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FACULDADE DE ENGENHARIA - UNESP ILHA SOLTEIRA

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA E ZOOTECNIA


DISCIPLINA: BIOLOGIA CELULAR

ROTEIROS DE AULAS PRTICAS


E
LISTAS DE EXERCCIOS
AGRONOMIA E ZOOTECNIA

Edson Guilherme Vieira

1
MICROSCPIO TICO

1. Definio

O microscpio tico (M.O.) um instrumento que permite observar objetos de


pequenas dimenses ou invisveis a olho nu. Fornece uma imagem consideravelmente aumentada,
geralmente invertida da esquerda para a direita, devido associao de lentes.

2. Partes do Microscpio tico


- Mecnica
a) Base ou P: o p sustenta todo o conjunto do M.O. podendo ser triangular, redondo,
oval ou de outra forma qualquer desde que seja amplo, slido e pesado a fim de suportar essa
sustentao.

b) Brao, Coluna ou Estativo: este se articula com o p, sustentando o tubo do


microscpio onde se encontram as lentes.

c) Platina: uma mesa em miniatura, perpendicular ao grande eixo do microscpio, que


sustenta a lmina e tem um orifcio no centro dando passagem para a luz. A lmina presa por
meio de pinas ou garras e desloca-se por um mecanismo de deslizamento, provido de botes que
se movimentam chamados Charriot. Na platina h tambm um sistema de escalas para a marcao
de pontos.
d) Canho ou Tubo: faz a comunicao entre as partes ticas de resoluo e ampliao,
ou seja, entre a objetiva e a ocular.
e) Revlver: pea giratria do tubo que proporciona a fixao e troca de objetivas.
f) Parafuso Macromtrico: permite movimentos mais grosseiros da platina em direo
s objetivas ou vice-versa.
g) Parafuso Micromtrico: Permite movimentos menores mais delicados da platina em
direo s objetivas ou vice-versa, para focalizao complementar. Localiza-se prximo ao
parafuso micromtrico ou adaptado sobre ele. Em certos microscpios, s existe um parafuso em
lugar do macro e do micromtrico.
h) Parafuso condensador: tambm se situa na poro inferior da coluna, destinando-se
a elevar e abaixar o condensador.

2
- tica
A parte tica composta por um conjunto de meios transparentes que conduzem o feixe
luminoso usado na microscopia. As lentes so reunidas em dois sistemas: oculares e objetivas.
a) Oculares: as oculares so formadas por sistemas de lentes cuja posio est sempre
prxima ao olho do observador. Sua finalidade recolher a imagem aumentada, vertical e direta.
Como a imagem que a objetiva fornece invertida, a imagem final do microscpio ser tambm
invertida. As oculares so formadas por duas lentes, a superior (lente ocular) e a inferior (lente do
campo ou coltica).
b) Objetivas: as objetivas, situadas sempre prximas do objeto que observado no
microscpio, constituem-se em sistemas centrados de lentes convergentes que formam uma
imagem real e invertida do objeto. Essa imagem acompanhada pela ocular e tornada definitiva.
Chamam-se objetivas a seco quando so empregadas, usando ar entre a objetiva e o objeto
examinado e chamam-se objetivas de imerso quando se coloca um leo transparente, de ndice
de refrao o mais prximo possvel da lente, entre esta e o objeto. O leo usado leo de cedro
ou sucedneo sinttico com a facilidade de tornar mais claro o campo do microscpio, o que
acontece quando o leo homogeneza o meio tico entre esses dois elementos.
A parte tica tambm compreende o sistema tico de iluminao que consiste de:
c) Fonte Luminosa: pode ser distante, como a luz solar ou prxima como a luz de uma
lmpada. Os microscpios modernos, mais aperfeioados, possuem uma lmpada embutida.
d) Diafragma-ris: quando for conveniente, pode-se limitar parte dos raios perifricos
que chegam ao objeto. Para tanto, o microscpio dispe de um diafragma-ris que permite
diminuir a abertura de entrada do feixe luminoso.
e) Condensador: conjunto de lentes situado entre a fonte de luz e o objeto, cuja
finalidade atuar no feixe de luz, produzindo um feixe com dimetro definido e uniforme e com
uma maior intensidade luminosa.
f) Filtros: os filtros so discos de vidro colorido ou recobertos com gelatina colorida que
absorvem uma parte das radiaes luminosas que atingem o objeto, permitindo utilizar faixas
estreitas de comprimento de onda proporcional, para uma dada objetiva, ao comprimento de onda
da luz empregada. O uso dos filtros pode favorecer grandemente a absoro aumentando o poder
de resoluo. Alm do mais, usando filtros de cores complementares possvel aumentar o
contraste entre estruturas de formas pouco diferenciveis.

3. Poder de resoluo ou Poder Resolutivo de um sistema tico refere-se sua capacidade de


formar imagens distintas (separadas) de dois pontos situados muito prximos um do outro, no
objeto observado.

3
4. Limite de Resoluo refere-se menor distancia que deve existir entre os dois pontos
mencionados, de modo que ainda apaream individualizados na imagem formada pelo sistema
tico utilizado. O limite de resoluo (L.R.) depende do comprimento de onda de luz utilizada
() e da abertura numrica da objetiva (AN).
Portanto: L.R. =

K.
AN

onde, K e uma constante e vale 0,61 e igual a 0,55 para a luz branca. Portanto, o
limite de resoluo o inverso do poder resolutivo, de modo que, quanto maior for o poder de
resoluo menor ser o seu limite.
O poder de resoluo do aparelho depende essencialmente da objetiva, ou seja, de sua
abertura numrica (A.N.) e do comprimento de onda de luz utilizada. Quanto maior for a
abertura, maior o poder e, quanto menor for o comprimento de onda de luz utilizada, maior o
poder de resoluo da objetiva.
A abertura numrica depende do ndice de refrao do material colocado diante da
objetiva.
AN = n. sen
Sendo n = ndice de refrao do material intercalado entre a lmina e a objetiva (leo de
imerso, glicerina, gua, etc...); sen = abertura angular da lente objetiva (valor fornecido pelo
fabricante).
Logo, aumentando-se o valor de n, aumentamos tambm o valor de AN. Isso significa
que maior quantidade de luz penetrar na lente objetiva, perdendo-se menos luz por refrao e
reflexo.
As objetivas de imerso so tambm utilizadas menor distncia do objeto, o que
tambm contribui para captarem maior quantidade de luz dele proveniente.
Obs: leo: n = 1,52

ar: n = 1,00

5. O Aumento Final conferido pelo M.O. o produto do aumento conferido pela lente objetiva e
pela lente ocular (objetiva x ocular).
O olho humano desarmado tem um poder de resoluo de aproximadamente 0,2 mm e o
microscpio tico em torno de 0,2 m.

6. Iluminao de Khler
Esse mtodo de iluminao foi idealizado por A. Khler e proporciona um melhor
rendimento do sistema tico, sendo, portanto, imprescindvel para uma microscopia ou

4
fotomicrografia de qualidade. Para a obteno da iluminao deste tipo devem-se realizar as
seguintes manobras:
1) Focalizar o preparo microscpico, com a objetiva 3,2X (ou 4X).
2) Fechar o diafragma ris do condensador, utilizando-se da alavanca. Excursionar o
parafuso do condensador para cima e para baixo at que se observem as bordas do diafragma em
foco (Figura 1)
3) Acionar os parafusos de centralizao do condensador at que a imagem do
diafragma fique bem no centro do campo (Figura 2)
4) Abrir o diafragma do condensador at que encha o campo (Figura 3)
5) Fechar gradualmente o diafragma do condensador, at que a intensidade luminosa
comece a diminuir.
OBS: Se o microscpio for dotado de diafragma de campo luminoso ou iluminador
(na base), nos itens 2 e 4 deve-se utilizar deste recurso no lugar do diafragma ris do
condensador.

7. Microscpio Estereoscpio
tambm um microscpio composto. Fornece imagens ampliadas de, no mximo,
algumas dezenas de vezes, permitindo assim a observao de objetos com dimenses maiores do
que os observados no microscpio composto propriamente dito.

5
BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 1

Assunto: Diversidade celular (tamanho, forma e cor)

Faa um esquema, com legenda, usando aumento de 400X, de cada um dos


seguintes materiais vistos ao microscpio tico: cortia, epiderme do bulbo de cebola e epiderme
da folha de Tradescantia.
Compare e descreva as clulas dos diferentes materiais quanto ao tamanho, forma
e cor.
Estruturas a serem identificadas:
Na cortia (sber):
Parede celular reforada com suberina (composto lipdico que impermeabiliza a parede e a
torna mais espessa, impedindo a troca de substncias entre a clula e o meio)
Espaos vazios (preenchidos por ar e, aps a preparao da lmina, por gua) antes ocupados
pelo citoplasma
Na cebola:
Parede celular
Ncleo celular
Estmato com clulas-guarda e ostolo (abertura do estmato)
Clulas epidrmicas incolores
Drusas (cristais de oxalato de clcio, na forma cilndrica ou de poligonal diamante)
Na Tradescantia:
Parede celular
Ncleo celular
Estmato com clulas-guarda e ostolo (abertura do estmato)
Cloroplastos nas clulas-guarda
Clulas epidrmicas incolores
Clulas epidrmicas coloridas (rosas ou roxas) contendo o pigmento antocianina (pigmento
flavonide encontrado no interior do vacolo); a antocianina pode ser encontrada no interior
das clulas tambm na forma cristalizada
Rfides (cristais de oxalato de clcio, na forma de agulha)

6
BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 2

Assunto: Ciclose; flagelos; microfilamentos

Lmina 6 - corte lngua/HE (hematoxilina e eosina)


observar microfilamentos de actina e miosina formando estrias em miofibrilas do
tecido muscular estriado; miofibrilas multinucleadas

ciclose (roteiro separado)

7
BIOLOGIA CELULAR
ANEXO DA AULA PRTICA 2

Assunto: Ciclose

1. Preparar uma lmina contendo dois ou trs pelos estaminais da flor da Tradescantia em gua e
cobrir com lamnula.
2. Observar que os pelos so filamentos formados por ns e interns, sendo que os interns so
constitudos por uma nica clula, em cujo interior pode-se observar o fluxo de organelas no
citoplasma perifrico e nas pontes citoplasmticas que cruzam o vacolo (ciclose).

8
BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 3

Assunto: Ncleo celular interfsico; Nuclolo

Lmina 3 - imprinting fgado/nitrato de prata

observar ncleos em amarelo e nuclolos em preto

Lminas de esfregao de sangue de aves e mamferos (roteiro separado)

9
ANEXO DA AULA PRTICA 3
Assunto: Esfregao de sangue
1. separar duas lminas bem limpas, secas e desengorduradas
2. pingar uma gota de sangue na borda de uma lmina e, com a outra lmina posicionada num
ngulo de 45o, realizar o esfregao
3. deixar secar
4. cobrir a lmina com uma camada fina da soluo de Leishmann a 0,25% por 2 minutos
5. pingar 5 gotas de gua destilada
6. homogeneizar assoprando com uma pipeta e deixar repousando por 5 minutos
7. lavar em gua corrente e deixar secar
8. usar o procedimento acima para preparar esfregaos de sangue de um mamfero e de uma ave.
9. verificar que as hemcias de mamferos so anucleadas e a de aves (assim como as de anfbios
e rpteis) so nucleadas.
10.verificar a diversidade de formas do ncleo dos leuccitos.
ELEMENTOS FIGURADOS DO SANGUE (os nmeros referem-se espcie humana):
glbulos vermelhos = eritrcitos = hemcias
homens: 4,5 a 5,5 milhes/mm3
mulheres: 4 a 5 milhes/mm3
glbulos brancos = leuccitos (4.000 a 10.000/mm3):
granulcitos ou polimorfonucleados:
neutrfilos (50 a 70%)
eosinfilos (2 a 4%)
basfilos (0 a 1%)
agranulcitos:
linfcitos (20 a 30%)
moncitos (4 a 6%)
plaquetas
Estruturas a serem identificadas:
No esfregao de sangue de mamferos (humano, bovino ou ovino):
granulcito com ncleo lobulado (2 a 6 lbulos)
agranulcito com ncleo arredondado
hemcias anucleadas
No esfregao de sangue de aves (ou anfbios ou rpteis):
hemcias nucleadas

10
BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 4

Assunto: Cromossomos metafsicos humanos; Mitose; Meiose.


Lmina metfases humanas

observar diversidade de cromossomos quanto ao tamanho e forma (metacntricos,


submetacntricos e acrocntricos)

Lmina mitose em clulas de raiz de cebola (roteiro anexo)

observar as diferentes fases do ciclo celular: interfase, prfase, metfase, anfase e


telfase)

Lmina meiose em clulas de testculo de gafanhoto (roteiro anexo)

observar as fases de diplteno/diacinese da prfase I da meiose; espermtides;


espermatozoides

11
ANEXO 1 DA AULA PRTICA 4
MITOSE - RAIZ DE CEBOLA:
Retirar os catfilos secos da cebola e com uma gilete cortar um pedao da
extremidade inferior (prato) retirando as possveis razes secas. Colocar a cebola sobre um borel
(copo, vidro de maionese, etc.) cheio de gua de maneira que apenas sua poro inferior fique
mergulhada. Depois de dois ou trs dias notar-se- o crescimento de diversas razes.
Procedimento:
1 - Com uma pina cortar da extremidade para cima cerca de 0,5 cm da raiz.
2 - Levar ao fixador Carnoy (3 partes de lcool : 1 parte de cido actico) por, no mnimo, 20
minutos.
3 - Hidrlise cida por 10 minutos.
soluo cida: 1 parte de HCl 1N (1 parte de HCl concentrado : 11 partes gua destilada) : 1
parte de lcool 95%
4 - Voltar ao fixador Carnoy por, no mnimo, mais 10 min.
5 - Sob lupa, separar o tecido epitelial (coifa) do meristema.
6 - Colocar uma gota do corante orcena lacto-actica na lmina e sobre ela depositar um pedao
de raiz (no mximo 3 pedaos).
Orcena lacto-actica: Orcena ---------------------- 1 g
cido actico glacial ---- 45 ml
cido ltico a 85% ------ 25 ml
gua destilada ----------- 30 ml
Dissolver a orcena na gua e juntar cido actico. Ferver. Juntar o cido ltico e deixar ferver
por alguns minutos. Esfriar. Filtrar. Conservar em geladeira.
7 - Quebrar (fragmentar) utilizando duas sondas exploradoras.
8- Colocar a lamnula e deixar de 5 a 10 min. para que ocorra a colorao.
9- Colocar a lmina com a lamnula entre papel higinico fino e proceder ao esmagamento,
pressionando os dedos sobre o papel.
10 Lutar (vedar) a lamnula com esmalte incolor.
11 Aps secar completamente, observar as diferentes fases da mitose (interfase, prfase,
metfase, anfase e telfase).

12
ANEXO 2 DA AULA PRTICA 4

MEIOSE - TESTCULO DE GAFANHOTO


Reconhecimento do macho: a parte posterior do abdmen do macho arredondada,
podendo ou no apresentar cercos; a fmea apresenta sempre um ovopositor com duas valvas
superiores e duas inferiores, tendo maior nmero de cercos que o macho.
Procedimento:
1 - Colocar o animal num frasco com um chumao de algodo embebido em ter, para anestesilo.
2 - Fazer a disseco aps a retirada das asas, pelo dorso ou pela lateral. Os testculos so dois
fios longos amarelos ou leitosos. Podem aparecer como um conjunto de pequenas "bolsas" de
cor clara.
3 - Retirar os testculos e coloc-los por 3 min. em gua destilada. Em seguida, retire a membrana
gordurosa de cor amarela que o envolve libertando os tbulos seminferos.
4- Coloque uma gota de orcena lacto-actica sobre uma lmina, separe dos testculos 2 ou 3
tbulos seminferos colocando-os no corante.
5 - Dissocie cuidadosamente e deixe corar por 12 a 20 min.
6 - Coloque a lamnula e faa o esmagamento.
7 - Aps secar completamente, observar as diferentes fases da meiose, principalmente as subfases
diplteno e diacinese da prfase I apresentando cromossomos com quiasmas, e espermtides e
espermatozides.

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BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 5
LISTA DE EXERCCIOS
CDIGO GENTICO. SNTESE PROTICA. REGULAO GNICA
0 1 - Q u a nt o s t ip o s d ife r e nt e s d e R N Am p o d e r ia m e s p e c ific a r a s e q nc ia
de a.a. MET-PHE-SER-PRO?
0 2 - C o ns id e r a nd o a s e q nc ia d e ba s e s nit r o g e na d a s d o D N A:
3 ' A C T T G C C C T A T A G T C 5 '*
5' T G A A C G G G A T A T C A G 3'
P e r g u nt a - s e :
a - Q u a l s e r ia a s e q nc ia d e ba s e s d o R N Am r e s u lt a nt e d a t r a ns c r i o
d a c a d e ia p o linu c le o t d ic a ma r c a d a c o m u m a s t e r is c o ? Q u a nt o s
c d o ns e s s e R N Am p o s s u ir ia ?
b - Q u a l s e r ia o a nt ic d o n d o R N A t r a ns p o r t a d o r p a r a o c d o n
5 'C U G 3 '?

03

- C o ns id e r a nd o a s e q nc ia d e ba s e s nit r o g e na d a s
c o r r e s p o nd e nt e a u m g e ne e s t r u t u r a l hip o t t ic o :

do

DNA

3 ' G AT T AC G AT AG G C T AC T T C C C G T AAT AAT C T AA 5 '*


5 ' C T AAT G C T AT C C G AT G AAG G G C AT T AT T AG AT T 3 '
a - q u a l o s e nt id o d a le it u r a d o D N A mo ld e d u r a nt e s u a d u p lic a o ?
b - Q u a l s e r ia a s e q nc ia d e ba s e s d o R N Am r e s u lt a nt e d a t r a ns c r i o d a
c a d e ia p o linu c le o t d ic a d o D N A ma r c a d a c o m a s t e r is c o ?
c - Q u a nt o s c d o ns e s s e R N Am p o s s u ir ia ?
d - Q u a l s e r ia o p r ime ir o c d o n a s e r s int e t iz a d o ne s s e R N Am?
e - Q u a l s e r ia a s e q nc ia d e a . a . d o p o lip e p t d e o ( p r o t e na ) t r a d u z id o a
p a r t ir d e s t e R N Am?
f - S e ho u ve s s e u ma mu t a o p o r d e fic i nc ia ( G ) e u ma mu t a o p o r
ins e r o ( T ) d e ba s e s no D N A mo ld e na p o s i o a ba ixo ind ic a d a , q u a l
s e r ia a s e q nc ia d e a . a . d o p o lip e p t d e o fo r ma d o a p a r t ir d e s s e D N A?
Q u a is s e r ia m a s c o ns e q nc ia s bio l g ic a s ?
T

3 'G AT T AC AT AG G C T A C T T C C C G T AAT AAT C T AA5 '


G
0 4 - C o ns id e r a nd o
a
s e q nc ia
de
ba s e s
nit r o g e na d a s
do
DNA
c o r r e s p o nd e nt e a u m g e ne e s t r u t u r a l hip o t t ic o :
3 ' C C C T AC G G G AT G AG T T AC T AT AAAC T G T AAG T AAT T AG C 5 '
5 ' G G G AT G C C C T AC T C AAT G A T A T T T G AC A T T C AT T A AT C G 3 '*
a - Q u a l s e r ia a s e q nc ia d e a . a . d o p o lip e p t d e o a p a r t ir d a c a d e ia
p o linu c le o t d ic a ma r c a d a c o m a s t e r is c o ?
b - S e ho u ve s s e u ma mu t a o p o r s u bs t it u i o d e ba s e s ( T A) no D N A
mo ld e na p o s i o a ba ixo ind ic a d a , q u a l s e r ia a s e q nc ia d e a . a . d o

p o lip e p t d e o fo r ma d o a
c o ns e q nc ia s bio l g ic a s ?

p a r t ir

desse

D N A?

Q u a is

s e r ia m

14
as

5 ' G G G AT G C C C T AC T C AAT G

T AT T T G AC AT T C AT T AAT C G 3 '
A

c - S e ho u ve s s e u ma mu t a o p o r s u bs t it u i o d e ba s e s ( A G ) no D N A
mo ld e na p o s i o a ba ixo ind ic a d a , q u a l s e r ia a s e q nc ia d e a . a . d o
p o lip e p t d e o fo r ma d o a p a r t ir d e s s e D N A? Q u a is s e r ia m a s
c o ns e q nc ia s bio l g ic a s ?
A

5 ' G G G AT G C C C T AC T C AAT G AT AT T T
AC AT T C AT T AAT C G 3 '
G
d - S e ho u ve s s e u ma mu t a o p o r d e fic i nc ia d e ba s e ( A) no D N A mo ld e na
p o s i o a ba ixo ind ic a d a , q u a l s e r ia a s e q nc ia d e a . a . d o p o lip e p t d e o
fo r ma d o a p a r t ir d e s s e D N A? Q u a is s e r ia m a s c o ns e q nc ia s bio l g ic a s ?
5 ' G G G AT G C C C T AC T C AAT G AT AT T T G AC AT T C AT T A T C G 3 '
A
e - S e o s e nt id o d a le it u r a d o R N Am d u r a nt e a t r a d u o fo s s e a o a c a s o ,
q u a nt o s p r o d u t o s d ife r e nt e s c a d a R N Am p o d e r ia s int e t iz a r ? P o r q u ?
f - Q u a l s e r ia a s e q nc ia d e a . a . d o p o lip e p t d e o s int e t iz a d o a p a r t ir d o
p o lip e p t d e o n o ma r c a d o d o D N A? E s t e p o lip e p t d e o d ife r e nt e
d a q u e le d o it e m a ? P o r q u ?
5 - Um dos tipos de sistemas regulatrios encontrados em organismos vivos o sistema indutivo e o
exemplo clssico o sistema da lactose em Escherichia coli, onde existe um gene regulador que
produz um repressor que, por sua vez, vai bloquear o operador, impedindo a sntese do RNA
mensageiro a partir dos genes estruturais que fazem parte do operon. Suponha uma clula com a
seguinte constituio:
i+
o+
y+
z+
---- -------- ---- ............ ----- -------- -------- -------- ----a - Na ausncia da lactose, vai haver produo de enzimas codificadas por y e z (genes estruturais)?
Por qu?
b - Se a lactose for adicionada ao meio, vai haver produo de enzimas a partir de y e z? Por qu?
c - Que vantagem voc acha que esse sistema oferece para a clula?
6 - Suponha agora que houve uma mutao no gene regulador (i+) de modo que ele se tornou i-, que
produz um repressor no ativo. Na ausncia de lactose vai haver produo de enzima por y e z?
Por qu?
7 - As seguintes mutaes podem ocorrer nos diversos genes que formam o operon da lactose em E.
coli?
+
i : fabrica substncia repressora que se torna inativa na presena de lactose
i- : no fabrica substncia repressora ativa
is : super-repressor insensvel presena de lactose
o+ : operador normal
oc : operador constitutivo, insensvel ao repressor, ativando permanentemente os genes estruturais

15
o

o : operador defeituoso que desativa permanentemente os genes estruturais


y+ : fabrica -galactosdeo permease
y- : nenhum produto identificvel produzido
z+ : fabrica -galactosidase
z- : fabrica uma substncia inativa (C)
Baseado nisso, complete a tabela a seguir, colocando + quando houver produo de enzima e quando no for produzida.
Gentipo

Indutor ausente
Permease
-galactosidase

Indutor presente
Permease
-galactosidase

1) i+o+y+z+
2) i-o+y+z+
3) iso+y+z+
4) i+ocy+z+
5) i+ooy+z+
6) i-ocy+z+
7) i-ooy+z+
8) isocy+z+
9) isooy+z+
8 - Um outro sistema regulatrio aquele no qual o produto final de uma reao atua como o
repressor ligando-se a um apo-repressor inativo, ativando-o e tornando-o repressor completo.
o sistema repressivo. Suponha uma clula com a seguinte constituio:
R+
o+
G1+ G2+ G3+
---------------- ................ -------- ----------------- -------- -------- -------- ---
---------- apo-repressor
a - Explique como se d a produo de um produto final.
b - E se o produto final estiver em excesso na clula, haver produo de enzimas a partir de G1, G2 e
G3. Por qu?
9 - O lote haplide (n) de cromossomos de um cavalo (Equus caballus) contm 32 cromossomos. Em
relao a esse animal, pergunta-se:
a) Quantos cromossomos uma clula somtica possui?
b) Quantas clulas sero produzidas por mitose a partir de uma clula somtica aps um ciclo de
diviso e quantos cromossomos cada uma delas possuir?
c) Em que fase do ciclo celular o DNA (cido desoxirribonuclico) se duplica?
d) Que fase da mitose deve ser escolhida para a contagem e identificao dos cromossomos?
e) Quantos gametas sero produzidos por meiose a partir de uma clula germinativa e quantos
cromossomos tero cada um deles?
f) Quantas vezes e em quais momentos o DNA se duplica no processo de meiose?
g) O cruzamento de um asno (Equus asinus: 2n = 62) e uma gua levar a produo de hbridos
cujo nmero diplide de cromossomos ____.

16
TABELA DO CDIGO GENTICO
1 posio
extremidade 5
U

U
U U U - P he
U U C - P he
U U A- L e u
UUG-Leu

UCU-Ser
UCC-Ser
UCA-Ser
UCG-Ser

U AU - T yr
U AC - T yr
U AA - *
U AG - *

U G U - C ys
U G C - C ys
U G A- *
UGG-Trp

3 posio
extremidade 3
U
C
A
G

CUU-Leu
CUC-Leu
CUA-Leu
CUG-Leu

CCU-Pro
CCC-Pro
C C A- P r o
CCG-Pro

C AU - H is
C AC - H is
C AA - G ln
C AG - G ln

C G U - Ar g
C G C - Ar g
C G A - Ar g
C G G - Ar g

U
C
A
G

AU U - I le
AU C - I le
AU A - I le
AUG-Met **

AC U - T r h
AC C - T r h
AC A - T r h
AC G - T r h

AAU - As n
AAC - As n
AAA- L ys
AAG - L ys

AG U - S e r
AG C - S e r
AG A - Ar g
AG G - Ar g

U
C
A
G

G C U - Ala
G C C - Ala
G C A - Ala
G C G - Ala

G AU - As p
G AC - As p
G AA - G lu
G AG - G lu

G G U - G ly
G G C - G ly
G G A- G ly
G G G - G ly

U
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* : c d o ns d e t e r mina o
* * : c d o n d e inic ia o

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BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 6

Assunto: Membrana plasmtica: Plasmlise e desplasmlise

1. Preparar uma lmina contendo um corte da epiderme da folha de Tradescantia em gua.


Verificar se contm clulas com antocianina de boa qualidade.
2. Colocar uma gota de soluo saturada de sacarose ao lado da lamnula e, pelo outro lado,
absorver com papel higinico para provocar um fluxo do lquido entre lmina e lamnula.
Observar atentamente, nas clulas pigmentadas com antocianina, o processo de plasmlise,
com o murchamento do protoplasma que se separa da parede celular, utilizando o aumento de
400X do microscpio.
3. Aps a anlise, colocar novamente gua em contato com as clulas, pelo processo inverso ao
utilizado anteriormente. Observar a desplasmlise, com o enturgecimento da clula, que
adquire inicialmente um formato arredondado e culmina por preencher todo o espao
delimitado pela parede celular.

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BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 7

Assunto: Membrana plasmtica: glicoclice; estereoclios


Digesto intracelular (fagossomos em macrfagos)

Lmina 7 - corte testculo e epiddimo/HE


Observar estereoclios no lmen de tbulos seminferos do epiddimo

Lmina 10 - corte intestino/PAS (Periodic Acid Schiff)


observar borda estriada (microvilosidades), glicoclice
observar glicoprotenas no Complexo de Golgi e grnulos de secreo corados em
vermelho intenso nas clulas caliciformes

Lmina 13 - corte pele/nankim


observar macrfagos com ncleo incolor e citoplasma em preto, em funo do
grande nmero de fagossomos formados pela fagocitose do nanquim

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BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 8

Assunto: Retculo endoplasmtico liso e rugoso. Complexo de Golgi.


Lmina 8 - corte pncreas/HE (hematoxilina e eosina)
observar retculo endoplasmtico rugoso e glicoprotenas coradas em rosa nas
clulas das glndulas acinares

Lmina 9 - corte fgado/PAS (Periodic Acid Schiff)


observar retculo endoplasmtico liso e glicognio corados em rosa intenso nas
bordas das clulas hepticas

Lmina especial - corte epiddimo/impregnao pela prata


observar nas clulas que compem os tbulos seminferos o ncleo em roxo e o
Complexo de Golgi em preto

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BIOLOGIA CELULAR
AULA PRTICA 9

Assunto: Mitocndrias (Condrioma).

1. Passe um palito sobre a mucosa bucal e descarte o material.


2. Repita esse procedimento e deposite o material colhido sobre uma lmina contendo uma gota
de gua.
3. Core com soluo do corante Verde Janus para destacar as mitocndrias.
4. A colorao das mitocndrias pelo Verde Janus in vivo deve-se presena de oxidases que
conservam o corante em sua forma oxidada, enquanto no resto da clula ele reduzido a um
composto incolor.
5. Observar nas clulas do epitlio pavimentoso bucal as mitocndrias dispostas ao redor do
ncleo.

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