El contenido de fenoles totales se determin por el mtodo de Folin-Ciocalteu
mtodo de Stintzing et al (2005).
Con el fin de expresar los resultados como equivalentes de cido glico se
realiz una curva de calibracin con este reactivo. La curva se gener a partir de una solucin madre de 400 mg/100 ml, se realizaron concentracin con un intervalo de 0-30 mg/ml (anexo 4), cabe mencionar que la lectura del presente anlisis se llev a cabo en un espectrofotmetro marca Thermo Fisher Scientific modelo G1OS UV-Vis.
Se colocaron 100 L de muestra centrifugada en viales de eppendorf, se les
agregaron 500 L de solucin Folin-Ciocalteu y 400 L de solucin de carbonato de sodio al 7.5%, en seguida, las muestras se agitaron en un vortex marca Scientific Industries por un minuto y fueron incubados a temperatura ambiente (26 2 C) durante 30 minutos. Trascurrido este tiempo, se midi la absorbancia a una longitud de onda de 765 nm la cual refleja la cantidad total de polifenoles. La concentracin total de fenoles presente en las diferentes muestras se calcul con la ecuacin de la recta obtenida de la curva de calibracin de cido glico ya elaborada. Y= 0.0338x 0.0038
ACTIVIDAD INHIBIDORA DEL RADICAL LIBRE 2,2-DIFENIL-1-PICRILHIDRAZILO
(DPPH).
El radical DPPH es uno de los pocos radicales orgnicos nitrogenados estable y
adems comercialmente disponible. Presenta un color violeta intenso, que disminuye en presencia en un antioxidante u otro radical. De esta manera la capacidad antioxidante que tienen las muestras se cuantifica midiendo el grado de decoloracin que estas provocan en una solucin etanlica de DPPH. El reactivo DPPH es un radical libre estable, que en solucin etanlica su mxima absorbancia se obtiene a una longitud de onda de 520 nm.
La actividad antirradical con base en el DPPH se evalu de acuerdo al
procedimiento reportado por Morales y Jimnez-Prez (2001). La actividad antioxidante se expres en mol equivalente de Trolox/L. El trolox (Carboxilico 6-hidroxi-2,5,8-tetrametilcromo) es una molcula que presenta una fuerte actividad antirradical. La tcnica consisti en preparar una solucin de DPPH a una concentracin de 7.4 mg/100 ml en etanol, se agit durante 10 minutos. Posteriormente se colocaron en viales de eppendorf 100 L de la muestra, se agreg tambin 500 L de la solucin DPPH y se llev a agitacin en vortex por 1 minuto. Se dej reposar a temperatura ambiente (26 2 C) durante 1 hr, transcurrido este tiempo, si exista turbidez en las muestras los viales se centrifugaban a 3000 rpm por 10 min. Se ley absorbancia del sobrenadante a una longitud de onda de 520 nm. Con el fin de expresar los resultados como equivalentes de Trolox se realiz una curva estndar con este reactivo solubilizado en etanol. La curva de calibracin se gener en un intervalo de concentracin de 0 a 400 mol Trolox/L (anexo ). La concentracin final del radical libre DPPH se calcul con la ecuacin de la recta obtenida de la curva de calibracin de trolox solubilizado en etanol.
Y= -0.0041x + 1.5456
Cabe mencionar que las marcas de los reactivos utilizados fueron Aldrich, Meyer y Analytyka.
ANEXO CURVA DE CALIBRACIN DE TROLOX
ANEXO CURVA DE CALIBRACIN DE CIDO GLICO
ESTAS SON ALGUNAS BIBLIOGRAFAS QUE TE PUEDEN SERVIR A LA HORA DE
DISCUTIR Barahona, C. V. C. (2013). Evaluacin de la actividad antioxidante y valor nutracutico de las hojas y frutos de la guanbana (annona muricata). Tesis. Escuela Superior Politcnica de Chimborazo. Riobamba, Ecuador. Floegel A, Kimb D, Chung S, Koo SI, Chun OK. (2011). Comparison of ABTS/DPPH assays to measure antioxidant capacity in popular antioxidant-rich US foods. ICBF, Instituto Colombiano de Bienestar Familiar. (2005). Tabla de Composicin de Alimentos. Karadag A, Ozcelik B, Saner S. (2009), Review of methods to determine antioxidant capacities. Food Anal Methods 2: 41 60. Kuskoski EM, Asuero AG, Troncoso AM, Mancini- Filho J, Fett R. (2005). Aplicacin de diversos mtodos qumicos para determinar actividad antioxidante en pulpa de frutos. Repo De Carrasco R., Encina Z. C. R. (2008). Determinacin de la capacidad antioxidante y compuestos bioactivos de frutas nativas peruanas. Rev. Soc. Qum. v.74 n.2. 108-124.
201.249.180.234_anaco__siceudo_reportes_record_academico.php_cedula=25994619&esp=2115&tipo=completas&nucleoUsr=EXTENSION REGION CENTRO SUR ANACO&codNucleoUsr=31&tipoEstu=regular&operacion=601