido por 1ml para
pasarlo a la misma unidad
5. RESULTADOS
ACM = r 2
2
FM =
10
=12732.4
7854
10712732.40.01 ml
x1 ml
x=13 107
6. COMENTARIO
El metodo de Breed es un metodo de recuento directo que se puede
aplicar para el analisis de muestras en el campo de alimentos nos
indica en el numero de celulas o microorganismos esta alterando un
determinado alimento , pero el error de este metodo que cuenta
celulas vivas y muertas.
7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
2. OBJETIVO:
3. MATERIAL
BIOLOGICO
Muestras conservadas
parasitos
DE
conteniendo
huevos
quistes
de
LABORATORIO:
Lamina portaobjetos
Lamina cubre objetos
Lugol
Gotero
EQUIPO
Microscopio
4. PROCEDIMIENTO
Se homogenizo la muestra 25 g en 225 ml de agua destilada se
lavo y se centrifugao para obtener el sedimento.
Se agrego lugol y se suspendio el sedimento y se observo en el
microscopio
5. RESULTADOS
Observacion: Ascaris sp
Aumento : 40 x
Observacion:
Entamoeba coli
Aumento : 40 x
Observacion:
Himenolepis sp
Aumento : 40 x
Observacion: Taenia sp
Aumento : 40 x
6. COMENTARIO
Los parasitos pueden ser transmitidos mediante la ingesta de
alimentos o agua contaminada ocasionando una serie de
enfermedades en las personas con malos habitos alimenticios e
higienicos.
7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
2. OBJETIVOS
3. MATERIAL
BIOLOGICO
Muestra (agua)
DE LABORATORIO
Tubos de ensayo
Pipetas de 10 y 1 ml
Campana
Durhanhttps://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/
38380/Eva%20Garc%C3%ADa.%20Calidad
%20leche-2014.pdf?sequence=1
Gradilla
Mechero
MEDIOS DE CULTIVO
Caldo lactosa bilis verde brillante (BRILLA)
Caldo triptonado
REACTIVO
Kovacs
EQUIPOS
Estufa reguladora a 35 -37C
Bao Maria a 44 C
4. PROCEDIMIENTO
5. RESULTADOS
1 TRIADA = 3 POSITIVOS
2 TRIADA = 1 POSITIVO
3 TRIADA = NINGUN POSITIVO
COLIFORMES TOTALES= 43
NMP/ 100ml
6. COMENTARIO
El numero mas probable (NMP/ml : 43) de coliformes totales en la
muestra de agua.
El crecimiento bacteriano de coliformes en los tubos es reflejado
mediante el cambio de apariencia en el medio que se enturbia y la
presencia de gas que se observa en la campana Durham.
7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
PASTEURIZACION
1. INTRODUCCION
La pasteurizacin o pasterizacin, es el proceso trmico realizado
a lquidos (generalmente alimentos) con el objetivo de reducir la
presencia
de agentes
patgenos (como
por
ejemplo
ciertas bacterias, protozoos, mohos, levaduras, etc.) que puedan
contener. Este proceso de calentamiento recibe el nombre del que lo
llev a cabo por primera vez, el cientfico-qumico francs Louis
Pasteur (1822-1895). La primera pasteurizacin fue realizada el 20
de abril de 1864 por el propio Pasteur y su colega Claude Bernard.
Uno de los objetivos del tratamiento trmico es una "esterilizacin
parcial" de los alimentos lquidos, alterando lo menos posible su
estructura fsica, sus componentes qumicos y sus propiedades
organolpticas. Tras la operacin de pasteurizacin, los productos
tratados se enfran rpidamente y se sellan hermticamente con
fines de seguridad alimentaria; por esta razn, es bsico en la
pasteurizacin el conocimiento del mecanismo de la transferencia
de calor en los alimentos. A diferencia de la esterilizacin, la
pasteurizacin
no
destruye
totalmente
las esporas de
los microorganismos,
ni
elimina
todas
las clulas de microorganismos termoflicos.
Louis Pasteur mejor la calidad de vida al hacer posible que
productos alimenticios bsicos, como la leche, se pudieran
transportar
largas
distancias
sin
ser
afectados
por
la descomposicin. En la pasteurizacin, el objetivo primordial no es
la "eliminacin completa de los agentes patgenos" sino la
disminucin sustancial de sus poblaciones, reducindolas a niveles
que no causen intoxicaciones alimentarias a los humanos (siempre
que
el
producto
pasteurizado
se
mantenga
refrigerado
correctamente y que se consuma antes de la fecha de
caducidad indicada). En la actualidad, la pasteurizacin es objeto de
cada vez ms polmicas por parte de ciertas agrupaciones de
consumidores en todo el mundo, debido a las cuestiones existentes
sobre la destruccin de vitaminas y alteracin de las propiedades
organolpticas (sabor y calidad) de los productos alimenticios
tratados con este procedimiento.
2. OBJETIVOS
Saber la importancia de la
fabricacion de alimentos.
3. MATERIAL
BIOLOGICO
Muestra (agua)
DE LABORATORIO
Pipetas
Placas petri
Mechero
Gradilla
Termometro
Vaso de precipitacion
MEDIOS DE CULTIVO:
PCA
EQUIPOS:
Estufa
4. PROCEDIMIENTO
5. RESULTADOS
Muestra original
Placa 1= 94
Placa 2 = 106
RECUENTO EN PLACA
1. INTRODUCCION :
En diversos estudios microbiolgicos (como anlisis de alimentos, de
agua de bebida, de productos farmacuticos o del medioambiente
entre otros), se requiere conocer el nmero de microorganismos
presentes en un material con objeto de determinar su calidad. El
procedimiento es esencialmente el mismo que para la medida del
crecimiento de las poblaciones de bacterias El crecimiento de
poblaciones microbianas puede determinarse mediante mtodos de
medida de la masa total celular, que generalmente es directamente
proporcional al nmero de clulas, (mtodos de determinacin del
peso, de la actividad del cultivo o mtodos turbidimtricos) o por la
determinacin del nmero de clulas. Es un mtodo muy utilizado
cuando se necesita determinar el tamao de la poblacin bacteriana
de una muestra.
El recuento de microorganismos, en este caso, se basa en que cada
uno desarrollar una colonia visible. Pero debido a que una muestra
3. MATERIAL
BIOLOGICO
Muestra (agua)
DE LABORATORIO
Placas petri esteriles
Pipetas
Mechero
Tubo de ensayo
MEDIO DE CULTIVO
Agar cuenta germenes (pca)
EQUIPOS
Incubadora regulada a 35- 37 C
4.
PROCEDIMIENTO
Se procedio a tomar la muestra de agua y se coloco un 1 ml
apartir de la muestra original en 2 placas.
Se coloco 1ml de la muestra original en 9ml de SSF (10 -1) a partir
de la dilucion se sembro por incorporacion 1ml en 2 placas.
Se licuo el medio PCA y se agrego a todas las placas y se dejo
solidificar.
Se llevo a incubar a 37C por 24-48 horas.
5. RESULTADOS
Dilucion 10-1 :
Placa 1= 18 UFC/ml
Placa 2= 7 UFC/ml
7x101
UFC/ml
Muestra original :
Placa 1= 156 UFC/ml
14x101
Placa 2= 131 UFC/ml UFC/ml
6. COMENTARIO
Los resultados obtenidos en la practica estan dentro del rango
establecido de 30-300 UFC/ml , al momento de la lectura se observo